大小鼠各种采血方法与最大采血量
小鼠采血及给药方法
小鼠采血及给药方法
小鼠采血方法:
1. 选择小鼠的尾部静脉为采血点。
2.事先将小鼠置于温暖的环境中,保持鼠体温度较高,有助于
血流畅通。
3.用70%乙醇消毒小鼠尾部,待干后将尾部静脉突出。
4.使用一段带有注射器的采血针,将针尖插入静脉内,逐渐将
血吸入注射器中。
5.采取适当的采血量,通常不超过小鼠总体重的1%。
6.采血完毕后,将小鼠放回舒适的环境,并检查是否有出血或
感染。
小鼠给药方法:
1. 可以考虑口服给药:将给药物质制成溶液或混悬液,使用小鼠专用的给药针或胃管轻轻将药物注入小鼠口中。
2. 可以考虑皮下注射给药:使用一次性注射器和细针,轻轻将药物注射到小鼠的颈部、背部或腹部皮下。
3. 可以考虑静脉注射给药:将小鼠固定在注射台上,通过尾静脉或静脉突出的其他部位进行注射,使用适当大小的注射器和针头。
4. 可以考虑腹腔注射给药:将小鼠固定在注射台上,轻轻将药物注射到小鼠的腹腔内,使用适当大小的注射器和针头。
5. 必要时,可以使用气管插管或静脉插管等专业仪器辅助给药。
值得注意的是,在进行任何操作之前,应该对小鼠的器官位置、给药剂量和频率等进行仔细研究和规划,并严格遵守动物实验
伦理的相关规定。
在操作过程中要注意对小鼠的痛苦程度进行评估,并在必要时使用麻醉药物减轻疼痛。
大鼠取血方法
大鼠取血方法1. 割(剪)尾采血:当所需血量很少时采用本法。
每鼠一般可采血10余次以上。
小鼠每次可取血0.1ml ,大鼠0.3〜0.5ml。
1.4見尖采血才法将大杖囲進好•阳50乜左右SL水根池城部妁2 mm1⅛⅛-充IftG,ffl⅛消Sr擦干⅛⅛(Wifi⅛≠术旳的去尾尖3 ■ 10mm. 从用根那向尼尖檢忙血Fl朋尖M⅛.此法町采L5-2 BlL血液•2. 鼠尾刺血法:大鼠用血量不多时(仅做白细胞计数或血红蛋白检查),可采用本法。
先将鼠尾用温水擦拭,再用酒精消毒和擦拭,使鼠尾充血。
用7号或8号注射针头,刺入鼠尾静脉, 拔出针头时即有血滴出,一次可采集10〜50mm3。
如果长期反复取血,应先靠近鼠尾末端穿刺,以后再逐渐向近心端穿刺。
3. 眼眶静脉丛采血:体重20-25g的小鼠每次可采血0.2-0.3ml ;体重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml ,可适用于某些生物化学项目的检验。
将Λ∣N∣⅛i⅛庄实验台边SSr左手抓囂大K⅛M½肤Bl定头部,井轻轻向下压迫!RliJ*⅛Λ1□用導先稚备好的W 号舍JM甘头顶蝎(怦尖斛閒朝内人垂i⅛插人内就并向眼底方向转⅛IUffl切开押体丛「血敕便会连缨不Ilft地溝人采血UQ用此法大约可⅛3*5 mLΛι⅛β取血宪毕•立刻用压迫Ih环境材料氏时闫揉屮∙⅛⅛BM宽½≠]⅛J÷ ft J步驟同时操作]0.9rπm X 10Onflm J背牛人习櫃便用T⅛⅛骨—断.3⅛nmm,弁去屮阀段=EP 曲虻人0.1% IH-比钠< >150U∕myJ OJ rrL.均匀涧湿・50V⅛下I輻适帀ImL伞Iil的抗甌¾μi⅛V<取血则感须熒InJ衿住骨的质昂・h⅛⅛≠ll. 逓当劣备.:D ⅛⅛T.⅛:'1ΓB⅛⅛⅛'";* ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■I ■ cm ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■■ ■琴LC≡E^JiAjaw f⅛⅛i1 Ml ■. ■■ IV ■■■. >■ -κ∙■动物处理功物作亟耍求权不% J 25Og给西前禁的2∙24h・给药前探前0.5-1 ∙0h fe0.5-1.0% IV/W)给水实验粥问•补充休液∙H前苛煜为:取Ifc质常胃给予等统计4•理社加衙帝樹涪液・实验之后,外用泊炎药涂布眼部2 <:;#• H A ・∣∙・「. ∙Mhl片火. .1::ITfteOiU ImΛ<. Bjihl <>∣<rw<. fw« U4K( ∣dΛUIKMHKIA• T S12LF保定2压迢颈曽3J½HΛ入4固定采血5去背止Jft6∏A⅛fi⅛J4.叵定身怎.圧住石⅛∙放桧手祈,緞轿毛Mh沆畅出血.6血样曾轻轻罷匀,防止窠血・濤血・SteP 1A建议;L于内MtJI •涌陆止摟見:B -Λ⅛*÷⅛;C开址必倾卑牢ea定隹头邙头那乱动.4LftX^⅛f!⅛¾.且鬲牧咬伤;D可衣此叶将丸只取如的的乍羽剪掉.彷止按E栽£・1 •料大⅛⅛∙i⅛βfct±.捋钟*3 •右手持“曾从纹内*部,与EL土脱45的.AiU^A5・取血丸成,之氐瞼去歿部压力•再采去界拔出,按圧Ii 上.1左手保定SICPLft大鼠按压在亂笼上. iJ&UJfff:IWt2・紧携頤都,R追頌两侧.使卑突出•匝后铮脉丛充血r*ge 7Stcp2A 可« f∙ A^⅛fe⅛eu^Λ ⅛ f5s 突出.w B Λ⅛λ扎JIU ♦窑・保送爪緊钓司时.不∙t λii.便其t.t Λ亡•Step3A 针⅛<tΛ⅛∣S)lR*・*1入后再转 一定角度便斜面廿着ERllJ &界;B 制入凍度.小RZZ 大区 约45∙n ・考禺型有Hl 力时即护止∙⅛⅛∙ 同时.管逼出约0. 1-0. 5ιWr ・边¾⅛< 转; C 不要使用管的尖位伶利期描入• 场穷璇購碎片右叹内,迪成持纹伤芳. 使埒下次反抗增“; D 拿昔的子要保持工净,常血潢的 子損不妥4*狀管的的⅛⅛,另龟反疑血・ 可刃鮮水搏洗・Stcp2. ⅜. Λ⅛ 茂两侧・使IR交出.屯一I 后静脉丛Jt血 Stcpl WL 內如,45 ΓΛΛ.戎转倒 入,夂转谴出.A -般血减速戊快•证明∙tt膩了IKIf劝脉■⅛⅝AΛrX<ft.