第11章 弧菌科
《医学微生物学》第11章弧菌属练习题及答案
《医学微生物学》第11章弧菌属练习题及答案【知识要点】1.掌握：霍乱弧菌的生物学性状、致病性。
2.熟悉：（1）霍乱弧菌的微生物学检查法与防治原则。
（2）副溶血性弧菌的致病性3.了解：副溶血性弧菌诊断与防治。
【课程内容】第一节霍乱弧菌一、生物学性状（一）形态与染色（二）培养特性与生化反应（三）抗原构造与分型（四）抵抗力二、致病性与免疫性（一）致病物质（二）所致疾病（三）免疫性三、微生物学检查法（一）标本（二）直接镜检（三）分离培养（四）血清学诊断四、防治原则第二节副溶血性弧菌一、生物学性状（一）形态与染色（二）培养特性与生化反应（三）抗原结构与分型（四）抵抗力二、致病性（一）致病物质（二）所致疾病三、诊断与防治【应试习题】一、名词解释1．霍乱肠毒素（CT）2．O139群霍乱弧菌3．O1群霍乱弧菌4．非O1群霍乱弧菌5．神奈川现象二、填空题1．霍乱弧菌可分为O1群霍乱弧菌、_______和_______，前者包括_______和_______两个生物型。
2．霍乱弧菌耐_______不耐酸，其选择性增菌培养基是_______。
3．霍乱肠毒素的A1肽链作用于腺苷酸环化酶，使_______不断转化为_______，引起肠液大量分泌，导致严重腹泻。
4．霍乱肠毒素的毒性中心是_______，结合中心是_______，后者与肠上皮细胞的_______结合，使毒素分子变构。
5．霍乱弧菌根据O抗原不同可分为_______个血清群，其中_______和_______引起霍乱。
6．副溶血性弧菌是一种嗜_______性弧菌，能引起_______。
7．O1群霍乱弧菌有两个生物型分别是__________和__________。
三、单选题（一）A型题1．霍乱弧菌的主要致病物质不包括A．鞭毛 B．菌毛 C．毒素共调菌毛D．外毒素 E．内毒素2．关于霍乱弧菌的生物学性状，叙述错误的是A．革兰阴性弧菌，有单鞭毛B．霍乱弧菌耐碱不耐酸C．在霍乱病人粪便悬滴标本中，可见“鱼群样穿梭”现象D．E1Tor生物型霍乱弧菌抵抗力强，是因为有芽胞形成E．有菌毛和荚膜3．关于霍乱肠毒素，叙述正确的是A．A亚单位与细胞受体结合B．B亚单位进入细胞发挥毒性作用C．激活鸟苷酸环化酶，使cGMP升高D．其受体是糖蛋白 E．不耐热外毒素致病4．霍乱病人排泄物的特点A．脓血便 B．水样便 C．米泔水样便D．果酱样便 E．柏油样便5．关于霍乱的叙述错误的是A．属于烈性传染病B．人类是霍乱弧菌的唯一易感者C．病愈后，少数病人可长期带菌D．病后的免疫力短暂E．接种霍乱死菌苗可增强人群的特异性免疫力6．弧菌主要分布于A．空气 B．水 C．土壤 D．人体肠道 E．动物肠道7．关于ElTor生物型霍乱弧菌与古典生物型霍乱弧菌所致疾病的叙述，下列错误的是A．两者感染后，机体免疫力有强弱之别B．两者所致疾病的临床表现轻重不一C．人类是唯一易感者D．传染源均为病人或带菌者E．传播途径均为污染水源或食物经摄入8．对可疑病人的“米泔水”样大便作细菌培养，应接种于A．S．S琼脂平板B．巧克力色琼脂平板C．血清肉汤培养基D．血琼脂平板E．碱性蛋白胨水培养基9．副溶血性弧菌引起的食物中毒经哪一途径传播A．污染用水 B．病畜肉C．病鼠尿污染食物 D．苍蝇污染食物 E．海产品或盐渍制品10．一男性病人，43岁，头晕，腹胀，剧烈腹泻呈水样便伴呕吐l天。
弧菌科
共有36个种。有14个种与人类感染有关。其 中以霍乱弧菌和副溶血弧菌最为重要，它们 分别引起霍乱和食物中毒。
（一）临床意义
是烈性肠道传染病霍乱的病原体。有155血清 群；其中 0l 群有古典和 EI-Tor 两种生物型。 巳发生七次世界性霍乱流行，均由 01 群引起， 前六次为古典生物，第七次为 EI-Tor 生物型。 1992 年 10 月 起 分 离 到 非 01 群 霍 乱 弧 菌 ， 与 01 ～ 0138 群霍乱弧菌抗血清不凝集，产生的 肠毒素。经核苷酸序列同源性分析，属于同 一霍乱弧菌，将其命名为新的血清群0139。
(二)细菌特征1
1．形态结构 G-阴性，弧形或逗点状，在病人“米泔 水”样便中呈“鱼群”样排列，细菌一端有鞭毛， 呈“穿棱”样运动，有菌毛和性菌毛， 0139 群有荚 膜。 2．抗原成分 有不耐热H抗原和耐热的 O抗原。前者为 共同抗原，特异性低；后者具群特异性和型特异性， 是分群和分型的基础。根据 O 抗原的不同，现有 155 个血清群，其中 O1 群、 0139 群引起霍乱。出现 36kb 的新基因，替代原有的 01 群抗原基因，遗传学特征 和毒力基因与 O1群相似。其余02群—0138群引起人类 的胃肠炎，不引起霍乱流行，称为非 Ol 群霍乱弧菌。
第二节 气单胞、邻单胞菌属
(一 ) 分 类 有四个种：嗜水气单胞菌、豚鼠气 单胞菌、温和气单胞菌和杀鲑气单胞菌。 分 为 14 个 DNA 杂 交 群 (HGs),HG8 和 HG10 被证实为同一菌种，即维隆气单胞 菌分为两个生物型。
