草莓无毒苗繁育技术

草莓无毒苗繁育技术

1草莓脱毒技术

1.1热处理与茎尖培养脱毒

1.1.1热处理将盆栽小苗2个月后或未经脱毒的试管苗置于恒温箱中,在35～40 ℃条件下变温处理4～5周。白天保持40 ℃处理5h,夜间在35 ℃下处理6h。处理过程中空气湿度不宜过高,一般维持在50%～70%,盆栽苗土壤水分保持在草莓苗生长不萎蔫为宜。

1.1.2茎尖培养(1)材料消毒:将热处理后的匍匐茎剥去外层大叶,用自来水冲洗3~6h后,对材料进行表面消毒。消毒的药品及其使用方法有多种,常用的有两种:①用70%酒精漂洗3~5s,再用0.10%~0.20%次升汞或6%~8%次氯酸钠浸泡2~3min,然后把材料移到超净工作台上;②用70%酒精漂洗3~5s,再用0.10%新洁尔灭浸泡5~10min,然后用1%过氯乙酸浸泡2~5min,然后把材料移到超净工作台上。

(2)接种:材料消毒后,在超净工作台上冲冼3~5次,然后置于双筒解剖镜下,一层层地剥去幼叶和鳞片后,切取0.40~0.50mm,带有2~4个叶原基。将这个生长点用细长的解剖针挑出,转接到培养基中。(3)培养基成分:草莓分化培养基为MS+BA 0.50mg/L+GA 30.10mg/L+IBA 0.50mg/L。(4)培养条件:温度25~30℃,光照强度1500~2000LX,每天光照10h左右。培养20~35d后,即开始分化新芽,新芽不断生长增殖,形成小的芽丛。

1.2花药培养脱毒苗

花药培养的目的,是培育源于花药内部花粉粒的单倍体植株,并使单倍体加培,作为育种材料的来源。但经大量实验表明,草莓花药培养所得的植株有95%以上是能开花结果的多倍体,而且生长发育优于母株。同时,经愈伤组织培养出来的花药植株不带病毒。花药培养不仅可快速获得草莓无毒植株,而且可以省去病毒鉴定工作,对基层生产应用实为一举两得的事情。

1.2.1花药培养方法取花药发育期处在单核靠边期、未开放的小花蕾,用与茎尖消毒同样的方法消毒后,在超净工作台上用镊子取下所有花药(不带花丝),接种到装有培养基的三角瓶中。

1.2.2培养基成分花药培养的第一阶段是诱导愈伤组织,培养中加2.4-D或萘乙酸(NAA);第二阶段是愈伤组织形成后转入茎叶分化培养基中,诱导出再生植株。茎、叶分化培养基通常除去生长素,保留细胞分裂素。(1)诱导愈伤组织培养基:GD培养基+2.4-D 1 mg/L。

(2)诱导再生植株培养基:MS培养基+BA 0.50~1 mg/L。有些品种可以用一种

培养基直接从愈伤组织上分化小植株,不需要进行愈伤组织的转接,其成分为:MS 培养基+IAA 4 mg/L +BA 2 mg/L +KT 2 mg/L,蔗糖30 mg/L。

2继代培养

(1)培养基成分:MS培养基+GA 3mg/L+IBA 0.20mg/L+BA 1mg/L,蔗糖30mg/L。(2)继代方式:以分株方式转接到继代和生根培养基上。(3)培养条件:温度25~30 ℃,光照强度2 000~3 000LX,每天光照16h左右。

3生根培养

(1)培养基成分:1/2MS(大量、微量元素)+IBA 0.20 mg/L, 蔗糖20~30 mg/L,附加活性炭3 mg/L。(2)培养条件:同继代培养条件。

4试管苗移栽

4.1沙培炼苗

清晨或傍晚,将培养瓶内的幼苗轻轻倒出,洗去根上附着的培养基,栽入沙床(8~10cm的干净河沙),栽植株距3~4cm,行距10~15cm,每平方米200~300苗。栽入沙床后,盖好临时小拱棚,棚内温度保持在25 ℃左右,最高不超过30 ℃,最低不低于20 ℃,相对湿度保持在80%~95%。光照为7 500~9 000LX,3d后,将棚内湿度降低到70%~80%,光强逐渐增强到35 000LX;6~7d后,逐渐揭开小拱棚。

4.2温室营养袋炼苗

将沙培后的合格苗小心挖出,在空气湿度不低于70%,温度在20~25 ℃,无直射光下,栽入肥土:沙:腐熟有机肥(1:1:0.30)的营养土中。栽入营养土中的苗,扣棚的最初几天,对温度、湿度和光照的要求和管理与沙培苗相同。

4.3大田苗圃移栽

选疏松肥沃、排灌水方便、距温室较近、日照良好的地块作为苗圃地。按营养袋苗的移栽和管理方式进行移栽和管理,移栽苗圃地的小苗应保证有3个月的生长期,以促进幼苗成熟和花芽分化。