造血干细胞表面标志物

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干细胞标志物

干细胞标志物

干细胞标志物胚胎干细胞的标志物Oct-4: Oct-4(也叫Oct-3或Oct3/4)属POU转录因子一员,最初鉴定为DNA结合蛋白,可通过顺式元件活化基因转录。

它在全能胚胎干细胞(ES)和生殖细胞表达。

该表达对于维持干细胞的自我更新和多能性是必要的。

4 ES的分化导致Oct-4的下调。

5 Oct-4不仅是细胞系多能分化的主要调节因子,而且也是首要的作为鉴定全能ES细胞的标志物。

SSEAs: SSEAs 最初是用来鉴定识别糖脂表位的三个单抗。

SSEA-1表达在前移植期的鼠胚表面(如八细胞期)并且也发现存在于畸胎瘤干细胞表面,但不存在分化的衍生细胞中。

输卵管上皮、子宫内膜、附睾, 成年鼠脑和肾小管区域也发现和SSEA-1抗体反应。

SSEA-3和4在卵子发生时合成,在卵母细胞、受精卵和早期卵裂球细胞膜上存在。

这些与糖链相关的分子的生物学功能被认为是调控发育期的细胞膜间的相互作用。

未分化的灵长类ES细胞,人的EC和ES细胞表达SSEA-3和SSEA-4,但不表达SSEA-1。

未分化的小鼠ES细胞表达SSEA-1,但不表达SSEA-3或SSEA-4.造血干细胞的标志物CD34(细胞表面的唾液粘蛋白):CD34自从被发现存在于少量人骨髓细胞以来就是兴趣的焦点。

从骨髓和外周血来源的CD34阳性富集的细胞群体显出大部分的造血活性。

CD34被认为是造血干细胞(HSCs). 的标志物。

CD34在原始细胞分化为成熟细胞后表达下降.这点也发现在克隆的祖细胞和一些细胞系的干细胞。

尽管CD34功能未知,但现在认为它参与早期造血CD34是HSCs的标志物的理论近年受到挑战。

Osawa等人首先证明小鼠HSCs可以是CD34阴性。

并且,人的CD34阴性细胞也有低水平的嫁接和造血能力。

移植研究表明胎绵羊CD34阴性细胞有重新繁殖的能力。

并且也表明人和鼠的CD34阳性细胞可能来源于CD34阴性细胞。

总的说来,这些报告提示,HSCs可能是CD34+或CD34-。

造血干细胞分选主要标志

造血干细胞分选主要标志

造血干细胞分选主要标志造血干细胞是血液系统中最基础的细胞类型,其具有极强的自我更新和分化能力,可以分化为各种具有特定功能的血细胞,如白细胞、红细胞和血小板等。

在临床治疗中,造血干细胞分选可以帮助医生寻找到适合患者的干细胞,用于造血干细胞移植,以治疗一系列血液和免疫系统相关疾病。

而造血干细胞分选所依据的主要标志则成为了重要的参考指标。

造血干细胞分选所基于的主要标志主要包括以下几个方面:第一、表面标记的克隆化抗体在造血干细胞表面,存在着多种特异的抗原。

这些抗原可以通过克隆化抗体进行检测。

其中,CD34是目前应用最为广泛的标志物之一。

CD34能够标记出具备造血干细胞特异性的人类骨髓细胞群,对于造血干细胞的分选十分重要。

第二、表面标志的共有抗原除了特异性抗原外,造血干细胞表面还存在着共有的抗原。

这些共有抗原对于干细胞分选同样具有重要的作用。

此处的共有抗原包括CD45和CD71,它们能够被所有造血系细胞表达,因此可以从细胞表面的角度来确定造血干细胞。

第三、功能标志除表面标记外,功能标志也是造血干细胞分选的重要参考因素。

在这个方面,可以根据细胞的内在功能特性,如依赖多能性(CFU-Mix)的形态、元素的吞噬等方面来对造血干细胞进行分选。

最后,需要强调的是,造血干细胞分选主要标志是多种因素综合作用的结果。

因此在干细胞分选过程中,应该综合考虑多种检测因素,包括表面标记的克隆化抗体、表面标志的共有抗原、功能标志等因素。

只有全方位地综合考虑这些因素,才能更好地判断一个细胞是否适合用于造血干细胞移植等临床治疗。

小鼠造血干细胞和多功能祖细胞细胞标志物

小鼠造血干细胞和多功能祖细胞细胞标志物

小鼠造血干细胞和多功能祖细胞细胞标志物嘿,朋友们!今天咱就来聊聊小鼠造血干细胞和多功能祖细胞细胞标志物那些事儿。

你说这造血干细胞啊,就像是小鼠身体里的超级英雄!它们有着神奇的能力,可以不断分化和更新,为小鼠的血液系统提供源源不断的新鲜力量。

那怎么才能找到这些超级英雄呢?这就得靠那些细胞标志物啦!就好比你在人群中找一个特定的人,总得有一些特征来分辨吧。

这些标志物就像是造血干细胞的独特标签,让我们能准确地把它们给认出来。

比如说 CD34 这个标志物,它就经常和造血干细胞紧密相连。

你想想,要是没有它,我们可就像在茫茫大海里找一根针一样困难啦!有了 CD34,就好像有了一个闪闪发光的指示牌。

还有其他的标志物呢,它们就像一群小伙伴,各自有着自己的特点和作用。

它们一起合作,帮助我们更好地了解和研究造血干细胞。

你说这是不是很神奇?就好像小鼠身体里藏着一个神秘的宝藏世界,而这些标志物就是打开宝藏大门的钥匙。

咱再想想,要是没有这些标志物,科学家们得费多大的劲儿去研究造血干细胞啊!那可真是如同盲人摸象,摸来摸去也搞不清楚状况。

而且哦,通过对这些标志物的研究,还能帮助我们找到治疗疾病的新方法呢!比如说一些血液疾病,要是能更好地利用造血干细胞的特性,说不定就能找到更好的治疗方案呢。

所以说啊,这些小小的标志物,可有着大大的作用呢!它们就像是隐藏在小鼠身体里的秘密代码,等待着我们去破解和发现。

总之呢,小鼠造血干细胞和多功能祖细胞细胞标志物真的是非常非常重要的研究领域。

它们就像一个个小精灵,在小鼠的身体里跳跃舞动,为我们展示着生命的奇妙和奥秘。

我们可不能小瞧了它们呀!原创不易,请尊重原创,谢谢!。

干细胞标志物

干细胞标志物

IWHLDA : 人 类 白 细 胞 分 化 抗 原 的 国 际 协 作 组 会 议 ( International workshop on human leukocyte differentiation antigens)

