药物分析药物的定量分析与分析方法验证 PPT

例：三氯叔丁醇含量的测定：Cl3-C(CH3)2-OH + NaOH ----Cl2．用硫酸水解后测定法
例：硬脂酸镁含量测定：Mg(C17H35COO)2 + H2SO4 ---- Mg2+
（三）经氧化还原后测定法
1．碱性还原后测定 2．酸性还原后测定 3．利用药物中可游离的金属离子的氧化性测定含量
第四章 药物定量分析与分析方法验证
第一节 定量分析样品的前处理方法
一、概述 含金属或卤素的药物，在分析前需要经过不同方法 处理之后，方可进行测定。 处理方法因金属或卤素在分子中结合的牢固程度而 异，如：有机卤素药物，所含卤素原子均直接与碳原子 相连，但不同药物中卤素所处的位置不同，则与碳原子 结合的牢固程度就有差异。如果卤素和芳环相连接，则 结合牢固，与脂肪链的碳原子相连接，则结合不牢固；
2000ml磨口、硬质玻璃锥形瓶，瓶塞应严密、空
心、底部熔封铂丝一根（直径为1mm），铂丝下 端做成网状或螺旋状，长度约为瓶身长度的2∕3 ， 如图
2． 称样 3． 燃烧分解操作法
4． 吸收液的选择：多数用水或水加氢氧化钠
例： NaOH吸收 含碘有机药物-----------------I 2----------NaI+NaIO3
二、不经有机破坏的分析方法 （一） 直接测定法 凡金属原子不直接与碳原子相连的含金属药物或某些C-M
（金属原子直接与碳原子相连）键结合不牢固的有机金属药物，
在水溶液中可以电离，因而不需有机破坏，可直接选用适当的方 法进行测定 。 例：富马酸亚铁的含量测定：富马酸亚铁 （二）经水解后测定法 1．直接回流后测定法 + 稀酸 ---Fe2+
16.10ml 1.003 3.429mg / ml 100 / 25 100% 104.8% 0.11000mg 0.2560 / 0.1211
(2)间接滴定法: 先加入定量过量的滴定液A,使其与被测物定量反应, 再用另一滴定液B回滴定反应剩余的A. 本法需进行空白试验校正.
燃烧所产生的欲测物质吸收于适当的吸收液中，然后根 据欲测物质的性质，采用适宜的分析方法进行鉴别、 检查或测定含卤素有机药物或含硫、氮、硒等其它元素 的有机药物。
本法是快速分解有机物的简单方法，它不需 要复杂设备，就能使有机化合物中的待测元素定 量分解成离子型。该方法被各国药典所收载。 1． 仪器装置 燃烧瓶为500ml、1000ml、或
三、色谱分析法 1、高效液相色谱（HPLC） 高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极 性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂,缓冲液等流 动相泵入装有固定相的色谱柱中.将供试品由流动 相带入柱内,根据供试品不同成份在溶剂中表现出 不同的性质,将其分离,然后检测得到色谱信号. 例如图:两种成份 保留时间:相邻两峰中前后 各峰保留时间tR1 ,tR2
A 0.598 D 1% 50 E1cm 含量%= 100% 357 100% 111.6% 0.75 W l 100 100
1000
分析：为什么含量超过100%？ 溶剂和吸收池有吸收，必须做空白试验
二、荧光分析法 某些物质受紫外可见光照射后能发射出比激光波长 较长的荧光，灵敏度高，取样少，方法快速，但干扰 因素多，必须做空白试验。 测定方法： 在一定条件下，用对照品溶液测定荧光强度与浓 度成线性关系的范围内，在同一条件下，测供试品、 空白、对照品及对照品空白的荧光度，计算得供试品 含量。 Ri Rib Cr D W Rr Rrb 百分含量% 100% W 标示量
（VA×FA—VB×FB）×T 含量%= W
×100%
例:P90 司可巴比妥钠的含量测定(略) VB空=23.21ml VB供试=15.73ml
∴ T(Br2)=
F(Na2S2O3) =1.038 0.05mol/L×(1/1) ×260.23g/mol=13.01(mg/ml)
（VA×FA—VB×FB）×T 含量%= W
试计算每1ml硫酸铈滴定液(0.01mol/L)相当于 生育酚的质量?
a 1 T M B 430.7 0.01 b 2 2.154 g / L 2.154mg / ml
3． 百分含量计算 （1） 直接滴定法
T—滴定度;V—消耗滴定液体积;W—供试品取量
校正因子F: 当滴定液浓度与药典中规定浓度不相同时,要校正
实际摩尔浓度 F 规定摩尔浓度
实际滴定度:T’=TF
在药检部门实验里的试剂瓶子一般不标浓度,而是F值.
含量%= V×T´ W ×100% = V×T×F ×100% W
例:用溴酸钾法测定异烟肼[M(C6H7N3O)=137.14]的 含量时,溴酸钾滴定液的规定摩尔浓度0.01667mol/L. 3C6H7N3O+2KBrO3==3C6H5NO2+3N2+2KBr+3H2O (1)计算滴定度T
1．特点 紫外-可见分光光度法是根据物质分子对波长为
200nm～760nm 这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的光 谱分析方法。主要特点如下： （1）灵敏度高，可达10-4g/ml～10-7g/ml 。
（2）准确度高，相对误差为2% ～5%。
（3）仪器价格较低廉，操作简单，易于普及。
2.朗伯-比耳定律 A=ELC A-吸光度；L-液层厚度/cm ； C-溶液浓度；E-比例系数
含卤素有机芳环药物 还原剂 酸性或碱性 无机卤化物
C - X键比较牢固
例1：碘番酸含量的测定 碘番酸在醋酸条件下用锌粉还原,使碳—碘键 断裂,形成无机碘化物,后用银量法测定; 例2：泛影酸含量的测定P81
三、 经有机破坏的分析方法 （一） 湿法破坏：一般采用强酸、加热湿法破坏法。
解： T=0.0166
(2)测定原料中异烟肼含量: 实验中配制的溴酸钾浓度为0.01672mol/L,取原料药 0.2012g,100ml定容,取25ml用溴酸钾滴定,消耗溴酸 钾14.25ml,求含量?
CKBrO3 (实际) 0.01672 F 1.003 CKBrO3 (规定) 0.01667 VKBrO3 F T D 原料药含量 W 14.25ml 1.003 3.429mg / ml 100 / 25 97.73% 0.2012 1000mg
(3)实验四：测定异烟肼片含量: 取20片(标示量0.1g),精称(2.4220g),研细精称 0.2560g,置 100ml定容,取25ml用溴酸钾滴定,消耗溴 酸钾16.10ml,求含量?
每片含量
---
VKBrO3 FTD 标示量 W / W

