临床检验方法评价

实验室认可对方法学验证的要求
CNAS-CL29:2007
检测限与可报告范围
可被检测系统检测出的被测量最低浓度称为检 检 测限（limit of detection，LoD），有时也称检 测限 测低限（lower limit of detection）或最小检出 浓度（minimum detectable concentration）。 测量范围（measuring range）表明测量系统的 测量范围 误差处于规定的极限内（如CV=10%）时，被 测量值分布的高、低界限值间的范围，又称工 工 作范围（working range）。 作范围
定性实验方法评价
样本的临床诊断是未知的，实验方法只能 与对比方法进行比较。 由于对比方法的准确度并非100%，此情 况下不能简单使用敏感性和特异性来描述 方法学性能， 应使用“符合率 符合率”对实验方法结果与对比 符合率 方法结果的一致程度进行描述：
样本的临床诊断未知
对比方法 总计 阳性 阳性 实验方法 阴性 总计 c a+c d b+d c+d n a 阴性 b a+b
Cut-off 95%区间 区间
当实验结果表明+20%浓度的样本产生阳 性结果数≥95%，同时，-20%浓度的样本 产生阴性结果数≥95%，说明临界值 ±20%浓度范围等于或超出临界值的95% 区间，对于被测物浓度在±20%浓度范围 以外的样本，实验方法将给出稳定的结果。 当阳性和/或阴性结果数＜95%时，应另 外准备不同浓度的实验样本，重新进行评 价。
保证足够的样本量， 确保对实验方法的评价在常规实验条件下进 行。
参考样本盘
由一组临床样本组成， 测定结果可与指定的参考方法或临床诊断 相联系， 参考样本盘通常包含不同浓度被测物的临 床样本， 可能时，还包括干扰物质。 对评价定性实验方法是非常有效的。
已知样本临床诊断结果
临床诊断 总计 阳性 阳性 评价方法 阴性 总计 C A+C D B+D C+D N A 阴性 B A+B
临界值（cutoff） 临界值
当样本中被测物浓度处于临界水平时，定 性实验重复检查同一样本，将产生50%的 阳性结果和50%的阴性结果。 当样本浓度在临界值以上增加时，阳性结 果比率增加； 而当样本浓度在临界值以下减低时，阴性 结果比率增加。
临界值的95%区间 临界值的 区间
当样本浓度高于临界值时，重复实验产生 95%阳性结果； 当样本浓度低于临界值时，重复实验产生 95%阴性结果； 之间的样本浓度范围。
（临床样本可达mg级）
HBsAg定性测定 定性测定
病毒抗原与病毒量无比例关系； 结果报告“反应性”或“无反应性” 确认（中和）实验有助于对病人的诊断； 结果报告“阴性”或“阳性”
谢谢
郭健 检验科： 85133860 检验中心：58115058 E-mail: guojian@cma.org.cn
定Baidu Nhomakorabea实验（qualitative tests） 定性实验
仅给出阳性或阴性（是或非）的实验结果。 特点：使用简便、低成本、操作过程规范 或能满足使用者的特殊要求。 评价：使用病人样本进行重复性实验和方 法比较是非常重要的内容。
定性实验的临床应用
在临床实验室中，定性试验可用于筛查、 诊断、确认、或监测为目的的测定。 试验的敏感性、特异性、预测值和效率等， 决定了其在临床应用的范围。 从临床应用的角度讲，定性实验可分为筛 查实验、诊断实验和确认实验。
已知样本临床诊断结果
方法敏感度 = 100%×[A/（A+C）] 方法特异性 = 100%×[D/（B+D）] 相关样本的患病率 = 100%×[（A+C）/N] 阳性结果预测值（PVP） = 100%×[A/ （A+B）] 阴性结果预测值 （PVN）= 100%×[D/ （C+D）] 方法效率 = 100%×[（A+D）/N]
临床检验（定性） 临床检验（定性）方法评价
郭健 卫生部北京医院
2007年10月 年 月
医学实验室认可的相关文件
CNAS-CL02《医学实验室质量与能力认 《 可准则》 可准则》； CNAS-CL27《医学实验室质量与能力认 可准则在临床血液学检验领域的应用说 明》； CNAS-CL29《医学实验室质量与能力认 可准则在临床化学检验领域的应用说明》 CNAS-CL30《医学实验室质量与能力认 可准则在临床免疫检验领域的应用说明》
方法学比较
样本种类和数量：最好使用常规病人的新 鲜样本，样本量应保证评价实验方法和比 较方法测定的需要。 样本中被测物应稳定，应尽可能用评价方 法和对比方法同时完成测定。 作为最低要求，用对比方法测定的阴性和 阳性样本数量，应分别在50例以上。
方法比较实验过程
使用临床样本进行方法学对比研究应在10 到20天内完成，
诊断实验（diagnostic tests） 诊断实验
定性实验用于特定疾病的诊断或临床可 疑指征的判断，如微生物学培养与细菌
鉴定。
通常情况下，诊断性实验要求方法学同 时具有较好的敏感性和特异性。 在有确认实验的条件下，可以适当放宽 对方法学特异性的要求。
确认实验（confirmatory tests） 确认实验
确认实验通常在筛查实验和诊断实验之 后进行，对已做出的检验结果进行验证 和确认，以帮助临床医生做出正确的临 床诊断。 确认实验一般设计为有较好的特异性和 较高的阳性预测值，如使用荧光密螺旋 体抗体吸收实验（FTA-ABS）作为梅毒
初筛实验的确认实验。
临界值（cutoff） 临界值
实验结果处于（阴、阳性）分界点时的样 本中分析物浓度值； 低于此值，定性实验的结果为阴性；高于 此值，定性实验的结果为阳性。 对定性实验来讲，临界值是唯一的医学决 定水平，
可报告范围
reportable range 在方法学规定的性能条件下，检测结果的 最大范围。 例：CK测定
测量范围：20-1000 U/L 可报告范围：20-5000 U/L（血清稀释， CV≤20%）
临床对“准确性” 临床对“准确性”的要求
实验室提供的检验结果或数据，应有助于 临床医生进行疾病诊断、疗效评估和预后 判断。 一个可以实现计量学“准确”测量的方法， 不一定能满足临床医生的实际工作需要。 除了具有计量学准确性外，实验室还应对 检验方法进行医学或临床准确性评价
样本的临床诊断未知
阳性符合率 = 100% × [a/(a+c)] 阴性符合率 = 100% × [d/(b+d)] 总符合率 = 100% × [(a+d)/n]
HBsAg测定的 测定的Cutoff值 测定的 值
ELISA方法：0.2-0.5 ng/ml CIA方法： 0.1 ng/ml
金标方法： 1.0 ng/ml 线性范围上线：50 ng/ml
筛查实验（screening tests） 筛查实验
筛查实验通常用于对整个人群或特定人群 中是否存在初测物的检查，如：大便潜血
实验。
通常要求检验方法有较高的敏感性，以保 证不漏掉真阳性结果。 一般情况下，筛查实验可能产生假阳性结 果，但在有较好的确认实验及不会带来严 重后果的前提下，还是很有益处的。
定性实验重复性评价
确立方法的临界值 ； 在临界值基础上准备出-20%浓度的样本 和+20%浓度的样本 ； 对以上低、高浓度样本分别测定20次，记 录阴性及阳性结果数；
确定Cut-off value
当实验结果表明“临界值”样本的阴性结 果和阳性结果不是各占50%时，原因可能 是：
被评估的临界值浓度不准确、 或结果数据不充足、 或方法学剂量反应曲线在临界值处是非线性 的