第二章蛋白质化学2

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生物化学02第二章 多肽与蛋白质

生物化学02第二章 多肽与蛋白质

Glu-Cys-Gly SH
Glu-Cys-Gly S S
Glu-Cys-Gly
谷胱甘肽的生理功用:
• 解毒作用:与毒物或药物结合,消除其 毒性作用;生物转化。
• 参与氧化还原反应:作为重要的还原剂, 参与体内多种氧化还原反应;
• 保护巯基酶的活性:使巯基酶的活性基 团-SH维持还原状态;
• 维持红细胞膜结构的稳定:消除氧化剂 对红细胞膜结构的破坏作用。
锌指结构是一个常见的模体。
由一个α-螺旋和两个反向平行的β-折迭组 成,形似手指。
N-端两个半胱氨酸,C-端两个组氨酸, 此四个氨基酸残基在空间上构成一个洞穴, 容纳一个锌,具结合锌离子功能。
含锌指结构的蛋白质都可与DNA或RNA 结合。
锌指结构 (折迭-折迭模序)
亮氨酸拉链结构:
• 见于真核生物DNA结合蛋白质的C端,与 癌基因表达调控有关。
第二章
多肽与蛋白质
Peptides and Proteins
1833年,Payen和Persoz分离出淀粉酶。 1864年,Hoppe-Seyler从血液分离出血红蛋白,
并将其制成结晶。 19世纪末,Fischer证明蛋白质是由氨基酸组成的,
并将氨基酸合成了多种短肽 。 1938年,德国化学家Gerardus J. Mulder引用
2. 蛋白质具有重要的生物学功能
1)作为生物催化剂(酶) 2)代谢调节作用 3)免疫保护作用 4)物质的转运和存储 5)运动与支持作用 6)参与细胞间信息传递
3. 氧化供能
第一节
肽和蛋白质的一级结构
Primary Structure of Peptides and Proteins
一、肽和蛋白质是由氨基酸组成的多聚体

生物化学 第2章 蛋白质化学

生物化学 第2章 蛋白质化学

第二章蛋白质化学一、填空题:1、不同蛋白质的含量颇为相近,平均含量为____%。

2、蛋白质中存在种氨基酸,除了氨基酸外,其余氨基酸的α-碳原子上都有一个自由的基及一个自由的基。

3、能形成二硫键的氨基酸是,分子量最小的氨基酸是。

4、蛋白质具有两性电离性质,大多数在酸性溶液中带电荷,在碱性溶液中带负电荷。

当蛋白质处在某一pH值溶液中时,它所带的正负电荷数相等,此时的蛋白质成为,该溶液的pH值称为蛋白质的________。

5、蛋白质的一级结构是指在蛋白质多肽链中的。

6、在蛋白质分子中,一个氨基酸的α碳原子上的与另一个氨基酸α碳原子上的_______脱去一分子水形成的键叫,它是蛋白质分子中的基本结构键。

7、一个四肽Lys-Val-His-Arg在pH=7溶液中进行电泳,它将向极方向移动。

8、蛋白质在280nm处有最大吸收峰,这是由于蛋白质分子中存在、和残基的缘故。

9、α—螺旋和β—折叠结构属于蛋白质的级结构,稳定其结构的作用力是。

10、丝氨酸、苏氨酸及酪氨酸的极性是由侧链基团的基提供的;天冬酰胺和谷氨酰胺的极性是由其引起的,而半胱氨酸的极性则是因为含的缘故。

11、蛋白质颗粒表面的和是蛋白质亲水胶体稳定的两个因素。

12、蛋白质变性主要是因为破坏了维持和稳定其空间构象的各种键,使天然蛋白质原有的与性质改变。

13、.蛋白质分子二级结构常见的两种类型是和。

14、天然蛋白质分子中的α—螺旋都属于手螺旋。

15、已知下列肽段:(1)-Ala-Phe-Tyr-Ala-Arg-Ser-Glu—(2)-Lys-Glu-Arg-Gln-His-Ala-Ala—(3)-Gln-Cys-Leu-Ala-Ser-Cys-Ala—(4)-Gly-Leu-Ser-Pro-Ala-Phe-Val—其中在pH=7条件下向负极移动快的多肽是;在280nm有最大光吸收的是;可能形成二硫键桥的是;α—螺旋中断的是。

二、选择题(只有一个最佳答案):1、在寡聚蛋白质中,亚基间的立体排布、相互作用以及接触部位间的空间结构称之谓( )A、三级结构B、缔合现象C、四级结构D、变构现象2、形成稳定的肽链空间结构,非常重要的一点是肽键中的四个原子以及和它相邻的两个α-碳原子处于( )A、不断绕动状态B、可以相对自由旋转C、同一平面D、随不同外界环境而变化的状态3、甘氨酸的解离常数是pK1=2.34, pK2=9.60,它的等电点(pI)是( )A、7.26B、5.97C、7.14D、10.774、肽链中的肽键是:( )A、顺式结构B、顺式和反式共存C、反式结构5、维持蛋白质二级结构稳定的主要因素是:( )A、静电作用力B、氢键C、疏水键D、范德华作用力6、蛋白质变性是由于()A、一级结构改变B、空间构象破坏C、辅基脱落D、蛋白质水解7、必需氨基酸是对()而言的。

动物生物化学 第二章 蛋白质

动物生物化学 第二章  蛋白质
肽链内形成氢键,氢键的取向 几乎与轴平行,第一个氨基酸 残基的酰胺基团的-CO基与第 四个氨基酸残基酰胺基团的NH基形成氢键(包含13个原 子)。
蛋白质分子为右手-螺旋。
(1)-螺旋
-螺旋
表 几种螺旋结构参数
结构类型 残基/圈 1个氢键环的原子数 每个残基高度(nm) Φ Ψ
310螺旋 3.0
位 置
及顺序分析,
的 然后同其它方法分析的肽段进行比较,
确 确定二硫键的位置。

