基于气相色谱―质谱技术的小青龙汤证大鼠血液代谢组学研究
小青龙汤治疗呼吸系统疾病的研究概况
小青龙汤治疗呼吸系统疾病的研究概况张培旭;蒋时红;吴耀松【摘要】了解小青龙汤治疗呼吸系统疾病的临床运用和实验研究现状及发展方向.通过收集、总结和分析近10年的相关文献发现:小青龙汤在临床中多用于治疗哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺炎、急性支气管炎、过敏性鼻炎、肺纤维化、急性肺损伤和急性呼吸窘迫综合征等呼吸系统疾病,并取得了良好的治疗效果;小青龙汤可通过止咳平喘、抗炎、抗过敏、增强机体免疫力等机制发挥其治疗呼吸系统疾病的作用.【期刊名称】《中医研究》【年(卷),期】2017(030)010【总页数】3页(P75-77)【关键词】小青龙汤/治疗应用;呼吸系统;机制;临床应用;实验研究;综述【作者】张培旭;蒋时红;吴耀松【作者单位】河南中医药大学,河南郑州450046;河南中医药大学,河南郑州450046;河南中医药大学,河南郑州450046【正文语种】中文【中图分类】R289.5小青龙汤是汉代张仲景所创的一首经典方剂，由麻黄、芍药、桂枝、五味子、干姜、半夏、细辛和炙甘草组成，具有散寒解表、温肺化饮之效[1]，主治外感风寒、水饮内停，症见恶寒、发热、咳喘气逆、胸闷憋喘、咳痰清稀或泡沫痰、舌苔白腻或白滑、脉弦滑或弦紧等。
《伤寒论》和《金匮要略》中均有小青龙汤的记载。
《伤寒论·辨太阳病脉证并治中第六》曰：“伤寒，表不解，心下有水气，干呕，发热而咳，或渴、或利、或噎，或小便不利，少腹满，或喘者，小青龙汤主之。
”笔者通过历代医家的总结和发展，结合中医学理论和现代研究成果，对目前临床运用小青龙汤治疗呼吸系统疾病的相关机制进行研究，综述如下。
支气管哮喘是呼吸系统常见病，临床以发作性喘息、气急、胸闷、咳嗽为主要症状，中医学称之为“哮证”。
哮喘的发病机制十分复杂，目前在全球近1亿的哮喘患者中，有50%属于难以控制的哮喘[2]。
有研究者[3-6]发现：小青龙汤加减在改善支气管哮喘患者的主要临床症状如喘息、哮鸣音、胸闷、咯痰等方面具有明显优势，特别是在化痰方面疗效显著，能提高患者肺功能，且用药安全。
基于气相色谱-飞行时间质谱技术的佐剂性关节炎大鼠尿液代谢组学的研究
１．１ 仪器与试剂 Ａｇｉｌｅｎｔ ７８９０Ａ 气 相 色 谱 仪 （ 美 国 Ａｇｉｌｅｎｔ 公 司） ； ＬＥＣＯ Ｃｈｒｏｍａ ＴＯＦ ＰＥＧＡＳＵＳ ＨＴ 质谱仪（ 美 国 ＬＥＣＯ 公司）； Ｒｘｉ⁃５Ｓｉｌ ＭＳ 毛细管柱（美国 Ｒｅｓｔｅｋ 公司）； ＰＶ⁃２００ 足趾容积测量仪（ 成都泰盟软件有 限公司） ； ＧＬ⁃２０Ａ 全自动冷冻高速离心机（ 湖南仪 器仪表总厂离心机厂） ； Ｅｃｌｉｐｓｅ ８０ｉ 显微镜（ 日本 Ｎｉｋｏｎ 公司） ； ＬＮＧ⁃Ｌ２ × ９６ 冷冻浓缩干燥仪 （ 太仓 市华美生化仪器厂） ； ＭＤＦ⁃Ｕ７１Ｖ 超低温冰箱 （ 日 本三洋公司） 。 ＦＣＡ、脲酶（ 美国 Ｓｉｇｍａ 公司） ； Ｌ⁃２⁃氯苯丙氨 酸（上海恒柏生物科技有限公司）； Ｎ，Ｏ⁃双三甲基 硅基三氟乙酰胺（ ＢＳＴＦＡ，含 １％ （ ｖ ／ ｖ） 三甲基氯硅 烷（ ＴＭＣＳ） ） （ 美 国 ＲＥＧＩＳ 公 司） ； 甲 醇 为 色 谱 纯 （ 国药集团化学试剂有限公司） ；甲醛（ 纯度＞３６％ ） 、 氯仿（ 纯度 ＞ ９９������ ８％ ） （ 中国阿达玛斯公司） ；甲氧胺 盐酸 盐 （ 纯 度 ＞ ９８％ ） 、 吡 啶 （ 纯 度 ＞ ９９������ ５％ ） （ 美 国 Ｓｉｇｍａ⁃Ａｌｄｒｉｃｈ 公司） 。 １．２ ＡＡ 模型的建立 ＳＤ 雄性大鼠 ２０ 只，体重（ ２２０ ± ２０） ｇ，由安徽
Ｍｅｔａｂｏｌｏｍｉｃｓ ｓｔｕｄｙ ｉｎ ｒａｔ ｕｒｉｎｅ ｏｆ ａｄｊｕｖａｎｔ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ｕｓｉｎｇ ｇａｓ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ⁃ｔｉｍｅ⁃ｏｆ⁃ｆｌｉｇｈｔ ｍａｓｓ ｓｐｅｃｇ２， ＪＩＡＮＧ Ｈｕｉ１， ＨＡＮ Ｙａｎｑｕａｎ１， ＬＩ Ｙｕｘｉｎ２
第６期
小青龙汤对肺癌大鼠VEGFVEGFR信号通路的影响研究
小青龙汤对大鼠VEGF/VEGFR信号通路的影响研究李慧、，冷静、，赵磊0(1.新疆医科大学第二附属医院，新疆乌鲁木齐830000；.新疆医科大学，新疆乌鲁木齐830000)［摘要］基于VEGF/VEGFR信号通路探讨小青龙汤对肺癌大鼠的作用及机制。
取24只成年雄性SD大鼠，利用尾静脉注射含WalPas-256细胞的腹水细胞悬液法建立肺癌模型，造模完成后随机分为模型组、小青龙汤组、贝伐珠单抗组、小青龙汤联合贝伐珠单抗组各6只，另取6只大鼠不做任何处理作为对照组。
小青龙汤组给予小青龙汤10mL/kg灌胃，贝伐珠单抗组给予贝伐珠单抗2mg/kg腹腔注射，小青龙汤联合贝伐珠单抗组给予小青龙汤10mL/kg灌胃及贝伐珠单抗2mg/kg腹腔注射，模型组及对照组灌胃给予等量生理盐水，均1次/i,连续28i。
实时定量PCR法检测各组大鼠肺组织中pl6、p21、p53 mRNA表达情况，流式细胞术检测肺组织细胞凋亡率，苏木精-伊红染色法观察肺组织病理学变化,Western blc-法检测肺组织中VEGF、VEGFR2表达水平。
与模型组比较，小青龙汤组、贝伐珠单抗组及小青龙汤联合贝伐珠单抗组大鼠肺组织中pl6、p21、p53mRNA相对表达量和VEGF、VEGFR2表达水平均显著降低(P均＜0.05)，肺细胞凋亡率均显著升高(P均＜0.05)，肺组织病理学明显改善，且小青龙汤联合贝伐珠单抗组较其他组变化更明显(P均＜0.05)。
小青龙汤能够促进大鼠肺癌细胞凋'，改善肺组织病理学变化，其机制可能与调节VEGF/VEGFR信号通路有关。
［关键词］小青龙汤；肺癌；VEGF/VEGFR信号通路dci：10.3969/j.issn.1008-8849.2021.06.006［中图分类号］R-332［文献标识码］A［文章编号］108-8849(2021)06-0598-05 Effect of Xiaoqiaglong Deccction on VEGF/VEGFR signal pathway ia—ng ccnccr raieLI Hui1,LENG JUg1,ZHAO Lei4(1.The Seccui Affiliated Hospital oS Xinjiana Medical Universitu,Urumqi830000,Xinjiana,China；2.Xinjiang Medical Utneresnhs，Ueumqn830000，Xntunnte，Chntn)AbstracS:Objective It is to stuUs the effect anC mechanism oS XiaoqinaPua Deccctiou ou Pua canccs in rats based ou the VEGF/VEGFR signal pathway.Methods Tweotu-fous