线性范围评估指南
EP6-A定量测量方法的线性评价-中文全文
EP6-AISBN 1-56238-498-8V olume 23 Number 16 ISSN 0273-3099Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement Procedures:A Statistical Approach;Approved GuidelineEP6-A：定量测量方法的线性评价： 一种统计学方法，批准指南NCCLS…通过自愿一致化的方式为世界医学科学团体服务NCCLS是医疗领域一个非赢利性的，不同学科之间，自愿参与的促进标准化和建立指南的教育组织。
NCCLS创建于1968年并获得美国国家标准研究院的认可。
NCCLS所依据的原则是，对病人高质量服务所需的临床实验室检测，自愿一致的标准是必不可少的。
NCCLS通过各临床实验室、检验团体学会、工厂和政府机构的参与而代表临床检验界。
叙述了文件叙述了实验室的程序、常规和参考方法以及评估方案可应用于所有检验学科。
文件审核的一致化过程由一些正式的步骤组成，叙述了NCCLS文件和规范的编制如何发展到被接受为临床实验室标准。
出版物NCCLS文件以标准、指南、委员会报告出版。
标准：通过一致化过程形成的文件，并对材料、方法、或实践以不能修改方式明确规定其特定的基本要求。
此外，标准也可以包含明确规定的选定要素。
指南：通过一致化过程形成的文件，叙述了用于临床检验界的一般实验操作、方法或材料的规范。
使用者可以使用成文文件或修改指南以适应特定的需要。
报告： 没有经过一致化审定过程的文件，由理事会颁布。
“标准”一词，除了有特定含义外，还常用来指有关的NCCLS文件。
一致化过程NCCLS的自愿一致化审定程序是一个为以下方面建立正式规范的方案：1. 标准项目的权威性2文件的编制和公开评审3根据实验室使用者反馈的评论修改文件4文件被接受为临床实验室标准大多数NCCLS文件必须有“建议”和“批准”两种层次的一致化文件，根据特定的一致化过程，文件也可以有一个中间（“试行”）一致化的水平层次。
CLSI系列文件---定量检测系统线性评价方法(EP6-A)
定量检测系统线性评价方法— EP6-A法线性范围是分析方法的重要技术指标之一，线性范围越宽，说明该分析方法的性能越好，越适用于临床。
目前评价分析方法线性范围的方法很多，如：目测法、EP6-P法、美国临床病理学家协会设备委员会（CAP-IRC）法、EP6-A法等。
本文主要介绍了目前评价分析方法线性范围最好的方法即EP6-A法。
1. 仪器熟悉阶段在线性评价实验之前，仪器应当在实验室安装并使用相当长的一段时间，以便实验者熟练掌握仪器的操作，并保证仪器经过正确的定标、实验样本经过适当的准备。
如果仪器生产商为实验者提供了培训，这也可以作为本阶段的一个部分。
2. 线性评价实验2.1 实验样本的数目线性评价实验的样本数目依据实验目的而确定：①如果实验目的是验证某方法的线性范围，需要5～7个不同浓度水平的样本，这些样本的浓度必须覆盖厂家申明的线性范围，并且每个样本重复测量2次。
②如果实验目的是建立新方法的线性范围，需要7～11个不同浓度水平的样本，这些样本的浓度必须覆盖预期的线性范围。
一般情况下，新方法线性范围的建立者希望有更多浓度水平的实验样本，并且这些实验样本的浓度应该比预期的线性范围宽20%～30%，这样能确定最合适的线性范围。
此外，再根据检测系统不精密度的大小，每个样本重复测量2～4次。
③多元回归分析法评价线性范围时至少需要5个不同浓度水平的实验样本，并且实验样本越多，就越能准确地评价线性范围。
2.2 实验样本的配制EP6-A文件推荐使用高值和低值浓度的样本按特定的比例精确配制成一系列不同浓度的样本，并且这些样本的浓度可以为等间距排列，也可以为不等间距排列，具体配制方法可以参考文件后的附录A。
在配制过程中，实验者应优先选用移液管法配制实验样本，因为用移液管精确吸量高值、低值浓度样本配制实验样本所产生的误差比称量法、配制复溶溶液法要小。
此外，实验者在吸取小体积溶液时要特别小心。
2.3 实验样本的编号在线性评价实验前，实验样本中分析物浓度可以为未知条件，只是此时必须对每个实验样本进行编号来反映实验样本中分析物浓度的关系。
线性范围评估的指南
1.463 1.481 1.492 1.496
线性范围的评估及数据处理方法
对回归方程进行线性检验
多元回归方程中以bi表示的系数为回归系数。 在二级与三级方程中，b2与b3为非线性系数。 对回归方程进行线性检验就是对每个非线性系数作t检
验，判断回归系数与零是否有显著性差异。 b0与b1不反映非线性，故不需对其进行检验
