血清葡萄糖GLU测定
7种血清葡萄糖常规检测系统测量结果的正确度评价
7种血清葡萄糖常规检测系统测量结果的正确度评价孙慧颖;邵燕;胡滨;李月玲;张天骄;张传宝;陈宝荣【摘要】目的评价血清葡萄糖(Glu)常规检测系统测量结果的正确度.方法用参考方法和7种常规系统(A～G)测量5种不同浓度的血清Glu标准物质和30份Glu浓度为1.88～20.72 mmol/L的冰冻人血清样本(分光光度法),按分析标准物质法、方法学比对法分别评价7种常规系统测量结果的正确度.结果依据计量学溯源标准,按分析标准物质法评价,A常规系统Glu测量结果正确度可接受,B～G常规系统Glu测量结果正确度不可接受；按方法学比对法评价,A～C常规系统Glu测量结果正确度可接受,D～G常规系统Glu测量结果正确度不可接受.结论用不同方法评价Glu测量结果的正确度时,同一常规系统的评价结论可能不一致,实验室应选择合适的正确度评价方法并使用符合ISO 15189正确度要求的血清Glu常规检测系统.【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2013(031)007【总页数】3页(P542-544)【关键词】葡萄糖;正确度;标准物质;参考方法【作者】孙慧颖;邵燕;胡滨;李月玲;张天骄;张传宝;陈宝荣【作者单位】北京航天总医院检验科,北京100076;北京航天总医院检验科,北京100076;北京航天总医院检验科,北京100076;北京航天总医院检验科,北京100076;卫生部临床检验中心,北京100730;卫生部临床检验中心,北京100730;北京航天总医院检验科,北京100076【正文语种】中文【中图分类】R446.1血清葡萄糖(Glu)是诊断、监测糖尿病的重要实验室指标，可溯源至SI单位。
ISO 15189[1]要求“应设计并实施测量系统校准和正确度验证计划，以确保结果可溯源至SI单位，或可参比至自然常数或其他规定的参考值”，因此，实验室应对常规系统检测Glu结果进行正确度评价。
本研究在复现血清Glu测量参考方法[2]及研制与临床标本有良好互通性Glu国家二级标准物质的基础上，参考文献[3]中分析标准物质法、方法学比对法分别评定7种常规系统测量结果的正确度。
高效液相色谱法测定血清葡萄糖
高效液相色谱法测定血清葡萄糖陈忠余;张天娇;张传宝;张江涛;周伟燕;闫颖;陈文祥【摘要】目的建立一种测定血清葡萄糖(glucose,Glu)的高效液相色谱法(HPLC),探讨其能否作为血清Glu测定的参考方法.方法以D-半乳糖(D-galactose)为内标物,用无水乙醇沉淀、去除血清中的蛋白质,在pH9.1条件下与1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)反应,用HPLC测定血清Glu衍生产物、D-半乳糖衍生产物,用标准曲线法定量；对建立的方法进行方法学评价.结果本法测定血清Glu的批内变异系数(CV)为0.33％～ 0.67％,平均0.51％；批间CV为0.02％～ 0.85％,平均0.38％；总CV为0.47％～ 1.03％,平均0.68％.回收率为98.22％～ 101.96％.分析Glu 的参考物质SRM 965a,测定结果与认定值的偏差为-0.928％～0.347％,平均偏差为- 0.072％.结论初步建立了测定血清Glu的HPLC法；该法准确、精密,有望作为血清Glu测定的候选参考方法.【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2011(029)009【总页数】3页(P660-662)【关键词】葡萄糖;高效液相色谱;1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮【作者】陈忠余;张天娇;张传宝;张江涛;周伟燕;闫颖;陈文祥【作者单位】重庆市第一人民医院检验科,重庆400011;卫生部北京医院卫生部临床检验中心,北京100730;卫生部北京医院卫生部临床检验中心,北京100730;卫生部北京医院卫生部临床检验中心,北京100730;卫生部北京医院卫生部临床检验中心,北京100730;卫生部北京医院卫生部临床检验中心,北京100730;卫生部北京医院卫生部临床检验中心,北京100730【正文语种】中文目前国际上测定血清Glu的参考方法有德国临床化学会(German Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine，DGKL)[1]、美国国家标准和技术研究院(National Institute of Standards and Technology，NIST)[2]和比利时根特大学[3]的同位素稀释气相色谱质谱(isotope dilution gas chromatography-mass spectrometry，ID-GC/MS)法、美国疾病控制中心[4](Centers for Disease Control，CDC)和日本临床化学会(Japanese Society of Clinical Chemistry，JSCC)的己糖激酶法。
