结核病的实验室诊断PPT课件
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2024版肺结核完整ppt课件
社区康复服务
利用社区资源，为患者提供康复锻炼、 健康咨询、心理支持等服务，促进患 者康复。
随访监测及效果评价
随访监测
定期对患者进行随访，了解患者病情变化、治疗反应及康复情况，及时调整治疗方案。
效果评价
根据随访结果，对患者治疗效果进行评价，为预防复发提供参考。
预防复发策略部署
加强健康教育
提高患者对肺结核的认 识和自我保健能力，减
足够的耐心和信心。
加强支持治疗
包括营养支持、免疫治疗等， 提高患者的免疫力，有助于杀
灭结核杆菌。
新型抗结核药物研究进展
贝达喹啉
是一种新型的抗结核药物，对多 种耐药结核杆菌具有杀菌活性。
利奈唑胺
另一种新型抗结核药物，常用于 治疗耐多药肺结核。
其他在研新药
包括多种处于临床试验阶段的新 型抗结核药物，如吡嗪酰胺的衍 生物等。这些药物的研究为耐药 肺结核的治疗提供了新的希望。
多层螺旋CT 可进行多平面重建和三维重建，能更准确地显示 病变范围、空洞形态以及与周围结构的关系。
3
CT引导下经皮肺穿刺活检 有助于获取病理学诊断，提高肺结核的确诊率。
影像学检查在诊断中价值
影像学检查是肺结核诊断的重要手段之一，可明确病变部位、范围、形态和性质。
结合临床病史和实验室检查，影像学检查可对肺结核进行准确分期，为制定治疗方 案提供依据。
改善患者营养状况，提高生活质量。
并发症预防和处理措施
并发症预防
加强病情观察，及时发现并处理可能 出现的并发症。
处理措施
如咯血、气胸、呼吸衰竭等，应采取相 应的急救措施，确保患者生命安全。同 时，针对并发症的原因进行积极治疗， 防止其再次发生。
05
耐药肺结核问题探讨
利用社区资源，为患者提供康复锻炼、 健康咨询、心理支持等服务，促进患 者康复。
随访监测及效果评价
随访监测
定期对患者进行随访，了解患者病情变化、治疗反应及康复情况，及时调整治疗方案。
效果评价
根据随访结果，对患者治疗效果进行评价，为预防复发提供参考。
预防复发策略部署
加强健康教育
提高患者对肺结核的认 识和自我保健能力，减
足够的耐心和信心。
加强支持治疗
包括营养支持、免疫治疗等， 提高患者的免疫力，有助于杀
灭结核杆菌。
新型抗结核药物研究进展
贝达喹啉
是一种新型的抗结核药物，对多 种耐药结核杆菌具有杀菌活性。
利奈唑胺
另一种新型抗结核药物，常用于 治疗耐多药肺结核。
其他在研新药
包括多种处于临床试验阶段的新 型抗结核药物，如吡嗪酰胺的衍 生物等。这些药物的研究为耐药 肺结核的治疗提供了新的希望。
多层螺旋CT 可进行多平面重建和三维重建，能更准确地显示 病变范围、空洞形态以及与周围结构的关系。
3
CT引导下经皮肺穿刺活检 有助于获取病理学诊断，提高肺结核的确诊率。
影像学检查在诊断中价值
影像学检查是肺结核诊断的重要手段之一，可明确病变部位、范围、形态和性质。
结合临床病史和实验室检查，影像学检查可对肺结核进行准确分期，为制定治疗方 案提供依据。
改善患者营养状况，提高生活质量。
并发症预防和处理措施
并发症预防
加强病情观察，及时发现并处理可能 出现的并发症。
处理措施
如咯血、气胸、呼吸衰竭等，应采取相 应的急救措施，确保患者生命安全。同 时，针对并发症的原因进行积极治疗， 防止其再次发生。
05
耐药肺结核问题探讨
肺结核诊断及治疗ppt课件
沉、肾功能等。