adult male SD rats were selected and given the ascites cell sus-peosiou ceutaining Walkeu256ceUs bs injectiou into the tail vein to estadlisk luna canccs models.After the modelinc was completed,they were raniomp divibed into model group,Xiaouinaloua Deccctiou group,bevacizumad group and XUopipi gloua Deccctiou plus bevacizumad group(combinatiou group),each group had6rats:another6rats without ans treatment as the ceutroi group.Xiaouinaloue Deccctiou group was given Xiaouingloua Deccctiou1mL/kg bs gavaae,bevacizumad group was given bevacizumad2me/kg bs intraderitoueal injectiou,the combiantiou group was given Xiaouinaloua Deccctiou 1mL/kg bs gavaae and bevacizumad2me/kg bs intraneritoueal injectiou,and the model group and the ceutroi group were given the same amount oS normal saline bs gavaae,all the groups were treated ouce a iay for22cousechtUe days.Realtime quuntitative PCR method was used to detect the expressiou oS p1,ph1,and p53mRNA in the luna tissue oS rats in each group,Cow cytometrn was used to detect the apoptosis rate oS tuna tissue,hematoxylin-cosin stainina method was used to oiserve the pathoPaUal changes oS tuna tissue,Western blot method was used to detect the expressiou levels oS VEGF［作者简介］李慧，女，硕士，副主任医师，研究方向为中医内科学。
顶空—固相微萃取—气相色谱—质谱联用技术对灌胃细辛后小鼠脑、
顶空—固相微萃取—气相色谱—质谱联用技术对灌胃细辛后小鼠脑、肝和血液中7个挥发性主要成分的定量分析研究采用顶空-固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术（HS-SPME-GC-MS）对灌胃给药细辛后吸收入小鼠体内的细辛活性成分4-烯丙基苯甲醚、甲基丁香酚、2，3，5-三甲氧基甲苯、3，4，5-三甲氧基甲苯、细辛素、3，5-二甲氧基甲苯和黄樟醚进行了定量研究。
采用VF-WAXms毛细管柱（0.25mm×30m，0.25μm）和SPME 萃取头PDMS/DVB（65μm），建立了7个成分的标准曲线，验证了该方法稳定性（RSD<15%）、重复性（RSD<9.5%）、精密度（RSD<22%）、相对回收率（87.0%～108%）和提取回收率（74.9%～102%），并使用验证后的方法确定了7个主要吸收成分的量，在给药后小鼠肝、脑和血液中检测到的质量分数分别为4-烯丙基苯甲醚0.22，0.14μg·g-1，0.25mg·g-1；甲基丁香酚1.1，0.39μg·g-1，0.69mg·g-1；2，3，5-三甲氧基甲苯0.45，0.13μg·g-1，0.54mg·g-1；3，4，5-三甲氧基甲苯0.51，0.15μg·g-1，0.45mg·g-1；细辛素0.48，0.039μg·g-1，0.69mg·g-1；3，5-二甲氧基甲苯2.2，1.2μg·g-1，1.5mg·g-1；黄樟醚1.3，0.67μg·g-1，1.1mg·g-1。
结果表明HS-SPME-GC-MS分析方法适合于中药中挥发性成分在体内的分析测定，样品用量少，快速简便；含量测定数据为进一步认识细辛药材有效物质和毒性物质提供了科学资料。
标签：细辛；挥发性成分；顶空-固相微萃取-气相色谱质谱联用技术；定量分析；生物样品检测；肝组织；脑组织；血液细辛为常用中药，用于风寒感冒、头痛、牙痛、鼻塞流涕、鼻鼽、鼻渊、风湿痹痛、痰饮喘咳。
基于电子鼻和溶剂辅助风味蒸发-气相色谱-质谱联用技术分析调味小龙虾挥发性风味特征差异
基于电子鼻和溶剂辅助风味蒸发-气相色谱-质谱联用技术分析调味小龙虾挥发性风味特征差异张权;李金林;胡明明;彭斌;钟比真;涂宗财【期刊名称】《食品与发酵工业》【年(卷),期】2024(50)8【摘要】为探究调味小龙虾风味特征差异,该文以市售常见调味小龙虾为研究对象,采用电子鼻结合溶剂辅助风味蒸发-气相色谱-质谱联用(solvent-assisted flavor evaporation-gas chromatography-mass spectrometry,SAFE-GC-MS)技术对其挥发性风味成分进行分析。
结果表明,电子鼻能够较好地区分不同调味小龙虾,W1W(对无机硫化物灵敏)、W1S(对甲基类灵敏)和W2W(对芳香成分、有机硫化物灵敏)是区分调味小龙虾风味的主要传感器。
8个调味小龙虾样品中共检出127种挥发性风味物质,通过相对气味活度值(relative odor activity value,ROAV)法确定了15种关键风味物质和10种修饰性风味物质,其中麻辣小龙虾主要关键风味物质为芳樟醇、桉叶油醇、丁香酚和D-柠檬烯,十三香小龙虾主要关键风味物质主要为丁香酚、芳樟醇、桉叶油醇、壬醛和β-蒎烯,而蒜蓉小龙虾主要关键风味物质为2,4-二叔丁基苯酚、L-石竹烯、壬醛、苯乙醛、2-甲基-2-丁烯醛和二烯丙基硫醚等。
该研究结果可为调味小龙虾风味统一、产品开发和生产提供理论参考。
【总页数】11页(P242-252)【作者】张权;李金林;胡明明;彭斌;钟比真;涂宗财【作者单位】江西师范大学生命科学院;江西师范大学国家淡水鱼加工技术研发专业中心;南昌大学【正文语种】中文【中图分类】TS2【相关文献】1.溶剂萃取/溶剂辅助风味蒸发-气相色谱/质谱联用分析野韭菜花挥发性成分2.基于固相微萃取-气相色谱-质谱与电子鼻技术分析发酵乳中的挥发性风味物质3.电子鼻结合气相色谱-质谱联用技术分析松茸减压贮藏过程中挥发性风味成分变化4.基于顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用法、电子鼻和电子舌技术分析绿茶饮料的风味物质5.溶剂辅助风味蒸发-气相色谱-质谱联用法分析普洱茶干茶与茶汤的挥发性成分因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
