微生物检查中无菌操作注意事项
微生物实验操作注意事项
微生物实验注意事项一、无菌操作要求★ 1. 接种细菌时必须穿工作服、戴工作帽。
2. 进行接种食品样品时,必须穿专用的工作服、帽及拖鞋,应放在无菌室缓冲间,工作前经紫外线消毒后使用。
★3. 接种食品样品时,应在进无菌室前用肥皂洗手,然后用75%酒精棉球将手擦干净。
★ 4. 进行接种所用的吸管,平皿及培养基等必须经消毒灭菌,打开包装未使用完的器皿,不能放置后再使用,金属用具应高压灭菌或用95%酒精点燃烧灼三次后使用。
5. 从包装中取出吸管时,吸管尖部不能触及外露部位,使用吸管接种于试管或平皿时,吸管尖不得触及试管或平皿边。
6. 接种样品、转种细菌必须在酒精灯前操作,接种细菌或样品时,吸管从包装中取出后及打开试管塞都要通过火焰消毒。
7. 接种环和针在接种细菌前应经火焰烧灼全部金属丝,必要时还要烧到环和针与杆的连接处,接种结核菌和烈性菌的接种环应在沸水中煮沸5min,再经火焰烧灼。
8. 吸管吸取菌液或样品时,应用相应的橡皮头吸取,不得直接用口吸。
二、无菌间使用要求1. 无菌间通向外面的窗户应为双层玻璃,并要密封,不得随意打开,并设有与无菌间大小相应的缓冲间及推拉门,另设有0.5-0.7m2的小窗,以备进入无菌间后传递物品。
2. 无菌间内应保持清洁,工作后用2%-3%煤酚皂溶液消毒,擦拭工作台面,不得存放与实验无关的物品。
★ 3. 无菌间使用前后应将门关紧,打开紫外灯,如采用室内悬吊紫外灯消毒时,需30W紫外灯,距离在1.0m处,照射时间不少于30min,使用紫外灯,应注意不得直接在紫外线下操作,以免引起损伤,灯管每隔两周需用酒精棉球轻轻擦拭,除去上面灰尘和油垢,以减少紫外线穿透的影响。
4. 处理和接种食品标本时,进入无菌间操作,不得随意出入,如需要传递物品,可通过小窗传递。
★ 5. 在无菌间内如需要安装空调时,则应有过滤装置三、消毒灭菌要求★微生物检测用的玻璃器皿、金属用具及培养基、被污染和接种的培养物等,必须经灭菌后方能使用。
无菌技术的操作流程
无菌技术的操作流程无菌技术是现代生物实验室中常用的一项技术,它用于在无菌条件下进行微生物的培养和实验操作。
无菌技术操作流程的规范和正确性对于实验结果的准确性和可靠性至关重要。
下面将详细介绍无菌技术的操作流程。
一、准备工作1. 实验前准备:清洗实验台面、操作台和实验仪器,保持干净整洁,并将所需的培养基、试剂和器械准备齐全。
2. 环境准备:确保实验室的环境无尘、无菌,使用紫外线灯照射操作区域,杀灭空气中的微生物。
二、个人防护1. 穿戴实验服、手套和口罩,避免将自身的微生物带入操作区域,减少对实验的污染。
2. 手部消毒:使用75%酒精或其他有效的手部消毒剂对双手进行彻底的消毒,确保双手洁净无菌。
三、无菌技术操作流程1. 开启无菌工作台或无菌柜,并等待5-10分钟,使其内部环境达到无菌状态。
2. 打开培养基瓶盖前,先对其外表面进行消毒,然后将瓶盖旋开一定角度,以避免瓶口受到外界污染。
3. 取出所需培养基,使用酒精灯或Bunsen燃烧器对瓶口进行消毒,避免外界空气中的微生物进入培养基中。
4. 取出需接种的微生物试管或培养皿,在火焰中将试管口或培养皿盖轻轻烧烤一下,杀灭表面的微生物,避免外界污染。
5. 使用灭菌的移液器或接种环,将微生物接种到培养基上,注意避免接触到瓶口或其他可能污染的物体。
6. 接种完成后,立即将瓶盖或培养皿盖盖好,避免外界的污染。
如果是试管,则立即用胶带封口。
7. 在接种完毕后,将移液器或接种环进行高温烧烤,以保证其表面的无菌状态。
8. 实验结束后,关闭无菌工作台或无菌柜,并对操作区域进行清洁消毒,确保下次实验时的无菌环境。
四、注意事项1. 操作要快且准确,以减少外界污染的可能性。
2. 避免与培养基的瓶口或试管口直接接触,以防止微生物的污染。
3. 注意消毒的方法和时间,确保彻底杀灭微生物。
4. 避免操作时产生气流,以防止空气中的微生物进入操作区域。
5. 定期对无菌工作台或无菌柜进行检测和维护,确保其正常工作和无菌状态。
无菌技术操作
无菌技术操作无菌技术操作是一种非常重要的技能,在生物学、医学和制药等领域中广泛应用。
无菌技术操作是指在细菌、病毒或其他微生物体存在的条件下,通过一系列操作来保持操作环境的无菌状态,从而确保实验或制药过程的准确性和可靠性。
无菌技术操作需要谨慎、细致和耐心,具有一定的专业知识和技能。
一、无菌技术操作的原则与方法1. 确定操作目的和操作物品的无菌要求。
不同的实验和制药过程需要的无菌程度不同,应根据实际需求来确定。
2. 准备好不同的无菌工具和溶液。
