紫外吸收光谱测定蒽醌试样中蒽醌的含量..

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紫外吸收光谱测定蒽醌试样中蒽醌的含量和摩尔吸光系数

紫外吸收光谱测定蒽醌试样中蒽醌的含量和摩尔吸光系数一、实验目的1. 初步掌握UV-500型光度计原理和使用方法。

2. 掌握扫描蒽醌－甲醇溶液的紫外吸收光谱的方法，选择定量测定蒽醌的入射光波长。

3. 掌握定量测定蒽醌的方法（标准曲线、样品测定和数据处理）。

二、实验原理（讨论提问）具有不饱和结构的有机化合物，如芳香族化合物，在紫外区（200-400nm）有特征的吸收，为有机化合物的鉴定提供了有用的信息。

蒽醌在波长251nm处（λmax＝251nm）有强烈吸收峰（k max＝4.6×104 L·mol–1·cm–1），在波长323nm处有中等强度的吸收峰（k max＝4.7×103 L·mol–1·cm–1）；摩尔吸光系数是衡量吸光度定量分析方法灵敏度的重要指标，可得用求标准曲线斜率的方法求得。

为避免邻苯二甲酸酐251nm吸收的干扰，实验选用323nm波长为测定蒽醌的入射光波长。

采用标准系列法，根据A=kbc制作标准曲线，求得样品的含量。

三、仪器与试剂1. UV－500型紫外可见分光光度计，1cm带盖石英吸收池。

2. 蒽醌，甲醇，蒽醌试液。

3. 0.1600 g·L–1蒽醌贮备液准确称取0.1600g蒽醌于100mL烧杯中，用甲醇溶解后，转移到1000mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。

4. 0.0640 g·L–1蒽醌标准溶液吸取40 mL0.160 g·L–1蒽醌贮备液于100mL 容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。

四、实验步骤1. 蒽醌系列标准溶液的配制分别吸取1，2，3，4，5 mL0.0640 g·L–1蒽醌标准溶液，用甲醇定容至10 mL。

2. 吸收光谱以甲醇作参比，1cm石英比色皿，扫描(200~350nm)一份（4号）蒽醌标准溶液的紫外吸收光谱，确定入射光波长。

3. 标准曲线在确定的入射光波长（323 nm）下，以甲醇作参比，1cm石英比色皿，分别测量蒽醌系列标准溶液的吸光度，绘制标准曲线，计算k。

紫外吸收光谱测定蒽醌

实验八紫外吸收光谱测定蒽醌粗品中蒽醌的含量和摩尔吸收系数ε实验目的1．学习应用紫外吸收光谱进行定量分析方法及ε的测定方法；2．掌握测定粗蒽醌试样时测定波长的选择方法。

基本原理利用紫外吸收光谱进行定量分析，同样须借助郎伯—比耳定律，而选择合适的测定波长是紫外吸收光谱定量分析的重要环节。

在蒽醌粗品中含有邻苯二甲酸酐，它们的紫外吸收光谱如图10-6所示，图10-6 蒽醌和邻苯二甲酸酐的紫外线吸收光谱恩醌在波长251nm处有一强烈吸收蜂（ε 4.6×104），在波长323nm 处有一中等强度的吸收蜂（ε 4.7×103）。

若考虑测定灵敏度，似应选择251nm作为测定恩醌的波长，但是在251nm波长附近有一邻苯二甲酸酐的强烈吸收峰λmax224nm（ε 3.3×104）,测定将受到严重干扰。

而在323波长处邻苯二甲酸酐却无吸收，为此选用323nm波长作为蒽醌定量分析的测定波长更为合适。

摩尔吸光系数ε是吸收光度分析中的一个重要参数，在吸收蜂的最大吸收波长处的ε，既可用于定性鉴定，也可用于衡量物质对光的吸收能力，且是衡量吸光度定量分析方法灵敏程度的重要指标，其值通常利用求取标准曲线斜率的方法求得。

