微生物的分离和培养的一轮复习
12-2微生物的培养技术及应用【新人教生物一轮复习课前自主预习案】
第十二单元生物技术与工程课前自主预习案2 微生物的培养技术及应用素能目标★考向导航基础梳理——系统化知识点一微生物的基本培养技术1．培养基2．无菌技术3．微生物的纯培养（1）概念：由繁殖所获得的微生物群体是纯培养物，获得的过程就是纯培养。
（2）过程：包括、灭菌、接种、分离和培养等步骤。
（3）常用方法：法和法。
（4）实例——酵母菌的纯培养知识点二微生物的选择培养和计数一、微生物的选择培养1．实验室中微生物筛选的原理人为提供有利于生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时其他微生物的生长。
2．稀释涂布平板法将菌液进行一系列的梯度稀释后，将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面，进行培养。
（1）系列稀释操作移液管需要经过灭菌。
操作时，试管口和移液管应离火焰1～2 cm处。
操作过程如下：（2）涂布平板操作）培养：待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板，放入中培养1～2 d。
二、微生物的数量测定1．稀释涂布平板法（1）计数原理：当样品的时，培养基表面生长的一个，来源于样品稀释液中的一个活菌。
通过统计平板上的，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
（2）计数标准：为了保证结果准确，一般选择菌落数为的平板进行计数。
（3）计数方法：通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数为、适于计数的平板。
在下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出。
（4）当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，统计结果一般用来表示。
2．显微镜直接计数法（1）计数原理：利用特定的或，在显微镜下观察、计数，然后再计算一定体积的样品中微生物的数量。
（2）优点：是一种常用的、的测定微生物数量的方法。
（3）缺点：统计的结果一般是死菌数和活菌数的总和。
三、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数基能过关——问题化一、判一判（判断正误并找到课本原话）（一）微生物的基本培养技术1．微生物在琼脂固体培养基表面或内部生长，可以形成肉眼可见的菌落。
一轮复习 人教版 微生物的培养技术及应用 作业
2023届一轮复习人教版微生物的培养技术及应用作业[基础达标]1．下列实验室培养微生物的操作措施中，不能获得较纯菌种的是() A．土壤样品灭菌处理后进行稀释涂布分离纯化B．培养皿、接种工具和培养基等进行灭菌C．操作过程需在酒精灯火焰旁进行并在适宜条件下培养D．如果是固体培养基，则需把培养皿倒置答案：A2．(2022·山东泰安一模)养殖池中存在的有毒物质主要是氨及亚硝酸，这两种物质可由硝化细菌吸收利用。
在“养殖池底泥中硝化细菌的分离和计数”实验中，下列说法正确的是()A．需要配制添加一定浓度铵盐的牛肉膏蛋白胨培养基，以筛选硝化细菌B．应对采集底泥使用的工具进行灭菌，全部接种过程均需在酒精灯火焰旁进行C．采用平板划线法进行分离和计数时，还需与未接种的空白培养基同时培养D．若空白对照组上长出了菌落，需要在实验组数据的基础上减去空白对照组的菌落数答案：B3．(2022·沈阳高三模拟)下图为实验室培养和纯化酵母菌的部分操作步骤，下列说法正确的是()A．步骤②中打开含菌种的试管后需将试管口通过酒精灯火焰灭菌B．步骤④中接种环共需5次灼烧处理C．将接种后的图④平板放入培养箱中培养时无须倒置D．①②③步骤操作时并不都需要在酒精灯火焰旁进行解析：选A。
打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需再次通过火焰，塞上棉塞才可以，A正确；每次接种前后都要灼烧接种环，因此完成步骤④中的5次划线操作共需灼烧接种环6次，B错误；划线接种结束后，将平板倒置后放入培养箱中培养，这样可以防止表面的水分过快挥发和防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，C错误；①②③步骤操作时都需要在酒精灯火焰旁进行，防止被杂菌污染，D错误。
4．(2022·山东日照一模)实践是动手和动脑的过程，也是解决实际问题的过程。
下列有关生物技术实践的叙述，错误的是()A．需灭菌的试管等玻璃器皿可用牛皮纸包好放入干热灭菌箱灭菌B．倒平板后需要持续间歇晃动，以保证固体培养基的表面平整C．平板划线时，每次转换划线角度后都需要灼烧接种环再划线D．微生物实验材料在丢弃前一定要进行灭菌处理以免污染环境答案：B。
2023年老高考生物一轮复习练习34 微生物的培养与应用
课时规范练34微生物的培养与应用1.近年来,随着养殖业的迅猛发展,会产生大量的羊毛废弃物,这些废弃物中含有大量难以分解的角蛋白。
为此,某科研单位从土壤中分离出具有较强羊毛角蛋白降解能力的菌株NJU-05、NJU-07、NJU-10三种,并对其液体发酵条件进行了探究,结果如图1、图2所示。
回答下列问题。
图1图2(1)富集培养:从长期堆积羊毛废弃物处采集土壤样品。
在15 mL基础培养基中加入1 g土壤样品及适量,在温度为37 ℃条件下培养,观察。
重复上述操作,得到富集培养液。
富集培养的主要目的是。
(2)分离纯化:对富集培养液进行,并均匀涂布到分离培养基平板上,37 ℃培养2d后从平板上挑取较大的菌落,进行再次分离纯化,获得单菌落,在此过程中应采用法对培养基进行灭菌处理。
“再次分离纯化”时常用的另一种接种方法为。
(3)综合图1和图2所示信息,在实际生产中应选择菌种作为降解角蛋白的菌种可获得较好的降解效果,其降解的最适条件为。
2.(2021安徽蚌埠第三次质检)北极地区存在着丰富的可用于低温处理有机污水的微生物资源,可从中分离出低温高效降解菌,以解决我国北方地区冬季有机污染水体的净化问题。
请回答相关问题。
(1)除了满足基本的营养条件外,培养时还需要满足降解菌生长对特殊营养物质、(答出2点即可)的要求。
(2)对降解菌进行筛选分离时,先取适量泥样接种到液体培养基中,在10 ℃条件下培养7 d,其目的是。
(3)若要通过观察菌落特征进行鉴定,可用接种环在琼脂固体培养基表面进行操作;也可使用涂布器进行接种,接种前需对涂布器的操作是。
接种后的培养基放在恒温箱内培养一段时间,可根据菌落的等特征对降解菌的类型作出初步判断。
为了排除操作过程中的杂菌污染,还应该在空白平板上接种作为对照。
(4)兴趣小组用涂布法接种了3个平板,并将它们和1个未接种的平板,放入恒温箱培养48 h后统计菌落数,分别是57、53、55和9。
分析未接种的平板上出现菌落的原因是。
微生物的分离与培养
微生物的分离与培养一．考纲要求：班级姓名1.微生物的分离和培养（A级）二．知识梳理考点一培养基1．培养基的营养构成(1)各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、、和无机盐。