(二)临床意义
为水中的常居菌，引起肠道内的感染,是 夏季慢性腹泻的常见病原菌,其主要的致 病物质为溶血和细胞毒素等。肠道外感 染为皮肤和软组织的感染，菌血症通常 发生在免疫低下的人群,由嗜水气单胞菌 和维隆气单胞菌引起。也可引起眼部感 染，脑膜炎，肺炎，胸膜炎，骨髓炎， 关节炎，腹膜炎，胆囊炎，静脉炎和尿 道感染等。
第十一章水产动物
4、生长要求和培养特性 普通琼脂：菌落同杀鲑气单胞菌 TYE（弧菌培养基）：产生淡黄褐色菌落 血平板：β溶血 生长要求：最适28℃ PH7.2～7.6 盐度0～4％ 5、生化特性 甘露糖、赤藓糖醇、棉籽糖、果胶糖 ＋ MR、VP、氧化酶、接触酶 ＋ 6、防治：灭活疫苗，用于鱼类浸泡或注射，有70％ 保护力。
7、微生物学诊断： 涂片镜检：取鱼的血液，脏器涂片，G－ 分离培养：普通平板、血平板、TYE 生化试验
动物致病性试验：小鼠、豚鼠、家兔死亡， 脏器和接种部位的皮肤等出现坏死性病理 变化。 血清学检查：凝集反应、荧光抗体、琼脂 扩散
三、 链球菌属（Streptococcus）
（一）、分类
3、生化特性 几乎所有的糖都不利用，接触酶＋ 吲哚＋ 液化明胶，VP－ 4、抵抗力 淡水中能存活1d，在海水中200d以上，对 氯霉素、四环素、卡那霉素敏感，红霉素， 竹桃霉素不敏感。
七、屈挠杆菌属 （一）柱状屈挠杆菌：是鱼柱状病的病原 菌。为G－细长杆菌。 1、形态及染色特征 G－长杆菌，培养时间延长，呈不规则形态， 老龄培养物成圆球体，液体培养的菌体较 长，没有鞭毛，菌落黄绿色，大小不一， 扩散型，中央较厚，显色较深，向四周扩 散成颜色较浅的假根状。
CAMP试验不是特异的，C、F、G群中有些链球 菌也可产生 CAMP 现象。猪放线杆菌也有CAMP现象。 （了解）原因：无乳链球菌产生CAMP因子， 这种因子可接合于被葡萄球菌神经磷脂酶C 改变了的红细胞膜上，引起红C大量溶解。
微生物检查法
标本
脓汁，血液，剩余食物，呕吐物等
直接涂片镜检 分离培养 革兰阳性葡萄球菌 生长现象 生化反应 色素，溶血， 血浆凝固酶 发酵甘露醇 耐热核酸酶
4．动物致病性试验：小白鼠腹腔注射0.2~0.5ml 24h肉汤培 养物，24h－ 48h死亡。
检验微生物学 弧菌科
26
霍乱弧菌
致病物质
*霍乱肠毒素
A亚单位 活性亚单位 ctxA
B亚单位 ctxB
与受体结合，介导A亚单位进入细胞
1A+5B
27
霍乱弧菌
致病机理
B亚单位与小肠粘膜上皮细 胞GM1神经节苷脂受体结 合，介导A亚单位进入细胞
A亚单位裂解为A1和A2两条多 肽，A1亚单位发挥毒性作用
28
霍乱弧菌
致病机理 A1
庆大霉素琼脂平板（含亚碲酸钾）
同双洗
15
16
17
18
霍乱弧菌
生化反应
迟发酵
霍乱红
+
19
霍乱弧菌
抗原结构与分型
Ｏ抗原 耐热(100℃2h不被破坏) 特异性高，具有群特异性和型特异性， 是霍乱弧菌分群和分型的基础
Ｈ抗原 不耐热 弧菌属共同抗原，特异性低
20
霍乱弧菌
分群、型
O抗原是霍乱弧菌分群和型的基础
血清型 小川型（AB） 稻叶型（AC） 彦岛型（ABC）
A抗原 + + +
B抗原 + +
C抗原 + +
22
霍乱弧菌
生物分型：二个生物型
O1群根据生物学特性上的差异分为两个生物型
鉴别试验 50U/片多粘菌素B 鸡红细胞凝集试验 羊红细胞溶血试验
V-P Ⅳ组噬菌体裂解 Ⅴ组噬菌体裂解
古典生物型 S + -
14
霍乱弧菌 霍乱弧菌常用培养基
碱性蛋白胨水
增菌６-９ｈ，液体表面大量繁殖形成菌膜
碱性琼脂平板
圆形、较大、扁平、无色透明或半透明似水滴状菌落
硫代硫酸钠-枸櫞酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板（TCBS）
11章 弧菌
Higher Education Press Higher Education Press
霍乱病人
Higher Education Press Higher Education Press
三、免疫性
人类感染霍乱弧菌后，机体能获得牢固持久免疫力， 再感染少见。患者发病数月后，血液和肠腔中可出现特异
性抗肠毒素抗体及抗菌抗体。O1群获得的免疫对O139群
感染无交叉免疫。
Higher Education Press Higher Education Press
四、微生物学检查法
1. 标本 采集患者粪便、肛拭。 观察有无典型形 2. 直接镜检
态的霍乱弧菌。
Higher Education Press Higher Education Press
长。
引起食物中毒，尤其因食用未煮熟的海产品，但确切致 病机制尚未阐明。
Higher Education Press Higher Education Press