03
肺结核的治疗
治疗原则
早期治疗
肺结核早期，病灶尚未产生耐药性，此时治 疗可提高治愈率。
适量用药
根据患者体重、病情等因素，适量使用药物， 避免药物副作用。
联合用药
多种药物联合使用，可降低单一药物的耐药 性，提高治疗效果。
全程治疗
确保患者完成整个疗程，避免中途停药导致 耐药性的产生。
肺结核诊断及治疗ppt课件
目录
• 肺结核概述 • 肺结核的诊断 • 肺结核的治疗 • 肺结核的预防与控制 • 肺结核点
定义
肺结核是一种由结核分枝杆菌引 起的慢性传染病，主要通过空气 传播。
特点
具有潜伏期长、传染性强、对肺 组织造成不同程度的损害等特点 。
肺结核的流行病学
处理原则
针对不同并发症采取相应治疗措施， 如胸腔闭式引流、抗结核药物治疗 等。
预防措施
及时发现并治疗肺结核，控制传染 源，提高患者免疫力，预防并发症 的发生。
谢谢观看
加重。
体重下降
由于结核病的影响，患 者可能出现体重下降。
辅助检查
01
02
03
04
血常规检查
血常规检查可以发现白细胞计 数是否正常，以及红细胞沉降
率是否增快。
肝功能检查
肝功能检查可以了解患者的肝 脏功能状况。
结核菌素试验
通过结核菌素试验，可以辅助 判断是否感染了结核分枝杆菌
。
其他实验室检查
根据病情需要，可能需要进行 其他相关的实验室检查，如血
健康教育
开展肺结核防治知识的宣传和教育，提高公 众对肺结核的认知和预防意识。
公共卫生管理
制定防控政策
政府应制定有效的防控政策，加强公共 卫生管理，减少肺结核的传播。
03
肺结核的治疗
治疗原则
早期治疗
肺结核早期，病灶尚未产生耐药性，此时治 疗可提高治愈率。
适量用药
根据患者体重、病情等因素，适量使用药物， 避免药物副作用。
联合用药
多种药物联合使用，可降低单一药物的耐药 性，提高治疗效果。
全程治疗
确保患者完成整个疗程，避免中途停药导致 耐药性的产生。
肺结核诊断及治疗ppt课件
目录
• 肺结核概述 • 肺结核的诊断 • 肺结核的治疗 • 肺结核的预防与控制 • 肺结核点
定义
肺结核是一种由结核分枝杆菌引 起的慢性传染病，主要通过空气 传播。
特点
具有潜伏期长、传染性强、对肺 组织造成不同程度的损害等特点 。
肺结核的流行病学
处理原则
针对不同并发症采取相应治疗措施， 如胸腔闭式引流、抗结核药物治疗 等。
预防措施
及时发现并治疗肺结核，控制传染 源，提高患者免疫力，预防并发症 的发生。
谢谢观看
加重。
体重下降
由于结核病的影响，患 者可能出现体重下降。
辅助检查
01
02
03
04
血常规检查
血常规检查可以发现白细胞计 数是否正常，以及红细胞沉降
率是否增快。
肝功能检查
肝功能检查可以了解患者的肝 脏功能状况。
结核菌素试验
通过结核菌素试验，可以辅助 判断是否感染了结核分枝杆菌
。
其他实验室检查
根据病情需要，可能需要进行 其他相关的实验室检查，如血
健康教育
开展肺结核防治知识的宣传和教育，提高公 众对肺结核的认知和预防意识。
公共卫生管理
制定防控政策
政府应制定有效的防控政策，加强公共 卫生管理，减少肺结核的传播。
结核病实验室诊断技术
GenoType MTBDR and 诊断结核感染及对利福 MTBDRplus；INNO- 平和异烟肼药物敏感性 LiPA Rif.TB
Frane; LW Scientific; Zeiss
诊断结核患者
Cepheid GeneXpert
诊断结核感染及对利福 平的耐药性
WHO推荐的结核新诊断技术