液相色谱_串联质谱法鉴定大鼠血浆中的东莨菪碱及其代谢物_陈怀侠
液相色谱-串联质谱法鉴定大鼠血浆中的东莨菪碱及其代谢物陈怀侠1,2 杜鹏1 韩凤梅1 陈勇*11(湖北大学中药生物技术省重点实验室,武汉430062) 2(武汉大学化学与分子科学学院,武汉430072)摘 要 建立了鉴别东莨菪碱及其代谢物的液相色谱-电喷雾离子阱串联质谱(LC -M S n )联用方法。
取单剂量灌胃50m g /kg 东莨菪碱的大鼠血样,甲醇沉淀蛋白,采用LC -M S 及LC -M S n 等方法分析血样。
和空白血样及东莨菪碱相比较,根据血样中代谢物分子量的变化(ΔM )及其多级质谱数据,鉴定并阐述其结构。
结果在服药后的大鼠血样中发现7种代谢物,分别为莨菪品、N -去甲基莨菪品、脱水东莨菪碱,N -去甲基脱水东莨菪碱、N -去甲基东莨菪碱、氧化东莨菪碱以及托品酸等。
该方法灵敏,快速,简便,适合于药物及其代谢物的快速鉴定。
关键词 东莨菪碱,液相色谱-串联质谱法,代谢物 2005-08-16收稿;2005-11-20接受本文系湖北省杰出青年基金(No .2002AC004)和湖北省中药生物技术重点实验室开放基金(No .2004CTM 001)资助项目1 引 言药物代谢研究对于人们认识药物体内作用规律,指导临床合理用药以及新药设计具有重要的意义[1]。
LC -M S n 联用技术是现今对药物代谢研究的最有力的工具[2～4]。
该方法具有灵敏度高,专属性好,样品处理简单,快速等特点,特别是多级质谱能够提供丰富的化合物的结构信息。
因此,该联用技术成为代谢物结构分析的首选方法之一。
东莨菪碱(Scopo la m i n e )是从茄科植物颠茄(A tropa bell a donna L .)、曼佗罗(D atura S tramonium L .)及莨菪(Hyosyam us niger L .)等分离提取的一种托品烷类生物碱,有着广泛的药理活性,如解痉、麻醉、止痛等[5],主要用于治疗暴发性肝炎、流行性乙型脑炎、支气管哮喘、重症新生儿窒息、肺性脑病等[6],随着药理研究的进展,其用途越来越广。
气相色谱-质谱联用法测定小鼠血清非胆固醇甾醇
遵
义 医 学
院 学 报
Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｚｕ ｎ ｙ ｉ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｕｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ
ＶＯ １ ． ３ ９ Ｎｏ． ６ Ｄｅ ｃ ．２ ０１ ６
气 相 色谱 一质 谱 联 用 法测 定 小 鼠血 清 非胆 固醇 甾醇
杜红岩 ， 周嘉南 ， 潘 峰 ， 杨 华 ， 闫振成 ， 倪银星 ， 祝之 明 ， 钟 健
（ １ ． 第三军医大学大坪 医 院野 战外科 研 究所 高血压 内分 泌科 ， 全军 高 血压 代谢 病 中心 ， 重庆 市 高血 压 研究 所 ， 重 庆
４ ０ ０ ０ ４ ２ ； ２ ． 第三军医大学科研部 生物医学分析测试中心 ， 重庆 ４ ０ ０ ０ ３ ８ ）
（ ｅ ａ ｍ ｐ ｅ ｓ ｔ ｅ ｒ ｏ １ ） 、 豆甾醇（ ｓ ｔ ｉ ｇ ｍ ａ ｓ ｔ ｅ ｒ ｉ ｎ ） 和 Ｂ一谷 甾醇 （ ｐ—ｓ ｉ ｔ ｏ ｓ ｔ ｅ ｒ ｏ １ ） 的含量 依次 为（ ４ ． ５ ２ ４ － ０ ． ９ ４ 、 １ ． ７ １±１ ． ５ ７ 、 ２ ２ ． １ ７± ９ ． ８ ６ 、 ０ ．
结论 Ｇ Ｃ—ＭＳ法具 有检测速度快 、 结果准确 、 精密性 高和重复性好 的优点 ， 可用于实验小鼠血清非胆固醇 甾醇的检测 ， 为深
入研究 实验 动物胆 固醇合成和吸收 的机制提供研究手段 ห้องสมุดไป่ตู้
［ 关键词 ］气相 色谱 ； 质谱 ； 非胆 固醇 甾醇 ［ 中图法分类号］Ｒ ５ ８ ９ ． ２ ［ 文献标志码 ］Ａ ［ 文章 编号］１ ０ ０ ０ － ２ ７ １ ５ （ ２ ０ １ ６ ） ０ ６ － ０ ６ １ ７ ０ － ６
气相色谱质谱联用法检测大鼠尿液中2C-B及其代谢物
气相色谱质谱联用法检测大鼠尿液中2C-B及其代谢物黄克建;潘智文;李宏森;林翠梧;刘晓锋;罗正坚;李璐;陈而廉【期刊名称】《中国法医学杂志》【年(卷),期】2009(024)001【摘要】目的研究4-溴-2,5-二甲氧基苯乙胺(2C-B)在大鼠体内的代谢物以及代谢途径.方法取 Wistar大鼠3只,以2C-B灌胃,收集24h内尿液,用β葡萄糖醛酸酶水解,Oasis HLB柱固相提取,DB-35MS柱分析,气相色谱质谱联用检测.结果从大鼠尿液中检出6种2C-B的代谢产物,分别为:4-溴-2-羟基-5-甲氧基苯乙醇、4-溴-2,5-二甲氧基苯乙醇、4-溴-2-羟基-5-甲氧基苯乙酸、4-溴-2,5-二甲氧基苯乙酸、1-乙酰氨基-2-(4-溴-5-羟基-2-甲氧基苯)乙烷和1-乙酰氨基-2-(4-溴-2-羟基-5-甲氧基苯)乙烷.未检出2C-B原药.结论 2C-B在大鼠尿液中主要以代谢物形式存在,其在大鼠体内至少存在两种代谢途径:第一种是2C-B的2位和5位氧上去甲基后氨基被乙酰化;第二种是2C-B去氨基生成醛,接着被还原或氧化生成醇和羧酸.【总页数】4页(P8-11)【作者】黄克建;潘智文;李宏森;林翠梧;刘晓锋;罗正坚;李璐;陈而廉【作者单位】广西壮族自治区公安厅物证鉴定中心,广西,南宁,530012;广西大学化学化工学院,广西,南宁,530004;广西壮族自治区公安厅物证鉴定中心,广西,南宁,530012;广西大学化学化工学院,广西,南宁,530004;广西壮族自治区公安厅物证鉴定中心,广西,南宁,530012;广西壮族自治区公安厅物证鉴定中心,广西,南宁,530012;广西壮族自治区公安厅物证鉴定中心,广西,南宁,530012;广西壮族自治区公安厅科技处,广西,南宁,530012【正文语种】中文【中图分类】D9【相关文献】1.大鼠尿液中γ辐射损伤特征代谢物 [J], 张慧芳;党旭红;邢利虹;郭月凤2.大鼠尿液与血液中海洛因4种代谢物的检测时限研究 [J], 王璐莹;倪春芳;姜凤丽;徐智儒;汪蓉;张玉荣3.雷公藤配伍甘草减毒大鼠体内尿液中的小分子代谢物以及相应生物代谢通路 [J], 王焕君; 马致洁; 董捷鸣; 吴昊; 于小红; 段晓颖4.长春西汀在大鼠尿液中的代谢物研究 [J], 唐蕾;艾超5.气相色谱-质谱法分析乳腺癌大鼠尿液中的代谢物 [J], 方梦婵;鄢爱平;万益群因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
基于气相色谱-质谱技术的小青龙汤证大鼠血液代谢组学研究