Higher Education Press Higher Education Press
二、致病性
1. 致病物质 （1）黏附因子：菌毛、鞭毛促进细菌黏附到小肠黏膜上
皮细胞。
（2）O139还具有多糖荚膜和特殊LPS毒性决定簇。 （3）霍乱肠毒素：由１个A亚单位、５个B亚单位组成。
Higher Education Press Higher Education Press
临床表现 上吐下泻
剧烈腹泻和呕吐（米泔水样腹泻物）， 大量水分和电解质丧失 ，低容量性休 克及心力不齐和肾衰竭（死亡率高达60%）
Higher Education Press Higher Education Press
弧菌科
不耐热的H抗原
为共同抗原
耐热的O抗原
具有群特异性和型特异性，是霍乱弧菌分群和 分型的基础
分型
根据O抗原的不同，现有155个血清群 O1群、O139群引起霍乱
O139血清群的抗原编码基因中出现了36kb的新基因 缺少了O1群高分子量的O抗原侧链 与O1群抗血清无交叉反应，但可与O22血清群和 O155血清群产生交叉反应，遗传学特征和毒力基因 与O1群相似。
培养特性
TCBS琼脂平板: 0.5~2.0mm大小，蔗糖不发酵而呈蓝绿色菌落 普通血平板: 不溶血或只产生α溶血 从腹泻患者中分离到的菌株95%以上在我妻（wagatsuma）琼脂上产生 β溶血现象，称为神奈川现象（Kanagawa phenomenon, KP） 嗜盐性选择平板: 较大，圆形，隆起，稍浑浊，半透明或不透 明，无粘性
（二）生物学特性
1. 形态
革兰阴性杆菌，有鞭毛（极单毛），无荚膜， 无芽胞
2. 抗原结构
耐热的菌体（O）抗原，具有群特征性，副溶 血性弧菌的O抗原有13种 鞭毛抗原，不耐热，无型特异性
3．培养特性
营养要求不高 在无盐培养基上不能生长，最适合生长的 氯化钠浓度为3.5%，超过8%不能生长 最适pH为7.7~8.0，但pH9.5时仍能生长， 最适生长温度为30~37℃ 在碱性胨水中经6~9h增菌可形成菌膜
用于霍乱弧菌的鉴别试验
霍乱红试验 霍乱弧菌有色氨酸酶和硝酸盐还原能力。 霍乱弧菌和其他弧菌均有此种反应 粘丝试验（String Test） 弧菌属细菌除副溶血性弧菌部分菌株外，均有此反应 O/129敏感试验 O/129 （2，4－Diamino－6，7－Diisopropylpteridine，2，4二氨基 －6，7－二异丙基喋啶） 10μg及150μg纸片周围出现任何大小的抑菌环均为敏感。 O1群和非O1群霍乱弧菌均敏感。 但已有对O/129耐药的菌株出现。用此试验作鉴定时，需特别谨 慎。需结合其他试验结果如耐盐生长试验等综合考虑
微生物学：C10 C11 弧菌属
注意事项： –尽量在使用抗菌药物前采集; –最好床边接种碱性蛋白胨水; –可将标本放入卡-布保存液中送检; –送检标本要严密包装,专人送检。
16Βιβλιοθήκη （二）病原学检查 标本直接涂片G染色镜检、悬滴法观察
运动情况和制动试验等快速诊断试验。 分离培养及鉴定 免疫学快速诊断：免疫胶体金试条 必要时做霍乱肠毒素测定
一、生物学特性
1. 形态与染色 • G-,菌体细长弯曲,呈S 形或海鸥形
•菌体一端或两端可有多 根带鞘鞭毛,运动活泼
•在胃黏液层下、胃黏膜 上皮表面、胃小凹及腺 腔内呈不均匀的集团状 分布。
2.培养特性和生化反应 •微需氧菌(需5%O2、10%CO2、85%N2培养) •最适生长T 37℃,相对湿度＞98%
碱性蛋白胨水
TCBS平板
菌膜
(四)抗原结构与分型 •H抗原：不耐热；无特异性。 •O抗原：耐热；具有群和型特异性。
• 依据O抗原可分为155个血清群 • O1群、O139群引起霍乱
又分为小川,稻叶和彦岛3种血清型 根据表型分为古典和埃托生物型
• O2~O138群:非O1群,引起胃肠炎。
(五)抵抗力
17
四、防治原则
预防： –控制传染源;切断传播途径;疫苗 预防接种(O1群霍乱死疫苗)
治疗： –补充液体和电解质+抗生素(氟哌酸,链
霉素,氯霉素,庆大霉素,复方SMZ等) –O139耐药性强于O1群
18
第十一章 螺杆菌属
幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)
与胃窦炎、十二指肠溃疡、胃溃疡, 胃腺癌和胃黏膜相关B细胞淋巴瘤 (MALT)的发生关系密切。
第11章 弧菌属
1
弧菌属（Vibrio）
细菌是一大群氧化酶阳性、单端 一根鞭毛、动力阳性的革兰阴性菌
2
第一节 霍 乱弧菌 (V.cholerae)
--------
霍
乱
烈性肠道传染病 国际检疫传染病 我国法定甲类传染病 俗称“二号病”
3
分类
19世纪初至今已引起7次世界性大流行。
1817～1923年的百余年间，在亚、非、欧、美、 澳等发生的六次世界性霍乱大流行——皆由古典生物 型引起。
舟状腹