至2010 年已被确定人类CD抗原共363群(CD1-CD363),许多群 中还包括若干个亚群;根据分布的细胞系分为T细胞、B细胞、髓 细胞、NK 细胞、血小板、活化细胞、粘附分子、内皮细胞、细胞 因子受体、红细胞、树突状细胞、干细胞/祖细胞、碳水化合/凝 集素等CD抗原,共13组。 动物的白细胞分化抗原也逐渐地采用CD命名法,与人类CD相同的 ,加上与人类相同的编号。为了与人的CD相区别,在CD前加上动 物种类的的缩写,例如BoCD,表示牛的白细胞分化抗原。绵羊、 山羊、马的分别表示为OvCD、CpCD、EpCD。
作用:
1.参与细胞间的识别、细胞的活化和信号转导、细胞的增殖与分 化、细胞的伸展与移动
2.免疫应答、炎症发生、凝血、肿瘤转移、创伤愈合
细胞膜受体
受体:(receptor)是一种能够识别和选择性结合某种 配体(信号分子)的大分子物质。 配体(ligand):指细胞外的信号分子,包括激素,神经 递质,抗原,药物以及其他有生物活性的化学物质。
IL-4受体,细胞生长、分化 IL-6受体,细胞生长、分化 IL-7受体,细胞生长 -8受体,趋化和活化PMN
CDw130
AM64(IL-6R-gp130SIG)
广泛
IL-6受体gp130,转导信号
注:Thy:胸腺细胞;DC:树突状细胞:FDC:滤泡树突状细胞;B:B细胞; Bsub:B亚群;Pre-B,前B细胞;Bm:成熟B细胞;Ba:活化B细胞;T:T细胞; Tsub:T亚群;Ta:活化T细胞;M:Ma:活化单核细胞;Mac:巨噬细胞;Mas :肥大细胞;PC:浆细胞;G:粒细胞;PMN:多形核细胞;My:髓样细胞; NK:自然杀伤细胞;NKsub:NK亚群;LHC:表皮郎罕氏细胞;RS:ReedSrtenterg细胞;NEC:神经内分泌细胞;RBC:细细胞;Pt:血小板;Eo:嗜酸 性粒细胞;BM:骨髓细胞;Meg:巨核细胞;Fb:成纤维细胞;En:内皮细胞; Leu:白细胞;gp:糖蛋白;p:蛋白质;VLA:很晚出现在抗原;CALLA:共同 型急性淋巴母细胞白血病抗原;LAMP:溶酶体相关膜蛋白;MCP:膜辅蛋白; MAC:膜攻击单位;LFA:淋巴细胞功能相关抗原;CR:补体受体;3FAL:3fucosyl-N-acetyl-lactosamine;PECAM:血小板内皮细胞粘附分子;ECMR:细胞 外基质受体;LCA:淋巴细胞共同抗原;PTPase:磷酸酪氨酸磷酸酯酶;ICAM :细胞间粘附分子;N-CAM:神经细胞粘附分子;TAP:T细胞活化蛋白;Tyr-P :磷酸化酪氨酸;VCAM:血管细胞粘附分子;GPI:糖基磷脂酰肌醇;AIM:活 化诱导分子;LIF:白血病抑制因子;OSM:抑瘤素-M;CNTF:睫状神经营养因 子;CA:胶原蛋白;LM:层粘连蛋白;FN:纤粘连蛋白;FB:血纤维蛋白原; vWF:von Willbrand因子;TM-4:四次跨膜家族。

干细胞标志物

干细胞标志物

干细胞鉴定
一般生物学特性 细胞标志物 增殖能力 分化能力
干细胞标志物 有哪些?
细胞表面分子 细胞内特异基因的表达 细胞内特殊物质的表达 其他
细胞膜表面分子
又被称为膜抗原或者表面标记分子(surface marker) ,大多数为跨膜(糖)蛋白,结构上分为膜外区、跨膜 区和胞质区,胞质区执行信号转导功能。少数膜分子并 非跨膜蛋白,而是以糖基磷脂酰肌醇(GPI)方式连接 锚固在细胞膜上。
4.钙黏蛋白家族(cadherin family):指在Ca2+参与下使细胞间 相互聚集的细胞粘附分子,又称钙粘着蛋白(C-adherin)。 已知该家族有3个成员,分布在上皮组织的P-钙粘着蛋白、主 要分布在神经组织的N-钙粘着蛋白、分布在胎盘和间皮组织的 P-钙粘着蛋白。 5.未归类的黏附分子
细胞因子受体的分类
• I型细胞因子受体家族(红细胞生成素受体超家族)

• •
II型细胞因子受体家族
Ⅲ型肿瘤坏死因子受体超家族 Ⅳ型趋化性细胞因子受体家族(G-蛋白偶联受体)
MHC
在诱导移植排斥反应过程中发挥主要作用的组织抗原被称为主 要组织相容性抗原(major histocompatibility antigen)。
包括LFA-1、 LFA-2、 LFA-3、ICAM-1、 ICAM-2和一些补体受 体等。
2.选择素家族(selectin family)
主要包括白细胞-选择素、血小板-选择素和内皮细胞-选择素3 种,即CD62L、CD62P和CD63E。
3.免疫球蛋白超家族( Ig superfamily)
共15个,主要有主要有CD2、CD4、CD8、CD28、CD31、CD54、 CD58、CD80、CD86。

各种干细胞标志物

各种干细胞标志物

胚胎干细胞的标志物Oct-4: Oct-4(也叫Oct-3或Oct3/4)属POU转录因子一员,最初鉴定为DNA结合蛋白,可通过顺式元件活化基因转录。

它在全能胚胎干细胞(ES)和生殖细胞表达。

该表达对于维持干细胞的自我更新和多能性是必要的。

4 ES的分化导致Oct-4的下调。

5 Oct-4不仅是细胞系多能分化的主要调节因子,而且也是首要的作为鉴定全能ES细胞的标志物。

SSEAs: SSEAs 最初是用来鉴定识别糖脂表位的三个单抗。

SSEA-1表达在前移植期的鼠胚表面(如八细胞期)并且也发现存在于畸胎瘤干细胞表面,但不存在分化的衍生细胞中。

输卵管上皮、子宫内膜、附睾, 成年鼠脑和肾小管区域也发现和SSEA-1抗体反应。

SSEA-3和4在卵子发生时合成,在卵母细胞、受精卵和早期卵裂球细胞膜上存在。

这些与糖链相关的分子的生物学功能被认为是调控发育期的细胞膜间的相互作用。

未分化的灵长类ES细胞,人的EC和ES细胞表达SSEA-3和SSEA-4,但不表达SSEA-1。

未分化的小鼠ES细胞表达SSEA-1,但不表达SSEA-3或SSEA-4.造血干细胞的标志物CD34(细胞表面的唾液粘蛋白):CD34自从被发现存在于少量人骨髓细胞以来就是兴趣的焦点。