2.4 蛋白质的高级结构
2.4.1 肽单位平面结构和二面角
O
O
O
H
H
H
H2N
C
C
N H
C
C
N H
C
C
R
R
R
N端
肽单位
肽单位
O
H
H
NH C C N C COOH
H
R
R
C端
肽单位: 主肽链中的重复单位
肽键平面—由于肽键的双键性质,使得形成肽键的N、C原子以及它们相 连的四个原子形成一个平面,这个平面就叫肽键平面。
蛋白质构件分子是氨基酸。 氨基酸是蛋白质的基本单位。 自然界存在的氨基酸有300多 种,但合成蛋白质的氨基酸只 有20种,都属于α-氨基酸,其 中除甘氨酸外,其余都是L-α氨基酸。
蛋白质分子中的20种 氨基酸在DNA分子中有它 们特异的遗传密码相对应,
因而也称编码氨基酸 (Coding amino acid)。 新近发现的硒代半胱氨酸 (SeCys)也是一种编码 氨基酸。
由 两 个 氨 基 酸 组 成 的 肽 称 为 二 肽 , 由 多 个 氨 基酸组成的肽则称为多肽。因为多肽呈链状, 所以又称为多肽链。组成多肽的氨基酸单元称 为氨基酸残基。

生物化学 第二章 蛋白质化学 上

生物化学 第二章 蛋白质化学 上

一 氨基酸的一般结构特征
氨基酸的基本结构特征:
•酸性:
•碱性:
•手性(旋光性):
•特异性
蛋白质是由20种L-型 的α-氨基酸构成。
非极性氨基酸(6个)
极性不带电荷(6个)
芳香族(3个)
带电荷(5个)
二 氨基酸的分类和结构 1.按照氨基酸侧链的极性分类 非极性氨基酸:Ala, Val, Leu, Ile, Met, Phe, Trp, Pro共八种 极性不带电荷:Gly, Ser, Thr, Cys, Asn, Gln, Tyr共七种 带正电荷:Arg, Lys, His(碱性氨基酸) 带负电荷:Asp, Glu(酸性氨基酸)
胶联剂、可制作金属涂料和车辆、电器用高档氨基树脂装饰漆。
第二节 蛋白质的组成单位-氨基酸
发现:
法国化学家H Braconnot 纤维素酸热解---葡萄糖(单体) 明胶酸热解----含氮化合物(甘氨酸) 肌肉酸水解---含氮化合物(含氨基和羧基)---氨基酸 蛋白质的基本组成单位是(***)氨基酸(amino acid,AA)
3 根据组成分类 简单蛋白质 分子中只有氨基酸 结合蛋白质 简单蛋白+非蛋白成分,
也称复合蛋白质(conjugated protein)或全蛋白质(holoprotein) 结合蛋白根据结合的非蛋白成分进一步分为:
① 色蛋白(chromoprotein)色素+Pr
血红素蛋白;细胞色素类(蛋白);叶绿素蛋白;血蓝蛋白;黄 素蛋白
Tyr、Phe
Trp
N
红色 胍基 Arg
酚试剂反应 (Folin-Cioculteu 反应)
Ellman反应
碱性 CuSO4 及磷 钨酸-钼酸
二硫硝基苯甲酸 DTNB

生物化学第二章蛋白质知识点归纳

生物化学第二章蛋白质知识点归纳

一、概述
结合蛋白:由简单蛋白与其它非蛋白成分结合而成。按辅基种类分为: 1 核蛋白(nucleoprotein ) 核酸 2 脂蛋白(lipoprotein ) 脂质 3 糖蛋白(glycoprotein) 糖 4 磷蛋白(phosphoprotein) 磷酸基 5 血红素蛋白(hemoprotein ) 血红素 6 黄素蛋白(flavoprotein ) FAD 7 金属蛋白(metallaprotein ) 金属
据R基团 极性分类
例外:
COO+α
H3N C H
R
Gly —— 没有手性
构型与旋光方向没有直接对应关系,L-α-氨基酸有的为左旋,有的为右旋, 即使同一种L-α-氨基酸,在不同溶剂也会有不同的旋光度或不同的旋光方向。
二十种常见蛋白质氨基酸的分类、结构及三字符号
据R基团化学 结构分类
脂肪族AA(烃链、含羟基或巯基、羧基、碱性基团) 杂环AA(His、Pro) 芳香族AA(Phe、Tyr、Trp)
6 结构蛋白(structural protein)
7 防御蛋白(defense protein) 8 异常蛋白 (exotic protein)

氨基酸
1.蛋白质的水解 2.氨基酸的结构与分类 3.氨基酸的理化性质
一、蛋白质水解
完全水解得到各种氨基酸的混合物; 部分水解通常得到肽片段及氨基酸的混合物。 氨基酸是蛋白质的基本结构单元。 大多数的蛋白质都是由20种氨基酸组成,这20种
一、概述
按生物功能分:
1 酶(enzyme)
2 调节蛋白(regulatory protein)
3 转运蛋白(transport protein) 4 储存蛋白(nutrient and storage

第二章生物化学--蛋白质上幻灯片PPT课件

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H
CH3-S-CH2CH2-CHCOO+NH3 甲硫(蛋)氨酸 methionine Met M 5.74
2、极性不带电荷的氨基酸
HS-CH2-CHCOO+NH3
半胱氨酸 cysteine Cys,C 5.07
HO-
-CH2-CHCOO+NH3
酪氨酸
tyrosine Tyr,Y
5.66
结构
名称
缩写
Glu ,E 3.22
+NH3
Glutamic acid
几种特殊氨基酸
• 脯氨酸 (亚氨基酸)
CH2 CH2
CH2
CHCOONH2+
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半胱氨酸
-OOC-CH-CH2-SH + HS-CH2-CH-COO-
+NH3
-HH
+NH3
-OOC-CH-CH2-S S-CH2-CH-COO-
+NH3
二、蛋白质的分类
1. 按组成分为:简单蛋白质 结合蛋白质 2. 按分子形状和溶解度分为:
纤维状蛋白质 球状蛋白质
LOGO
3.按功能分:酶、转运蛋白、贮存蛋白、运动蛋 白、结构蛋白、防御蛋白、调节蛋白等。
三、蛋白质的元素组成
碳 50% 氢7% 氧23% 氮16% 硫 0-3% 微量的磷、铁、铜、碘、锌、钼
第二章生物化学 蛋 白质上幻灯片
第一节 蛋白质在生命活动中的作用 第二节 氨基酸 第三节 蛋白质的结构 第四节 蛋白质结构与功能的关系 第五节 蛋白质的溶解性质及分离鉴定
LOGO
第一节 蛋白质在生命活动中的作用
一、蛋白质的概念
蛋白质(protein):是由氨基酸(amino acids) 通过肽键(peptide bond)相连形成的高分子 含氮化合物。