(2)不同培养基要满足不同微生物对pH、特殊营养物质及氧气的需求。
易错警示①自养微生物所需的碳源、氮源来自含碳、含氮的无机物，而异养微生物需要的碳源、氮源来自含碳、含氮的有机物，因此可根据培养基中营养物质判断微生物的代谢类型。
②对异养微生物来说，含C、H、O、N的有机化合物既是碳源，又是氮源、能源。
③有些培养基不需要添加特殊营养物质，生物自己能合成，如大肠杆菌能合成某些维生素，作为特殊营养物质。
3.制备固体培养基的流程计算→称量→溶化→→倒平板操作的注意事项：①倒平板的适宜温度是℃左右，温度过高会烫手，过低培养基又会凝固。
②培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，不要完全打开；整个操作过程要在旁进行，避免杂菌的污染。
③平板冷凝后需，这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
④若倒平板时，培养基溅在皿盖和皿底之间的部位，这个平板应该。
考点二微生物培养的无菌操作和接种方法1、进行无菌操作主要是为了防止外来杂菌的入侵，重点是消毒和灭菌。
3、纯化大肠杆菌的方法（1）原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。
例1．下列无菌操作中，错误的是 ( )A．无菌操作的目的是防止杂菌污染 B．用酒精擦拭双手的方法对操作者进行消毒C．实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行D．玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭例2．如右图是微生物平板划线示意图。
划线的顺序为1、2、3、4、5。
下列操作方法正确的是( )A．操作前要将接种环放在火焰旁灭菌 B．划线操作须在火焰上进行C．在5区域中才可以得到所需菌落D．在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌例3．（2015江苏）做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是A．高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖B．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上例4(1)培养基的类型有很多，但培养基中一般都含有水、碳源、和无机盐。
2023版高考生物一轮总复习第10单元生物技术与工程第36课微生物的培养技术及应用教师用书
第36课微生物的培养技术及应用►学业质量水平要求◄1．通过分析培养基各成分在微生物培养中的作用，得出可以通过调整培养基的配方，有目的地培养某种微生物的结论。
(科学思维)2．通过分析选择培养基的原理，理解适者生存的含义。
(生命观念)3．通过微生物的相关实验，学会培养、分离微生物以及微生物计数的实验设计。
(科学探究)考点一微生物的基本培养技术1．培养基(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
(2)种类①按物理状态可分为液体培养基和固体培养基。
②按功能可分为选择培养基和鉴别培养基。
(3)成分：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求。
2．无菌技术(1)含义：在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。
(2)常用方法3．微生物的纯培养(1)概念：由单一个体繁殖所获得的微生物群体是纯培养物，获得纯培养物的过程就是纯培养。
(2)过程：包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。
(3)常用接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。
(4)实例——酵母菌的纯培养1．培养基只能用以培养、分离、鉴定、保存微生物，不能用以积累其代谢物。
( ×) 2．由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。
( √) 3．经高压蒸汽灭菌后的培养基，要冷却至50 ℃左右时，才能在酒精灯火焰附近倒平板。
( √) 4．平板划线时要注意将最后一次的划线与第一次的划线相连。
( ×) 【教材细节命题】(选择性必修3 P12～13旁栏思考)(1)在未接种的培养基表面是否有菌落生长？没有。
如果有，说明了培养基被杂菌污染。
(2)在接种酵母菌的培养基上，如果你观察到了不同形态的菌落，你能分析出可能是由哪些原因引起的吗？如果观察到了不同形态的菌落，可能是接种的菌种不纯或者无菌操作不规范等原因引起的。
1．常见物品的消毒或灭菌方法(1)消毒方法及适用对象(2)灭菌方法及适用对象2．平板划线操作的注意事项(1)灼烧接种环，待其冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。
高三生物一轮复习《微生物的培养和应用》真题研悟
《微生物的培养和应用》真题研悟一、微生物是实验室培养【教材清单】1.各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
2.消毒是指是指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物；灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
3.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。
倒平板要待培养基冷却至50℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。
4.微生物接种最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，其结果是在培养基上得到单个菌落。
【名师点读】平板划线法与稀释涂布平板法的比较：【真题精练】1.（2018·全国卷Ⅱ）在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。
回答下列问题：（1）在实验室中，玻璃和金属材质的实验器具（填“可以”或“不可以”）放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。
（2）牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法，与煮沸消毒法相比，这两种方法的优点是。
（3）密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒，其原因是紫外线能，在照射前，适量喷洒，可强化消毒效果。