方法 DNA微阵列芯片法
有前景的几种新技术
❖ 分子诊断技术:GeneXpert（Cepheid公司） ❖ 分子线性探针技术:INNO-LIPA（Innogenetics公司） ❖ 反向点杂交技术:GenoType MTBDR （Hain Lifescience）
分枝杆菌菌种鉴定试剂盒（亚能生物） ❖ 基因芯片技术：微阵列芯片法（博奥生物） ❖ 细胞免疫学技术：T-SPOT.TB（Oxford Immunotec公司）
目前诊断方法回顾
细菌学检测方法 ： 涂片、常规培养、快培 其他辅助检查方法：皮试、结核抗体
目前诊断方法的局限性
涂片的缺点： 敏感性低； 特异性差； 无法区别死菌与活菌
培养的缺点： 耗时久，一般需4~8周； 阳性率低，约30%~50%；特异性差， 无法区别MTB与NTM
皮试的缺点： 敏感性低特异性差 抗体检测缺点：敏感性低特异性差
新型诊断技术产品比较
企业 美国 Cepheid
比利时 Innogenetics 德国 Hain Lifescience 中国 亚能生物
中国 博奥生物
英国 Oxford Immunotec
方法
产品特点
GeneXpert
同时检测MTBC和判断利福平耐药； 快速；简便；安全
线性探针杂交法 （INNO-LIPA）
➢ 新的实验诊断技术可弥补传统方法的不足，提高诊 断的灵敏度和特异性，但各有缺点或不足，难以完 全满足临床检测需求，因此，新型结核杆菌诊断技 术及产品的研发势在必行。
结核病实验室诊断技术2017.10.13
• 绝对浓度法 • 比例法
• 液体培养法
基于固体培养基；时间：4周 多种药物
基于液体培养基，时间：4-12天 INH/RFP/SM/EMB/PZA
结核分枝杆菌药物敏感试验
不同药敏方法的差异
三者在临界药物浓度接种菌量、结果判读方法等方面都有一定差 别，导致结果有很少一部分不相符
比例法和绝对浓度法检测结果的一致率4 药均高达96 %以上,对于 结核分支杆菌,二种方法测试 SM INH RFP EMB的耐药率均无显著 性差异
涂片显微镜检查的敏感性
观察到的AFB
AFB估计数量 涂片阳性的可能性(%)
数量
( /ml)
• 0 in ≥100 fields
< 1,000
<10
• 1-2 in 300 fields 5,000 – 10,000
50
• 1-9 in 100 fields about 30,000
80
• 1-9 in 10 fields
结核分枝杆菌药敏试验-菌型鉴定
利用固体罗氏鉴别培养基的鉴别：
中性罗氏 培养基
+
噻吩-2-羧酸 肼TCH
+
对硝基苯 甲酸PNB
+
菌型鉴定 NTM
+
+
-
人型Mtb
+
-
-
牛型Mtb
结核分枝杆菌药敏试验-菌型鉴定
• 原理：硝基苯甲酸还原酶机制
绝大部分非结核分枝杆菌能将对硝基-苯甲酸（PNB ）还原为细菌能够利用的对氨基-苯甲酸（PABA），而 绝大部分（98%以上）MTBC缺乏对硝基-苯甲酸（PNB ）还原酶活性，为对氨基-苯甲酸（PABA）将对硝基苯甲酸（PNB）还原为细菌能够利用的对氨基-苯甲酸 （PABA） • 局限：鉴定周期长15天-30天，特异性不高
肺结核诊断思路PPT课件
干性胸膜炎
结核性 胸膜炎
渗出性胸膜炎 结核性脓胸
第2页/共20页
继发性肺结核胸部X线特征
➢ 各型肺结核均有不同的CT表现，但病理基础都 是相同的，即渗出、增生、干酪和空洞四个时期， 以其中一种为主要表现。