“洗衣工手”
皮肤干皱、湿冷无弹性 26
血压下降
霍乱患儿
27
意识障碍
重型
腹泻次数一日20次以上，极度 烦躁甚至昏迷，皮肤弹性消失，眼窝 深凹，明显发绀，严重肌肉痉挛，脉 搏微弱而速，甚或无脉，血压下降或 测不到，尿量每日少于50ml或无尿， 脱水程度儿童相当于体重10%以上， 成人8%以上。
•
• • • • •
世界上第一次分离出结核病细菌；
世界上第一次发明了预防炭疽病的接种方法； 世界上第一次发现了霍乱弧菌； 世界上第一次提出了霍乱预防法； 世界上第一次发现了鼠蚤传播鼠疫的秘密； 世界上第一次发现了睡眠症是由采采蝇传播的。
8
• 制定科赫法则：（科赫为研究病原微生物制订了严格 准则,被称为科赫法则,包括:一种病原微生物必然存在 于患病动物体内,但不应出现在健康动物内;此病原微 生物可从患病动物分离得到纯培养物;将分离出的纯 培养物人工接种敏感动物时,必定出现该疾病所特有的 症状;从人工接种的动物可以再次分离出性状与原有 病原微生物相同的纯培养物。） • 创立了固体培养基划线分离纯种法。
28
29
及时经口或静脉补充水、电解质
第1112章弧菌属
2019/10/31
18
O1血清群
Classical biotype 6次霍乱大流行
El Tor
biotype
第7次霍乱大流行1961西 奈半岛 El Tor地区发现
O139群： 1992年印度分离，流行于南亚和东南亚
2019/10/31
20
2019/10/31
21
2019/10/31
22
“米泔水”样便及霍乱患 儿
2019/10/31
9
抵抗力
El Tor生物型和其它非O1群霍乱弧菌抵 抗力较古典生物型强
在有水环境中生存时间长 本菌不耐酸，不耐热
2019/10/31
10
致病性
鞭毛：有助于细菌穿过肠
粘膜表面粘液层而接近肠 壁上皮细胞
菌毛：是细菌定居于小肠 所必须的因子
霍乱肠毒素Choleragen 最强的致泻毒素 1A+5B结构 不耐热
2019/10/31
11
致病物质
涉及到多个基因：ToxR蛋白调控的ctxA、ctxB、 zot、ace、tcp，不受ToxR蛋白调控的hlyA、hap
霍乱肠毒素：由ctxA、ctxB编码，由１个A亚单位、 ５个B亚单位组成， B亚单位与GM１神经节苷脂受体结合
A亚单位进入细胞 Gs活化，cAMP升高 腹泻
抗原结构
O抗原、H抗原 O抗原分200多个血清群
其中O1群、O139群引起霍乱
2019/10/31
7
霍乱弧菌O1群血清型
血清型 01多克 01多克隆抗体 (抗原组分) 隆抗体 A B C
小川型
(AB) 稻叶型
(AC) 彦岛型
(ABC)
医学微生物学 第11章 弧菌属(Vibrio)
2020/12/13
3、抵抗力 • 霍乱弧菌对热、干燥、日光、消毒剂
酸均很敏感，耐碱而不耐酸
卡-布运送培养基 在水中存活时间长（1-3周），可越冬
2020/12/13
2020/12/13
(一)致 病 物 质
• 鞭毛、菌毛 • 霍乱肠毒素(cholera toxin,CT)
2020/12/13
预
习
第十三章 厌氧性细菌
2020/12/13
医学微生物学 第11章 弧菌属(Vibrio)
主要致病性弧菌
• 霍乱—— 霍乱弧菌O1群和O139群 • 食物中毒——副溶血弧菌 河弧菌、拟态弧菌、弗尼斯弧菌、霍利斯弧菌
2020/12/13
第一节 霍 乱弧菌 (V.cholerae)
-------- 霍 乱
烈性肠道传染病 国际检疫传染病 我国法定甲类传染病 俗称“二号病”
增菌(碱性蛋白胨水)、分离（TCBS） 快速诊断：免疫荧光、PCR等
首例病例要及时诊断，封锁疫区，上报疫情
2020/12/13
2020/12/13
• 一般性预防：加强水源和粪便管理 • 特异性预防：口服减毒疫苗，二价联合疫苗 • 治疗：及时补充液体和电解质
抗生素的使用减少外毒素产生
2020/12/13
• 1992年10月印度和孟加拉相继发生一种新型霍乱暴 发和较大流行，这型霍乱随后由亚洲传播，至2003年 ，WHO报告45个国家111575例病例——O139群引 起 新现病原体（emerging pathogen）
2020/12/13素 鸡红细胞凝集
Ⅳ组噬菌体裂解 Ⅴ组噬菌体裂解
弧菌科
+ 致病物质：
KP阳性株产生耐热直接溶血素（TDH）和耐 热相关溶血素（TRH）两种致病因子，都具有 细胞毒性 和 心脏毒性,与人或兔红细胞膜上的 神经节苷脂结合引起溶血，致病性与溶血能力 呈平行关系。
+ 所致疾病：
食入被副溶血性弧菌污染的海产品或盐渍食 品，引起食物中毒。潜伏期5—7２h，多数为 24小时左右，起病急骤，常有腹痛、腹泻、呕 吐、低热 ，粪便呈水样或糊状，较少为粘液血 便。
致病物质
１．霍乱肠毒素choleratoxin :
A亚单位 ctxA B亚单位 ctxB
活性亚单位
与受体介导A亚单位进入细胞