（4）水厂供应的自来水通常是经过（填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”）消毒的。
（5）某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时，若压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度，最可能的原因是。
1.（1）可以（2）在达到消毒目的的同时，营养物质损失较少（3）破坏DNA结构（4）消毒液（5）氯气未将锅内冷空气排尽【解题指导】理清实验室和日常生产、生活中常用的消毒和灭菌方法是解答此题的关键。
【解析】（1）能耐高温的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等可以放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。
（2）煮沸消毒法所用温度高且时间长，易破坏牛奶中的营养物质；巴氏消毒法使用的温度较低，高温瞬时消毒法的温度虽然高，但时间非常短，可杀死大部分微生物，但营养物质不会被破坏。
【与名师对话】高考生物一轮复习 1
3．生物技术在食品加工及其他方面的应用：(1)从生物材 料中提取某些特定的成分。(2)运用发酵加工食品的基本方法。 (3)植物的组织培养。(4)蛋白质的提取和分离。(5)PCR技术的 基本操作和应用。
4. 酶的应用与生产生活联系密切，需要掌握相关实验设 计的原理。
5. 果酒、果醋、腐乳的制作常作为背景材料，与微生物 的培养应用等知识一起考查，需要我们注意相关知识间的联 系，把握生产实践中常用微生物的营养与代谢关系、发酵条件 的控制、相应的实验操作要领等。
[答案] (1)尿素 选择 (2)皿盖上会凝有水珠，防止水珠落入培养皿造成污染， 还可使培养基表面的水分更好地挥发
(3)稀释涂布平板 第一步灼烧接种环是防止接种环上有 其他微生物而污染培养基。每次划线前灼烧接种环是为了杀死 上次接种时留下的菌种，使下一次划线时接种环上的菌种直接 来自上次划线的末端，以便通过多次划线后，得到单个的菌落 划线结束后仍要灼烧接种环，以免菌种对环境造成污染和感染 操作者
5．微生物的类型
营养类型 主要(或惟一)碳源 能源 代表菌
光能自养型 光能异养型
CO2 有机物
光能 蓝藻 光能 红螺菌
化能自养型 化能异养型
CO2 有机物
NH3 硝化细菌 有机物 大肠杆菌
例1 培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空 气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是 ( )
①化学消毒 ②灼烧灭菌 ③干热灭菌 ④紫外线消毒 ⑤高压蒸汽灭菌 ⑥巴氏消毒法
在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？
__________________________________________________ ______________________。
[解析] 从土壤中分离出分解尿素的细菌，需用选择性培 养基，惟一的氮源是尿素。接种过程中，最常用的是平板划线 法和稀释涂布平板法两种方法。每次划线前都要灼烧接种环的 目的是杀死上次接种时留下的菌种，使下一次划线时接种环上 的菌种直接来自上次划线的末端，以便通过多次划线后，得到 单个的菌落。操作的第一步和最后一步需灼烧接种环的目的分 别是防止接种环上有其他微生物而污染培养基、以免菌种对环 境造成污染和感染操作者。
高三一轮复习生物课件：专题2课题1微生物的实验室培养
⑥ CaCl2 0.5g
⑦
H2O
100m l
（四）无菌技术
1概念 : 无菌技术泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。 是获得纯净培养物的关键。
主要包括以下几个方面： ①操作空间，操作者的衣服和手需消毒 ②微生物培养器皿，接种用具和培养基需灭菌 ③微生物实验操作应该在酒精灯火焰旁进行 ④应该避免已灭菌处理的材料用具与周围物品接触
三.菌种的保藏：
1.临时保藏： 试管固体斜面培养基上 4℃ 菌种易被污染、变异
2.长期保存： 甘油管藏 1ml甘油＋1ml菌液 －20℃
纯化培养
制备培养基 1.计算
2.称量 3.溶化
4.灭菌
5.倒平板
（凝固后倒置）
接种
平稀 板释 划涂 线布 法平
板 法
培养 保藏
37°C 恒温箱 临 长
时期
(2019年高考-新课标Ⅰ卷) [ 生物──选修1生物技术实践]（15分）
3、请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要， 请选择合适的方法。 ⑴培养细菌用的培养基与培养皿⑵玻棒、试管、烧瓶和吸管⑶实 验操作者的双手
（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒
三.大肠杆菌的纯化培养
分散成单个细胞, 形成单个菌落
实验操作
（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 （二）纯化大肠杆菌 （三）培养12h和24h后，观察并记录
。
（2）若除去成分②，加入（CH2O），该
培养基可用于培养 固氮微生物
。
（3）表中营养成分共有 3
类。
（4）若右表培养基用于菌种鉴定，应该增
加的成分是 琼脂（或凝固剂） 。
编号 成分 含量
① 粉状硫 10g
2024届高考一轮复习生物学案(人教版)第十单元生物技术与工程第2课时微生物的培养技术及应用
第2课时 微生物的培养技术及应用课标要求 1.获得纯净的微生物培养物是发酵工程的基础。
2.阐明在发酵工程中灭菌是获得纯净的微生物培养物的基础。
3.阐明无菌技术是在操作过程中，保持无菌物品和无菌区域不被微生物污染的技术。
4.举例说明通过调整培养基的配方可有目的的培养某种微生物。
5.概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的常用方法。
6.概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法。
考点一 微生物的培养技术及应用1．培养基的配制(1)培养基的概念、用途和类型①概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。
②用途：用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。
③种类：按物理性质分⎩⎪⎨⎪⎧液体培养基↓(加入凝固剂，如琼脂)固体培养基(2)培养基的配方①主要营养物质：水、碳源、氮源、无机盐。
②其他条件：pH 、特殊营养物质和氧气。
如下表：微生物 乳酸杆菌 霉菌 细菌 厌氧微生物 特殊需求添加维生素pH 调至酸性pH 调至中性或弱碱性无氧2.无菌技术(1)目的：获得纯净的微生物培养物。
(2)关键：防止杂菌污染。
