光学显微镜的使用知识讲解
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细胞的显微测量
细胞的显微测量需要以目镜测 微尺来进行，但其分度值随着放大 倍数的变化而变化，长度也不一样， 因此需要事先进行标定。而镜台测 微尺的长度是已知的，目镜测微尺 的标定是通过镜台测微尺来进行的。
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目镜测微尺与镜台测微尺
0.01mm
0
1
2
3
40
1
2
3
4
5
6
7
8
目镜测微尺
(长度随放大倍数发生改变)
如何进行蛙细胞的显微测量？
转动目镜镜筒 短轴
长轴
目镜测微尺
细胞形态和显微测量
实验报告
描绘在显微镜下观察到的口腔上皮细胞 记录蛙红细胞显微测量结果
细胞膜 细胞质 细胞核
蛙红细胞示意图
分别记录5个蛙红细胞的长径和短径，并计算平均值。
1 长径
蛙红细胞测量结果
2
3
4
单位：m
5
平均
短径
目镜测微尺标定
二、细胞形态和显微测量
目的要求 用品材料 实验内容 实验报告 复习预习
细胞形态和显微测量
目的要求
❖ 掌握光镜下细胞的基本形态结构； ❖ 掌握临时制片和显微绘图的方法； ❖ 进一步掌握显微镜的正确使用方法； ❖ 了解细胞显微测量的原理。
细胞形态和显微测量
用品材料
❖ 玻片标本 人口腔上皮细胞、平滑肌装片、牛脊髓横 切片、小鼠肝细胞切片、蛙血涂片
其他几种显微镜介绍
检测显微镜SFC-86
双筒解剖显微镜
其他几种显微镜介绍
偏振光显微镜
倒置显微镜光路图
倒置显微镜
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显微镜的构造和使用
复习预习
❖ 复习“使用显微镜的注意事项” ❖ 预习“生物绘图的要求及方法”(p10) ❖ 预习第二次实验“细胞形态和显微测量” ❖ 携带实验报告纸、铅笔、橡皮擦、直尺
（1）标定物镜：40
（2）重合线之间，
目镜测微尺
格，镜台测微
尺格
（3）求值：
目镜测微尺的每一小格相当于镜台测微尺的
目镜测微尺的标定值为
微米
小格
细胞形态和显微测量
用品材料
❖ 玻片标本 字母装片、头发装片、玻璃纤维
❖ 实验材料 显微镜、擦镜纸、载玻片、擦布、香 柏油、二甲苯
显微镜的构造和使用
实验内容
光学显微镜的构造
✓ 机械系统部分 ✓ 光学系统部分 ✓ 照明系统部分 ✓ 图像记录系统
机械部分
镜座 镜柱 活动关节 镜臂 调焦器 镜筒 物镜转换器 载物台 推片器与游标卡尺
镜台测微尺的长度为68格
则：
50:68=1:x
x=1.36格，即目镜测微尺的1小格相当于镜台测微尺 的1.36格，而镜台测微尺每1小格的长度为10um，则目镜测微 尺每1小格的长度为13.6um。
标定时 应注意 的问题
• 标定时必须严格按照操作规程，以免损坏测微尺； • 重合线的判断应在二者刻度线完全重合； • 比例式的计算； • 标定值只能在同一放大倍数下进行测量。
光学系统部分
目镜(接目镜)
“5×”，“10×”的含义。目镜指 针 低倍镜 (8x，10x)：0.25,160
物镜(接物镜)
高倍镜 (40x,45x):0.65,160/0.17
油 镜 (90x,100x):1.25,160/0.17
如何计算显微镜的放大倍数？
照明系统部分