基于气相色谱-质谱技术的小青龙汤证大鼠血液代谢组学研究赵小华;何丽清;盖江华【摘要】Objective To determine the endogenous metabolites in blood of rats with Xiaoqinglong Decoction Syndrome by using GC-MS;To provide evidence for researches on the essence of Xiaoqinglong Decoction Syndrome. Methods Totally 36 male Wistar rats were randomly dividedinto blank control group (10 rats), model group (13 rats), and Xiaoqinglong Decoction group (13 rats). Model group and Xiaoqinglong Decoction group were used to make the models of exogenous cold and internal fluid syndrome (Xiaoqinglong Decoction Syndrome). Rats in Xiaoqinglong Decoction group received gavage with Xiaoqinglong Decoction, while rats in blank control group received nothing. Blood of rats in the three groups was taken from the abdominal aorta and detected by GC-MS 15 days later, and analyzed by multivariate statistical analysis with PLS-DA. Results 13 kinds of biomarkers were found:lactic acid, 3-hydroxy-butyric acid, glycine, serine, lysine, dextrose, arachidonic acid and other metabolites. Conclusion Expressions of biomarkers, such as lactic acid and glycine, are energy metabolism, immune function, and inflammation, which provide material basis for researches on the essence of Xiaoqinglong Decoction Syndrome.%目的：采用气相色谱-质谱法(GC-MS)测定小青龙汤证大鼠血液中内源性代谢物,为小青龙汤证本质研究提供依据。
小青龙汤证大鼠尿液的代谢组学研究
小青龙汤证大鼠尿液的代谢组学研究何丽清;盖江华;郭鑫【摘要】目的：运用代谢组学核磁共振技术找出小青龙汤证大鼠尿液中的生物标志物，为小青龙汤证的临床诊断和治疗提供客观依据。
方法：对空白对照组、模型组和小青龙汤组大鼠的尿液进行核磁共振氢谱检测，经MestRenova预处理和积分后，再用SIMCA-P+进行偏最小二乘法判别分析，得到相应的散点图和载荷图，进行比较后找出差异性代谢物。
结果：与空白对照组比较，模型组中肌酸酐、胍基乙酸、三甲胺、牛磺酸、尿囊素等代谢物含量升高，琥珀酸、2-酮戊二酸、乳酸、甘氨酸、甲基烟碱等代谢物含量降低。
用药后小青龙汤组中肌酸酐、三甲胺、尿囊素、牛磺酸与空白对照组比较明显升高，但与模型组比较明显降低；乳酸与空白对照组比较明显降低，但与模型组比较明显升高，胍基乙酸、2-酮戊二酸、N-甲基烟碱的改变则无统计学意义。
结论：经分析可以看出，所找出的这些物质主要与能量代谢、炎症反应和免疫抵抗力有关，与能量代谢相关的物质变化尤为明显。
%Through the map analysis of various metabolites in rat's urine, the biomarkers in syndrome suitable for Small Qing-Long Decoction (SQLD) were found out, which provided objective basis for the clinical diagnosis and treatment. Based on the rat's urine nuclear magnetic resonance (NMR) spectrum detection of the blank control group, the model group and the SQLD group, the data come from the map by MestRenova pretreatment and integration were analyzed using SIMCA-P+ by (PLS-DA). Then, the corresponding scatter diagram and diagram of loading were re-ceived and the differences of metabolites were found out by the comparison . The results showed that compared with the blank control group, contents ofcreatinine, guanidinoacetic acid, trimethylamine, taurine, allantoin metabolites in the model group had elevated. And the contents of succinic acid, 2-OG, lactic acid, glycine, methyl nicotine metabolite had decreased. After medication, contents of creatinine, trimethylamine, allantoin, taurine of SQLD group were still higher than the blank control group. However, the contents were reduced compared with the model group. The content of lactic acid was lower than the blank control group, but higher than the model group. There was no statistical significance on changes of guanidinoacetic acid, 2-OG, N-nornicotine. It was concluded that substances found were mainly related to energy metabolism, inflammation and immune resistance, which was especially related to energy metabolism change obviously.【期刊名称】《世界科学技术-中医药现代化》【年(卷),期】2014(000)007【总页数】5页(P1542-1546)【关键词】核磁共振;小青龙汤证;大鼠;尿液;代谢组学【作者】何丽清;盖江华;郭鑫【作者单位】山西中医学院太原 030024;山西中医学院太原 030024;山西省晋中市中医院晋中 030600【正文语种】中文【中图分类】R285.5目前对小青龙汤证本质的研究多在宏观层面上，对于微观层面上的研究与认识还很欠缺，不能与宏观认识形成对接，对其代谢组学技术的应用尚未见报道。