从骨髓和外周血来源的CD34阳性富集的细胞群体显出大部分的造血活性。

CD34被认为是造血干细胞(HSCs). 的标志物。

CD34在原始细胞分化为成熟细胞后表达下降.这点也发现在克隆的祖细胞和一些细胞系的干细胞。

尽管CD34功能未知,但现在认为它参与早期造血CD34是HSCs的标志物的理论近年受到挑战。

Osawa等人首先证明小鼠HSCs可以是CD34阴性。

并且,人的CD34阴性细胞也有低水平的嫁接和造血能力。

移植研究表明胎绵羊CD34阴性细胞有重新繁殖的能力。

并且也表明人和鼠的CD34阳性细胞可能来源于CD34阴性细胞。

总的说来,这些报告提示,HSCs可能是CD34+或CD34-。

cd34细胞计数计算公式

cd34细胞计数计算公式

cd34细胞计数计算公式CD34细胞计数计算公式。

在医学领域,CD34细胞计数是一项非常重要的指标,它可以用来评估造血干细胞的数量和质量,对于临床诊断和治疗具有重要意义。

CD34细胞是一种干细胞的标志物,它存在于骨髓、外周血和胎盘等组织中,是造血干细胞的一种表面标记物。

因此,CD34细胞计数的准确性对于临床诊断和治疗至关重要。

CD34细胞计数的公式是一种用来计算CD34细胞数量的数学公式,它可以通过实验室检测数据来计算CD34细胞的绝对数量,为临床诊断和治疗提供重要的参考依据。

下面我们将介绍CD34细胞计数的公式及其计算方法。

CD34细胞计数的公式如下:CD34细胞数(每微升)=(CD34细胞百分比×白细胞计数)/100。

其中,CD34细胞百分比是指在外周血或骨髓细胞中CD34阳性细胞所占的百分比,白细胞计数是指外周血或骨髓中白细胞的数量。

通过这个公式,可以计算出每微升外周血或骨髓中CD34细胞的数量。

在实际应用中,CD34细胞计数通常是通过流式细胞术来进行测定的。

流式细胞术是一种通过检测细胞表面标记物来分析细胞数量和类型的技术,它可以对CD34细胞进行准确的定量分析。

通过流式细胞术,可以得到CD34细胞的百分比和白细胞计数,从而可以利用上述公式计算出CD34细胞的绝对数量。

CD34细胞计数的结果对于临床诊断和治疗具有重要的指导意义。

在临床上,CD34细胞计数通常被用来评估造血干细胞的数量和质量,对于骨髓移植、干细胞移植以及造血干细胞采集等治疗方案的制定和评估起着关键的作用。

此外,CD34细胞计数还可以用来监测患者的疾病进展和治疗效果,对于临床预后评估和治疗效果监测具有重要的临床意义。

除了在临床诊断和治疗中的应用,CD34细胞计数还在科研领域具有广泛的应用价值。

科研人员可以利用CD34细胞计数来开展干细胞移植和再生医学等方面的研究,为临床治疗提供更多的科学依据。

因此,CD34细胞计数不仅在临床上具有重要的应用意义,同时也在科研领域具有广阔的发展前景。

T细胞和B细胞

T细胞和B细胞

T细胞和B细胞集团档案编码:[YTTR-YTPT28-YTNTL98-UYTYNN08]T淋巴细胞和B淋巴细胞(免疫细胞)免疫细胞概述定义:泛指所有参与免疫应答或与免疫应答有关的细胞及其前体。

一、造血干细胞(HSC)1具有自我更新和分化潜能、持续赋予机体造血功能的细胞。

2.表面标志(1)CD34(2)CD117(C-Kit):即干细胞因子(SCF)受体3.造血干细胞来源:→骨髓→外周→脐带血→胎盘二、淋巴细胞T淋巴细胞(T lymphocyte)来源于骨髓→在胸腺内发育成熟→移行至外周淋巴组织→执行特异性免疫应答。

(一)T细胞表面标志及其功能细胞抗原受体(T cell antigen receptor, TCR)细胞特异性识别抗原的受体b.所有成熟T细胞的特征性表面标志;c.与CD3分子结合成TCR-CD3复合物;TCR多样性原因:①组合多样性②连接多样性N序列插入概率高,故TCR多样性远高于BRC亦发现于NK细胞表面受体包括(T细胞受体):TCR-CD3复合物,T细胞通过识别抗原肽-MHC分子复合物产生活化T细胞的第一信号,由CD3传递至T细胞内辅助受体:CD4和CD83.辅助(共、协同)刺激分子①CD28:与APC表面的辅助刺激分子B7-1/2结合并相作用,为初始T细胞活化提供最重要的第二信号②CD40L:与CD40结合提供第二信号CD4,CD8 (T细胞的辅助受体)病毒受体:HIV—CD4分子抗原:所有T细胞均表达MHC-I类分子,人T细胞激活后还可表达MHC-II类分子(活化后有抗原提呈能力)。

5. 丝裂原受体:刀豆素A(ConA)、植物血凝素(PHA)PWM商陆丝裂原丝裂原(mitogen):亦称有丝分裂原,可致细胞发生有丝分裂,进而增殖,6.细胞因子受体(cytokine receptor, CKR)IL-1R,IL-2R,IL-4R,IL-6R,IL-7R等T细胞表面的协同信号分子(刺激)CD28?由二条相同多肽链组成的二聚体。

7.造血干细胞表型及分离纯化方法

7.造血干细胞表型及分离纯化方法

较差,完全缓解率及存活率低,传统的
化疗方案治疗效果可能不好。
4.CD34阳性细胞亚群
根据细胞表面抗原表达的情况,可 将CD34阳性细胞分为许多亚群,这些细 胞多数已定向到特定细胞系。 与CD34共表达,可作为干细胞进一 步分型依据的抗原有:CD38、CD10、 CD19、CD5、CD7、CD71、CD45、 CD41、CD13、CD33等。

MACS-isolated CD133+ cells became adherent and CD133- during cultivation, but gave rise to nonadherent CD133+ cells budding from the adherent cell surface by a symmetric cell division. Cells were stained with CD133/1 (AC133)-PE.
之后,其他研究小组也相继研制 出12.8; BI-3c5; ICH-3等类似抗体。 1986年,这些抗体被命名为CD34, 为目前公认的干细胞的重要标志。 CD34抗原的发现促进了造血干 细胞研究的深入和发展,是一重要的 里程碑事件。
本次课的主要内容
一.造血细胞的表型 CD34;Sca-1;Thy-1;Lin-;c-kit 二.造血细胞分离方法 FACS;磁柱分离;亲合分离; Panning
97kDa的糖蛋白,包括5个跨膜结 构域, 糖基化后在蛋白胶上显示120 kDa的蛋白带。最初是通过AC133单抗 鉴定的,它能识别人HSCs的CD34+亚 类29,30。一种CD133异构体AC133-2, 最近已经被克隆并鉴定为可被AC133抗 体识别的原始表面抗原。

T细胞和B细胞

T细胞和B细胞

T淋巴细胞和B淋巴细胞(免疫细胞)免疫细胞概述定义:泛指所有参与免疫应答或与免疫应答有关的细胞及其前体。

一、造血干细胞(HSC)1具有自我更新和分化潜能、持续赋予机体造血功能的细胞。

2.表面标志(1)CD34(2)CD117(C-Kit):即干细胞因子(SCF)受体3.造血干细胞来源:→骨髓→外周→脐带血→胎盘二、淋巴细胞T淋巴细胞(T lymphocyte)来源于骨髓→在胸腺内发育成熟→移行至外周淋巴组织→执行特异性免疫应答。