建立一种定量测定方法的线性范围时，需在预期测定 范围内选择7-11个浓度水平。如将预期测定范围加宽至 130%，在此范围内选择更多的浓度水平，然后依据实 验结果逐渐减少数据点直至表现出线性关系，可发现 最宽的线性范围。
线性范围的评估及数据处理方法
实验样本的基本要求
对标称线性参数进行验证时，需在已知线性范 围内选择5-7个浓度水平。
临床标准的线性与非线性检验
一般设定ADL小于5%为临床允许误差，即取PctBnd为 5%，通过查表（附录A和B）得到ADL临界值。
如ADL小于临界值，可认为多项式具有临床可接受的 非线性，为二阶线性。如ADL大于临界值，则为临床 不可接受的非线性
线性范围的评估及数据处理方法
临床标准的线
性与非线性检 验
线性范围的评估及数据处理方法
剔除离群值
离群值可由散点图初步判断，标准中建议采用格拉布 斯（GRUBBS）法进行离群值检验。检验步骤如下:
每组数据中有4个测定结果，将4个测定值按大小顺序 排列,最大值记为max,最小值记为 min;
计算均值和标准差S，根据可疑值max或min分别按下 式计算统计量t: t1=(max-均值 )/S，t2=(min-均值)/S
线性范围的评估及数据处理方法
结果报告
线性范围报告的具体格式不要求，但至少应包括以下 几方面：
CLSI发布标准介绍
附件：《体外诊断试剂分析性能评估系列指导原则（征求意见稿）》目录1.体外诊断试剂分析性能评估指导原则――编制说明2.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——检测限3.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——线性范围4.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——可报告范围5.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——准确度（回收实验）6.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——准确度（方法学比对）7.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——精密度8.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——干扰实验9.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——稳定性10.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——参考值（参考区间）附件1：体外诊断试剂分析性能评估指导原则编制说明《体外诊断试剂注册管理办法（试行）》颁布后，体外诊断试剂产品的注册过程中要求提供申报产品的分析性能评估资料，产品性能评估是产品研发、制定产品标准等过程的重要技术支持研究过程，并可能对产品的质量造成一定的影响。
目前国际上对体外诊断试剂的性能评估通常是以美国临床实验室标准化组织（Clinical and Laboratory Standards Institude以下称为CLSI）的相关标准为依据，也是美国FDA推荐采用的评价标准，但我国还没有相关的标准及指导原则的要求。
为进一步明确体外诊断试剂分析性能评估的技术要求，我中心组织有关专家起草产品分析性能评估指导原则，以明确体外诊断试剂产品性能评估的技术要求。
体外诊断试剂产品性能评估包括检测限、线性范围、可报告范围、准确度（回收实验）、准确度（方法学比较）、精密度、干扰实验、稳定性、参考区间共九个项目。
起草的主要依据CLSI发布的以下标准:1. C28-A2: How to define and determine reference intervals in the clinical laboratory; ApprovedGuideline-Second Edition.2. EP5-A: Evaluation of precision performance of clinical chemistry devices; Approved Guideline.3. EP6-A: Evaluation of the linearity of quantitative measurement procedures; A Statistical Approach; Approved Guideline.4. EP7-A: Interference testing in clinical chemistry; Approved Guideline.5. EP9-A2: Method comparison and bias estimation using patient samples; Approved Guideline-Second Edition. 每项性能的主要研究方法均采用以上标准和国内实际采用的评价方法相结合的方法。