大学生物化学课件 第2章 蛋白质化学

大学生物化学课件 第2章 蛋白质化学

肽链上的氨基酸不是完整的氨基 酸,因而称为氨基酸残基(Amino acid residues)。 一条肽链有两端。 具有游离氨基的一端称为氨基末端 (Amino terminal,或叫N端)。 具有游离羧基的一端称为羧基末端 (Carboxyl terminal,或叫C端)。
3. 肽的书写方法 Calligraph of peptides 书写肽链时,习惯把N端写在左 边,把C端写在右边。 两个氨基酸之间用·或-分开,也 可以用圆圈将氨基酸符号圈开。
4.
二 . 蛋白质的分类 Classification of proteins
1. 根据蛋白质的分子形状分类 Classification according to the shape of protein molecules 球状蛋白质 Globulins 纤维状蛋白质 Fibrins
2. 根据蛋白质的功能分类 Classification according to the functions of proteins 活性蛋白质 Active proteins 酶,转运蛋白,调节蛋白,信号蛋 白,防御蛋白等。 非活性蛋白质 Passive proteins 结构蛋白等。 3. 根据组成分类 Classification according to the composition of proteins 简单蛋白质 Simple proteins 结合蛋白质 Conjugated proteins
2. 由氨基和羧基参与的几种重要化学反应 Several important reactions of amino acids 1)茚三酮反应 Ninhydrin reaction 茚三酮 + 氨基酸 蓝紫色化合物
*
茚三酮反应

生物化学第2章 蛋白质

生物化学第2章 蛋白质

蛋白质的生物学意义

生命是蛋白质的存在形式,是重要的生物大分子; 蛋白质是生物功能的载体,每种细胞活性都依赖于一种 或几种特定的蛋白质;

蛋白质有极其重要的生物学意义(生物学功能):
蛋白质功能多样性 5-1(阅读)

蛋白质是生物功能的载体,每种细胞活性都依赖于一种
或几种特定的蛋白质;

蛋白质的生物学功能有以下几个方面: 内各种化学反应几乎都是在相应酶参与下进行的,催化 效率远大于合成的催化剂;
极移动,即处于等电兼性离子(极少数为中性分子)状
态,少数解离成阳离子和阴离子,但解离成阳离子和阴 离子的数目和趋势相等;
第2章
蛋白质
2.1 蛋白质的分类 2.2 蛋白质的组成单位—氨基酸
2.3 肽 2.4 蛋白质的结构
2.5 蛋白质结构与功能的关系 2.6 蛋白质的性质与分离、分析技术
2.1 蛋白质的分类

P17
蛋白质分类方法至少有4种:
1. 根据分子形状分类;
2. 根据分子组成分类 ;
3.根据功能分类;
2. 1. 1 根据分子形状分类
引起精氨酸脱氨,生成鸟氨酸和尿素 (色氨酸稳定);
3. 酶水解:

优点:不破坏氨基酸,不产生消旋作用。 缺点:使用一种酶常水解不彻底,需几种酶协同作用才 能使蛋白质完全水解;水解所需时间较长;

酶法主要用于部分水解; 常用的蛋白水解酶: 胰蛋白酶、糜(胰凝乳)蛋白酶、胃蛋白酶等;

这些酶的作用点见第6章(酶)表6-3 (P148) 。
泌一类胶质蛋白,能将贝壳牢固地粘在岩石或其他硬表
面上;
2. 2 蛋白质的组成单位--氨基酸

《生物化学》第二章

《生物化学》第二章

2.β-折叠
形式
4.无规卷曲
多肽链中,两段以上折叠成锯齿状的肽链, 通过氢键相连而成的平行片层状结构称为β折叠或β-片层。
无规卷曲是指肽链中没有确定规律性的构象, 不能被归入明确的二级结构,本身也具有一 定的稳定性。
- 20 -
第二节 蛋白质的分子结构
二、蛋白质的空间结构
α-螺旋
α-螺旋的主链呈螺旋上升,每3.6个氨基酸残基 上升一圈,相当于0.54 nm。
另外,虽然亚基具有独立的三级结构,但单独存在时无生物活性。例如,血红蛋白(上图)由四个 亚基组成,每个亚基在含氧量高的地方均能结合一分子的氧,在含氧量低时,释放所结合的氧。但任何 一个亚基单独存在时,只能结合氧,不能释放氧,不具有血红蛋白的运氧作用。
- 27 -
第二节 蛋白质的分子结构
二、蛋白质的空间结构
蛋白质的一级结构决定了蛋白质的二级、三级等高级结构。 蛋白质一级结构的阐明,对揭示某些疾病的发病机制、指导疾病治疗有十分重要的意义。

蛋白质的空间结构是如何形成的??
- 18 -
第二节 蛋白质的分子结构
二、蛋白质的空间结构
蛋白质的二级结构
蛋白质的二级结构(secondary structure)是指多肽链中有规则重复的构象, 这些构象由主链原子形成,不涉及侧链部分的构象。
-7-
第一节
蛋白质的分子组成 二、蛋白质的基本结构单位——氨基酸
除甘氨酸外,其他氨基酸的α-碳原子均为手性碳 原子,有L-型和D-型两个旋光异构体。组成天然氨基 酸的氨基酸均为L-型,因此人体内的氨基酸均为L-α-氨 基酸,其结构式如右图所示。
-8-
第一节
蛋白质的分子组成 二、蛋白质的基本结构单位——氨基酸