(3)消毒与灭菌的比较 项目 消毒灭菌 作用强度 较为温和的理化因素 强烈的理化因素 作用程度杀死物体表面或内部一部分微生物杀死物体内外的所有微生物芽孢和孢子一般不能杀灭能杀灭适用对象实验操作的空间、操作者衣着和双手微生物培养器皿、接种用具和培养基等常用方法煮沸消毒法、巴氏消毒法等湿热灭菌法、干热灭菌法、灼烧灭菌法等(4)注意事项①实验操作时，应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。
②为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在超净工作台上并在酒精灯火焰附近进行。
3．微生物的纯培养(1)概念辨析(2)酵母菌纯培养的操作步骤(3)平板划线法操作步骤下图是平板划线操作的示意图，据图回答下列问题：(1)用图中字母和箭头表示平板划线操作的正确步骤：d→b→f→a→e→c→h→g。
高中生物高考一轮总复习讲义 选修1 专题1 传统发酵技术的应用
专题1 传统发酵技术的应用
忆教材 溯本源
研考点 破疑难
明题型 析典例
练真题 悟考情
课时作业
研
基础导学
一、果酒和果醋的制作 1．制作原理[填表]
类 ①有氧条件下，进行________，大量繁殖 ②无氧条件下，进行________，反应式为 ____________________ ①当氧气和糖源都很充足时，可将糖分解
二、腐乳的制作 1．原理[填空] (1)菌种：主要是________。 (2)作用特点： 蛋白酶 蛋白质 ――→ ________ 脂肪酶 脂肪 ――→ ________
2．影响条件[填空] (1)卤汤配制：卤汤是由酒及各种________配制而成 的。加酒既________微生物的生长，又能使腐乳具有独特 的香味。香辛料不但能调制腐乳的风味，还具有________ 作用。
④将温度严格控制在 18～25 ℃， ④将温度严格控制在 30～35 ℃， 时间控制在 10～12 d 左右。发酵 不 同 过 程 并注意适时通过充气口充气
旺盛期的 CO2 产量非常大，要及 ⑤检测指标：果醋的制作是否成 时排气，防止发酵瓶爆裂 功可以通过观察菌膜的形成、嗅
⑤检测指标：7～10 d 以后，可以 味和品尝初步鉴定，再通过检测 开始进行取样检验工作。例如， 可以嗅味和品尝、用重铬酸钾检 和比较醋酸发酵前后的 pH 进一 步鉴定。还可以在显微镜下观察
腐败变质 (2)×
三、1.(1)× 2．(1)玫瑰红
(2)越深
考点1
果酒和果醋的制作
知识必备 1．果酒和果醋的制作步骤的比较
制果酒 相 同 过 程 制果醋 ①选材和材料处理：选择新鲜的葡萄，先用清水冲洗葡萄 1～ 2 遍除去污物后，再去枝梗 ②制作发酵液，防止杂菌污染 ③发酵：将葡萄汁注入发酵瓶，注意液体量不要超过发酵瓶 总体积的 2/3
2023年高考生物一轮考点复习选择性必修3第十单元第2讲微生物的培养技术及应用
练案[35]选择性必修3第十单元生物技术与工程第2讲微生物的培养技术及应用A组一、选择题1．在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。
下列关于消毒和灭菌的叙述，错误的是( B )A．牛奶的消毒常用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法B．水厂供应的自来水通常是经过高锰酸钾消毒的C．用紫外灯对密闭教室消毒前，适量喷洒消毒液可强化消毒效果D．培养基不能放入干热灭菌箱中进行干热灭菌解析：高锰酸钾是强氧化剂，不宜用于自来水消毒，B项错误。
2．(2023·山东烟台模拟)下列与微生物培养相关的说法错误的是( B )A．平板上的一个菌落一般是由一个细胞繁殖而来的B．稀释涂布平板法对微生物计数时，欲将1 mL样品稀释10倍，应加入10 mL无菌水C．平板划线法接种微生物后，将平板倒置放入培养箱中，防止冷凝水倒流污染培养基D．制作牛肉膏蛋白胨固体培养基时，应将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯中再加水去纸解析：稀释涂布平板法对微生物计数时，欲将1 mL样品稀释10倍，只需加入9 mL无菌水，B错误。
3．某同学将1 mL土壤样液稀释100倍，在3个平板上用稀释涂布平板法分别接入0.1 mL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、57和58。
下列叙述错误的是( D )A．可得出土壤样液中活菌数大约为5.7×107个/LB．此方法统计的菌落数往往比实际的活菌数目低C．一般选择菌落数在30～300的平板进行计数D．显微镜直接计数法统计的都是稀释液中活菌数解析：根据分析可知，每升样品中的活菌数为(56＋58＋57)÷3÷0.1×1 000×100＝5.7×107(个)，A项正确；当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以此方法统计的菌落数往往比实际的活菌数目低，B项正确；显微镜直接计数法统计的是稀释液中所有个体的数目，包括活菌和死菌，D项错误。
2020届高中生物一轮复习人教版 发酵工程作业含答案
2020届一轮复习人教版发酵工程作业1．做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是()A．高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖B．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上解析：选D在高压灭菌的操作过程中，加热结束后应让灭菌锅内温度自然下降，待压力表的指针指到零时，打开放气阀，旋松螺栓，打开盖子。
倒平板时，用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，而不是完全取下放到一边。
接种环经火焰灼烧灭菌后应在火焰旁冷却后，再用其挑取菌落。
在微生物的培养中，一般将培养皿倒置，在皿底上用记号笔做标记。
2．(2019·滨州模拟)微生物培养过程中，要十分重视无菌操作。
现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染。
请分析下列操作中错误的是()①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢②接种操作要在酒精灯火焰附近进行③无菌繁殖脱毒苗时，植物的外植体要进行消毒④家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌⑤培养基要进行高压蒸汽灭菌⑥加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌A．①③B．②④C．③⑤D．④⑥解析：选D无菌操作包括消毒和灭菌。
需进行消毒处理的有植物的外植体及操作人员的双手等，需进行灭菌的有器皿、培养基、添加剂(指示剂或染色剂)等。
煮沸可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢，属于消毒；为防止空气中杂菌污染，接种操作要在酒精灯火焰附近进行；家庭制作葡萄酒时所利用的微生物是葡萄表面的酵母菌，故不能灭菌；培养基常进行高压蒸汽灭菌。
