谷氨酰转移酶测定

谷氨酰转移酶测定

1 检验目的

指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。

2 实验原理

L-γ-谷氨酰-3羧基-4硝基苯胺 + 甘氨酰甘氨酸GGT L-γ-谷氨酰甘氨酰甘氨酸 + 5-氨基-2-硝基苯甲酸盐

在上述反应中， 5氨基2硝基苯甲酸盐的生成速率与样本中γ谷氨酰基转移酶的活力成正比，通过在405 nm处监测吸光度的上升速率，即可测得样本中γ谷氨酰基转移酶的活性。

3 标本：

3.1 病人准备：无特殊。

3.2 类型：血清或EDTA血浆。

3.3 标本存放：室温可保存8小时；2～8℃可保存3天；-20℃保存至少可稳定1周。

3.4 标本运输：常温条件下保存运输。

3.5 标本拒收标准：细菌污染的标本。

4 实验材料

4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司GGT试剂盒（沪食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）4.1.1 试剂组成

试剂1（R1）：Tris缓冲

液100mmol/

L

甘氨酰甘氨酸 125mmol/L

试剂2（R2）：Tris缓冲

液100mmol/

L

L-γ-谷氨酰

-3羧基-4硝基

苯胺

14.5mmol/L

4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。

4.1.3 试剂稳定性与贮存:2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂（盒）自生产之日起有效期为12个月。

4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。

4.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。

4.2 校准品：使用上海复星长征医学科学有限公司提供的GGT校准品对自动分析仪进行校准。

4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。

5 仪器

AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪

6 操作步骤

6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。

6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。

6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。

6.4仪器操作步骤：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪操作规程。

7 质量控制

在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。

8 计算方法

以GGT复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以U/L报告。

9 参考值范围

女性7-32U/L；男性11-49U/L。

参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。

我室参考值：4-60u/l

10 临床意义

γ-谷氨酰转移酶（GGT）又称γ-谷氨酰转肽酶。存在于肝脏和胆汁中，是肝胆疾病最敏感的指示物。因为该酶对肝胆疾病具有高阴性预期值，因此γ-谷氨酰转移酶的检测被广泛地用于排除肝胆疾病。结合丙氨酸氨基转移酶、门冬氨酸氨基转移酶、胆碱酯酶等其它酶，γ-谷氨酰转移酶对于肝脏疾病的鉴别诊断非常有价值。GGT还用于诊断肝胆疾病。原发性肝癌，胰腺Ca和气特壶鹏Ca时，血清GGT活力显著升高。急性肝炎、慢肝活动期，阻塞性黄疸，胆适感染，胆和症，急性胰脉炎时都可以升高。

11 操作性能

11.1试剂空白：

a) 试剂空白吸光度：应不大于0.800。

b）试剂空白吸光度变化率（ΔA/min）：应不大于0.001。11.2分析灵敏度：10.0U/L样本的吸光度变化率（ΔA/min）应不小于0.005。

11.3线性范围：试剂（盒）线性范围应覆盖[5～450]U/L。

a) 线性相关系数（r）应不小于0.990；b) [5～50]U/L 范

围内，线性偏差应不超过±3.0U/L；[51～450] U/L 范围内，线性偏差应不超过±10％。

11.4准确度：相对偏差（B）应不大于±10%。

11.5精密度：(1)重复性：变异系数（CV）应不大于5%；(2)批间差：相对极差（R）应不大于5%。

12 超出范围结果处理

本法对GGT活力检测的最大上限为4500U/L，当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1:4稀释，重新测定，结果乘以5。

13 病危报警值的处理:

无警告/危急值

14 方法局限性

14.1 测定结果的准确性依赖于对所使用分析仪器校准、测定温度和测定时间的控制。

14.2 大多数样本可能观察不到延迟期。

14.3 有关可能干扰本测定的药物或物质，请参阅参考文献16.3。