分子克隆技术试卷
分子生物学重组DNA技术试题
分子生物学重组DNA技术试题分生—重组DNA技术试题一、单选1、在分子生物学领域，分子克隆主要是指（）A、DNA的大量复制B、DNA的大量转录C、DNA的大量剪切D、RNA的大量反转录E、RNA的大量剪切2、在分子生物学领域，重组DNA又称（）A、酶工程B、蛋白质工程C、细胞工程D、基因工程E、DNA工程3、在重组DNA技术中，不常用到的酶是（）A、限制性核酸内切酶B、DNA聚合酶C、DNA连接酶D、反转录酶E、DNA解链酶4、多数限制性核酸内切酶切割后的DNA末端为（）A、平头末端B、3突出末端C、5突出末端D、粘性末端E、缺口末端5、可识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类酶称为（）A、限制性外切核酸酶B、限制性内切核酸酶C、非限制性外切核酸酶D、非限制性内切核酸酶E、DNA内切酶6、CDNA是指（）A、在体外经反转录合成的与RNA互补的DNAB、在体外经反转录合成的与DNA互补的DNAC、在体外经转录合成的与DNA2补的RNAD、在体内经反转录合成的与RNA互补的DNAE、在体内经转录合成的与DNA互补的RNA7、基因组代表一个细胞或生物体的（）A、部分遗传信息B、整套遗传信息C、可转录基因D、非转录基因E、可表达基因8、在基因工程中通常所使用的质粒存在于（）A、细菌染色体B、酵母染色体C、细菌染色体外D、酵母染色体外E、以上都不是9、就分于结构而论，质粒是（）A、环状双链DNA分子B、环状单链DNA分于C、环状单链RNA分子D、线状双链DNA分子E、线状单链DNA分子10、聚合酶链反应可表示为（）A、PECB、PERC、PDRD、BCRE、PCR11、在已知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是（）A、化学合成法B、基因组文库法C、CDNA文库法D、聚合酶链反应E、差异显示法12、重组DNA的基本构建过程是将（）A、任意两段DNA搂在一起B、外源DNA接入人体DNAC、目的基因接人适当载体D、目的基因接入哺乳类DNAE、外源基因接人宿主基因13、ECoRI切割DNA双链产生（）A、平端B、5’突出粘端C、3’突出粘端D、钝性末端E、配伍末端14、催化聚合酶链反应的酶是（）A、DNA连接酶B、反转录酶C、末端转移酶D、碱性磷酸酶E、TaqDNA聚合酶15、将PstI内切酶切割后的目的基因与用相同内切酶切割后的载体DNA连接属（）A、同聚物加尾连凑B、人工接头连接C、平端连接D、粘性末端连接E、非粘性末端连接16、限制性核酸内切酶切割DNA后产生（）A、3磷酸基末端和5羟基末端B、5磷酸基末端和3羟基末端C、3磷酸基末端和5磷酸基末端D、5羟基末端和3羟基末端E、3羟基末端、5羟基末端和磷酸17、重组DNA技术中实现目的基因与载体DNA拼接的酶是（）A、DNA聚合酶B、RNA聚合酶C、DNA连接酶D、RNA连接酶E、限制性核酸内切酶18、以质粒为载体。
克隆技术测试题
八年级生物课堂教学效果检测试题第二节克隆技术一、克隆的概念生物体的产生没有经过 _______________ 的结合，属于 ______________ 它们能保留原来生物体的优良性状。
这种现象在生物学上叫做克隆。
二、克隆技术的应用植物的 ___________________ 、组织培养、动物“多利”羊的诞生。
三、克隆技术与伦理克隆技术就像一把双刃剑。
我们要共同遵守 ___________ 的基本原则, 理性地开发和利用克隆技术，不能克隆人。
课堂自测1.克隆牛时，选用甲牛的卵细胞，去掉细胞核，选择乙牛（雄性）的耳缘细胞培养，取出细胞核植入甲牛的去核卵细胞中，移植到丙牛的子宫中。
出生的克隆牛将（）。
A.肯定是雄性B. 肯定是雌性C.可能是中2.“克隆”技术属于下列哪项生物学范畴？（）A.有性繁殖B.无性繁殖C.杂交育种D.基因工程3.试管婴儿是（）。
A.只在体外完成受精作用B. 胚胎发育的全过程均在体外C.在体外完成早期的胚胎发育D.精子和卵细胞是在体外培养形成的4.下图是维尔穆特培育克隆绵羊的过程图解，请据图分析:黑血绵羊占核卵细胞口面绵羊乳腺细胞核重组细胞电击法+（1）该实验中选用了几只母羊？ ________ 。
（2 ）实验时，维尔穆特选用不同品种的绵羊的目的是什么？。
（3）“多利”的大多数性状像_______ 。
这说明了什么? _________ 。
（4）有人说：“这几只母羊都不是‘多利’生物学上的母亲。
” 对此谈谈你的理解。
知能提升1.科学家将雌黑鼠胰腺细胞的细胞核移入白鼠去核的卵细胞内，待发育成早期胚胎后移植入褐鼠的子宫内，该褐鼠产下小鼠的体色和性别是（）。
A.黑、雌B.褐、雌C.白、雄D.黑、雄2•“试管婴儿”技术属于（）。
A.胚胎移植B.组织培养C.克隆技术D.基因工程3.一只羊的卵细胞核被另一只羊的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂，再植入第三只羊的子宫内发育，结果产下一只羊羔。
分子生物学重组DNA技术试题word精品
分生—重组DNA 技术试题一、单选1、在分子生物学领域，分子克隆主要是指（）A DNA勺大量复制B、DNA勺大量转录C、DNA勺大量剪切D RNA勺大量反转录E、RNA勺大量剪切2、在分子生物学领域，重组DNA又称（）A、酶工程B、蛋白质工程C、细胞工程D、基因工程E、DNAT程3、在重组DNA技术中，不常用到的酶是（）A、限制性核酸内切酶B、DNA聚合酶C、DNA连接酶D、反转录酶E、DNA军链酶4、多数限制性核酸内切酶切割后的DNA末端为（）A、平头末端B、3突出末端C、5突出末端D、粘性末端E、缺口末端5、可识别DNA勺特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA勺一类酶称为（）A、限制性外切核酸酶B、限制性内切核酸酶C、非限制性外切核酸酶D非限制性内切核酸酶E、DNA内切酶6、CDNA1 指（）A、在体外经反转录合成的与RNA互补的DNAB在体外经反转录合成的与DNA互补的DNAC在体外经转录合成的与DNA2补的RNAD在体内经反转录合成的与RNA互补的DNAE、在体内经转录合成的与DNA互补的RNA7、基因组代表一个细胞或生物体的（）A、部分遗传信息B、整套遗传信息C、可转录基因D非转录基因E、可表达基因8、在基因工程中通常所使用的质粒存在于（）A、细菌染色体B、酵母染色体C细菌染色体外D酵母染色体外E、以上都不是9、就分于结构而论，质粒是（）A、环状双链DNA分子B、环状单链DNA分于C、环状单链RNA分子D线状双链DNA分子E、线状单链DNA分子10、聚合酶链反应可表示为（）A、PECB、PERC、PDRD、BCRE、PCR11、在已知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是（）A、化学合成法B、基因组文库法C、CDNAfc库法D聚合酶链反应E、差异显示法12、重组DNA勺基本构建过程是将（）A、任意两段DNA娄在一起B、外源DNA接入人体DNAC、目的基因接人适当载体D、目的基因接入哺乳类DNAE 、外源基因接人宿主基因13、ECoRI切割DNA双链产生（）A、平端B、5'突出粘端C、3'突出粘端D、钝性末端E、配伍末端14、催化聚合酶链反应的酶是（）A DNA连接酶B、反转录酶C末端转移酶D、碱性磷酸酶E TaqDNA聚合酶15、将Pstl内切酶切割后的目的基因与用相同内切酶切割后的载体DNA连接属（）A、同聚物加尾连凑B、人工接头连接C平端连接D、粘性末端连接E、非粘性末端连接16、限制性核酸内切酶切割DNA后产生（）A、3 磷酸基末端和5 羟基末端B 、5 磷酸基末端和3 羟基末端C、3 磷酸基末端和5 磷酸基末端D 、5 羟基末端和3 羟基末端E、3 羟基末端、5 羟基末端和磷酸17、重组DNA技术中实现目的基因与载体DNA拼接的酶是（）A DNA R合酶B、RNA聚合酶C、DNA连接酶D、RNA连接酶E、限制性核酸内切酶18、以质粒为载体。
分子生物学检验技术试题及答案
分子生物学检验技术试题及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 以下哪个不是分子生物学常用的检测技术？A. PCRB. 凝胶电泳C. 免疫组化D. 核酸杂交2. 基因克隆中，常用的载体是：A. 质粒B. 病毒C. 染色体D. 线粒体3. 在分子生物学中，用于扩增DNA片段的技术是：A. 逆转录B. 转录C. 翻译D. PCR4. 以下哪个是真核生物的基因表达调控元件？A. 启动子B. 内含子C. 外显子D. 终止子5. 以下哪个不是DNA测序技术？A. Sanger测序B. 焦磷酸测序C. 凝胶电泳D. 单分子测序二、填空题（每空1分，共10分）6. 核酸分子杂交技术中，常用的标记物有_________、_________等。
7. 基因工程中，用于将目的基因导入受体细胞的方法有_________、_________等。
8. 基因编辑技术CRISPR-Cas9中，Cas9是一种_________。
9. 真核生物的基因表达调控中，mRNA的加工包括5'端加帽、3'端加尾和_________。
10. 蛋白质的分离和纯化技术中，常用的方法有电泳、层析和_________。
三、简答题（每题10分，共20分）11. 简述PCR技术的原理及其在分子生物学中的应用。
12. 描述核酸分子杂交技术的基本原理及其在基因检测中的应用。
四、论述题（每题15分，共30分）13. 论述基因克隆的一般步骤及其在生物技术研究中的重要性。
14. 讨论基因编辑技术CRISPR-Cas9的优势和潜在的伦理问题。
五、实验设计题（每题20分）15. 设计一个实验方案，用于检测某种疾病相关基因的突变情况。
答案：1. C2. A3. D4. A5. C6. 放射性同位素、荧光标记7. 转化、转染8. 核酸酶9. 剪接10. 沉淀11. PCR技术的原理是利用DNA聚合酶在特定温度条件下对目标DNA序列进行循环扩增。
它在分子生物学中的应用包括基因克隆、基因表达分析、遗传病诊断等。
分子生物学试卷(含答案)
分子生物学试卷姓名：__________ 考试时间：_______ ___一、填空题，根据题意，将正确答案补充完整(本大题满分20分,每小题2分)1. 反式作用因子可划分为( )、组织特异性转录因子和( )三类。
2. 分子克隆中常用的工具酶有( )、( )、( )、( )。
3. 常用的核酸探针包括( )、( )和( )。