标准曲线的线性范围
标准曲线的线性范围标准曲线的线性范围是指在一定浓度范围内，检测方法对浓度与响应值之间呈线性关系的范围。
在实际分析中，线性范围的确定对于准确测定样品的浓度至关重要。
本文将详细介绍标准曲线的线性范围的概念、确定方法以及实际应用。
标准曲线的线性范围概念。
标准曲线的线性范围是指在一定浓度范围内，检测方法对浓度与响应值之间呈线性关系的范围。
在该范围内，样品的浓度与检测方法的响应值成正比，可以通过线性方程进行描述。
一般来说，线性范围越宽，检测方法对样品浓度的测定范围也就越广。
确定方法。
确定标准曲线的线性范围的方法有多种，常用的方法包括逐点法、最小二乘法、相关系数法等。
逐点法是最直观的确定方法，即通过一系列标准溶液的浓度与检测方法的响应值进行绘图，观察曲线的线性范围。
最小二乘法则是通过最小化实测值与拟合值之间的误差平方和来确定线性范围。
相关系数法则是通过计算相关系数来确定线性范围，相关系数越接近于1，线性范围越宽。
实际应用。
在实际分析中，确定标准曲线的线性范围对于准确测定样品的浓度至关重要。
首先，确定线性范围可以帮助选择合适的标准溶液浓度范围，避免溶液浓度过高或过低而导致测定结果不准确。
其次，确定线性范围可以帮助评价检测方法的灵敏度和准确性，为方法的优化提供依据。
最后，确定线性范围可以帮助验证检测方法的可靠性，确保在一定浓度范围内测定结果准确可靠。
总结。
标准曲线的线性范围是确定检测方法对浓度与响应值呈线性关系的范围，其确定方法包括逐点法、最小二乘法、相关系数法等。
在实际分析中，确定线性范围对于准确测定样品的浓度至关重要，可以帮助选择合适的标准溶液浓度范围、评价检测方法的灵敏度和准确性，以及验证检测方法的可靠性。
因此，对于每种检测方法，都应该进行严格的线性范围确定，确保测定结果的准确可靠性。
标准曲线的线性范围
标准曲线的线性范围标准曲线的线性范围是指在一定浓度范围内，检测方法对浓度的响应是线性的。
在实际分析中，我们经常需要确定某种物质的浓度，而标准曲线的线性范围则是评价分析方法准确性和灵敏度的重要指标之一。
因此，了解和掌握标准曲线的线性范围对于科研工作者和实验人员来说至关重要。
首先，标准曲线的线性范围的确定是基于实验数据的分析。
在实验过程中，我们通常会选择一系列不同浓度的标准品，进行多次测定，然后利用测定结果绘制标准曲线。
通过观察标准曲线的线性部分，我们可以确定方法的线性范围。
一般来说，线性范围是指在这个范围内，物质的浓度与检测信号呈线性关系，也就是说浓度增加时，检测信号也会相应增加，且增加的比例是一致的。
其次，标准曲线的线性范围的确定需要考虑实际样品的浓度范围。
在选择标准曲线的线性范围时，我们需要考虑到实际样品中物质的浓度范围。
如果选择的线性范围过窄，可能会导致高浓度样品的测定结果偏离线性范围，影响测定的准确性；如果选择的线性范围过宽，可能会导致低浓度样品的测定结果不够准确。
因此，在确定标准曲线的线性范围时，需要充分考虑实际样品的特点，选择合适的线性范围进行分析。
此外，标准曲线的线性范围还需要考虑分析方法的灵敏度。
在确定线性范围时，我们需要考虑到分析方法的灵敏度是否足够。
如果选择的线性范围过窄，可能会导致低浓度样品的测定结果不够灵敏；如果选择的线性范围过宽，可能会导致高浓度样品的测定结果不够灵敏。
因此，需要根据分析方法的灵敏度选择合适的线性范围，以保证分析方法对不同浓度样品的检测都能够达到较好的灵敏度。
总之，标准曲线的线性范围的确定是一个综合考虑实验数据、实际样品特点和分析方法灵敏度的过程。
合理确定标准曲线的线性范围，对于保证分析方法的准确性和灵敏度具有重要意义。
因此，在进行分析方法的建立和优化时，需要充分重视标准曲线的线性范围的确定，以确保分析结果的准确可靠。
NCCLS_EP6-A定量测量方法的线性评价_中文翻译
EP6-AISBN 1-56238-498-8 Volume 23 Number 16 ISSN 0273-3099Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement Procedures:A Statistical Approach;ApprovedGuidelineEP6-A：定量测量方法的线性评价：一种统计学方法，批准指南NCCLS…通过自愿一致化的方式为世界医学科学团体服务NCCLS是医疗领域一个非赢利性的，不同学科之间，自愿参与的促进标准化和建立指南的教育组织。
