谷氨酰转移酶测定
γ-谷氨酰基转移酶(GGT)测定试剂盒(GCANA底物法)产品技术要求sainuopu
γ-谷氨酰基转移酶(GGT)测定试剂盒(GCANA底物法)适用范围:用于体外定量测定人体血清中γ-谷氨酰基转移酶的活性。
1.1 试剂盒包装规格试剂1:1×25ml,试剂2:1×5ml;试剂1:2×60ml,试剂2:2×12ml;试剂1:3×40ml,试剂2:3×8ml;试剂1:4×60ml,试剂2:4×12ml;试剂1:2×400ml,试剂2:1×160ml;试剂1:2×40ml,试剂2:2×8ml。
1.2 试剂盒主要组成成分2.1 外观试剂1:无色澄清液体;试剂2:浅黄色澄清液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在37℃、405nm波长、1cm光径条件下,试剂空白吸光度应不大于1.2。
2.3.2试剂空白吸光度变化率在37℃、405nm波长、1cm光径条件下,试剂空白吸光度变化率(ΔA/min)应不大于0.005。
2.4 分析灵敏度测定活性为50U/L样本时,吸光度变化率(ΔA/min)应不小于0.011。
2.5 线性范围在(10,500)U/L线性范围内,线性相关系数r不小于0.996。
在(50,500)U/L范围内的线性相对偏差不大于±10%;测定结果(10,50]U/L时线性绝对偏差不大于±5 U/L。
2.6 重复性重复测试两份高低浓度的样本,所得结果的变异系数(CV%)应不大于5%。
2.7 批间差不同批号试剂测试同一份样本,测定结果的批间相对极差应不大于10%。
2.8 准确度相对偏差:相对偏差应不超过±10%。
2.9 稳定性效期稳定性:试剂盒在2℃~8℃下有效期为12个月,取失效期的试剂盒进行检测,试验结果应满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8要求。
γ-谷氨酰基转移酶测定的操作规程
γ-谷氨酰基转移酶测定的操作规程1、用途:测定人血清中γ-谷氨酰基转移酶的活性。
2、检验原理:其在GGT的作用下,生成呈色产物5-氨基-2-硝基苯甲酸,后者在405nm波长处有最大吸收,其生成量与血浆中GGT活性成正比。
根据测定405nm波长下吸光度增加的速率,即可测出血清中GGT活性。
3、适用仪器:AU480奥林巴斯全自动生化分析仪。
4、样本要求:4.1、样本种类:新鲜无溶血血清。
4.2、样本采集:常规静脉采血约3ml,不抗凝。
置普通管中,或采用含有分离胶的真空采血管。
4.3、样本干扰:对反映吸光度有干扰的样本,包括溶血和浑浊的样本都可能影响检测结果遇上述情况建议重新采集标本。
4.4、样本保存:血清样本2℃—8℃可稳定7天,-20℃可保存一个月,忌反复冻融。
5、检测方法:5.1、试剂的准备:试剂开瓶即可使用。
5.2、检测步骤:1cm)2、全自动生化分析仪操作步骤:参数设置→试剂装载→校准→质控→样品加载→测定→结果审核→报告。
5.3、校准:用K因素进行试剂空白校准,也可使用Roche公司校准品进行校准操作,当试剂更换批号、出现质控漂移、仪器做完保养后及重要零件更换时,须重新校准。
5.4、结果计算:全自动生化分析仪会自动给出检测结果。
6、参考范围:(各医院应该根据本地区实际情况建立自己的参考范围)7、注意事项:7.1、试剂具有一定的酸碱性,避免直接接触皮肤和眼睛,切勿吞咽。
7.2、使用后的器具应按照规定处理,扔入指定的垃圾箱内,不可随处乱扔,防止环境污染和二次使用。
7.3、由于运输过程产生渗液或漏夜的产品,或在运输贮存中没有按照说明书要求进行维护的试剂,不可使用。
7.4、试剂只用于体外诊断。
8、参考文献:陆永绥、李清华、张伟民主编,临床检验自动化仪器分析标准操作规程,浙江大学出版社,2006.王惠萱、李雪梅、王冈,临床检验操作手册,云南科技出版社,2008.中华人民共和国卫生部医政司,全国临床检验操作规程(第三版),东南大学出版社,2006。
γ-谷氨酰基转移酶(γ-GT)测定试剂盒(GCANA底物法)产品技术要求百奥泰康
γ-谷氨酰基转移酶(γ-GT)测定试剂盒(GCANA底物法)适用范围:该试剂盒用于体外定量测定人血清中γ-谷氨酰基转移酶的活性。
1.1 产品规格试剂1:60mL×5,试剂2:12mL×5;试剂1:60mL×5,试剂2:60mL×1;试剂1:60mL×2,试剂2:12mL×2;试剂1:60mL×2,试剂2:24mL×1;试剂1:80mL×4,试剂2:16mL×4;试剂1:80mL×4,试剂2:64mL×1;试剂1:80mL×2,试剂2:16mL×2;试剂1:80mL×2,试剂2:32mL×1;试剂1:50mL×3,试剂2:10mL×3;试剂1:50mL×3,试剂2:30mL×1;试剂1:40mL×3,试剂2:24mL×1;试剂1:50mL×4,试剂2:20mL×2;试剂1:50mL×4,试剂2:40mL×1;试剂1:60mL×1,试剂2:12mL×1;试剂1:50mL×1,试剂2:10mL×1;试剂1:40mL×1,试剂2:;8mL×1;试剂1:500mL×1,试剂2:100mL×1;试剂1:5000mL×1,试剂2:1000mL×1;1.2 组成成分该试剂盒由试剂1(R1)和试剂2(R2)组成。