100%
W总 2.4220 W= = =0.1211g 20 20
峰宽:W1,W2
(1)分离度: R 2(t R1 t R 2 ) W1 W2
R值越大说明分离越好,R>1.5较好. 较好的色谱图为:,峰窄,对称性好,两峰相隔分明较好. W 1W 2要换算成时间,保证R无量纲
例:用HPLC测得两组分的保留时间8.0min和10.0min, 峰宽分别是2.8mm,3.2mm,记录纸速5.0mm/min,求两 峰分离度? 2.8mm W1 0.56 min 解: 5.0mm / min 2(10.0 8.0) R 3.3 3.2mm W2 0.64 min 0.56 0.64 5.0mm / min
而含金属的有机药物，有两种情况：
一是金属原子不直接与碳原子相连，通常为有机酸及酚的 金属盐或配位化合物，称为含金属的有机化合物，其分子结构 中的金属原子结合不够牢固，在水溶液中既可离解出金属离子， 如有机结构部分不干扰分析时，可在溶液中直接进行其金属的 鉴别或含量定； 二是金属原子直接与碳原子以共价键相连接，结合状态比 较牢，称为有机金属药物，在溶液中其金属一般不能解离成离 子状态，应该根据共价键的牢固程度，经适当处理，将其金属 转变为适于分析的状态，应该根据共价键的牢固程度，经适当 处理，将其金属转变为适于分析的状态（多转变为无机的金属 盐或离子），方可进行其金属的鉴别或含量测定。 不经有机破坏的分析方法 分析方法分两大类： 经有机破坏的分析方法
对照品浓度:Cr=2.5μg/ml=2.5x10-3mg/ml
稀释倍数:
1 1 D 100 10 10 2 1
W20 W 20

W=取样量（约相当于地高辛1.25mg),如标示量 0.8mg（配方中有标注）, 则取约1.5片的质量左右.
Ri Rib Cr D W Rr Rrb 百分含量% 100% W 标示量
a T M B b
×100%
(23.21 15.73) 1.038 13.01 100% 98.8% 0.1022 1000(mg )
二、 光谱分析法 光照在物质上，物质内部发生能级跃迁而产生辐射， 利用光谱进行定性或定量的结构分析称为光谱分析法
（一）紫外-可见分光光度法
a T M B b
B--滴定液浓度 ; a/b--供试品与滴定液摩尔比; M-- 供试品摩尔质量
例：羟苯乙酯含量测定: 先加入定量过量的氢氧 化钠,用0.5mol/L硫酸滴定,(羟苯乙酯分子量 166.2)求滴定度T
T=0.5X(2:1)X166.2=166.2(mg/ml)
例:维生素E中游离生育酚[M(C29H50O2)=430.7g/mol] 的检查方法如下: 取本品0.10g加无水乙醇5ml溶解后,加二苯胺试液1滴, 用硫酸铈滴定液(0.01mol/L)滴定,消耗硫酸铈滴定液 (0.01mol/L)不得超过1.0ml,反应如下:
适量(约相当于地高辛1.25mg)置100ml量瓶中,加80%
乙醇适量,振摇1h使溶解再加80%乙醇稀释至刻度,滤过,
精密量取续滤液2ml,置10ml量瓶中,加80%乙醇至刻度, 摇匀即得.