➢这四个不同时期可在一次胸部CT检查时全部或部 分显现，并结合短期动态观察，由此形成了肺结 核“三多、三少、一慢”的特征。
第14页/共20页
实验室诊断进展
皮肤试验 PPD与BCG存在明显的交叉反应，PPD特异性差， 目前国内外学者通过临床试验，筛选 BCG不表达 的而致病性结核菌表达、诱导皮肤迟发型变 态反应的特异性抗原 结核皮肤诊断试剂
血清特异性抗原、抗体的检测 联合特异性强的多种抗原、抗体检测
第15页/共20页
实验室诊断进展
纤维支气管镜 Fibrobronchoscope
胸CT（＋） Thoracic CT
positive
PCR(+) PCR positive
抗结核预防治疗 Anti-tuberculosis prophylactic treatment
确诊 治疗 Final diagnosis and
treatment
positive
胸片（-） Chest X-ray
negative
痰菌（+） Sputum smear
positive
痰菌（－） Sputum smear
negative
PCR检测 PCR detection
胸CT（-） Thoracic CT
negative
胸CT（＋） Thoracic CT
positive
咳嗽、咳痰2周 Productive cough
结核病实验室课件
谢谢
行检测
4
结果分析：根 据检测结果判 断患者是否患
有结核病
血液检测
结核菌素试验 （TST）：检测结
核菌感染
结核菌培养：检测 结核菌的存在
抗结核药物敏感性 试验：检测抗结核
药物的敏感性
结核病分子生物学 检测：检测结核菌 的基因型和耐药性
影像学检测
01
胸部X线检查： 发现肺部病变， 判断病变性质
02
胸部CT检查： 显示肺部病变 细节，判断病 变范围
保持通风：保持 实验室通风良好， 降低空气传播风 险
定期消毒：定期 对实验室进行消 毒，确保环境安 全
疫苗研发
01
疫苗类型：结核病疫苗主要有卡介苗、BCG、MVA等
02
研发进展：目前卡介苗是唯一广泛使用的结核病疫苗，其他疫苗尚在研发中
03
疫苗效果：卡介苗对预防结核病有一定效果，但保护率有限
04
研发挑战：结核病疫苗研发面临诸多挑战，如疫苗保护率低、免疫原性差等
结核病
结核病的症状
咳嗽、咳痰、胸 痛、呼吸困难等
呼吸道症状
发热、盗汗、乏 力、体重下降等
全身症状
淋巴结肿大、皮 疹、关节痛等局
部症状
结核病潜伏期较 长，症状不明显，
容易被忽视
结核病实验室检 测
痰液检测
1
痰液采集：使 用无菌容器收
集患者痰液
2
痰液处理：将 痰液进行离心、
沉淀等处理
3
痰液检测：使 用显微镜、培 养基等方法进
结核病实验室课件
演讲人
目录
01. 结 核 病 基 础 知 识
02. 结 核 病 实 验 室 检 测
03. 结 核 病 实 验 室 诊 断
结核病实验室检查的临床意义通用课件
指检查结果显示阳性，但实际并未患病，可能是由于检测方法的灵敏度过高， 导致出现误判。
假阴性
指检查结果显示阴性，但实际患有疾病，可能是由于检测方法的特异性不足， 导致未能准确检测出病原体。
不同检查方法的优缺点比较
痰结核菌检查
直接检测结核菌，但阳性率较低 ，且无法区分活动性结核和陈旧
性结核。
结核抗体检测
结核分枝杆菌主要通过空气传播，当 患者咳嗽、打喷嚏或说话时，含有结 核分枝杆菌的飞沫可以被他人吸入。
结核病的临床表现
肺结核症状
肺结核是最常见的结核病类型，其症 状包括咳嗽、咳痰、胸痛、呼吸困难 等。