光 源 ： 内光源与外光源 反光镜 ： 凹面镜与平面镜 聚光镜 ： 升高与降低聚光镜 光 圈 ： 放开与关闭光圈
镜台测微尺
(每一大刻度值为0.1mm，小刻度值为0.01mm)
细胞形态和显微测量
实验内容
细胞的显微测量
✓ 标定镜台测微尺 ✓ 蛙红细胞的测量
目镜测微尺的标定
*装入目镜测微尺
放镜台测微尺于载物台
记录二者在重合线之间的刻度
调节使镜台测微尺 与目镜测微尺平行
取下镜台测微尺
计算标ห้องสมุดไป่ตู้值
如在低倍镜下重合线之间目镜测微尺的长度为50格
实验一
光学显微镜的使用方法
一、光学显微镜构造和使用
目的要求 用品材料 实验内容 复习预习
光学显微镜构造和使用
目的要求 用品材料 实验内容 复习预习
显微镜的构造和使用
目的要求
❖ 熟悉光学显微镜基本结构和用途； ❖ 掌握显微镜维护的基本知识； ❖ 初步掌握低倍镜、高倍镜使用方法。
显微镜的构造和使用
高倍镜的使用
显微镜的构造和使用
实验内容
光学显微镜的使用
使用练习
✓字母装片：观察中注意字母像与实 际装片的位置关系，为什么？
✓头发装片：调节推片器定位头发的 十字交叉点
✓玻璃纤维：调节推片器定位玻璃纤 维的十字交叉点
✓问题思考：对颜色深的标本与颜色 浅的标本在观察过程中有何不同？
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显微镜的构造和使用
✓ 星形细胞——牛脊髓神经细胞
✓ 梭形细胞——小鼠平滑肌细胞
✓ 圆形细胞——蛙血(示红细胞)
✓ 小鼠肝细胞切片观察
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人口腔上皮细胞制备(临时制片)
取干净载玻片
滴入0.9%NaCl溶液
取口腔上皮细胞
盖上盖玻片
亚甲基蓝染色 观察
扁平上皮细胞 人口腔上皮细胞
扁平上皮细胞 蟾蜍扁平上皮细胞(HE染色)
柱状上皮细胞 蝾螈小肠切片 (HE染色)
星状细胞
离体培养的新生老鼠脊 髓神经细胞(HE染色)
平滑肌细胞 小鼠平滑肌细胞
小鼠肝细胞切片 小鼠肝细胞内DNA的显示(Feulgen反应)
圆形细胞
人血涂片 (Giemsa染色)
(红色箭头示白细胞，兰色箭头示红细胞)
细胞形态和显微测量
实验内容
第二部分
如何调节观察视野的明暗度？
显微图象系统
普通生物显微镜
数码生物显微镜 生物显微镜(含摄影系统)
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显微镜的构造和使用
实验内容
光学显微镜的使用
✓ 取镜 ✓ 放镜 ✓ 对光 ✓ 放片 ✓ 调焦(粗调焦和细调焦)
低倍镜的使用
显微镜的构造和使用
实验内容
光学显微镜的使用
✓ 定位 ✓ 换镜 ✓ 调焦(细调焦)
实验内容
显微镜使用注意事项
✓ 显微镜持取正确姿势 ✓ 使用前后的镜头维护 ✓ 注意标本的放置方向 ✓ 观察时注意双目齐睁 ✓ 高倍镜不得使用粗调 ✓ 严禁拆卸任何部件 ✓ 使用后恢复机器原貌
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显微镜的构造和使用
实验内容
其他常用光学显微镜
✓ 检测显微镜 ✓ 解剖显微镜 ✓ 倒置显微镜 ✓ 偏光显微镜
❖ 实验材料 显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、小镊 子、载玻片、盖玻片、吸管、牙签、纱布、 擦镜纸、吸水纸、解剖刀、剪刀等