证明要调怒皂侦胥的位JL 占液祁克釘爼保中了,没版毛师打漉出来;B岀血过租Q知週到出£不杨不用着宦械毛如管可以调兰一下毛细管的扎入付Jf或深戎浅的找止一下&会t¼Λ出;C加肴“浹已经冬毛hr⅛中{固必须込迫拔除毛细管,再搽工净眼哺・f*∣Mf4L4t;D筝到出血点将力it 删到大Il的身体上大鼠出现英动的惜况檢大的一邯分力是他旳M 吹仗出来约保迄抱的后咬尢法乱蹬就瓮很好的供定大鼠•集后传中指和*第处・、•U可以保IT血淹的雁畅Slop5.4tiι½A.・±ff ⅛1Λ*Λ力.⅛<⅛SICP SA自曙自繪宣的血量G∙即冷±3千璘部的圧力.同时.并覆土茎抜出.以防土术6£併扎出直.B 尿乞把IjlltflaiΛ⅛>it∣∣干冷,遊丸储块附徇下次2・6>UΛM 匀Stcp6.Λ4⅛ UteΛ<J.---- 障止心・潺血StCP 44同龙采血Sιcp4•阖丸身体.坊滋,披松手4⅛, M 毛⅛e管・Λ¼⅛⅛.2{锻出•扶/1止血∖ -* IlIlJf≠∣⅛⅛ιfl絮丹事第拭耳*⅞∕->l01 : w√>前五点(4 丁4昭一厉^<6O⅛∣⅛w O4.断头取血:采血者的左手拇指和食指以背部较紧地握住大(小)鼠的颈部皮肤,并作动物头朝下倾的姿势。
大鼠和小鼠的采血方法
大鼠和小鼠的采血方法1.麻醉方法:在采血前,先给大鼠或小鼠进行麻醉,以减少它们的疼痛感受。
常用的麻醉方法有以下几种:-静脉麻醉:将合适剂量的麻醉剂通过尾静脉或背静脉注射给大鼠或小鼠,使其进入麻醉状态。
-吸入麻醉:将麻醉气体或气溶胶通过麻醉箱或麻醉罩给大鼠或小鼠吸入,达到麻醉效果。
-局部麻醉:将麻醉剂涂抹在采血部位的皮肤上,使局部麻木,减少疼痛感。
2.采血部位:常用的大鼠采血部位有尾静脉、颈静脉、眼眶突静脉等,而小鼠采血部位则有尾静脉、颈静脉、眼眶突静脉、前肢静脉等。
3.采血工具和器材:-采血针:选择合适大小的采血针,不同大小的动物需要选择不同规格的针头。
-注射器:用于抽取和储存血液样本的容器。
常用的有离心管、毛细管等。
-注射器插管:将采集到的血液导入注射器中储存。
4.采血方法:-尾静脉采血:将大鼠或小鼠的尾巴用温水浸泡,使其尾部静脉扩张。
然后用酒精消毒尾巴,用手指轻轻压住尾部静脉靠近尾根的部位,使尾尖鼓胀,再用采血针针尖刺破尾尖的皮肤,顺着静脉方向将血吸入注射器中。
-颈静脉采血:将大鼠或小鼠定位于侧卧位,用酒精消毒颈部的皮肤。
手指轻轻压住颈侧的静脉,使其充血,然后用采血针针尖针插入触及到静脉,将血液吸入注射器中。
-眼眶突静脉采血:先给大鼠或小鼠进行眼眶突的局部麻醉,随后用消毒酒精将眼眶突部分消毒。
再用适当大小的针头插入眼眶突静脉,将血液抽取到注射器中。
5.采血后的处理:-停血:采血后需用无菌棉球或无菌纱布轻轻按住针刺处,让血液凝结停止流血。
-保存:将采集到的血液样本转入离心管中,用离心机离心,分离血浆和血细胞。
将血浆或血细胞储存在冷冻管中,冷冻保存。
以上就是大鼠和小鼠采血的最全方法。
在进行采血操作时,需要注意动物的麻醉和疼痛管理,操作要轻柔、快速、准确,以减少动物的痛苦和疼痛。
另外,为了确保采血的科学性和准确性,还需要遵守实验室的相关规范和伦理要求,确保实验与动物实验道德的合理性。
常见实验小鼠采血方法
常见实验小鼠采血方法小鼠是科研实验中常用的实验动物,但由于其体积小,血管细,采血难度大,进而影响采血的质量,小编简要总结了常见的小鼠采血方法,仅供参考:一只成年小鼠的循环血量大约是1.5~2.5ml,大约体重的6~8%。
在对营养状况良好的小鼠进行采血时,单次采血量最多可以到达循环血量的10%,(例:若20克小鼠,它的总血量约占1.2-1.4毫升,即每次取120ul-140ul血液不会对小鼠有太大的影响)。
采血之后应该给予温热的等渗溶液补充,可以在2~3个星期内恢复原有的水平。
两周采血量小于血液循环的10%,单周小于7.5%,小鼠血液循环72ml/kg实验室常用抗凝剂:乙二胺四乙酸(EDTA)盐、枸橼酸盐、草酸盐、肝素实验室常用采血管:(采血后立即颠倒混匀8次)1.黑色:枸橼酸钠;血沉2.浅蓝色:枸橼酸钠;血凝试验(如PT、APTT)3.深蓝色:肝素钠或EDTA-Na2;血液微量元素4.紫色:EDTA-K2;血常规(血液细胞分析)5.绿色:肝素锂;大部分生化、血氨6.灰色:血糖降解抑制剂和EDTA-Na2;血糖7.棕色:肝素钠或EDTA-K2;血铅8.浅黄色ACD管:葡萄糖、抗凝剂;血库试验9.浅黄色SPS管:SPS液、氯化钠溶液;血液培养、微生物培养尾尖采血麻醉小鼠后,用温水(但水温不要过高)擦拭尾巴,引起轻微的血管扩张。
用无菌手术刀、刀片或锋利的剪刀,快速截断小鼠尾尖0.5-1cm。
如果需要多次采血,之后每次仅需截除2-3mm。
可以从尾部向尾尖方向按摩,以增加血流(但是,这会降低血样的质量,增加溶血的风险)。
可以用毛细采血管收集血液,或直接滴入收集管中。
采血结束后,按压伤口或使用止血剂(如硝酸银,6%液体火棉胶)来止血。
每次采血量大约可达0.1ml。
眼眶静脉丛采血优点:眼眶后静脉丛采血法方法简单,便于掌握。
血流较快,采血量多,能在较短时间内采约0.5mL血。
伤口较小,愈合较快。
成功率高,死亡率低。
小鼠常用采血方法
THE END
优点: 1.不会给大小鼠造成大的伤害 2.可反复采血,每次采血量可控于0.2-
0.5ml 3.操作方便,无需麻醉 4.采血后动物恢复快 5.符合3R原则
颌下静脉采血
3
1 1.无菌的、单包装的、一次性采血针
2. 4.0mm的针头适合小鼠(2到6周大小的BALB/C和 C57Bl/6)。
3. 5.0mm的针头更适合2个月或者更大的成年鼠。
Sequential bleeds
眼眶静脉丛采血 颌下静脉采血 隐静脉采血 尾部采血
需要麻醉
Terminal bleeds
心脏采血 下腔静脉采血
需要麻醉
小鼠面颈部血管解剖示意图
眼眶静脉丛采血
1
2
3
4
小鼠采血量为0.2-0.3ml
大鼠采血量为0.4-0.6ml
眼眶静脉丛采血
颌下静脉采血
目前国际上一种最新的、最简单快捷的、最 人道的采血方法!