其他器官结核症状
除了肺部，结核分枝杆菌还可以感染 其他器官，如淋巴结、脑膜、腹膜等 ，引起相应的症状。
结核病的特点
结核病通常具有长期、慢性的病 程，症状可能不明显，但随着病 情的发展，可能出现咳嗽、咳痰 、发热、体重减轻等症状。
结核病的流行病学
传染源
结核病的主要传染源是开放性肺结核 患者，即痰中带有结核分枝杆菌的患 者。
传播途径
易感人群
任何人都可能感染结核分枝杆菌，但 某些人群的感染风险更高，如儿童、 老年人、身体虚弱或免疫系统受损的 人。
结核菌素试验
结核菌素试验是通过皮内注射结 核菌素，观察机体是否产生免疫 反应来判断是否感染结核菌的方
法。
结核菌素试验主要用于辅助诊断 结核病，尤其适用于儿童和青少
年。
结核菌素试验的结果受到多种因 素的影响，如注射剂量、观察时 间等，需要专业医生进行解读。
结核抗体检测
结核抗体检测是通过检测血液 中是否存在结核抗体来判断是 否感染结核菌的方法。
05
结核病实验室检查的未来 展望
假阴性
指检查结果显示阴性，但实际患有疾病，可能是由于检测方法的特异性不足， 导致未能准确检测出病原体。
不同检查方法的优缺点比较
痰结核菌检查
直接检测结核菌，但阳性率较低 ，且无法区分活动性结核和陈旧
性结核。
结核抗体检测
结核分枝杆菌主要通过空气传播，当 患者咳嗽、打喷嚏或说话时，含有结 核分枝杆菌的飞沫可以被他人吸入。
结核病的临床表现
肺结核症状
肺结核是最常见的结核病类型，其症 状包括咳嗽、咳痰、胸痛、呼吸困难 等。
其他器官结核症状
除了肺部，结核分枝杆菌还可以感染 其他器官，如淋巴结、脑膜、腹膜等 ，引起相应的症状。
结核病的特点
结核病通常具有长期、慢性的病 程，症状可能不明显，但随着病 情的发展，可能出现咳嗽、咳痰 、发热、体重减轻等症状。
结核病的流行病学
传染源
结核病的主要传染源是开放性肺结核 患者，即痰中带有结核分枝杆菌的患 者。
传播途径
易感人群
任何人都可能感染结核分枝杆菌，但 某些人群的感染风险更高，如儿童、 老年人、身体虚弱或免疫系统受损的 人。
结核菌素试验
结核菌素试验是通过皮内注射结 核菌素，观察机体是否产生免疫 反应来判断是否感染结核菌的方
法。
结核菌素试验主要用于辅助诊断 结核病，尤其适用于儿童和青少
年。
结核菌素试验的结果受到多种因 素的影响，如注射剂量、观察时 间等，需要专业医生进行解读。
结核抗体检测
结核抗体检测是通过检测血液 中是否存在结核抗体来判断是 否感染结核菌的方法。
05
结核病实验室检查的未来 展望
实验室检查-第二章 结核病实验室检查 PPT课件
旧版 痰检对象和要求：
疑似肺结核病人、结核病可疑症状者； 进行疗效考核的病人
痰直接涂片检查法：
涂片、染色、镜检与方法
新版 增加痰标本留痰场所的描述 增加镜检结果报告最低视野数量的要求
8
内容
实验室检查要求-培养和药敏
旧版
无
新版
增加培养和药敏的对象
培养对象
用于确定诊断
第二章 结核病实验室检查
实验室部分总体介绍
标 题
包含
单一------全面
内
范围
容
检查 方法
2
标题
旧指南
“痰涂片检查与质量 控制”
新指南
“结核病实验室检查”
3
包含范围
旧指南 涂片相关内容：
新指南
生物安全 实验室检查要求：
涂片 培养 药敏
4
旧指南
涂片
检查方法
新指南
涂片 培养 药敏试验
5
内容
实验室生物安全
旧版 无
新版 生物安全级别要求：
法律法规：