基于液相色谱-质谱联用的血清代谢组学在中医上火研究中的应用
基于液相色谱-质谱联用的血清代谢组学在中医上火研究中的应用吴德鸿;周佳;李倩倩;谭祖教;范永升【摘要】[目的]利用代谢组学表征上火人群血清代谢组的特异性变化,为进一步探索上火的发病机制提供参考依据.[方法]采集30例上火和24例非上火人群血清样本,采用液相色谱-质谱联用(liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)技术对血清中代谢物进行检测,并结合正交信号校正-偏最小二乘法判别分析(orthogonal signal correction-partial least squares discriminant analysis,OSC-PLS DA)和t检验挖掘上火后发生显著变化的血清代谢物,进一步进行结构鉴定,解释上火状态下的人体代谢变化的病理生理机制.[结果]结合单变量和多变量统计分析手段筛选出上火与非上火人群中存在显著差异的代谢物,部分代谢物结构已经确认,主要是脂类物质,包括2种磷脂酰胆碱(34:1和38:7)、2种溶血磷脂酰胆碱(18:1和16:0)、1种磷脂酰乙醇胺(34:2)、1种溶血磷脂酰乙醇胺(18:2)、2种鞘脂(44:2和40:2)、1种甘油三酯(53:3)及胆红素等.[结论]利用LC-MS技术从整体水平上探讨上火人群血清代谢谱的变化,发现多种脂质和胆红素有一定程度地下降,可能与上火人群体内炎性反应和氧化应激的发生有关.【期刊名称】《浙江中医药大学学报》【年(卷),期】2018(042)010【总页数】6页(P769-774)【关键词】上火;血清;LC-MS技术;代谢组学;脂质;正交信号校正-偏最小二乘法判别分析【作者】吴德鸿;周佳;李倩倩;谭祖教;范永升【作者单位】浙江中医药大学附属第二医院杭州 310005;浙江中医药大学基础医学院;浙江中医药大学基础医学院;浙江中医药大学基础医学院;浙江中医药大学基础医学院【正文语种】中文【中图分类】R720“上火”的概念源于中医学对人体和疾病的认识，但中医学中尚无专门论述，其内容散见于中医火热病证中。
基于气相色谱的铅中毒大鼠尿液代谢指纹图谱研究
基于气相色谱的铅中毒大鼠尿液代谢指纹图谱研究王穆;杨慧仙;黄卓;田丹;李程;李纯颖;何爱桃;让蔚清【期刊名称】《南华大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2012(026)004【摘要】代谢组学是近年来新发展起来的一门学科,其在毒理学领域的应用越来越受到关注.本文通过对色谱条件的优化建立了一种基于气相色谱的代谢组学技术,检测铅染毒大鼠内源性代谢物谱变化,并运用主成分分析的模式识别方法对这一变化过程进行分析.发现正常组、低剂量染毒组、中剂量染毒组以及高剂量染毒组大鼠处于不同的空间位置,说明随着染毒剂量的不同,各组大鼠的尿液代谢指纹图谱发生了明显的变化.进一步分析发现,各组大鼠的气相色谱图谱在保留时间为3.5 min和5.5 min时的差异对上述总体差异的贡献最大.表明不同剂量的铅染毒能导致大鼠的尿液代谢指纹图谱发生明显的改变,这种改变能用结合模式识别的气相色谱技术检测出来;气相色谱技术可作为核磁共振技术等其它平台的补充工具用于代谢组学研究.【总页数】7页(P69-74,80)【作者】王穆;杨慧仙;黄卓;田丹;李程;李纯颖;何爱桃;让蔚清【作者单位】南华大学生命科学研究中心环境医学与放射卫生研究所,湖南衡阳421001【正文语种】中文【中图分类】O657.7+1【相关文献】1.基于气相色谱-飞行时间质谱技术的佐剂性关节炎大鼠尿液代谢组学的研究 [J], 汪永忠;柳清;姜辉;韩燕全;李钰馨2.超高效液相色谱/飞行时间质谱用于人参皂甙Rg3作用后大鼠尿液代谢物指纹图谱分析及标记物的鉴定 [J], 汪江山;赵欣捷;郑育芳;孔宏伟;卢果;蔡宗苇;许国旺3.基于气相色谱-质谱的肥胖抵抗大鼠尿液代谢组学研究 [J], 辛衍代;季虹;刘兴艳;张丽;荣海钦4.基于气相色谱-质谱联用技术的代谢组学方法在转植酸酶基因玉米代谢物指纹图谱分析中的应用 [J], 周艳明;郭欣硕;黄新;朱水芳5.基于NMR代谢组学方法研究应激性高血压大鼠尿液中的差异性代谢组份 [J], 哈力旦.阿布都;吴桂霞;钟莉;卡思木江.阿西木江;张景萍;黎佳;楚岚鹏;库热西.玉努斯因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
芪附汤对大鼠抗阿霉素心脏毒性作用的血清气相色谱-质谱代谢组学研究
芪附汤对大鼠抗阿霉素心脏毒性作用的血清气相色谱-质谱代谢组学研究周倩;刘奎;马静;谭光国【期刊名称】《药学实践杂志》【年(卷),期】2018(036)004【摘要】目的采用基于气相色谱-质谱(GC-M S)血清代谢组学技术研究芪附汤抗阿霉素心脏毒性的作用,并初步探讨其作用机制.方法将24只大鼠分为正常组、阿霉素组和芪附汤治疗组,给予4周相应的干预治疗后,采集大鼠血清进行GC-M S分析,结合多变量和单变量统计分析,研究阿霉素诱导的心脏毒性损伤大鼠血清中内源性代谢物的变化,以及芪附汤对其的干预作用,寻找其抗阿霉素心脏毒性潜在的生物标志物,采用代谢通路分析鉴定芪附汤靶向代谢通路.结果 GC-M S血清代谢组学分析鉴定了17种阿霉素心脏毒性潜在生物标志物,芪附汤对其中10种代谢物具有显著的逆转作用,代谢通路分析表明,三羧酸循环、乙醛酸和二羧酸代谢(简称二羧酸代谢)、花生四烯酸代谢是芪附汤主要的靶向代谢通路.结论芪附汤能够通过调节失衡的三羧酸循环、二羧酸代谢和花生四烯酸代谢而发挥抗阿霉素心脏毒性的作用.【总页数】5页(P313-317)【作者】周倩;刘奎;马静;谭光国【作者单位】空军军医大学第一附属西京医院中医科 ,陕西西安 710032;空军军医大学基础医学院学员一旅 ,陕西西安710032;空军军医大学第一附属西京医院中医科 ,陕西西安 710032;空军军医大学药学系药物分析学教研室 ,陕西西安710032【正文语种】中文【中图分类】R966【相关文献】1.基于气相色谱-质谱技术的小青龙汤证大鼠血液代谢组学研究 [J], 赵小华;何丽清;盖江华2.姜附汤对阿霉素心脏毒性大鼠心肌细胞SOD、GPH-Px、MDA的影响 [J], 孙萌;范颖;于彩娜;李然;林庶茹3.表阿霉素纳米粒联合生育三烯酚的抗肝癌作用及心脏毒性研究 [J], 王跃武;张琦4.五参汤对阿霉素药物心脏毒性的保护作用及机理研究 [J], 蔡昂;吕俊;丁念5.气相色谱-质谱的代谢组学方法研究血必净注射液对百草枯中毒大鼠的治疗作用[J], 李莎;祝益民;刘文;伍洋科;蒋菲娅;颜笑因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