实验室常用抗凝剂
乙二胺四乙酸(EDTA)盐 枸橼酸盐 草酸盐 肝素
常用:(采血后立即颠倒混匀8次) 1.黑色:枸橼酸钠; 血沉 2.浅蓝色:枸橼酸钠; 血凝试验(如PT、APTT) 3.深蓝色:肝素钠或EDTA-Na2;血液微量元素 4.紫色:EDTA-K2; 血常规(血液细胞分析) 5.绿色:肝素锂; 大部分生化、血氨 6.灰色:血糖降解抑制剂和EDTA-Na2; 血糖 7.棕色:肝素钠或EDTA-K2; 血铅 8.浅黄色ACD管: 葡萄糖、抗凝剂;血库试验 9.浅黄色SPS管: SPS液、氯化钠溶液;血液培养、微生物培养
隐静脉采血
1
2
3
4
小量、反复小鼠采血的常用方法。特点是不用麻醉
小鼠采血及给药方法
小鼠采血及给药方法一、小鼠采血方法1.静脉采血法:(1)静脉穿刺法:将小鼠固定在实验台上,清洁采血部位(常常是尾静脉),用适当的方法固定小鼠尾部,例如用取血夹固定。
用消毒棉球涂抹于采血部位,利用一只针筒或采集针对静脉进行穿刺。
(2) 尾静脉切割法:先用消毒棉球涂抹于小鼠尾部静脉附近,接着使用锋利的剪刀剪切尾部皮肤,直到出现静脉。
使用脱针管(micro-hematocrit tube)将血液抽吸出来。
采血结束后,可用消毒剂处理采血点,以防止感染。
2.额高度法:采用颅内针,固定小鼠在颅骨穿刺装置上,选用滑动固定针。
先用洗净针按住头部,再通过颅针插入到穿刺装置中。
同时使用抽吸器抽取出血液。
3.围尾车压法:将小鼠固定在一块平板上,用三个围绳将其尾部固定,留一个关节使小鼠尾部随意摆动。
在上方围绳旁边的固定处架设一只容器,用于收集滴下的尾血。
二、小鼠给药方法1.口服给药:该方法较简单,将药物以适当的剂量溶解于注射用水或生理盐水中,用灌胃针或注射器将药液直接灌入小鼠口腔中。
要确保给药的准确剂量和流量,避免嗓子喉咙堵塞。
2.腹腔注射法:将小鼠放在工作台上,用适当的方法固定小鼠身体,清洗注射部位。
用消毒棉球涂抹于腹部,使用22-25号注射针或微量注射器将药物缓慢注射入腹腔。
注射速度要控制得适当,避免损伤内脏器官。
3.尾静脉注射法:将小鼠固定在工作台上,清洁尾部毛发,用爪式血管夹固定尾部血管。
使用注射针插入尾静脉,并注意发现血斗标志。
缓慢将药物注射入尾静脉。
4.静脉注射法:将小鼠固定在工作台上,清洗注射部位。
用消毒棉球涂抹于注射部位(通常是尾静脉),固定小鼠尾部。
使用注射针或微量注射器将药物注射入静脉。
5.肌肉注射法:将小鼠放在工作台上,用适当的方法固定小鼠身体。
将药物以适当的剂量溶解后,使用注射针插入小鼠腹股沟或胫肌中缓慢注射。
以上是小鼠采血及给药的常用方法,注意采血和给药的操作应该规范、缓慢、准确,以避免对小鼠造成不必要的伤害。
大鼠取血方法
大鼠取血方法1. 割(剪)尾采血:当所需血量很少时采用本法。
每鼠一般可采血10余次以上。
小鼠每次可取血0.1ml,大鼠0.3〜0.5ml。
1.4見尖采血才法将大杖囲進好•阳50乜左右SL水根池城部妁2 血骨充血后•用球消黑、擦干BU匕用消澎手术旳的去尾尖3 ■ 10mi叭魅后从用根那向尼尖檢忙血fl朋尖流岀。
此法町采L5-2 mL2. 鼠尾刺血法:大鼠用血量不多时(仅做白细胞计数或血红蛋白检查),可采用本法。
先将鼠尾用温水擦拭,再用酒精消毒和擦拭,使鼠尾充血。
用7号或8号注射针头,刺入鼠尾静脉, 拔出针头时即有血滴出,一次可采集10〜50mm3。
如果长期反复取血,应先靠近鼠尾末端穿刺,以后再逐渐向近心端穿刺。
3. 眼眶静脉丛采血:体重20-25g的小鼠每次可采血0.2-0.3ml ;体重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml,可适用于某些生物化学项目的检验。
将天M冊建庄实验台边Sfir左手抓囂大區拥那皮肤囿定头部,井轻轻向下压迫用導先稚备好的io 号舍JM甘头顶蝎(怦尖斛閒朝内人垂氏插人内就并向眼底方向转动以便切开押体丛「血敕便会连缨不斷地溝人采血用此法大约可取?-3 取血宪毕•立刻用脱册郴压迫也环境材料0.9mm x 100mm,背牛人习櫃便用丫经常骨—断.30mm晴、弁去屮阀段=EP 曲虻人0.1% IH-比钠< >150U/mgJ 0J mL-均匀涧湿・50P减下I輻适帀1mL伞血的抗甌效果肛人取血则感须熒I R J衿住骨的质昂.杯号井汕. 邀当劣备.1 Mi ■. ■■ iV ■■■. >■ -K> ■宽敬台曲*輕了F组多步驟同时操作]| ■ cm ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■■ ■琴L9tt»EP&J动物处理功物作亟耍求权不% J 250g给西前禁的2・24h・给药前探前0.5-1-Oh fe0.5-1.0% iV/W)给水实验粥问•补充休液.H前苛煜为:取血质常胃给予等统计4•理社加衙帝樹涪液.实验之后,外用泊炎药涂布眼部2 <1AF保定2压迢颈曽3加的剌入4固定采血5去背止jft 6样加擂匀4.叵定身怎.圧住石肢,放桧手祈,緞轿毛ML沆畅出血.6血样曾轻轻罷匀,防止窠血・濤血.Step 1A建议;L于内枚鼻•涌陆止摟見:B 一定更帶手豪;C开址必倾卑牢83定隹头邙头那乱动.扎位JT黑易棉僞离.且易枕咬伤:D可衣此叶将丸只取如的的乍須剪掉.彷止按总栽£・1 •料大R歿壬牲歐1±.捋钟*3 •右手持“曾从纹内*部,与6L土脱45的.