(一)T细胞表面标志及其功能1.T细胞抗原受体(T cell antigen receptor, TCR)a.T细胞特异性识别抗原的受体b.所有成熟T细胞的特征性表面标志;c.与CD3分子结合成TCR-CD3复合物;TCR多样性原因:①组合多样性②连接多样性N序列插入概率高,故TCR多样性远高于BRC表面受体包括1.TCR(T 细胞受体):TCR-CD3复合物,T 细胞通过识别抗原肽-MHC 分子复合物产生活化T 细胞的第一信号,由CD3传递至T 细胞内2.TCR 辅助受体:CD4和CD8亦发现于NK 细3.辅助(共、协同)刺激分子①CD28:与APC表面的辅助刺激分子B7-1/2结合并相作用,为初始T细胞活化提供最重要的第二信号②CD40L:与CD40结合提供第二信号CD4,CD8 (T细胞的辅助受体)病毒受体:HIV—CD4分子4.MHC抗原:所有T细胞均表达MHC-I类分子,人T细胞激活后还可表达MHC-II类分子(活化后有抗原提呈能力)。

5. 丝裂原受体:刀豆素A(ConA)、植物血凝素(PHA)PWM商陆丝裂原丝裂原(mitogen):亦称有丝分裂原,可致细胞发生有丝分裂,进而增殖,6.细胞因子受体(cytokine receptor, CKR)IL-1R,IL-2R,IL-4R,IL-6R,IL-7R等T细胞表面的协同信号分子(刺激)CD28 由二条相同多肽链组成的二聚体。

流式细胞术分析造血干细胞

流式细胞术分析造血干细胞

造血干细胞HSC1简介造血干细胞(HSC)是罕见的能自我更新的祖细胞,可产生所有血细胞谱系。

此外,HSC能够在移植后的主要受辐照接受者中长期产生所有血细胞类型,并且能够自我更新,因此可以将细胞移植到第二宿主中,从而引起长期的多谱系再造种群。

HSC静态、自我更新和分化之间的平衡在很大程度上取决于HSC跟环境的相互作用。

在发育中的胚胎中,HSC驻留在尚未形成小生态的胎儿肝脏中,可延长细胞寿命。

从E 17.5开始,骨髓被HSC所定居,在整个成年期BM仍然是主要的造血生境。

成年后,最原始的HSC被认为位于BM中最缺氧的微环境中,即低氧干细胞生态位,从而维持了原始表型和细胞周期的静止,从而避免了HSC衰老。

可以基于表面标志物表达,通过流式细胞术分离小鼠HSC。

从BM中分离小鼠HSC的第一步通常是去除表达特异于终末分化血细胞的“谱系”(Lin)抗原的成熟细胞,Lin包括F4/80+/Mac1+单核和巨噬细胞,Gr1+粒细胞,CD11c+DC细胞,CD4+/CD8+/CD3+ T细胞,CD5+ CD19+ B220+ B 细胞,NK1.1+ NK细胞和Ter119+红细胞。

这些抗原在HSC上不存在。

然后,HSC作为谱系阴性(Lin–)细胞进一步富集,表达细胞表面标志物的组合。

常用的标记包括Thy1.1,c-Kit和Sca1。

因此,多能造血祖细胞已被纯化为Lin-Thy1.1lo c-Kit+ Sca-1+细胞,占有核BM细胞的<0.1%。

尽管该种群包含小鼠中的所有多能祖细胞,但它仍然是异质的,除了长期重建的HSC外,还包含瞬时重建的多能祖细胞。

长期自我更新的HSC与短暂重构的多能祖细胞之间在表面标志物表达上存在差异,两种祖细胞群能够区分。

Lin-c-Kit+ Sca-1+Thy1.1loCD150+CD48-群体(SLAM细胞)主要包含长期自我更新的HSC,Lin-c-Kit+Sca-1+Thy1.1loCD150+CD48+群体主要包含瞬时自我更新的多能祖细胞,Lin-c-Kit+Sca-1+Thy1.1loCD150-CD48+群体主要包含非自我更新的多能祖细胞,可据此进行流式分选或移植分析。

脐带血储存cd34标准

脐带血储存cd34标准

脐带血储存cd34标准全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:脐带血干细胞特点之一为其富含CD34阳性干细胞。

CD34是一种细胞表面标记分子,被广泛认为是造血干细胞的标志。

脐带血中的CD34阳性细胞具有重建造血系统的潜力,可以重建患者的免疫系统,促进血液的再生。

脐带血中CD34阳性细胞的含量对于干细胞移植的成功率起着至关重要的作用。

目前,国际上对于脐带血中CD34阳性细胞的计数和储存有着一定的标准。

根据世界卫生组织的要求,脐带血单位中至少含有CD34阳性细胞的数量应达到1×10^6/kg。

这一标准是保证脐带血具备治疗作用所必须的关键指标之一,也是干细胞移植成功率的重要指标之一。

具备符合CD34标准的脐带血单位才能被认可为适合干细胞移植的供体。

为了确保脐带血中CD34阳性细胞的准确计数和储存,目前的主要做法是采用流式细胞术进行计数,并采取适当的储存方法保存脐带血单位。

流式细胞术是一种用于细胞表面标记物的定量和鉴定的技术,通过荧光共振技术测定细胞中的CD34阳性细胞数量。

这种方法具有高灵敏度、高准确性和高重复性,能够准确计数脐带血中CD34阳性细胞的数量,确保脐带血单位的质量标准。

在脐带血单位的储存方面,通常采用冷冻保存的方法。

在采集后,将脐带血样本迅速送至实验室,进行流式细胞术计数后,加入适量的冷冻保护剂,然后分装成小份装冻存管,通过快速冷冻的方式保存于液氮槽中。

冷冻保存可以有效保护脐带血中的CD34阳性细胞,延长其存储时间,为后续的干细胞移植提供保障。

除了单纯的计数和储存外,对于脐带血中CD34阳性细胞,还需要进行其功能性评估。

通过体外实验和动物实验等方法,可以评估脐带血中CD34阳性细胞的再生及增殖潜能,以确保其在移植后能够有效地重建患者的造血系统。

脐带血中CD34阳性细胞的计数和储存标准是干细胞移植治疗成功的关键因素之一。

严格遵守国际标准,采用科学的计数和储存方法,保证脐带血单位的质量和有效性,对于提高干细胞移植的成功率,减少患者的并发症,具有重要的意义。

造血干细胞基因标志物

造血干细胞基因标志物

造血干细胞基因标志物
造血干细胞(Hematopoietic stem cell,HSC)是一种具有自我更新和多向分化潜能的干细胞,可以分化为各种血液细胞,包括红细胞、白细胞和血小板等。