葡萄糖测定方法操作规程
葡萄糖（GLu）测定方法操作规程【产品名称】通用名称：葡萄糖（GLu）测定试剂盒（葡萄糖氧化酶法）使用说明书【摘要】糖是人体的主要供能物质，也是组织细胞的主要成分。
血糖浓度受神经系统和激素的调节而保持相对稳定，当这些调节失去原有的相对平衡时，则出现高血糖或低血糖症状。
1.病理性高血糖：（1）原发性糖尿病（2）内分泌疾病：嗜铬细胞瘤、甲状腺毒瘤、肢端肥大症、巨人症、Cushing综合征、高血糖素细胞瘤；（3）胰腺疾病：急性或慢性胰腺炎、流行性腮腺炎引起的胰腺炎、胰腺囊性纤维化、血色病（血红蛋白沉着症）等；（4）抗胰岛素受体抗体与有关疾病：棘皮症、Wernicke’s脑病。
2.病理性低血糖：（1）胰岛细胞瘤、高血糖素缺乏；（2）对抗胰岛素的激素分泌不足，如垂体前叶功能减退、肾上腺皮质功能减退和甲状腺功能减退而使生长激素、肾上腺皮质激素和甲状腺素分泌减少；（3）严重肝病患者，肝细胞糖原储存不足及糖原异生功能低下，肝脏不能有效地调节血糖。
【预期用途】该试剂盒采用葡萄糖氧化酶法，用于体外定量测定人血清或血浆中葡糖糖的含量。
【检验原理】葡糖糖被葡萄糖氧化酶氧化后生成过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下，与4-氨基安替比林和对羟基苯甲酸钠缩合，生成醌系色素，通过测定此反应的吸光度可求得葡糖糖的含量。
D-2葡萄糖氧化酶D-葡萄糖醛酮+H2O22 H2O2 + 4-APP ++ H3O+POD醌系色素+ 5H2O【主要组成成份】试剂1（R1）：磷酸盐缓冲液100 mmol/L抗环血酸氧化酶4700 U/L葡糖糖氧化酶4000 U/L试剂2（R2）：磷酸盐缓冲液100 mmol/L过氧化物酶6700U/L4-氨基安替比林0.7 mmol/L对羟基苯甲酸钠 1.3 mmol/L校准品：葡萄糖溶液。
*不同批号试剂盒各组分请勿混用。
【试剂准备】R1：即用液体试剂R2：即用液体试剂【储存条件与有效期】未开启的试剂盒避光保存于无腐蚀性气味和通风良好的室内，在2℃~8℃有效期为一年。
葡萄糖(GLU)测定试剂盒(己糖激酶法)产品技术要求sainuopu
葡萄糖（GLU）测定试剂盒（己糖激酶法）适用范围：用于体外定量测定人体血清中葡萄糖的含量。
1.1 试剂盒包装规格试剂1：1×25ml，试剂2：1×5ml；试剂1：2×60ml，试剂2：2×12ml；试剂1：3×40ml，试剂2：3×8ml；试剂1：4×60ml，试剂2：4×12ml；试剂1：2×400ml，试剂2：1×160ml；试剂1：2×40ml，试剂2：2×8ml。
校准品（选配）：1×1ml；1×3ml。
1.2 试剂盒主要组成成分2.1 外观试剂1：无色澄清液体；试剂2：浅黄色澄清液体。
校准品：无色至淡黄色澄清液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 试剂空白吸光度在37℃、340nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不大于0.3。
2.4 分析灵敏度测定浓度为5.55mmol/L样本时，吸光度变化值（ΔA）应在（0.2，0.4）范围内。
2.5 线性范围在（0.5，38.9）mmol/L线性范围内，线性相关系数r不小于0.996。
在[5，38.9）mmol/L范围内的线性相对偏差不大于±10%；测定结果（0.5，5）mmol/L时线性绝对偏差不大于±0.5mmol/L。
2.6 重复性重复测试两份高低浓度的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于5%。
2.7 批间差不同批号试剂测试同一份样本，测定结果的批间相对极差应不大于6%。
2.8 准确度当参考物质浓度在（0，4.16）mmol/L时，实测值与标示值偏差不应超过±0.833mmol/L；当参考物质浓度在[4.16，38.9）mmol/L时，实测值与标示值偏差应在±20%范围内。
2.9校准品溯源性依据GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求，校准品溯源至中国计量科学研究院生产的有证参考物质（GBW10062）。
血液葡萄糖的测定方法
血液葡萄糖的测定方法血液葡萄糖测定方法是用于检测人体血液中葡萄糖含量的一种方法。
葡萄糖是人体重要的能量供应来源，它在体内的浓度与机体的代谢状态密切相关。
因此，对于糖尿病患者来说，监测血液葡萄糖水平非常重要，有助于他们控制血糖水平，维持身体健康。