无菌技术操作需要使用一系列的无菌工具和溶液,如无菌操作台、无菌手套、酒精灯、无菌的注射器和管道、消毒酒精、紫外线灯等。
3. 无菌操作台是无菌技术操作的基础设施,也是最为重要的设备。
无菌操作台是一个带有过滤器的封闭操作室,可以过滤掉空气中的微生物,确保操作环境的无菌状态。
4. 开始进行无菌操作前,需要对所有用品进行清洁和消毒,无菌手套也需要进行消毒处理。
5. 离子除菌机是保持无菌手套的净化器。
手套放进去因离子的作用可以有效地去除静电灰和灰尘,减少手套和灰尘对菌体的影响。
6. 聚四氟乙烯分离膜简称PTFE膜,是制备药物的无害操作膜。
该膜极佳的无污染性及生物相容性方面极可靠,对于培养生物细胞和免疫细胞很友好,可用于细胞培养、医学检查和药物制备等方面。
7. 战斗移液管使微量注射操作简单,流量方便的操纵,自动化的操纵,而无需直接接触样品,大大的提高了实验过程的安全性。
二、无菌技术操作的步骤1. 将操作区域消毒。
用70%的乙醇清洗无菌工作区和各种准备好的设备。
特别要注意对无菌操作台上的工作区域进行消毒,以确保工作区域的无菌状态。
2. 消毒手部。
用70%的酒精进行消毒处理,并穿上无菌手套,保证手部的无菌状态。
3. 准备好实验用品。
在操作台上摆放好需要使用的实验用品,而且要保证用品的无菌状态。
4. 打开紫外线灯。
打开紫外线灯,让灯光辐射30分钟,杀死操作区域内的细菌和病毒。
5. 开始进行实验。
检验科无菌技术操作原则
检验科无菌技术操作原则
(一)操作前准备
1、环境准备:环境要清洁、宽敞、定期消毒。
进行无菌技术操作前半小时,须停止清扫地面、更换床单等工作,减少人员流动,防止尘埃飞扬导放污染;操作台面清洁、平坦、干燥、物品摆放合理。
2、医务人员准备:衣帽穿戴要整洁,帽子要把全部头发遮盖,口罩须遮住口鼻,修剪指甲,并洗手。
必要时穿无菌衣、胾无菌手套。
(二)操作中保持无菌
1、无菌操作过程中医护人员应面向无菌区,操作者的身体应与无菌区域保持一定距离,手臂应保持在腰部或操作台面以上,不得面对无菌区谈笑、咳嗽、打喷嚏。
2、取无菌物品时,必须用无菌钳(摄)。
未经消毒的物品、手臂不可触及无菌物品或跨越无菌区;无菌物品若已有污染或怀疑污染应立即更换或重新灭菌。
3、一套无菌物品,只能供一个病员使用,以免发生交叉感染。
(三)无菌物品管理
1、无菌物品与非无菌物品应分开放置,标志明显,摆放有序。
2、无菌包外应注明物品名称、灭菌日期,合格标志。
并按灭菌日期先后顺序摆放,在清洁、干燥、固定的地方;无菌包在未被污染的情况下有效期为7天,过期或包布受潮应重新灭菌。
3、无菌物品必须存放于无菌包或无菌容器内,不得暴露于空气中。
从无菌容器中取出的物品,虽未使用,也不可放回无菌容器内。
(完整版)微生物实验注意事项
微生物实验注意事项1.实验过程中要及时详细标清除产物和日期,实验做完以后要对以前的过度产品做个清理,以免东西积累过多。
2.实验后的DNA和RNA要及时放回冰箱,以免时间长降解,特别是用水溶解的时候。
3.要及时甘油保存你鉴定出的细菌,每个细菌保存两份,存放在—80度冰箱里。
4.实验用的酶类虽然在室温下放一段时间也没什么问题,但还是要及时放回冰箱,以免活性降低。
5.要及时清理实验台面,保持干净,整洁,有序。
6.无菌操作台用后及时清理干净,操作真菌和细菌等最好不要交叉使用。
7.培养基使用的时候要注意无菌操作,移液器不要插入培养基中,之准许无菌枪头进入瓶子腔体,如培养基较少,可以倾斜瓶子,移液器取液体最好不要用到最大量程,以免吸液过猛导致与移液器接触。
8.灭好的培养基标签一定要写好,包括名称,日期,是否加抗生素,是否加抗生素非常重要,特别是在共用培养基的实验室。
9.实验用过的试剂盖子一定要盖好,以免挥发。
特别是有毒的物品,如氯仿,苯酚等,用完后的瓶子及时拿出实验室。
10.带手套接触有毒物品后,要及时处理掉手套。
不管是否接触过有毒物品,,不要戴着手套乱接触其他东西,如开窗等。
11.做实验过程中不要接电话,说话,考虑其他事情。
特别是PCR和配溶液的时候。
做PCR和配溶液的时候要把所用的试剂找全,一字排开,加完一种东西就把这种东西放到一边,可防止自己少加错东西。
12.同时作几个实验的时候一定要有定时器,防止自己忘记,特别是在煮东西,加热溶化溶液等危险操作的时候,切忌。
13.饭前,有活动前不要做实验,这时候匆匆忙忙非常容易出错,特别是作有危险的实验,更要注意。
14.作好试验记录,不管有没有结果,一定要坚持。
还有点用图片,测序结果等,如果不清楚记录东西多了,就乱了,混了。