故④⑥操作错误。
3．(2019·乐山联考)下列关于有关传统发酵技术的叙述，正确的是()A．在果酒的制作过程中，应先去除葡萄的枝梗，再进行多次反复冲洗，这样才可以洗得彻底B．果酒、果醋的发酵装置中，充气口的作用是在发酵时连接充气泵进行充气，排气口的作用是在酒精发酵时排出二氧化碳C．豆腐上长满毛霉后，需加盐腌制8天左右，这样可以抑制微生物的生长，避免豆腐变质，又能使豆腐析出水分，使豆腐块变硬D．制作泡菜时要选火候好、无裂纹、无砂眼、盖子吻合好的坛子，需要加水密封，目的是隔绝空气，抑制细菌繁殖解析：选C在果酒的制作过程中，应先冲洗葡萄，然后再去除葡萄的枝梗，以避免除去枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会；冲洗以洗去灰尘为目的，不能多次反复冲洗，以防洗去附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。
生物一轮复习练习33微生物的培养和应用含解析
第2讲微生物的培养和应用一、单项选择题（每小题给出的四个选项中只有一个符合题目要求)1．下列关于统计菌落数目方法的叙述，错误的是（C）A．采用平板计数法获得的菌落数往往少于实际的菌落数B．当样品的稀释度足够高时,一个活菌会形成一个菌落C．为了保证结果准确，一般采用密度较大的平板进行计数D．在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数差别不大,则应以它们的平均值作为统计结果[解析]当两个或多个活菌连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落，因此统计的菌落数往往比活菌的实际数目少。
一般选择菌落数在30~300的平板计数，密度过大会使计数结果偏小，影响结果的准确性.至少涂布3个平板,作为重复组，取其平均值计数能增强实验的说服力和准确性。
2．下列是从土壤中筛选纤维素分解菌的实验步骤，正确的是（C）①土壤取样②称取10 g土壤加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中③吸取0。
1 mL进行平板涂布④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度A．①→②→③→④ B.①→③→②→④C．①→②→④→③ D.①→④→②→③[解析］在分离土壤中某细菌时，应先选取土样（10 g),然后加无菌水获得土壤浸出液，并进行不同倍数稀释，最后将稀释液涂布到培养基表面进行培养，并分离和计数.3．（2019·甘肃武威十八中高三月考)关于培养基的配制说法不正确的是（B）A．在配制培养乳酸杆菌的培养基时，需加入维生素B．微生物的适应性强，配制培养基时可以不考虑pHC．虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有碳源、氮源、水和无机盐D．配制培养基时要注意各种养分的浓度和比例[解析］培养基除需要满足碳源、氮源、水和无机盐几种营养物质外，还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求，如培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，A 正确；B错误；虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有碳源、氮源、水和无机盐，C正确;不同微生物的生长对各种营养物质的需求不同，配制培养基时要注意各种养分的浓度和比例，D正确.4．（2020·北京高三期末)下列有关微生物培养的叙述正确的是(D）A．通常使用液体培养基分离获得细菌单菌落B．若培养基需要调节pH,应该在灭菌后进行C．用显微镜直接计数固体培养基中微生物数量D．倒置平板可防止培养基被滴落的冷凝水污染[解析］常用固体或半固体培养基分离获得细菌单菌落，液体培养基无法分离，A错误；若培养基需要调节pH，应该在灭菌前进行,B错误；显微镜直接计数法是测定培养液中微生物数量的方法，固体培养基上用稀释涂布法直接计数单个菌落数，C错误；平板倒置是避免冷凝的液体掉到培养基上，污染培养基，D正确.5．(2018·上海高三）下表是培养某种细菌的培养基。
39 微生物的培养与应用-2023年高考生物一轮复习小题分层练(解析版)
专题十三传统发酵技术与微生物的应用课时39 微生物的培养与应用1．培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶，上述内容所采用的灭菌或消毒方法依次是（）①化学药物消毒①灼烧灭菌①干热灭菌①紫外线消毒①高压蒸汽灭菌①巴氏消毒法A．①①①①①①B．①①①①①①C．①①①①①①D．①①①①①①【答案】C【解析】培养基需用湿热灭菌（高压蒸汽灭菌）；培养皿能耐高温，需用干热灭菌；接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果；实验操作者的双手可用化学药剂进行消毒，如用酒精擦拭双手；空气可用紫外线消毒；为不破坏其营养成分，对牛奶可采用巴氏消毒法。
2．不同的微生物对营养物质的需求各不相同。
下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是（）A．氮源物质为该微生物提供必要的氮元素B．碳源物质也是该微生物的能源物质C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质D．为制成固体培养基往往需要加入琼脂作为凝固剂【答案】B【解析】氮源物质为该微生物提供必要的氮素，A正确；该碳源是二氧化碳，属于无机物，不能作为微生物的能源物质，B错误；无机盐是该微生物不可缺少的营养物质，C正确；琼脂的作用是在固体及半固体培养基中充当凝固剂，D正确。
3．下列关于微生物纯化培养的叙述，错误的是（）A．涂布平板时应先将培养皿盖置于实验操作台上B．微生物的纯化培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤C．用平板划线法和稀释涂布平板法都能在固体培养基上得到单菌落D．倒平板操作应等培养基冷却至50①左右时，在酒精灯火焰附近进行【答案】A【解析】涂布平板时不能完全掀开培养皿盖，将其置于实验操作台上，只需要打开一条缝隙，A错误；微生物的纯化培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤，B正确；用平板划线法和稀释涂布平板法都能在固体培养基上得到单菌落，C正确；D、倒平板操作应等培养基冷却至50①左右时，在酒精灯火焰附近进行，D正确。
4．在稀释涂布平板法对微生物进行计数时的错误操作是（）A．将1mL样品稀释10倍，需加入10mL无菌水B．吸取菌液的移液管需要干热灭菌避免杂菌污染C．将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃D．稀释涂布平板法既能分离纯化微生物，又能计数【答案】A【解析】将1mL样品稀释10倍，需加入9mL无菌水，A错误；吸取菌液的移液管需要干热灭菌避免杂菌污染，B正确；将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃，将涂布器灭菌，C正确；稀释涂布平板法既能分离纯化微生物，又能计数，D正确。
