Report-头孢地尼CP2015分析

Sep 21, 2016

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头孢地尼CP2015的分析

依《中国药典》15版二部方法对头孢地尼原料药进行分析，客户反映主峰前后杂质与主峰分离度较难达到药典标准，需求合适C18柱进行分析以达到药典分离要求；尝试使用资生堂MGII，SUPERIOREX ODS,AQ,BB 等C18色谱柱对客户所提供样品进行分析，发现高极性的C18AQ柱分析结果为最佳，结果如图1。

图1 AQ药典方法对系统适用性溶液分析

HPLC Conditions ：

色谱柱：CAPCELL PAK C18 AQ ;4.6mm i.d.×250mm

流动相：A：0.25%四甲基氢氧化铵（磷酸调pH至5.5），每1000ml加入0.1mol/L乙二胺四醋酸二钠0.4ml B：0.25%四甲基氢氧化铵（磷酸调pH至5.5）：乙腈：甲醇: =500:300:200，每1000ml加入0.1mol/L 乙二胺四醋酸二钠0.4ml

B%5%(0min)→B%5%(2min) →B%25%(25min) →B%50%(42min) →B%5%(43min)

→B%5%(60min)

流速：1mL / min

温度：40°C

检测：PDA 254nm

进样量：20µL

HPLC Conditions ：

Column ：CAPCELL PAK C18 AQ;4.6mm i.d.×250mm

Mobile phase ：A：0.25%TMAH(adjust pH to 5.5 with phosphoric acid), add 0.4ml of 0.1mol/L EDTA-2Na in every 1000 ml of solution

B：0.25% TMAH(adjust pH to 5.5 with phosphoric acid)：CH3CN：CH3OH: =500:300:200，add

0.4ml of 0.1mol/L EDTA-2Na in every 1000 ml of solution

B 5%(0min)→5%(2min) →25%(25min) →50%(42min) →5%(43min)→5%(60min)Gra

Flow rate ：1mL / min

Temp ：40°C

Detection ：PDA 254nm

Inj.vol. ：20µL

结果中看出头孢地尼主峰保留时间为20.73min，同药典头孢地尼系统适用性溶液的典型色谱图基本相符（如附图I）；药典要求头孢地尼峰与杂质J峰分离度不小于1.2，杂质I峰与杂质J峰，头孢地尼峰与杂质K 峰及杂质K峰与杂质L峰之间分离度应符合要求，此时头孢地尼峰与杂质J峰分离度为1.21，杂质I峰与杂质J

峰分离度为2.19，头孢地尼峰与杂质K峰分离度为2.77，杂质K峰与杂质L峰分离度为1.70，均符合药典规定。为达到药典要求使保留时间约为22min，降低流速，再一次分析，分析结果如图2。

附图Ⅰ头孢地尼系统适用性溶液典型色谱图

图2 AQ药典方法对系统适用性溶液分析

HPLC Conditions ：

色谱柱：CAPCELL PAK C18 AQ ;4.6mm i.d.×250mm

流动相：A：0.25%四甲基氢氧化铵（磷酸调pH至5.5），每1000ml加入0.1mol/L乙二胺四醋酸二钠0.4ml B：0.25%四甲基氢氧化铵（磷酸调pH至5.5）：乙腈：甲醇: =500:300:200，每1000ml加入0.1mol/L 乙二胺四醋酸二钠0.4ml

B%5%(0min)→B%5%(2min) →B%25%(25min) →B%50%(42min) →B%5%(43min)

→B%5%(60min)

流速：0.85mL / min

温度：40°C

检测：PDA 254nm

进样量：20µL

HPLC Conditions ：

Column ：CAPCELL PAK C18 AQ;4.6mm i.d.×250mm

Mobile phase ：A：0.25%TMAH(adjust pH to 5.5 with phosphoric acid), add 0.4ml of 0.1mol/L EDTA-2Na in every

1000 ml of solution

B：0.25% TMAH(adjust pH to 5.5 with phosphoric acid)：CH3CN：CH3OH: =500:300:200，add

0.4ml of 0.1mol/L EDTA-2Na in every 1000 ml of solution

B 5%(0min)→5%(2min) →25%(25min) →50%(42min) →5%(43min)→5%(60min)Gra

Flow rate ：0.85mL / min

Temp ：40°C

Detection ：PDA 254nm

Inj.vol. ：20µL

此时头孢地尼主峰保留时间为22.18min，为药典所要求保留时间，头孢地尼峰与杂质J峰分离度为1.23，杂质I峰与杂质J峰分离度为2.35，头孢地尼峰与杂质K峰分离度为2.68，杂质K峰与杂质L峰分离度为1.84，均符合药典规定。在同样的分析环境下对按药典方法所配制的供试品溶液进行分析，分析结果如图3。

图3 AQ药典方法对供试品的分析

HPLC Conditions ：

色谱柱：CAPCELL PAK C18 AQ;4.6mm i.d.×250mm

流动相：A：0.25%四甲基氢氧化铵（磷酸调pH至5.5），每1000ml加入0.1mol/L乙二胺四醋酸二钠0.4ml B：0.25%四甲基氢氧化铵（磷酸调pH至5.5）：乙腈：甲醇: =500:300:200，每1000ml加入0.1mol/L 乙二胺四醋酸二钠0.4ml

B%5%(0min)→B%5%(2min) →B%25%(25min) →B%50%(42min) →B%5%(43min)

→B%5%(60min)

流速：1.0mL / min

温度：40°C

检测：PDA 254nm

进样量：20µL

HPLC Conditions ：

Column ：CAPCELL PAK C18 AQ;4.6mm i.d.×250mm

Mobile phase ：A：0.25%TMAH(adjust pH to 5.5 with phosphoric acid), add 0.4ml of 0.1mol/L EDTA-2Na in every

1000 ml of solution

B：0.25% TMAH(adjust pH to 5.5 with phosphoric acid)：CH3CN：CH3OH: =500:300:200，add

0.4ml of 0.1mol/L EDTA-2Na in every 1000 ml of solution

B 5%(0min)→5%(2min) →25%(25min) →50%(42min) →5%(43min)→5%(60min)Gra

Flow rate ：1.0mL / min

Temp ：40°C

Detection ：PDA 254nm

Inj.vol. ：20µL