NCCLS创建于1968年并获得美国国家标准研究院的认可。
NCCLS所依据的原则是，对病人高质量服务所需的临床实验室检测，自愿一致的标准是必不可少的。
NCCLS通过各临床实验室、检验团体学会、工厂和政府机构的参与而代表临床检验界。
叙述了文件叙述了实验室的程序、常规和参考方法以及评估方案可应用于所有检验学科。
文件审核的一致化过程由一些正式的步骤组成，叙述了NCCLS文件和规范的编制如何发展到被接受为临床实验室标准。
出版物NCCLS文件以标准、指南、委员会报告出版。
标准：通过一致化过程形成的文件，并对材料、方法、或实践以不能修改方式明确规定其特定的基本要求。
此外，标准也可以包含明确规定的选定要素。
指南：通过一致化过程形成的文件，叙述了用于临床检验界的一般实验操作、方法或材料的规范。
使用者可以使用成文文件或修改指南以适应特定的需要。
报告：没有经过一致化审定过程的文件，由理事会颁布。
“标准”一词，除了有特定含义外，还常用来指有关的NCCLS文件。
一致化过程NCCLS的自愿一致化审定程序是一个为以下方面建立正式规范的方案：1.标准项目的权威性2文件的编制和公开评审3根据实验室使用者反馈的评论修改文件4文件被接受为临床实验室标准大多数NCCLS文件必须有“建议”和“批准”两种层次的一致化文件，根据特定的一致化过程，文件也可以有一个中间（“试行”）一致化的水平层次。
体外诊断试剂分析性能评估系列指导原则
附件：《体外诊断试剂分析性能评估系列指导原则（征求意见稿）》目录1.体外诊断试剂分析性能评估指导原则――编制说明2.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——检测限3.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——线性范围4.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——可报告范围5.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——准确度（回收实验）6.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——准确度（方法学比对）7.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——精密度8.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——干扰实验9.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——稳定性10.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——参考值（参考区间）附件1：体外诊断试剂分析性能评估指导原则编制说明《体外诊断试剂注册管理办法（试行）》颁布后，体外诊断试剂产品的注册过程中要求提供申报产品的分析性能评估资料，产品性能评估是产品研发、制定产品标准等过程的重要技术支持研究过程，并可能对产品的质量造成一定的影响。
目前国际上对体外诊断试剂的性能评估通常是以美国临床实验室标准化组织（Clinical and Laboratory Standards Institude以下称为CLSI）的相关标准为依据，也是美国FDA 推荐采用的评价标准，但我国还没有相关的标准及指导原则的要求。
为进一步明确体外诊断试剂分析性能评估的技术要求，我中心组织有关专家起草产品分析性能评估指导原则，以明确体外诊断试剂产品性能评估的技术要求。
体外诊断试剂产品性能评估包括检测限、线性范围、可报告范围、准确度（回收实验）、准确度（方法学比较）、精密度、干扰实验、稳定性、参考区间共九个项目。
起草的主要依据CLSI发布的以下标准:1. C28-A2: How to define and determine reference intervals in the clinical laboratory; Approved Guideline-Second Edition.2. EP5-A: Evaluation of precision performance of clinical chemistry devices; Approved Guideline.3. EP6-A: Evaluation of the linearity of quantitative measurement procedures; A Statistical Approach; Approved Guideline.4. EP7-A: Interference testing in clinical chemistry; Approved Guideline.5. EP9-A2: Method comparison and bias estimation using patient samples; Approved Guideline-Second Edition.每项性能的主要研究方法均采用以上标准和国内实际采用的评价方法相结合的方法。