造血干细胞基因标志物是指可以用来识别、分离和鉴定造血干细胞的基因或分子。

这些标志物可以帮助研究人员更好地了解造血干细胞的生物学特性和分化机制,也可以为造血干细胞移植等临床应用提供重要的指导。

目前已经发现了许多造血干细胞基因标志物,其中一些常见的包括:
1. CD34:CD34 是一种细胞表面标志物,可以用来识别和分离造血干细胞。

2. CD133:CD133 是一种细胞表面标志物,可以用来识别和分离造血干细胞。

3. SCA-1:SCA-1 是一种细胞表面标志物,可以用来识别和分离造血干细胞。

4. c-Kit:c-Kit 是一种细胞表面受体,可以用来识别和分离造血干细胞。

5. Flt3:Flt3 是一种细胞表面受体,可以用来识别和分离造血干细胞。

这些标志物可以通过流式细胞术、免疫磁珠分离等技术进行检测和分离。

此外,还有一些其他的基因标志物也被用于造血干细胞的研究和临床应用,如 CD45、CD90、CD117 等。

需要注意的是,不同的造血干细胞基因标志物在不同的实验条件下可能会有不同的表达水平和功能,因此在具体应用中需要根据实际情况进行选择和优化。

造血细胞分离、集落培养及表型分析

造血细胞分离、集落培养及表型分析

造血细胞分离、集落培养及表型分析动性好,同时也避免了细胞因受力而损伤的情况。

流式细胞仪通过激光束照射细胞,检测细胞表面标记物的荧光强度,进而分析细胞表型,包括细胞表面标志、大小、形态等。

2、集落培养集落培养法是一种常用的检测造血干细胞的方法。

将待测细胞在半固体培养基中培养,待细胞分裂形成集落后,根据集落的形态和数量来判断细胞的分化能力。

常用的集落包括粒-巨嗜细胞集落形成单位(CFU-GM)、红系爆式集落形成单位(BFU-E)、巨核细胞集落形成单位(CFU-MK)等。

集落培养法可以检测细胞的增殖能力和分化潜能,是评估细胞功能的重要方法。

二、实验步骤1、细胞样品制备将待测细胞制成单细胞悬液,使得细胞可以均匀地分布在流式细胞仪的流动室中,方便后续的细胞表型分析。

2、流式细胞仪分析将制备好的细胞悬液加入样品管中,加入特异性荧光染料后,通过流式细胞仪进行细胞表型分析。

根据细胞表面标志物的荧光强度,可以判断细胞的类型和状态。

3、集落培养将待测细胞在半固体培养基中培养,待细胞分裂形成集落后,根据集落的形态和数量来判断细胞的分化能力。

常用的集落包括粒-巨嗜细胞集落形成单位(CFU-GM)、红系爆式集落形成单位(BFU-E)、巨核细胞集落形成单位(CFU-MK)等。

三、实验结果分析通过流式细胞仪和集落培养的结果,可以分析细胞的表型和功能。

例如,CD34+、CD38-、HLA-DR-、Thy-1+、c-kit+、LFA-1-、CD45RA-、CD71-、lin-等标志物被广泛认为是造血干细胞的标志。

同时,集落培养的结果也可以评估细胞的增殖能力和分化潜能。

这些结果对于研究造血干细胞的生物学特性和临床应用具有重要意义。

本实验采用流式细胞仪技术对脐血中的造血干细胞进行分离和检测。

流式细胞仪的测量区利用样品流和鞘流的气压差的层流原理,使细胞依次排列成单行,每个细胞以均等的时间依次通过测量区。

被荧光染料染色的细胞受到强烈的激光照射后发出荧光,同时产生散射光。

大学细胞生物学考试(习题卷24)

大学细胞生物学考试(习题卷24)

大学细胞生物学考试(习题卷24)第1部分:单项选择题,共88题,每题只有一个正确答案,多选或少选均不得分。

1.[单选题]染色体的组蛋白属于( )A)酸性蛋白B)碱性蛋白C)中性蛋白D)核蛋白答案:B解析:2.[单选题]在电镜下可见细胞核的外膜与细胞质中哪种细胞器相连?A)高尔基复合体B)滑面内质网C)线粒体D)粗面内质网答案:D解析:3.[单选题]下列( )不属于真核生物基因表达调控的范畴。

A)复制水平的调控B)转录水平的调控C)RNA加工水平的调控D)翻译水平的调控答案:A解析:4.[单选题]促进细胞凋亡的基因是( )。

A)p53B)Bcl-2C)ced9D)mcl1答案:A解析:ced9、mcl1和Bcl-2三者的功能都是抑制细胞的凋亡,p53是抑癌基因,促进细胞凋亡。

5.[单选题]关于核定位信号(NLS)的描述不正确的是( )A)NLS可以存在于蛋白质的任何部位B)NLS帮助蛋白质入核时需要核转运受体的参与C)RNA分子也可以借助其中的NLS跨核膜运输D)不同的亲核蛋白上的NLS不同答案:C解析:6.[单选题]下列哪种结构被认为是染色质组装的一级结构()A)核小体B)螺线管D)染色单体答案:A解析:7.[单选题]受精卵中的中心体由( )提供A)精子B)卵子C)精子卵子各提供一个D)精子卵子都不提供答案:B解析:8.[单选题]细胞凋亡最主要的生物化学特征是( )。

A)DNA发生核小体间的断裂,产生含有不同数量核小体单位的片段B)细胞质Ca2+浓度增加C)tTG积累并达到较高水平D)磷脂酰丝氨酸重分布答案:A解析:细胞凋亡最突出的生化特征是染色质DNA的有空裂解,即DNA发生核小体间的断裂,产生含有不同数量核小体单位的片段。

9.[单选题]下列哪项不是细胞学说建立时的要点( )A)所有生物都是由细胞构成的B)所有生活细胞的结构都是类似的C)所有的细胞都是来源于已有细胞的分裂D)所有的细胞形态相似答案:D解析:10.[单选题]活体内植入细胞的行为分析内容不包括( )A)细胞是否真正植入了相应组织器官B)细胞是否具有相应的生物学功能C)植入细胞在组织器官中的稳定性D)植入细胞是否进入细胞周期答案:D解析:11.[单选题]细胞培养时,要保持细胞原来染色体的二倍体数量,最多可传代培养( )代。

