中国药科大学生物药剂学实验课件——小肠吸收实验

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仪器与药品
（二）试剂 1. 0.2%亚硝酸钠； 2. 1%氨基磺酸铵； 3. 0.2%津田试剂（用0.2%二盐酸萘乙二胺代替）（以上置冰箱保 存）； 4. 1 N HCl； 5. 1 N NaOH； 6. 生理盐水； 7. Krebs-Ringer磷酸缓冲液(pH 7.4)：每1000 mL内含7.8 g氯化钠， 0.35 g氯化钾，0.37 g氯化钙，1.37 g碳酸氢钠，0.22 g磷酸二氢钠， 0.22 g氯化镁，1.4 g葡萄糖； 8. 戊巴比妥钠溶液（10 mg/mL，大鼠每100 g腹腔注射0.4 mL麻醉）。
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实验操作 三、腹部除毛：将腹部毛刮除或剪除。 四、小肠两端插管：沿腹部正中线（腹白线）切开腹部（约
3～4 cm），在十二指肠上部(先找到胃)和回肠下部（先找到盲肠） 各插入细玻璃管并用线扎紧，缝合切口（不缝合，上覆以浸有生理 盐水的纱布）。
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实验操作 五、洗涤肠管：用37 ℃缓冲液（或生理盐水），缓缓注
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实验操作
八、含量测定：
空白液：1 N NaOH液。
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数据处理
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数据处理
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源自文库
实验操作 七、取样：回流开始后10 min，取样二份，一份1 mL，另
一份0.5 mL，分别作为药物和酚红的零时间样品。其后每隔10 min亦同样取样二份。 注意事项：每次取样后应立即补充酚红溶液（20 g/mL）1.5 mL，取样至60 min后停止回流。
八、含量测定：
空白液：用供试液（或试验结束后的循环液）1.0 mL，按上法操作，但不加 萘乙二胺显色剂
入肠管，洗去肠管内容物。充分洗净后送入空气使洗涤液尽量 流尽。 注意：1、先将肠管捋顺，却保无死结； 2、推注时不要太快，以免涨破肠管； 3、充分洗净后送入空气使洗涤液尽量流尽。
六、作成回路：吸取供试液
50 mL，从十二指肠上部进入肠管 并流入贮液瓶中，按图所示作成回 路。开动蠕动泵记录开始回流时间。
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实验原理
肠回流法（2～5mL/min）
在体实验法 单向肠灌流法（0.2～ 0.3ml/min） 肠襻法 药物肠吸收实验方法 翻转囊法 离体实验法 组织流通室法 分离肠系膜法 细胞模型法
徐术，刘忠良，胡晋红.药物肠吸收的实验研究方法概述.中国药房，2009，20（16）：1266-1268. 翁榕安，李小曼.药物小肠吸收常用方法比较.。医学综述，2009，15（2）：269-270.
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生物药剂学实验
(Experiment of Biopharmaceutics) 2011-2012学年(1)学期
任课老师：魏元锋
weiyuanfengyuer@yeah.net
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小肠吸收实验
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【实验目的】
（1）掌握大鼠在体肠管回流的基本操作和方法；
（2）通过药物的大鼠在体肠管回流法实验，求出药 物的吸收速率常数（K），半衰期（t 1/2）以及每小 时吸收率等。
在体法不损伤研究部位的淋巴和循环系统而明显优于离体法。但由于肠道能吸收或排泄 水分，导致供试液体积变化，可加入不被吸收的标记物（如酚红）来分析校正小肠水转 运对药物浓度的影响。
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实验操作 一、大鼠称重，计算给药量
二、大鼠麻醉：将实验前一夜绝食的大鼠，按40 mg/kg（0.4
mL/100 g）戊巴比妥钠量作腹腔注射麻醉(翻正反射消失)，并背位 固定于固定台上。
实验动物
大鼠，200 g左右
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实验原理
消化道主要包括胃、小肠和大肠（结肠），小肠 又包括十二指肠、空肠和回肠。小肠最为突出的 结构特点是它具有非常巨大的上皮表面积，药物 通过上皮吸收。小肠表面有环轮状粘膜皱襞和绒 毛突起，绒毛上还有许多微绒毛，大大增加了有 效吸收表面积。由于被动转运速度与表面积成正 比，故小肠既是药物吸收的主要部位（尤其是十 二指肠），又是药物主动吸收的特殊部位。 根据pH分配学说，对于以被动扩散机制吸收的药 物，未解离型（分子型，非离子型）的有机弱酸 和有机弱碱易吸收，离子型则难以吸收。理论上 弱酸性药物从酸性溶液中（pH＜pKa）的吸收好； 而碱性药物从碱性溶液中（pH＞pKa）的吸收好。 尽管如此，大多数药物仍可被小肠迅速吸收，这 说明有效吸收表面积是决定吸收速度的主导因素。
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仪器与药品
（三）样品 1. 供试液(1 mg%SMZ) 溶媒组成同Krebs-Ringer缓冲液。称取SMZ 10 mg和酚红20 mg后， 加入少量蒸馏水混悬，加入碳酸氢钠并微热使溶解（必要时滴加数 滴1 N NaOH液），得甲液。另将缓冲液的其它成分用蒸馏水溶解， 得乙液。将甲液缓缓加入乙液中，添加适量蒸馏水至1000 mL，即 得。 2. 酚红液(20 g/mL) 溶媒组成同Krebs-Ringer缓冲液。称取酚红20 mg。加入少量蒸馏水 混悬，加入碳酸氢钠并微热使溶解（必要时滴加数滴1 N NaOH液）， 得甲液。另将缓冲液的其它成分用蒸馏水溶解，得乙液。将甲液缓 缓加入乙液中，添加适量蒸馏水至1000 mL，即得。
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仪器与药品
（一）仪器 1. 微量输液器（蠕动泵）； 2. 752型紫外可见分光光度计； 3. 恒温水浴； 4. 红外灯； 5. 其它：搪瓷盘；10 mL离心管；移液管(50、5、2、1和0.5 mL)，100 mL锥 形瓶；烧杯(75和50 mL)；注射器(20和1 mL)；眼科剪刀；眼科镊子；普通中 号镊子；小剪刀；手术刀片等。