SOP--kaolin检测
高岭土测试项目SOP一、检验目的：检测患者的凝血全貌，指导成分用血。
凝血评估常用于评定各种临床病情，比如术后出血和/或心血管手术期间和之后的血栓形成、器官移植、外伤以及心脏手术。
二、检测原理：凝血激活检测试剂是一种标准化的试剂，它包含高岭土，缓冲稳定剂和混合磷脂。
它提供了一种凝血激活相关的表面活化或内源性凝血旁路的检测（例如XIII因子）。
高岭土激活剂与硅藻土类似，但不易受Trasylol（抑肽酶）影响。
试剂为体外诊断使用，请专业人士操作。
凝血激活检测试剂通过表面激活机制激发内源凝血途径（XIII因子）。
使血样发生凝固。
随着血凝块的形成、回缩和／或溶解，电脑控制的TEG分析仪自动记录这些血样(全血、血浆、富含血小板的血浆)的动力学变化。
因此，形成的凝血图是检测血凝块的形成、溶解及血凝块凝血功能的动态变化。
TEG分析仪监测血凝块的某一物理性质，即切应力．因此，它对所有影响血凝块的结构或速率及其溶解的细胞和血浆成份之间的相互作用均很敏感。
血凝块进行有用的机构工作(凝血工作)这一能力是参与凝血过程的凝血因子及细胞成份相互作用的共同结果。
实际上，TEG测量血凝块在其结构变化发展过程中的进行机械工作的能力。
TEG图形能够以血样的低凝、正常凝血或高凝状态以及溶解度来进行定量或定性分析。
见图1。
图1三、性能参数（准确度、精密度、可报告范围（线性范围））性能参数通过性能检测，证明了TEG5000系列分析仪的精确性和精密型性。
除此之外，Haemonetics确定了可能影响分析仪测量能力、性能和灵敏度的参考范围和因素。
TEG5000分析仪的精确性、精密性、灵敏度和参考范围参数总结如下所示。
精确性为了证明TEG分析仪的测量精确性，Haemonetics对TEG5000系列分析仪和TEG3000系列分析仪之间的样本测量性能进行了比较评估。
按照TEG用户指南的操作准备40例冻干的血浆样本。
同时将每个样本的血液放到校准的5000系列分析仪和校准的3000系列分析仪上。
体外诊断试剂分析性能评估线性范围
C
符合要 求
该方法 呈线性
停顿
缩小范围？(5.3.3) 能够
不行
该方法是非线 性
舍去非线性显
著处低或高值
B
点(5.3.3)
停顿
第14页
举例: Ca检测: 试验室准备样本和对6个不一样浓度水平标本进行
重复测定，假定试验室设定Ca重复性和非线性误差均为
0.20mg/dL
标本
测量值1
测量值2
均值
1
4.7
如非线性系数b2.b3与0比较，经t检验（p>0.05）， 存在线性关系，不精密度满足条件时，则分析完 成。 如二次多项式模型非线性系数b2，或三次多项式 模型b2或b3中任一个与0比较，有显著差异 （p<0.05），则该组数据存在非线性。
体外诊断试剂分析性能评估线性范围
第13页
设计方法和确定误差目 标（非线性和重复性） (6.3)
138
138.5
3
269
273
271.0
4
337
343
340.0
5
409
404
406.5
从表中数据能够看出，没有显著离群值，但在低水平浓度处重复性很好，
而在高浓度水平处两次测量结果差异较大。重复性差异检测以下:
标本号 1 2 3 4 5
均值 26.35 138.5 271.0 341.0 406.5
体外诊断试剂分析性能评估线性范围
图C4: Ca线性评价差值点图—1-5稀释
第20页
举例
在试验室内准备五个等距浓度标本测定IgM，每标本重复测定两次。假定 试验室设定重复性和线性允许误差范围分别为2%和5%。随机次序测试结 果以下:
HJ84-2016《水质无机阴离子(F-、Cl-、SO42-)的测定离子色
HJ842016《水质无机阴离子(F、Cl、SO42)的测定离子色谱法》操作指南一、概述HJ842016《水质无机阴离子(F、Cl、SO42)的测定离子色谱法》是一种用于检测水质中无机阴离子（氟离子、氯离子和硫酸根离子）含量的方法。
本指南将为您详细介绍该方法的具体操作步骤、注意事项及数据处理，帮助您更好地掌握和应用此技术。