《病原微生物实验室生物安全管理条例》 《实验室生物安全通用要求》 《人间传染的病原微生物名录》 《医疗机构临床实验室管理办法》
结核菌操作的生物安全级别要求：
大量活菌操做：生物安全三级（BSL-3） 样本检测：生物安全二级（BSL-2）
12
内容
实验室登记报告
旧指南
本章节无明确表述
新指南
登记报告： 涂片 培养 药敏
13
内容——新指南
年
痰涂片检查登记本
第页
实验 序号
日期 姓名 性别 年龄
疑似肺结核病人、结核病可疑症状者； 进行疗效考核的病人
痰直接涂片检查法：
涂片、染色、镜检与方法
新版 增加痰标本留痰场所的描述 增加镜检结果报告最低视野数量的要求
8
内容
实验室检查要求-培养和药敏
旧版
无
新版
增加培养和药敏的对象
培养对象
用于确定诊断
第二章 结核病实验室检查
实验室部分总体介绍
标 题
包含
单一------全面
内
范围
容
检查 方法
2
标题
旧指南
“痰涂片检查与质量 控制”
新指南
“结核病实验室检查”
3
包含范围
旧指南 涂片相关内容：
新指南
生物安全 实验室检查要求：
涂片 培养 药敏
4
旧指南
涂片
检查方法
新指南
涂片 培养 药敏试验
5
内容
实验室生物安全
旧版 无
新版 生物安全级别要求：
法律法规：
《病原微生物实验室生物安全管理条例》 《实验室生物安全通用要求》 《人间传染的病原微生物名录》 《医疗机构临床实验室管理办法》
结核菌操作的生物安全级别要求：
大量活菌操做：生物安全三级（BSL-3） 样本检测：生物安全二级（BSL-2）
12
内容
实验室登记报告
旧指南
本章节无明确表述
新指南
登记报告： 涂片 培养 药敏
13
内容——新指南
年
痰涂片检查登记本
第页
实验 序号
日期 姓名 性别 年龄
肺结核完整ppt课件
koch现象机体对结核杆菌再感染和初感染表现出不同反应的现象tb菌1014d23d初感染再感染局部红肿溃烂豚鼠死亡初次感染对tb菌无免疫力浅表溃烂愈合无播散具有免疫力tb菌豚鼠局部红肿结核菌大量繁殖局部淋巴结淋巴血液循环全身播散受过tb菌感染成年人病灶反应强烈干酪坏死空洞tb菌一般不沿淋巴血行播散具有免疫力变态反应是指原发性结核感染时期遗留下来的潜在病灶中的结核分枝杆菌重新活动而发生的结核病此为内源性复燃学说
(细胞免疫占优势,结核感染被控制)
精品课件
19
变态反应
机体对结核菌或其代谢产物(结核蛋白)发生Ⅳ 型（迟发型）变态反应。
结核菌再次侵入具有变态反应的人可引起： 强烈病灶反应――渗出、干酪坏死 全身反应――Tb中毒症状 其他表现――多发关节炎、皮肤结节红斑、
疱疹角膜炎
精品课件
20
变态反应
Koch现象（机体对结核杆菌再感染和初感 染表现出不同反应的现象） Tb菌 初感染 豚鼠 10~14D 局部红肿、溃烂 结核菌大量繁殖 局部淋巴结 淋巴 全身播散
精品课件
4
流行病学
全球疫情: 全球有1/3的人(约20亿)曾受到结核菌感染. 结核病的流行状况与经济水平大致相关. 结核病的高流行与国民生产总值(GDP)的低水平相 对应. WHO把22个国家列为结核病高负担、高危险国家 我国就是其中之一.
精品课件
5
流行病学
我国疫情:
根据第4次全国结核病流行病学抽样调查 我国结核病的疫情特点为: 高感染率 高肺TB患病率 高耐药率 高死亡率 递降率低 中青年患病多（15-59岁年龄段 涂阳肺结核占全部涂阳患者的61.6%) 地区患病差异大 实施DOTS项目的地区患 病率低
机体免疫功能下降时,重新繁殖,发生TB病.