高三生物一轮复习课件第37讲微生物的培养技术及应用
②在火焰旁冷却接 种环，拔出酵母菌 培养液试管的棉塞
③试管口通过火焰
④在火焰附近用接 种环蘸取一环菌液
⑦灼烧接种环，待其冷却后， 从第一次划线的末端开始作第 二次划线。重复以上操作，作 第三、四、五次划线。
⑥将皿盖打开一条缝隙， 将沾有菌种的接种环迅速 伸入平板内，划3-5条平 行线，盖上皿盖。
⑤试管口通过火 焰，并塞上棉塞
什么目的？
无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。
2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适 的方法。 (1)培养细菌用的培养基与培养皿 (2)玻棒、试管、烧瓶和吸管 (3)实验操作者的双手
(1)、(2)需要灭菌；(3)需要消毒。 培养基用高压蒸汽灭菌， 培养皿、玻璃棒、试管、烧瓶、吸管可以采用干热灭菌法， 实验操作者的双手可以用酒精擦拭。
◆微生物的共同特点：个体微小、结构简单
微生物结构简单、形体微小，眼睛看不到，若想得到纯净的微生物， 就必须对其进行培养和分离。
1. 防止杂菌污染，获得纯净的微生物培养物 是研究和应用微生物的 前提，也是发酵工程的重要基础。
2.实验室培养微生物的条件：
①为微生物提供合适的 营养和环境 条件；
培养基
②要确保 其他微生物无法混入
划分标准 培养基种类
特点
用途
液体培养基
不加凝固剂
工业生产
半固体培养基 注：琼脂仅作为凝固剂不为微生物
物理性质
生长提供能量和碳源
固体培养基
加凝固剂，如琼脂
观察微生物的运动、 分类鉴定
微生物分离、鉴定、 活菌计数、保藏菌种
天然培养基 化学成分 合成培养基
含化学成分不明确的天然物质 培养基成分明确
2022年高考生物一轮考点复习 第十单元 生物技术与工程 第1课 微生物的培养技术及应用
第十单元生物技术与工程第1课微生物的培养技术及应用【课标要求】1.阐明在发酵工程中灭菌是获得纯净的微生物培养物的前提。
2.阐明无菌技术是在操作过程中，保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染的技术。
3.举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物。
4.概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的常用方法。
5.概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法。
【素养目标】1.掌握培养基的成分及其作用，比较平板划线法和稀释涂布平板法的异同；掌握无菌技术及微生物的纯培养。
(科学思维)2.设计实验探究微生物培养的条件，利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产中有关微生物的计数。
(科学探究)3.关注有害微生物的控制及宣传健康生活等。
(生命观念、社会责任)一、微生物的培养技术1．培养基的配制：概念人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质种类按物理性质液体培养基固体培养基按用途选择培养基鉴别培养基成分主要成分水、碳源、氮源和无机盐特殊的培养成分pH、特殊营养物质以及O2等2.无菌技术：(1)概念：在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。
(2)关键：防止杂菌污染。
(3)目的：获得纯净的微生物培养物。
(4)两种无菌技术的比较：(5)常见灭菌方法在操作中的注意事项：3.微生物的纯培养：(1)概念：由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，获得纯培养物的过程就是纯培养。
(2)步骤：配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等。
(3)酵母菌的纯培养。
①菌落的概念：由分散的微生物繁殖而来的肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体。
②接种方法：最常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。
③步骤：制备培养基、接种和分离酵母菌、培养酵母菌。
1．培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，有时还需要加入一些特殊的物质。
(√)2．消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害。
高中生物高考一轮总复习讲义 选修1 专题2 微生物的培养与应用
(4)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂， 若指示剂变蓝，则说明筛选到分解尿素的细菌。( )
三、分解纤维素的微生物的分离[填空] 1．纤维素酶 (1)组成：一种________酶，它至少包括三种组分，即 ________。 C1酶 葡萄糖 (2)作用：纤维素――→________ ――→ 葡萄糖 CX酶 苷酶 2．筛选方法 (1)方法：刚果红染色法，即通过是否产生________来 筛选纤维素分解菌。 (2)培养基：以________为唯一碳源的选择培养基。
高中生物高考复习讲义
选修部分
选修1
生物技术实践
专题2 微生物的培养与应用
忆教材 溯本源
研考点 破疑难
明题型 析典例
练真题 悟考情
课时作业
研
基础导学
一、微生物的分离与培养 1．培养基[判断正误] (1)据物理状态的不同，培养基只有液体培养基和固体 培养基两种类型。( )
(2)培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四种 成分。( )
方法 平板划线法 (1)接种环的灼烧： 注 意 事 项 ①第一次划线前：杀死接种环上的 微生物，避免污染培养物 ②每次划线前：杀死残留菌种，保 证每次划线菌种来自上次划线末端 ③划线结束后：杀死残留菌种，避 免污染环境和感染操作者 稀释涂布平板法 (1)稀释操作时：每支 试管及其中的9 mL
水、移液管等均需灭 菌；操作时，试管口和 移液管应在离火焰1～2 cm处
3．实验流程 土壤取样：富含________的环境 ↓ 选择培养：用________培养，以增加纤维素分解菌的 数量 ↓ 梯度稀释 ↓
涂布平板：将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基 上 ↓ 挑选产生透明圈的菌落：产生________的菌落周围出 现透明圈
高考生物一轮复习 第十一单元 生物技术实践 第42讲 微生物的利用 新人教版高三全册生物试题