1.2.1试剂组成试剂1: Tris缓冲溶液≥50.0mmol/L 双甘肽≥100.0mmol/L 试剂2:L-g-谷氨酰-3-羟基-4-硝基苯胺≥3.0mmol/L2.1 外观a) R1应为无色溶液,无混浊,无未溶解物。
b) R2应为淡黄色溶液,无混浊,无未溶解物。
GGT 文档,γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)测定试剂盒标准操作规程
1、方法依据:深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)测定试剂盒测定方法2、适用范围:适用于人血清γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)的测定。
3、试剂仪器:3.1 试剂:深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司原装试剂盒。
3.2 试剂储存:未打开的试剂盒避光保存于2℃~8℃,有效期为一年。
试剂开瓶后应避光保存,在2℃~8℃可稳定30天。
试剂不可冰冻。
3.3 仪器:迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪.4、操作程序4.1方法原理γ-GT 催化谷氨酰基转移给受体的反应。
本法以L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-苯基重氮酸为底物,将底物上的谷氨酰基转移至受体双甘肽,生成5-氨基-2-硝基苯甲酸盐。
在405 nm进行吸光度检测,吸光度升高的速率与标本中γ-GT 活力成正比。
γ-GTL-γ-谷氨酰-3-羧基-4-苯基重氮酸 + 双甘肽5-氨基-2-硝基苯甲酸盐 + L-γ-谷氨酰双甘肽4.2样本要求新鲜血清样本,采集后及时测定,应避免溶血和污染。
血清样本于20℃~25℃保存可稳定6天4.3上机操作4.3.1试剂装载、校准、样品和质控血清分析操作详见“《迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪标准操作、维护、保养规程》”4.3.2 校准:4.3.2.1 标准液的准备:标准液的准备:校准品使用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司配套冻干品,按说明书要求稀释后分装,-20℃冷冻保存,用前提前15分钟从冰箱中取出,复溶到室温后上机检测。
4.3.2.2 校准程序:首次使用校准。
当有以下情况时需重新校准:1)换试剂批号或出现质控漂移时;2)当仪器做完保养后;3)仪器进行零件更换时。
每次试验前用准备好的校准品进行校准,校准通过后进行检测。
4.3.2.3 质控:在标本开始之前做质控,质控通过后方能进行标本的检测。
4.3.3 测试基本参数4.4参考范围女:9~39 U/L男:11~61 U/L(37℃)(注:各实验室应有自己的参考范围。
3γ-谷氨酰转移酶(GGT)测定
肝脏疾病: ALB α1 α2 β↓ γ↑
M蛋白血症:ALB轻度减低,γ↑↑,峰型呈明显的“M”蛋白区带。 多发性骨髓瘤
肾病型,ALB γ↓,αβ↑ 肾病综合症
炎症型:α1、α2、β↑ 急性生的机制
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肝脏疾病的常用实验室检查
(一)蛋白质代谢检查
1.血清TP、ALB、A/G比值测定
蛋白质是一类亲水胶体性质的高分子化合物,90%以上的血清总蛋白和 全部的血清白蛋白由肝脏合成,因此血清总蛋白和白蛋白检测是反映肝功能 的重要指标。
方法:⒈盐析法:白蛋白、球蛋白 ⒉电泳法:白蛋白 球蛋白
➢ 参考值: T: 60- 80g/L A: 40- 55g/L G: 20- 30g/L A/G: 1.5-2.5:1
1. 乙肝五项标志物的临床意义
1)HBsAg 阳性是乙肝的感染指标之一; 2)Anti-HBs 效价与保护作用呈平行关系; 3)HbeAg 阳性表示HBV在体内复制,具有传染性。
4)Anti-HBe 可存在于无症状携带者及无活动性肝病患者中,若Anti-Hbe存在于慢活肝 患者中,则肝病有可能继续发展,并逐步变成肝硬化;