1A+5B
致病机理
A亚单位裂解为A1和A2两条多 肽，A1亚单位发挥毒性作用
A1 G蛋白 Gs 活化腺苷酸环化酶
ATP
cAMP
胞内cAMP↑，导致肠腺上 皮细胞分泌功能亢进，分泌 Na+、K+、HCO3-和水，大 量水和电解质在肠腔堆积， 引起剧烈腹泻与呕吐
标本
血标本
分离培养 （BAP、MAC）
增菌
氧化酶 TCBS生长 O/129 耐盐试验
+
+ +
+
+
+ ElTor型抵抗力较古典型强
+ 在水中存活时间长，1-3周 + 怕酸耐碱，常用消毒剂敏感
+ 对庆大霉素耐受
+ 形态变异
多次传代可失去典型形态而成为杆状 + 菌落变异 S型→R型 + 血清型别变异 + 毒力变异
致病物质： 霍乱肠毒素 导致小肠上皮细胞分泌功能亢进，分泌大量肠 液。 鞭毛、菌毛及其他毒力因子 所致疾病： + 经肠道传染，引起烈性肠道传染病－－霍乱，为 甲类传染病。 + 典型病人粪便呈“米泔水”样 + 病后可获得牢固免疫，以SIgA为主。 + 我国霍乱流行菌株以ElTor小川型为主。
医学微生物学 第11章 弧菌属(Vibrio)PPT
本章复习要点
➢ 概念：O139群霍乱弧菌(查资料)
➢ 简答题 1．为何霍乱病人出现剧烈米泔水样腹泻？
2. 某地区发现首例疑似霍乱患者，结合你的专业谈谈 应需开展哪些工作？
➢ 拓展题 为何霍乱和ETEC引起的婴儿腹泻都表现为水样腹泻？
为何细菌性痢疾和EIEC引起的较大儿童腹泻都表现为 粘液脓血性腹泻？
第11章 弧菌属(Vibrio)
一群菌体短小，弯曲成弧形的G-菌
1883年，Koc1群和O139群 ➢ 食物中毒——副溶血弧菌 河弧菌、拟态弧菌、弗尼斯弧菌、霍利斯弧菌
第一节 霍 乱弧菌 (V.cholerae)
-------- 霍 乱
烈性肠道传染病 国际检疫传染病 我国法定甲类传染病 俗称“二号病”
预
习
第十三章 厌氧性细菌
古典生物型 【S讲述】 + -
ElTor生物型 + + R + +
一、生 物 学 性 状
1.形态染色〔初步诊断价值〕 革兰染色阴性
呈逗点状或弧状 有单根鞭毛，运动活泼
悬滴观察鱼群穿梭样 流星状
有菌毛 荚膜〔O139群) 无芽胞
2、培养特性
➢ 耐碱不耐酸 ➢ 碱性蛋白胨水(pH8.8～
9.2) ➢ TCBS培养基〔黄色菌落〕
革兰染色、悬滴法观察 ➢ 分离培养(确诊)
增菌(碱性蛋白胨水)、分离（TCBS） 快速诊断：免疫荧光、PCR等
首例病例要及时诊断，封锁疫区，上报疫情
四、防 治 原 则
➢ 一般性预防：加强水源和粪便管理 ➢ 特异性预防：口服减毒疫苗，二价联合疫苗 ➢ 治疗：及时补充液体和电解质
抗生素的使用减少外毒素产生
➢ 1992年10月印度和孟加拉相继发生一种新型霍乱暴 发和较大流行，这型霍乱随后由亚洲传播，至2003年 ，WHO报告45个国家111575例病例——O139群引 起 新现病原体（emerging pathogen）
医学微生物学课件 第十章 弧菌属 第十一章 螺杆菌属
直接镜检
涂片见G-性弧菌，鱼群状排列 悬滴法观察细菌呈穿梭样运动
分离培养
碱性蛋白胨水增菌 选择培养基为TCBS 玻片凝集反应
四、防治原则
控制传染源 隔离治疗、疫区封锁 切断传播途径 改善社区环境，加强水源管理 提高易感者免疫力 疫苗预防接种：死疫苗
B亚单位-全菌灭活口服疫苗 治疗霍乱的关键
及时补充液体和电解质
流行病学概况
1992年10月印度和孟加拉相继发生一 种新型霍乱暴发和较大流行，这型霍乱随 后在亚洲传播，至今已有印度、巴基斯坦、 孟加拉、中国、泰国、马来西亚、缅甸、 尼泊尔、新加坡、斯里兰卡、香港等国家 和地区报告发生O139霍乱病例。2003年， WHO报告45个国家111575例病例——O139 群霍乱弧菌引起。
第十章 弧菌属
第一节 霍乱弧菌
流行病学概况
19世纪初至今已引起7次世界性大流行。
1817～1923年的百余年间，在亚、非、欧、 美、澳等发生的六次世界性霍乱大流行——皆 由O1群的古典生物型引起。
1961年开始的第七次世界性霍乱大流行至 今已波及五大洲140个以上的国家和地区，报告 病例数在400万以上，目前尚无停息的迹象。它 们由O1群的埃尔托(El Tor)生物型引起。
第二节 副溶血性弧菌
• 嗜盐性弧菌 • 海产品中，食用污染食物引起食物中毒 • 沿海较常见
第十一章 螺杆菌属 幽门螺杆菌（H. pylori）
生物学特性
• 螺旋形弯曲 • 在胃粘膜粘液层中常呈鱼群样排列 • 微需氧菌，营养要求高，需血液或血清 • 脲酶、氧化酶、过氧化氢酶丰富 • 与胃窦炎、十二指肠溃疡、胃溃疡、胃腺癌、胃
• 临床表现： 上吐下泻：剧烈腹泻和呕吐（米泔水样腹泻物）， 大量水分和电解质丧失 低容量性休克和肾衰竭（死亡率高达60%）
第11章弧菌科