肿瘤与造血干细胞的分子差异分析

肿瘤与造血干细胞的分子差异分析

肿瘤与造血干细胞的分子差异分析肿瘤和造血干细胞一直是生命科学领域的研究热点。

肿瘤细胞是一种不受限制生长和分裂的细胞,在分子上与正常细胞有很大区别。

而造血干细胞则具有自我更新和分化为多种相对成熟的细胞类型的能力。

分子差异研究是发现治疗肿瘤和造血系统疾病的重要方法之一。

本文将着重介绍肿瘤与造血干细胞的分子差异分析。

一、肿瘤细胞的基因变异肿瘤细胞的基因变异是肿瘤形成和发展的重要因素之一。

基因突变、基因重排、染色体重排等基因遗传上的变异能够迫使细胞进入异常增殖状态。

许多肿瘤都与基因突变有关,如胰腺癌、乳腺癌等。

固然许多基因的突变都可能引发肿瘤,但一些核心肿瘤驱动基因(core tumor driver genes)具有较高的频率和较强的致瘤作用。

目前,已经发现了多个核心肿瘤驱动基因,如KRAS、TP53、EGFR、BRAF等。

这些基因的变异可以促进分裂期间不合理的细胞生长和分裂,是肿瘤的重要基础。

二、造血干细胞的分子特性造血干细胞是造血系统中非常重要的一类细胞,因为它们具有自我更新能力和向多种成熟的血细胞分化的潜力。

同时,它们也是造血干细胞移植的重要来源。

造血干细胞的分子特性主要包括下列几个方面。

1. CD细胞表面标志物的分布。

CD34是造血干细胞表面的广泛存在的蛋白质,它已经成为了造血干细胞的典型标志物。

除此之外,造血干细胞还可以表达CD38、CD90等其他标志物。

2. 转录因子的特异表达。

造血细胞谱系转录因子是一类重要的分子,它们可以初始干细胞向多种成熟的细胞类型分化。

造血干细胞具有多种转录因子的共同表达和特异表达,如GATA系、PU.1等。

3. 细胞周期和增殖能力。

造血干细胞可以进一步分化,但其再生能力有限。

在医学上,这一特性可以用来使用干细胞在患者体内重新建立血液系统。

三、肿瘤和造血干细胞的分子差异分析虽然肿瘤细胞和造血干细胞的功能不同,但它们之间仍有许多分子差异,如下:1. 蛋白质的表达水平和翻译后修饰。

干细胞标记物

干细胞标记物

受体:(receptor)是一种能够识别和选择 性结合某种配体(信号分子)的大 分子物质
受体与配体间的作用具有三个主要特征: ①特异性; ②饱和性; ③高度的亲和力。
白细胞分化抗原: 是白细胞(还包括血小板、血管内皮细胞
等)在分化成熟为不同谱系(lin-eage)和分 化不同阶段以及活化过程中,出现或消失的细 胞表面标记
当造血干细胞分化为各系的祖细胞和成熟细胞时,会出现各系细胞的专一标 志,即系表面抗原 如: 淋巴 系:CD19、CD7 粒 系:CD11、CD13、CD15、CD16 红 系:CD36、CD47、CD51、CD59、CD71; 单核 系:CD14 巨核 系:CD31、CD41、CD42、CD61、CD107 B淋巴系:CD19、CD20、CD21、CD22 T/NK 系:CD2、CD7、CD11、CD25、CD26
粘附分子: 是一类能介导细胞间及细胞与细胞外
基质粘附的分子,多为糖蛋白。
粘附分子分类: 粘合素超家族粘附分子(纤维粘连蛋白、层粘连 蛋白、纤维蛋白原、胶原蛋白、等) 免疫求蛋白超家族粘附分子(ICAM、VCAM、和CD31等) 钙粘连素超家族粘附分子 选择素家族粘附分子 其它粘附分子。
干细胞表面分子功能: 参与干细胞的分化调控 维持干细胞的自我更新和多能性 参与机体重要的生理和病理过程
Kit:原癌基因c-kit表达产物(又叫干细胞因子受 体SCF-R,CD117),表达于几乎
所有小鼠造血干细胞。 C-kit可编码一种穿膜酪氨酸激酶受体分子。 存在于造血干细胞膜上,它的配体分子是造血干细胞因子(stem cell
factor,SCF)。 人类60%-75%的CD34+造血细胞同时表达c-kit分子。kit+细胞占骨髓细胞的1%-4%,

PBMC表面标志物

PBMC表面标志物

PBMC表面标志物Leukopak是一种通过单采机收集的富集血液分离产物,主要目的是从外周血中提取白细胞(WBC)。

白细胞含有高浓度的单核细胞(PBMC),主要由T细胞,B细胞,NK细胞和单核细胞组成。

Leukopak中的白细胞浓度明显(约4-7*108白细胞/毫升)比全血(平均值5-7*106白细胞/毫升)高很多。

此外,白细胞中的红细胞(RBC)浓度显着降低,比例约为每2个红细胞1个WBC,而在全血中,比例约为每1,000个红细胞约1个WBC。

而且白细胞纯度和质量与全血相比要优越得多,通常含有20倍以上的单核细胞含量。

PBMC因其在免疫治疗研究,细胞治疗工艺开发和临床中的应用而受到高度重视。

因此,白细胞已成为细胞治疗研究和药物开发的首选起始材料。

高品质的Leukopak是纯度和产量的完美平衡。

实现这种平衡不仅需要血液分离专业知识,还需要对捐赠者的良好管理。

通过对捐赠者的饮食和生活习惯指导,我们可以最大限度地提高捐赠者白细胞的潜在质量。

然而,即使是高质量的白细胞在产量方面也是可变的。

捐赠者与捐赠者之间的可变性是固有的,而且往往不可预测的。

然而,这种自然变异性肯定会出现在患者群体中,并且在工艺开发过程中必须被接受和考虑。

02什么是PBMC?外周血单个核细胞(Peripheralbloodmononuclearcell,PBMC),是外周血中具有单个核的细胞,来源于骨髓中的造血干细胞(HSC)。

HSC通过造血过程产生免疫系统的所有血细胞。

HSC可以分化成两个谱系:髓系(单核细胞、巨噬细胞、粒细胞、巨核细胞、树突状细胞、红细胞)和淋巴系(T细胞、B细胞、NK细胞)。

而PBMC主要包括淋巴细胞和单核细胞,淋巴细胞又细分为T细胞,B细胞,NK细胞等。

2023年检验类之临床医学检验技术(士)过关检测试卷A卷附答案

2023年检验类之临床医学检验技术(士)过关检测试卷A卷附答案

2023年检验类之临床医学检验技术(士)过关检测试卷A卷附答案单选题(共50题)1、参与Ⅳ型超敏反应的是A.IgE和IgG4,肥大细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞B.IgG、IgM和IgE,肥大细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞C.IgA.IgM和IgG,补体,中性粒细胞、血小板D.致敏T细胞、单核巨噬细胞、细胞因子E.IgG和IgM,补体,巨噬细胞、NK细胞、中性粒细胞【答案】 D2、放射免疫测定的缺点是()。

A.灵敏度低B.特异性差C.核素具有放射性,对人和环境有危害D.样本和试剂的用量很大E.重复性差【答案】 C3、免疫组织化学技术中最常用的制片方法是A.只有冰冻切片B.只有石蜡切片C.直接推片D.冰冻切片和石蜡切片E.以上都不对【答案】 D4、男,15岁,家住农村,10天前在右肘窝局部皮肤出现针尖大的丘疹、小疱,以后皮肤出现灰白色弧形线纹。