血液葡萄糖的测定方法有很多种，根据实际需求和方法的可行性，可以选择不同的方法进行测定。
以下将介绍几种常见的血液葡萄糖测定方法。
首先是基于试纸的葡萄糖测定方法。
这种方法常用于家庭血糖监测，便携式血糖仪就是基于试纸原理的。
使用这种方法，只需将试纸置于一滴血液上，试纸上的葡萄糖酶会与葡萄糖发生反应，产生氧化还原反应，导致试纸变色，通过比色板或仪器来判断血糖水平。
这种方法操作简便，但准确度相对较低，适用于一般家庭血糖监测。
其次是荧光法葡萄糖测定方法。
这种方法是基于葡萄糖氧化酶的反应原理，葡萄糖氧化酶与葡萄糖反应生成辅酶还原型，再与辅酶反应产生荧光染料，测量荧光强度来计算血糖浓度。
这种方法灵敏度高，准确度较高，但需要专业的仪器和技术支持，适用于实验室中血糖测定。
此外，还有电化学法葡萄糖测定方法。
这种方法是将血液样品置于电极上，通过电化学反应来测量葡萄糖浓度。
常用的电极有电化学氧化酶电极和谐振速度电极。
电化学法测定血糖准确度高，但仪器复杂，需要专业的操作技术和维护。
最后是光学法葡萄糖测定方法。
这种方法是利用光学仪器，通过检测葡萄糖溶液对特定波长光的吸收或散射来测定葡萄糖浓度。
光学法测定速度快，操作简便，适用于实时监测。
总之，血液葡萄糖测定方法多种多样，每种方法都有其适用的场景和特点。
在选择合适的测定方法时，需要根据实际需求，考虑准确性、操作便捷性以及成本等因素。
对于糖尿病患者来说，定期监测血液葡萄糖水平非常重要，可以根据医生的建议选择合适的测定方法，并保持良好的血糖控制，以维持健康的生活。
用GOD法测定血清中葡萄糖浓度
酶法：葡萄糖氧化酶法
（一）化学法
方法
磷钼酸法 （Folin-Wu）
类型
原理
定量 G+Cu2+→Cu2O↓ 分光 Cu2O +磷钼酸试剂 →蓝色钼化合物
（430nm）
用途及备注
稳定、准确、但对 葡萄糖无特异性，
受血中非糖还 原物 质的影响。
邻甲苯胺法
定量
G+邻甲苯胺→蓝绿色的席弗(Schiff)碱 （630nm）
思考题：
a) 本实验原理为酶促化学反应，为何未加终止剂 终止酶的反应？
b) 本实验涉及显色反应，该反应与血清碱性磷酸 酶活力测定中的显色反应有何异同？
c) 为何不同检测方法所提供的空腹正常血糖参考 值存在差异？
葡萄糖氧化酶法： 3.89~6.11mmol/L Folin-Wu法： 4.4~6.7mmol/L 邻-甲苯胺法： 3.89~6.11mmol/L
③ 严重黄疸、溶血及乳糜样血清应先制备无蛋白 血滤液，然后再进行测定。
临床意义：
生理性高血糖：摄入高糖食物，情绪紧张
病理性高血糖：
①糖尿病
②内分泌腺功能障碍
③颅内压增高
④脱水引起高血糖
生理性低血糖：见于饥饿和剧烈运动
病理性低血糖：特发性功能性低血糖，依次是药源性，
肝源性和胰岛素瘤等。
❖调节血糖水平的激素：胰岛素、胰高血糖素、糖皮 质激素和肾上腺素。
血糖的来源、去路
血糖水平恒定的生理意义
保证重要组织器官的能量供应，特别是某些以 葡萄糖供能的组织器官。 ➢ 脑组织不能利用脂酸，正常情况下主要以来葡 萄糖供能； ➢ 红细胞没有线粒体，完全通过糖酵解获能； ➢ 骨髓及神经组织代谢活跃，经常利用葡萄糖供 能。
生化实验室糖Glu葡萄糖氧化酶法作业指导书
生化实验室糖Glu葡萄糖氧化酶法作业指导书1、前言试验名称：葡萄糖测定，英文名称：Glu，方法：葡萄糖氧化酶法。
本文件适用于安阳鼎城糖尿病医院检验科生化实验室，目的是指导工作人员正确的在OLYMPUS－AU400全自动生化分析仪上测定血清、血浆样本中的葡萄糖浓度，以保证测定结果的准确可靠。
本试验用体外定量测定人血清或血浆样本中葡萄糖的浓度。
葡萄糖的准确测定对于诊断和治疗高血糖症和低血糖症是十分重要的，高血糖症可发生于糖尿病、静脉输入含葡萄糖液体、严重应激状态、脑血管意外，低血糖症可见于胰岛瘤、胰岛素用药，先天性碳水化合物代谢障碍和禁食。
通常在研究这些病症时，还将葡萄糖测定与各种耐量试验和剌激试验一同进行。
2、测定原理本试验采用改良的Trinder氏方法，其反应原理：葡萄糖+O2+H2O GOD葡萄糖酸+H2O2H2O2+AAP+HBA POD醌亚胺色素+H2O上式中AAP为4-氨基安替比林HBA为4-羟基苯甲酸GOD为葡萄糖氧化酶POD为辣根过氧化物酶在上述反应中，红色醌亚胺色素的生成量与样本中葡萄的浓度成正比，通过在520nm波长处测定吸光度的变化值，从而计算出样本中葡萄糖的浓度。
3、试剂试剂生产商：长海科华生物工程股份有限公司。
剂型：液体双试剂。
包装量：R1：4*30ml R2：4*15ml注册号：沪食药监械（准）字2010第2401171号。
生产许可证号：沪药管械生产许20030916号。
基本成份：试剂1：过氧化物酶375u/l4-羟基苯甲酸15mmol/l4-氨基安替比林0.75mmol/l磷酸盐缓冲液110mmol/l试剂2：磷酸盐缓冲液110mmol/l葡萄糖氧化酶6000u/l储存条件和有效期：试剂避光储存于2―8℃可稳定12个月。