4. 限制性核酸内切酶的作用特点是识别位点的DNA序列呈二重旋转对称，即具有( )、切割DNA均产生含( )和3'-羟基的末端、错位切割产生具有5'-或3'-突出的粘性末端；而沿对称轴切割双链DNA产生平头末端，也称( )、少数不同的限制酶可识别和切割相同的( )。
5. 顺式作用元件按功能可划分为( )、( )、( )和( )。
6. 影响PCR的因素有( )、( )、耐热DNA聚合酶活性和用量、( )、( )、PH、温度、( )。
7. 原核细胞中各种RNA是催化一种酶催化( )种RNA生成的，而真核细胞基因的转录分别由( )种RNA聚合酶催化，其中rRNA基因由( )转录，hnRNA基因由( )转录，各类小分子量RNA则是( )的产物。
8. 体外重组常用方法有( )、平齐末端连接法、( )、( )和适配子连接法。
9. DNA切除修复需要的酶有( )、 ( )、( )。
10. PCR技术的基本过程是( )、( )、( )。
二、判断题，以下各题只有对错两个选项(本大题满分10分,每小题1分)1. Km值是酶的特性常数之一，与酶的浓度、pH、离子强度等条件或因素无关。
( )2. 有两个核酸制剂A和B,A的A250/A280=2.0,B的A250/A280=1.5,因此可判定制剂A的纯度比制剂B的要高。
( )3. 卫星DNA是一类高度重复序列，通常由串联重复序列组成。
( )4. 目前已知的G蛋白都是由α和βγ亚基组成的。
( )5. 生物膜中脂质的流动性受胆固醇含量的影响。
三四章分子克隆载体---答案_完_
三四章分⼦克隆载体---答案_完_第三章分⼦克隆载体（Molecular cloning vectors）⼀、名词解析1.质粒：质粒是染⾊体外的遗传因⼦，能进⾏⾃我复制（但依赖于宿主编码的酶和蛋⽩质）；⼤多数为超螺旋的双链共价闭合环状DNA分⼦（covalently closed circle , cccDNA），少数为线性；⼤⼩⼀般为1～200Kb，有的更⼤。
2.质粒拷贝数：质粒拷贝数(plasmid copy numbers)是指细胞中单⼀质粒的份数同染⾊体数之⽐值,常⽤质粒数/每染⾊体来表⽰。
不同的质粒在宿主细胞中的拷贝数不同。
3.质粒的不相容性：两个质粒在同⼀宿主中不能共存的现象称质粒的不相容性，它是指在第⼆个质粒导⼊后，在不涉及DNA 限制系统时出现的现象。
不相容的质粒⼀般都利⽤同⼀复制系统，从⽽导致不能共存于同⼀宿主中。
4.质粒的转移性：质粒具转移性。
它是指在⾃然条件下，很多质粒可以通过称为细菌接合的作⽤转移到新宿主内。
它需要移动基因 mob ，转移基因 tra ，顺式因⼦ bom 及其内部的转移缺⼝位点 nic。
5.穿梭质粒：既能在真核细胞中繁殖⼜能在原核细胞中繁殖的载体。
这类载体必须既有细菌的复制原点或质粒的复制原点，⼜含有真核⽣物的复制原点，还具备酶切位点和合适的筛选指标。
它⽤来转化细菌，⼜可以⽤于转化真核细胞。
6.α-互补：α-互补是指 lacZ 基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完整的近操纵基因区段的β-半乳糖苷酶（β -galactosidase ，由 1024 个氨基酸组成）阴性的突变体之间实现互补。
α-互补是基于在两个不同的缺陷β-半乳糖苷酶之间可实现功能互补⽽建⽴的7.温和噬菌体：既能进⼊溶菌⽣命周期⼜能进⼊溶源⽣命周期的噬菌体。
8.溶源性细菌：具有⼀套完整的噬菌体基因组的细菌叫溶源性细菌。
9.整合：如果噬菌体的DNA是被包容在寄主细菌染⾊体DNA中，便叫做已整合的噬菌体DNA。
沪科版高中生命科学第二册7.5《克隆技术》练习题
第 5节克隆技术【典型例题】〖例 1〗一只羊的卵细胞核被另一只羊的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂，再植入第三只羊的子宫内发育，结果产下一只羔羊。
这种克隆技术具有多种用途，但是不能（）A．有选择地繁殖某一性别的家畜B．繁殖家畜中的优秀个体C．用于保存物种D．改变动物的基因型〖解析〗这是一道有关生物技术——克隆技术的学科内综合测试题，对考生的认知层次要求比较高。
克隆动物一般是指通过无性繁殖形成动物后代。
供体细胞核的基因状况一般决定了克隆动物的基因状况，即供体细胞核的基因和克隆动物的基因相同。
利用这一原理，人们当然可以有选择地繁殖某一性别的家畜，可以选用基因状况良好的个体（即优秀个体）。
这种技术也可以用以保存濒危物种，因为克隆技术为无性繁殖技术，原则上只要拥有物种的一个体细胞就可以繁殖出该物种。
但是，克隆技术为无性繁殖技术，它不可能改变物种的基因型。
〖答案〗 D〖说明〗高等动物的繁殖为有性生殖，其意义是让后代拥有双亲的优良基因，利于生物的进化。
而克隆是以无性繁殖为基础的生物技术，从根本上说不可能改变动物的基因型，也不利于动物的进化。
〖例 2〗英国爱丁堡卢斯林研究所胚胎学家维尔莫特（J． wilmut ）博士于 1996 年 8 月成功地繁殖出世界上第一只克隆绵羊多利，请据有关背景材料回答问题。
背景材料： 1997 年 2 月 7 日，《自然》杂志报道，英国爱丁堡大学的卢斯林研究所将一只6 岁母羊（ A 羊）的乳腺上皮细胞核导入另一只母羊（ B 羊）的去核卵细胞中，经体外培养并胚胎移植到第三只母羊（ C 羊）的子宫内，终于培育出一只名为多利（Dolly）的小绵羊，它就是提供细胞核的那只 6 岁母羊的克隆或拷贝。
这是在哺乳动物中首次利用体细胞核作为核供体获得自体复制的成功实例。
这一消息一公布立即轰动了整个世界。
克隆绵羊被列为1997 年世界十大科技新闻的榜首。
（ 1）克隆羊多利的遗传性状基本与绵羊一致；（2）在 3 只绵羊中哪一只羊没有为多莉提供遗传物质？（3）克隆羊多利的成功，在技术上的突破之处是（）A．供核细胞是体细胞B．供核细胞是胚胎细胞C．胚胎移植技术D．细胞核移植技术（4）繁殖多利的过程是否遵循孟德尔的遗传分离规律？为什么？（5）你是否赞同克隆人？谈谈你的看法。
分子生物实验试题及答案
分子生物实验试题及答案一、选择题1. DNA的双螺旋结构是由哪位科学家提出的？A. 沃森B. 克里克C. 沃森和克里克D. 罗莎琳·富兰克林答案：C2. 以下哪个不是PCR反应的组成部分？A. DNA模板B. 引物C. Taq聚合酶D. RNA聚合酶答案：D3. 基因克隆中常用的载体是？A. 质粒B. 噬菌体C. 人工染色体D. 所有以上选项答案：D4. 以下哪个是限制性内切酶的作用？A. 连接DNA片段B. 切割DNA片段C. 合成DNA片段D. 复制DNA片段答案：B5. 以下哪个是真核生物细胞核中的RNA聚合酶？A. RNA聚合酶IB. RNA聚合酶IIC. RNA聚合酶IIID. 所有以上选项答案：D二、填空题6. 真核生物的基因表达调控主要发生在_________阶段。
答案：转录7. 基因工程中，将目的基因插入到宿主细胞中的过程称为_________。
答案：转化8. 在分子生物学中，_________是指DNA的两条链分离，每条链作为模板合成新的互补链的过程。
答案：PCR扩增9. 一种常用的基因编辑技术是_________，它允许科学家进行精确的基因编辑。
答案：CRISPR-Cas910. 基因组测序的目的是确定一个生物体的_________。
答案：全部DNA序列三、简答题11. 简述DNA复制的过程。
答案：DNA复制是一个精确的过程，首先需要DNA解旋酶解开双链，然后DNA聚合酶III沿着模板链合成新的互补链，最后形成两条新的双链DNA。
12. 什么是转录过程，它在细胞中的作用是什么？答案：转录是DNA信息被复制到RNA分子上的过程。
它在细胞中的作用是将遗传信息从DNA转移到RNA，为后续的翻译过程提供模板，从而合成蛋白质。
四、论述题13. 论述基因编辑技术在医学领域的应用及其潜在的伦理问题。
答案：基因编辑技术，如CRISPR-Cas9，已经在医学领域显示出巨大的潜力，例如治疗遗传性疾病、癌症等。
分子生物检验试题及答案
分子生物检验试题及答案1. 什么是DNA复制过程中的引物酶？引物酶是一种能够催化合成RNA引物的酶，它在DNA复制的起始阶段起着至关重要的作用。
引物酶能够识别复制起始点，合成一小段RNA，为DNA聚合酶的加入提供起始点。
2. 描述PCR技术中变性、退火和延伸三个步骤。
PCR技术是一种体外扩增DNA片段的方法。
在变性步骤中，DNA双链被高温加热至94-98°C，导致双链分离成单链。
退火步骤中，温度降至50-65°C，使得引物能够与单链DNA互补配对。
最后，在延伸步骤中，温度升至72°C，DNA聚合酶沿着模板链合成新的DNA链。
3. 简述基因克隆的基本步骤。
基因克隆包括以下基本步骤：首先，通过限制性内切酶切割目的基因和载体DNA，产生粘性末端或平滑末端。
然后，使用DNA连接酶将目的基因与载体DNA连接，形成重组DNA分子。
接着，将重组DNA分子转入宿主细胞中，使其表达目的基因。
最后，筛选并鉴定含有目的基因的克隆细胞。
4. 解释什么是基因突变，并给出一个例子。
基因突变是指基因序列中发生的改变，包括碱基的替换、插入或缺失。
这些改变可能导致基因编码的蛋白质结构或功能发生改变。
例如，镰状细胞贫血症是一种由基因突变引起的遗传性疾病，该突变导致血红蛋白分子结构改变，使红细胞形状变为镰刀状。
5. 什么是转录和翻译过程？转录是DNA信息被复制成mRNA的过程，主要发生在细胞核中。
在这个过程中，RNA聚合酶沿着DNA模板链合成互补的mRNA分子。
翻译则是mRNA上的遗传信息被翻译成蛋白质的过程，发生在细胞质中的核糖体上。
核糖体根据mRNA上的密码子序列，将相应的氨基酸连接起来，形成多肽链，最终折叠成具有特定功能的蛋白质。
6. 描述限制性内切酶的作用及其在分子生物学中的应用。
限制性内切酶是一种能够识别特定DNA序列并在该序列处切割DNA双链的酶。
这种酶在分子生物学中有着广泛的应用，如基因克隆、基因工程、DNA指纹分析等。
2023-2024学年高中生物浙科版选修3第2章 克隆技术单元测试(含答案解析)
