生物免疫治疗讲座汇总-知识说明篇

放化疗的局限性
手术后或失去手术时机的患者，通常需要进行化疗或 放疗。化疗、放疗能杀伤快速增殖的肿瘤细胞，但对残留 的肿瘤干细胞和其它处于非增殖期的肿瘤细胞无效。 放化疗在杀死癌细胞同时，正常细胞和机体免疫功能 损伤作用是不可避的。这样就导致一种局面，即使有一个 癌细胞没有被杀死，他们也会在没有人体免疫系统防护状 况下，快速增殖、扩散转移。 研究表明，经过传统的三大疗法，体内还存在至少 1012个肿瘤细胞，他们主要依靠机体的免疫功能来杀伤。
恶性肿瘤生物治疗最新技术-----抗肿瘤免疫活性细胞疗法
三大疗法的局限性
手术 放疗 化疗
手术治疗的局限性
机体发生肿瘤后，尽早手术切除仍是目前治疗 肿瘤的第一选择，但是单纯手术疗法不能清除残 留在血液和淋巴系统中的肿瘤细胞，造成术后复 发转移率高（1年复发率达60%，死于复发和转移 的人超80%），5年存活率低。
DC疫苗的临床应用
恶性黑色素瘤、前列腺癌、恶性淋巴瘤、白 血病、其他实体瘤（结直肠癌、 乳腺癌、 肺癌、卵巢癌、肝癌、胰腺癌、肝胰管壶 腹癌、胃癌、食管癌、转移性肾癌等 、儿 童青少年好发的间叶组织来源的肉瘤）的 免疫治疗。
CIK，细胞因子诱导的杀伤细胞免疫疗法

CIK细胞是一种用外周血单个核细胞（PBMC），在体外经过多种 细胞因子培养激活后，获得的对肿瘤细胞具有高效溶解毒性的一 群异质细胞。 又称为NK细胞样T淋巴细胞：CD3+CD56+双阳性细胞. 特点：兼具有T淋巴细胞强大的抗肿瘤活性、NK细胞的非MHC限制 性杀瘤优点。
（3）肿瘤细胞形成生理屏障阻碍DC摄取抗原。

肿瘤患者的淋巴细胞因素
1.抗肿瘤T细胞数量不足
2.抗肿瘤T细胞功能下降：T细胞的肿瘤细胞亲和性不足；T细胞耐受性T细胞传 导信号下调；T细胞与肿瘤细胞接触时发生凋亡；T细胞不能进入肿瘤基质； Treg细胞的抑制。
肿瘤免疫逃逸机制-肿瘤细胞因素





细胞来源丰富：正常或患者的骨髓或外周血单个核细胞均可 诱导获得CIK细胞
对多重耐药肿瘤细胞同样敏感



杀瘤活性不受CsA、FK506等免疫抑制剂的影响
对正常骨髓造血前体细胞无毒性 能抵抗肿瘤细胞引发的效应细胞Fas-FasL凋亡
CIK细胞的作用机制
CIK细胞
CIK细胞杀伤肿瘤作用特点
1.能够迅速执行杀伤肿瘤细胞的功能，其抗瘤作用 可持续2周到1个月； 2.通过整个免疫网络的激活，调整宿主的防御机制 ，达到控制肿瘤生长乃至使其消退的目的； 3.一部分记忆细胞在体外也得到了扩增，一旦遇到 新的肿瘤细胞出现，能够迅速在体内活化，杀伤 靶细胞。
生物治疗--肿瘤的第四大模式
1985年，美国NIH就把肿瘤生物治疗正式列入继手术、放化 疗以外肿瘤综合治疗的第四大模式。并因其安全、有效、无毒副 作用等特点，被认为是肿瘤综合治疗模式中最活跃、最有前途的 手段。 2000年 “国际肿瘤生物治疗及基因治疗年会”会议总结报 告曾指出：“生物治疗是目前知道的唯一的一种有望完全消灭癌 细胞的治疗手段，21世纪是肿瘤生物治疗的世纪。”