启用后2―10℃可稳定30天，若试剂混浊，或空白在520nm下吸光度值高于0.4A时，则不能使用。
4、标准品：使用试剂盒附带标准品5、质控品：生产商：英国Randox公司。
葡萄糖含量测定方法(GLU)
葡萄糖含量测定方法(GLU)
简介
本文档介绍了一种葡萄糖含量测定方法(GLU)。
该方法可以快
速准确地测量样品中的葡萄糖含量。
实验步骤
1. 准备样品：将待测样品准备好，并标清楚每个样品的编号。
2. 前处理：根据样品的特性，进行必要的前处理步骤，如提取、稀释等。
3. 校准曲线制备：准备一系列不同浓度的葡萄糖标准溶液，分
别测量它们的吸光度，并绘制标准曲线。
4. 测量样品吸光度：使用分光光度计或其他合适的光学仪器，
测量每个样品的吸光度。
5. 计算葡萄糖含量：将样品的吸光度值代入标准曲线中，利用
线性回归等方法计算出样品中的葡萄糖含量。
注意事项
- 在进行实验前，确保所有仪器设备已经校准，并且采取适当的安全措施。
- 在样品处理和测量过程中，尽量避免污染和氧化，以确保测量结果的准确性。
- 在进行葡萄糖含量测定时，建议重复测量多次，以提高结果的可靠性。
结论
葡萄糖含量测定方法(GLU)是一种准确可靠的方法，可以用于测量样品中的葡萄糖含量。
通过合理的样品处理和测量步骤，可以得到准确的结果，并为相关领域的科研和生产提供支持。
请注意，该方法的具体步骤和实验条件可能会因实际情况和需求的不同而有所调整。
在进行实验前，请根据实际情况进行适当的优化和验证。
以上是关于葡萄糖含量测定方法(GLU)的简要介绍，希望对您有所帮助。
如有需要，请随时联系。
谢谢！。
血糖浓度测定
血糖浓度测定【实验目的】学会用分光光度计测定血清中GLU（葡萄糖）的含量。
【检验原理】肉眼可见彩色光称为可见光，波长范围在400～750nm。
当可见光通过有色溶液介质，一部分光能被吸收，一部分被透过。
这种光能的吸收和透过，可用于某些物质的定性、定量分析。
用葡萄糖试剂同样处理已知浓度的葡萄糖标准液和待测血清样品，标准管和样品管内的葡萄糖与试剂发生显色反应（形成红色醌型化合物），在510nm波长测定其吸光度值，计算样品的血糖浓度。
【检验用品】葡萄糖测定试剂、葡萄糖标准液，大、小微量移液计、配套吸管，722-P可见分光光度计，试管、试管架、玻璃笔，手控电热水浴槽。
【检验方法】1．准备试管试液：取三支试管，用玻璃笔在试管上划记1、2、3编号，1试剂空白管、2标准管、3样品管。
用大移液计（配大吸管）分别吸取试剂1ml（1000μl）入三支试管内，换用小移液计（配小吸管）吸取葡萄糖标准液10μl入标准管内，换小吸管后吸取待测血清样品10μl入样品管内。
2．水浴：各管混合均匀，置于试管架上并放入水浴槽内，37℃水浴15分钟后取出。
3.上机测定（1）接通光度计电源、开机，打开光度计比色皿，按编号依次将三支试管液倒入比色皿中，使其磨砂面相邻隔光，透光面对准光路。
（2）把可见光波长调至510nm。
当试剂空白管透光时，按MODE （功能）键设置T(透光度)为100%。
再按功能键设置为A（吸光度），滑动比色皿拉杆，依次让标准管、样品管透光并测出其吸光度值。
1试剂空白管2标准管3样品管试剂（ml） 1.0 1.0 1.0标准液（μl）—10 —样品（μl）——10【检验结果】C样：样品浓度？C标：标准液浓度（5.55mmol/L）A样：样品吸光度值（）A标：标准液吸光度值（）C样=A样/ A标×C标。
血清葡萄糖(GLU)——生化检测项目
血清葡萄糖（GLU ）
一、检测原理
在己糖激酶的作用下，葡萄糖被三磷酸腺苷酸（ATP ）磷酸化。
葡萄糖-6-磷酸在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的作用下被氧化，进而降低了二核糖酸尼古丁胺腺嘌呤（NADH ）的水平，在340nm 或410nm 条件下测量NADH 的吸收值，作为反应终点数值。
葡萄糖+ATP −−−→−己糖激酶
G6P+ADP
G6P+NAD+−−→−PD
G 66-磷酸糖苷+NADH+H+
二、参考区间
血清：3.9—6.1mmol/L
三、临床意义
1、升高见于：糖尿病、慢性胰腺炎、甲状腺功能亢进、心肌梗死、皮质醇增多症、肢端肥大症、嗜铬细胞瘤、胰高血糖素瘤；脑外伤、脑溢血。
2、降低：见于各种原因引起的胰岛素分泌过多或对抗胰岛素的激素分泌不足、甲状腺功能不全、肾上腺功能不全、脑垂体恶病质、急性进行性肝脏疾病(急性黄色肝萎缩、急性肝炎、肝癌、磷及砷中毒等)、新生儿低血糖症等。
检验科生化葡萄糖测定的标准操作规程
葡萄糖测定的标准操作规程【目的】体外检测血清中葡萄糖（GLU ）的含量。
【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