细胞形态和显微测量
实验内容
❖ 细胞的形态观察 ❖ 细胞的显微测量
细胞形态和显微测量
实验内容
第一部分
细胞的形态结构观察
✓ 扁平细胞——人类口腔上皮细胞
✓ 柱状细胞——小鼠小肠上皮细胞
细胞的显微测量需要以目镜测 微尺来进行，但其分度值随着放大 倍数的变化而变化，长度也不一样， 因此需要事先进行标定。而镜台测 微尺的长度是已知的，目镜测微尺 的标定是通过镜台测微尺来进行的。
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目镜测微尺与镜台测微尺
0.01mm
0
1
2
3
40
1
2
3
4
5
6
7
8
目镜测微尺
(长度随放大倍数发生改变)
如何进行蛙细胞的显微测量？
转动目镜镜筒 短轴
长轴
目镜测微尺
细胞形态和显微测量
实验报告
描绘在显微镜下观察到的口腔上皮细胞 记录蛙红细胞显微测量结果
细胞膜 细胞质 细胞核
蛙红细胞示意图
分别记录5个蛙红细胞的长径和短径，并计算平均值。
1 长径
蛙红细胞测量结果
2
3
4
单位：m
5
平均
短径
目镜测微尺标定
二、细胞形态和显微测量
目的要求 用品材料 实验内容 实验报告 复习预习
细胞形态和显微测量
目的要求
❖ 掌握光镜下细胞的基本形态结构； ❖ 掌握临时制片和显微绘图的方法； ❖ 进一步掌握显微镜的正确使用方法； ❖ 了解细胞显微测量的原理。
细胞形态和显微测量
用品材料
❖ 玻片标本 人口腔上皮细胞、平滑肌装片、牛脊髓横 切片、小鼠肝细胞切片、蛙血涂片
其他几种显微镜介绍
检测显微镜SFC-86
双筒解剖显微镜
其他几种显微镜介绍
偏振光显微镜
倒置显微镜光路图
倒置显微镜
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显微镜的构造和使用
复习预习
❖ 复习“使用显微镜的注意事项” ❖ 预习“生物绘图的要求及方法”(p10) ❖ 预习第二次实验“细胞形态和显微测量” ❖ 携带实验报告纸、铅笔、橡皮擦、直尺
（1）标定物镜：40
（2）重合线之间，
目镜测微尺
格，镜台测微
尺格
（3）求值：
目镜测微尺的每一小格相当于镜台测微尺的
目镜测微尺的标定值为
微米
小格
细胞形态和显微测量
用品材料
❖ 玻片标本 字母装片、头发装片、玻璃纤维
❖ 实验材料 显微镜、擦镜纸、载玻片、擦布、香 柏油、二甲苯
显微镜的构造和使用
实验内容
光学显微镜的构造
✓ 机械系统部分 ✓ 光学系统部分 ✓ 照明系统部分 ✓ 图像记录系统
机械部分
镜座 镜柱 活动关节 镜臂 调焦器 镜筒 物镜转换器 载物台 推片器与游标卡尺
镜台测微尺的长度为68格
则：
50:68=1:x
x=1.36格，即目镜测微尺的1小格相当于镜台测微尺 的1.36格，而镜台测微尺每1小格的长度为10um，则目镜测微 尺每1小格的长度为13.6um。
标定时 应注意 的问题
• 标定时必须严格按照操作规程，以免损坏测微尺； • 重合线的判断应在二者刻度线完全重合； • 比例式的计算； • 标定值只能在同一放大倍数下进行测量。
光学系统部分
目镜(接目镜)
“5×”，“10×”的含义。目镜指 针 低倍镜 (8x，10x)：0.25,160
物镜(接物镜)
高倍镜 (40x,45x):0.65,160/0.17