从轻剌入5•取血丸成,之EF瞼去歿部压力.再采去界拔出,按圧吐上.1左手保定Stcpl.W大鼠按压在亂笼上.il&Wfff:藝部t2•紧携頤都,R追頌两侧.使卑突出・匝后铮脉丛充血r»ge 7•押•Stcp2A 可円管试来鼻段碰Cl 球是否巳疑 突出.1'此甘丈乱反此身扎JU ♦窑・保送 爪緊钓司时.不ttKii.便其宣息死亡.Step3A 针头钎面走尙at 班・的入后再转 一定角度便斜面廿着瓯聊&界;B 制入凍度.小区为2・4・大区 釣卜X ・考禺型有也力时即护止牠进. 同时.管逼出约0. 1-0. 5twr ・边迅边就 转;C 不要使用管的尖位伶利期描入. 场穷璇購碎片右叹内,迪成持纹伤芳. 使埒下次反抗增“;D 拿昔的子要保持工净,常血潢的 子損不妥搽狀管的的坊,另龟安疑血・ 可刃鮮水搏洗・Sgp2•禁祖fiS 部.压迪 it两侧・使銀交出.屯一I 后静脉丛It 血Step! WL 內如, 45匸夬代・戎转倒 入,夂转谴出.A -般血减速戊快.证明•«膩了殴匝劝脉. 如舉白兀迄皮慢.证明要调怒皂侦胥的位JL 占液祁克釘爼保中了,没版毛师打漉出来;B岀血过租*知週到出£不杨不用着宦械毛如管可以调兰一下毛细管的扎入付Jf或深戎浅的找止一下&会玄新沉出;C加肴“浹已经冬毛fw$中{固必须込迫拔除毛细管,再搽工净眼哺.f*JMf4L4t;D筝到出血点将力it 删到大II的身体上大鼠出现英动的惜况檢大的一邯分力是他旳吉吹仗出来约保迄抱的后咬尢法乱蹬就瓮很好的供定大鼠.集后传中指和*第处… •U可以保iL血淹的雁畅5去育止ItStep SA自曙自繪宣的血量6.即冷去3千到1部的圧力.同时.并覆土茎抜出.以防土术6 £併扎出直.B尿乞把1RM罔18的血潢摄干冷,遊丸储块附徇下次2・6"品摇匀S"M・血桿片U经汎勺.---- 障止心・Step 44同龙采血・ ±fr 力.将集血2{锻出.扶/!止血\ -* II4.断头取血: 采血者的左手拇指和食指以背部较紧地握住大 (小)鼠的颈部皮肤,并作动物头 朝下倾的姿势。
大鼠取血方法
大鼠取血方法1.割(剪)尾采血:当所需血量很少时采用本法。
每鼠一般可采血10余次以上。
小鼠每次可取血0.1ml,大鼠0.3~0.5ml。
2.鼠尾刺血法:大鼠用血量不多时(仅做白细胞计数或血红蛋白检查),可采用本法。
先将鼠尾用温水擦拭,再用酒精消毒和擦拭,使鼠尾充血。
用7号或8号注射针头,刺入鼠尾静脉,拔出针头时即有血滴出,一次可采集10~50mm3。
如果长期反复取血,应先靠近鼠尾末端穿刺,以后再逐渐向近心端穿刺。
3.眼眶静脉丛采血:体重20-25g的小鼠每次可采血0.2-0.3ml;体重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml,可适用于某些生物化学项目的检验。
4.断头取血:采血者的左手拇指和食指以背部较紧地握住大(小)鼠的颈部皮肤,并作动物头朝下倾的姿势。
右手用剪刀猛剪鼠颈,约1/2-4/5的颈部前剪断,让血自由滴入盛器。
小鼠可采用约0.8~1.2ml;大鼠约5-10ml。
5.心脏采血:鼠类的心脏较小,且心率较快,心脏采血比较困难,故少用。
若做开胸一次死亡采血,先将动物作深麻醉,打开胸腔,暴露心脏,用针头刺入右心室,吸取血液。
小鼠约0.5-0.6ml;大鼠约0.8-1.2ml。
1.浅麻醉大鼠2.四肢展开固定在平板上3.按常规碘酒、酒精消毒后4.用食指感觉心博最动处5.大约在胸骨下缘1/3处、稍偏左0.2-0.5左右的地方垂直进针(1/4号)6.针头抵心脏有明显的搏动感,再稍进针,有空虚感,血液跳跃而上针腔7.从血液的颜色很容易判断在心室还是心房,一般都在心室8.多次同一大鼠的心脏采血,切记初次进针的位置及深度,不要随意更换固定姿势!9.我每次取1ml血液,大约可操作4-5次(200g大鼠)6.颈动静脉采血:先将动物仰位固定,切开颈部皮肤,分离皮下结缔组织,使颈静脉充分暴露,可用注射器吸出血液。
在气管两侧分离出颈动脉,离心端结扎,向心端剪口将血滴入试管内。
离心取上清后,余下的红细胞加适量生理盐水从尾静脉中回输给大鼠,这样可能对大鼠的血量、体内药物的浓度等影响均小些。
大鼠和小鼠的采血方法
大鼠和小鼠的采血方法(最全)这里主要介绍几种大小鼠的采血方法,以帮助试验中需要用到相关技术的人员。
1)尾尖取血:当所需血量很少时采用本法。
固定动物并历出鼠尾,将鼠尾在45 C温水中浸泡数分钟,也可用二甲苯等化学药物涂擦,使局新血管扩张。
将鼠尾擦干,剪去尾尖,血自尾尖流出,让血液滴入盛器或直接用移液器吸取。
如需间隔一定时间,多次采取鼠尾尖部血液,每次采血时,将鼠尾剪去很小一段,取血后,先用棉球压迫止血并立即用6%液体火棉胶涂于尾巴伤口处,使伤口外结一层火棉胶薄膜,保护伤口。
也可采用切割尾静脉的方法采血,三根尾势脉可交替切割,并自尾尖向尾根方向切割,每次可取0.2〜0.3ml血,切割后用棉球压迫止血。
这种采血方法在大鼠进行较好,可以较长的间隔时间连续取血,进行血常规检查。
(2)眼眶后静脉丛取血:当需中等量的血液,而又需避免动物死亡时采用此法。
用左手固定鼠,尽量捏紧头部皮肤,使头固定,并轻轻向下压迫颈部两侧,引起头部静脉血液回流困难,使眼球充分外突(示眼眶后静脉丛充血),右手持毛细玻璃管,沿内眦眼眶后壁向喉头方向旋转刺入。
刺入深度小鼠2〜3mm ,大鼠4〜5mm。