2.本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
【标本类型及实验前准备】1.受检者的准备病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况。
孕妇应在产后或终止哺乳3个月后检验。
此外，有无服用影响的药物以及采血的季节都应做相关记录。
2.静脉采血除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
【仪器设备】东芝TBA-FX8全自动生化分析仪，低速离心机一、检测原理本试剂所采用的反应式如下：葡萄糖ATP HK葡糖糖6磷酸ADP葡萄糖 6 磷酸 NAD G 6 PDH 6 PG NADH H式中：ATP为三磷酸腺苷；ADP为二磷酸腺苷；HK为己糖激酶；G-6-PDH为葡萄糖-6-磷酸脱氢酶；6-PG为6-磷酸葡萄糖酸上述反应中，NADH的生成量与样本中葡萄糖的浓度成正比，通过在340nm处测定吸光度的变化值，即可测得样本中葡萄糖的浓度。
、试剂1.试剂本科使用上海复星长征医学科学有限公司HDL-C试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：试剂1（R1）三磷酸腺苷0.75mmol/L葡萄糖-6-磷酸脱氢酶375U/LNAD15mmol/L哌嗪-N,N’ -双（2-乙磺酸）缓冲液 50 mmol/L试剂2（R2）己糖激酶60KU/L哌嗪-N,N’ -双（2-乙磺酸）缓冲液 50 mmol/L2.校准要求2.1校准品：使用与试剂配套使用的复星长征临床化学校准血清（货号：449 5 0/4 5 9 5 0对测定进行校准。
2. 2校准间隔2. 2. 1试剂批号变更时使用与试剂配套使用的复星长征临床化学校准血清对测定进行校准后再对临床病人样本进行测定。
glu指标
GLU指标通常指的是血糖（Glucose）指标，它是衡量血液中葡萄糖浓度的标准。
血糖是人体能量的重要来源，对于维持正常的生理功能至关重要。
血糖水平异常可能会导致一系列健康问题，因此监测血糖指标对于预防和治疗相关疾病具有重要意义。
正常情况下，人体内的血糖水平受到胰岛素等激素的调节，保持在一个相对稳定的范围内。
空腹血糖正常值在3.9-6.1mmol/L之间，餐后2小时血糖正常值应小于7.8mmol/L。
血糖水平受到多种因素的影响，如饮食、运动、药物等。
当血糖指标异常时，可能会导致以下健康问题：
高血糖：长期高血糖会损害血管、神经等组织器官，增加患糖尿病、心脑血管疾病等慢性病的风险。
糖尿病患者需要密切关注血糖变化，通过药物治疗、饮食控制等方式维持血糖在正常范围内。
低血糖：低血糖可能导致头晕、乏力、心慌等症状，严重时甚至可能出现昏迷、癫痫等危险情况。
低血糖患者需要及时补充糖分，避免长时间饥饿或过度运动。
为了保持血糖稳定，建议采取以下措施：
合理饮食：保持均衡的饮食，适量摄入碳水化合物、蛋白质和脂肪，避免过多摄入高糖、高脂肪食物。
适量运动：进行适量的有氧运动，如散步、慢跑、游泳等，有助于提高胰岛素敏感性，维持血糖稳定。
定期监测：定期检测血糖水平，了解自身血糖状况，及时调整生活方式和治疗方案。
请注意，以上内容仅供参考，如有血糖异常或相关健康问题，请及时就医并遵循专业医生的建议。
1。
葡萄糖氧化酶法测定血清(浆)葡萄糖
实验名称：葡萄糖氧化酶法测定血清（浆)葡萄糖【实验原理】葡萄糖可由葡萄糖氧化酶氧化成葡萄糖酸并产生过氧化氢，后者在过氧化物酶的作用下，能与苯酚及4-氨基安替比林作用产生红色醌化合物。
醌的产量与葡萄糖量成正比。
醌化合物呈红色，其颜色深浅与葡萄糖含量成正比，在500nm出测定其吸光度，对照标准科计算出葡萄糖的含量。
【实验准备】一、材料（1）血清（2）血浆：以草酸钾-氟化钠为抗凝剂的血浆二、试剂（1）试剂R1：磷酸盐缓冲液100mmol，pH7.5，苯酚10mmol/L。
（2）试剂R2：磷酸盐缓冲液100mmol，pH7.5，葡萄糖氧化酶16 000U/L，过氧化物酶1 000U/L，4-氨基安替比林2.0mmol/L。
（3）葡萄糖校准液：5.550mmol/L（1mg/ml）（4）生理盐水。
（5）工作试剂（酶酚混合液）：取R1试剂4.5ml与R2试剂0.5ml混合在10ml试管中。
三、器材（1）试管和试管架（2）移液枪（3）722型分光光度计（4）酶标仪（5）恒温水浴箱（6）酶标板（7）板条（8）生化培养箱【实验步骤】（1）取酶标板一块，板条一条，设定空白孔A1，标准孔A2、A3，测定孔A4、A5，按【实验结果】葡萄糖（GLU）浓度（mmol/L）=（A测定孔平均值/A校准孔平均值）×5.55参考值：3.89~6.11mmol/L测得数据为A2 A3 A4 A50.085 0.05 0.03 0.037(0.037+0.030)/2——×5.55 ﹦2.75mmol/L（0.085+0.050/2【实验讨论】①移液枪操作熟练程度直接影响测定结果，吸样前需多练习②测定标本以草酸钾-氟化钠为抗凝剂的血浆较好。