蛋白质化学-蛋白质结构和功能关系

蛋白质化学-蛋白质结构和功能关系

• 变性的本质
—— 破坏非共价键和二硫键,不改变蛋白 质的一级结构。
•造成变性的因素 物理因素:加热、紫外线、X线、超声波 化学因素:乙醇等有机溶剂、强酸、强 碱、重金属离子及生物碱试剂等 。
➢ 变性特征: 生物活性丧失;
理化性质改变:溶解度降低、球状蛋白质的 不对称性增加、粘度增加、扩散系数降低,某 些蛋白质不能够再形成结晶, 变性后分子结构 松散、易被水解,变性蛋白易被酶消化。
2、不可逆沉淀
▪ 定义:蛋白质发生沉淀后,不能用透析等方法除 去沉淀剂而使蛋白质重新溶解的现象
▪ 在强烈沉淀条件下,不仅破坏了蛋白质胶体溶液 的稳定性,而且也破坏了蛋白质的结构和性质, 产生的蛋白质沉淀不可能再重新溶解于水。
▪ 由于沉淀过程发生了蛋白质的结构和性质的变化, 所以又称为变性沉淀。
▪ 如加热沉淀、强酸碱沉淀、重金属盐沉淀和生物 碱沉淀等都属于不可逆沉淀。
肌红蛋白(myoglobin, Mb)
肌红蛋白是一个只有三级结
构的蛋白质,有8段α-螺旋
结构,分别成为A B C D E F G H肽段。整条多肽链折叠 成紧密球状分子,氨基酸残 基上的疏水侧链大都在分子 内部,富极性及电荷的则在 分子表面,因此水溶性较好。 Mb分子内部有个袋形空穴, 血红素居于其中。
(1)抗体的基本结构
Ig分子基本结 构是由四个肽 链组成的。
包括二条较小 的轻链和二条 较大的重链。
轻链与重链之 间是由二硫键 连接形成Ig分 子单体。
(1)抗体的基本结构
(2)可变区和恒定区
➢ 可变区和抗原识别有关,决定抗体识别的特异 性,而恒定区和效应功能相关。
➢ 此外在Y形分子伸出的两臂和主干之间还有个 可弯曲的铰链区(hinge R),能改变两个结合抗 原的Y形臂之间的距离。

《生物化学》思考题第二章 蛋白质化学

《生物化学》思考题第二章  蛋白质化学

第二章蛋白质化学学习要求一、掌握蛋白质分子平均含氮16%的意义,20种氨基酸名称(及三字符号),R结构特点及分类法;蛋白质一、二、三、四级结构基本特点;蛋白质生物学功能。

二、熟悉蛋白质重要的理化性质;其他为应了解的内容。

习题一、名词解释1.等电点(pI) 2.肽键 3.蛋白质的变性作用 4.非编码氨基酸 5.α螺旋 6.结合蛋白 7.盐析作用 8.亚基 9.分子病 10.透析二、思考题1.不同蛋白质的含量颇为相近,平均含量为%。

2.20种基本氨基酸可以分为哪几类?其分类依据是什么?其中,酸性氨基酸和碱性氨基酸各包含哪几种氨基酸?3.蛋白质的一、二、三、四级结构的各自定义及其特点。

4.蛋白质的二级结构有哪些?维持二级结构的化学键是?5.维持蛋白质一级结构的化学键是键,而维持蛋白质高级结构的化学键有哪些?6.如果组成蛋白质的2条多肽链之间存在共价键(如二硫键),就没有四级结构。

7.试说明蛋白质结构与功能的关系。

8.维持蛋白质亲水胶体稳定的两个因素是?9.引起蛋白质变性的理化因素有哪些?蛋白质变性后,其理化性质....和生物学活性.....会发生怎样的改变?10.沉淀蛋白质的方法有哪些?其中法在常温下沉淀出的蛋白质不变性。

11.试举二例说明蛋白质变性在医学、食品工业等实践中的应用。

12.蛋白质和核酸对紫外光均有吸收。

蛋白质的最大吸收波长是 nm;核酸的最大吸收波长是 nm。

13.蛋白质的生理功能有哪些?试从含量及生理功能说明蛋白质在生命过程中的重要性。

14.氨基酸的等电点和中性点(pH 7.0)有何区别?15.如将氨基酸混合液(甘氨酸、精氨酸、谷氨酸)点在滤纸上,在pH6.8的缓冲液中进行电泳,试推测它们从正极至负极的顺序。

第三章酶学学习要求一、掌握酶的概念与作用特点(催化效率高、专一性强、不稳定性及可调控性等).酶蛋白、辅助因子(辅酶或辅基)、参与辅酶或辅基组成的B族维生素及其功能、全酶;必需基团与活性中心;酶原激活及同工酶概念。

生物化学第二章 蛋白质

生物化学第二章   蛋白质
第二章
蛋白质
目 录
一、蛋白质的种类、含量与分类 二、氨基酸 三、肽 四、蛋白质的结构 五、蛋白质的性质 六、食物中的蛋白质 七、蛋白质的分离与纯化
一、蛋白质的化学组成与分类


主要组成元素:C、H、O、N、S 及 P、Fe、 Cu、Zn、Mo、I、Se 等微量元素。 百分数约为:碳占50~55%,氢占6~8%, 氧占20~30%,氮占15~18%及硫占0~4%。 大多数蛋白质所含氮素约为16%,因该元素容 易用凯氏(Kjeldahl)定氮法进行测定。 故蛋白质的含量可由氮的含量乘以 6.25(100/16)计算出来: 即:蛋白质含量=6.25×样品含氮量
aa向正极移动 aa向负极移动 aa不移动
pI的测定:
酸碱滴定法; 基于aa所带基团 均可解离; 得到弱酸弱碱曲 线; 根据aa上可解离 基团的pK值计算 等电点: pK:解离常数。 以甘氨酸为例:

由此可知:



在生理pH内,aa 的羧基和氨基全部解离; 具有这种性质的物质称两性电解质; 带有相反基团的分子叫两性离子; 滴定中Gly的阳离子(R+)、阴离子(R-) 和两性离子(R°)的比例随pH而变; 当溶液中只有两性离子时, pH = pI
蛋白质氨基酸
蛋白质中存在的20种氨基酸,除脯氨酸外,在其 α -碳原子上都有一个自由的羧基及一个自由的氨基; 由于脯基酸的α -氨基被取代,它实际上是一种α -亚 氨基酸。此外,每种氨基酸都有一个特殊的R基团。
生物体内常见氨基酸的分类:

蛋白质氨基酸: 蛋白质中常见的20种氨基酸 稀有的蛋白质氨基酸:蛋白质组成中,除上述20 种常见氨基酸外,从少数蛋白质中还分离出一些 稀有氨基酸,它们都是相应常见氨基酸的衍生物。 如4-羟脯氨酸、5-羟赖氨酸等。 非蛋白质氨基酸:生物体内呈游离或结合态的氨 基酸。

生化蛋白质化学2试题及答案

生化蛋白质化学2试题及答案

生化蛋白质化学2试题及答案1.含有辅基的一定是 [单选题] *A.核蛋白B.糖蛋白C.脂蛋白D.简单蛋白质E.结合蛋白质(正确答案)2.免疫球蛋白是一类 [单选题] *A.核蛋白B.磷蛋白C.脂蛋白D.铁蛋白E.糖蛋白(正确答案)3.蛋白质肽键属于 [单选题] *A.氢键B.二硫键C.离子键D.酰胺键(正确答案)E.疏水作用4.属于肽类激素的是 [单选题] *A.睾酮B.雌二醇D.醛固酮E.催产素(正确答案)5.人体内的一种重要的肽类抗氧化剂是 [单选题] *A.GSH(正确答案)B.催产素C.脑啡肽D.内啡肽E.血管紧张素Ⅱ6.决定蛋白质空间结构的是 [单选题] *A.亚基B.分子间氢键C.分子内离子键D.分子内疏水作用E.氨基酸组成和序列(正确答案)7.稳定蛋白质一级结构的主要作用力是 [单选题] *A.氢键B.肽键(正确答案)C.盐键D.二硫键E.疏水作用8.仅破坏氢键不会改变蛋白质的 [单选题] *A.基序C.三级结构D.四级结构E.一级结构(正确答案)9.第一种人工合成的蛋白质是 [单选题] *A.酶(正确答案)B.激素C.抗体D.载体E.抗生素10.关于蛋白质二级结构正确的是 [单选题] *A.局部主链的构象(正确答案)B.氨基酸的排列顺序C.氨基酸侧链的空间布局D.氨基酸相对的空间布局E.每个原子的相对空间布局11.不属于蛋白质二级结构的是 [单选题] *A.α螺旋B.β折叠C.β转角D.无规卷曲E.右手双螺旋(正确答案)12.蛋白质二级结构中通常不存在的构象是 [单选题] *A.α螺旋B.β折叠C.β转角D.无规卷曲E.α转角(正确答案)13. [单选题] *蛋白质分子中α螺旋特点是A.都是右手螺旋(正确答案)B.靠盐键维持稳定C.肽键平面完全伸展D.螺旋方向与长轴垂直E.每个螺旋含有5.4个氨基酸残基14.α螺旋每上升一圈相当于氨基酸残基个数 [单选题] *A.2B.3.4C.3.6(正确答案)D.4E.5.415.一个β折叠单位含有的氨基酸残基个数 [单选题] *A.1B.2(正确答案)C.1.5D.3.6E.5.416. [单选题] *稳定蛋白质分子中α螺旋和β折叠的作用力是A.氢键(正确答案)B.肽键C.盐键D.二硫键E.疏水作用17.β转角属于蛋白质的 [单选题] *A.结构域B.一级结构C.二级结构(正确答案)D.三级结构E.四级结构18.稳定蛋白质二级结构的主要作用力 [单选题] *A.氢键(正确答案)B.肽键C.离子键D.二硫键E.疏水作用19.一个β转角含有的氨基酸残基个数是 [单选题] *A.2B.3C.4(正确答案)D.5E.620.整条肽链中全部氨基酸残基的空间布局属于蛋白质的 [单选题] *A.基序B.一级结构C.二级结构D.三级结构(正确答案)E.四级结构21.稳定蛋白质三级结构的主要作用力是 [单选题] *A.氢键B.范德华力C.离子键D.二硫键E.疏水作用(正确答案)22.稳定蛋白质三级结构的作用力不包括 [单选题] *A.氢键B.范德华力C.盐键D.肽键(正确答案)E.疏水作用23.在蛋白质的三级结构中,趋向于避开分子表面的是 [单选题] *A.谷氨酸B.精氨酸C.赖氨酸D.亮氨酸(正确答案)E.丝氨酸24.蛋白质三级结构中,主要表现在分子内部的是 [单选题] *A.谷氨酸B.酪氨酸C.丝氨酸D.缬氨酸(正确答案)E.天冬酰胺25.关于蛋白质结构下列叙述,不正确的是 [单选题] *A.α螺旋属于二级结构B.三级结构属于空间结构C.一级结构决定空间结构D.无规卷曲是在一级结构基础上形成的E.各种蛋白质都有一级、二级、三级、四级结构(正确答案)26.氧在血中的主要运输形式是 [单选题] *A.溶解氧B.水合氧C.磷酸氢根D.氧合血红蛋白(正确答案)E.氨基甲酸血红蛋白27.一分子血红蛋白中含有Fe2+的个数是 [单选题] *A.1B.2C.3D.4(正确答案)E.528.镰状细胞贫血是由血红蛋白分子结构异常而引起的分子病,患者镰状血红蛋白HbS的β亚基N端6号氨基酸是 [单选题] *A.谷氨酸B.精氨酸C.赖氨酸D.亮氨酸E.缬氨酸(正确答案)29.一分子血红蛋白最多可结合氧的分子数是 [单选题] *A.1B.2C.3D.4(正确答案)E.530.维持蛋白质分子一级结构的化学键是 [单选题] *A.盐键B.二硫键C.疏水键D.肽键(正确答案)E.氢键31.蛋白质分子中α-螺旋和β-片层都属于 [单选题] *A.一级结构B.二级结构(正确答案)C.三级结构D.四级结构E.高级结构32.维持蛋白质分子二级结构的化学键是 [单选题] *A.肽键B.离子键C.氢键(正确答案)D.二硫键E.疏水键33.α螺旋每上升一圈相当于几个氨基酸残基? [单选题] *A.2.5B.2.6C.3.0D.3.6(正确答案)E.5.434.有关蛋白质分子中α螺旋的描述正确的是 [单选题] *A.一般为左手螺旋B.螺距为5.4 nmC.每圈包含10个氨基酸残基D.稳定键为二硫键E.氨基酸侧链的形状大小及所带电荷可影响α螺旋的形成(正确答案)35.关于蛋白质分子三级结构的描述,其中错误的是 [单选题] *A.天然蛋白孩子分子均有这种结构B.具有三级结构的多肽链都具有生物学活性(正确答案)C.三级结构的稳定性主要是次级键维持D.亲水基团聚集在三级结构的表面E.决定盘曲折叠得因素是氨基酸残基36.具有四级结构的蛋白质特征是 [单选题] *A.分子中必定含有辅基B.每条多肽链都具有独立的生物学活性C.依赖肽键维系四级结构的稳定性D.由两条或两条以上具有三级结构的多肽链组成(正确答案)37.维持蛋白质四级结构的化学键是 [单选题] *A.盐键B.氢键C.二硫键D.范德华力E.次级键(正确答案)38.蛋白质分子中两个半胱氨酸残基间可形成 [单选题] *A.肽键B.盐键C.二硫键(正确答案)D.疏水键E.氢键39.维持蛋白质三级结构的化学键为( )。