第11、12章弧菌属与螺杆菌属一、名词解释1、弧菌属2、 Cholera entero toxin二、填空题1、霍乱弧菌可分为O-1群霍乱弧菌、___________和__________，前者包括________和________两个生物型。
2、霍乱弧菌耐_________不耐酸，其选择性增菌培养基是_____________。
3、霍乱肠毒素的A1肤链作用于腺苷酸环化酶，使________不断转化为_________，引起肠液大量________，导致严重腹泻。
4、霍乱肠毒素的毒性中心是___________，结合中心是_________，后者与肠上皮细胞的________结合使毒素分子变构。
5、霍乱弧菌有耐热的____________抗原和不耐热的___________抗原。
6、霍乱弧菌感染后主要抗体是____________________。
7、霍乱弧菌根据O抗原不同可分为_________个血清群，其中_________和_________引起霍乱。
8、副溶血性弧菌是一种嗜________性弧菌，能引起________，病后免疫力__________。
9、空肠弯曲菌广泛存在于禽类__________，人类接触后主要引起_______________。
10、幽门螺杆菌形态似______状，目前认为与人类的_______、________等疾病有关。
三、选择题A型题1、霍乱弧菌的主要致病物质不包括A、鞭毛B、菌毛C、毒素共调菌毛D、外毒素E、内毒素2、关于霍乱弧菌的生物学性状，叙述错误的是A、革兰阴性弧菌，有单鞭毛B、霍乱弧菌耐碱不耐酸C、在霍乱病人粪便悬滴标本中，可见“鱼群样穿梭”现象D、ELTor真生物型霍乱弧菌抵抗力强，是因为有芽胞形成E、有菌毛和荚膜3、关于霍乱肠毒素，叙述正确的是A、A亚单位与细胞受体结合B、B亚单位迸入细胞发挥毒性作用C、激活鸟苷酸环化酶，使cGMP升高D、其受体是糖蛋白E、不耐热外毒素4、霍乱病人排泄物的特点A、脓血便B、水样便C、米泔水样便D、果酱样便E、柏油样便5、关于霍乱，错误的是A、属于烈性传染病B、人类是霍乱弧菌的唯一易感者C、病愈后，少数病人可长期带菌D、病后的免疫力短暂E、接种霍乱死菌苗可增强人群的特异性免疫力6、弧菌主要分布于A、空气B、水C、土壤D、人体肠道E、动物体肠道7、关于ELTor型霍乱弧菌与古典型霍乱弧菌所致疾病的叙述，下列错误的是A、两者感染后，机体免疫力有强弱之别B、两者所致疾病的临床表现轻重不一C、人类是唯一易感者D、传染源均为病人或带菌者E、传播途径均为污染水源或经食物摄人8、O139群霍乱弧菌与01群霍乱弧菌的不同之处是A、形态染色性B、产生肠毒素C、成人病例比例高D、在TCBS琼脂培养基呈黄色菌落E、所致临床表现9、副溶血性弧菌引起的食物中毒经什么传播A、污染用水B、病畜肉C、病鼠尿污染食物D、苍蝇污染食物E、海产品或盐脯制品10、一男性病人，43岁，头晕，腹胀，剧烈腹泻水样便伴呕吐1天。
弧菌科
弧菌科[单项选择题]1、我国沿海地区最常见的一种食物中毒由何种菌所致（）.A.沙门菌B.副溶血弧菌C.肉毒梭菌D.金黄色葡萄球菌E.产气荚膜梭菌参考答案：B参考解析：副溶血弧菌是一种嗜盐性弧菌，是我国沿海地区最常见的食物中毒病原菌。
[单项选择题]2、检查副溶血性弧菌致病力的试验是（）.A.肥达试验B.锡克试验C.OT试验D.抗"O"试验E.神奈川试验参考答案：E参考解析：神奈川试验常用于鉴别致病性和非致病性副溶血性弧菌。
[单项选择题]3、男性病人，43岁，头晕，腹胀，剧烈腹泻水样便伴呕吐1天。
无腹痛，无里急后重。
查，疲倦面容，皮肤、唇舌干燥，眼窝内陷。
血压80/60mmHg。
应首先进行如下何种检查来进行初步诊断（）.A.便常规B.尿常规C.取粪便标本立即进行直接悬滴检查D.取耳血立即进行直接悬滴检查E.碱性蛋白胨水接种参考答案：C参考解析：初步怀疑是霍乱弧菌感染，一般取粪便标本立即进行直接悬滴检查。
[单项选择题]4、关于弧菌的叙述，下列哪项是错误的（）.A.呈革兰阴性B.耐碱不耐酸C.一端具有单鞭毛而运动活泼D.菌体短小，弯曲成弧形或逗点形E.营养要求高，仅在含葡萄糖的培养基上生长良好参考答案：E参考解析：许多致病性弧菌可在血平板或普通琼脂平板上生长，在肠道选择性培养基上许多致病性弧菌可以生长，形成糖类不发酵的菌落。
[单项选择题]5、有关副溶血性弧菌错误的是（）.A.引起食物中毒B.嗜盐耐碱C.在TCBS平板上菌落为黄色D.在无盐环境中不生长E.食入未煮熟的海产品而感染参考答案：C参考解析：副溶血弧菌在TCBS琼脂上不发酵蔗糖，菌落绿色。
[单项选择题]6、TCBS琼脂中所含的鉴别用糖为（）.A.蔗糖B.葡萄糖C.麦芽糖D.乳糖E.以上均否参考答案：A参考解析：霍乱弧菌分离培养常用的选择性培养基有硫代硫酸钠-枸橼酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板。