这个一定要认真做好。
15.要随时写下自己的想法,因为有些想法稍纵即逝。
微生物实验注意事项一、无菌操作要求1。
接种细菌时必须穿工作服、戴工作帽。
2。
微生物检验时的注意事项
微生物检验时的注意事项对微生物进行检验时有很多需要注意的事项,检测环境一定要非常干净,同时实验室的器具也需要保持洁净,进行操作的有关人员一定要具备非常强的专业性,操作要在无菌环境下进行,避免因为工作人员的失误导致检验结果出现差错。
除此之外,还要保持适宜的温度,保证决策的合理性。
1.微生物检验概述微生物检验指的是对病原微生物进行研究,借助检验手段和先进的技术将病原体检测出来,让临床诊断变得更加准确和科学,同时为下一步的治疗提供思路,给接下来的用药提供科学指导,防止出现感染扩散。
2.培养基的灭菌及使用2.1在每一次进行配置前,都要保证生产日期在保质期的时间之内,检查开瓶日期以及瓶口的密封度是否完好,不可以出现变质和受潮等现象。
2.2在进行培养基的配置时,要保证称量非常准确,并且分装的盐水准确无误。
2.3必须做到现配置现灭菌,不能长时间没有灭菌地配好培养基,坚决不允许出现过夜的情况。
2.4灭菌的时候要保证恒定的温度,同时保证在恒压环境下进行,对灭菌时间也要有严格的要求,确保在有效的时间内进行灭菌。
2.5进行灭菌处理的培养基要放在冰箱中进行保存,时间最长可以保存一周,但是原则上不能超过三天。
并且要按照“先入先出”的原则,优先使用最先培养好的。
2.6使用的时候也要对使用量有着严格要求,先使用水浴锅把培养基溶化到液态,紧接着迅速调低水浴的温度,培养基一定不能长时间接触高温环境。
2.7对产品微生物进行检测的时候,将培养基温度保持在四十五度左右,温度不能过高,也不能过低。
过高的温度容易将菌烫死,过低的温度则会造成培养基结块凝固,给观察结果制造麻烦。
2.8每瓶培养基都需要做空白。
2.9在集中的时间做样,对同一瓶培养基的打开不要过于频繁,造成培养基的污染,减少误差结果的出现。
2.10当培养基的数量很少时,可以先把少量的培养基倾倒成空白用板。
3.维持检测环境3.1检测室3.1.1进行检测的时候,要管好检测室的窗户和空调,用医用酒精对检测室进行消杀,避免检测室内的空气流动对超净工作台的内部环境产生影响。
无菌技术操作规程
无菌技术操作规程《无菌技术操作规程》一、目的无菌技术操作规程的目的是为了确保无菌操作的安全性和有效性,防止细菌、病毒等微生物的污染,保证实验结果的准确性和实验人员的健康安全。
二、适用范围本规程适用于实验室、手术室等需要进行无菌操作的场所,涉及到培养基制备、细胞培养、微生物实验等工作。
三、操作程序1. 理清工作流程:在进行无菌操作前,要先明确工作流程,将需要使用的器皿、培养基等准备齐全。
2. 环境准备:无菌操作需要在无菌操作台上进行,操作台表面要进行清洁消毒,保持无菌状态。
3. 个人准备:实验人员需要穿戴合适的无菌服,戴上口罩、手套等个人防护用品。
4. 器皿处理:将需要使用的器皿在一定条件下进行高温高压灭菌处理,确保器皿的无菌状态。
5. 培养基制备:在无菌操作台上进行培养基的制备过程,确保在无菌环境下完成,防止细菌的污染。
6. 细胞培养:在严格的无菌条件下进行细胞的培养和处理,避免微生物的污染。
7. 垃圾处理:将使用过的器皿、口罩、手套等垃圾按规定的程序进行处理,防止垃圾中的微生物传播。
四、注意事项1. 每一项无菌操作都需要在无菌环境下进行,防止细菌、病毒的污染。
2. 实验人员需要接受相关的无菌操作培训,并进行定期的健康检查。
3. 无菌操作需要有专门的空间和设备,确保无菌状态的维持。
4. 严格按照规程操作,不得私自更改程序。
5. 发现操作台面或器皿出现污染时,要及时清洁消毒。
五、总结无菌技术操作规程是实验室和手术室等需要进行无菌操作的场所必须严格遵守的操作规定,只有严格按照规程操作,才能保证无菌环境的稳定和无菌操作的准确性和安全性。
在无菌操作中,实验人员需要时刻保持警惕,及时发现和处理可能的污染情况,确保无菌操作的顺利进行。
无菌操作的原则与注意事项
器材、规范进行无菌操作等。
03
定期评估操作技能
定期对无菌操作技能进行评估和考核,及时发现和纠正操作中的问题和
不足,确保操作技能的稳定和可靠。
提高对微生物污染危害认识
了解微生物污染的危害
充分认识微生物污染对实验结果的准确性和可靠性的影响 ,以及对实验人员和环境的潜在危害。
强化微生物污染防控意识
树立微生物污染防控意识,时刻保持警惕,严格遵守无菌 操作规范,防止微生物污染的发生。
保持环境清洁与消毒
定期清洁