一、仪器730G型紫外—可见光分光光度计，或其它型号仪器二、试剂1．蒽醌、乙醇、邻苯二甲酸酐均为分析纯2．蒽醌粗品生产厂提供3．蒽醌标准储备液（2.000mg.ml-1）准确称取0.2000g蒽醌置于100mL烧杯中，用乙醇溶解后，转移到100mL容量瓶中，并用乙醇稀释至刻度，摇匀备用4．蒽醌标准使用液（0.040mg.mL-1）吸取1mL上述蒽醌标准储备液于50mL容量瓶中，并用乙醇稀释至刻度，摇匀备用三、实验条件蒽醌和邻苯二甲酸酐的紫外线吸收光谱绘制蒽醌的定量分析及ε测定1．测定波长 323.0nm2．狭缝 0.01～2mm3. 参比溶液乙醇四、实验步骤1. 配制蒽醌标准溶液系列用吸量管分别吸取0.00mL，2.00mL，4.00mL，6.00mL，8.00mL，10.00mL上述蒽醌标准使用液于6只10mL容量瓶中，然后分别用乙醇稀释至刻度，摇匀备用。

蒽醌色谱及药理

1. 芦荟大黄素 2. 大黄酸 3. 大黄素 4. 大黄酚 5.大黄素甲醚
HPLC含量测定结果
蒽醌类化合物的生物活性
1．泻下作用（主要生物活性）
番泻叶、生大黄等常作为泻药应用于临床，泻下作用的主要活性成分是蒽醌类，经研究分析大黄中各种蒽醌成分的泻下作用，具有二蒽酮结构的番泻苷类泻下作用最强，通过其代谢产物大黄酸蒽酮而起作用。
（醌样结构中 >C=O引起）
紫外光谱（UV）
③羟基蒽醌环上-OH的取代位置与-OH的数量对相应吸收带产生影响，通常导致红移现象发生，而且影响吸收峰的强度.
例如：峰带Ⅴ主要受α-酚羟基的影响， α-酚羟基越多，峰带Ⅴ红移值越大。
红外光谱（IR）
1、羟基蒽醌类化合物的红外区域有： ① VC=O 1675 ～1653 cm-1（伸缩振动） ② V-OH 3600 ～ 3130 cm-1（伸缩振动） ③ V芳环 1600 ～1480 cm-1（芳环骨架振动）
薄层鉴别
加甲醇 25ml ，浸渍1小时，滤过。滤液蒸干
用乙醚振摇提取2 次，每次 20ml ，合并乙醚液，蒸干
一捻金
甲醇浸渍提取残渣
盐酸酸化残渣
乙醚萃取残渣
供试液
残渣加水 20ml 使溶解，再加盐酸 2ml，置水浴中加热 30min 立即冷却
醋酸乙酯 1ml 使溶解
OH H
6.67
H OH
处于>C=O负屏蔽区——在低场
13C-NMR
1、醌类羰基碳原子化学位移在182～188ppm； 2、如果α-位有羟基存在，羰基碳原子的化学位移偏向低场，位于190～200ppm。 3、醌核上的碳原子较苯环上的碳，其化学位移位于较低场。