(细胞免疫占优势,结核感染被控制)
精品课件
19
变态反应
机体对结核菌或其代谢产物(结核蛋白)发生Ⅳ 型（迟发型）变态反应。
结核菌再次侵入具有变态反应的人可引起： 强烈病灶反应――渗出、干酪坏死 全身反应――Tb中毒症状 其他表现――多发关节炎、皮肤结节红斑、
疱疹角膜炎
精品课件
20
变态反应
Koch现象（机体对结核杆菌再感染和初感 染表现出不同反应的现象） Tb菌 初感染 豚鼠 10~14D 局部红肿、溃烂 结核菌大量繁殖 局部淋巴结 淋巴 全身播散
精品课件
4
流行病学
全球疫情: 全球有1/3的人(约20亿)曾受到结核菌感染. 结核病的流行状况与经济水平大致相关. 结核病的高流行与国民生产总值(GDP)的低水平相 对应. WHO把22个国家列为结核病高负担、高危险国家 我国就是其中之一.
精品课件
5
流行病学
我国疫情:
根据第4次全国结核病流行病学抽样调查 我国结核病的疫情特点为: 高感染率 高肺TB患病率 高耐药率 高死亡率 递降率低 中青年患病多（15-59岁年龄段 涂阳肺结核占全部涂阳患者的61.6%) 地区患病差异大 实施DOTS项目的地区患 病率低
机体免疫功能下降时,重新繁殖,发生TB病.
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1990s 2000s 2010s 2020s
NAAT ELISPOT, QuantiFERON, LPA, GeneXpert ???
11
3.结核病的实验室诊断
细菌学
血清/免疫学
分子生物学
涂片： 敏感性低
传统固体培养： 所需时间长， 2~3月
液体培养及药 敏试验：平均 时间20天
血清学： 存在抗原 纯度和特 异性差等 方面的问 题
5
当前结核研究的热点
• 新型抗结核药物(50%) • 新型快速诊断技术(40%) • 新型结核疫苗(10%)
6
近期结核病诊断方法的相关研究
JID 2012:205 (Suppl 2), S147.
7
7/45
2.结核病的病原学
✓ 结核分枝杆菌(M.tuberculosis)是引 起人类结核病的主要病原体。
率较高，此技术已趋向淘汰
瓶外检测技术
瓶内检测技术 易导致污染及生物安全问题
15－21天
不详
无药敏试剂提供
只有3种一线药物 21
BACTEC™ MGIT™ 960/320
指示器系统
阴性培养
阳性O2
CO2 O2 CO2
O2 O2
FFFOOF22OFF2FOO22FFFOO22
初染
石炭酸金胺O
脱色
盐酸酒精
复染
高锰酸钾
显微镜检查
登记/报告
15
萋尼氏染色镜下形态
16
荧光染色镜下形态
17
LED Fluorescence microscopy
LED荧光显微镜
18
LED 荧光显微镜
• 成本低廉的超亮发光二极管 • 可承受的价格，价格接近于现有的光学显微镜 • 寿命长（~ 15-20,000小时） • 省电 • 可用电池供能 • 可靠性更强 • 不需要空调设施 • 不需要暗室 • 诊断性能优于标准荧光显微镜 • 操作人员工作负荷减轻
9
生长特点：
生长缓慢，繁殖一代在人工培养基内 约需要15～20小时，在静脉感染未经 免疫小鼠肺中约需要15小时，在巨噬 细胞内约需要15～20小时，在家兔角 膜中约需要20～22小时。
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实验室检查方法的历史
1880s
1900s 1920s
1930s 1940s 1950s
Tubercle bacilli的发现 Ziehl-Neelsen染色方法 Mantoux test (TST with tuberculin) Petragnani medium Purified Protein Derivative（PPD） Lewenstein-Jensen 培养基 Dubos agar, Ogawa 培养基 Middlebrook 7H9
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2011 WHO tuberculosis control report
我国是全球27个耐药结核病高负担国家之一 2013年世界卫生组织宣布全球耐多药结核病紧急状态
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全球的结核病患者,在接受治疗 之前已经传染给了别人！！！