当感到有阻力时再稍后退,保持水平位,稍加吸引,由于血压的关系,血液即流人玻璃管中。
得到所需的血量后,拨出毛细管。
若手法恰当,小鼠约可采血0.2〜0.3ml,大鼠约可采血0.4〜0.6ml。
(3)断头取血:当需要较大量的血液,而又不需继续保存动物生命时采用此法。
左手捉持动物,使其头略向下倾,右手持剪刀猛力剪掉鼠头,让血液滴入盛器。
小鼠可采血0.8〜1.0ml,大鼠可采用5〜8ml。
(4)眶动脉和眶静脉取血:此法既能采取较大量的血液,又可避免断头取血法中因组织液的混入导致溶血的现象,现常取代断头取血法。
先使动物眼球突出充血后,以弯头眼科镊迅速钳取眼球,并将鼠倒置,头向下,眼眶内很快流出血液,让血液滴入盛器,直至不流为止。
此法由于取血过程中动物未死,心脏不断在跳动,因此取血量比断头法多,一般可取鼠体重4〜5 %的血液量,是一种较好的取血方法。
小鼠取血方法
固定动物并露出鼠尾,将尾部侵入 45-50度温水中数分钟,小鼠取血方法主要有三类方法: 1、少量取血:鼠尾采血法使静脉充血,擦干,再用酒精棉球擦拭消毒。
剪掉尾尖约 用毛细管定量吸取尾血。
采血完毕用棉球压迫止血2、中等量取血:眼眶静脉丛采血 一一左手拇指及食指紧紧握住小鼠颈部,压迫颈部两侧使眶后静脉丛充血,但用力要恰当,防止动物窒息死亡。
右手持玻璃毛细管从右眼或左眼内眦 部以45度角刺入,刺入深度为 2-3mm 。
若遇阻力稍后调整角度后再刺入,如穿刺恰当,血 液能自然流入毛细管内。
得到血厚,即除去颈部压力,拔出毛细管,用干棉球压迫止血 3、大量采血:断头采血 一一用于动物实验结束后。
左手握住小鼠,右手持剪刀,快速剪掉 头颈部,倒立动物让血液滴入容器。
注意防止断毛落入剪脛取耻法:将材暑鼠较入深融也0^布養中,将試身瑕塩.竊卅厘巴•川洎精涂泡址曲 管扩帐r 剪《遲?;庇蜃曲瞳血卿盯流出,皿子轻轻地从尾根郛向尾次挤捏,吋取到一疋S 的血械U UllL 后,川柿刊斥迫止血-也可采用交眷切割厘静脉方肚联血.fDF 利7J 片在屁尖部切破一fitSiSVSS”诲脉 血即可流岀.母次刃収63〜0.5 ml,供一^^^^(1帯况宾验=三狠尽欝牀可普换切剖.d 厘瓷冋椒部切別. 由卜毆恤易题 需要仝血时,慚事先将抗礙剂直P 采血管中*如用MDlfa 泡恳减 则壷即与i 理赴K 混合.狼球后前献从审血注,左千持罷* ^fi/指与中指拥忤烦用应扶.侑捋按乐%部向下■阴滞押IB:冋甌倬 谨球石前聯風充虬喂球外如 右于品1斌卩索落被^^牠过的11制吸血益.从内毗部刺、消内N 関雌, 向眼球厉推进4-5 DIDI. 切开WA. Ibl.液n 初进入吸血计简,槿抽吸啊管〔EF 止負用用 迫甜脉M 柚拥血弟ffisft},拔出吸血比 放松手床力,出血可rm 梓止.也可用特制的破璃取Ik 管(管长?〜 10 cm,前關世成孔则智*内泾0. 1・=1, Smkh 长为1血 丘端管栓为0飞cJdr 此硬时可在同一刺孔型 見取『1"此袪也适用,暉鼠和專岛-0.2-0.3cm 。
摘眼球采血
一、1.割(剪)尾采血当所需血量很少时采用本法。
固定动物并露出鼠尾。
将尾部毛剪去后消毒,然后浸在45℃左右的温水中数分钟,使尾部血管充盈。
再将尾擦干,用锐器(刀或剪刀)割去尾尖0.3-0.5cm,让血液自由滴入盛器或用血红蛋白吸管吸取,采血结束,伤口消毒并压迫止血。
也可在尾部作一横切口,割破尾动脉或静脉,收集血液的方法同上。
每鼠一般可采血10余次以上。
小鼠每次可取血0.1ml,大鼠0.3~0.5ml。
2.鼠尾刺血法大鼠用血量不多时(仅做白细胞计数或血红蛋白检查),可采用本法。
先将鼠尾用温水擦拭,再用酒精消毒和擦拭,使鼠尾充血。
用7号或8号注射针头,刺入鼠尾静脉,拔出针头时即有血滴出,一次可采集10~50mm3。
如果长期反复取血,应先靠近鼠尾末端穿刺,以后再逐渐向近心端穿刺。
3.眼眶静脉丛采血采血者的左手拇食两指从背部较紧地握住小鼠或大鼠的颈部(大鼠采血需带上纱手套),应防止动物窒息。
当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧,使眶后静脉丛充血。
右手持续接7号针头的1ml注射器或长颈(3~4cm)硬质玻璃滴管(毛细管内径0.5-1.0mm),使采血器与鼠面成45℃的夹角,由眼内角刺入,针头斜面先向眼球,刺入后再转180度使斜面对着眼眶后界。
刺入浓度,小鼠约2~3mm,大鼠约4~5mm。
当感到有阻力时即停止推进,同时,将针退出约0.1-0.5mm,边退边抽。
若穿刺适当血液能自然流入毛细管中,当得到所需的血量后,即除去加于颈部的压力,同时,将采血器拔出,以防止术后穿刺孔出血。
若技术熟练,用本法短期内可重复采血均无多大困难。
左右两眼轮换更好。
体重20-25g的小鼠每次可采血0.2-0.3ml;体重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml,可适用于某些生物化学项目的检验。
4.断头取血采血者的左手拇指和食指以背部较紧地握住大(小)鼠的颈部皮肤,并作动物头朝下倾的姿势。
右手用剪刀猛剪鼠颈,约1/2-4/5的颈部前剪断,让血自由滴入盛器。
大鼠小鼠采血标准操作规程
目的规范实验人员进行大、小鼠采血的操作程序。
适用范围适用于需要对大、小鼠的采血操作。