无菌操作室需定期进行全面的清洁工 作,包括擦拭操作台面、清洗设备表 面等。
消毒处理
清洁后需对无菌操作室进行消毒处理 ,如使用紫外线灯照射、喷洒消毒液 等,确保环境达到无菌要求。
使用合格无菌器材和试剂
选用合格产品
购买和使用经检验合格的无菌器材和试剂,确保其无菌状态 和有效性。
对实验过程中产生的废弃物和污染物进行分类处理,分别放置
在不同的容器中,避免交叉污染。
安全处理
02
对于可能具有传染性的废弃物和污染物,应采取安全处理措施
,如高压灭菌、化学消毒等,以确保安全无害。
及时清理
03
在实验结束后,应及时清理操作区域和废弃物容器,保持环境
整洁卫生。
05
无菌操作后处理及评估
对操作区域进行彻底清洁和消毒
正确保存
无菌器材和试剂需按照说明书要求正确保存,避免污染和失 效。
避免交叉污染和感染风险
分区操作
在无菌操作室内设立明确的分区,将 已灭菌和未灭菌的物品分开放置,避 免交叉污染。
减少人员流动
废弃物处理
对操作过程中产生的废弃物进行及时 、正确的处理,防止对环境造成污染 。
微生物检验流程及操作标准
微生物检验流程及操作标准全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:微生物检验是一种重要的实验室技术,用于检测食品、水质、环境等样品中的微生物存在情况。
微生物检验需要严格遵守一系列操作标准和流程,以确保检验结果的准确性和可靠性。
下面我们将介绍一下微生物检验的流程及操作标准。
一、样品采集1. 样品的采集需要采用无菌工具,并保持样品在采集过程中不受到外界环境的污染。
2. 样品的采集过程应尽量避免接触到任何可能引入外源微生物的物质,比如皮肤、空气等。
3. 采集的样品应标明正确的标识信息,包括样品名称、采集地点、采集日期等。
二、样品处理1. 样品收到实验室后,需要尽快进行处理,避免样品内的微生物增殖或死亡。
2. 样品处理过程需要保持在无菌条件下进行,使用无菌工具进行操作。
3. 样品处理过程中需要按照检验要求进行适当的稀释,以确保实验得出准确的结果。
三、培养基准备1. 培养基的制备需要按照标准的配方和步骤进行,以确保培养基的质量符合要求。
2. 制备培养基时需要严格遵守无菌操作规范,避免细菌、真菌等外源微生物的污染。
3. 制备好的培养基需要在适当的条件下保存,确保培养基的稳定性和有效性。
四、接种操作1. 在进行微生物检验之前,需要准备好无菌的接种环、移液器等工具。
2. 采取适当的方法将处理好的样品接种到培养基上,避免接种时引入外源微生物。
3. 接种操作需要在无菌条件下进行,避免培养物受到任何污染。
五、培养与观察1. 接种后的培养基需要置于适当的温度和湿度条件下进行培养,促使样品中的微生物生长。
2. 定期观察培养基上的生长情况,记录生长的数量和形态,用于后续的分析和鉴定。
3. 在观察过程中需要注意反复进行无菌操作,避免细菌、真菌等外源微生物的污染。
六、鉴定与结果解读1. 当样品中的微生物生长到一定程度时,需要进行鉴定和分析,确定其种属和数量。
2. 鉴定过程需要参考相关的鉴定手册和标准,进行适当的试验和测试。
3. 根据鉴定结果进行结果解读,判断样品中微生物的种类和数量是否符合标准要求。
微限及无菌操作注意事项
8)薄膜过滤法要求及操作步骤
☆ 应优先采用全封闭式薄膜过滤器。应选择低吸附 的滤器及滤膜。滤膜孔径应不大于0.45um。直径为 50mm。使用前应采用适宜的方法灭菌。使用时, 应保证滤膜在过滤前后的完整性。 ☆ 水溶性供试液过滤前先将少量的冲洗液过滤以润 湿滤膜。油类供试品,其滤膜和过滤器在使用前应 充分干燥。为发挥滤膜的最大过滤效率,应注意保 持供试品溶液及冲洗液覆盖整个滤膜表面。供试液 经薄膜过滤后,若需用冲洗液冲洗滤膜,每张滤膜 每次冲洗量一般为100ml,总冲洗量不得超过 1000ml,以避免滤膜上的微生物受损伤。
培养温度及结果报告单位
培养温度:除另有规定外,本检查法中细菌及控制 菌培养温度为30~35℃﹡;霉菌、酵母菌培养温度 为23 ~28℃。 检验结果报告:以1g 、1ml 、10g 、10c㎡为单位 报告,特殊品种可以最小包装单位报告。 特殊品包括 (1)药典规定微量包装药品的检验量可以酌减。 (2)一些贵重药品也应考虑检验量。
微生物实验室建设问题