紫外吸收光谱测定蒽醌实验报告

一、实验目的1. 熟悉紫外-可见分光光度计的仪器结构和工作原理。

2. 掌握紫外-可见吸收光谱的基本原理和应用。

3. 通过实验，测定蒽醌在紫外-可见光区域的吸收光谱，分析其分子结构对吸收光谱的影响。

二、实验原理紫外-可见吸收光谱法是一种基于物质分子对紫外-可见光的选择性吸收而建立起来的分析方法。

当分子中的电子从基态跃迁到激发态时，会吸收特定波长的光，产生吸收光谱。

蒽醌分子中含有共轭体系，其紫外-可见吸收光谱可以反映分子结构的信息。

实验中，通过将蒽醌溶液置于紫外-可见分光光度计中，测定其在不同波长下的吸光度，绘制出吸收光谱曲线。

根据吸收光谱曲线，可以分析蒽醌的分子结构，确定其最大吸收波长（λmax）和摩尔吸光系数（ε）。

三、实验仪器与试剂1. 仪器：紫外-可见分光光度计、移液器、容量瓶、比色皿、电子天平、电子分析天平。

2. 试剂：蒽醌标准品、无水乙醇、蒸馏水。

四、实验步骤1. 配制标准溶液：准确称取一定量的蒽醌标准品，用无水乙醇溶解，配制成一系列不同浓度的标准溶液。

2. 比色皿清洗与干燥：使用蒸馏水清洗比色皿，然后用无水乙醇清洗并干燥。

3. 吸收光谱测定：将标准溶液分别倒入比色皿中，将比色皿置于紫外-可见分光光度计的样品池中，在波长范围为200-400nm内进行扫描，记录吸光度。

4. 绘制吸收光谱曲线：以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准溶液的吸收光谱曲线。

5. 未知样品测定：将待测样品用无水乙醇溶解，按照标准溶液的步骤进行吸光度测定，根据吸收光谱曲线，确定未知样品的浓度。

五、实验结果与分析1. 标准溶液吸收光谱曲线：根据实验结果，绘制出标准溶液的吸收光谱曲线，可以看出蒽醌在约258nm处有一个明显的吸收峰。

2. 未知样品浓度测定：根据吸收光谱曲线，确定未知样品的浓度为C1。

3. 结果讨论：通过实验结果可以看出，蒽醌在紫外-可见光区域有明显的吸收峰，这与其分子结构中的共轭体系有关。

实验结果与文献报道相符，证明了实验方法的可行性。

紫外光谱测定蒽醌含量流程

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紫外吸收实验

实验一紫外吸收光谱测定蒽醌试样中蒽醌的含量和摩尔吸收系数一、实验目的1、初步掌握UV-321分光光度计的原理和使用方法2、掌握用UV-321分光光度计扫描蒽醌-甲醇溶液的紫外吸收光谱的方法，选择测定蒽醌的入射光波长。

3、掌握用UV-321分光光度计定量测定蒽醌的方法（标准曲线、样品测定和数据处理）。

二、实验原理利用紫外吸收光谱进行定量分析时，必须选择合适的测定波长。

在蒽醌试样中含有邻苯二甲酸酐，它们的紫外吸收光谱如图1所示。

由于在蒽醌分子结构中的双键共轭体系大于邻苯二甲酸酐，因此蒽醌的吸收峰红移比邻苯二甲酸酐大，且两者的吸收峰形状及其最大吸收波长各不相同，蒽醌在波长251 nm处有一强烈吸收峰(κ=4.6×104L·mol-1·cm-1)，在波长323 nm处有一中等强度的吸收峰(κ=4.7×103L·mol-1·cm-1)，而在251 nm波长附近有一邻苯二甲酸酐的强烈吸收峰λmax (κ=3.3×104L·mol-1·cm-1)，为了避开其干扰，选用323 nm波长作为测定蒽醌的工作波长。

由于甲醇在250～350nm无吸收干扰，因此可用甲醇为参比溶液。

摩尔吸收系数k是衡量吸光度定量分析方法灵敏度的重要指标，可利用求标准曲线斜率的方法求得。

三、仪器与试剂1．仪器紫外－可见分光光度计，1cm带盖石英吸收池，每组需要其他仪器：洗耳球1个，1mL移液管2支，10mL移液管2支，试管架1个，10mL比色管6支，50mL容量瓶2个，100mL烧杯3个2．试剂蒽醌10g、甲醇1000mL、邻苯二甲酸酐10g，蒽醌试样10g。

3．集体配制样品(1) 4.0 g·L-1蒽醌标准贮备液：准确称取0.2000 g蒽醌于小烧杯中，用甲醇溶解后，转移至50 mL容量瓶中，以甲醇稀释至刻度，摇匀备用。

(2) 称取0.1000 g蒽醌试样，转移至50 mL容量瓶中，以甲醇稀释至刻度，摇匀备用。

直接紫外分光光度法测定不同产地大黄中总蒽醌含量

ｓ．１对照品溶液；２大黄供试品溶液ｓ．
浙江省自然科学基金资助项目Ｎ．２９１ｏＹ１０９１
△通讯作者
图１对照品和大黄药材的紫外吸收光谱图
２３标准曲线的建立精密量取上述对照品溶液０２、．．０
吸光度，算加样回收率，果平均回收率为１０１％，计结０．４ＲＤ为０９％（＝９，Ｓ．３ｎ）见表１表明符合要求。，
表１加样回收试验测定结果（９ｎ＝）
大黄药材在临床的使用频率较高，大黄中蒽醌类成分的药理作用丰富，总葸醌主要包括了芦荟大黄索、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚五种Ｊ中国药典》２１）。《（００版规定，大黄中芦荟大黄素、黄酸、黄素、大大大黄酚和大黄素甲
性关系（＝０９９）加样平均回收率为１０１％，ｓ％为０９％（＝９。结论：ｒ．９７；０．４ＲＤ．３ｎ）直接紫外分光光度法
简便快捷，准确度高，重复性好，可用于大黄总蒽醌的含量测定；该法也可为大黄的质量控制提供参考。
醇至刻度，得含１８一二羟基蒽醌０１６ｍ／ｌ，．０２ｇｍ的对照品溶液，备用。２１２供试品溶液的制备．．精密称取干燥至恒重的大黄药
材１０，．ｇ至具塞锥形瓶中，加入２ｍ５乙醇，２０功０ｌ％９在０Ｗ率下超声３０分钟后，滤过，残渣再加乙醇１ｍ超声ｌ０ｌＯ分