第42讲微生物的利用考点一微生物的分离与培养1.培养基(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
(2)营养组成：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。
此外，还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特殊营养物质的要求。
(3)种类：按照物理性质可分为液体培养基和固体培养基。
2.无菌技术(1)含义：指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。
(2)关键：防止外来杂菌的入侵。
(3)不同对象的无菌操作方法(连线)3.大肠杆菌的纯化培养(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基①操作步骤计算→称量溶化灭菌倒平板②倒平板的方法及注意事项a.请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程：丙→乙→甲→丁。
b.甲、乙、丙中的灭菌方法是灼烧灭菌。
c.丁中的操作需要等待平板冷却凝固才能进行。
(2)纯化大肠杆菌的方法①纯化培养原理：想方设法在培养基上得到由一个细菌繁殖而来的肉眼可见的菌落，即可获得较纯的菌种。
②纯化大肠杆菌的关键步骤是接种。
③常用的微生物接种方法有两种a.平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
b.稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
系列稀释操作(如下图所示)：涂布平板操作(如下图所示)：(3)菌种的保存方法①对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。
②对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。
[诊断与思考]1.判断下列说法的正误(1)倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上( ×)(2)培养基分装到培养皿后进行灭菌( ×)(3)从有机废水中分离分解有机物的微生物时，接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养( ×)(4)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害( √)(5)培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，有时还需要加入一些特殊的物质( √)(6)下图中甲为平板划线法中最重要的环节，乙为操作的结果：①每一次划线后都要将接种环灼烧( √)②除第一次划线外，每一次划线的起点都是第一次划线的末端( ×)(7)用稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时，只要稀释度足够高，就能在培养基表面形成单个菌落( √)2.如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，请思考：(1)获得图A效果和B效果的接种方法分别是什么？提示获得效果A的接种方法为稀释涂布平板法，获得效果B的接种方法为平板划线法。
【新教材生物一轮复习】选择性必修3 第10单元 第2讲 微生物的培养技术及应用
2．某同学在利用稀释涂布平板法纯化土壤中的细菌时，发现培 养基上的菌落连成一片，最可能的原因是什么？为了防止杂菌污染， 有同学建议加入抗生素，你觉得可以吗？并说明理由。
提示：最可能的原因是菌液浓度过高(土壤溶液稀释不够)。不可 以，因为抗生素不但能杀灭杂菌，而且也可以杀灭目的菌，因此在 培养基上不可以加入抗生素。
(3)统计甲乙两组培养皿中的菌落，乙组中菌落数比甲少得多， 实验结果说明肥皂洗手不能彻底清除手上的微生物。为避免手上微 生物在无菌操作中污染培养基，洗过的手还应进行______________ ___________________________________________________________ 等方法处理(答出 1 种即可)。
(2)实验中“将拇指在培养基上轻轻按一下”相当于微生物培养 操 作 中 的 ________ ， 该 操 作 应 该 在 酒 精 灯 火 焰 附 近 进 行 ， 原 因 是 ___________________________________________________________ _________________________________________________________。
平板示意图
平板划线法 平板划线操作
接种环
稀释涂布平板法 系列稀释操作和涂布平板操 作
涂布器
2.平板划线操作中灼烧接种环的目的
灼烧时间
灼烧目的
第一次划线前
杀死接种环上原有的微生物，防止外来杂菌污 染培养基
第二次及以后每次 杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次
划线前
划线的菌种直接来源于上次划线的末端
杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境 最后一次划线后
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微生物的分离和纯培养技术
一、培养基
1、培养基的概念：人们按照______________对营养物质不同的_______，配制出供其生长繁殖的________________叫培养基。
根据其物理状态，一般分为_______________________和固体培养基。
在液体培养基中加入凝固剂_____________后，就能制成__________________
2、培养基的营养成分：各种培养基的配方不同，但一般都含有__ 、、、和______等最基本的生命物质。
在此基础上还要满足微生物生长对_________、特殊营养物质以及_________的要求。
二、无菌技术
1、消毒方法：___________________、__________________、化学药剂消毒法
2、灭菌方法：___________灭菌、_______________灭菌、___________________灭菌
【思考】无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？
【思考】请选用合适的方法为下列材料或用具进行消毒或灭菌
（1）培养细菌用的培养基与培养皿。
___________（2）玻棒、试管、烧瓶和吸管。
__________ （3）实验操作者的双手。
___________
三、分离和纯培养大肠杆菌的实验操作
1、制备培养大肠杆菌的培养基：即牛肉膏蛋白胨固体培养基，一般步聚：计算、_______、_______、_______、倒平板。