除地面、墙面、顶棚和工作台外,传递窗、物品台、坐凳、门把手等细微环节, 也应做到易于清洁,耐腐蚀、不起尘、不开裂、光滑防水,便于消毒。 洁净室内照明、紫外、超净工作台等仪器设备开关易设置在第1缓冲间以外,便 于控制。 洁净室内各区域的风速、压差、温度、湿度显示等易设置在第1缓冲间以外或第 1缓冲间外可以观察到的地方,便于观察纪录,实时提示屏障系统的有效性 。 洁净区内部和外部宜设置对讲设备,便于实验人员的信息交流和协作。 洁净室内不应安装水槽、水管、上下水道等,避免滋生微生物。 微生物实验室空调系统的设计应充分考虑生物安全柜、恒温水浴、培养箱、冰箱、 高压蒸汽灭菌器等冷、热、湿和污染负荷。 无菌室内不宜放置水浴等对湿度影响较大的仪器,如需要放置应加盖,并经常换 水 ,防止微生物滋生 由于实验室建成后,结构布局很难变更,所以应对未来的人员编制、检验内容、 工作量、所需仪器做出规划,充分考虑实验室的承载能力,必要时预留部分空间。
无菌操作实验报告
无菌操作实验报告引言无菌操作是生命科学和医学研究中重要的实验技术之一。
通过无菌操作,可以避免外部微生物的污染,确保实验结果的准确性和可靠性。
本实验报告旨在描述无菌操作的基本原理、操作步骤和注意事项。
无菌操作的原理无菌操作的原理是通过杀灭或阻止外源性微生物的进入,保持实验环境的洁净和无菌状态。
无菌操作通常包括以下几个方面:1.灭菌:通过高温蒸汽、紫外线照射、化学药剂等方法,彻底杀灭实验器材和培养基中的微生物。
2.防护:佩戴无菌手套、口罩和实验衣等防护用具,避免自身的微生物污染。
3.空气净化:利用高效过滤器等设备,过滤空气中的微生物,保持实验环境的无菌状态。
无菌操作的步骤1. 准备工作在进行无菌操作前,需要进行充分的准备工作,确保实验环境的洁净和无菌状态。
1.清洗实验室台面和器材:使用含有消毒剂的清洁剂彻底清洗实验台面和所需的器材,保证它们的无菌状态。
2.灭菌工具:准备好所需的高温蒸汽灭菌器、紫外线照射器等工具,以进行必要的灭菌操作。
2. 穿戴防护用具在进行无菌操作前,必须佩戴适当的防护用具,以防止自身的微生物污染。
1.穿戴实验衣:穿戴干净的实验衣,确保全身被完全覆盖。
2.戴口罩和帽子:戴上口罩和帽子,避免口腔和头发中的微生物进入实验环境。
3.戴无菌手套:佩戴无菌手套,以防止手部的微生物接触实验材料和器械。
3. 灭菌操作在进行无菌操作前,需要对器材和培养基进行灭菌处理,以确保它们不会引入外部微生物。
1.器材灭菌:将需要使用的器材,如试管、培养皿等,放入高温蒸汽灭菌器中进行灭菌处理。
2.培养基灭菌:将需要使用的培养基倒入培养瓶中,使用高温蒸汽或化学药剂对其进行灭菌处理。
4. 实验操作在进行实验操作时,必须保持无菌操作的环境和步骤。
1.打开实验台面灯光:打开实验台面上的灯光,以提供充足的照明。
2.打开无菌操作台:打开无菌操作台,确保台面和周围环境的无菌状态。
3.快速操作:在无菌操作台上迅速进行实验操作,减少操作时间,降低微生物污染的风险。
无菌技术操作规程及注意事项
环 境:清洁、干燥、平坦。
实施
1、无菌持物钳(镊)使用 取放时钳端闭合,垂直取放,尖端不可触及罐口边缘。 使用时保持钳端向下,不可倒转向上,用后立即放回容器
内,并将关节打开。如到远处取物时连同容器一并转移, 就地取用,持钳高度不低于腰部,不能随意甩动。 只能夹取无菌物品,不可用于换药及消毒皮肤;夹油纱时 应专用;污染或疑污染应重新灭菌。 存放于高效消毒剂的无菌容器内,更换时间根据使用频率 和消毒液性质而定。手术室是用干燥保存有效时间为4小 时。
操作中保持无菌
2、用无菌钳取无菌物品,无菌物品一经取 出,即使未使用,也不可放回无菌容器内 ;非无菌物品应当远离无菌区;一套无菌 物品,仅供一位病人使用,防止交叉感染 。
操作中保持无菌
3、无菌操作中,无菌物品疑有污染或已被 污染,不可使用,应更换或重新灭菌。
无菌物品保管
无菌物品必须备
操作前准备
1、无菌操作时环境应清洁、宽敞、定期消 毒;物品布局合理;无菌操作前半小时停 止清扫、减少走动、避免尘埃飞扬。
操作前准备
2、操作者应修剪指甲,洗手,戴口罩,必 要时穿无菌衣、戴无菌手套。
操作中保持无菌
操作中保持无菌
1、工作人员应当面向无菌区域并保持一定 距离,手臂须保持在腰部水平以上,不可 跨越无菌区,手不可触及无菌物品。操作 时,不可面向无菌区讲话、咳嗽、打喷嚏 。
实施
铺无菌盘法 打开无菌包,取治疗巾双折铺治疗盘,无菌巾上
层折扇形,边缘向外,内层为无菌区,无菌物品 存放无菌盘内。拉开扇形遮盖无菌物品,上下对 齐,向上反折,两侧边缘向下对折,注明铺盘时 间,4小时内有效。
微生物检查中无菌操作注意事项
微生物检查中无菌操作注意事项无菌操作是在微生物实验室中进行微生物检查的关键步骤,目的是避免实验样本被外界的微生物污染,确保实验结果的准确性和可靠性。