毛细管气相色谱 质谱联用法测定血中毒鼠强及其应用
毛细管气相色谱质谱联用法测定血中毒鼠强及其应用【摘要】目的建立毛细管气相色谱质谱联用法(GC MS法)定性检测血中毒鼠强的方法。
方法血样经苯提取后,用DM 5弹性石英毛细管柱(Dikma公司,30 m×0.25 mm×0.25 μm),100℃~250℃程序升温,分别以全扫描模式和选择离子监测模式进样测定。
结果毒鼠强的质谱特征碎片M/Z为240、212和121。
结论所建立的方法简便、快速、灵敏、准确,可为临床相关急性中毒抢救工作提供科学的实验依据。
【Abstract】Objective A qualitative method was set up to rapidly determine tetramine in human serum/plasma by GC MS.Methods The capillary column was a DM 5 column(30 m×0.25 mm×0.25 μm)with oven temperature increased with a rate of 10℃/min from 100℃to 250℃; After extracted with benzene,serum/plasma sample was deteced by GC MS with full scan and SIM mode,respectively.Results The characteristics ion of tetramine to be detected by MS was M/Z 240,212 and 121.Conclusion The method is simple,quickly,sensitive and accurate,and it could provide a scientific evidence to clinical rescue for emergent toxic patients.【Key words】Tetramine; Gas chromatography mass chromatography (GC MS); Qualitative determination毒鼠强,化学名为四亚甲基二砜四胺,别名424、三步倒等,为有机氮化合物,无臭无味,化学性质稳定,其毒性极大,是我国严禁使用的的剧毒急性中枢神经兴奋性杀鼠药[1]。
小青龙汤治疗咳喘的有效成分预测
小青龙汤治疗咳喘的有效成分预测李思洋;朱芝娴;董杰【期刊名称】《世界科学技术-中医药现代化》【年(卷),期】2018(020)002【摘要】目的:通过一种基于通路模式的方法,对传统中药名方小青龙汤治疗咳喘的有效成分进行预测.方法:首先搜索TCM中医药资料库与CTD数据库来整理出小青龙汤已知的各种化合物成分与相关基因,再通过DAVID生物分析系统与KEGG数据库挖掘出与咳喘相关的通路模式.然后利用该通路模式对候选基因打分,筛选出相关性高的基因,并据此推测出治疗咳喘的有效成分.结果:根据上述的计算方式,我们将相关基因根据得分进行排序,得到相关性最好的三种基因分别为MAPK1、MAPK3与RELA.最终预测出的有效成分中效能最高的三种分别是Paeonol(丹皮酚)、Glycyrol(甘草醇)、Geraniin(老鹳草素).结论:此种基于通路模式的方法可以较好的预测出小青龙汤治疗咳喘的有效成分,加以推广更有利于中药基础药理研究的标准化.【总页数】8页(P239-246)【作者】李思洋;朱芝娴;董杰【作者单位】南京中医药大学附属医院南京210001;南京中医药大学附属医院南京210001;南京中医药大学附属医院南京210001【正文语种】中文【中图分类】R285【相关文献】1.小青龙汤治疗咳喘的古今浅探 [J], 王明杰;孙中莉;王丽娟;王飞2.老中医蔡长福小青龙汤治疗咳喘病学术经验 [J], 白玉忠;何乃举;季清华;谭长涛;邵爱华;张丽萍;李明松;朴武军;蔡文举3.小青龙汤治疗咳喘临证心得 [J], 李前进4.六味小青龙汤治疗痰饮郁肺型小儿咳喘临床举隅 [J], 李晓;姜之炎5.小青龙汤加减治疗马属动物咳喘症 [J], 戴富春;张兴瑞因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
基于气相色谱-质谱的肥胖抵抗大鼠尿液代谢组学研究
基于气相色谱－质谱的肥胖抵抗大鼠尿液代谢组学研究辛衍代季虹刘兴艳张丽荣海钦【摘要】摘要目的对肥胖抵抗大鼠尿液进行代谢组学分析，研究高糖高脂饮食对非肥胖型代谢紊乱的影响，探讨非肥胖型2型糖尿病的发病机制。
方法建立肥胖抵抗大鼠模型，取静脉血，测其生化指标，同时对尿液进行气相色谱－质谱分析，得到的数据进行代谢组学分析。
结果除羰基戊二酸(RSD=11．77%)外，其他14种代谢物的相对标准偏差(RSD)均在10%以内，R2 Y和Q2值分别为0．929和0．905;与对照组相比，肥胖抵抗组大鼠尿液中能量代谢过程的相关代谢物羟基乙酸、苏氨酸、丝氨酸、丁二酸、延胡索酸、2，3－二羟基－丁酸、苹果酸、羰基戊二酸减少，同时与肠道菌群代谢相关的代谢物对羟基苯甲酸、葡萄糖醇、反式乌头酸、果糖、葡萄糖、肌醇含量也明显减少。
结论饮食干预16周之后，肥胖抵抗组大鼠能量代谢过程中的主要代谢物发生异常，基于GC－MS的代谢组学分析方法能较为全面的反应能量代谢状况，发现差异代谢物，可用于非肥胖型2型糖尿病发病机制的研究。
【期刊名称】医学研究杂志【年(卷),期】2012(041)012【总页数】5【关键词】关键词气相色谱－质谱代谢组学尿液肥胖抵抗代谢组学的研究方法能对生物流体中的代谢产物和代谢中间物进行定性定量分析，发现由疾病过程引起的代谢异常，帮助人们更好地理解病变过程及机体内物质的代谢途径，还有助于疾病的生物标志物的发现和辅助临床诊断的目的［1，2］。
气相色谱－质谱(GC－MS)联用技术具备较为完善的质谱数据库，其操作简便，且具有较强的分离分析能力，已得到广泛的应用［3，4］。
由生活因素特别是高糖高脂饮食导致的肥胖型2型糖尿病等代谢性疾病已引起人们的高度重视，而肥胖抵抗型2型糖尿病等代谢性疾病目前研究较少。
尿液是整体代谢终产物输出的主要途径之一，尿液中代谢物的波动不仅能够反映机体整体代谢的特征，还可能是局部组织或器官功能异常的外在表现，且尿液样品的收集无创、方便等特点使操作简便易行。
玉屏风颗粒治疗大鼠变应性鼻炎的血清氨基酸代谢组学研究
玉屏风颗粒治疗大鼠变应性鼻炎的血清氨基酸代谢组学研究李小曼;曹婕;吴飞虎【期刊名称】《中医研究》【年(卷),期】2024(37)3【摘要】目的:研究玉屏风颗粒对变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)大鼠血清氨基酸含量的影响,探讨玉屏风颗粒治疗AR的疗效和作用机制。