[单项选择题]7、可引起呕吐、腹泻等消化道症状的是（）.A.霍乱弧菌B.副溶血性弧菌C.以上两者均是D.以上两者均不是参考答案：C参考解析：霍乱弧菌怕酸而耐碱，在正常胃酸中仅能生存4分钟，可在无盐培养基上生长，但在高于6%氯化钠的培养基上不能生长。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
1 2 3
弧菌属
气单胞菌属
邻单胞菌属
发光杆菌属
4
第一节 弧菌属
弧菌属共有36个种，有12个种与人类感染有关 霍乱弧菌 副溶血弧菌 其他
第一节 弧菌属
霍乱弧菌
O1群霍乱弧菌 O139群霍乱弧菌 非O1群霍乱弧菌
副溶血性弧菌 其他：霍利斯弧菌、拟态弧菌、河弧菌、创伤弧 菌、溶藻弧菌、少女弧菌、麦氏弧菌、辛辛那提 弧菌、弗尼斯弧菌、卡佳丽弧菌
第一节 霍乱弧菌——临床意义
其他致病物质 El-Tor生物型能产生不耐热溶血素和血凝素 不耐热溶血素 具有溶血活性、细胞毒、心脏毒和致死毒性 El-Tor生物型的溶血特性可发生变异 血凝素 能凝集鸡红细胞 能被D-甘露糖抑制
第一节 霍乱弧菌——生物学特性
形态 新从患者标本中分离出的细菌革兰染色阴性，弧 形或逗点状 在患者“米泔水”样便中，可呈头尾相接的“鱼 群”样排列 菌体一端有鞭毛，悬滴观察时呈“穿梭”样运动， 可被相应的多价血清抑制——制动试验 有普通菌毛和性菌毛 O139群有荚膜
第一节 霍乱弧菌——生物学特性
O1群霍乱弧菌的O抗原 由A、B、C三种抗原因子组成，通过不同组合可 形成三个型别 AB——小川型(异型) AC——稻叶型(原型) ABC——彦岛型(中间型) 彦岛型的抗原性不稳定，各型之间可以相互转换。 以小川型和稻叶型为常见流行型别
第一节 霍乱弧菌——生物学特性
第一节 副溶血性弧菌——临床意义
致病因素 菌毛、鞭毛 毒素 耐热直接溶血素(TDH) 耐热直接溶血素相关溶血素(TRH)
第一节 副溶血性弧菌——临床意义
耐热直接溶血素 能耐受100℃不被破坏。 溶血毒性，对人和兔红细胞的溶血性较高，对马 红细胞不溶血 细胞毒性，对多种培养细胞如有细胞毒性 心脏毒性，可导致心电图异常表现如ST-T改变、 房室传导阻滞、室颤或心跳骤停及心肌损伤 肠毒性，使肠粘膜的毛细血管通透性增高，向肠 腔分泌亢进
第一节 霍乱弧菌——临床意义
霍乱毒素(CT)，对热不稳定，由A和B两个亚单位 A亚单在成熟过程中由蛋白水解酶切割成A1和A2 B亚单位与肠粘膜上皮细胞膜上的GM1受体结合 A1为毒素活性单位，通过B亚单位结合细胞膜上 GM1受体的通道或“内吞”进入细胞内，激活腺 苷酸环化酶，使细胞内cAMP大量增加。快速向 细胞外分泌水和电解质，使肠腔内水、钠潴留， 导致呕吐和腹泻，机体陷于缺水和电解质、酸碱 平衡紊乱状态。
第一节 霍乱弧菌——生物学特性
抗原成分 不耐热的H抗原，为共同抗原 耐热的O抗原，具有群特异性和型特异性，是霍 乱弧菌分群和分型的基础。
第一节 霍乱弧菌——生物学特性
分型 根据O抗原的不同，现有155个血清群 O1群、O139群引起霍乱 O2群~O138群血清群 可引起人类的胃肠炎，不引起霍乱流行，称之 为非O1群霍乱弧菌。 以往也称不凝集弧菌或非霍乱弧菌
第一节 副溶血性弧菌——生物学特性
形态 革兰阴性杆菌，有鞭毛（极单毛），无荚膜，无 芽胞 抗原结构 耐热的菌体（O）抗原，具有群特征性，副溶血 性弧菌的O抗原有13种 鞭毛抗原，不耐热，无型特异性
第一节 副溶血性弧菌——生物学特性
培养特性 营养要求不高 在无盐培养基上不能生长，最适合生长的氯化钠 浓度为3.5%，超过8%不能生长 最适pH为7.7~8.0，但pH9.5时仍能生长，最适生 长温度为30~37℃ 在碱性胨水中经6~9h增菌可形成菌膜 TCBS琼脂平板: 0.5~2.0mm大小，蔗糖不发酵而 呈蓝绿色菌落
第一节 霍乱弧菌——微生物检验学检验
动力和制动试验 直接取“米泔水”样便，制成悬滴(或压滴)标 本后，观察有无呈穿梭样运动的细菌。 在悬液中加入1滴不含防腐剂的霍乱多价诊断 血清，可见最初呈穿梭状运动的细菌停止运动 并发生凝集，则为制动试验阳性。可推定为霍 乱弧菌存在
第一节 霍乱弧菌——微生物检验学检验
第一节 霍乱弧菌——微生物检验学检验
第一节 霍乱弧菌——微生物检验学检验
标本采集和运送 霍乱是烈性传染病，凡在流行季节和地区有腹泻 症状的患者均应快速准确作出病原学诊断 在发病早期，尽量在使用抗菌药物之前采集标本 取患者“米泔水”样便，亦可采取呕吐物或尸体 肠内容物，或采取肛门拭子
第一节 霍乱弧菌——微生物检验学检验
第一节 霍乱弧菌——微生物检验学检验
鉴别试验 霍乱红试验（亚硝酸靛基质） 霍乱弧菌有色氨酸酶和硝酸盐还原能力。 霍乱弧菌和其他弧菌均有此种反应，非特异性 粘丝试验 弧菌属细菌除副溶血性弧菌部分菌株外，均有 此反应 耐盐培养试验
第一节 霍乱弧菌——微生物检验学检验
