蝴蝶兰丛生芽途径的组织培养技术

4期
李金雨等 ： 蝴蝶兰丛生芽途径的组织培养技术
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1.3 1.3.1
实验设计 丛生芽的诱导 将带腋芽的切段 （ 约 2 cm ） 基部向下插在 MS 培养基上 ， 比较不同浓度 6-BA(0.0 、
1.0 、 3.0 、 5.0 、 7.0 mg ／ L) 对丛生芽诱导的影响 。 观察并统计诱导天数 、 诱导出丛生芽的个数以及诱导率 ，
的增殖个数 、 增殖率和生长情况 ， 对试验结果进行方差分析 。 （2 ） 不同浓度 6-BA 与 NAA 配比对蝴蝶兰丛生芽增殖的影响 。 将诱导出的丛生芽转至 MS 培养基上 ， 比较不同浓度 6-BA 与 NAA 配比 （6-BA 8.0 mg/L ， 6-BA 6.0 mg/L ＋NAA 0.5 mg/L ， 6-BA 8.0 mg/L ＋NAA
NAA 0.5 mg ／ L ＋10％ 香蕉汁 ， MS ＋NAA 0.5 mg ／ L ＋10％ 椰子汁 ， MS ＋IBA 0.5 mg ／ L ＋10％ 香 蕉 汁 ， MS ＋IBA 0.5 mg ／ L＋10％椰子汁)进行生根培养 。 培养 40 d 后观察并统计平均生根条数 ， 对试验结果进行方差分析 。 1.4
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/ 6-BA 0.0 mg/L 6-BA 2.0 mg/L 6-BA 4.0 mg/L 6-BA 6.0 mg/L 6-BA 8.0 mg/L 6-BA 10.0 mg/L 6-BA 12.0 mg/L 50 50 50 50 50 50 50 0 35 43 78 102 112 120 / / 0 aA 170 bB 186 bB 256 cC 304 dD 324 eE 340 fF
在一定的差异 。 经方差分析表明 ， 除了生根培养基组合 MS＋NAA 0.5 mg ／ L 与 MS＋IBA 0.5 mg ／ L＋10％ 椰子 汁之间 、 生根培养基组合 MS＋NAA 0.5 mg ／ L＋10％ 香蕉汁与 MS ＋IBA 0.5 mg ／ L ＋10％ 香蕉汁之间的生 根数差异不 显著外 ， 其 它 的 生 根 培 养 基 组 合 之 间 的 生 根 数 差 异 均 达 极 显 著 水 平 。 其 中 以 NAA 0.5
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热 带 作 物 学 报
31 卷
处理效果最好 ， 丛生芽增殖率可达 304％ ， 所诱导出的丛生芽不仅生长健壮 ， 而且颜色鲜嫩 ， 有利于进一 步增殖与培育壮苗 。 而当 6-BA 浓度高于 10.0 mg/L 时 ， 虽然诱导的丛生芽增殖率不断增加 ， 但所长出的 丛生芽生长偏弱 ， 甚至有些还会出现畸形现象 ， 不利于进一步增殖与培育壮苗 。
doi
10.3969/j.issn.1000-2561.2010.04.019 S682.31
中图分类号
蝴蝶兰(Phalaenopsis aphrodite Rchb. f.)为著名的观赏兰科植物 ， 其姿态优美 ， 花色艳丽 ， 花形似蝴蝶 ， 随风摇曳 ， 翩翩起舞 ， 尤为素净雅致 ， 给人以洁净的美感 。 在热带兰中素有 “ 兰花皇后 ” 的美称 ， 深受 世界各国人民的厚爱 。 近年来蝴蝶兰产业在我国发展迅速 ， 中国大陆生产蝴蝶兰的大中型企业已达 100 多家 ， 其数量仍在不断增加 ， 工厂化生产能力达到年产 1 000 万株的规模 [1-2] 。 福建省的福州 、 厦门 、 漳 州 、 龙岩等蝴蝶兰生产已具有相当大的规模 ， 销量也十分可观 。 蝴蝶兰属于典型的单茎性气生兰 ， 植株上极少发育侧枝 ， 比其它种类的兰花更难以进行常规无性繁 殖 ， 无法大量生产 [3]。 种子无菌播种和茎芽组织培养是蝴蝶兰快速繁殖的两种主要手段 。 蝴蝶兰种子内不 含胚乳 ， 自然条件下很难萌发 ， 发芽率极低 ， 种子无菌播种萌发产生实生苗变异性大 ， 不能良好的保持 母本植株的品种特性 ， 也会出现品种退化的现象 ， 导致种苗质量差 。 利用茎尖 、 根尖 、 叶片等外植体诱 导原球茎 ， 然后进行分割转移 、 增殖 ， 并分化成苗 。 虽然品质比较一致 ， 增殖系数较高 ， 但经过愈伤组 织阶段仍有较高的变异率 ， 即使有些是有益变异 ， 但更多的是不良变异 [4]， 如不开花 、 花小或花色不纯等 。 因此 ， 进一步探索降低蝴蝶兰组培苗在生产过程中的变异率是十分必要的 。 利用丛生芽途径繁殖蝴蝶兰 是一种从芽到芽的增殖途径 ， 其优点是可以不通过诱导原球茎分化不定芽来达到稳定遗传母本的特征特 性 ， 从而达到减少后代发生变异的目的 ， 是蝴蝶兰快速而有效的繁殖方法 ， 具有技术难度低 、 遗传稳定 等优点 [5-7]。
0.5 mg/L ， 6-BA 10.0 mg/L＋NAA 0.5 mg/L ， 6-BA 12.0 mg/L＋NAA 0.5 mg/L ） 对蝴蝶兰丛生芽增殖的影响 。
培养 2 个月后观察并统计蝴蝶兰丛生芽的增殖个数 、 增殖率和生长情况 ， 对试验结果进行方差分析 。
1.3.3
生根培养
将培养所得的小苗转至不同生根培养基上(MS＋NAA 0.5 mg ／ L， MS＋IBA 0.5 mg ／ L， MS＋
分析 ， 它们之间差异性达到极显著水平 ， 说明 6-BA 是影响蝴蝶兰丛生芽诱导的重要因素 ， 且较高浓度的
6-BA 更有利于丛 生芽的诱导 ； 6-BA 浓 度
在 3.0～7.0 mg/L 之间 ， 随着 6-BA 浓度的增 加 ， 出现丛 生 芽 的 诱 导 时 间 随 着 缩 短 ， 但 蝴蝶兰丛生芽的诱导率不变 （ 都是 100 ％ ）， 经方差分析 ， 它 们 之 间 差 异 性 不 显 著 ， 说 明 当 6-BA 浓 度 达 到 3.0 mg/L 以 上 时 ， 增 加 6-BA 浓 度 对 提 高 蝴 蝶 兰 丛 生 芽 诱 导 率 的作用已经 没 有 意 义 。 因 此 ， 从 生 产 成 本 考 虑 ， 诱 导 蝴 蝶 兰 丛 生 芽 的 6-BA 适 宜 浓 度以 3.0 mg/L 为佳 。
2.2 2.2.1
影响
丛生芽的增殖 不同浓度 的 6-BA 对 丛 生 芽 增 殖 的 从表 2 可以看出 ， 随着 6-BA 浓度
的不断增加 ， 新 增 丛 生 芽 的 芽 数 也 随 之 不 断增多 ， 丛 生 芽 的 增 殖 率 也 不 断 提 高 ， 经 方差分析， 它们之间差异达极显著水平。 说 明 6-BA 也 是 影 响 蝴 蝶 兰 丛 生 芽 增 殖 的 重 要 因 素 之 一 ， 其 中 以 6-BA 8.0 mg/L 的
MS NAA 0.5 mg/L MS IBA 0.5 mg/L MS NAA 0.5mg/L 10 MS NAA 0.5 mg/L 10 MS IBA 0.5 mg/L 10 MS IBA 0.5 mg/L 10
/ 50 50 50 50 50 50 2.7 bB 2.4 aA 3.1 cC 3.6 dD 3.0 cC 2.8 bB
对试验结果进行方差分析 。
1.3.2
丛生芽的增殖
（1 ） 不同浓度的 6-BA 对丛生芽增殖的影响 。 将启动的丛生芽转至 MS 培养基上 ， 比较不同浓度 6-BA
(0.0 、 2.0、 4.0、 6.0、 8.0、 10.0、 12.0 mg ／ L)对丛生芽增殖的影响 。 培养 2 个月后观察并统计蝴蝶兰丛生芽
1
1.1 1.2
材料与方法
供试材料 供试蝴蝶兰品种为 Dtps. Taisuco Firebird×Dtps. China Huey Red Rose-Kung ’s Valentine 。 取样与消毒 剪取蝴蝶兰未开花粗壮的花梗 ， 首先用流水冲洗 30 min ， 然后在超净工作台上进行以下操作 ： 先用
6-BA 0.0 mg/L 6-BA 1.0 mg/L 6-BA 3.0 mg/L 6-BA 5.0 mg/L 6-BA 7.0 mg/L 40 40 40 40 40 / 45 39 33 30 28 /d