瘙痒症状严重,尤其是夜间睡眠时奇痒难忍。

由于搔抓,现继发感染。

最可能患的疾病是A.潜蚤病B.疥疮C.蠕形螨寄生D.蝇蛆病E.硬蜱寄生【答案】 B5、疟疾相关的肾小球肾炎A.全身性速发性超敏反应B.细胞毒性过敏C.免疫复合物性超敏反应D.迟发性超敏反应E.免疫缺陷病【答案】 C6、可为细菌生长提供氮源和碳源的是A.蛋白胨B.肉浸液C.葡萄糖D.血液E.氯化钠【答案】 B7、凝胶内双向扩散主要用于A.抗原定量B.IgG定量C.补体定量D.抗原或抗体的定性E.半抗原测定【答案】 D8、血液中的钙有43%~47%的钙与蛋白质结合,其中最主要与哪种蛋白质结合A.白蛋白B.钙调蛋白C.免疫球蛋白D.转铁蛋白E.C-反应蛋白【答案】 A9、多发性骨髓瘤患者尿中主要出现()A.白蛋白B.Tamm-Horsfall糖蛋白C.Ig重链D.Ig轻链E.β球蛋白【答案】 D10、血沉使用的抗凝剂是()。

A.乙二胺四乙酸(EDTA)盐B.双草酸盐C.肝素D.枸橼酸盐E.以上都不是【答案】 D11、有关生物芯片的描述哪一项是错误的A.常用的生物芯片分为三大类,即基因芯片、蛋白质芯片和芯片实验室B.生物芯片的主要特点是高通量、微型化和自动化C.生物芯片是近年来在生命科学领域中迅速发展起来的一项高新技术D.生物芯片技术属于一种大规模集成电路技术E.基因芯片可分为主动式芯片和被动式芯片【答案】 D12、能分析出有机化合物的元素组成及构造的仪器是A.毛细管电泳仪B.火焰光度计C.原子吸收分光光度仪D.质谱议E.高效液相色谱仪【答案】 D13、与甲状腺功能亢进无关的表现是()。

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造血干细胞表面标志物造血干细胞(Hematopoietic stem cells, HSC)是一类成体干细胞,具有干细胞的特性:自我更新和分化潜能。

造血干细胞是一种骨髓来源的多能干细胞,它是血液系统中的“种子”细胞。

造血干细胞(HSCs)在造血过程中形成血系中的所有细胞,包括各种成熟细胞如白细胞、红细胞、血小板等。

在受到适当刺激时还分化为其他非造血组织(如脂肪细胞、心肌细胞、内皮细胞和胰腺细胞)[1]。

造血干细胞具有调节体内平衡、免疫功能、抗微生物、抗炎症等生物学功能。

它在血液病、遗传性血液病和自身免疫性疾病的治疗方面有重要作用。

1. 造血干细胞类型2. 造血干细胞的来源3. 造血干细胞的生物学特性4. HSC和免疫系统5. 人体造血系统层次6. 造血干细胞的细胞表面标志7. HSC的临床应用1. 造血干细胞类型已经定义了两种类型的造血干细胞:能够终生保持自我更新和多谱系分化潜能的长期再生细胞(LTRC);来源于LTRC的短期再生细胞(STRC),虽然它们保持了多能性,但它们表现出更有限的自我更新潜能。

它们重建髓系和/或淋巴系间隔的时间很短,大约6周。

2. 造血干细胞的来源造血干细胞存在于成年人的骨髓中,特别是在骨盆、股骨和胸骨中。

它们也存在于脐带血和少量的外周血中。

2.1 骨髓造血干细胞(HSCs)是一种骨髓来源的多能干细胞。

从骨髓中获取造血干细胞通过外科手术,从两个髂骨后嵴分次采集。

骨髓中每10万个细胞中约有1个是长期造血干细胞(LT-HSC)。

2.2 外周血大部分造血干细胞来源于骨髓,少量的干细胞和祖细胞在血液中循环。

人类造血干细胞的临床移植,可以从外周血中收集供体细胞。

造血干细胞的采集是在粒细胞集落刺激因子(G-CSF)等造血生长因子的作用下,将骨髓中的HSC动员到外周血后,通过分离的方式采集。

2.3 脐带血(UCB)脐带血是造血干细胞和造血祖细胞的丰富来源,它所含不同类型的造血祖细胞的数量大约是成人血液中观察到的数量的10倍。

脐带血作为再生医学的特殊细胞来源,也含有多种类型的干细胞。

2.4 胎儿造血系统与胚胎造血干细胞胎儿造血系统是造血干细胞的重要来源,但在临床上尚未得到应用。

图1 造血干细胞的来源3. 造血干细胞的生物学特性造血干细胞是真正的干细胞,因为它们具有多能性、自我更新能力。

其他特性还包括它的异质性。

自我更新:造血干细胞的自我更新意味着造血干细胞产生与它们相同的子代细胞。

它的这种能力,使得造血干细胞可以从单个细胞产生一个完整的造血系统,并在个体的一生中保持造血。

多能性:是指造血干细胞在需要时产生主要造血细胞类型的能力。

造血干细胞(HSC)可分化为来自髓系(单核细胞和巨噬细胞、中性粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞、红细胞、巨核细胞/血小板、树突状细胞)和淋巴系(T、B和NK细胞)的各种血细胞。

造血干细胞具有极高的增殖潜能,使其能够满足正常成人一生中对造血的高需求。

图2 造血干细胞的多能性可塑性:可塑性是指造血干细胞分化为多种非造血组织如心肌细胞的能力[2]。

造血干细胞运输:从胚胎起源开始,HSPC从一个生态位移动到另一个。

造血干细胞(HSC)生态位是造血干细胞赖以生存和自我更新的空间位置和生理微环境。

造血干细胞的运输可分为归巢、保留和植入。

异质性:造血干细胞内部的异质性是指造血干细胞具有不同的生理特征,如细胞周期状态[3]和自我更新能力[4],对不同的外部信号有不同的反应,在移植后有不同的谱系输出[5][6][7][8]。

造血干细胞内部的异质性是构成成人造血系统基础的最坚实的细胞部分,为什么存在HSC亚型、它们是如何产生的?Muller-Sieberg组是最早确定HSC异质性的研究小组之一。

HSC的异质性可以稳定地传播。

HSC的异质性是如何产生的呢?目前认为造血干细胞(HSC)异质性产生的可能途径如下:•造血干细胞来源不同:HSC类型可能来自中胚层细胞、内皮细胞或来自于背主动脉前造血干细胞。

•调控因素的差异:HSC的类型可能受不同的诱导性发育组织(如AGM、胎盘、卵黄囊、头部)的调节,并可能随着它们在循环中的迁移而改变;或受发育生态位(可能是血管、肝脏、神经或骨骼)的调节;或受不同的发育机制(如EHT)的调节。