2023-2024学年浙科版高中生物单元测试学校 __________ 班级 __________ 姓名 __________ 考号 __________注意事项1．答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息;2．请将答案正确填写在答题卡上;一、选择题（本大题共计17小题每题3分共计51分）1.“生物导弹”是指（）A. 单克隆抗体B. 杂交瘤细胞C. 产生特定抗体的B淋巴细胞D. 在单抗上链接抗癌药物【答案】D【解析】解生物导弹是指单克隆抗体上连接放射性同位素、化学药物或细胞毒素能够借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞在原位杀死癌细胞．故选 D．2.美国德克萨斯州科学家培育出世界上第一只克隆猫这只小猫毛色花白看上去完全不像生养它的花斑猫妈妈也不完全像为它提供细胞核的基因猫妈妈．对该克隆猫毛色的解释合理的是（）①发生了基因突变②提供卵母细胞的雌猫细胞质基因进行了表达③表现型是基因型与环境共同作用的结果④代孕花斑猫妈妈的基因进行了表达．A. ①B. ①②③C. ②③④D. ①②③④【答案】B【解析】解①克隆猫不完全像为它提供细胞核基因的猫妈妈的原因可能是基因突变①正确②由于动物细胞的细胞质中的线粒体内含有少量的遗传物质DNA 所以提供卵细胞的雌猫细胞质基因能表达出性状②正确③基因的表达受环境因素的影响所以表现型是基因型与环境共同作用的结果③正确④生养它的花斑猫妈妈与小猫之间只有营养物质的交换没有基因的交流④错误．故选 B．3.下列有关植物组织培养的叙述正确的是（）A. 愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞B. 二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株C. 愈伤组织是一种细胞呈正方形、排列紧密的组织D. 植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养筛选而获得【答案】D【解析】解 A.愈伤组织是一团排列疏松而无规则、高度液泡化的、呈无定形状态的、用秋水仙素处理后得到的植株才能稳定遗传 B错误C.愈伤组织是高度渡泡化呈无定形的具有分生能力的薄壁细胞 C错误D.用特定的选择培养基可筛选出所需的突变体类型如植物耐盐突变体的筛选可利用加适量NaCl的培养基进行 D正确故选 D4.单克隆抗体在医疗、诊断等方面发挥着越来越重要的作用科学家米尔斯坦和科勒设计了一个用已免疫的B淋巴细胞制备单克隆抗体的实验如图为其实验流程图则相关的叙述或说法中不正确的是（）A. a是骨髓瘤细胞 b细胞遗传了其无限增殖的特性B. ①中常用的不同于植物细胞的诱导剂是灭活的病毒C. 经②过程筛选后得到的c包含多种杂交瘤细胞D. ③过程可通过体外培养或体内培养来生产单克隆抗体【答案】C【解析】解分析题图 a细胞是小鼠骨髓瘤细胞 b表示诱导细胞融合的杂交瘤细胞 c表示筛选出的杂交瘤细胞①过程是细胞融合②表示在选择性培养基上进行培养③是对杂交瘤细胞进行克隆化培养A.根据试题分析a是骨髓瘤细胞具有无限增殖的能力 b是已免疫的B淋巴细胞和a融合后的杂种细胞（杂交细胞、杂交瘤细胞） b具备双亲细胞的特性 A正确B.①过程是细胞融合动物细胞融合中在诱导手段上不同于植物细胞的方法是利用灭活的病毒诱导 B正确C.②表示在选择性培养基上进行培养从而将产生所需抗体的杂交瘤细胞从众多杂交瘤细胞中筛选出来得到的c为能产生所需抗体的单一种类的杂交瘤细胞 C错误D.③是对杂交瘤细胞进行克隆化培养该过程包括了体外培养和小鼠腹腔内培养 D正确故选 C5.多利羊的培育过程大致是将一只母羊( A )乳腺上皮细胞的核注入到另一母羊(B)去核的卵细胞中并进行电激融合卵裂至早期胚胎时移置至第三只母羊( C )的子宫内继续发育．经过140多天的怀孕期 C羊就产下了多利羊．与多利羊培育所属生殖类型相同的是（）A. 试管牛的培育B. 未受精的卵细胞直接发育成雄蜂C. 衣藻产生孢子后直接发育成新的衣藻D. 用四倍体与二倍体杂交得到三倍体西瓜植株【答案】C【解析】解多利羊培育是利用了细胞核移植技术属于无性生殖．A 、试管牛培育为体外受精属于有性生殖 A错误C 、衣藻产生孢子为无性孢子为无性生殖 C正确D、四倍体与二倍体杂交得到三倍体西瓜植株为有性生殖 D错误．故选 C．6.生产人工种子不受季节限制可能更快地培养出新品种还可以在凝胶包裹物里加入天然种子可能没有的有利成分使人工种子具有更加好的营养供应和抵抗疾病的能力从而获得更加茁壮生长的可能性下列不是人类发展人工种子原因的是（）A. 人工种子结构完整体积小便于储藏运输B. 人工种子技术可以克服不同物种间远缘杂交不亲和障碍C. 供制作人工种子的原料丰富、繁殖快可快速繁殖D. 制作人工种子时不受季节、地域的限制【答案】B【解析】解 A.人工种子结构完整、体积小便于储藏运输 A正确B.通过人工种子获得的个体遗传物质只能来自一种生物不能克服远缘杂交不亲和障碍B错误C.供制作人工种子的原料丰富、繁殖快可快速繁殖 C正确D.制作人工种子主要是在实验室中进行的不受季节、地域的限制 D正确故选 B7.有关单克隆抗体的制备下列叙述错误的是（）A. 将抗原注入小鼠体内从骨髓中分离出已免疫的B淋巴细胞B. 用灭活的病毒可促进己免疫的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合C. 用抗原﹣﹣抗体杂交法可以筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞D. 杂交瘤细胞株的增殖方式和产物分别是有丝分裂和单克隆抗体【答案】A【解析】A、将抗原注入小鼠体内从脾脏中分离出已免疫的B淋巴细胞 A错误B、动物细胞融合过程中可以利用灭活的仙台病毒作诱导剂促进己免疫的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 B正确C、用抗原﹣﹣抗体杂交法可以筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞 C正确D、杂交瘤细胞株的增殖方式和产物分别是有丝分裂和单克隆抗体 D正确8.下列有关植物细胞工程应用的叙述错误的是（）A. 用人工薄膜将愈伤组织包裹可形成人工种子B. 在紫草素的细胞产物工厂化生产的过程中使用的是液体培养基C. 对愈伤组织进行诱变处理从分化的植株中可筛选出新品种D. 利用植物组织培养技术培育的脱毒苗具有不含或很少含病毒的特点【答案】A【解析】解 A.用人工薄膜将胚状体包装后可制成人工种子 A错误B.在紫草素的细胞产物工厂化生产的过程中使用的是液体培养基 B正确C.在育种中可以对植物的愈伤组织进行诱变处理促使其发生突变再通过诱导分化形成植株从而培育成新品种 C正确D.一般选取植物的茎尖作材料利用植物组织培养技术培育脱毒苗其依据是茎尖不含病毒或含病毒极少 D正确故选Ａ9.人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白制备说法错误的是（）A. 早孕的诊断试剂盒之所以准确灵敏是因为单克隆抗体的特异性强、纯度高B. ②过程通过选择培养基筛选出的细胞都能产生抗HCG抗体C. ③过程经抗体检测呈阴性的杂交瘤细胞既能迅速大量增殖又能产生抗体D. ④过程能在体内进行也可在体外进行【答案】B【解析】解 A.早孕的诊断试剂盒之所以准确灵敏是因为单克隆抗体的特异性强、纯度高 A正确B.②过程通过选择培养基筛选出的细胞可能有骨髓瘤细胞自身融合的细胞不一定都能产生抗HCG抗体 B错误C.③过程经抗体检测呈阴性的杂交瘤细胞既能迅速大量增殖又能产生抗体 C正确D.④大规模培养过程能在体内进行也可在体外进行 D正确故选 B10.下列不属于克隆的一项是（）A. 将某个DNA片段利用PCR技术进行扩增B. 将草莓的匍匐茎压入泥土中长出新的草莓植株C. 将某种瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系D. 将小鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞【答案】D【解析】解克隆技术指从众多的基因或细胞群体中通过无性繁殖和选择获得目的基因或特定类型细胞的技术操作可从三个层面上理解（1）分子水平上的克隆指基因克隆（2）细胞水平上的克隆指细胞克隆（3）个体水平的克隆指个体的无性生殖A.将某个DNA片段利用PCR技术进行扩增是从分子水平上进行的克隆 A不符合题意B.将草莓的匍匐茎压入泥土中长出新的草莓植株属于无性生殖是个体水平的克隆 B不符合题意C.将某种瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系属于细胞培养是细胞水平的克隆 C不符合题意D.将小鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成的杂交瘤细胞其遗传物质发生了改变不属于克隆 D符合题意故选 D11.科学家将鱼的体细胞核植入雌鱼去核的卵细胞中该卵细胞可培育为克隆鱼．如图中能正确表示动物克隆技术原理的是（）B.C.D.【答案】C【解析】解 A、A图中是直接将精子与卵细胞融合不是核移植过程故A错误B、B图中是将2个体细胞核融合也不是核移植过程故B错误C 、C图中是将体细胞核取出移入去核卵细胞内与题意相符故C正确D、D图中是将卵细胞核与去核的体细胞融合与题意相反故D错误．故选C．12.下列同时属于基因工程和植物细胞工程实际应用的是（）A. 培育抗病毒植物B. 生产脱毒植株C. 制作“生物导弹”D. 培育单倍体【答案】A【解析】解培育抗病毒植物需要将抗病毒的相应目的基因经过转基因技术导入植物细胞再经过植物组织培养得到抗病毒植株是基因工程和植物细胞工程的应用故选 A13.如图是单克隆抗体制备过程示意图 1～6代表相关过程 a～e代表相关细胞以下叙述错误的是（）A. 过程1是给小鼠注射特定抗原蛋白以刺激小鼠产生相应抗体的B淋巴细胞B. c细胞有三种种类每种细胞染色体组数是相等的 e细胞是杂交瘤细胞C. 过程2的促融方法可以采用电融合技术这种技术能击穿核膜促使核融合D. 过程3是抗体检测及克隆产生阳性细胞的过程此过程要进行两次【答案】C【解析】14.如图表示一人工种子下列有关叙述不正确的是（）A. 人工种子一般用离体的植物细胞通过组织培养技术获得B. 人工种子能够克服季节、气候、地域的限制C. 同一批次的人工种子可以保证具有相同的基因型D. 胚状体是由未分化的、具有分裂能力的细胞组成【答案】D【解析】A、人工种子是用离体的植物细胞通过植物组织培养获得胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等然后包上人工种皮就形成了人工种子 A正确B、人工种子能够克服季节、气候、地域的限制 B正确C、人工种子是由离体的组织或细胞培养而来的属于无性繁殖具有相同的遗传物质因此同一批次的人工种子可以保证具有相同的基因型 C正确D、胚状体已具有根、芽的分化仍然具有分裂能力 D错误15.如图为制备人工种子部分流程示意图下列叙述正确的是（）A. 胚状体是外植体在培养基上脱分化形成的一团愈伤组织B. 该过程以海藻酸钠作为营养成分以\ CaCl_2溶液作为凝固剂C. 可在海藻酸钠溶液中添加蔗糖为胚状体提供碳源D. 