生物化学 第2章 蛋白质(2)

生物化学 第2章 蛋白质(2)

目标蛋白质的分离纯化程序主要包括:
1 3 材料的选择; 蛋白质初步提纯;
2 组织匀浆的方法除去杂蛋白,直至完全纯化;
5 目标蛋白的鉴定。 用于研究目的蛋白质通常应保持它的生物活性。因此,在目标蛋白 质的整个分离纯化过程中要在较低温度下(0-4℃)操作,注意使用蛋 白酶(使蛋白质降解的酶)的抑制剂,避免使用剧烈条件,以免蛋白质 特定的折叠结构受到破坏。
600g,3 min.上清 沉淀:细胞核 6000g,8 min.上清 沉淀:线粒体,叶绿体, 溶酶体,过氧化酶体 沉淀:细胞质膜,高尔基 体和内质网膜的碎片 沉淀:核糖体亚基
40000g.30 min.上清 100000g.90 min.上清
细胞液
平衡密度梯度离心: 用不同的离心速度、依据被分离物的密度而进 行分离的效果;通常是将没有纯化的物质铺在密度 溶液(如蔗糖溶液,氯化铯溶液为介质,离心管内 的溶液密度从底部到顶部是浓至稀的梯度)的顶层, 通过离心(160000g,3h)细胞内各成分不停地下 沉分别达到与溶液的密度相等时的位置。其介质的 密度范围宽于被分离组分的密度。
二 蛋白质一级结构测定 蛋白质测序的一般步骤:
首先目标蛋白质分离纯化得到高度纯净的蛋白质 样品。 (1) 测定蛋白质分子中多肽链的数目,末端分析, 分析多肽链的N末端和C末端。 (2) 拆分蛋白质分子中的多肽链。断裂链内二硫键。 (3) 测定多肽链的氨基酸组成,酸水解或碱水解。 (4) 多肽链部分裂解成肽段,专一性酶解。 (5) 测定各个肽段的氨基酸顺序。 (6) 确定肽段在多肽链中的顺序。 (7) 确定多肽链中二硫键的位置。
(五)电泳后的蛋白质检测:
考马斯亮蓝染色是常用的一项电泳染色方法,是根据 考马斯亮蓝能与蛋白质多肽链定量结合的原理而建立起的。 对于一个混合蛋白质的电泳分离来说,它只能检测样品的 分离情况;如果被检蛋白质的位置可以确定,可以将该蛋 白质的色带切下之后进行脱色,测定脱色液光吸收值,能对 该蛋白质进行定量分析。

蛋白质化学2

蛋白质化学2

今有一个七肽, 今有一个七肽,经分析它的氨基酸组成 :Lys,Gly,Arg,Phe,Ala,Tyr和Ser.此肽未经糜 是:Lys,Gly,Arg,Phe,Ala,Tyr和Ser.此肽未经糜 蛋白酶处理, FDNB反应不产生 反应不产生α DNP-氨基酸. 蛋白酶处理,与FDNB反应不产生α-DNP-氨基酸. 经糜蛋白酶作用后,此肽断裂成两个肽段, 经糜蛋白酶作用后,此肽断裂成两个肽段,其氨基 酸组成分别为Ala,Tyr,Ser Ala,Tyr,Ser和 酸组成分别为Ala,Tyr,Ser和Phe, Lys, Gly,Arg. 这两个肽段分别和FDNB反应,可分别产生DNP FDNB反应 DNP这两个肽段分别和FDNB反应,可分别产生DNPSer和DNP- Lys.此肽与胰蛋白酶反应 此肽与胰蛋白酶反应, Ser和DNP- Lys.此肽与胰蛋白酶反应,同样能产 生两个肽段,它们的氨基酸组成分别是Gly,Arg Gly,Arg和 生两个肽段,它们的氨基酸组成分别是Gly,Arg和 Lys.试问此七肽的一级结构 Ala,Tyr ,Ser,Phe, Lys.试问此七肽的一级结构 是怎样的? 是怎样的?
(3)肽链的部分水解 )
拆分得到的多肽链一般是100-1000个氨基酸 个氨基酸 拆分得到的多肽链一般是 需要将其切成小肽段 分别测定它们的顺序, 切成小肽段, 需要将其切成小肽段,分别测定它们的顺序,最后 连在一起。 连在一起。 1、裂解的部位要专一。 、裂解的部位要专一。 2、裂解点要少,切的肽段的大小要合适。 、裂解点要少,切的肽段的大小要合适。 3、产率要高,要求试剂不能破坏裂解后的肽段。 、产率要高,要求试
(4)肽段的分离和氨基酸序列测定
分离: 分离 凝胶过滤层析 电泳 离子交换层析
肽段氨基酸序列测定: 肽段氨基酸序列测定:
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第二章核酸的结构和功能一、选择题1、热变性的DNA分子在适当条件下可以复性,条件之一是(B)。