鉴别试验 O/129敏感试验 O/129 ：2,4二氨基-6,7-二异丙基喋啶 10ug及150ug纸片周围出现任何大小的抑菌环 均为敏感。 O1群和非O1群霍乱弧菌均敏感， O139群耐药
第一节 霍乱弧菌——生物学特性
特 羊红细胞溶血 鸡红细胞凝集 V-P 试验 多粘菌素B敏感试验 征 古典生物型 — — — + El-Tor生物型 D + + —
Ⅳ组噬菌体裂解
Ⅴ组噬菌体裂解
+
—
—
+
第一节霍乱弧菌——生物学特性
抵抗力强 可在河水、井水及海水中存活20天左右 对热、干燥和光敏感；100℃1~2min即死亡 怕酸耐碱，在正常胃酸中仅能生存4min 对常用消毒剂敏感，0.5ppm氯15min能杀死 对庆大霉素耐药
第一节 霍乱弧菌——临床意义
O1群 古典生物型(CVC)——尚未灭绝 埃尔托生物型(EVC)——仍在流行 O139群(BVC)——新出现
第一节 霍乱弧菌——临床意义
致病因素 鞭毛 有助与细菌运动穿过肠粘膜表层进入肠上皮 细胞内 菌毛 有助于细菌粘附定植 霍乱毒素(CT) 目前已知的致泻毒素中，致泻效果 最强烈的
第一节 霍乱弧菌——微生物检验学检验
在TCBS上形成黄色，4号琼脂或庆大霉素琼脂平 板上呈灰褐色中心的菌落，均为可疑菌落 用O1群和O139群霍乱弧菌多价和单价抗血清进 行凝集 结合菌落特征和菌体形态，作出初步报告
第一节 霍乱弧菌——微生物检验学检验
鉴定 将血清凝集确定的菌落进一步纯培养，依据全面 生化反应，血清学分群及分型进行最后鉴定 符合霍乱弧菌的菌株尚需区分古典生物型和ElTor生物型 对病原性弧菌的主要鉴定试验为赖氨酸脱羧酶、 鸟氨酸脱羧酶和精氨酸双水解酶 霍乱弧菌和拟态弧菌可在无盐普通肉汤和普通琼 脂平板上生长，而其他弧菌则不能
第一节 霍乱弧菌——临床意义
霍乱弧菌是甲类传染病―霍乱的病原体 目前有155个血清群，其中O1群有古典和埃尔托 两种生物型 在自然情况下，人类是霍乱弧菌的易感者 自1817年以来，已发生七次世界性的霍乱大流行， 均由霍乱弧菌的O1群引起，前六次为霍乱弧菌的 古典生物型，第七次为埃尔托生物型 自1992年10月起分离到新的血清群O139，现在 世界各地均有流行或散发病例报告
标本的采集和运送 标本应避免接触消毒液 采取的标本最好就地接种碱性胨水增菌 不能及时接种者可用棉签挑取标本或将肛门拭子 直接插入卡－布运送培养基中 送检标本装在密封，不易碎的容器中，置室温由 专人输送 甘油盐水保存液不适合于弧菌的运送
第一节 霍乱弧菌——微生物检验学检验
标本直接检查 涂片染色镜检 观察有无“鱼群”样排列的革兰阴 性弧菌
第一节 副溶血性弧菌——临床意义
具有嗜盐性 存在于近海的海水、海底的沉淀物、鱼虾类和贝 壳及盐渍加工的海产品中 主要引起食物中毒和急性腹泻 是我国沿海地区及海岛食物中毒的最常见病原菌 胃肠炎临床表现有：恶心、呕吐、腹痛、低热、 寒战等。腹泻呈水样便，偶尔血性，恢复较快， 病程2~3天，通常为自限性 还可引起伤口感染和菌血症
其他培养特性 在血琼脂平板上菌落较大, El-Tor生物型可形成β 溶血环 在含明胶的培养基上O139群霍乱弧菌可形成不透 明的浅灰色菌落，周围有一圈不透明带，此菌落 涂片观察可发现荚膜
第一节 霍乱弧菌——生物学特性
生化反应 氧化酶阳性，发酵蔗糖，动力阳性，赖氨酸脱羧 酶阳性、鸟氨酸脱羧酶阳性，精氨酸双水解酶阴 性。 O/129敏感试验
第十一章
弧菌科
第十一章 弧菌科
一群菌体短小、弯曲成弧形或直杆状的革兰阴性 细菌 兼性厌氧，发酵葡萄糖 许多菌株生长需要2%~3%氯化钠 大多数菌株氧化酶阳性 具有一端单一鞭毛、运动迅速 弧菌科细菌广泛分布于自然界，以水中最为多见。 其中有一些种对人类致病。
第十一章 弧菌科
第一节 霍乱弧菌——生物学特性
常用的选择性培养基 TCBS 琼脂平板，霍乱弧菌发酵蔗糖产酸，菌落 呈黄色 含亚碲酸钾的选择平板有4号琼脂、庆大霉素琼脂， 将培养基中的碲离子还原成元素碲，形成灰褐色 菌落中心 可以在无盐培养基上生长，在含有高于6%氯化钠 的培养基上不能生长
第一节 霍乱弧菌——生物学特性
第一节 霍乱弧菌——临床意义
致病机制 正常情况下，胃液中的胃酸可消灭食物中的霍乱 弧菌，但在胃酸降低时，或摄入大量的霍乱弧菌 时，霍乱弧菌可以从胃进入肠道。进入肠道的霍 乱弧菌通过鞭毛运动穿过肠粘膜表面的粘液层， 通过菌毛定植于肠粘膜上皮细胞表面繁殖，产生 由染色体介导的对热不稳定的霍乱毒素（CT）而 致病。 O1群和O139群的致病机制和过程是一样的
第一节 霍乱弧菌——临床意义
霍乱弧菌是烈性肠道传染病，法定甲类传染病― 霍乱的病原体
第一节 霍乱弧菌——临床意义
传染源 病人或无症状的感染者 传播途径 粪口途径，摄入污染的水源、食物；人 与人直接接触不常见。
第一节 霍乱弧菌——临床意义
病程 前驱期→吐泻期→脱水期（霍乱面容）→循 环衰竭→恢复期