包埋胚状体的凝胶珠能够隔绝空气有利于人工种子的储藏【答案】C【解析】A、外植体在培养基上脱分化形成的愈伤组织再分化才能形成胚状体 A错误B、该过程以海藻酸钠作为包埋材料以CaCl_2溶液作为凝固剂 B错误C、可在海藻酸钠溶液中添加蔗糖为胚状体提供碳源和能量 C正确D、包埋胚状体的凝胶珠能够保护胚状体有利于人工种子的储藏 D错误16.利用细胞工程方法以H7N9病毒颗粒外膜表面糖蛋白为抗原制备出单克隆抗体下列相关叙述错误的是（）A. 用纯化的糖蛋白反复注射到小鼠体内提取的血清抗体具有异质性B. 经多次抗体检验得到的阳性杂交瘤细胞可注射到小鼠腹水中继续培养C. 利用该单克隆抗体通过抗原—抗体杂交技术可诊断出H7N9病毒感染者【答案】D【解析】解 A. 将纯化的糖蛋白作为抗原反复注射到小鼠的体内一段时间后从小鼠体内提取出血清抗体该血清抗体只针对H7N9病毒发挥作用所以具有异质性 A正确B. 多次检验后得到的阳性杂交瘤细胞可以冻存起来既可以在体外进行培养也可以在体内（小鼠腹腔）进行培养 B正确C.该单克隆抗体是针对H7N9病毒的具有特异性可与抗原发生特异性反应通过抗原—抗体杂交技术诊断患者 C正确D.杂交瘤细胞是在制备单克隆抗体过程中用骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合而成的两个二倍体细胞融合后产生的杂交细胞是四倍体 D错误故选 D17.下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解请根据图分析下列四个选项其中说法不正确的一项是（）A. 单克隆抗体制备过程的顺序是B. H阶段的细胞分泌的抗体能与特定抗原结合C. 单克隆抗体具有能准确识别抗原的细微差异、与特定抗原发生特异性结合并可以大量制备的优点所以可以制成“抗体—药物偶联物”D. 由图中可看出此过程运用的技术手段有动物细胞融合和动物组织培养【答案】D【解析】解 A.单克隆抗体制备过程包括获取免疫能力的效应B细胞和骨髓瘤细胞、诱导细胞融合和筛选出杂交瘤细胞、克隆化培养和抗体检测并筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞、体外或体内培养杂交瘤细胞、获取大量单克隆抗体因此按单克隆制备过程的顺序是 A正确B.H阶段的细胞为筛选完的能分泌特定抗体的杂交瘤细胞故分泌的抗体能与特定抗原结合 B正确C.单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高并可以大量制备的优点与抗癌药物结合可制成可以制成“生物导弹”（“抗体一药物偶联物”） C正确D.此过程运用的技术手段有动物细胞融合和动物细胞培养 D错误故选 D二、解答题（本大题共计8小题每题10分共计80分）18.（1）转基因动物通过分泌的乳汁来生产所需要的药品称为乳腺生物反应器将药用________的方法导入哺乳动物的________中然后使其生长发育成转基因动物18.（2）上述实验前必须给小鼠甲注射H-Y抗原该处理的目的是___________________________18.（3）实践中常用________作为促融剂以提高细胞融合的成功率18.（4）写出以小鼠甲的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要实验步骤________________________________________________________________________________18.（5）研究发现在小鼠细胞内DNA的合成有两条途径主要途径（简称D途径）是在细胞内由氨基酸和其他小分子化合物合成核苷酸进而合成DNA的过程该过程中叶酸必不可少氨基蝶呤是叶酸的拮抗剂可以阻断此途径另一辅助途径（简称S途径）是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下经酶的催化作用合成DNA 骨髓瘤细胞缺乏催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷合成的酶①图中筛选1利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分其中添加的______________________具有筛选杂交瘤细胞的作用骨髓瘤细胞及其互相融合细胞不能在HAT培养基上增殖其原因是______________________②图中筛选2含多次筛选筛选所依据的基本原理是____________________ 筛选的目的是_____________________________________________________18.（6）通常选用囊胚期的早期胚胎做雌雄鉴别鉴别后的_____________________胚胎符合要求可做胚胎移植【答案】（1）启动子, 显微注射, 受精卵【解析】解（1）用转基因动物生产药物通常将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起通过显微注射法等方法导入哺乳动物的受精卵中最终培育的转基因动物进入泌乳期后可以通过分泌的乳汁生产所需要的药物【答案】（2）诱导小鼠甲产生能够分泌H-Y抗体的B淋巴细胞【解析】（2）实验前给小鼠注射H-Y抗原是为了诱导小鼠产生能够分泌抗H-Y抗体的B淋巴细胞【答案】（3）聚乙二醇【解析】（3）为了将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合实践中常用聚乙二醇（或灭活的病毒）作为促融剂以提高细胞融合的成功率【答案】（4）取小鼠甲脾脏剪碎用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞加入培养液制成单细胞悬液【解析】（4）以小鼠甲的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要实验步骤取小鼠甲脾脏剪碎要想动物细胞分散需要用胰蛋白酶处理根据酶的专一性破坏细胞之间的联系使其分散成单个细胞【答案】（5）①氨基蝶呤, 缺乏催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷合成的酶无法合成次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷, ②抗体与抗原特异性结合, 获得能产生专一抗体的杂交瘤细胞【解析】（5）①由题干可知氨基嘌呤可以阻断在细胞内由氨基酸和其他小分子化合物合成核苷酸进而合成DNA的过程而骨髓瘤细胞的DNA合成没有其他辅助途径（骨髓瘤细胞缺乏催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷合成的酶无法合成次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷）因此配制的HAT培养基中添加氨基嘌呤的成分骨髓瘤细胞及其互相融合细胞不能增殖从而具有筛选杂交瘤细胞的作用②图中筛选2含多次筛选目的是选育出能产生专一抗体的杂交瘤细胞原理是抗原和抗体的特异性结合【答案】（6）雌性【解析】（6）雌性可以产生乳汁通常选用桑椹胚或囊胚期的胚胎做雌雄鉴别鉴别后的雌性胎可做胚胎移植19.（1）淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合成一个细胞此过程常用________作为诱导剂该细胞的特点是________19.（2）杂交瘤细胞的体外培养液与植物组织培养的培养基相比需加入动物血清也需要加入适量CO_2 添加CO_2的原因是________ 通过体外培养液获得的单克隆抗体的纯度不能达到100%其原因是________19.（3）在单克隆抗体制备过程中需要两次筛选第一次筛选需用________培养基选择出________ 第二次筛选采用________反应选择出能产生所需要的特定抗体的杂交瘤细胞将其注入小鼠腹腔小鼠为细胞提供的条件有适宜的营养、温度、pH 此外健康小鼠的________也抑制了体内外的病原体对培养细胞的影响【答案】聚乙二醇, 既能大量增殖又能产生单克隆抗体【解析】淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合成一个细胞此过程常用聚乙二醇作为诱导剂该细胞的特点是既能大量增殖又能产生单克隆抗体【答案】调节培养液的pH, 血清中含有其它抗体【解析】杂交瘤细胞的体外培养液与植物组织培养的培养基相比需加入动物血清也需要加入适量CO_2 添加CO_2的原因是调节培养液的pH．通过体外培养液获得的单克隆抗体的纯度不能达到100%其原因是血清中含有其它抗体【答案】选择, 杂交瘤细胞, 抗原﹣抗体, 免疫系统【解析】在单克隆抗体制备过程中需要两次筛选第一次筛选需用培养基选择出杂交瘤细胞第二次筛选采用抗原﹣抗体反应选择出能产生所需要的特定抗体的杂交瘤细胞将其注入小鼠腹腔小鼠为细胞提供的条件有适宜的营养、温度、pH 此外健康小鼠的免疫系统也抑制了体内外的病原体对培养细胞的影响20.（1）注射特定抗原后小鼠体内会产生能与________特异性结合的抗体诱导A、F融合得到D的原理是________20.（2）单克隆抗体制备过程中一定要进行D→H步骤的原因是________________________________________ 得到的抗体检验呈阳性的细胞具有________________________的特性20.（3）体外培养阳性细胞时为保证阳性细胞处于无菌无毒的环境对培养液的处理包括灭菌、添加一定量的抗生素此外还要________ 以防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成伤害【答案】（1）A蛋白, 细胞膜的流动性【解析】解（1）注射特定抗原后小鼠体内会产生能与A蛋白特异性结合的抗体诱导A、F融合得到D的原理是细胞膜的流动性【答案】（2）小鼠还会接受除A蛋白之外的多种抗原刺激从小鼠体内分离到的多种B淋巴细胞经细胞融合后会产生多种杂交瘤细胞, 既能无限增殖又能产生专一抗体【解析】（2）得到的抗体检验呈阳性的细胞具有的特性既能无限增殖又能产生专一抗体【答案】（3）定期更换培养液【解析】（3）体外培养阳性细胞时为保证阳性细胞处于无菌无毒的环境对培养液的处理包括灭菌、添加一定量的抗生素此外为防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成伤害要定期更换培养液21.