(1)胆红素形成过多。 (2)肝细胞处理胆红素的能力下降。 (3)胆红素在肝外的排泄障碍,逆流人血而引起黄疸。
12
13
14
参考值: 总胆红素 结合胆红素 非结合胆红素
1.7-17.1 umol/L 0-6.8 umol/L
1.7-10.28 umol/L
临床意义
(1)总胆红素判断有无黄疸及黄疸的程度
(3)急性肝炎中度↑, < 200U (4)慢性肝炎、肝硬化 若持续升高,为病情不稳定或恶化趋势,若逐渐
谷氨酰氨基转移酶标准范围
谷氨酰氨基转移酶标准范围一、性别男性和女性的谷氨酰氨基转移酶正常范围有所不同。
一般来说,男性的正常范围在40-70U/L 之间,而女性的正常范围在30-50U/L之间。
二、年龄随着年龄的增长,人体的肝脏功能会逐渐下降,因此谷氨酰氨基转移酶的正常范围也会有所不同。
一般来说,年轻人的正常范围在20-40U/L之间,而中老年人的正常范围在30-50U/L之间。
三、饮食饮食对谷氨酰氨基转移酶的影响较大。
如果饮食中富含高蛋白、高脂肪的食物,或者长期饮酒,会对肝脏造成损害,导致谷氨酰氨基转移酶升高。
因此,建议在饮食上保持清淡,适量饮酒。
四、疾病因素某些疾病会对肝脏造成损害,导致谷氨酰氨基转移酶升高。
例如,肝炎、肝硬化、肝癌等肝脏疾病,以及胆囊炎、胆结石等胆囊疾病都会影响谷氨酰氨基转移酶的数值。
因此,如果患有这些疾病,需要及时治疗并定期检查谷氨酰氨基转移酶。
五、药物因素某些药物会对肝脏造成损害,导致谷氨酰氨基转移酶升高。
例如,抗生素、抗肿瘤药物、镇静剂等都会影响谷氨酰氨基转移酶的数值。
因此,在使用这些药物时需要遵医嘱,定期检查肝功能。
六、生活习惯生活习惯对谷氨酰氨基转移酶的影响也较大。
长期熬夜、缺乏运动、吸烟等不良生活习惯会对肝脏造成损害,导致谷氨酰氨基转移酶升高。
因此,建议保持健康的生活方式,适量运动、规律作息、戒烟限酒。
总之,谷氨酰氨基转移酶标准范围受到性别、年龄、饮食、疾病因素、药物因素和生活习惯等多种因素的影响。
为了保持健康的肝脏功能,建议在日常生活中注意饮食健康、适量运动、规律作息、戒烟限酒。
同时,如果出现谷氨酰氨基转移酶异常的情况,需要及时就医并进行相应的治疗。
谷氨酰基转移酶测定试剂盒-速率法
谷氨酰基转移酶测定试剂盒-速率法【产品注册号】京药监械(准)字2006第2400359号【适用范围及临床意义】本试剂适用于人血清或肝素/EDTA抗凝血浆中γ-GT的体外定量分析。
γ-GT存在于人体不同组织中,血清中γ-GT主要来源于肝胆系统。
因此肝脏疾病或肝脏受损时,可引起γ- GT升高,临床上常用于阻塞性黄疸、胆管炎和胆囊类疾病的诊断。
某些药物如酒精、镇静药、抗癫痫药等亦可引起γ-GT水平升高。
【测定原理】γ-GTL-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺+ 双甘肽→L-γ-谷氨酰双甘肽+3-羧基-4-硝基苯胺上式反应中的3-羧基-4-硝基苯胺引起405nm处吸光度增加,其增高速率与γ-GT的活性成正比。
【试剂组成】组成溶液的浓度Tris缓冲液 100mmol/L双甘肽 100mmol/Lγ-L-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺 6mmol/L【产品形式】谷氨酰氨基转移酶测定试剂为液体双试剂。
【标本收集】不溶血的血清或肝素/EDTA抗凝抗凝血浆,黄疸及脂血不干扰本法。
血清中的γ-GT室温可稳定一天,2—8℃稳定7天,-20℃稳定2个月。
【操作步骤及性能指标】标本量 10 μL试剂1 (R1) 200 μL试剂2 (R2) 50 μL标本+R1+R2在37℃保温60秒后,测量1分钟内的吸光度变化。
主波长 405 nm副波长 505 nm反应类型速率法(RATE)反应方向升反应(+)参考范围 7—32 U/L线性范围 5.0-450 U/LF值 2737【计算】ΔA/min×Vt×1000GGT(U/L) = ----------------------------- = ΔA/mi×Fe×Vs×dΔA/min----每分钟吸光度变化率 e----9.5 (摩尔吸光系数)Vt-------反应液总体积(ml) Vs----标本体积(ml)1000-----变化因数 d----1 比色杯光径(cm)【注意事项】样本:R1:R2=1:20:5,可根据需要按比例调节。
血清L-γ-谷氨酰基转移酶(GGT)活性测定及意义
血清L-γ-谷氨酰基转移酶(GGT)活性测定及意义GGT在体内分布较广,如肾、肝、胰等脏器均有此酶,但血清中GGT主要来自肝脏,具有较强的特异性。
所以当肝胆系统病变的时候,GGT活性升高,临床上测定此酶活性来协助诊断肝胆疾病。
1.正常参考值:
速率法:健康成年男性:11-50U/L