/ 16 32 40 40 40 / 40 aA 80 bB 100 cC 100 cC 100 cC
是影响蝴蝶兰丛生芽诱导的重要因素 ， 6-BA 浓度达 3.0 mg ／ L 以上时丛生芽的诱导率就可达 100％ ； 在丛生芽增 殖过程中 ， 6-BA 8.0 mg/L 处理效果最好 ， 丛生芽增殖率 可 达 304％ ； 6-BA 8.0 mg/L ＋NAA 0.5 mg/L 的 处 理 更 能 促进蝴蝶兰丛生芽的增殖效果 ， 丛生芽增殖率可达 506％ ； 生根培养基组合 MS＋NAA 0.5 mg ／ L＋10％ 椰子汁的生 根效果较好 。 关键词 蝴蝶兰 ； 丛生芽 ； 组织培养
第 31 卷 第 4 期
热 带 作 物 学 报
CHINESE JOURNAL OF TROPICAL CROPS
Vol．31 No．4 Apr. 2010
2010 年 4 月
蝴蝶兰丛生芽途径的组织培养技术
李金雨 ， 洪丽萍
福建省亚热带植物研究所 ， 厦门
摘要
361006
对蝴蝶兰丛生芽途径的组织培养进行研究 ， 结果表明 ， 不经过愈伤组织直接诱导丛生 芽 的 过 程 中 ， 6-BA





6-BA 8.0 mg/L ＋NAA 0.5 mg/L 的 处 理
效果最佳 ， 丛生芽增殖率可达 506％ 。 由此可见 ， 适当浓度的 6-BA 和 NAA 混合使用能对蝴蝶兰丛生芽的增殖起 到较好的促进效果 。
2.3
生根培养 从表 4 可以看出 ， 在每个生根培养基组合上都能分化出根来 ， 但是 ， 不同的生根培养基组合之间存

/
mg ／ L＋10％椰子汁的组合生根效果最佳 ， 平均每株
试管苗生根数达 3.6 条 。 同时 ， 试验结果还 表明 ， 椰子汁或香 蕉汁等有机 物 对 蝴 蝶 兰 试 管 苗 的 生 根 有较好的促进作用 。