（1）利用植物组织培养对马铃薯脱毒宜选用马铃薯的________（填“茎尖”或“叶片”）部位进行组织培养不选另外一个部位的理由是________ 其培育成功所依据的原理是________21.（2）建立无菌体系时通常使用________对外植体进行消毒处理后要用________清21.（3）以增殖和分化阶段产生的不定芽、胚状体为材料通过人工种皮（人工薄膜）包装得到人工种子在适宜条件下同样能够萌发长成幼苗人工种皮的成分中除了有机碳、无机盐外还可添加________________________等物质以促进人工种子的生长发育和提高抗病菌的能力与天然种子相比人工种子的显著优点有_____________________________________________________________________ （至少答出2点）【答案】（1）茎尖, 叶片细胞带病毒（病毒载量大）, 植物细胞的全能性【解析】解（1）培育脱毒马铃薯时外植体宜选用茎尖原因是茎尖细胞几乎不含病毒且全能性较高不宜选用叶片原因是叶片细胞带病毒（病毒载量大）、细胞的全能性低其培育成功所依据的原理是植物细胞的全能性【答案】（2）体积分数为70%的酒精, 无菌水【解析】（2）建立无菌体系时通常使用体积分数为70%的酒精对外植体进行消毒处理后要用无菌水清洗【答案】（3）植物生长调节剂（植物激素）、矿质元素、农药, 不受季节、气候和地域的限制一般不会出现性状分离能保持优良品种的遗传特性方便贮存和运输【解析】（3）人工种子培养过程通过组织培养技术可把植物组织的细胞培养成在形态及生理上与天然种子胚相似的胚状体然后将它包埋于有一定营养成分和保护功能的介质中人工种皮的成分中除有机碳、无机盐外还可添加植物生长调节剂、矿质元素、农药等物质用以促进人工种子的生长发育、提高抵抗病菌的能力与天然种子相比人工种子的优点是能保持亲本的优良性状、生产不受季节限制、可大量快速生产等22.（1）克隆动物是________（填“有性”或“无性”）生殖的产物22.（2）克隆产生的动物表现型与体细胞供体动物接近但不是对体细胞供体动物100%的复制理由是________22.（3）为了提高动物细胞克隆成功率可以选择适宜的培养基添加________等天然成分以滋养细胞支持其生长克隆动物除了用到动物细胞工程的技术手段外还必须用到________、________等胚胎工程技术手段22.（4）若要鉴别XY型性别决定的动物胚胎的性别可以获取该种动物囊胚的________细胞并提取其DNA 用Y染色体上特异性DNA做探针检测这种技术称为________【答案】无性【解析】克隆动物是利用体细胞进行细胞核移植得到的故属于无性生殖的产物【答案】克隆动物绝大部分DNA来自于供体细胞核但其核外还有少量的DNA是来自于受体卵母细胞此外核供体动物生活的环境与克隆动物所生活的环境不会完全相同【解析】由于克隆动物绝大部分DNA来自于供体细胞核但其核外还有少量的DNA如线粒体中的DNA是来自于受体卵母细胞此外核供体动物生活的环境与克隆动物所生活的环境不会完全相同所以克隆产生的动物表现型与体细胞供体动物接近但不是对体细胞供体动物100%的复制【答案】动物血清, 早期胚胎培养, 胚胎移植技术【解析】为了提高动物细胞克隆成功率可以选择适宜的培养基添加动物血清等天然成分以滋养细胞支持其生长克隆动物除了用到动物细胞工程的技术手段外还必须用到早期胚胎培养、胚胎移植技术等胚胎工程技术手段【答案】滋养层, DNA分子杂交技术【解析】若要鉴别XY型性别决定的动物胚胎的性别可以获取该种动物囊胚的滋养层细胞并提取其DNA 用Y染色体上特异性DNA做探针检测这种技术称为DNA分子杂交技术属于分子水平。
高三生物克隆技术试题答案及解析
高三生物克隆技术试题答案及解析1.以下为植物体细胞杂交技术流程图，其中甲和乙分别表示两种二倍体植物细胞，所含有的染色体组分别是AA和BB。
据图分析正确的是A．图中①过程通常用纤维素酶和果胶酶作用，目的是获得原生质体B．过程②一般使用聚乙二醇作为诱导剂，也可用电激或离心的方法C．经过②和③过程形成的c细胞只有AABB这一种类型D．该过程的目的是获得杂种细胞，优点是克服远缘杂交不亲和障碍【答案】AB【解析】①过程是植物细胞去细胞壁的过程，要用纤维素酶和果胶酶分别水解纤维素和果胶，获得原生质体，A正确；过程②是诱导细胞融合，常使用聚乙二醇作为诱导剂，也可用电激或离心的方法，B正确；细胞融合的结果三种：AAAA、BBBB、AABB，另有些细胞可能没有融合，所以共有五种细胞：AAAA、BBBB、AABB、AA、BB，C错误；该过程的目的是获得杂种植物，优点是克服远缘杂交不亲和障碍，D错误。
【考点】本题考查植物体细胞杂交的知识。
意在考查能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，能用文字、图表以及数学方式等多种表达形式准确地描述生物学方面的内容。
能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论的能力。
2.下列有关植物的克隆的相关叙述中，正确的是A．水稻等植物在多次继代培养后，其细胞全能性的表达能力会丧失B．植物组织培养过程中植物器官的发生主要通过营养物质的配比进行调节C．植物组织培养过程中，培养物的胚胎发生和器官形成能力下降的可能原因有染色体畸变、细胞核变异或非整倍体产生等，但其结果是可逆的D．原生质体培养需要先对原生质体的活力进行检测，可以采用质壁分离的方法【答案】A【解析】不同种类植物或同种植物的不同基因型个体之间遗传性的差异，细胞全能性的表达程度大不相同，如拟南芥等培养细胞很容易再生出新植株，并能在多个世代中保持细胞全能性的表达，而小麦、水稻等在多次继代培养后，会丧失其全能性的表达能力，A正确；植物组织培养过程中植物器官的发生主要通过植物激素的配比进行调节，故B错误；植物组织培养过程中，培养物的胚胎发生和器官形成能力下降的可能原因有染色体畸变、细胞核变异或非整倍体产生等，其结果是不可逆的，故C错误；原生质体培养需要先对原生质体的活力进行检测，细胞壁已经去除，所以不能采用质壁分离的方法，可以根据形态待征判断其活力，如原生质体呈绿色（若来源于叶片）及圆而鼓者为活原生质体，故D错误。
2019届浙科版克隆技术单元 测试
克隆技术一、单选题1．有关植物体细胞杂交的叙述，错误的是A．有可能把两个植物体的优良性状集中在杂种植株上B．需要用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁C．利用聚乙二醇可以促进原生质体融合D．植物体细胞杂交就是将不同的植物体细胞融合成杂种细胞【答案】D【解析】试题分析：A．植物体细胞杂交技术是把两个不同物种的植物体细胞融合后诱导成杂种植株，有可能把两个植物体的优良性状集中在杂种植株上，A正确；B．植物体细胞杂交需要用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，B错误；C．诱导不同种植物原生质体融合的方法是物理法和化学法（聚乙二醇），C错误；D．植物体细胞杂交就是将不同的植物体细胞融合成杂种细胞，然后通过植物组织培养成为杂种植株的技术，D错误。
考点：植物的组织培养【名师点睛】植物体细胞杂交过程中杂种细胞类型及检测方法（1）诱导产物（假设用于杂交的两种植物细胞分别为A、B）：①未融合的细胞：A和B。
②两两融合的细胞：AA、BB和AB。
③多细胞融合体。
（2）检测方法：对诱导产物中的细胞进行植物组织培养，然后根据得到的植物性状进行判断。
①若只表现出一种植物的性状，说明是未融合细胞。
②若得到的是具有两种亲本性状的植物，说明是杂种植株。
③若得到的是两种亲本性状的植物，且一种植物的性状得到加强，则是多细胞融合体。
④若得到的是一种植物的性状，但是效果得到加强，则是同种细胞融合的结果。
2．某研究小组为测定药物对体外培养细胞的毒性，准备对某种动物的肿瘤细胞(甲)和正常细胞(乙)进行动物细胞培养。
下列说法正确的是()A．在利用两种组织块制备细胞悬液时，也可用胃蛋白酶处理B．细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞的呼吸C．两种细胞都会在贴壁生长时发生接触抑制现象D．在持续的传代培养过程中，乙会出现停止增殖的现象【答案】D【解析】试题分析：利用两种动物组织块进行制备细胞悬液时，一般用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，不能用胃蛋白酶，因为其最适PH呈酸性，故A错误；细胞培养过程中所用的气体培养箱中有二氧化碳，作用是维持培养液的PH，故B错误；肿瘤细胞由于糖蛋白减少，没有接触抑制现象，而正常细胞会出现接触抑制现象，故C错误，D正确。
育种中功能性基因的克隆与转移考核试卷
B.使用组成型启动子
C.减少转移基因的长度
D.增加转移基因的长度
17.关于基因克隆，以下哪种说法是正确的？（）
A.克隆的基因可以直接用于转移和表达
B.克隆的基因需要进行序列分析
C.克隆的基因无法在异源生物体中表达
D.克隆的基因只能用于同源生物体
18.功能性基因转移技术在动物育种中的应用不包括以下哪项？（）
2.农杆菌介导的转化法利用农杆菌将外源基因转移到植物细胞中，原理是利用农杆菌的Ti质粒与植物细胞融合，通过植物自身的DNA修复机制整合外源基因。
3.基因沉默可能是由于外源基因与宿主基因组的不兼容性、甲基化、基因位置效应等原因。减少基因沉默的方法包括使用强启动子、优化基因序列、使用组织特异性启动子等。
A.食品安全
B.环境安全
C.生物多样性
D.转基因生物的竞争力
11.以下哪些方法可以用来减少转基因植物中外源基因的沉默现象？（）
A.使用不同的启动子
B.提高转基因的拷贝数
C.优化外源基因的序列
D.使用不同的转化方法
12.功能性基因转移在农业上的应用包括以下哪些方面？（）
A.提高作物的抗病性
B.提高作物的耐盐性
8.在动物育种中，功能性基因转移可以用于以下哪些目的？（）
A.提高动物的生长速度
B.改善动物产品的品质
C.增强动物对疾病的抵抗力
D.改变动物的性别比例
9.以下哪些技术可以用于功能性基因的克隆？（）
A. PCR
B. RT-PCR
C. Southern blot
D. Northern blot
10.转基因生物的安全性问题包括以下哪些方面？（）
A.提高动物的生长速度
2023-2024学年高中生物浙科版选修3第2章 克隆技术单元测试(含答案解析)