健康成年女性:7-32 U/L
重氮反应比色法:健康成年男性:3-17 U/L
健康成年女性:2-13 U/L
2.临床意义
人体各器官中GGT含量按下列顺序排列:肾、前列腺、胰、肝、肓肠和脑。
在肾脏、胰腺和肝脏中,此酶含量之比约为100:8:4。
肾脏中GGT含量最高,但肾脏疾病时,血液中该酶活性增高却不明显。
有人认为,肾单位病变时,GGT经尿排出,测定尿中酶活力可能有助于诊断肾脏疾病。
GGT主要用于诊断肝脏疾病。
原发性肝癌、胰腺癌和乏特壶腹癌时,血清GGT活力显著升高,特别中诊断恶性肿瘤患者有无肝转移和肝癌术后有无复发进,阳性率可高达90%。
嗜酒或长期接受某些药物如苯巴比妥、苯妥因钠、安替比林者,血清GGT活力常常升高。
口服避孕药会使GGT值增高约20%。
但是,GGT作为肝癌标志物的特异性较差,急性肝炎、慢性肝炎活动期、阻塞性黄疸、胆道感染、胆石症、急性胰腺炎等时此酶活性均可以升高。
血清谷氨酰基转移酶(GGT)—生化检测项目
血清谷氨酰基转移酶(GGT)
一、检测原理
血清中GGT在双甘氨肽的存在下,促使底物L-r-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺的L-r-谷氨酰基转移至双甘氨肽,通过测定硝基苯甲酸(黄色)的生成速率,而求得GGT的活性。
二、参考区间
血清:男性10—60U/L 女性7—45U/L
三、临床意义
1、血清谷氨酰转移酶(GGT, r-GT)是肝和胆道等多种细胞所排泌的一种代谢酶。
长期以来在临床上用作肝功能或肝、胆疾病的重要提示指标。
此酶在血清中的升高与胆道疾病(胆道周围癌、胆囊炎和胆道感染、胆结石等)或肝脏疾病(肝癌、肝炎、肝硬化等)有关。
2、血清谷氨酰转移酶的升高还与饮酒有密切关系,且日常饮酒量越大,血清谷氨酰转移酶在血中的升高越明显。
3、GGT的升高也与肾脏损伤有关,它是慢性肾疾患引起死
亡的预示指标,也是可能发生肾疾患的预示指标。
4、GGT的升高还与肥胖、2型糖尿病以及代谢综合征有联系。
尤其是同时有肥胖和GGT升高者,易于发生糖尿病和代谢综合征。
5、GGT广泛分布于肾、胰、前列腺、肝等人体组织中。
血清γ-谷氨酰基转移酶测定(.
每次测定时都需用试剂空白溶液调零,不可用
蒸馏水代替 试剂空白溶液如果是红色应更换基质液。
熟悉血清γ-谷氨酰基转移酶测定(重氮比色法)
原理,操作方法及标准曲线的绘制。 掌握其临床意义
γ-谷氨酰基转移酶(γ-glutamyl
transferase, GGT,EC2.3.2.2)催化γ-谷氨酰基移换反应。 本法以L-γ-谷氨酰-α-萘胺为底物,在GGT的催 化下,γ-谷氨酰基转移到双甘肽分子上,释放 出游离α-萘胺,后者与重氮试剂反应产生红色 化合物,其红色深浅与α-萘胺的量成正比。根 据α-萘胺产生的量计算出血清GGT活性单位。
试剂空白管
标准管
样品管
基质液ml 标准液ul
样品ul
1
1 40
1
40
充分混合,37度水浴15分钟 显色终止液ml 2 2 2 充分混合,37度水浴5分钟,上机测定,测定波长510nm
A测 C样 C标 A标
C标=0.06mmol/L 参考范围:8-50U/L Fra bibliotek
人体各器官GGT含量不同,肾最高,其次是前列腺、胰、 肝等器官。肾中GGT含量虽高,但肾脏疾病时,血液中 酶活性增高不明显,可能是肾单位病变时,GGT经尿排 出,所以测定尿中GGT活性可能有助于诊断肾疾病。 血清GGT测定主要用于诊断肝胆疾病: 1.原发性或转移性肝癌 血清中GGT可高于正常的几倍 至几十倍,且GGT活性与肿瘤大小及病情严重程度呈平 行关系,对GGT动态观察,有助于判断疗效及预后。 2.阻塞性黄疸 肝内或肝外性胆道阻塞,GGT明显升高。 一般讲,阻塞发生愈快,GGT上升愈迅速,阻塞愈重, 上升也愈显著。 3.病毒性肝炎和肝硬化 肝炎时血清GGT升高,上升幅 度低于ALT,肝炎恢复期,GGT是惟一仍然升高的酶; 如长期升高可能有肝坏死的倾向。 4.乙醇性肝炎 乙醇性肝硬化、肝炎者血清GGT几乎都 上升,为乙醇性肝病的特征。
血清谷氨酰转移酶GGT速率法测定
血清γ-谷氨酰转移酶(γ-GGT)速率法测定1. 实验原理GGT催化谷氨酰基转移给受体的反应。
本法以γ-谷氨酰-3-羧基-对硝基苯胺为底物,将底物上的谷氨酰基转移至受体双甘肽,生成对硝基苯胺和γ-谷氨酰双甘肽。
在405nm进行吸光度检测,吸光度升高的速率与标本中GGT活力成正比。
γ-谷氨酰-3-羧基-对硝基苯胺+ 双甘肽GGT对硝基苯胺 + γ-谷氨酰双甘肽2. 标本:2.1 病人准备:无特殊。
2.2 类型:血清或EDTA血浆。
3. 标本存放:室温可保存8小时;2~8℃可保存3天;-20℃保存至少可稳定1周。
4. 标本运输:常温条件下保存运输。