职责.1 管理人员负责监督、管理;.2 实验动物中心技术员负责指导、教学;.3 实验人员选择合适的采血方法,并严格遵守本规程。
规程.1 大小鼠常用的采血方法有:眼眶静脉丛采血、剪尾采血、摘眼采血、心脏采血。
.2 眼眶静脉丛采血操作规程(如图).2.1 采血前可按《大鼠小鼠麻醉标准操作规程》(CCAL-SY-SOP-24)将实验动物浅麻醉,但一般情况下不用。
.2.2 按抓取方法抓取实验动物,左手拇指、食指从背部较紧地握住实验动物的颈部(应防止动物窒息)。
.2.3 取血时,左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧,使头部静脉血液回流困难,眼球充分外突,眶静脉丛充血。
右手持长颈(3-4cm)硬质毛细玻璃管(内径 0.5-1.0mm),将采血管与面部成 45°的夹角,在泪腺区域内,用采血管由眼内角在眼睑和眼球之间向喉头方向刺入。
.2.4 刺入深度小鼠约为 2-3mm,大鼠约为 4-5mm,当达到蝶骨感到有阻力时,再稍后退 0.1-0.5mm,边退边抽。
.2.5 将采血管保持水平位,稍加旋转并后退吸引,由于血压的关系,血液回自动流入玻璃管中。
.2.6 得到所需的血量后,立即除去加于颈部的压力,同时拔出采血管。
为防止术后穿刺孔出血,用消毒纱布压迫眼球 30 秒。
.2.7 20-30g小鼠每次可采血0.2-0.3ml,200-300g大鼠每次可采血0.4-0.6ml 采血部位大约 3-7d 修复)。
.3 小鼠眼眶采血简易方法:用注射器针头代替毛细玻管,插入后挑起或压迫眼球,血液自动流出滴下。
.2 剪尾采血操作规程需血量较少时常用此法。
先将实验动物固定,将鼠尾浸在 45-50℃温水中浸泡数分钟或使用酒精棉球反复擦拭擦鼠尾,使尾部血管充盈,剪去尾尖1-2mm(小鼠)或 5-10mm(大鼠),血自尾尖流出,让血液滴入盛器或直接使用吸管吸取。
采血方法
查看文章实验动物的取血方法2007-11-10 11:01采血方法(1)小鼠和大鼠①尾尖取血将动物装在固定筒内,露出尾巴。
将尾共剪掉1~2mm(小鼠)或5cm(大鼠),然后自尾根向尖端按摩,血自尾尖流出。
亦可先将鼠尾泡于500C热水中,揩干后剪去尾尖,取血后用棉球压迫止血。
此法可反复多次取血,小每次可取血0.1ml,大鼠0.3~0.5ml。
②眶动脉和眶静脉取血将动物头部按住并压迫眼球使突出充血后,以止血钳迅速钳取眼球后。
眼眶内很快流出血液,将血滴入玻璃器皿内,达到所需采用量后用棉球压迫眼眶止血。
此法所取血量较多,小鼠每次可采血0.2~0.3ml,大鼠每次可采血0.5~lml,动物可存活。
间隔数日后可自另一侧眼眶取血。
③眼眶后静脉丛取血用一长约7~lOcm的玻璃毛细管(内径约1mm),另端渐扩大呈喇叭形,将其尖端折断。
折断端锋利,预先将玻璃管浸入l%肝素溶液,取出干燥。
取血时左手抓住鼠两耳间头部皮肤,使头固定,并轻轻向下压迫颈部两侧,使眼球充分外突,眼眶后静脉丛充血。
右手持毛细管,将其尖端插入眼睑与眼球之间并向眼底方向移动,稍加吸引,血液即流入玻璃管中。
取血完毕拔出毛细管,左手放松出血即停止。
毛细管就叫“玻璃毛细管”,是硬质中性玻璃,内径:0.9--1.1mm, 壁厚0.1--0.15mm 管长120mm。
④股静脉(或股动脉)取血麻醉动物背位固定,切开左或右腹股沟的皮肤,作股静脉或股动脉分离手术。
注射针穿刺股动脉或股静脉抽血,也可在颈静脉或颈动脉处穿刺取血。
此法小鼠可采血0.2~0.8ml,大鼠约0.4~0.6ml。
⑤断头取血用剪刀剪掉鼠头,立即将鼠头向下,提起动物,将血滴入容器内。
小鼠可采用0.8~1.2ml,大鼠5~lOml。
(2)豚鼠①心脏取血豚鼠背位固定,左手触摸心脏搏动最明显处。
一般在胸骨左缘第4~6肋间隙,用注射针刺入心脏。
血液即进入注射器内,取血宜迅速,以防血液凝固。
本法取血量多,可达15~20ml。
大小鼠各种采血方法与最大采血量
大小鼠各种采血方法与最大采血量1 剪尾采血小鼠每次采血量0.1ml,大鼠每次采血量0.3-0.5ml左手拇指和食指从背部抓住鼠颈部皮肤,将鼠头朝下,鼠保定后将其尾巴置于50℃热水中浸泡数分钟,使尾部血管充盈。
擦干尾部,再用剪刀或刀片剪去尾尖1-2mm,用试管接流出的血液,同时自尾根部向尾尖按摩。
取血后用棉球压迫止血并用6%液体火棉胶涂在伤口处止血。
2 摘除眼球采血小鼠采血量0.6-1ml左手抓住小鼠颈部皮肤,轻压在实验台上,取侧卧位,左手食指尽量将小鼠眼周皮肤往颈后压,使眼球突出。
用眼科弯镊迅速夹去眼球,将鼠倒立,用器皿接住流出的血液。
采血完毕立即用纱布压迫止血。
大鼠少用。
3 心脏采血小鼠采血量0.5-0.6ml,大鼠采血量1-1.5ml鼠仰卧位固定,剪去胸前区被毛,皮肤消毒后,用左手食指在左侧第3-4肋间触摸到心搏处,右手持带有4-5号针头的注射器,选择心搏最强处穿刺,当刺中心脏时,血液会自动进入注射器。
4 断头采血小鼠采血0.8-1.2ml,大鼠采血量5-10ml左手拇指和食指从背部抓住鼠颈部皮肤,将鼠头朝下,右手用剪刀剪断鼠颈部约1/2-4/5,让血液流入试管。
5 眼眶静脉丛采血小鼠采血量为0.2-0.3ml,大鼠采血量为0.4-0.6ml取内径为1.0-1.5mm的玻璃毛细管,临用前折断成1~1.5cm长的毛细管段,浸入1%肝素溶液中,干燥后用。