2023-2024学年浙科版高中生物单元测试学校 __________ 班级 __________ 姓名 __________ 考号 __________注意事项1．答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息;2．请将答案正确填写在答题卡上;一、选择题（本大题共计16小题每题3分共计48分）1.拟采用“取材→消毒→愈伤组织培养→出芽→生根→移栽”的方法繁殖一种名贵花卉下列有关叙述错误的是（）A. 消毒的原则是既要杀死材料表面的微生物又要减少消毒剂对细胞的伤害B. 在愈伤组织培养基中加入细胞融合的诱导剂可获得染色体加倍的细胞C. 出芽是外植体经细胞脱分化后再分化的结果受基因选择性表达的调控D. 诱导分化生长物生根时培养基中通常含有NAA等植物生长调节剂【答案】B【解析】解 A.消毒指用比较温和的物理或化学方法清除或杀灭除芽胞外的所有病原微生物使其数量减少达到无害化 A正确B.愈伤组织细胞含有细胞壁加入细胞融合诱导剂不会诱导细胞融合因此不会得到染色体加倍的细胞 B错误C.愈伤组织再分化形成胚状体后一般先形成芽再形成根而分化的实质是基因的选择性表达 C正确D.诱导分化生长物生根时培养基中通常含有NAA等植物生长调节剂 D正确故选 B2.利用细胞工程方法以H7N9病毒颗粒外膜表面糖蛋白为抗原制备出单克隆抗体下列相关叙述错误的是（）A. 用纯化的糖蛋白反复注射到小鼠体内提取的血清抗体具有异质性B. 经多次抗体检验得到的阳性杂交瘤细胞可注射到小鼠腹水中继续培养C. 利用该单克隆抗体通过抗原—抗体杂交技术可诊断出H7N9病毒感染者D. 经灭活的仙台病毒诱导融合并筛选得到的杂交瘤细胞具有二倍体核型【答案】D【解析】解 A. 将纯化的糖蛋白作为抗原反复注射到小鼠的体内一段时间后从小鼠体内提取出血清抗体该血清抗体只针对H7N9病毒发挥作用所以具有异质性 A正确B. 多次检验后得到的阳性杂交瘤细胞可以冻存起来既可以在体外进行培养也可以在体内（小鼠腹腔）进行培养 B正确C.该单克隆抗体是针对H7N9病毒的具有特异性可与抗原发生特异性反应通过抗原—抗体杂交技术诊断患者 C正确D.杂交瘤细胞是在制备单克隆抗体过程中用骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合而成的两个二倍体细胞融合后产生的杂交细胞是四倍体 D错误故选 D3.下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图请根据图分析下列说法不正确的一项是（）A. 单克隆抗体制备过程的顺序是B. 在单克隆抗体制备过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有在体外大量繁殖、产生特异性抗体的特性C. 由图中可看出此过程运用的技术手段有动物细胞融合和动物组织培养D. “生物导弹”的成分为单克隆抗体加药物【答案】C【解析】解 A.单克隆抗体制备过程包括获取免疫能力的效应B细胞和骨髓瘤细胞、诱导细胞融合和筛选出杂交瘤细胞、克隆化培养和抗体检测并筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞、体外或体内培养杂交瘤细胞、获取大量单克隆抗体因此按单克隆制备过程的顺序用箭头把代表各图解的字母连接为 A正确B.在单克隆抗体制备过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞是因为它们融合后的D杂交瘤细胞具有在体外大量繁殖、产生特异性抗体的特性 B正确C.此过程运用的技术手段有动物细胞培养和动物细胞融合技术 C错误D.“生物导弹”的成分为单克隆抗体加药物 D正确故选 C4.下列关于克隆动物的说法正确的是（）A. 动物难以克隆的根本原因是基因组中的基因不完整B. 克隆羊多利是利用胚胎干细胞进行核移植所得的个体C. 核移植后的重组细胞在最初分裂时就完成了DNA的复制和基因的转录D. 克隆羊多利的成功证明了高度分化细胞经过一定技术处理也可回复到类似受精卵时期的功能【答案】D【解析】解 A、动物的体细胞均来自受精卵的有丝分裂因此细胞核中的基因组都相同A错误B、克隆羊多利是利用成年的体细胞进行核移植所得的个体 B错误C 、重组细胞最初分裂时虽然复制了DNA 但基因转录并未开始 C错误D、克隆羊多利的成功证明了动物细胞核具有全能性 D正确．故选 D．5.下面是制备单克隆抗体的过程示意图相关叙述错误的是（）A. ①表示从已免疫的小鼠的脾脏中提取B淋巴细胞B. ②过程常用灭活的病毒促进细胞融合不可用聚乙二醇C. ④中的筛选是通过抗原一抗体反应进行的D. ⑤是经过筛选后得到的既能无限增殖又产生特定抗体的细胞群【答案】B【解析】A、①表示从小鼠的脾脏中提取B淋巴细胞 A正确B、②促进细胞融合的方法可以利用聚乙二醇作介导也可以用灭活的病毒 B错误C、④如果要筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞可以通过检测抗原一抗体反应如果有反应说明表达了抗体 C正确D、⑤是经过筛选后得到的杂交瘤细胞既能无限增殖又能产生单一抗体 D正确6.有关单克隆抗体的制备下列叙述错误的是（）A. 将抗原注入小鼠体内从骨髓中分离出已免疫的B淋巴细胞B. 用灭活的病毒可促进己免疫的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合C. 用抗原﹣﹣抗体杂交法可以筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞D. 杂交瘤细胞株的增殖方式和产物分别是有丝分裂和单克隆抗体【答案】A【解析】A、将抗原注入小鼠体内从脾脏中分离出已免疫的B淋巴细胞 A错误B、动物细胞融合过程中可以利用灭活的仙台病毒作诱导剂促进己免疫的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 B正确C、用抗原﹣﹣抗体杂交法可以筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞 C正确D、杂交瘤细胞株的增殖方式和产物分别是有丝分裂和单克隆抗体 D正确7.下列有关人工种子的叙述不正确的是（）A. 人工种子的人工种皮中含有胚状体发育所需要的营养物质还可以添加农药和植物激素B. 人工种子可以工业化生产播种人工种子可节省大量的粮食C. 人工种子克服了有些作物品种繁殖能力差结子困难或发芽率低等问题D. 人工种子的胚状体还未分化出胚芽、胚轴和胚根等结构【答案】D【解析】解A、人工种皮中可加入适量的养分、无机盐、有机碳源以及农药、抗生素、有益菌等也可添加植物生长调节剂以调节植物的生长发育 A正确B、人工种子可以工业化生产播种人工种子可节省大量的粮食 B正确C 、人工种子具有很多优点如解决有些作物品种繁殖能力差、结籽困难、发芽率低等问题 C正确D、人工种子的胚状体已经分化出胚芽 D错误．故选 D．8.下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解请根据图分析下列四个选项其中说法不正确的一项是（）A. 单克隆抗体制备过程的顺序是B. H阶段的细胞分泌的抗体能与特定抗原结合C. 单克隆抗体具有能准确识别抗原的细微差异、与特定抗原发生特异性结合并可以大量制备的优点所以可以制成“抗体—药物偶联物”D. 由图中可看出此过程运用的技术手段有动物细胞融合和动物组织培养【答案】D【解析】解 A.单克隆抗体制备过程包括获取免疫能力的效应B细胞和骨髓瘤细胞、诱导细胞融合和筛选出杂交瘤细胞、克隆化培养和抗体检测并筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞、体外或体内培养杂交瘤细胞、获取大量单克隆抗体因此按单克隆制备过程的顺序是 A正确B.H阶段的细胞为筛选完的能分泌特定抗体的杂交瘤细胞故分泌的抗体能与特定抗原结合 B正确C.单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高并可以大量制备的优点与抗癌药物结合可制成可以制成“生物导弹”（“抗体一药物偶联物”） C正确D.此过程运用的技术手段有动物细胞融合和动物细胞培养 D错误故选 D9.下列同时属于基因工程和植物细胞工程实际应用的是（）A. 培育抗病毒植物B. 生产脱毒植株C. 制作“生物导弹”D. 培育单倍体【答案】A【解析】解培育抗病毒植物需要将抗病毒的相应目的基因经过转基因技术导入植物细胞再经过植物组织培养得到抗病毒植株是基因工程和植物细胞工程的应用故选 A10.如图为制备人工种子部分流程示意图下列叙述不正确的是（）A. 胚状体是外植体在培养基上脱分化形成的一团愈伤组织B. 该过程以海藻酸钠作为包埋材料以CaCl_2溶液作为凝固剂C. 可在海藻酸钠溶液中添加蔗糖为胚状体提供碳源和能量D. 包埋胚状体的凝胶珠能够保护胚状体有利于人工种子的储藏【答案】A【解析】A、外植体在培养基上脱分化形成的愈伤组织再分化才能形成胚状体 A错误B、该过程以海藻酸钠作为包埋材料以CaCl_2溶液作为凝固剂 B正确C、可在海藻酸钠溶液中添加蔗糖为胚状体提供碳源和能量 C正确D、包埋胚状体的凝胶珠能够保护胚状体有利于人工种子的储藏 D正确11.单克隆抗体的应用包括以下哪几项（）①作为诊断试剂②构建人造皮肤③“生物导弹”④用于基因治疗A. ①③B. ①②③C. ②③D. ①③④【答案】A【解析】①单克隆抗体最主要的用途是作为诊断试剂①正确②单克隆抗体不能用于构建人造皮肤②错误③单克隆抗体可用于制备“生物导弹” ③正确④基因治疗需要采用基因工程技术单克隆抗体不能用于基因治疗④错误12.在“内蒙古白绒羊种羊场”诞生了目前国际上规模最大的一批转基因克隆绒山羊．克隆有不同的水平下列不属于克隆技术的是（）A. 幼龄动物的细胞在体外离体培养成细胞系B. 使某些特定的外源基因在哺乳动物体内表达C. 农业生产上利用马铃薯的芽繁殖马铃薯D. DNA分子的体外扩增【答案】B【解析】解 A、幼龄动物的细胞在体外离体培养成细胞系为动物细胞培养属于细胞克隆 A错误B、使某些特定的外源基因在哺乳动物体内表达属于基因工程不属于克隆 B正确C 、农业生产上利用马铃薯的芽繁殖马铃薯属于个体克隆 C错误D、DNA分子的体外扩增属于分子克隆 D错误．故选 B．13.下列事例中不属于克隆的是（）A. 通过PCR获取目的基因B. 用液体培养基扩大培养大肠杆菌C. 花生种子发育成完整植株D. 通过动物细胞培养得到相应的细胞【答案】C【解析】A、通过PCR获取目的基因属于分子水平上的克隆 A错误B、用液体培养基扩大培养大肠杆菌属于细胞水平上的克隆 B错误C、花生种子发育成完整植株属于自然生长过程不属于克隆 C正确D、通过动物细胞培养得到相应的细胞属于细胞克隆 D错误14.如图为烟草植物组织培养过程的流程图下列有关叙述正确的是（）A. 经过过程② 细胞的形态和结构未发生变化B. 