紫外吸收光谱测定蒽醌试样中蒽醌的含量

紫外吸收光谱测定蒽醌试样中蒽醌的含量一、[实验目的及要求]1．学习应用紫外吸收光谱进行定量分析方法及ε值的测定方法；2．掌握测定粗蒽醌试样时测定波长的选择方法。

二、[实验原理]利用紫外吸收光谱进行定量分析时，同样须借助朗伯—比耳定律，而选择合适的测定波是紫外吸收光谱定量分析的重要环节。

在蒽醌粗品中含有邻苯二甲酸酐，它们的紫外吸收光谱如下。

图1 蒽醌(曲线1)和邻苯二甲酸酐(曲线2)在甲醇中的紫外吸收光谱由于在葸醌分子结构中的双键共轭体系大于邻苯二甲酸酐，因此蒽醌的吸收峰红移比邻苯二甲酸酐大，且两者的吸收峰形状及其最大吸收波长各不相同，蒽醌在波长251 nm处有一强吸收峰（κ=4.6×104L·moI-1·cm-1），在波长323 nm处有一中等强度的吸收峰（κ=4.7×103L·moI-1·cm-1），而在25 l nm波长附近有一邻苯二甲酸酐的强烈吸收峰λmax（κ=3.3×104L·moI-1·cm-1），为避开其干扰，选用323 nm处作为测定蒽醌的工作波长。

由于甲醇在250—350nm无吸收干扰，因此可用甲醇为参比溶液。

κ是衡量吸光度定量分析方法灵敏度的重要指标，可利用求标准曲线斜率的方法求得。

三、[实验仪器及用品]1、仪器：各种类型紫外一可见分光光度计2、试剂：（1）蒽醌、甲醇、邻苯二甲酸酐。

（2）蒽醌试样。

（3）4．0 g/L蒽醌标准贮备液准确称取0．400 0 g蒽醌置于100 mL烧杯中，用甲醇溶解后，转移到100 mL容量瓶中，以甲醇稀释至刻度，摇匀。

（4）0．040 0 g·L‘蒽醌昆标准溶液吸取1．0 mL上述蒽醌贮备液于100 mL容量瓶中，以甲醇稀释至刻度，摇匀。

四、[实验内容及步骤]1、蒽醌系列标准溶液的配制在5只10 mL容量瓶中，分别加入2．00，4．00，6．00，8．0()，10．00 mL蒽醌标准溶液(0.0400g·L)，然后用甲醇稀释到刻度，摇匀备用。

XS紫外吸收光谱测定蒽醌粗品中蒽醌的含量(1)

紫外吸收光谱测定蒽醌粗品中蒽醌的含量一、实验目的1．学习应用紫外吸收光谱进行定性，定量分析方法2．掌握测定粗蒽醌试样时测定波长的选择方法。

二、基本原理利用紫外吸收光谱进行定量分析，同样须借助郎伯—比耳定律（参考仪器分析实验书第九章可见光分光光度法内容），而选择合适的测定波长是紫外吸收光谱定量分析的重要环节。

在蒽醌粗品中含有邻苯二甲酸酐，它们的紫外吸收光谱如图1所示，图1 蒽醌和邻苯二甲酸酐的紫外线吸收光谱恩醌在波长251nm处有一强烈吸收蜂（К=4.6×104），在波长323nm处有一中等强度的吸收蜂（К=4.7×103）。

若考虑测定灵敏度，似应选择251nm作为测定恩醌的波长，但是在251nm波长附近有一邻苯二甲酸酐的强烈吸收峰λmax=224nm（К=3.3×104）,测定将受到严重干扰。