下面是无菌操作时需要注意的事项:1.消毒和准备工作:(1)实验室的台面、仪器、试剂瓶等必须经过充分的消毒,可以使用酒精或消毒液进行彻底擦拭。
(2)培养器具,如试管、移液器、培养皿等要经过高温高压灭菌或使用紫外线灭菌箱进行灭菌处理。
(3)实验人员需要穿戴好无菌实验服、手套,并使用无菌技术进行消毒。
2.操作环境:(1)无菌操作应在高洁净实验室中进行,可以利用洁净工作台或操作隔离器进行操作。
(2)在操作过程中,应保持操作区域内无风或微风,以避免空气中的微生物进入实验物品。
3.无菌技术:(1)经验培养物的传代应在无菌条件下进行,以避免可能存在的细菌、真菌或病毒的污染。
(2)操作时,要将试管或培养皿口向火焰吹热,以杀灭外界的微生物。
(3)要合理选择各种工具并进行正确使用,如使用无菌注射器取样、移液器吸取培养基等。
(4)在操作中尽量避免开盖时间过长,以防止空气中的微生物进入操作区域。
(5)使用完后,必须将工具进行高温高压灭菌处理,以杀灭残留的微生物。
4.操作技巧:(1)在进行移液操作时,务必注意吸液的速度,避免引起气泡,从而使空气中的微生物进入试验物品。
(2)在移液过程中,避免吸液器底部接触到实验物品,以防细菌污染。
(3)在进行接种操作时,应将培养皿或试管倾斜45度角,以避免细菌通过空气附着到试验物品上。
(4)接种时尽量避免接触到培养基表面,避免污染培养基。
5.废弃物处理:(1)实验过程中产生的废弃物,如培养皿、试管、移液器等,都需要进行合理处理。
(2)废弃物应放入无菌塑料袋中,并用高温高压灭菌处理,防止废弃物中的微生物扩散到其他地方。
总之,无菌操作是微生物检查中至关重要的环节,需要实验人员具备严谨的实验态度和操作技巧。
通过严格遵守无菌操作的注意事项,可以有效地保证微生物检查的准确性和可靠性。
中检所无菌检查和微生物限度检查操作规范
中检所无菌检查和微生物限度检查操作规范无菌检查和微生物限度检查操作规范(中国药品生物制品检定所)一、无菌室的要求:无菌室是无菌检查、微生物限度检查的重要设备,面积不小于6平米,高度2.4-2.8m为宜。
建筑材料要光洁,不吸潮,无凸起,耐腐蚀,易清洗。
无菌室内部应六面光滑,无缝隙,里面连接处应呈凹凸形,不留死角。
操作间和缓冲间的门不应直对,缓冲间两个。
无菌室内采光面积要大,照明灯应镶嵌在天花板内,光照应分布均匀,光照度不低于300lux,电源开关应设在室外。
无菌室、缓冲间和操作间均应设置紫外线杀菌灯,每立方米2-2.5瓦,距实验台高度不超过1米,并应定期检查辐射强度,距1米处应不低于70微瓦/平方厘米,无菌室内应安装空气除菌过滤层流装置及调温装置,控制温度18-26℃,相对湿度40%-60%,操作间或净化工作台的洁净空气应保持与相临环境形成正压,不低于4.9帕。
操作区洁净度100级,操作间洁净度10000级,洁净度定期检查。
无菌室及缓冲间不得存放其他杂物,如培养箱。
用消毒液清洁无菌室操作台面,开启无菌室紫外灯和层流空气过滤30分钟以上。
无菌室的无菌程度,常用的沉降菌测定方法为:取营养肉汤琼脂平板3个,置无菌室的操作区台面左、中、右位置上,开盖暴露30分钟,在30-35℃培养2天后,计算菌落数。
用于无菌检查的无菌室或微生物限度检查的无菌室,细菌总数应小于3个,浮游菌每立方米应小于5个,否则,不能用于无菌检查和微生物限度检查。
二、培养基的准备1、培养基的制备:配制培养基的蒸馏水或去离子水应符合规定。
再称取需气菌、厌气菌培养基、真菌培养基的干燥培养基,加水溶化后,调节PH值,使灭菌后需气菌、厌气菌培养基的PH值为7.0-7.3,真菌培养基的PH值为6.2-6.6,分装、盖塞、灭菌,待用。
2、培养基灵敏度试验:培养基是无菌试验的基准物质,关系到无菌试验结果的科学、准确、可信度,因此,培养基灵敏度试验是无菌试验的重要组成部分。
微生物实验注意事项
微生物实验注意事项微生物实验是生物学实验中常见的一种实验方式。
在进行微生物实验时,为了保证实验结果的可靠性和安全性,需要注意以下事项。
首先,保持实验环境的洁净。
微生物实验需要在无菌环境下进行,因此实验室必须保持良好的卫生状况。
实验人员应戴上合适的实验服和手套,严格遵守实验室的操作规程,避免将外界的细菌或病原体带入实验室。
其次,选择适当的实验条件。
微生物实验需要在适当的温度、湿度和光照条件下进行。
不同的微生物对于这些条件的要求有所不同,因此在实验前要对实验菌株有一定的了解,选择适宜的实验条件。
第三,准备好必要的培养基和实验用具。
微生物实验需要使用培养基来培养微生物,因此在实验前要准备好所需的培养基,并按照要求进行消毒和灭菌处理。