过程③表示脱分化其实质是基因的选择性表达C. 植物组织培养的培养基中不需要加入有机营养物质D. 组织培养可用于培育转基因植物或生产某些中药【答案】D【解析】解 A.过程②为脱分化形成愈伤组织细胞的形态和结构发生变化 A错误B.过程③为再分化形成胚状体其实质是基因的选择性表达 B错误C.植物组织培养的培养基的成分水、琼脂、无机盐、蔗糖、植物激素（生长素细胞分裂素）等需要加入有机营养物质 C错误D.组织培养可用于培育转基因植物或生产某些中药此为该技术的应用 D正确故选 D15.下列有关人工种子的叙述不正确的是（）A. 通过微型繁殖技术获得B. 主体部分是脱分化形成的愈伤组织C. 人工胚乳可以提供营养D. 可能含有不同种生物的遗传物质【答案】B【解析】解 A、人工种子是通过微型繁殖技术（植物组织培养技术）获得 A正确B、人工种子的主体部分是经过脱分化和再分化过程形成的胚状体 B错误C 、人工胚乳可为人工种子提供营养 C正确D、人工种子中可能含有不同种生物的遗传物质如通过植物体细胞杂交技术获得的人工种子 D正确．故选 B．16.下列不属于克隆的一项是（）A. 将某个DNA片段利用PCR技术进行扩增B. 将草莓的匍匐茎压入泥土中长出新的草莓植株C. 将某种瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系D. 将小鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞【答案】D【解析】解克隆技术指从众多的基因或细胞群体中通过无性繁殖和选择获得目的基因或特定类型细胞的技术操作可从三个层面上理解（1）分子水平上的克隆指基因克隆（2）细胞水平上的克隆指细胞克隆（3）个体水平的克隆指个体的无性生殖A.将某个DNA片段利用PCR技术进行扩增是从分子水平上进行的克隆 A不符合题意B.将草莓的匍匐茎压入泥土中长出新的草莓植株属于无性生殖是个体水平的克隆 B不符合题意C.将某种瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系属于细胞培养是细胞水平的克隆 C不符合题意D.将小鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成的杂交瘤细胞其遗传物质发生了改变不属于克隆 D符合题意故选 D二、解答题（本大题共计8小题每题10分共计80分）17.（1）与乙细胞相比甲细胞应该具有______________能力将H1N1病毒外壳注入小鼠体内的目的是________________________________17.（2）灭活的病毒能够使甲、乙细胞融合是因为病毒表面含有的___________________________能够与细胞膜上的_________________发生作用使细胞发生融合17.（3）为了得到最终所要的丙细胞需经过两次筛选请对两次筛选的目的进行简单描述___________________________________________________________________________ ____________17.（4）最终得到符合要求的丙细胞可在体外大规模培养也可注射到小鼠腹腔中进行增殖前者所用的培养基按物理性质应属于__________________ 在培养基中加抗生素的目的是_______________________________【答案】（1）无限增殖, 产生能分泌特异性抗体的乙细胞【解析】解（1）与乙细胞相比甲细胞应该具有无限增殖能力将H1N1病毒外壳注入小鼠体内的目的是产生能分泌特异性抗体的乙细胞【答案】（2）糖蛋白和一些酶, 糖蛋白【解析】（2）灭活的病毒能够使甲、乙细胞融合是因为病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用使细胞发生融合【答案】（3）第一次筛选是为了得到甲细胞和乙细胞的杂交瘤细胞第二次筛选为了得到能产生专一性抗体的杂交瘤细胞【解析】（3）为了得到最终所要的丙细胞需经过两次筛选两次筛选的目的第一次筛选是为了得到甲细胞和乙细胞的杂交瘤细胞第二次筛选为了得到能产生专一性抗体的杂交瘤细胞【答案】（4）液体培养基, 防止杂菌污染培养液【解析】（4）最终得到符合要求的丙细胞可在体外大规模培养也可注射到小鼠腹腔中进行增殖前者所用的培养基按物理性质应属于液体培养基在培养基中加抗生素的目的是防止杂菌污染培养液18.（1）细胞A的名称是________ 与通过传统方法获得的抗体相比通过上述两种途径得到的单克隆抗体具有的显著优点是________18.（2）通过过程④________可获得V1基因用________技术可以获得更多的V1基因18.（3）抗体1与抗体2的氨基酸排列顺序相同两者的生物活性________（填“相同”或“不相同”）原因是________18.（4）除通过上述途径获得的单克隆抗体外请再写一种目前应用动物细胞工程技术生产的生物制品 ________【答案】浆细胞, 特异性强、灵敏度高、可大量制备【解析】由图示可知细胞A的名称是浆细胞与通过传统方法获得的抗体相比通过上述两种途径得到的单克隆抗体具有的显著优点是特异性强、灵敏度高、可大量制备【答案】逆转录, PCR【解析】由图示可知通过过程④逆转录可获得V1基因用PCR技术可以获得更多的V1基因【答案】不相同, 抗体2是大肠杆菌产生的其形成过程没有经过内质网和高尔基体的加工抗体1是杂交瘤细胞产生的其形成过程经过了内质网和高尔基体的加工【解析】抗体1与抗体2的氨基酸排列顺序相同两者的生物活性不相同原因是抗体2是大肠杆菌产生的其形成过程没有经过内质网和高尔基体的加工抗体1是杂交瘤细胞产生的其形成过程经过了内质网和高尔基体的加工【答案】疫苗、干扰素、酶、激素等【解析】应用动物细胞工程技术生产的生物制品很多如疫苗、干扰素、酶、激素等19.（1）通过细胞工程制备单克隆抗体的方法是将从小鼠脾脏中提取的已免疫B淋巴细胞与小鼠__________________相融合经选择性培养基筛选出的杂种细胞还需要进行____________________ 其目的是______________________________________________ 19.（2）利用抗癌的单克隆抗体等制成的“生物导弹”能在原位杀死癌细胞的原因是___________________________________________________________________________ _________________________________19.（3）传统制备抗体的方法是从已注射了特定抗原的动物的________中分离抗体单克隆抗体相较于传统方法制备的抗体的优点是__________________________________ 19.（4）除了上述工程技术外制备单克隆抗体的途径还有___________________________________________________________________________ _____________（答两条途径）【答案】（1）骨髓瘤细胞, 克隆化培养和抗体检测, 获得足够数量的能分泌特定抗体的杂交瘤细胞【解析】解（1）通过细胞工程制备单克隆抗体的方法是将从小鼠脾脏中提取的已免疫B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞相融合为获得足够数量的能分泌特定抗体的杂交瘤细胞经选择性培养基筛选出的杂种细胞还需要进行克隆化培养和抗体检测【答案】（2）借助单克隆抗体的导向作用能将药物定向带到癌细胞所在的位置（补充答案抗癌的单克隆抗体与癌细胞表面的抗原特异结合从而能将药物带至癌细胞处）【解析】（2）利用抗癌的单克隆抗体等制成的“生物导弹”能在原位杀死癌细胞的原因是借助单克隆抗体的导向作用抗癌的单克隆抗体与癌细胞表明的抗原特异结合能将药物定向带到癌细胞所在的位置【答案】（3）血清（或血浆）, 特异性强灵敏度高可大量制备【解析】（3）传统制备抗体的方法是从已注射了特定抗原的动物的血清或血浆中分离抗体单克隆抗体相较于传统方法制备的抗体的优点是特异性强灵敏度高可大量制备【答案】（4）将无限增殖的调控基因导入已免疫的 B 淋巴细胞、将合成某抗体的基因导入骨髓瘤细胞【解析】（4）除了细胞工程技术外制备单克隆抗体的途径还有将无限增殖的调控基因导入已免疫的B淋巴细胞、将合成某抗体的基因导入骨髓瘤细胞等20.（1）图中所表示的接种方法是________ 请用线条和箭头在答题纸图2空白圆圈内画出该方法接种的路径示意图．________20.（2）图示接种方法的目的是________．20.（3）在进行________和________操作之间要对用到的培养基做灭菌处理．20.（4）“灭菌”具体是指________ 需要在________条件下进行．II、有机农药苯磺隆是一种除草剂长期使用会污染环境．研究发现苯磺隆能被土壤中某些微生物降解．为从土壤中分离获得分解苯磺隆的菌落某同学设计了一种培养基（成分见下表）20.（5）土壤中存在能分解苯磺隆的细菌从生物进化的角度分析这是________结果．20.（6）细菌种群进化过程中起主要作用的变异是________．20.（7）据表判断该培养基能否用于分离出分解苯磺隆的菌落？为什么？________ ________．20.（8）利用培养基不仅可以培养微生物也可以进行植物组织培养和动物细胞的培养但不同的是在组织培养的培养基中还需要加入________ 而动物的培养基则需要适宜的温度、PH和________条件．（写两点）【答案】平板划线法,【解析】解（1）图中所表示的接种方法是平板划线法该方法接种的路径示意图为【答案】分离纯化得到单个菌落【解析】（2）用平板划线法进行接种的目的是分离纯化得到单个菌落．【答案】调PH值, 倒平板【解析】（3）在进行调PH值和倒平板操作之间要对用到的培养基做灭菌处理．【答案】杀死培养基中的微生物及芽孢, 121\^circ C 、1.05 \kg / \cm^2 、15--30分钟【解析】（4）“灭菌”具体是指杀死培养基中的微生物及芽孢需要在121^\circ C 、1.05 kg / cm^2 、15--30分钟条件下进行．【答案】自然选择【解析】（5）土壤中存在能分解苯磺隆的细菌从生物进化的角度分析这是自然选择结果．【答案】C【解析】（6）由于细菌属于原核生物细胞内没有染色体也不能进行有性生殖所以细菌种群进化过程中起主要作用的变异是基因突变．【答案】不能, 液体培养基不能分离出菌落【解析】（7）据表判断由于是液体培养基而液体培养基不能分离出菌落所以该培养基不能用于分离出分解苯磺隆的菌落．