中药多糖的分子量及结构研究进展

中药多糖的分子量及结构研究进展

[09-09-09 15:35:00 ] 编辑：studa20 sm 【摘要】 目前中药多糖药理作用研究比较活跃，而其分子量和分 子量分布及化学结构确定成为进一步深入研究多糖特异性和构效关系以及药效 机理的基础。该文归纳总结了多糖分子量和分子量分布及化学结构研究的方 法。

【关键词】 中药多糖；分子量；分子量分布；化学结构；生物活性

Abstract:The study on p harmacological acti on of po lysaccharide of traditi onal Chin ese drug is more active at p rese nt, but the defi niti on of molecular weight and molecular weight distributi on and chemical con stitutio n has become the foun dati on of better study on sp ecificity and structure-fu nction relati onship and drug action mecha nism of po lysaccharide. The methods of study on molecular weight and molecular weight distributio n and chemical con stitutui on of po lysaccharide were reviewed in this paper.

Key words:Po lysaccharide of traditi onal Chin ese drug; weight;

Molecular weight distributi on;

Chemical con stituti on; Biological activity 多糖通常是由几百甚至几千个单糖组成的高分子均聚物或共聚物，其能被 水解为多个单糖。多糖存在于植物和动物之中，在高等植物和藻类中，它们是 细胞壁或细胞内部的组分；在细菌和真菌中，它们可能既是细胞组分，又是新 陈代谢的产物。多糖分子量很大，其性质也大大不同于单糖和低聚糖。现代研 究发现茯苓、黄芪、猪苓、枸杞、柴胡、人参、香菇、云芝、银耳、灵芝、冬 虫夏草等中药其生物活性成分之一是多糖，具有免疫调节、抗辐射、抗凝血、 降血糖、降血脂等功效，而它们的生理活性与多糖分子量和分子量分布及化学 结构有密切关系。

1 中药多糖分子量和分子量分布研究

中药多糖是生物大分子，属高分子化合物，其分子量的测定方法有绝对 法、当量法和相对法。表示其分子量大小的方式有重均分子量（ MW ，数均分 子量（Mr ），粘均分子量（M 耳）和Z 均分子量（MZ 。多糖大多数情况下Mn < M n V Mw < Mz 。多糖的分子量分布是指多糖中各种不同的分子量组分在总 量中所占的各自的分量，一般用分子量分布指数 a 表示，即重均分子量与数均 分子量的比值（a =Mw / Mn ） ， a 比值愈大，说明分子量分布愈宽，当 a = 1 时，是分子量均一体系。对于生物大分子多糖来说，其分子链的长短可以是不 同的，在衡量其分子量时，往往是一个平均数。重均分子量是按分子重量统计 平均的分子量，测定方法有光散射法、超速离心沉降速度法以及凝胶渗透色谱 法等。数均分子量就是依据总体分子的的个数，求出分子量来的，数均分子量 测定方法有端基分析法，气相渗透法，沸点升高冰点降低法，膜渗透压法，凝 胶渗透色谱法等。中药多糖主要测数均分子量和重均分子量。目前常用体积排 阻色谱法(包括凝胶渗透色谱法和高效凝胶渗透色谱法)测定多糖分子量和分 子量分布。2005年版《中国药典》n 部中收载了用高效凝胶渗透色谱法测定多 糖分子量及分子量分布方法。

作者：封聚强，赵

Molecular

1.1 凝胶渗透色谱法( GPC)

凝胶渗透色谱法它是根据在凝胶柱上不同分子量的多糖与洗脱体积成一定关系的特性，先用各种已知分子量的多糖制成标准曲线，然后由样品的洗脱体积从曲线中求得分子量。用凝胶过滤法测分子量，每次缓冲液及流速均需一致，否则会产生较大的误差，凝胶柱多采用软质凝胶，常用的商品型号为交联葡聚糖Sephadex，琼脂糖Sepharose，聚丙烯酰胺Blo-Gel P。A. E. A. Oliveiral等［1］用GPC法测定了刀豆属植物种子外皮多糖的重均分子量

(MW为8 830。孔庆胜等［2］采用凝胶过滤法测定南瓜多糖分子量，

SephadexG-200层析柱，硫酸-苯酚法检测，测得南瓜多糖的平均分子量为16 000。陈洪亮等［3］用葡聚糖凝胶过滤法测定芦荟多糖分子量，所用凝胶为Sephadex G-150，硫酸-苯酚法跟踪检测，结果分子量为45 400。盖英萍等

［4］将桑叶多糖粗提取物通过SephadexG-200柱层析，检测得到3种多糖组分，后经SephadexG-75柱层析测定3种多糖组分的相对分子量为41 977，21

220， 6 697。

1.2 高效凝胶渗透色谱法( HPGP)C

高效凝胶渗透色谱法它是根据在凝胶柱上不同分子量的多糖与洗脱保留时间(tR)成一定关系的特性，先用各种已知分子量的多糖制成标准曲线，然后由样品的保留时间(tR) 从曲线中求得分子量。高效凝胶渗透色谱法测定多糖分子量多采用示差折光检测器，示差折光检测器是一种通用型检测器，在液相色谱检测中多应用于对紫外-可见光没有吸收的化合物分析，只要被检测的化合物的折光指数与液相溶剂体系有差别即可被检测。高效凝胶渗透色谱中主要使用的是刚性凝胶柱，包括高交联度(>40%)苯乙烯-二乙烯基苯共聚物微球，常用的商品型号为TSK-Gel、Progel-TSKH-Type 柱等；多孔球形硅胶，常用的商品型

号为T5K- SW柱等；羟基化聚醚多孔微球，常用的商品型号为TSK -PW等。戴

敬［5］采用色谱柱为TSK-G4000PWXL(7.8 mm30.0 cm),示差折光检测器，分析测定了13 批样品，得到四维灵芝液中多糖组分高效凝胶色谱图谱、多糖组分平均分子量。郭辉［6］采用色谱OHPakSB805HQ(8 m材300 mm),示差折光器检测器，测得红毛五加多糖各组分的重均分子量。姜素琴［7］采用色谱柱为TSK-GELG3000PW〉测定云芝多糖的重均分子量、数均分子量及分子量分布指数。韩凤兰［8］应用SUGAR KS-80色谱柱，示差折光器检测器，测定宁夏黄芪多糖重均分子量、数均分子量及分子量分布指数。张红旭［9］用凝胶色谱分

析柱为Ohpak SB-805HQC(300 mm8 mm),示差折光器检测器，测定了香菇多糖的平均分子量。

2 中药多糖的化学结构研究

多糖与蛋白质等生物大分子一样也有明确的三维空间结构，可以用一、

二、三、四级结构来描述，其中二、三、四级结构属高级结构，多糖的一级结构是指多糖的单糖残基的组成、排列顺序、相邻单糖残基的连接方式、异头物的构型及糖链有无分支、分支的位置和长短等。多糖的二、三、四级结构是指多糖分子中主链的构象, 侧链的空间排布，单糖残基空间相对定位等。由于单糖的种类比构成蛋白质的氨基酸种类多，连接的位点也多，故具有多分支结构的杂多糖结构的确定比蛋白质困难得多。多糖与蛋白质一样，其活性不但与立体结构有关，也存在活性中心，而且还与它所结合的蛋白质、色素、金属离子等有关。目前中药多糖化学结构测定方法很多，主要有酸完全水解、部分水