甘薯病毒病及其检测技术
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展望
• 由此可以看出,分子生物学方法将成为甘 薯病毒病检测的发展放向;
• RT-PCR技术可以对未知病毒进行检测, 并以此为基础发展出了简并引物PCR和复 合引物PCR技术,拥有诸多优势。
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• 目前,本实验室通过分子生物学检测方法, 检测到采自鄂州的甘薯植物叶片内的病毒 有:Sweet potato feathery mottle virus(SPFMV),Sweet potato chlorotic stunt virus (SPCSV), Cucumber mosaic virus (CMV)。
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检测技术
生物学方法
目测法(外观症状诊断法) 指示植物检测法(巴西牵牛、普通牵牛)
血清学方法
酶联免疫吸附法(ELISA) 免疫电镜法(ISEM)
分子生物学方法
核酸杂交技术(NASH) RT-PCR技术
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生物学方法
优点:
操作简单,成本低
缺点:
对病毒灵敏性差,不 能准确判定病毒及其 种类
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血清学方法
优点:
缺点:
操作简单,高效,特异 性强,快速 (NCM)ELISA
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抗血清制备时间长, 假阳性反应,具有株 系专化性,多种病毒 检测灵敏度低
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分子生物学方法
灵敏度最高, 特异性最强, 简单快速, 适于普遍应 用
优缺 点点
NASH需检测 大量样品, 处理复杂, 探针分离比 较困难,有 放射性污染
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甘薯病毒病及其检测技术
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• 地下根顶端通常有 4~10多个分枝,各 分枝未端膨大成卵球 形的可食用块根。
• 无性繁殖方式:薯块 育苗繁殖 ,茎蔓繁殖 (品种退化,病毒积 累,产量下降)
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甘薯上的病毒种类
目前,全世界报道的甘薯病毒共有32种,属于9个科
• 雀麦花叶病毒科(Bromoviridae); • 本扬病毒科(Bunyaviridae); • 花椰菜花叶病毒科(Caulimoviridae); • 长线性病毒科(Closteroviridae); • 豇豆花叶病毒科(Comoviridae); • 联体病毒科(Geminiviridae); • 马铃薯Y病毒科(Potyviridae) • Flexiviridae ; • Luteoviridae;
线性病毒; • 病毒颗粒850-950 nm,直径12 nm; • (+) ssRNA,含两条RNA,大约17 kb.
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甘薯病毒病害(SPVD)
➢SPFMV 和 SPCSV 协生共侵染引起 ➢SPFMV 和 SPCSV单独侵染症状轻微
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症状特点
变色:
花叶、斑驳、黄化
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马铃薯Y病毒科(Potyviridae)
• 甘薯羽状斑驳病毒 (SPFMV,分布最广) • 甘薯病毒C (SPVC) • 甘薯潜隐病毒 (SPLV) • 甘薯G病毒 (SPVG) • 甘薯病毒2(SPV2) • 甘薯轻斑点病毒 (SPMSV)
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坏死:
顶死、坏死斑、 环斑、条斑、条纹
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Βιβλιοθήκη Baidu
畸形:
皱缩、卷曲、 果面凹凸、矮化
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叶片斑点型
叶片皱缩型
花叶型
叶片黄化型
症状类型
卷叶型
薯块龟裂型
丛枝型
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SPVD的危害
➢ 潜伏侵染:病毒侵染后,在植物体内增殖,但 植物不表现症状的现象;
➢ 隐症带毒: 受到侵染而不表现症状的植株 ➢ SPVD显症植株的产量比健康减少79-86% ; ➢ 比SPCSV 单独侵染植株产量减少62-72%; ➢ SPVD爆发流行对甘薯生产造成严重危害。
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Potyviridae基本特征
• Potyvirus 病毒粒体线条状; • 在受侵染植物细胞中产生风轮状、卷轴状内含体; • 蚜虫传播; • 基因组为单链正义RNA
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甘薯褪绿矮化病毒(SPCSV)
• 长线性病毒科(Closteroviridae),毛形 病毒属(Crinivirus),是唯一侵染甘薯的长