5. 标本拒收标准:细菌污染的标本。
6. 实验材料6.1 试剂利德曼γ-GGT测定试剂盒(试剂1 6×64ml试剂2 6×16ml)6.1.1 试剂组成试剂1(R1):Tris缓冲液pH8.25 100mmol/L甘氨酰甘氨酸150mmol/L试剂2(R2):γ-谷氨酰-3-羧基-对硝基苯胺 2.9mmol/L6.1.2 试剂准备:试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存:试剂保存于2~8℃,若无污染,可稳定至失效期。
6.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使用。
6.1.5 注意事项:试剂中含叠氮钠(0.95g/L)为防腐剂。
不可入口!避免接触皮肤及粘膜。
应采取必要的预防措施使用试剂。
6.2 校准品:使用DiaSys公司提供的TruCal U校准品对自动分析仪进行校准,具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。
6.3 质控品:具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。
7. 仪器:贝克曼AU680生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数:参见AU680生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2仪器操作步骤:参见AU680生化分析仪操作规程.SOP文件9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制:在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。
谷氨酰基转移酶标准值
谷氨酰基转移酶标准值谷氨酰基转移酶(Glutamate Pyruvate Transaminase,简称GPT)是一种重要的酶类,广泛存在于人体的多个组织和器官中,尤其是肝脏、心肌和肌肉组织中含量较高。
谷氨酰基转移酶在人体内起着重要的生理功能,它参与了谷氨酸代谢途径中的一系列重要反应,对维持人体正常的代谢平衡至关重要。
谷氨酰基转移酶的标准值是指在正常健康人群中,其血液中谷氨酰基转移酶的浓度范围。
通常,谷氨酰基转移酶的浓度在血液中是非常低的,正常情况下,男性的标准值为0-45单位/升,女性的标准值为0-34单位/升。
这个标准值的范围是经过大量的临床实验和统计分析得出的,可以用来评估人体内谷氨酰基转移酶的活性水平。
谷氨酰基转移酶的标准值的测定对于临床医学具有重要的意义。
一般来说,当人体内存在一些疾病或损伤时,谷氨酰基转移酶的浓度会升高。
其中最常见的情况就是肝脏疾病,比如肝炎、肝硬化等。
当肝脏细胞受损时,细胞内的谷氨酰基转移酶会释放到血液中,导致血液中谷氨酰基转移酶的浓度升高。
因此,谷氨酰基转移酶的标准值可以用来评估肝脏功能的状态,对于肝脏疾病的诊断和监测具有重要的帮助。
除了肝脏疾病之外,其他疾病或情况也可能导致谷氨酰基转移酶的浓度升高。
例如,心肌梗死、肌肉损伤、胰腺炎等疾病都可以导致谷氨酰基转移酶的升高。
此外,一些药物、酒精和其他化学物质的摄入也可能对谷氨酰基转移酶的浓度产生影响。
因此,在临床医学中,通过检测血液中的谷氨酰基转移酶浓度,可以帮助医生判断疾病的类型和严重程度,指导治疗方案的制定。
需要注意的是,谷氨酰基转移酶的标准值只是一个参考范围,不同实验室所使用的测定方法和标准值可能会有所不同。
因此,在进行谷氨酰基转移酶的测定时,应该参考具体实验室提供的标准值范围,并结合患者的具体情况进行综合判断。
同时,还应该注意到谷氨酰基转移酶的浓度在一天内可能存在波动,因此多次测定可以提高准确性。
谷氨酰基转移酶的标准值是衡量人体内谷氨酰基转移酶活性水平的重要指标。
血清λ谷氨酰转移酶测定标准操作规程
血清γ-谷氨酰转移酶测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请:血清γ-谷氨酰转移酶测定(缩写GGT);组合项目申请:血生化中肝功能测定。
临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2 ml,不抗凝,置普通试管中。
或采用含分离胶的真空采血管。
2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本应记录采集时间、送检时间、接收时间。
2.1.4 标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态,对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足:少于0.3ml的全血标本,或少于0.1ml的血清或血浆。