③由于尿液中尿酸等干扰物质浓度过高，会干扰过氧化物酶反应，出现结果假性偏低，因此葡萄糖氧化酶法不能直接测定尿液葡萄糖含量，但可直接测定脑脊液葡萄糖含量。
④本法测定葡萄糖原理中反应式第一步是特异反应，第二步特异性较差，所以第二步易引起误差。
血清葡萄糖测定标准操作规程
⾎清葡萄糖测定标准操作规程葡萄糖测定标准操作规程1 检验申请单独检验项⽬申请：空腹⾎清葡萄糖测定(缩写GLU)，餐后2h葡萄糖测定，各种体液葡萄糖测定；组合项⽬申请：葡萄糖耐量试验(缩写OGTT)。
临床医⽣根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采⾎约2 ml，不抗凝，置普通试管中。
或采⽤含分离胶的真空采⾎管。
2.1.2检验申请单和⾎标本试管标上统⼀且唯⼀的标识符。
2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单⼀起及时运送⾄检验科。
专⼈负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不⾜：少于0.3ml的全⾎标本，或少于0.1ml的⾎清或⾎浆。
2.1.5.2对反应吸光度有⼲扰的标本，包括严重溶⾎、严重浑浊的标本。
2.1.5.3⽆法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4抽⾎后室温放置超过4h以上的标本。
2.1.5.5静脉滴注⼤剂量维⽣素C后⽴即抽⾎的标本。
2.1.5.6其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离⼼分离出⾎清，并及时将⾎清与⾎球分离。
2.2.2标本保存时间：不抗凝⾎标本如⾎清未与⾎块分开，共存同⼀试管中，室温（15～25℃）下⾎清葡萄糖很不稳定，普通冰箱中（2～8℃）稳定1天。
加氟化钠的⾎液标本室温（15～25℃）下稳定4h。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，单独分离出⾎清后，密闭置4～8℃冰箱内保存7天。
2.3标本采集的注意事项2.3.1采⾎前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。
检查空腹⾎清葡萄糖的须在禁⾷12h以上早晨抽⾎。
2.3.2餐后2h葡萄糖检查，受检者于餐后2h准时抽⾎。
2.3.3葡萄糖耐量试验检查的⾎液标本，在服⽤75克葡萄糖后，分别于0.5h、1h、2h及3h准时抽⾎。
2.3.4为了避免葡萄糖被酵解，单独测定葡萄糖时，⾎标本可氟化钠-草酸钾抗凝，氟化钠⽤量为1.5mg/ml⾎。
血清葡萄糖(GLU)测定—GOD-POD(精)
正常参考范围:3.9~6.1mmol/L
注意事项
-葡萄糖有ɑ型和ß型之分，在溶液中可互相转 变。新配制的葡萄糖标准液须放置2小时以上 （最好过夜），使两者在溶液中达到平衡。
COD-POD 法初始反应特异性高，而指示反 应特异性较差，干扰往往发生在指示反应。血 液中的一些还原性物质，如维生素C、谷胱甘 肽及左旋多巴可与色原性氧受体竞争H2O2， 使结果出现偏差。
临床意义
血糖浓度受神经系统和激素的调节而保持相对稳定，当这些调节失去原有的 相对平衡时，则出现高血糖和低血糖。
高血糖： 1.生理性高血糖：见于饭后1~2h；注射葡萄糖后；情绪紧张时分泌肾上腺
素增加或注射肾上腺素后等。 2.病理性高血糖： ①内分泌功能障碍：如糖尿病等 ②颅内压增加刺激血糖中枢而使血糖升高，如颅外伤，颅内出血等。 ③严重脱水：引起血液浓缩而导致血糖升高，如呕吐、腹泻、高热等。 血糖降低.： 1.生理性的低血糖：有饥饿、剧烈运动等。 2.病理性的低血糖： 胰岛素分泌过多：如胰岛β细胞增生或肿瘤。 对抗胰岛素的激素分泌不足：如垂体前叶、肾上腺皮质和甲状腺功能减退等。 血糖来源减少：如长期营养不良，严重的肝病等。
血清葡萄糖（ＧＬＵ）测定—GOD-POD法
实验目的：
⒈掌握GOD-POD法测定血糖的原理及注意事 项。
⒉熟练进行实验操作并能够正确使用加样枪 ⒊了解血糖测定的主要临床意义。
实验原理：
ＧＯＤ催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并产生过 氧化氢，过氧化氢被偶联的ＰＯＤ催化释放出 初生态氧，后者将色原性氧受体４-氨基安替 比林偶联的酚氧化，并与4-氨基安替比林结合 生成红色醌类化合物。
操作步骤：
1、配制酶工作液：
2、按下表操作：
血清中葡萄糖浓度的测定
操作步骤
取试管3支，按表操作 血清中葡萄糖浓度的测定
试剂/ml
空白管
标准管
测定管
血清