应用CIK细胞被认为是新一代抗肿瘤过继细胞免疫治疗的首选方 案。CIK细胞在杀伤肿瘤细胞的同时，不损伤任何正常组织细胞。
是目前国际上广泛应用的肿瘤免疫治疗手段

INF-γ、 CD3 McAb、IL-2
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CIK 增殖细胞团
CIK细胞的特点

增殖速度快 杀瘤活性高，兼具有T淋巴细胞强大的抗肿瘤活性杀伤活性 可达84.7% 杀瘤谱广，兼具有NK细胞的非MHC限制性杀瘤优点


诱导产生免疫记忆，使机体获得持久的抗肿瘤免疫力。
可治疗的肿瘤种类广，几乎对各种肿瘤都有一定的疗效。 与CIK细胞治疗可以协同进行，达到互补的效果。
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DC应用

目前，DC疗法，在我国已被批准用于肿瘤 患者的临床治疗，已上全国及辽宁省医疗 服务价格项目规范，也是目前国内唯一被 批准应用于临床的肿瘤疫苗类治疗方法， 已经大量应用于肿瘤的临床免疫治疗
肿瘤抗原表达不足 肿瘤产生局部免疫抑制因子 缺乏凋亡和破坏途径 肿瘤相关免疫抑制细胞的免疫抑制作用
造成机体免疫细胞（主要为淋巴细胞）对肿瘤 细胞识别和杀伤功能下降甚至消失
肿瘤免疫逃逸机制
自身免疫因素 肿瘤细胞因素
临床可见肿瘤
肿瘤的免疫治疗


肿瘤的免疫治疗就是借助免疫学理论和技 术，提高肿瘤抗原的免疫原性，激发和增 强机体抗肿瘤的免疫应答，提高肿瘤对疫活性细胞，以最终清除 肿瘤。 DC及CIK细胞是抗肿瘤免疫活性细胞治疗中 功能最强、最有潜力的肿瘤治疗手段
生物治疗--新希望
20世纪80年代以来，细胞生物学、分子生物学及生
物工程技术的迅速发展，使人们重新认识传统的肿瘤免 疫治疗的理论与实践。 肿瘤的生物治疗是应用生物技术，通过调节和增强 肿瘤患者机体的免疫防御机制杀伤肿瘤，不但对肿瘤细 胞，而且肿瘤干细胞和其它处于非增殖期的肿瘤细胞均 有明显的杀伤作用，并能提高机体的免疫力，从而能有 效清除体内残存的肿瘤细胞，防止肿瘤的转移及复发。
采集病人外周血单个核细胞
加入相关抗原致敏
体外细胞因子刺激
成熟抗原知敏的DC回输给病人 利用负载肿瘤抗原的树突状细胞，能够激发 机体产生肿瘤特异性的细胞毒性T淋巴细胞， 从而能有效地杀伤肿瘤细胞，并且能够建立 起持久的抗肿瘤的特异性免疫应答。
发挥抗肿瘤作用
DC细胞疫苗的优势

整个治疗过程病人简单易行，非常轻松，无痛苦和不适。 培养所需的淋巴细胞数量少，不需要采集大量的外周血。 诱导并激活病人自身的特异性抗肿瘤免疫反应。
肿瘤与免疫
免疫系统是人体的防御系统，
发挥着清除体内发生突变的肿瘤细
胞的作用。机体免疫系统和肿瘤细
胞相互作用的结果,决定了肿瘤的最
终演变。
肿瘤与免疫
对于健康人来说，免疫系统强大， 足以及时清除突变的肿瘤细胞；而对 于肿瘤病人来说，其免疫功能低下、
不能识别肿瘤抗原、或者不能递呈肿
瘤抗原信号，从而使机体的免疫系统 不能对肿瘤细胞进行杀伤与清除，这 是肿瘤发生的主要原因之一。
3. 4.
化疗联合DC/CIK 常规治疗无效
5.
6.
支持疗法
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肿瘤生物治疗与常规治疗的关系
DC疫苗和CIK治疗的疗效

