血凝试验(HA)及血凝抑制试验(HI)

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1： 2 1： 4 1： 8 ﹟ ﹟ ﹟
弃去25
37℃ 15-30min 以100%凝集病毒最大稀释孔为该病毒的凝集价
血凝抑制试验(HI)
一、概念： 1 、 HI 试验：病毒的红细胞凝集现象，可以被特异性免疫血清所抑制， 称HI试验。 2、抗体效价：出现红细胞凝集抑制现象的血清的最大稀释倍数叫抗体 效价。
二、动物体内抗体存在情况 1、当动物感染某病毒而发病时，可在机体的相应器官查出病毒。
2、病毒相当于免疫效应物质中的抗原，病毒进入动物机体，将发生特异
性免疫反应，即产生免疫物质——抗体（ 90%抗体都存在于动物的血清 中），抗原和抗体发生特异性结合反应 3、病畜体内，因受病毒抗原刺激，产生大量相应抗体，故体内抗体效价 较高 4、健康动物，免疫接种后，因受疫苗（抗原）刺激，而发生免疫应答反 应，体内抗体效价较高
HI试验
孔号
血清稀释倍 数 生理盐水 血清 4单位病毒
1
1： 2 25 25 25
2
1：4 25 25 25
3
1：8 25 25 25
4
5
6
7
8
9
10
1：1024 25 25 25
病毒对 照
1：2048 25
血清 对照
…….. …….. …….. ……..
25 25
25
振荡1分钟，37℃温箱15分钟 弃 25
（二）按下表顺序加样
96孔板孔号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12对照
生 理盐水
病 毒 红细胞 病毒稀释倍 数 结果判定
25
25 25
25
25 25
25
25 25
……..
…….. …….. …….. ﹟﹟ ﹟ ﹟卅 _
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25 25 1： 1024 _
25
25 25 1： 2048 _ _
红细胞悬液
ห้องสมุดไป่ตู้25
25
25
25
……..
25
25
振荡1分钟，37℃温箱15—20分钟 结果判定 _ _ _ _
十 十十
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﹟
﹟
_
以100%抑制凝集的血清最大稀释度为该血清的滴度，即血清效价
病毒的血凝试验（HA）及血凝抑制试验(HI)
一、目的要求 掌握HA和HI试验的基本操作技术，了解其实用价值。 二、实验材料 1、禽流感毒 2、1%鸡红细胞 3、生理盐水 4、禽流感阳性血清 5、96孔“V”型微量反应板 三、实验内容 1、HA试验术式表： 2、HI试验术式表： 四、作业 1、病毒凝集红细胞是不是一种特异的抗原抗体反应？为什么？ 2、HI试验是不是特异的抗原抗体反应？为什么
病毒的红细胞凝集试验（HA）
一、 概念 病毒的红细胞凝集现象：许多病毒表面有血凝素，能与各种动物的红细胞 表面受体结合，而出现红细胞凝集现象，简称为病毒的血凝现象。 二、应用 1 、当以被检动物的某一器官为病料，进行HA试验，结果为阳性者，证明 该被检材料中有能凝集红细胞的某种病毒。 2 、凝集价的测定：将被检病毒材料，稀释成不同的稀释倍数，进行 HA试 验，出现血凝现象的各稀释孔中，以100%能出现病毒的红细胞凝集现象的 病毒的最大稀释倍数者即定为凝集价(血凝价)