取血时左手抓住鼠两耳之间的颈背部皮肤以固定头部,轻轻向下压迫颈部两侧,引起头部静脉血液回流困难使眼眶静脉丛充血,右手持毛细管由内眦部插入结膜,再轻轻向眼底部方向推进,轻轻旋转毛细管以划破静脉丛,让血液顺毛细管流出,接收入事先准备的容器中。
采血后纱布轻压眼部止血。
小鼠、大鼠、豚鼠及家兔均可采取此法取血。
刺入深度小鼠为2-3mm,可采血0.2-0.3ml;大鼠为4-5mm,可采血0.4-0.6ml。
动物的采血方法
动物的采血方法动物的采血方法一、小鼠、大鼠的采血1.眼眶后静脉丛采血左手拇指及食指抓住鼠两耳之间的皮肤使鼠固定,并轻轻压迫颈部两侧,阻碍静脉回流,使眼球充分外凸。
右手持玻璃采血管,将其尖端插入内眼角与眼球之间,轻轻向眼底方向刺入,小鼠刺入2~3mm,大鼠刺入4~5mm,当感觉有阻力时即停止刺入,放置取血管以切开静脉丛,血流即流入取血管。
采血结束后,拔出取血管,放松左手,出血即停止。
本方法在短期内可重复采血。
小鼠一次可采血0.2~0.3ml,大鼠一次可采血0.5~1.01ml。
为防止血液在取血管中凝固,可将取血管进入1%肝素溶液,干燥后使用。
2.摘眼球采血此方法用于鼠类大量采血。
采血时,用左手固定动物,压迫眼球,尽量使眼球凸出,右手用弯头镊子摘除眼球,眼眶内很快流出血液。
二、兔的采血1.耳中央动脉、耳沿静脉采血左手固定兔,并用酒精棉球消毒采血部位,右手持注射器,在兔耳血管的末端,沿着与血管平行的向心方向刺入血管,即可见血液流入针管,注意固定好针头。
采血结束后,拔出注射器,用棉球压迫止血2~3min。
2.颈静脉采血将兔麻醉后,仰卧在固定台上固定,剪去一侧颈部被毛,用碘酒、酒精棉球消毒皮肤,手术刀轻轻划破皮肤,钝性分离静脉,颈静脉暴露后,用注射器针头沿血管平行的远心方向刺入,采血结束后,拔出注射器,缝合切口。
三、狗的采血1.前、后肢皮下静脉血此方法一次可取较多的血,操作可参照相应的静脉注射。
如需采少量血。
则可用5.5号针头直接刺入静脉。
如需采一定量的血,最好用静脉滴注针头与注射器连接,以防狗挣扎时针头刺破血管。
2.股动脉采血将狗仰卧后固定,伸展后肢向外拉直,暴露腹股沟,在腹股沟三角区动脉搏动的部位剪去被毛,用碘酒、酒精消毒。
左手中指、食指探摸股动脉搏动部位并固定好血管,右手区静脉滴注针,针头由动脉搏动处慢慢刺入,当血液流入针头后的朔料管时,固定好针头,连接好注射器可抽到大量血液。
3.心脏采血将狗仰卧固定,前肢向背侧方向固定,暴露胸部,剪去左侧第3~5肋间的被毛,用碘酒、酒精消毒皮肤。
小白鼠采血三种方法的优缺点
小白鼠采血三种方法的优缺点(1)眼眶后血管丛采血(2)摘除眼球采血(3)心脏采血1.采血部位:眼眶采血采血方法:将鼠固定在实验台边缘,左手抓紧鼠颈部皮肤固定头部,并轻轻向下压迫颈两侧,使眼球充血。
用事先准备好的10号金属针头顶端(针尖斜面朝内)垂直插入内眦并向眼底方向转动以便切开静脉丛,血液便会连续不断地滴入采血管。
用此法大约可取3~5mL 血液。
取血完毕,立刻用脱脂棉压迫止血。
优点:眼眶后静脉丛采血法方法简单,便于掌握。
血流较快,采血量多,能在较短时间内采到3~5mL血。
伤口较小,愈合较快。
成功率高,死亡率低。
缺点:不能避免组织液的混入,对于血样要求较高的研究应谨慎使用。
另外,多次使用易引起大鼠的感染。
对后续试验结果存在一定影响。
2.摘眼采血:鼠可以眼球取血,需要多多练习。
一般来说,可以三人配合取血。
取血前不需麻醉,用眼科剪剪掉大鼠的胡须(胡须过长,血液滴下的时候容易沾在胡须上,既浪费,又造成溶血,故应剪掉)。
所需器械:眼科小剪、眼科弯镊、止血钳。
一人抓大鼠并用眼科弯镊摘眼球,一人用止血钳夹住大鼠的嘴部以固定大鼠头部,另一个人拿试管接血。
大鼠在挣扎过程中,很容易导致血液丢失,因此固定头部很重要,否则只有眼看着血液乱飞,却不入试管。
摘眼球也需要技巧,否则眼球摘下来了,而血液却不流出来,应多多练习优缺点不太清楚啊,只知道我一个学长摘眼球的时候被咬了一口,挺残忍的3.采血部位:心脏取血(其实这个一般用在家兔)采血方法:将实验动物做仰卧有助手固定,术者在其左前肢腋下处剪毛及消毒。
在胸部心脏跳动最明显处,用一寸长的12好针头直刺心脏,感到以针头跳动或有血液内流动时。
即可抽血。
一次可采血15-20ml优点:抽血快,血液不易凝集,心区面积大, 进针准确性较高, 易一针见血, 且采血量能满足大量试验需要缺点:心脏损伤较大,难以迅速愈合,不利于短期连续采血。
3‘.采血部位:心脏采血(剪开皮肤)采血方法:从胸部正中剪开皮肤2.0~2.5cm。
小白鼠采血三种方法的优缺点
小白鼠采血三种方法的优缺点(1)眼眶后血管丛采血(2)摘除眼球采血(3)心脏采血1.采血部位:眼眶采血采血方法:将鼠固定在实验台边缘,左手抓紧鼠颈部皮肤固定头部,并轻轻向下压迫颈两侧,使眼球充血。
用事先准备好的10号金属针头顶端(针尖斜面朝内)垂直插入内眦并向眼底方向转动以便切开静脉丛,血液便会连续不断地滴入采血管。
用此法大约可取3~5mL 血液。
取血完毕,立刻用脱脂棉压迫止血。
优点:眼眶后静脉丛采血法方法简单,便于掌握。
血流较快,采血量多,能在较短时间内采到3~5mL血。
伤口较小,愈合较快。
成功率高,死亡率低。
缺点:不能避免组织液的混入,对于血样要求较高的研究应谨慎使用。
另外,多次使用易引起大鼠的感染。
对后续试验结果存在一定影响。
2.摘眼采血:鼠可以眼球取血,需要多多练习。