早期快速诊断与治疗成为制 约结核病控制的关键：有细
菌学诊断依据的病人不超过50%
专业分枝杆菌检测系统 业内金标准 960个检测位 每年可至少检测8000个样本 25~30个
荧光增强法：采用敏感性较 强的荧光信号探测氧气的变 化情况，只需单一反应，所 以速度快，准确性高
瓶外检测技术
8－11天
5种一线抗TB药物，全部具 有FDA及SFDA认证
普通细菌血培养系统 需加装分枝杆菌培养特殊组件
IGRA： 有望替代 TST，但 不能区分 活动性TB 与潜伏感 染
TB-DNA TB-mRNA
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①.细菌学诊断
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我国目前最常用的结核病实验室诊断技术
萋尼氏染色
荧光染色
罗氏培养/ 药敏试验
快培/药 敏试验
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光学显微镜检查
碱性复红 盐酸酒精
亚甲兰
显微镜检查 荧光显微镜检查 涂片 ► 干燥 ► 固定
240个瓶位 每年可检测2000个样本
普通细菌血培养系统 需加装分枝杆菌培养特殊组件
528个瓶位
6~7个
9个
PH值比色法：当培养瓶内
有微生物生长，其释放出的 CO2，经水饱和后，产生H+， 使PH值产生变化，感应器的
颜色也随之变化。需双重反
应，因此速度较慢，假阳性
压力检测：检测细菌生长中各 种气体产生和消耗而引起的瓶 内压力的变化。灵敏度差。此 技术已趋向淘汰
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普通荧光显微镜和发光二极管荧光显微镜性能比较 （不同实验室的结果进行汇总与平均）
显微镜
普通荧光显微 镜
方法
灵敏度 (%)
直接涂片 67.4
普通荧光显微 浓集涂片 66.6 镜
发光二极管 荧 直接涂片 71.6
光显微镜
(p=0.1025)
发光二极管 荧 浓集涂片 72.4
光显微镜
(p=0.0073)
结核病的实验室诊断
1
主要内容
1 结核病的流行情况 32 结核病的病原学 3 结核病的实验室诊断 34 结核病的分子药敏
2
1.结核病的流行概况
✓ 全球范围内结核病疫情急剧恶化 • 人口大规模流动 • 结核菌耐药现象益发严重 • 结核病合并艾滋病感染 ✓ 我国是世界上仅低于印度的第二结核病大国 • 结核菌感染率44.5% • 新发活动性结核患者130万/年 • 死亡13万/年
特异度 (%) 96.1 99.2 96.4 98.8
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生产厂家
培养/药敏试验
Bactec®MGIT 960/320
美国BD公司
Bact/Alert 3D
法国生物 梅里埃公司
VERSA TREK
美国Trek 诊断公司
仪器定位 单机容量 日均标本处理量
检测原理
检测技术 平均阳性报告时 间 药敏试剂
✓ 1882年由德国医生Koch发现。
✓ 结核分枝杆菌属于厚壁门、裂殖菌 纲、放线菌目、分枝杆菌科、分枝 杆菌属。
✓ 分枝杆菌复合群共包括人型、牛型、
非洲型和田鼠型，而人型结核分枝
杆菌是人类主要的致病菌。
8
2020/9/20
GDTB
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结核分枝杆菌(M.tuberculosis)
生物学主要特点： 1. 细胞壁中含有大量 脂质 2.引起的疾病都呈慢性， 并伴肉芽肿 3.抗酸染色阳性
上部空间
已预先充填10% CO2
肉汤
改良Middlebrook 7H9肉汤
传感器
对氧气高度敏感的钌复合物
O2 O2
O2
O2
O2 CO2
FFO2F
F F
F
F F FO2 F
无或微弱荧光
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强荧光
MGIT /3D制造的液体培养基
优点
• 比固体培养快 (平均 10-12 天 vs. 20-24 天) • 比固体培养基更敏感 • 可以自动判读，或使用标准指示管和操作手册进行判读 • 也加快了药敏试验的速度