葡萄糖标 准液 蒸馏水 酶酚混合 试剂
─
─
─
0.020
0.020
─
0.020
3.00
─
3.00
─
3.00
混匀，置37℃水域中，保温25min,在波长510nm比 色处，以空白管调零，读取标准管及测定管的吸光 度
• 反应式 葡萄糖＋O2＋H2O
（3）本实验原理为酶促化学反应，为何未加终止剂终止酶 的反应？ （4）本实验的第二步是显色反应，该反应与碱性磷酸酶活 力测定中的显色反应有和相同与不同？ （5）本实验在设计上存在缺陷，指出存在的缺陷与改进方 案。
Thank you！
血清葡萄糖浓度的测定 （GOD-POD法）
小组成员：石子涛 习文 盛世豪 蒋勇
实验目的
1.掌握酶法测定血清葡萄糖浓度的原理。
2.掌握血糖变化的临床生理意义。
知识窗
酶法分析是指用酶作为工具定量测定某种物
质含量的分析方法。定量分析的目标可以是酶的 底物，辅酶，也可以是酶的激活剂或抑制剂。
其分类如下：
（3）酚溶液：称取重蒸馏酚100mg，溶入蒸馏水100ml 中，用棕色瓶储存。 （4）酶酚混合试剂：将酶试剂及酚溶液等量混合，4可 放一个月。 （5）苯甲酸钠溶液(12mmol/L)：称取苯甲酸钠1.6g，于 800ml蒸馏水中加温助溶，冷却后加蒸馏水定容至1L。 （6）葡萄糖标准储存液（100mmol/L）：称取已干燥至 恒重的无水葡萄糖1.082g，溶入约70ml 12mmol/L苯甲酸 钠溶液中定容至100ml。2h以后方可使用 （7）葡萄糖标准工作液（5mmol/L）：吸取葡萄糖标准 储存液5.00ml，用12mmol/L苯甲酸钠溶液稀释至100ml。
血清葡萄糖测定方法
血清葡萄糖测定方法
血清葡萄糖测定方法的步骤如下：
1. 采集血液样本，一般常用的是静脉血。
2. 将血样离心，使血浆和血细胞分离开。
3. 取血浆样本进行血清葡萄糖测定。
常用的血清葡萄糖测定方法有：酶促反应法、葡萄糖氧化酶法、光度法等。
4. 酶促反应法：将血清样本与一定浓度的葡萄糖酰胺酶和葡萄糖脱氢酶一起反应，生成NADH。
通过测量NADH的吸光度来计算血清中的葡萄糖含量。
5. 葡萄糖氧化酶法：将血清样本与一定浓度的葡萄糖氧化酶反应，生成过氧化氢和D-酮糖。
再用过氧化物酶反应掉过氧化氢，最后通过吸光度计算血清中的葡萄糖含量。
6. 光度法：将血清样本与一定浓度的酚啉试剂和磷酸缓冲液混合后，通过加热反应，测量其吸光度，然后计算血清中的葡萄糖含量。
7. 根据所用方法的不同，测定结果会有一些差异，请根据实验室所用的方法进行测定。
血清葡萄糖浓度的测定
2. 葡萄糖氧化酶法(GOD-POD法)
葡萄糖氧化酶GOD (glucose oxidase) 将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并释放过氧 化氢。过氧化物酶POD (peroxidase)将过氧化氢分解为水和氧，并将无色的4氨基安替比林与酚氧化缩合生成红色的醌类化合物(Trinder反应)，其红色深 浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比。
• 空腹血糖损害IFG (impaired fasting glucose) 和糖耐量减退IGT (impaired
glucose tolerance) 是正常向糖尿病的过渡状态，这部分人虽然现在还不是糖尿
病， 但是将来发生2型糖尿病的危险性非常高，可以说是糖尿病的后备军。据
有关研究报道，每年5-8%的 IGT者将发展成为2型糖尿病。
人体对糖的耐受现象 OGTT为口服葡萄糖负荷试验，可了解人体进食葡萄糖后的血
糖调节能力，早期发现糖代谢异常，早期诊断糖尿病，是一种简
单、快捷的诊断方法。 OGTT重复性差，操作繁琐，并非必需的糖尿病诊断方法，因 此不推荐临床常规应用。
方法：试验前三天，受试者每日食物中糖含量不应低于150 g，且维持正常活 动。影响试验的药物应在三天前停用，受试前应空腹10-16 h。空腹取血后，5 分钟内饮入250 mL含75 g无水葡萄糖的糖水(妊娠妇女用量为100 g，儿童按1.75
实验步骤
B S T
工作液 dH2O
葡萄糖标准液 血清
1.00 mL 10 uL
-
1.0 mL 10 uL -
1.0 mL 10 uL
混匀， 37C， 15 mins dH2O 0.50 mL 0.50 mL 0.50 mL 混匀，以B管调零，在510nm波长处读取S管和T管的吸光度. 计算:
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血清葡萄糖GLU测定
1 检验目的
指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。
2 实验原理
本试剂基于在精密度和准确性方面具有很高可靠性的Trinder’S方法，在防止已知化合物（如尿酸、谷胱甘肽和肌酐等）的干扰进行了进一步的改良。