A、骤然冷却B、缓慢冷却C、浓缩D、加入浓的无机盐2、在适宜条件下,核酸分子两条链通过杂交作用可自行形成双螺旋,取决于(D)。

A、DNA的Tm值B、序列的重复程度C、核酸链的长短D、碱基序列的互补3、核酸中核苷酸之间的连接方式是(C)。

A、2’,5’—磷酸二酯键B、氢键C、3’,5’—磷酸二酯键D、糖苷键4、tRNA的分子结构特征是(A)。

A、有反密码环和3’—端有—CCA序列B、有反密码环和5’—端有—CCA序列C、有密码环D、5’—端有—CCA序列5、下列关于DNA分子中的碱基组成的定量关系(D)是不正确的。

A、C+A=G+TB、C=GC、A=TD、C+G=A+T6、下面关于Watson-Crick DNA双螺旋结构模型的叙述中(A)是正确的。

A、两条单链的走向是反平行的B、碱基A和G配对C、碱基之间共价结合D、磷酸戊糖主链位于双螺旋内侧7、具5’-CpGpGpTpAp-3’顺序的单链DNA能与下列(C)RNA杂交。

A、5’-GpCpCpAp-3’B、5’-GpCpCpApUp-3’C、5’-UpApCpCpGp-3’D、5’-TpApCpCpGp-3’8、RNA和DNA彻底水解后的产物(C)。

A、核糖相同,部分碱基不同B、碱基相同,核糖不同C、碱基不同,核糖不同D、碱基不同,核糖相同9、下列关于mRNA描述,(A)是错误的。

A、原核细胞的mRNA在翻译开始前需加“PolyA”尾巴。

B、真核细胞mRNA在3’端有特殊的“尾巴”结构C、真核细胞mRNA在5’端有特殊的“帽子”结构D、原核细胞mRNA在5’端有特殊的“帽子”结构10、tRNA的三级结构是(B )。

A、三叶草叶形结构B、倒L形结构C、双螺旋结构D、发夹结构11、维系DNA双螺旋稳定的最主要的力是(C)。

A、氢键B、离子键C、碱基堆积力D范德华力12、下列关于DNA的双螺旋二级结构稳定的因素中(A)是不正确的。

A、3',5'-磷酸二酯键C、碱基堆积力B、互补碱基对之间的氢键D、磷酸基团上的负电荷与介质中的阳离子之间形成的离子键13、Tm是指(C)情况下的温度。

A、双螺旋DNA达到完全变性时B、双螺旋DNA开始变性时C、双螺旋DNA结构失去1/2时D、双螺旋结构失去1/4时14、稀有核苷酸碱基主要见于(C)。

A、DNAB、mRNAC、tRNAD、rRNA15、双链DNA的解链温度的增加,提示其中含量高的是(D)。

A、A和GB、C和TC、A和TD、C和G16、核酸变性后,可发生的效应是(B)。

A、减色效应B、增色效应C、失去对紫外线的吸收能力D、最大吸收峰波长发生转移17、某双链DNA纯样品含15%的A,该样品中G的含量为(A )。

A、35%B、15%C、30%D、20%18、预测下面(B )基因组在紫外线照射下最容易发生突变。

A、双链DNA病毒B、单链DNA病毒C、线粒体基因组D、细胞核基因组19、下列关于cAMP的论述(B )是错误的。

A、是由腺苷酸环化酶催化ATP产生B、是由鸟苷酸环化酶催化ATP产生的C、是细胞第二信息物质D、可被磷酸二酯酶水解为5'-AMP20、下列关于Z型DNA结构的叙述(D)是不正确的。

A、它是左手螺旋B、每个螺旋有12个碱基对,每个碱基对上升0.37nmC、DNA的主链取Z字形D、它是细胞内DNA存在的主要形式21、下列关于DNA超螺旋的叙述(B )是不正确的。

A、超螺旋密度α为负值,表示DNA螺旋不足B、超螺旋密度α为正值,表示DNA螺旋不足C、大部分细胞DNA呈负超螺旋D、当DNA分子处于某种结构张力之下时才能形成超螺旋22、下列(B)技术常用于检测凝胶电泳分离后的限制性酶切片段。

A、Eastern blottingB、Southern blottingC、Northern blottingD、Western blotting23、下列复合物中除(C)外,均是核酸与蛋白质组成的复合物。

A、核糖体B、病毒C、核酶D、端粒酶24、胸腺嘧啶除了作为DNA的主要组分外,还经常出现在( B )分子中。

A、mRNAB、tRNAC、rRNAD、hnRNA25、艾滋病病毒HIV是一种(D)病毒。

A、双链DNA病毒B、单链DNA病毒C、双链RNA病毒D、单链RNA病毒26、对DNA片段作物理图谱分析,需要用(C)。

A、核酸外切酶B、DNaseIC、限制性内切酶D、DNA聚合酶I27、引起疯牛病(牛海绵脑病)的病原体是( C )。

A、一种DNAB、一种RNAC、一种蛋白质D、一种多糖28、RNA经NaOH水解,其产物是(D)。

A、5’-核苷酸B、2’-核苷酸C、3’-核苷酸D、2’-核苷酸和3’-核苷酸29、下述DNA中(B)是单拷贝DNA。

A、组蛋白基因B、珠蛋白基因C、rRNA基因D、tRNA基因30、snRNA的功能是(B)。

A、作为mRNA的前身物B、促进mRNA的成熟C、催化RNA的合成D、使RNA的碱基甲基化31、在mRNA中,核苷酸之间(D )连接。

A、磷酸酯键B、氢键C、糖苷键D、磷酸二酯键32、真核细胞RNA帽样结构中最多见的是(B )。

A、m7ApppNmp(Nm)pNB、m7GpppNmp(Nm)pNC、m7UpppNmp(Nm)pND、m7CpppNmp(Nm)pN33、DNA变性后理化性质有下述那个改变(B )。