同时,实验用具如培养皿、培养管、移液器等也需要进行消毒处理,以防止交叉感染。
第四,在实验操作中要注意细菌的传播途径。
微生物实验中,细菌可以通过空气、液体和固体等多种途径传播。
为了防止交叉感染,实验人员必须做好个人防护措施,注意隔离操作,避免实验菌株的交叉污染。
第五,注意实验结果的准确性和可靠性。
微生物实验中,实验操作的规范性和准确性对于实验结果的可靠性至关重要。
实验中要严格按照实验方案进行操作,注意记录实验数据,避免对实验结果产生影响的人为因素。
最后,进行微生物实验时要注重安全。
微生物实验中有一些菌株具有一定的致病性,为了保证操作人员的安全,实验室应配备相应的安全设备,如生化安全柜、口罩、护目镜等,并指定专门的人员负责监督和管理实验室的安全工作。
综上所述,进行微生物实验时需要注意保持实验环境的洁净、选择适当的实验条件、准备好必要的培养基和实验用具、注意细菌的传播途径、确保实验结果的准确性和可靠性,同时注重安全。
只有做到这些,才能保证微生物实验的顺利进行和实验结果的可靠性。
微生物检测技术的操作流程与注意事项
微生物检测技术的操作流程与注意事项微生物检测技术是指通过检测样品中的微生物数量和类型来评估其卫生质量的方法。
微生物检测广泛应用于食品、药品、饮用水、环境等领域,对于确保公共卫生和防止疾病传播具有重要意义。
然而,由于微生物的微小和快速繁殖特性,微生物检测技术的操作流程和注意事项非常重要。
以下是微生物检测技术的详细操作流程与注意事项。
操作流程:1. 样品采集与处理:a. 根据需要选择合适的采样方法,例如从食品表面刮取样品、从空气中吸取微生物、从液体中取样等。
确保采样器具干净且无微生物污染。
b. 将采样器具中的样品转移到适当的容器中,避免样品交叉污染。
确保容器表面无微生物污染。
c. 样品处理前,根据需要进行稀释。
确保样品浓度适宜,能够在检测中获得准确的结果。
2. 样品预处理:a. 对于含有大量杂质或抑制物质的样品,需要进行预处理来去除干扰。
预处理的方法包括过滤、离心、稀释等。
b. 样品预处理的目的是提高微生物的检出限和降低干扰物的影响。
确保预处理方法不会影响微生物的存活和增殖。
3. 微生物检测方法选择:a. 根据具体需求选择合适的检测方法。
常用的微生物检测方法包括传统培养法、分子生物学方法、免疫学方法等。
不同的方法有不同的灵敏度、特异性和操作复杂度,请根据具体情况选择最适合的方法。
b. 针对不同的微生物,可以选择相应的培养基、控制参数和检测条件来增强方法的准确性和可靠性。
4. 实验操作:a. 根据选择的检测方法,准备必要的实验试剂和仪器设备。
确保设备和试剂的清洁和消毒,并按照操作说明进行使用。
b. 操作过程中严格遵守无菌操作,避免交叉污染。
使用无菌培养器皿、移液器和培养基等。
c. 严格控制实验条件,如温度、湿度和pH值等,以保证微生物在培养过程中的正常生长和增殖。
5. 结果解读与报告:a. 根据检测结果判断微生物是否超过卫生标准,并分析可能的原因。
注意结果的可靠性和误差的范围。
b. 对于阳性样品,根据需要进行进一步检测或确认,以确保结果的准确性和可靠性。
简述无菌技术操作的基本原则
无菌技术是在微生物学和生物工程领域中非常重要的技术,它可以有效地防止杂菌或其他微生物的污染,保证实验结果的准确性和可靠性。
无菌技术操作的基本原则是非常重要的,只有遵循了这些原则,才能够保证实验过程中的无菌操作得以顺利进行。
本文将从严格遵守实验室卫生、消毒灭菌、个人卫生保护和操作规范等方面来介绍无菌技术操作的基本原则。
1. 严格遵守实验室卫生在进行无菌技术操作之前,首先要保证实验室的卫生条件良好。
实验室内部的地面、工作台面、各种器皿和设备等都需要经过彻底的清洁和消毒。
实验人员还需要定期对实验室进行空气消毒,确保实验环境的无菌状态。
只有在干净整洁的实验室环境中进行无菌操作,才能有效地避免外界微生物的污染。
2. 坚持消毒灭菌在实验室操作中,所有用于实验的器皿、培养基、培养液等都需要经过严格的消毒和灭菌处理。
消毒灭菌是无菌技术操作的基本要求,通过对实验器具的高压蒸汽灭菌、紫外线消毒等方式,可以有效地杀灭器具表面和内部的微生物,保证实验器具的无菌状态。
3. 个人卫生保护在进行无菌技术操作时,实验人员的个人卫生也是至关重要的。
实验人员需要做好手部卫生保护,经常洗手并使用消毒洗手液,保持双手清洁。
另外,实验人员需要佩戴实验服、手套、口罩和帽子等防护用具,防止自身的皮肤屑、头发等杂质污染到实验器具和培养基上。
4. 严格操作规范在进行无菌技术操作时,实验人员需要严格遵守操作规范,确保实验操作的严谨性和准确性。