2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本,包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2 标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。
2.2.2标本保存时间:室温(15~25℃)下可稳定48h,普通冰箱中(2~8℃)稳定7天。
-20℃保存稳定60天。
为避免标本中水分挥发使血清浓缩,对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号,置4~8℃冰箱内保存7天。
2.3 标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动,和12h以上禁食空腹状态。
2.3.2可以使用EDTA、枸橼酸盐、草酸盐抗凝的血液标本,但肝素抗凝剂可引起反应液混浊。
3 方法原理谷氨酰-3羧基-对硝基苯胺+双甘肽……对-硝基苯胺+ 谷氨酰双甘肽,反应中生成的对-硝基胺的颜色深浅与谷氨酰转肽酶的含量成正比,在405nm测定反应前后吸光度的变化,可以计算出谷氨酰转肽酶的活力。
4 试剂及其他用品4.1试剂:γ-谷氨酰转移酶测定试剂盒,北京利德曼公司出品。
4.2试剂盒保存:未启封试剂盒在2~8℃保存,可储存至失效期。
γ-谷氨酰基转移酶测定标准操作规程
γ-谷氨酰基转移酶测定标准操作规程1.检验原理:(L-r-谷氨酰-3-羟基-对硝基苯胺底物法)以L-r-谷氨酰-3-羟基-4-硝基苯胺为底物,双甘氨肽为谷氨酰基的受体。
在谷氨酰基转移酶(GGT)的催化下,谷氨酰转移到双氨肽上。
同时释放出黄色的2-硝基-5-氨基苯甲酸,后者可使405nm-410nm处吸光度增高。
在底物过剩的情况下,5-氨基-2-硝基苯甲酸的生成速率与血清中GGT浓度成正比,因而可监测5-氨基-2-硝基苯甲酸生产速率测定血清GGT活性浓度。
GGT活性测定的反应式如下:L-r-谷氨酰-3-羟基-4-硝基苯胺+双甘氨肽−←GGT L-r-谷氨酰-双甘氨肽−→+2-硝基-5-氨基苯甲酸L-r-谷氨酰-3-羟基-4-硝基苯胺+L-r-谷氨酰-3-羟基-4-硝基苯胺−←GGT−→2-硝基-5-氨基苯甲酸+L-r-谷氨酰-3-羟基-4-硝基苯胺2.试剂主要组成成分3.样本要求:新鲜无溶血血清。
在22~25℃保存8小时,2~8℃保48小时,-20℃保存7天,样本不可反复冻融!样本中抗坏血酸含量≤0.3g/L、胆红素含量≤0.4g/L、血红蛋白含量≤5.0g/L、乳糜含量≤5.0g/L对检测结果基本无影响。
4.检验方法;仪器法(详见DF-603/DI-600标准操作规程)5.参考范围:6.检验结果的解释:6.1样本含量超出线性范围时,建议用0.9%(W/V)的氯化钠溶液稀释样本。
建议最大稀释不超过10倍10-6.2.单位换算:ukat/L=U/L×16.67×37.检验方法的局限性7.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。
7.2若试剂浑浊,或以水空白在405nm处吸光度大于0.800时不能使用。
7.3检验结果仅供参考,不作为临床诊断唯一依据。
8.试剂性能指标8.1试剂外观:R1:无色透明液体,无悬浮物及沉淀。
R2:无色或淡黄色透明液体,无悬浮物及沉淀。
8.2装量:不低于标识值。
γ-谷氨酰转移酶测定试剂盒(GCANA底物法)标准化操作规程GT-SOP
γ-谷氨酰转移酶测定试剂盒(GCANA底物法)标准化操作规程1 目的规范实验室操作,保证检验工作顺利有效进行特制定此规程。
2 授权操作人经培训且考核通过的临床检验人员。
3 适用范围本试剂适用于体外定量检测人血清或血浆中γ谷氨酰转移酶的活力。
4 检验方法本试剂采用IFCC推荐法测定γ谷氨酰转移酶的活力。
5 检验原理试剂中的L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺和甘氨酰甘氨酸在样品中γ-谷氨酰转移酶(GGT)的催化作用下,生成呈色产物5-氨基-2-硝基苯甲酸盐,引起405nm处的光吸收值升高,通过监测405nm处光吸收值上升的速率,可以测定γ-谷氨酰转移酶的活力。
Lγ谷氨酰3羧基4硝基苯胺 + 甘氨酰甘氨酸γGGTLγ谷氨酰甘氨酰甘氨酸+ 5氨基2硝基苯甲酸盐6 标本要求6.1 样本为血清或血浆。
6.2 血浆应选用肝素或EDTA抗凝剂,不得使用溶血或被污染的样本。
6.3 样本在2℃~8℃条件下可保存7天、室温条件下可保存1天。