•此外,表观遗传修饰也可能解释不同HSC类型的存在。

4. HSC和免疫系统造血干细胞(HSC)生态位是造血干细胞赖以生存和自我更新的空间位置和生理微环境。

它保持干细胞在自我更新和分化之间的动态平衡。

研究表明,在活体内,造血干细胞的生态位为造血干细胞提供了免疫特权部位。

调节性T细胞(Treg)与造血干细胞定位于骨髓的骨内膜区域,以保护造血干细胞免受免疫攻击。

此外,造血干细胞本身也通过调节表面免疫分子的表达而具有一定的免疫豁免潜能。

当HSCs被强炎症信号激活并动员进入循环时,HSCs表面的CD47水平显著上调。

CD47与巨噬细胞上的信号调节蛋白结合,抑制吞噬作用。

CD47在动员的造血干细胞表面表达的增加可以保护这些细胞不被吞噬。

5. 人体造血系统层次造血系统中所有血细胞的起源被认为来自于具有自我更新能力的造血干细胞。

造血干细胞和祖细胞(HSPCs)库可分为三种类型的细胞:长期造血干细胞(LT-HSC)、短期造血干细胞(ST-HSPC)和多能祖细胞(MPP)。

造血系统中,静止的、长期再填充的造血干细胞(LT-HSC)位于所有成熟血细胞的顶端,通过其自我更新和不对称的细胞分裂潜能在一生中维持一个原始的多潜能池。

在稳定状态下,造血干细胞衍生的子代具有对外周刺激的快速增殖能力,取代了活化的、消耗的或老化的血细胞的损失[9][10]。

ST-HSPC及其祖细胞具有维持正常造血6~8周的能力。

丧失正常的LT-HSC和ST-HSPC功能是自然干细胞老化和几种造血疾病的标志,最显著的是血液系统恶性肿瘤的发展和进展[11]。

多能祖细胞(MPPs)是由造血干细胞产生的失去自我更新潜能但仍能完全分化为所有多系的多潜能祖细胞(MMPPs)。

MPPs进一步产生低潜能祖细胞,即常见的淋巴和髓系祖细胞(CLPs和CMPs)。

所有这些低潜能祖细胞均可分化为有限的定型谱系:CMPs可分化为巨核/红细胞祖细胞(MEPs)、粒/巨噬细胞祖细胞(GMPs)和树突状细胞(DC)祖细胞;CLPs可分化为T细胞祖细胞、B细胞祖细胞、NK细胞祖细胞和DC祖细胞。

[12][13]。

DC祖细胞(CD8+DC、CD8-DC和浆细胞样DC)可以来自CMPs和CLPs。

图3 人体造血系统层次6. 造血干细胞的细胞表面标志尽管关于造血干细胞的研究很多,但是还没有发现一个单独的分子标记是由造血干细胞表达。

由于造血干细胞缺乏成熟血细胞标志物的表达,因此被称为Lin-。

对造血干细胞进行鉴定或分离一般都是采用多个不同的细胞表面标志物的组合,利用流式细胞术将稀少的造血干细胞从周围的血细胞中分离出来。

人造血干细胞与小鼠造血干细胞的标记物在普遍接受的造血干细胞类型上存在许多差异。

小鼠HSC:EMCN+、CD34lo/-、SCA-1+、Thy1.1+/lo、CD38+、C-kit+、lin-人HSC:EMCN+、CD34+、CD59+、Thy1/CD90+、CD38lo/-、C-kit/CD117+、lin-区分鼠标长期(LT-HSC)和短期(ST-HSC)造血干细胞和多能祖细胞(早期MPP和晚期MPP)标记如下:LT-HSC:CD34-、CD38-、SCA-1+、Thy1.1+/lo、C-kit+、lin-、CD135-、Slamf1/CD150+ST-HSC:CD34+、CD38+、SCA-1+、Thy1.1+/lo、C-kit+、lin-、CD135-、Slamf1/CD150+、Mac-1 (CD11b)lo早期MPP:CD34+、SCA-1+、Thy1.1-、C-kit+、lin-、CD135+、Slamf1/CD150-、Mac-1 (CD11b)lo、CD4lo晚期MPP:CD34+、SCA-1+、Thy1.1-、C-kit+、lin-、CD135high、Slamf1/CD150-、Mac-1 (CD11b)lo、CD4lo6.1 主要标志物的介绍6.1.1 CD34CD34是最重要的标志之一,在造血干细胞及其祖细胞的分离和鉴定中,CD34分子是第一个被广泛研究的分子。

CD34在人脐带血、骨髓和外周血中的表达约0.1 - 4.9%[14]。

CD34在0.55%的人骨髓细胞上表达,在早期祖细胞上有表达,而在成熟的骨髓细胞上不表达。

其他表面标记已经与CD34结合使用来区分原始细胞群体。

6.1.2 CD38CD38又称环状ADP核糖水解酶,是一种存在于许多免疫细胞(白细胞)表面的糖蛋白,包括CD4+、CD8+、B淋巴细胞和自然杀伤细胞。

CD38标记用于区分造血干细胞多能祖细胞(CD38-)和定向祖细胞(CD38+)。

6.1.3 CD90 (Thy1)CD90,也被称为Thy-1,是一个28-30 kDa 的GPI连接膜糖蛋白。

CD90表达于造血干细胞、神经元、胸腺细胞、外周T细胞、成纤维细胞和基质细胞。

CD90在CD34 + CD38-上的共表达定义了造血干细胞,而CD34 + CD38- CD90-定义了多能祖细胞。

6.1.4 CD117 (C-Kit)CD117是一种145 kDa的蛋白酪氨酸激酶,也被称为c-Kit。

CD117在多能造血祖细胞(约1-4%的骨髓细胞)、肥大细胞和急性髓系白血病细胞(AML)上表达。

通过与它的配体结合可诱导CD117的磷酸化,刺激原始造血干细胞、红细胞和单核细胞的增殖和存活。

在配子形成、黑色素形成和造血过程中起着重要作用。

6.1.5 CD135 (Flk-2)CD135,又称FLK-2、FLT3和Ly-72,是一种III型酪氨酸激酶受体。

CD135既表达在正常的CD34+造血干细胞中,也表达于恶性造血细胞,包括AML、ALL和CML BC。

CD135与FLT3配体结合,可以调节造血干细胞的生长,促进具有髓系和B淋巴系潜能的原始造血祖细胞的存活。

6.1.6 CD150 (SLAM)CD150又称SLAM,I型跨膜糖蛋白信号转导淋巴细胞活化分子,是CD2蛋白家族SLAM亚群的典型成员。

SLAM表达于胸腺细胞、T细胞亚群、B细胞、树突状细胞、巨噬细胞和造血干细胞。

6.1.7 CD184 (CXCR4)CD184,又称Fusin或CXCR4。

它广泛表达于血液和组织细胞,包括B细胞和T细胞、单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞、粒细胞、巨核细胞/血小板、淋巴样细胞、髓样前体细胞、内皮细胞、上皮细胞、星形胶质细胞和神经元等组织细胞。

在骨髓龛中,造血干细胞表达CXCR4。

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