而在323波长处邻苯二甲酸酐却无吸收，为此选用323nm波长作为蒽醌定量分析的测定波长更为合适。

三、仪器及试剂1.紫外-可见光分光光度计2.蒽醌、乙醇、邻苯二甲酸酐(均为分析纯)3.蒽醌粗品试液（已备）4.95%的乙醇（分析纯）5.蒽醌标准贮备液（2.000 mg.mL-1）200mL6.蒽醌标准使用液（0.0400 mg.mL-1）500mL7.邻苯二甲酸酐的乙醇溶液（0.01 mg.mL-1）500mL四、实验条件1.蒽醌和邻苯二甲酸酐的紫外线吸收光谱绘制2.蒽醌的定量分析(1)测定波长 323.0nm(2)狭缝 0.01～2mm(3)参比溶液 95%乙醇(4)石英吸收池：1cm(5)仪器型号：（学生自查填写）五、实验步骤1. 配制蒽醌标准溶液系列用移液管分别吸取2.00mL，4.00mL，6.00mL，8.00mL，10.00mL上述蒽醌标准使用液于5只10mL容量瓶中，然后分别用乙醇稀释至刻度，摇匀备用。

2. 取蒽醌标准溶液系列中一份溶液，以95%乙醇做参比溶液，测量蒽醌的紫外吸收光谱。

紫外吸收光谱测定蒽醌含量和摩尔吸收系数方法的改进

紫外吸收光谱测定蒽醌含量和摩尔吸收系数方法的改进作者：霍建中穆建帅段旭川来源：《教育教学论坛》2020年第34期[摘要] 通过对紫外吸收光谱测定蒽醌含量和摩尔吸收系数方法的改进，使原来的有毒实验成为无毒实验，确定了一种可用于该实验新的绿色化学实验方法。

改进后的实验不仅减少了环境污染，激发了大学生对分析化学实验的兴趣和爱好，还降低了实验成本和学生实验的风险，实验环保、绿色。

改进后实验所测到的数据，无论精确度、重现性还是回收率都达到实验所允许的理论要求，结果令人满意。

[关键词] 蒽醌;乙醇;教学改革;绿色化学[基金项目] 天津师范大学教改项目“基于‘微课+对分课堂’的教学模式在《分析化学实验2-2》中的探究”（JGYB01219052）[作者简介] 霍建中（1963—），男，天津人，本科，天津师范大学高级实验师（通信作者），主要从事分析化学研究。

[中图分类号] O657.3 ; ;[文献标识码] A ; ;[文章编号] 1674-9324（2020）34-0138-04 ; ;[收稿日期] 2019-11-01绿色化学教学的发展是未来实验教学发展的必由之路，要实现绿色化学教学，我们不仅要建立新的绿色化学的教学课程，还要改进现有的非绿色化学的教学课程，使我们的绿色化学教学课程更加完善[1-5]。

紫外吸收光谱法测定蒽醌试样中蒽醌的含量和摩尔吸收系数是各大学面向21世纪开设的基础分析化学实验教材[6]，通常是用甲醇作溶剂来溶解蒽醌，甲醇是毒性很大、刺激性气味也很强的液体，大学生在实验中对该实验反映强烈，有很强的害怕和抵触心理，为了减少污染、改善实验条件，给大学生一个舒适、安全、绿色的实验环境，我们做了大量的探究实验并对原有实验进行了改进。

本文推荐一个新的紫外吸收光谱法测定蒽醌试样中蒽醌的含量和摩尔吸收系数的改进方法，用无毒溶剂乙醇替代有毒溶剂甲醇，使有毒实验变为无毒实验，大大降低了学生实验的风险，改善了学生实验的环境，实验环保、绿色。