方法:将40只雄性大鼠随机分为正常对照组、模型组、玉屏风颗粒组、枸地氯雷他定组四组。
采用卵清蛋白造模法建立AR大鼠模型,玉屏风颗粒组、枸地氯雷他定组以相应药物干预,应用气相色谱-质谱联用技术检测氨基酸含量,分析药物干预后AR大鼠血清样本代谢谱的变化,找出有统计学意义的差异代谢物,并进一步分析相关代谢通路。
结果:造模后AR血清代谢谱发生了显著变化,玉屏风颗粒干预后逆转了精氨酸、丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺及谷氨酸等的变化(P<0.05),使AR大鼠血清氨基酸含量较枸地氯雷他定组更趋于正常对照组。
结论:玉屏风颗粒干预后,AR大鼠血清氨基酸含量有所逆转,证实了玉屏风颗粒治疗AR的一定疗效,通过血清氨基酸代谢物回归趋势可从侧面证实其在治疗AR中发挥着一定的抗炎、调节免疫作用。
【总页数】6页(P68-73)【作者】李小曼;曹婕;吴飞虎【作者单位】安徽中医药大学第一附属医院耳鼻咽喉科【正文语种】中文【中图分类】R756.21【相关文献】1.玉屏风颗粒联合沙美特罗替卡松治疗变应性鼻炎及对IL-12组胺的影响2.玉屏风颗粒对变应性鼻炎大鼠Th17/Treg平衡及相关细胞因子的影响3.代谢组学技术在变应性鼻炎研究中的应用4.消风宣窍汤治疗小鼠变应性鼻炎血清代谢组学研究5.小青龙汤治疗变应性鼻炎患者的鼻腔灌洗液代谢组学研究因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
基于UPLC-Q-Exactive-MS代谢组学技术的清肺化痰颗粒对发热大鼠的调控作用研究
基于UPLC-Q-Exactive-MS代谢组学技术的清肺化痰颗粒对发热大鼠的调控作用研究张洪铭;郭文军;孙英莲;王英军;解生旭;徐雅娟【期刊名称】《特产研究》【年(卷),期】2022(44)3【摘要】本文基于UPLC-Q-Exactive-MS的代谢组学技术研究清肺化痰颗粒(QFHT)对干酵母致大鼠发热的调控作用。
将SD大鼠随机分为对照组,模型组,阳性对照对乙酰氨基酚片组和QFHT高、中及低剂量组,每组10只,建立酵母诱导的大鼠发热模型,以大鼠肛温和血清中环磷酸腺苷(cAMP)的含量为指标,评价QFHT解热效果。
运用UPLC-Q-Exactive-MS对大鼠血清进行非靶向代谢组学研究,获取干酵母诱导发热的潜在生物标志物,并对其进行代谢通路分析。
结果表明,与模型组比较,给药组大鼠肛温和血清中c AMP含量均有所下降,有显著性差异(P<0.05);通过分析模型组和对照组血清代谢轮廓,筛选并鉴定出潜在生物标志物21个,主要涉及两条代谢途径。
QFHT对发热大鼠的治疗作用与其改善血清中潜在生物标志物的水平有关,且主要通过调控色氨酸代谢、牛磺酸和亚牛磺酸代谢途径发挥解热作用。
【总页数】8页(P51-57)【作者】张洪铭;郭文军;孙英莲;王英军;解生旭;徐雅娟【作者单位】长春中医药大学;吉林省中医药科学院第一临床医院中药药效物质基础重点实验室【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.基于代谢组学技术研究泽泻对高脂血症大鼠防治的生物化学作用机制2.基于代谢组学技术的麻黄汤对发热模型大鼠解热作用的初步研究3.基于UPLC-Q-Exactive-MS 代谢组学技术的清肺化痰颗粒对哮喘小鼠的调控作用4.基于粪便代谢组学技术丹贝益肺方对肺纤维化伴抑郁大鼠的作用机制研究5.基于脑代谢组学研究羚珠散联合对乙酰基氨基酚对发热幼龄大鼠的解热作用因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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基于气相色谱―质谱技术的小青龙汤证大鼠血液代谢组学研究摘要：目的采用气相色谱-质谱法（GC-MS）测定小青龙汤证大鼠血液中内源性代谢物，为小青龙汤证本质研究提供依据。
方法将36只雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组10只、模型组13只和小青龙汤组13只，模型组和小青龙汤组制作外寒内饮（小青龙汤证）模型，小青龙汤组灌胃小青龙汤，空白对照组不作任何处理。
15 d后，3组大鼠腹主动脉取血，进行GC-MS检测。
图谱经预处理后采用偏最小二乘法-判别分析进行多元统计分析。
结果发现13种小分子标志物，分别为乳酸、3-羟基丁酸、甘氨酸、丝氨酸、赖氨酸、葡萄糖、花生四烯酸等代谢物质。
结论乳酸、甘氨酸等标记物集中表现为能量代谢、免疫功能和炎症反应，为小青龙汤证本质研究提供了物质基础。
关键词：气相色谱-质谱；血液；小青龙汤证；大鼠DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2015.04.023中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2015）04-0083-04Metabonomics Study on Blood of Rats with Xiaoqinglong Decoction Syndrome Based on GC-MS ZHAO Xiao-hua1，HELi-qing1，GAI Jiang-hua2 （1.Shanxi University of Traditional Chinese Medicine，Taiyuan 030024，China；2.Changzhi Chinese Medicine Hospital，Changzhi 046000，China）Abstract：Objective To determine the endogenous metabolites in blood of rats with Xiaoqinglong Decoction Syndrome by using GC-MS；To provide evidence for researches on the essence of Xiaoqinglong Decoction Syndrome. Methods Totally 36 male Wistar rats were randomly divided into blank control group （10 rats），model group （13 rats），and Xiaoqinglong Decoction group （13 rats）. Model group and Xiaoqinglong Decoction group were used to make the models of exogenous cold and internal fluid syndrome （Xiaoqinglong Decoction Syndrome）. Rats in Xiaoqinglong Decoction group received gavage with Xiaoqinglong Decoction，while rats in blank control group received