7 试剂及配套品7.1试剂来源长春迪瑞医疗科技股份有限公司γ-谷氨酰转移酶试剂盒(IFCC推荐法)7.2试剂组成含非反应性填充物及稳定剂7.3试剂的稳定性与贮存:7.3.1 试剂在2℃~8℃条件下,干燥、避光、密封贮存,有效期为12个月。
7.3.2 试剂开封后在2℃~8℃条件下可稳定30天。
7.4试剂的变质指示:若试剂混浊,或以水为空白在405 nm处吸光度值大于0.800A时,则不能使用。
8 实验仪器及性能指标8.1 实验仪器迪瑞CS系列全自动生化分析仪8.2试剂性能指标8.2.1 试剂空白:试剂空白吸光度:A≤0.800。
试剂空白吸光度变化率:△A/min≤0.005。
8.2.2 分析灵敏度:测试50U/Lγ-谷氨酰转移酶时,吸光度变化率(△A/min)>0.01。
γ—谷氨酰基转移酶(GGT)测定试剂(盒)(GCANA底物法)产品技术要求新产业
2.性能指标
2.1外观
试剂应为清澈透明的液体,无沉淀、悬浮物和絮状物。
2.2装量
试剂装量的装量应按表1,液体装量的最大允许负偏差应为5%。
2.3试剂空白
2.3.1试剂空白吸光度
用试剂(盒)测试空白样本,在37 ℃±0.1 ℃ 、405 nm 波长、1 cm 光径条件下,试剂空白吸光度应≤0.400 Abs。
2.3.2试剂空白吸光度变化率
用试剂(盒)测试空白样本,在37℃ 0.1℃,405 nm 波长、1 cm 光径条件下,试剂空白吸光度变化率≤0.005 Abs/min。
2.4分析灵敏度
试剂(盒)测试63 U/L 的被测物时,吸光度变化率(ΔA/min)应在0.030 Abs/min ~0.045 Abs/min 的范围内。
2.5线性区间
试剂(盒)线性在(0.00,600.00] U/L区间内:
a) 线性相关系数r≥0.990;
b) (0.00,50.00] U/L 区间内,线性绝对偏差应在±5.00 U/L 范围内;(50.00,600.00] U/L
区间内,线性相对偏差应在±10%范围内。
2.6精密度
2.6.1重复性
试剂(盒)测试活性在(50±5)U/L 范围内的样本时,变异系数CV≤4.0%。
2.6.2批间差
试剂(盒)测试活性在(50±5)U/L 范围内的样本时,相对极差R≤6.0%。
2.7准确度
测可溯源至有证参考物质的校准品,相对偏差 B 在±10%范围内。
谷氨酰基转移酶注意事项
谷氨酰基转移酶注意事项谷氨酰基转移酶(aspartate aminotransferase,简称AST)是一种在人体中广泛存在的酶,主要存在于肝脏、心肌、肌肉和肾脏等组织中。
AST的测定是临床常用的肝功能检查指标之一,对于一些肝脏疾病的诊断和评估具有重要意义。
在进行AST的检测时,需要注意以下几个方面。
1.采集标本:采集静脉血作为AST检测的标本,在采血前应告知患者要求空腹,并且最后一次进餐时间应距离采血时间至少8小时。
此外,还需注意采血管道要干净,不得受到外界污染,以免对结果产生影响。
2.适用范围:AST的测定不仅仅用于肝脏疾病的诊断,还可用于评估心肌梗死、急性胰腺炎、肾脏疾病等其他器官的损伤情况。
在临床应用中,AST常与丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,简称ALT)一同测定,用于评估肝脏损伤的程度。
3. AST与疾病关联:AST水平升高常提示肝脏损伤,包括急性肝炎、酒精性肝病、肝炎病毒感染等。
此外,AST还可在其他非肝脏疾病中升高,如心肌梗死、心肌炎、肌肉疾病、肾脏损伤等。
所以,在解读AST检测结果时,需结合患者的病史、体征和其他相关指标来综合判断。
4.结果解读:正常情况下,成人AST的参考范围为10-40 U/L。
AST升高可能是因为肝细胞受损引起的,但也可能与其他身体器官的损伤有关。
AST升高的程度并不一定能反映出病情的严重程度,尤其是在肝炎早期,AST升高往往不明显。
因此,结合其他临床指标,如ALT、总胆红素、血清白蛋白等,进行综合判断,有助于明确肝脏疾病的性质和严重程度。
5.影响AST结果的因素:AST水平受到多种因素的影响,如年龄、性别、肌肉质量、运动、酒精摄入等。
高龄患者AST水平略高于年轻人,男性相对高于女性。
因此,在解读AST检测结果时,需考虑患者的个体差异和生活习惯等因素。
6.临床意义:AST作为肝功能检查指标的重要参数之一,可以反映出肝脏和其他器官的损伤情况。
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谷氨酰转移酶测定
1 检验目的
指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果的准确。
2 实验原理
L-γ-谷氨酰-3羧基-4硝基苯胺 + 甘氨酰甘氨酸GGT L-γ-谷氨酰甘氨酰甘氨酸 + 5-氨基-2-硝基苯甲酸盐