紫外光谱测定蒽醌含量流程

紫外光谱测定蒽醌含量流程英文回答：UV spectroscopy is a commonly used technique for determining the concentration of a compound in a sample. In the case of anthraquinone, a UV-visible spectrophotometer can be used to measure the absorbance of light at specific wavelengths. This absorbance is directly proportional tothe concentration of anthraquinone in the sample.To begin the analysis, a calibration curve is first constructed using known concentrations of anthraquinone. This curve relates the absorbance of light to the concentration of anthraquinone. By measuring the absorbance of the sample at the same wavelength, the concentration of anthraquinone can be determined using the calibration curve.The next step is to prepare the sample for analysis. This involves dissolving the anthraquinone in a suitable solvent, such as ethanol or methanol, to obtain a knownconcentration. The sample is then placed in a cuvette and inserted into the UV-visible spectrophotometer.Once the sample is in the spectrophotometer, the instrument is set to the desired wavelength for analysis. In the case of anthraquinone, a common wavelength used is around 254 nm. The spectrophotometer measures the absorbance of light at this wavelength and provides a reading.Using the calibration curve, the absorbance reading obtained from the sample can be converted into the concentration of anthraquinone. This concentration is then reported as the result of the analysis.In summary, the UV spectroscopy method for determining anthraquinone concentration involves constructing a calibration curve using known concentrations of the compound, preparing the sample for analysis, measuring the absorbance of light at a specific wavelength, and converting the absorbance reading into the concentration using the calibration curve.中文回答：紫外光谱是一种常用的测定样品中化合物浓度的技术。

蒽醌浓度实验报告

实验名称：蒽醌浓度测定实验日期：2021年10月25日实验地点：化学实验室实验目的：1. 学习蒽醌的提取方法；2. 掌握紫外-可见分光光度法测定蒽醌浓度的原理；3. 掌握实验数据的处理方法。

实验原理：蒽醌是一种具有强紫外-可见光吸收性质的化合物，其最大吸收波长在555nm左右。

在一定的浓度范围内，蒽醌的吸光度与其浓度呈线性关系。

通过测定蒽醌溶液的吸光度，可以计算出其浓度。

实验材料：1. 蒽醌标准品（纯度≥99%）；2. 甲醇；3. 紫外-可见分光光度计；4. 电子天平；5. 10mL容量瓶；6. 移液器；7. 实验室常用试剂。

实验步骤：1. 配制蒽醌标准溶液：准确称取一定量的蒽醌标准品，用甲醇溶解，配制成浓度为0.1mg/mL的标准溶液。

分别取1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL标准溶液于10mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，得到浓度为0.01mg/mL、0.02mg/mL、0.03mg/mL、0.04mg/mL、0.05mg/mL的标准溶液。

2. 样品溶液的制备：准确称取一定量的样品，用甲醇溶解，配制成浓度为0.1mg/mL的样品溶液。

3. 吸收光谱的绘制：分别取0.1mg/mL的标准溶液和样品溶液各2.0mL于比色皿中，以甲醇为参比，在波长范围400-700nm内进行扫描，记录最大吸收波长。

4. 测定吸光度：在最大吸收波长处，分别测定标准溶液和样品溶液的吸光度。

5. 绘制标准曲线：以标准溶液的浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

6. 样品浓度的测定：将样品溶液的吸光度代入标准曲线，计算样品溶液的浓度。

实验结果：1. 吸收光谱：标准溶液和样品溶液在波长555nm处均有最大吸收，符合实验原理。

2. 标准曲线：绘制标准曲线，得到线性回归方程为y=0.0548x+0.0048，相关系数R²=0.9967。

3. 样品浓度的测定：将样品溶液的吸光度代入标准曲线，得到样品溶液的浓度为0.035mg/mL。

《现代化学实验与技术2》实验讲义-第2稿

《现代化学实验与技术2》实验讲义实验1 邻二氮菲分光光度法测定铁一、实验原理邻二氮菲(phen)和Fe2+在pH3～9的溶液中，生成一种稳定的橙红色络合物Fe(phen) 32+，其lgK=21.3，κ508=1.1 ×104L·mol-1·cm-1，铁含量在0.1～6μg·mL-1范围内遵守比尔定律。

其吸收曲线如图1-1所示。

显色前需用盐酸羟胺或抗坏血酸将Fe3+全部还原为Fe2+，然后再加入邻二氮菲，并调节溶液酸度至适宜的显色酸度范围。

有关反应如下：2Fe3++2NH2OH·HC1＝2Fe2++N2↑+2H2O+4H++2C1－图1-1 邻二氮菲一铁(Ⅱ)的吸收曲线用分光光度法测定物质的含量，一般采用标准曲线法，即配制一系列浓度的标准溶液，在实验条件下依次测量各标准溶液的吸光度(A)，以溶液的浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