油 镜 (90x,100x):1.25,160/0.17
如何计算显微镜的放大倍数？
照明系统部分
光 源 ： 内光源与外光源 反光镜 ： 凹面镜与平面镜 聚光镜 ： 升高与降低聚光镜 光 圈 ： 放开与关闭光圈
镜台测微尺
(每一大刻度值为0.1mm，小刻度值为0.01mm)
细胞形态和显微测量
实验内容
细胞的显微测量
✓ 标定镜台测微尺 ✓ 蛙红细胞的测量
目镜测微尺的标定
*装入目镜测微尺
放镜台测微尺于载物台
记录二者在重合线之间的刻度
调节使镜台测微尺 与目镜测微尺平行
取下镜台测微尺
计算标ห้องสมุดไป่ตู้值
如在低倍镜下重合线之间目镜测微尺的长度为50格
实验一
光学显微镜的使用方法
一、光学显微镜构造和使用
目的要求 用品材料 实验内容 复习预习
光学显微镜构造和使用
目的要求 用品材料 实验内容 复习预习
显微镜的构造和使用
目的要求
❖ 熟悉光学显微镜基本结构和用途； ❖ 掌握显微镜维护的基本知识； ❖ 初步掌握低倍镜、高倍镜使用方法。
显微镜的构造和使用
高倍镜的使用
显微镜的构造和使用
实验内容
光学显微镜的使用
使用练习
✓字母装片：观察中注意字母像与实 际装片的位置关系，为什么？
✓头发装片：调节推片器定位头发的 十字交叉点
✓玻璃纤维：调节推片器定位玻璃纤 维的十字交叉点
✓问题思考：对颜色深的标本与颜色 浅的标本在观察过程中有何不同？
返回上一层
显微镜的构造和使用
✓ 星形细胞——牛脊髓神经细胞
✓ 梭形细胞——小鼠平滑肌细胞
✓ 圆形细胞——蛙血(示红细胞)
✓ 小鼠肝细胞切片观察
返回上一层
人口腔上皮细胞制备(临时制片)
取干净载玻片
滴入0.9%NaCl溶液
取口腔上皮细胞
盖上盖玻片
亚甲基蓝染色 观察
扁平上皮细胞 人口腔上皮细胞
扁平上皮细胞 蟾蜍扁平上皮细胞(HE染色)
柱状上皮细胞 蝾螈小肠切片 (HE染色)
星状细胞
离体培养的新生老鼠脊 髓神经细胞(HE染色)
平滑肌细胞 小鼠平滑肌细胞
小鼠肝细胞切片 小鼠肝细胞内DNA的显示(Feulgen反应)
圆形细胞
人血涂片 (Giemsa染色)
(红色箭头示白细胞，兰色箭头示红细胞)
细胞形态和显微测量
实验内容
第二部分
如何调节观察视野的明暗度？
显微图象系统
普通生物显微镜
数码生物显微镜 生物显微镜(含摄影系统)
返回上一层
显微镜的构造和使用
实验内容
光学显微镜的使用
✓ 取镜 ✓ 放镜 ✓ 对光 ✓ 放片 ✓ 调焦(粗调焦和细调焦)
低倍镜的使用
显微镜的构造和使用
实验内容
光学显微镜的使用
✓ 定位 ✓ 换镜 ✓ 调焦(细调焦)
实验内容
显微镜使用注意事项
✓ 显微镜持取正确姿势 ✓ 使用前后的镜头维护 ✓ 注意标本的放置方向 ✓ 观察时注意双目齐睁 ✓ 高倍镜不得使用粗调 ✓ 严禁拆卸任何部件 ✓ 使用后恢复机器原貌
返回上一层
显微镜的构造和使用
实验内容
其他常用光学显微镜
✓ 检测显微镜 ✓ 解剖显微镜 ✓ 倒置显微镜 ✓ 偏光显微镜
❖ 实验材料 显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、小镊 子、载玻片、盖玻片、吸管、牙签、纱布、 擦镜纸、吸水纸、解剖刀、剪刀等
细胞形态和显微测量
实验内容
❖ 细胞的形态观察 ❖ 细胞的显微测量
细胞形态和显微测量
实验内容
第一部分
细胞的形态结构观察
✓ 扁平细胞——人类口腔上皮细胞
✓ 柱状细胞——小鼠小肠上皮细胞