【答案】植物激素, 溶解氧、渗透压【解析】（8）利用培养基不仅可以培养微生物也可以进行植物组织培养和动物细胞的培养但不同的是在组织培养的培养基中还需要加入植物激素而动物的培养基则需要适宜的温度、PH和溶解氧、渗透压条件．21.（1）传统获取单克隆抗体整个过程中需要进行两次筛选目的分别是____________________、____________________21.（2）噬菌体展示技术获得的抗体还可用于定量检测抗原如双抗体夹心法具体原理如下图所示分析上图可知固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合这是由于不同抗体可与同一抗原表面的________部位（填“不同”或“相同”）的受体结合21.（3）单克隆抗体的特点是________________________________________【答案】（1）筛选出杂交瘤细胞, 筛选出产生单克隆抗体的杂交瘤细胞【解析】解（1）传统单克隆抗体的获得需先对小鼠进行注射特定的抗原蛋白（免疫）处理使其产生已免疫的B淋巴细胞整个过程中涉及的现代科学技术有动物细胞融合（已免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合）、动物细胞培养（体内培养和体外培养）该过程中有两次筛选分别是筛选出杂交瘤细胞、筛选出产生单克隆抗体的杂交瘤细胞【答案】（2）不同【解析】（2）由于不同抗体可与同一抗原表面的不同部位结合因此固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合【答案】（3）特异性强灵敏度高可大量制备【解析】（3）单克隆抗体具有特异性强灵敏度高可大量制备的特点22.（1）供体体细胞在体外培养时定期更换培养液的目是________ 由于人们对动物细胞所需营养物质还没有完全弄清楚因此在培养细胞时需在培养基中加入________22.（2）体细胞核移植时将甲的细胞核移植到乙的去核卵母细胞中选择卵母细胞的原因是________ 图中④表示________技术22.（3）克隆猴“中中”和“华华”核基因组理论上与________（填“甲”“乙”或“丙”）猴一致科研人员通过27个微卫星位点分析证明克隆猴核基因组信息与理论上一致微卫星序列是1﹣4个碱基的重复序列不同个体间重复次数往往不同说明微卫星位点________（填“容易”或“不容易”）发生变异选用多个微卫星位点而非个别微卫星位点的优点是________ “中中”和“华华”的有些性状与核基因组供体并不完全相同除环境因素外发生此现象的原因是________【答案】防止代谢产物积累对细胞自身造成危害, 动物血清或血浆【解析】动物细胞体外培养需要定期更换培养液防止代谢产物积累对细胞自身造成危害由于人们对动物细胞所需营养物质还没有完全弄清楚因此在培养细胞时需在培养基中加入动物血清或血浆【答案】卵母细胞的质中含有能使已分化的核表达出全能性的营养和物质, 胚胎移植【解析】由于卵母细胞的质中含有能使已分化的核表达出全能性的营养和物质所以体细胞核移植时一般将细胞核移植到去核卵母细胞中图中④表示将克隆胚胎移入代孕个体丙所以表示胚胎移植技术【答案】甲, 容易, 减小误差提高实验数据的准确性, 卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响【解析】克隆个体的基因型与核供体相同所以克隆猴“中中”和“华华”核基因组理论上与甲一致微卫星序列是1﹣4个碱基的重复序列不同个体间重复次数往往不同说明微卫星位点的碱基序列容易重复或缺失因此微卫星位点容易发生变异选用多个微卫星位点而非个别微卫星位点可以防止个别位点突变造成检测误差因此选用多个微卫星位点的目的是减小误差提高实验数据的准确性性状由基因与环境相互作用控制基因包括核基因和质基因所以“中中”和“华华”的有些性状与核基因组供体并不完全相同除环境因素外就是受卵母细胞的细胞质中的遗传物质的影响23.（1）转基因动物通过分泌的乳汁来生产所需要的药品称为乳腺生物反应器将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的_________________________等调控组件重组在一起通过________的方法导入哺乳动物的________中然后使其生长发育成转基因动物23.（2）上述实验前必须给小鼠甲注射H-Y抗原该处理的目的是___________________________23.（3）实践中常用________作为促融剂以提高细胞融合的成功率23.（4）研究发现在小鼠细胞内DNA的合成有两条途径主要途径（简称D途径）是。
2012高考生物复习-选修3专题2 克隆技术 试题及答案
专题2 克隆技术1．图为植物组织培养的基本过程，则制作人工种子和生产治疗烫伤、割伤的药物——紫草素，应分别选用编号( )①−−−→脱分化②−−−→再分化③―→④A．④②B．③②C．③④D．④③2．单克隆抗体产生于( )A．促融剂作用下形成的杂交瘤细胞B．单个杂交瘤细胞增殖形成的细胞群C．B淋巴细胞分化形成的浆细胞D．胚胎干细胞定向诱导形成的淋巴细胞3．(2010年浙江理综)下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是( )A．培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞B．克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变C．二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的D．恶性细胞系的细胞可进行传代培养4．(2010年浙江二测)下列有关克隆的叙述，错误的是( ) A．转基因植物的培育利用了细胞的全能性B．动物组织培养过程中不会发生组织分化C．“多利”绵羊的性状与供核绵羊不完全相同D．肝细胞难以克隆成个体是因为存在阻止核基因表达的调节蛋白5．(2010年杭州月考)下列关于植物组织培养的叙述中，错误的是( )A．培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压B．培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化C．离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织D．同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因型相同6．(2010年佛山调研)下列有关生物技术的叙述，错误的是( ) A．在植物细胞组织培养中胚不能作为组织培养的材料B．多种显微操作和处理技术使体外受精、胚胎移植和胚胎分割成为可能C．利用植物组织培养可以筛选出对人类有用的突变体D．异体骨髓移植成功后，康复者的血型有可能发生改变但不会遗传二、双项选择题7．(2011年深圳联考)下列关于细胞工程的叙述中，正确的是( )A．细胞工程的原理是细胞的全能性B．绵羊多利的诞生，说明高度分化的动物细胞核具有全能性C．植物组织培养技术可用于培育新物种D．试管婴儿技术包括核移植和胚胎移植技术8．(2011年佛山联考)下列有关制备单克隆抗体的叙述，不正确的是( )A．对小动物注射多种抗原B．用动物细胞核移植技术构建杂交瘤细胞C．用选择性培养基筛选杂交瘤细胞D．利用抗原—抗体反应对杂交瘤细胞进行阳性检测三、非选择题9．(2010年全国新课标)请回答：(1)植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。
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分子克隆技术
一、填空题
1.PCR反应中加入矿物油的作用是___________________________。
2.分子克隆实验中外源DNA和载体片段连接之前，要对载体进行去磷酸化处理，我
们在本次试验中去磷酸化使用的碱性磷酸酶是___________________________。
它
的目的是___________________________。
3.用α互补筛选转化子是，带有外源片段的菌落显___________________________色。
4.Southern杂交中进行与杂交的目的是___________________________。
5.凝胶糖凝胶电泳时加入loading buffer作用是___________________________和
___________________________。
6.影响琼脂糖凝胶电泳的因素主要有___________________________、
___________________________、___________________________、
___________________________、___________________________。
二、简答题
1.简述PCR反应体系中都有哪些成分及各成分的作用。
2.为得到质量较好的水稻RNA，抽提前应做如何准备？RNA抽提过程中、RNA的
保存及以后对RNA的操作过程中应特别注意什么？
3.简述为防止放射性同位素外照射及内照射对人体造成伤害，在操作放射性同位素
时，我们可以采取哪些措施进行防护？
4.简述影响电转化感受态细胞转化效率的因素有哪些？
5.质粒抽提时用到的SolutionI，SolutionII，SolutionIII及异丙醇分别起什么作用？操
作时应注意什么？
三、分析问答题
1.描述并图示pUC19载体DNA及其在HindIII位点克隆了外源DNA片段的质粒DNA
和水稻总DNA及它们的HindIII和BamH1酶切产物在琼脂糖凝胶电泳时的带型。
2.利用质粒载体克隆外源DNA片段主要包括哪些步骤？涉及到哪些工具酶？要获得
理想的结果，各步骤操作中应主要注意哪些事项？
3.在Southern杂交实验中，同一根杂交管内的膜曝光的····（原卷此处不清晰）冲
洗后，有些组X光片信号很强，有些组信号很弱，有的样品点样孔附近有较强的
信号，但是有的地方信号较弱，请分析造成这种结果的可能原因。
4.下面是本次课生物技术班某组β-active基因RT-PCR（反转录前没有对总RNA进
行去除DNA 的处理）试验的琼脂糖凝胶电泳图，凝胶上共点了6个样，PCR使用
的模板从左至右分别是：该组提取的水稻总DNA，该组提取的水稻总RNA，该组
的4个反转录产物。
（原卷本题图不清晰）
请问：
提取的RNA的质量如何？
RT-PCR是否成功？为什么会出现这样的结果？
有哪些地方需要改进？。