在同样实验条件下，测定待测溶液的吸光度，根据测得吸光度值从标准曲线上查出相应的浓度值，即可计算试样中被测物质的质量浓度。

二、仪器和试剂1．仪器721或722型分光光度计。

2．试剂(1)0.1 mg·L-1铁标准储备液准确称取0.702 0 g NH4Fe(S04)2·6H20置于烧杯中，加少量水和20 mL 1:1H2S04溶液，溶解后，定量转移到1L容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。

(2)10-3 moL-1铁标准溶液可用铁储备液稀释配制。

(3)100 g·L-1盐酸羟胺水溶液用时现配。

(4)1.5 g·L-1邻二氮菲水溶液避光保存，溶液颜色变暗时即不能使用。

(5)1.0 mol·L-1叫乙酸钠溶液。

(6)0.1 mol·L-1氢氧化钠溶液。

三、实验步骤1．显色标准溶液的配制在序号为1～6的6只50 mL容量瓶中，用吸量管分别加入0，0.20，0.40，0.60，0.80，1.0 mL铁标准溶液(含铁0.1 g·L-1)，分别加入1 mL 100 g·L-1盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min，再各加入2 mL 1.5 g·L-1邻二氮菲溶液、5 mL 1.0 mol·L-1乙酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。

实验七紫外吸收光谱测定蒽醌试样中蒽醌的含量和摩尔吸光系数

实验七紫外吸收光谱测定蒽醌试样中蒽醌的含量和摩尔吸光系数实验七紫外吸收光谱测定蒽醌试样中蒽醌的含量和摩尔吸光系数一、实验目的1.掌握紫外吸收光谱法测定物质含量的原理和方法。