在上述反应中, 5氨基2硝基苯甲酸盐的生成速率与样本中γ谷氨酰基转移酶的活力成正比,通过在405 nm处监测吸光度的上升速率,即可测得样本中γ谷氨酰基转移酶的活性。
3 标本:
3.1 病人准备:无特殊。
3.2 类型:血清或EDTA血浆。
3.3 标本存放:室温可保存8小时;2~8℃可保存3天;-20℃保存至少可稳定1周。
3.4 标本运输:常温条件下保存运输。
3.5 标本拒收标准:细菌污染的标本。
4 实验材料
4.1 试剂:上海复星长征医学科学有限公司GGT试剂盒(沪食药监械(准)字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014)4.1.1 试剂组成
试剂1(R1):Tris缓冲
液100mmol/
L
甘氨酰甘氨酸 125mmol/L
试剂2(R2):Tris缓冲
液100mmol/
L
L-γ-谷氨酰
-3羧基-4硝基
苯胺
14.5mmol/L
4.1.2 试剂准备:试剂为即用式。
4.1.3 试剂稳定性与贮存:2~8℃避光、密封的储存条件下,试剂(盒)自生产之日起有效期为12个月。
4.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使用。
4.1.5 注意事项:试剂中含叠氮钠为防腐剂。
不可入口!避免接触皮肤及粘膜。
应采取必要的预防措施使用试剂。
4.2 校准品:使用上海复星长征医学科学有限公司提供的GGT校准品对自动分析仪进行校准。
4.3 质控品:使用正常值、病理值复合控制品。
5 仪器
AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪
6 操作步骤
6.1 样品的准备:将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。
6.2 试剂的检测:仪器开机后,检查各种试剂的位置,体积等确认无误后方可进行测定。
6.3 项目基本参数:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。
6.4仪器操作步骤:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪操作规程。
7 质量控制
在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。
8 计算方法
以GGT复合校准品校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠的检测结果,以U/L报告。
9 参考值范围
女性7-32U/L;男性11-49U/L。
参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。
根据好的实验室经验,每个实验室应建立自己的参考值。
我室参考值:4-60u/l
10 临床意义
γ-谷氨酰转移酶(GGT)又称γ-谷氨酰转肽酶。
存在于肝脏和胆汁中,是肝胆疾病最敏感的指示物。
因为该酶对肝胆疾病具有高阴性预期值,因此γ-谷氨酰转移酶的检测被广泛地用于排除肝胆疾病。
结合丙氨酸氨基转移酶、门冬氨酸氨基转移酶、胆碱酯酶等其它酶,γ-谷氨酰转移酶对于肝脏疾病的鉴别诊断非常有价值。
GGT还用于诊断肝胆疾病。
原发性肝癌,胰腺Ca和气特壶鹏Ca时,血清GGT活力显著升高。
急性肝炎、慢肝活动期,阻塞性黄疸,胆适感染,胆和症,急性胰脉炎时都可以升高。
11 操作性能
11.1试剂空白:
a) 试剂空白吸光度:应不大于0.800。
b)试剂空白吸光度变化率(ΔA/min):应不大于0.001。
11.2分析灵敏度:10.0U/L样本的吸光度变化率(ΔA/min)应不小于0.005。
11.3线性范围:试剂(盒)线性范围应覆盖[5~450]U/L。
a) 线性相关系数(r)应不小于0.990;b) [5~50]U/L 范
围内,线性偏差应不超过±3.0U/L;[51~450] U/L 范围内,线性偏差应不超过±10%。
11.4准确度:相对偏差(B)应不大于±10%。
11.5精密度:(1)重复性:变异系数(CV)应不大于5%;(2)批间差:相对极差(R)应不大于5%。
12 超出范围结果处理
本法对GGT活力检测的最大上限为4500U/L,当样品测定值超过上限时,应将样品用9g/L氯化钠溶液作1:4稀释,重新测定,结果乘以5。
13 病危报警值的处理:
无警告/危急值
14 方法局限性
14.1 测定结果的准确性依赖于对所使用分析仪器校准、测定温度和测定时间的控制。
14.2 大多数样本可能观察不到延迟期。
14.3 有关可能干扰本测定的药物或物质,请参阅参考文献16.3。