GOD
葡萄糖+ H2O+ O2 H2O2+葡萄糖酸 POD
H2O+AAP + HBA 醌亚胺（红色）H2O 式中：AAP 为4-氨基安替比林；HBA 为4-羟基苯甲酸上述反应中，红色醌亚胺色素的生成量与样本中葡萄糖的浓度成正比，通过在波长500nm波长处测定吸光度的变化值，即可测得样本中葡萄糖的浓度。
3 标本：
3.1 病人准备：12小时禁食。
3.2 类型：血清，标本最好不要溶血。
迅速分离血清或，减少红细胞糖酵解时葡萄糖的损失。
随机收集尿样。
3.3 标本存放：血清应在血液采集1小时内，尽早分离。
加入糖分解抑制剂（NaF，KF）后的稳定性：15～25℃保存可稳定1天,4～8℃保存可稳定7天。
血清中的葡萄糖，无溶血，无细菌污染，没有添加的防腐剂，在25℃下可稳定8个小时，在4℃下可稳定72小时。
尿样应保存在2～8℃下并尽快进行分析。
脑脊髓液如果避免蒸发可在2～8℃下稳定至少5天，5天内不检验的标本应在收集后立即储存在-20℃的条件下。
3.4 标本运输：常温条件下保存运输。
3.5标本拒收标集：细菌污染、超时送检的的标本。
4 实验材料
4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司GLU试剂盒（沪食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）4.1.1 试剂组成
试剂1（R1）：过氧化物酶 375U/L 4-羟基苯
甲酸
15mmol/L
4-氨基安替比林0.75mmo
l/L
磷酸盐缓
冲液
110mmol/L
试剂2（R2）：葡萄糖氧化
酶
6000U/L 磷酸盐缓
冲液
110mmol/L
4.1.2 试剂稳定性与贮存：在2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂盒自生产之日起有效期为12个月
4.1.3 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
4.1.4 注意事项：试剂中含有防腐剂叠氮化钠，可能存在一定的刺激作用，请勿直接接触皮肤、眼睛。
一旦接触，即用大量清水冲洗。
请勿吞服。
4.2 校准品：使用上海复星长征医学科学有限公司提供的GLU校准品对自动分析仪进行校准。
4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。
5 仪器
AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪
6 操作步骤
6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。
6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。
6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。
6.4仪器操作步骤：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪操作规程。
7 质量控制
在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
8 计算方法
以GLU复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告
9 参考值范围：（mmol/L）
成人（空腹） 3.89～5.83
参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。
根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。
我室参考值 3.9-6.1mmol/L
10 临床意义
检测血清或血浆中葡萄糖主要用于糖尿病的诊断和治疗监视，还可用于检出新生儿低血糖症、排除胰岛细胞癌以及评估各种疾病碳水化合物代谢状况。
血清葡萄糖水平可能会异常高（高血糖）或异常低（低血糖）。
葡萄糖测量用于诊
断和治疗碳水化合物代谢紊乱，包括糖尿病，新生儿低血糖，自发性低血糖，郎格罕氏岛细胞癌等。
血糖升高：
1、内分泌功能障碍，能引起高血糖的糖尿病。
2、颅内压增高：颅内压增高刺激血糖中枢如颅外伤，颅外出血，脑膜炎等。
3、由于脱水引起的高血糖，如呕吐、腹泻和高热等也可使血糖轻度增高。
血糖降低：
1、胰岛细胞增生成瘤等，使胰岛素分泌过多。
2、对抗胰岛素的激素分泌不足，如垂休前叶机能减退，肾上腺皮质机能减退和甲状腺机能减退而使生长素、肾上皮质激素分泌减少。
3、严重肝病患者葡糖尿（存在葡萄糖化尿）在健康，怀孕的妇女中很常见。
妊娠葡糖尿的最主要的特征就是每天之间或一天之中有一个显著的变化。