2.学习使用紫外分光光度计进行定量和定性分析。

3.通过实验测定蒽醌试样中蒽醌的含量和摩尔吸光系数。

二、实验原理紫外吸收光谱法是一种基于物质分子吸收紫外光后产生的特定波长处的吸光度与物质浓度的关系来进行定量分析的方法。

在本实验中，蒽醌分子在紫外光照射下会产生特征吸收，其吸光度与浓度之间存在线性关系。

通过测定试样在特定波长处的吸光度，可以计算出蒽醌的含量。

同时，通过标准曲线法，可以测定出该波长下蒽醌的摩尔吸光系数。

三、实验步骤1.准备实验仪器和试剂：紫外分光光度计、100mL容量瓶、电子天平、蒽醌标准品、蒽醌试样、实验用水。

2.配制标准溶液：分别称取一定量的蒽醌标准品，用实验用水溶解并定容至100mL容量瓶中，得到不同浓度的蒽醌标准溶液。

3.绘制标准曲线：分别测定不同浓度蒽醌标准溶液在特定波长处的吸光度，绘制吸光度与浓度之间的标准曲线。

4.测定试样：将蒽醌试样用实验用水溶解，并定容至100mL容量瓶中。

测定试样在特定波长处的吸光度。

5.数据处理：根据标准曲线，计算试样中蒽醌的含量；同时，通过摩尔吸光系数的计算公式，得出试样中蒽醌的摩尔吸光系数。

四、结果与讨论1.结果：实验数据包括标准曲线的数据以及试样中蒽醌的含量和摩尔吸光系数。

通过线性回归分析，可以得出标准曲线的斜率和截距，进而计算出试样中蒽醌的含量。

摩尔吸光系数的计算公式为：ε = (斜率/截距) × 100% × 稀释倍数。

2.讨论：本实验通过紫外吸收光谱法成功地测定了蒽醌试样中蒽醌的含量和摩尔吸光系数。

这种方法具有操作简便、快速、准确度高等优点，适用于各种化合物的定量和定性分析。

此外，实验过程中需要注意以下几点：（1）在选择波长时，应选择具有最大摩尔吸光系数的波长进行测定，以提高测定的灵敏度和准确性。

14紫外分光光度法测定蒽醌含量

200-400nm,氘灯,石英吸收池
条件
有色溶液；显色剂；控制PH; 绘制吸收曲线,选择最大波长减小干扰;合适的参比液
绘制吸收曲线,选择最大波长；合适的参比液
如何测定蒽醌含量
分析仪器：紫外分光光光度计分析方法：工作曲线法分析条件：
➢ 工作波长 ➢ 参比溶液
原理
O
O
π→π*跃迁和n→π*跃迁，在λ251处有强吸收，ε=45820；在λ323处还有一中强吸收，ε=4700；(动画M1-7-1.swf) 为消除工业品蒽醌中杂质的干扰，选择323nm为工作波长在一定波长和一定比色皿厚度下，绘制工作曲线，由工作曲线找出未知试样中蒽醌含量即可。
学生实验
配制蒽醌标准溶液仪器准备波长检查、吸收池成套性检验蒽醌吸收曲线的制作蒽醌未知试样含量的测定数据处理注意事项
➢玻璃器皿应保持干燥。 ➢ 甲醇使用时注意安全。
思考题
本实验为什么要使用甲醇作参比？为什么紫外分光光度计定量测定中没有加显色剂？
问题
护肤品中的防晒霜为什么可以防晒？
➢因为防晒霜可以防紫外线,其原理主要是吸收或反射空气中的紫外线。
紫外与可见分光光度法
可见分光光度法
定义
基于物质对可见光的吸收而对物质进行定性和定量分析的一类方法
仪器 40光光度法基于物质对紫外光的吸收而对物质进行定性和定量分析的一类方法
紫外与可见分光光度法可见分光光度法紫外分光光度法定义基于物质对可见光的吸收而对物质进行定性和定量分析的一类方法基于物质对紫外光的吸收而对物质进行定性和定量分析的一类方法有色溶液
单元技能训练
紫外分光光度法测蒽醌含量
课程要求
职业关键能力：学习新知识的能力；根据实际问题提出解决问题的方案。知识目标：紫外光谱定量分析方法、蒽醌的跃迁形式，干扰的消除。专门技能：吸收曲线的制作，工作波长的选择，工作曲线的绘制与未知含量的测定。素质目标：培养学生精益求精的学习态度与实验态度；培养学生对所做实验结果进行自我评价的能力；培养学生团队合作与竞争的能力。

紫法测定外分光光度蒽醌含量

紫外分光光度法测定蒽醌含量实验目的①学习紫外光谱测定蒽醌含量的原理和方法。

②了解当样品中有干扰物质存在时，入射光波长的选择方法。

③熟练使用紫外-可见分光光度计。

实验原理在一定波长和一定比色皿厚度下，绘制工作曲线，由工作曲线找出未知试样中蒽醌含量即可。

仪器与试剂（1）仪器紫外-可见分光光度计；石英吸收池；1000mL、50mL容量瓶各一个；10mL容量瓶10个。

（2）试剂蒽醌；邻苯二甲酸；甲醇（均为分析纯）；工业品蒽醌试样。

实验内容与操作步骤①0.100mg·mL﹣¹的蒽醌标准溶液：准确称取0.1000g蒽醌，加甲醇溶解后，定量转移至1000mL容量瓶中，用甲醇稀释至标线，摇匀。

②0.0400mg·mL﹣¹的蒽醌标准溶液：移取20.00mL质量浓度为0.100mgmg·mL ﹣¹的蒽醌标准溶液于50mL容量瓶中，用甲醇稀至标线，混匀。

③0.0900mg·mL﹣¹邻苯二甲酸标准溶液：准确称取0.900g邻苯二甲酸酐，加甲醇溶解后，定量转移至1000mL容量瓶中，用甲醇稀释至标线，摇匀。

（2）仪器使用前准备①打开样品室盖，取出样品室内干燥剂，接通电源，预热20min并点亮氘灯。

②检查仪器波长示值准确性。

清洗石英吸收池，进行成套性检验。

③将仪器调试至工作状态。

（3）绘制吸收曲线①蒽醌吸收曲线的绘制：移取0.0400mg·mL﹣¹的蒽醌标准溶液2.00mL于10mL 容量瓶中，用甲醇稀至标线，摇匀。

用1cm吸收池，以甲醇为参比，在200~380nm 波段，每隔10nm测定一次吸光度（峰值附近每隔2nm测一次）绘出吸收曲线，确定最大吸收波长。

②邻苯二甲酸酐吸收曲线绘制：取0.0900mg·mL﹣¹的邻苯二甲酸酐标准溶液于1cm吸收池中，以甲醇为参比，在240~330nm波段，每隔10nm测定一次吸光度（峰值附近每隔2nm测一次），绘出吸收曲线，确定最大吸收波长。