2、接种和纯化大肠杆菌
①平板划线法：是通过______________在琼脂固体培养基表面划线的操作，将聚集的菌种___________________到培养基表面。
在数次划线后培养，可以分离到由_____个大肠杆菌繁殖而来的肉眼可见的菌落
②稀释涂布平板法：是将菌液进行_______________________稀释，再将不同稀释度的菌液_____________涂布到琼脂________培养基的表面进行培养。
在涂布稀释度_____________的培养基表面上可获得单个菌落。
课题延伸：对于频繁使用的菌种我们可以采用_______________的方法，但这种方法保存的时间不长，菌种易被污染或产生变异，需长期保存的菌种可采用___________________的方法放在___________℃的冷冻箱中保存。
【讨论】1、平板划线时，为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？
答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；
每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的未端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到单个菌落。
划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环
上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。
2、在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再划线？
答：以免接种环温度太高，杀死菌种。
3、在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？
答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
【成果与评价】
（一）培养基的制作是否合格
如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2天后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。
（二）接种操作是否符合无菌要求
如果培养基上生长的菌落的颜色、形状和大小基本一致，并符合大肠杆菌的菌落特点，则说明操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明在接种过程中，无菌操作还未达到要求。
（三）是否进行发及时细致的观察与记录
培养12h 与24h 的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同，及时观察与记录的同学会发现这一点。
【思考】
比较无土栽培技术、植物组织培养技术、微生物培养技术在设计思路和具体操作上的异同
【巩固练习】
1、下列物质中，不能用作酵母菌碳源的是
A．含碳有机物B。
蛋白胨C。
含碳无机物D。
花生粉饼等天然物质2、下面对发酵工程中灭菌的理解，不正确的是
A．防止杂菌污染B。
灭菌就是杀死培养基中的杂菌C．培养基和发酵设备都必须进行灭菌、消毒D。
灭菌必须在接种前
3、在光亮处用一种培养液分别培养绿藻和酵母菌，其结果如图所示，造成这种结果的原因是培养液中
A．缺少无机盐B。
含氧量太高
C。
缺少有机养分D。
不含二氧化碳
4、蓝藻常利用的碳源、氮源依次是
A．CO2、氨基酸B。
氨基酸、葡萄糖C。
CO2、硝酸盐D。
葡萄糖、蛋白胨5、（多选）利用稀释涂布平板法纯化的大肠杆菌，经培养后发现培养基上出现发多种菌落，可能的原因是
A．培养基制备过程中被杂菌污染B。
接种过程中，无菌操作不符合要求
C．系列稀释时，无菌操作不符合要求D。
由大肠杆菌的种类不同造成的
6、细菌培养基常在121℃压力锅中灭菌。
如果只是在100℃的温度下将细菌培养基灭菌，以
下哪种生物仍会存活
A．大肠杆菌 B。
一种青霉 C。
炭疽杆菌芽孢 D。
沙门氏菌
7、糖类是微生物最常用的碳源，因此在配制培养基时
A．糖类越多越好 B。
糖类越少越好
C．异养型微生物尽可能多提供糖类 D。
自养型微生物不用供应糖类
8、将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱的目的是
A．对比观察培养基有没有被微生物利用 B．对比分析培养基上是否生有杂菌
C．没必要放入未接种的培养基 D。
为了下次接种时再使用
9、有关稀释涂布平板法，叙述错误的是
A．首先将菌液进行一系列的梯度稀释
B．然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面
C．适宜条件下培养
D．结果都可在培养基表面形成单个菌落
10、为了保持菌种的纯净需要进行菌种的保藏，下列有关叙述不正确的是
A．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法
B．临时保藏的菌种一般是接种到试管的固体斜面培养基上
C．临时保藏的菌种容易被污染或产生变异
D．对于需要长期保存的菌种，可以采用-4℃低温保藏的方法
11、培养基是人工配制的适合不同微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养物质。
先用完全培养基培养混合菌种，然后分别放在A、B、C三种特殊培养基上培养，分别得到菌落①、②、
请分析回答：
（1）菌落③同化作用类型最可能是______________
A．光能自养型 B。
化能自养型 C。
异养型 D。
A或B
（2）如果要获得具有固氮能力的菌株，应选用菌落_______；如果要培育获得大量蛋白酶的菌株，应选用菌落__________
（3）从题中分析可见，生物进化的内在因素是_________________。
12、在当前国家农业结构调整过程中，政府鼓励农民依靠科技致富。
食用菌的栽培是其中一项热门技术。
首先对食用菌栽培室进行清扫和消毒处理，准备食用菌栽培所需的各种原料和用具，然后从菌种站购来各种食用菌菌种。
培养蘑菇时常使用的原料为棉籽壳、花生饼粉、朽木等，再喷洒适量的水，加入一定量的尿素等。
请简答下列问题：
（1）蘑菇培养基（菌床）中要加入大量的有机质。
原因是_________________________ （2）菌床在接种前要进行灭菌处理，否则很容易长出大量的霉菌。
霉菌与蘑菇的关系一般为______________
（3）培养过程中发现培养基上长出了其他杂菌，经鉴定为细菌，细菌与蘑菇的关系为______，
在培养基上施用适量的___________即可抑制细菌生长。
（4）蘑菇的代谢类型为________________________，在生态系统的成分中属于________，其细胞结构与植物细胞相比无_________。
（5）种蘑菇所用菌种一般是亲代蘑菇产生的一些褐色粉末，每粒粉末实际是一个______。
这种生殖方式在生物界属于___________生殖。