实验过程中不得随意触摸器具表面,不得随意打开培养皿和试管盖,不得在实验室内吃东西等。
只有通过严格的操作规范,才能有效地防止外界微生物的污染。
无菌技术操作的基本原则是非常重要的,只有严格遵守了实验室卫生、消毒灭菌、个人卫生保护和操作规范等原则,才能够有效地保证实验过程的无菌状态,并得到准确可靠的实验结果。
在进行无菌技术操作时,实验人员应该始终牢记这些基本原则,以确保实验工作的顺利进行和实验结果的准确可靠。
5. 使用无菌技术器具和培养基在无菌技术操作中,选择合适的无菌技术器具和培养基也是非常重要的。
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微生物检查中无菌操作注意事项
一、关于采用酒精棉球消毒的注意事项
1.用酒精棉球擦拭双手,包括手掌、手背,尤其是手指,更换一个酒精棉球擦拭酒精灯附近(约10cm)桌面。
2.点燃酒精灯,在酒精灯附近拆器皿包装,并对器皿做相应标记。
3.用酒精棉球再次擦拭双手,开始实验操作。
4.消毒用酒精棉球湿度以不挤压出酒精为宜。
二、关于酒精灯正确使用的注意事项
1.酒精量以大于1/3,小于2/3为正确量。
2.防风罩应小口朝上放置于酒精灯上,反过来放置会导致氧气没有充分燃烧。
3.使用酒精灯前要检查灯芯帽是否盖得太紧,以防酒精不能上升,影响酒精灯燃烧。
点燃酒精灯时严禁两个酒精灯对点。
4.熄灭酒精灯方法:先用灯芯帽扣压并熄灭火焰,再揭帽重新扣压一次。
这样可防止蒸汽倒吸灯帽,再次使用酒精灯时难以揭开灯帽。
5.做样品稀释及从试管取样实验时,酒精灯应放在操作人员和试管架之间,便于无菌操作。
三、关于吸量管使用的注意事项
1.左手拿洗耳球,右手持吸量管,用右手食指平按住吸量管的顶部。
2.吸取样品后进行定量时,吸量管吸液口应贴附于试管内壁;放样时,吸量管吸液口也应贴附于试管约1/2内壁,不应贴附在管口处放液。
吸量管应尽可能垂直放液。
3.用吸量管往空平皿加入1ml溶液时,吸量管应贴附于平皿底部中央位置放液;用吸量管在平板上加入溶液做涂布接种时,吸量管应垂直、悬空放液于平板中央。
4.因吸量管拆封包装后应马上使用,故无须对吸量管吸液口过火焰消毒。
5.整个取样放样的过程应尽可能保证试管口或锥瓶口靠近酒精灯火焰附近。
四、关于样品梯度稀释的注意事项
1.从试管架上取出所需试管于酒精灯火焰附近拔出试管塞,并在火焰外焰处对试管口过火焰进行消毒。
2.将试管放回试管架后用吸量管进行取样,然后取出该试管于火焰附近调节吸量管内溶液体积。
3.取样完成后对试管口再次消毒并塞上试管塞,将试管放回试管架原处。
4.从试管架上取出所需加样的试管于火焰附近进行加样放液操作。
五、关于培养皿记号的注意事项
1.标记统一写在平皿底部边缘,以“字数少、字体小、清晰、明确”为原则。
2.标记内容包括:班级、学号、日期、培养基名称、稀释级。
六、关于平板制备的注意事项
1.打开培养皿的方法:左手小指、无名指、中指及一部分掌腹托住平皿底部,食指和拇指张开轻握皿盖侧部,以食指为支点,摆动拇指打开皿盖。
打开的皿口应向着酒精灯的外焰。
切勿把开口朝向操作人员。
2.手持锥形瓶中下部将瓶中培养基倾倒入平皿中央位置,锥瓶口不应接触平皿。
培养基应一次注入够量,不应分次加入(除实验特殊规定)。
3.混匀培养基时应将装有混合培养基的平皿于手中顺时针轻微摇匀2-3次,平放于桌面上后再次顺时针摇匀2-3次,整个过程应在培养基尚未开始凝固时完成。
学生只要有其中一个摇匀动作也算完成混匀培养基。
4.手中装有培养基的平皿应水平放置于台面上,不应从台面边缘往里推。
在位置允许的情况下,应分开平摊放置待凝。
七、关于涂布方式的注意事项
型涂布棒应放平涂布。
2.涂布时应从中间按同一个方向打圈方式往周边涂布,可以重复涂布。
3.从高稀释级往低稀释级涂布时,可以不用更换涂布棒,也不用灼烧涂布棒。
涂布同一个稀释级的不同平板时也不用灼烧涂布棒。
但是从低稀释级往高稀释级涂
布时,如不更换涂布棒,一定要灼烧涂布棒(原则上不采用这个涂布顺序)。
八、关于培养基接种的注意事项
1.液体培养基接种时不强调接种环是否应接触到液体培养基。
2.单手持两支大试管切忌手部覆盖培养基面,空白管在里面(近操作人员),菌种在外面。
九、关于接种环灭菌的注意事项
取完固体菌时,应先垂直灼烧环部再往上灼烧其余接种丝;取完液体菌时,应先灼烧非环处的其它接种丝,再灼烧环部,这样可避免环上液体突然遇热而爆破溅出,造成污染。
以下是做参考用的,类似考评项目和分值:我们以后实训考试可否参考这些来调整我们以前的考核评分表。