A、对260nm紫外光吸收减少B、溶液粘度下降C、磷酸二酯键断裂D、糖苷键断裂34、决定tRNA携带氨基酸特异性的关键部位是(A)。

A、-XCCA 3'末端B、TψC环C、HDU环D、反密码环35、下列单股DNA片段中(C)在双链状态下可形成回文结构。

A、ATGCCGTAB、ATGCTACGC、GTCATGACD、GTATCTAT36、下列对环核苷酸的描述(D)是错误的。

A、是由5'-核苷酸的磷酸基与核糖C-3'上的羟基脱水缩合成酯键,成为核苷的3',5'-环磷酸二酯B、重要的环核苷酸有cAMP及cGMPC、cAMP在生理活动及物质代谢中有重要的调节作用,被称之为第二信使D、环核苷酸的核糖分子中碳原子上没有自由的羟基37、DNA携带生物遗传信息这一事实意味着(C)。

A、不论哪一物种的碱基组成均应相同B、病毒的侵染是靠蛋白质转移至宿主细胞来实现的C、同一生物不同组织的DNA,其碱基组成相同D、DNA的碱基组成随机体年龄及营养状态而改变38、下列关于核酸的描述(C)是错误的。

A、核酸分子具有极性B、多核苷酸链有两个不相同的末端C、多核苷酸链的3'-端为磷酸基D、多核苷酸链的5'-端为磷酸基39、自然界游离核苷酸中的磷酸最常位于(C)。

A、核苷的戊糖的C-2'上B、核苷的戊糖的C-3'上C、核苷的戊糖的C-5'上D、核苷的戊糖的C-2'及C-3'上40、核酸(C)。

A、是生物小分子B、存在于细胞内唯一的酸C、是遗传的物质基础D、是组成细胞的骨架二、是非题(在题后括号内打√或×)1、杂交双链是指DNA双链分开后两股单链的重新结合。

×2、tRNA的二级结构是倒L型。

×3、DNA分子中的G和C的含量愈高,其熔点(Tm)值愈大。

√4、Z型DNA与B型DNA可以相互转变。

√5、在tRNA分子中,除四种基本碱基(A、G、C、U)外,还含有稀有碱基。

√6、一种生物所有体细胞的DNA,其碱基组成均是相同的,这个碱基组成可作为该类生物种的特征。

√7、核酸探针是指带有标记的一段核酸单链。

√8、DNA是遗传物质,而RNA则不是。

×9、真核生物成熟mRNA的两端均带有游离的3ˊ-OH。

√10、核糖体不仅存在于细胞质中,也存在于线粒体和叶绿体中。

√11、基因表达的最终产物都是蛋白质。

×12、毫无例外从结构基因中的DNA序列可以推出相应的蛋白质序列。

×13、对于提纯的DNA样品,测得OD260/OD280<1.8,则说明样品中含有RNA。

×14、在所有病毒中,迄今为止还没有发现既含有RNA又含有DNA的病毒√15、生物体内,天然存在的DNA多为负超螺旋。

√16、由两条互补链组成的一段DNA有相同的碱基组成。

×17、所有生物的染色体都具有核小体结构。

×18、核酸是两性电解质,但通常表现为酸性。

√19、真核生物成熟tRNA的两端均带有游离的3′-OH。

×20、用于核酸分离的凝胶电泳有琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。

√三、问答题:1、某DNA样品含腺嘌呤15.1%(按摩尔碱基计),计算其余碱基的百分含量。

答:根据碱基互补配对原则A=T=15.1% C=G=(1-15.1%)/2所以结果是:A(腺嘌呤):15.1% T(胸腺嘧啶): 15.1%C(细胞嘧啶): 34.9% G(鸟嘌呤): 34.9%2、DNA和RNA的结构和功能在化学组成、分子结构、细胞内分布和生理功能上的主要区别是什么?答:1)DNA化学组成:组成DNA的碱基有A、T、C、G四种,戊糖为D-2-脱氧核糖。

分子结构:DNA分子常为双链结构,包括一级结构、二级结构、三级结构等。

细胞内分布:DNA在细胞内主要分布于细胞核,组成染色质(染色体),此外线粒体中也有少部分DNA。

生理功能:主要是作为遗传物质,通过复制将遗传信息由亲代传给子代。

2)RNA化学组成:组成RNA的碱基有A、U、C、G这四种,戊糖为D-核糖。

分子结构:RNA为单链线形分子,可自身回折形成局部双螺旋(二级结构),进而折叠(三级结构)。

细胞内分布:RNA分为三类:tRNA、rRNA和mRNA,分布于细胞质中的核糖体上。

生理功能:RNA的功能是与遗传信息在子代的表达有关,如转录、翻译。

某些病毒的基因组为RN A,此外RNA还有催化功能。

3、DNA双螺旋结构有些什么基本特点?这些特点能解释哪些最重要的生命现象?答:1)(1)两条反向平行的多聚核苷酸链沿一个假设的中心轴右旋相互盘绕而形成。

(2)磷酸和脱氧核糖单位作为不变的骨架组成位于外侧,作为可变成分的碱基位于内侧,链间碱基对形成氢键,按A—T,G—C配对(碱基配对原则,Chargaff定律)(3)螺旋直径2nm,沿螺旋的中心轴形成大沟和小沟交替出现。

(4)相邻碱基平面垂直距离0.34nm,螺旋结构每隔10个碱基对(base pair, bp)重复一次,间隔为3.4nm。

2)解释生命活动:双螺旋DNA是储存遗传信息的分子,通过半保留复制,储存遗传信息;通过转录和翻译表达出生命活动所需信息。

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