nothing. Blood of rats in the three groups was taken from the abdominal aorta and detected byGC-MS 15 days later，and analyzed by multivariate statistical analysis with PLS-DA. Results 13 kinds of biomarkers were found：lactic acid，3-hydroxy-butyric acid，glycine，serine，lysine，dextrose，arachidonic acid and other metabolites. Conclusion Expressions of biomarkers，such as lactic acid and glycine，are energy metabolism，immune function，andinflammation，which provide material basis for researches on the essence of Xiaoqinglong Decoction Syndrome.Key words：GC-MS；blood；Xiaoqinglong Decoction Syndrome；rats小青龙汤首见于《伤寒论?辨太阳病脉证并治》“伤寒表不解，心下有水气，干呕，发热而咳，或渴，或利，或噎，或小便不利，少腹满，或喘者，小青龙汤主之”。
全方共8味药，是张仲景治疗外寒内饮证的名方。
基金项目：国家自然科学基金（81102538）；山西中医学院临床基础项目（2011JC05）通讯作者：何丽清，E-mail：hlqyx@小青龙汤证为外感风寒表邪、内有水饮之气、内外合邪而表现出的适合服用小青龙汤的症状，其临床表现较多，其中咳嗽、痰多、喘息为小青龙汤证辨证关键。
尽管对小青龙汤已有较多研究，但对其证本质研究仍有不足。
目前，气相色谱-质谱（GC-MS）技术较为成熟地运用于中医证候客观化研究，且在证候动物模型证本质研究中取得一定进展，代谢组学与生理学的联系更加紧密[1-2]。
本研究采用GC-MS 测定大鼠血液中内源性代谢物，为小青龙证证本质研究提供基础。
1 仪器、试药与动物气相色谱-质谱联用仪（Trace GC-PolarisQ Mass，Thermo Finnigan），DZF-1B型真空干燥箱（上海跃进医疗医械厂），TGL-6高速台式冷冻离心机（长沙湘仪离心机有限公司），KQ2200型数控超声仪（昆山超声仪器有限公司），ESJ120-4电子天平（沈阳龙腾电子称量仪器有限公司）。
N-甲基-N-（三甲基硅烷）三氟乙酰胺[MSTFA，含1%TMCS （三甲基氯硅烷）]，美国Thermo pierce公司；吡啶、甲氧胺盐酸盐、正庚烷、乙腈均为分析纯，北京化工试剂公司；二十四烷，上海索莱宝生物科技有限公司。
内标液：精密称取1 mg二十四烷，置于10 mL容量瓶中，加甲醇溶解定容，即得0.1 mg/mL二十四烷内标工作液。
Wistar大鼠，雄性，体质量（200±10）g，清洁级，中国医学科学院中国协和医科大学动物研究所提供，合格证号SCXK（京）2009-2004。
2 方法2.1 动物分组、造模与取样将36只Wistar大鼠随机分为空白对照组10只、模型组13只和小青龙汤组13只，饲养于普通级动物房。
依据外感风寒表邪、内有水饮之气，内外合邪病机制作外寒内饮（小青龙汤证）模型：将模型组和小青龙汤组大鼠放置于寒冷环境（控制室内温度在10 ℃左右）中喂养，每日在低温环境[（0±4）℃]冷冻1 h，并放入冰水中游泳，水面淹没大鼠鼻尖时将大鼠捞出，持续4周，同时进寒凉饮食（冷冻饲料及冰水）。
空白对照组不做任何处理。
小青龙汤组大鼠给予小青龙汤（麻黄9 g，白芍9 g，细辛3 g，干姜3 g，炙甘草9 g，桂枝9 g，五味子9 g，姜半夏9 g，山西中医学院第二附属医院药房提供）灌胃，连续15 d。
将3组大鼠麻醉后腹主动脉取血，存放在-80 ℃冰箱中[4]。
2.2 生物样品制备从-80 ℃冰箱中取出血液，解冻，摇匀，取上清液100 ?L，加入250 ?L乙腈，4 ℃、10 000 r/min离心10 min，取上清液150 ?L，氮气吹干，加入30 ?L甲氧胺（15 mg/mL）吡啶溶液，70 ℃反应1 h。
加入50 ?L MSTFA，40 ℃反应90 min。
加入500 ?L正庚烷（0.1 mg/mL二十四烷），涡旋1 min，进行GC-MS分析。
2.3 气相色谱-质谱条件进样量：1 ?L；进样口温度：260 ℃；离子源温度：200 ℃；载气：氦气；载气流速：1 mL/min；DB-5MS毛细管柱；不分流进样。
质谱检测条件：电离方式EI，电子能量70 eV，全扫描模式，50～650 m/z。
程序升温：起始温度60 ℃，保持2 min，以7 ℃/min升至140 ℃，以5 ℃/min升至180 ℃，保持6 min，再以5 ℃/min升至280 ℃，保持2 min。
2.4 模式识别分析与统计方法运用SIMCA-P+软件进行偏最小二乘法判别分析（PLS-DA）和建立模型，采用SPSS17.0统计软件对截荷图远端标记物进行分析。
数据以―x±s表示，组间比较采用独立样本t检验，组内比较采用方差分析。
P<0.05表示差异有统计学意义。
3 结果3.1 血液样品测定结果3组血液样品GC-MS测定所得色谱图见图1。
各色谱峰分布均匀，峰形较好，且得到很好的分离，模型组和空白对照组直观可见较多差异峰，如15.11、15.80、27.67、33.17、41.25。
说明大鼠造模后体内代谢物发生了明显变化。
3.2 多元统计分析分别对空白对照组与模型组、小青龙组与空白对照组血液样本GC-MS数据进行分析，PLS-DA分析结果见图2。
从散点图可以看出，空白对照、模型组分布在t[1]轴两侧，直观反映了空白对照组与模型组之间有差别，说明造模之后机体的代谢物发生了变化。
小青龙汤组接近空白对照组，反映了模型大鼠在服用小青龙汤之后，代谢物明显接近空白对照组。
结合载荷图、典型的血液图谱及SPSS软件分析结果得到这些生物标志物：乳酸、甘氨酸、丁二酸、丝氨酸、赖氨酸、缬氨酸、吡喃半乳糖苷、山梨醇、葡萄糖、花生四烯酸等。
以上这些代谢物在用药后发生明显变化。
从3组载荷图结合VIP值（variable importance in the projection，变量重要性投影，可以预测各个数据对模型的贡献值，VIP>1的意义在于可能为潜在标志物）寻找导致其分开的差异性成分，即小分子标志物，结果共找到13个标志物，见表1。
采用SPSS17.0统计软件对13个标志物进行t 检验，部分结果见表2。
4 讨论由于GC-MS在具有诸多优点同时，也有不能分析大分子、难挥发性和热不稳定性物质的缺点，所以，在处理血液样本同时需要对样本进行衍生化处理。
三甲基硅烷（TMS）衍生化在样本硅烷化处理的基础上进行GC-MS检测，结合PLS-DA有监督的模式识别方法，能够对样本进行较好的分析，有利于寻找内源性代谢物的小分子标记物。
所以参考文献[5-7]，本试验选择TMS衍生化试剂对血样进行处理。