病例1 CT显示：一例转移性髓性甲 状腺癌DC疫苗前（左）和 DC疫苗治疗后13个月（右）。 显示肝转移完全消退（上）， 肺损害明显 减少（下），箭 头所示疫苗之前的损伤部。
放疗
2.
3.
1.
化疗
2.
3.
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肿瘤综合治疗
治疗时机与方案 手术后联合DC/CIK 放疗联合DC/CIK
1. 2.
联合治疗意义 快速恢复传统治疗手段造成的免疫损伤； 特异清除术后残余肿瘤细胞；防治转移与复 发； 增强放化疗敏感性，减少放化疗毒副作用； 抵抗化疗药物的免疫抑制作用； 对放化疗耐药的肿瘤细胞也有杀伤作用； 支持骨髓功能衰竭后的免疫重建；
细胞制备及回输方案
治疗途径：全身治疗是通过静脉输注进行； 局部治疗是通过介入方法或直接注入病灶部位。
治疗过程：第0天采集外周血单个核细胞，GMP实验室分离培养；
第7-8天开始收获DC细胞，分4次回输；
第12-16天开始收获CIK细胞，分4次回输,
1个总疗程：4DC + 4CIK 大约1个月。
与常规治疗方法比较
治疗种类
1. 2. 3. 4.
特点 增强机体免疫功能； 增强放、化疗的敏感性； 清除微小病灶和残余肿瘤细胞； 无明显毒副作用；
DC/CIK免疫治疗
手术
1. 2. 1.
局部快速切除肿瘤组织；见效快； 容易遗漏微小病灶或转移病灶；
局部减少肿瘤负荷；见效快； 不敏感细胞，复发根源； 毒副作用大，造成免疫损伤； 全身减轻肿瘤负荷；见效快； 不敏感细胞，复发根源； 毒副作用大，造成免疫损伤；
1012 109 106


用于治疗某些化疗不敏感的肿瘤； 用于不宜手术且对化疗和放疗禁忌的肿瘤患者。 显效时间短，病人可以马上感到食欲和精神状态的好转以及疼
痛减轻，使病人对继续接受治疗充满信心。
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DC/CIK细胞联合治疗
DC识别病原, 激活获得性免疫系统，产生肿瘤特 异性的免疫反应 CIK通过发挥自身细胞毒性与分泌细胞因子杀伤肿 瘤细胞 二者联合有协同作用，达到互补的效果（1+1﹥2）， 确保有效和谐的免疫反应的完成。
引自Cancers Endocrine-Related Cancer.2006.13;779-795

病例2
1例多发肝转移的病例，回输 自体免疫活性细胞后获得完 全缓解。治疗前（左）， 治疗后（右）
引自Proc Natl Acad Sci U S A.2004 October 5;101:14639

上海第二军医大曹雪涛、万涛教授等2008年完成了
150例转移性晚期大肠癌应用肿瘤抗原负载DC细胞治
疗的临床研究，研究结果CR+PR达到46.2%，显著高于 随机对照化疗组22.5%。

2010年4月30日，美国食品和药物管理局（FDA）批准 了名为Provenge的治疗晚期前列腺癌疫苗。临床实验
CIK治疗流程
采集病人外周血单个核细胞PBMC
加入多种细胞因子培养
扩增、活化、诱导成为CIK细胞
分数次静脉回输体内
发挥抗肿瘤作用
到达病变部位直接清除残存肿瘤细胞 调节和增强全身免疫机能 防止肿瘤复发及转移
CIK治疗的适应症

手术后患者，可防止肿瘤转移复发；
肿瘤综合治疗的组成部分，如在化疗治疗的间隙期 或在肿瘤局部放疗过程中同时联合自体免疫细胞治 疗。 无法进行手术、放疗、化疗的中晚期患者； 放疗、化疗失败的患者； 癌性胸、腹腔积液患者。