一般来说,可以三人配合取血。
取血前不需麻醉,用眼科剪剪掉大鼠的胡须(胡须过长,血液滴下的时候容易沾在胡须上,既浪费,又造成溶血,故应剪掉)。
所需器械:眼科小剪、眼科弯镊、止血钳。
一人抓大鼠并用眼科弯镊摘眼球,一人用止血钳夹住大鼠的嘴部以固定大鼠头部,另一个人拿试管接血。
大鼠在挣扎过程中,很容易导致血液丢失,因此固定头部很重要,否则只有眼看着血液乱飞,却不入试管。
摘眼球也需要技巧,否则眼球摘下来了,而血液却不流出来,应多多练习优缺点不太清楚啊,只知道我一个学长摘眼球的时候被咬了一口,挺残忍的3.采血部位:心脏取血(其实这个一般用在家兔)采血方法:将实验动物做仰卧有助手固定,术者在其左前肢腋下处剪毛及消毒。
在胸部心脏跳动最明显处,用一寸长的12好针头直刺心脏,感到以针头跳动或有血液内流动时。
即可抽血。
一次可采血15-20ml优点:抽血快,血液不易凝集,心区面积大, 进针准确性较高, 易一针见血, 且采血量能满足大量试验需要缺点:心脏损伤较大,难以迅速愈合,不利于短期连续采血。
3‘.采血部位:心脏采血(剪开皮肤)采血方法:从胸部正中剪开皮肤2.0~2.5cm。
大小鼠血清采集
大小鼠血清采集一、仪器耗材(一)共用低温恒温离心机、-20℃冰箱、4℃冰箱、鼠笼、无害化冰箱、50ml离心管、500ml血清瓶、一次性橡胶手套、移液器(0.1~1ml、1~5ml)及配套吸头、废弃吸头存储盒、75%酒精。
(二)小鼠1.5ml EP管、无盖离心管盒、弯头镊、眼科剪。
(三)大鼠麻醉剂(3%戊巴比妥钠)、5ml无菌注射器、大鼠解剖台、手术剪、利器盒、止血钳、弯头镊、10ml无抗凝剂真空采血管(含一次性采血针)、止血纱布、电子天平(精度0.1~1g即可)。
二、操作方法(一)小鼠血清的采集1、摘除眼球采血(1)使小鼠爬伸在笼盒上,左手拇、食指抓取小鼠双耳及颈后皮肤,小指固定尾部,用眼科剪减去小鼠待摘眼球脸部胡须;(2)中指将小鼠左侧前肢轻压在胸骨心脏部位,无名指按在腹部,捻动拇指,轻压取血侧眼部皮肤,使眼球充血突出;(3)用弯头镊夹取眼球;(4)根据需要捻动拇指与食指的方向,使血液从眼眶内以不同速度垂直流入1.5ml EP管中;(5)同时用左手中指轻按小鼠心脏部位,以加快心脏泵血速度;(6)当血液流尽时,用脱臼法处死小鼠。
2、分离血清(1)将EP管中的血室温静置2小时;(2)再置于4℃冰箱内3~4小时或过夜;(3)待血液凝固血块收缩后,4℃ 3500rpm离心10分钟;(4)使用移液器吸取上清液置于干净的50ml离心管中4℃冰箱暂存,待所有动物血清收集完成后,再次离心转移到500nl血清瓶中,保存于-20℃冰箱。
3、注意事项(1)采血场所有充足的光线,室温夏季保持在25~28℃,冬季保持在15~20℃为宜;(2)防止血液浸入眼部周围毛发,否则会造成污染和溶血;(3)按压心脏时,用力一定要适度,若用力过度,一是会造成动物采血中途死亡,使采血不完全,二是有可能引起溶血现象发生,影响血清质量;(4)采血用的器材和试管必须保持清洁干燥;(5)采血时要防止小鼠挣扎,否则会损失比较多的血液;(6)若一边眼球摘除后眼部发生凝血,无法继续采血时,可将另一侧眼球摘除,用相同的方法继续采血;(7)血液凝固后不宜在4℃放置过久,否则会溶血;(8)移液器吸取上清液时注意不要将血凝块吸取出来。
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大小鼠各种采血方法与最大采血量
1剪尾采血小鼠每次采血量0.1ml ,大鼠每次采血量0.3-0.5ml
左手拇指和食指从背部抓住鼠颈部皮肤,将鼠头朝下,鼠保定后将其尾巴置
于50C热水中浸泡数分钟,使尾部血管充盈。
擦干尾部,再用剪刀或刀片剪去尾尖1-2mm用试管接流出的血液,同时自尾根部向尾尖按摩。
取血后用棉球压迫止血并用6%液体火棉胶涂在伤口处止血。
2摘除眼球采血小鼠采血量0.6-1ml
左手抓住小鼠颈部皮肤,轻压在实验台上,取侧卧位,左手食指尽量将小鼠眼周皮肤往颈后压,使眼球突出。
用眼科弯镊迅速夹去眼球,将鼠倒立,用器皿接住流出的血液。
采血完毕立即用纱布压迫止血。
大鼠少用。
3心脏采血小鼠采血量0.5-0.6ml ,大鼠采血量1-1.5ml
鼠仰卧位固定,剪去胸前区被毛,皮肤消毒后,用左手食指在左侧第3-4 肋间触摸到心搏处,右手持带有4-5 号针头的注射器,选择心搏最强处穿刺,当刺中心脏时,血液会自动进入注射器。
4断头采血小鼠采血0.8-1.2ml ,大鼠采血量5-10ml
左手拇指和食指从背部抓住鼠颈部皮肤,将鼠头朝下,右手用剪刀剪断鼠
颈部约1/2-4/5 ,让血液流入试管。
5眼眶静脉丛采血小鼠采血量为0.2-0.3ml ,大鼠采血量为0.4-0.6ml 取内径为1.0-1.5mm的玻璃毛细管,临用前折断成1〜1.5cm长的毛细管段,
浸入1%肝素溶液中,干燥后用。
取血时左手抓住鼠两耳之间的颈背部皮肤以固定头部,轻轻向下压迫颈部两侧,引起头部静脉血液回流困难使眼眶静脉丛充血,右手持毛细管由内眦部插入结膜,再轻轻向眼底部方向推进,轻轻旋转毛细管以划破静脉丛,让血液顺毛细管流出,接收入事先准备的容器中。
采血后纱布轻压眼部止血。
小鼠、大鼠、豚鼠及家兔均可采取此法取血。
刺入深度小鼠为2-3mm,
可采血0.2-0.3ml ;大鼠为4-5mm 可采血0.4-0.6ml 。