二、实验原理离子色谱法是通过离子交换原理，将水样中的无机阴离子分离出来，并通过检测器进行定量分析。
该方法具有操作简便、灵敏度高、准确度好等特点。
在本方法中，我们采用离子色谱仪，以氢氧根离子为淋洗液，实现对F、Cl、SO42的分离和检测。
三、实验仪器与试剂1. 实验仪器：离子色谱仪、阴离子交换柱、超纯水系统、真空抽滤装置、注射器等。
2. 试剂：氢氧化钠（分析纯）、氟离子标准溶液、氯离子标准溶液、硫酸根离子标准溶液、去离子水等。
四、实验步骤1. 样品前处理：取适量水样，经0.45μm微孔滤膜过滤，去除悬浮物和颗粒物。
2. 色谱条件设置：根据仪器说明书，设置合适的淋洗液浓度、流速、检测器温度等参数。
3. 标准曲线制备：分别配制不同浓度的F、Cl、SO42标准溶液，依次进样，绘制标准曲线。
4. 样品测定：将处理后的水样注入离子色谱仪，记录各无机阴离子的峰面积，根据标准曲线计算其浓度。
5. 结果计算：根据样品中各无机阴离子的浓度，计算其在水样中的含量。
五、注意事项1. 实验过程中，确保试剂和样品纯净，避免交叉污染。
2. 色谱柱使用前后，需进行充分冲洗，防止柱效降低。
3. 定期检查仪器性能，确保检测结果的准确性。
4. 实验操作人员需具备一定的专业技能，严格按照操作规程进行实验。
六、数据分析与质量控制1. 数据分析：在完成样品测定后，应对数据进行仔细分析。
检查色谱峰的形状、分离度是否良好，确保定量分析的准确性。
若出现异常峰，需排查原因，必要时重新进样分析。
每批样品测定时，同时测定标准曲线中间浓度点的标准溶液，以监控仪器的稳定性。
医学中线性范围的名词解释
医学中线性范围的名词解释线性范围是指在医学领域中，结果的变化与测量物质浓度或作用量之间呈现线性关系的范围。
在医学诊断、药物疗效评估、生物学研究等方面，线性范围的概念都具有重要意义。
在许多实验室的研究中，常常需要通过测量某种物质的浓度来判断人体健康状况或药物的疗效。
而线性范围就是指在这种测量中，结果的变化与物质浓度的变化之间存在着一种恒定的比例关系。
在临床实验室中，常用的血清指标如血糖、肝功能指标、肾功能指标等经常需要进行相关检验，在这些检验中，线性范围的确定尤为重要。
如果浓度过低或过高，可能会导致结果的误差和不确定性，进而影响对患者健康状况的评估和治疗方案的制定。
因此，准确确定线性范围对于临床实验室的准确性和可靠性至关重要。
线性范围的确定通常需要使用校准方法和质控品，通过测量一系列浓度已知的物质来确定测量方法的线性范围。
这样可以保证在临床检验中结果的准确性和可靠性。
校准方法通常是通过制备不同浓度的标准溶液，并在仪器上测量这些溶液的浓度，验证仪器的灵敏度和准确性，从而确定线性范围。
而质控品则是用于检验仪器日常运行情况的标准物质。
通过每次测量一定浓度的质控品，并跟踪和记录其结果，可以保证仪器的稳定性和准确性。
质控品的浓度通常涵盖了线性范围的整个范围，这样可以确保在临床实验室进行测量时，结果可以准确且可靠。
除了在临床实验室中的应用外，线性范围在药物疗效评估中也具有重要作用。
在药物临床试验中，通过控制药物服用的剂量，观察药物在不同浓度下的疗效和毒副作用，以确定适宜的治疗剂量。
在生物学研究中，线性范围也是一个关键因素。
在蛋白质测定、基因表达分析等实验中，通过控制不同浓度的样本，可以确定测量方法的灵敏度和范围。
在研究中，科学家经常需要测量物质的浓度变化来确定其功能、相互作用以及疾病相关性等。
总之，线性范围在医学领域中扮演着重要角色，它的准确确定对于临床实验室的诊断与治疗至关重要。
通过校准方法和质控品的应用，可以确保测量结果的准确性和可靠性。
标准曲线线性范围确定
标准曲线线性范围确定标准曲线线性范围是指在一定浓度范围内，检测结果与浓度之间呈现出线性关系的范围。
确定标准曲线线性范围对于准确测定样品中目标成分的浓度非常重要，因此在实验室分析中具有重要意义。
确定标准曲线线性范围的方法有很多种，下面将介绍一种常用的方法。
首先，准备一系列标准溶液，浓度依次递增，覆盖可能出现的样品中目标成分的浓度范围。
然后，分别用仪器对这些标准溶液进行测定，得到一系列的检测结果。
接下来，将浓度与检测结果进行统计分析，通常采用线性回归分析的方法，得到标准曲线的方程。
最后，根据线性回归分析的结果，确定标准曲线线性范围。
在进行线性回归分析时，需要注意一些问题。
首先，要选择合适的回归模型，通常情况下可以选择一次线性回归模型。
其次，要对回归方程的拟合优度进行评价，通常采用相关系数R²来评价拟合优度，R²越接近1，拟合优度越好。
最后，根据回归方程的斜率和截距，确定标准曲线线性范围。
确定标准曲线线性范围的目的是为了保证在这个范围内，仪器对目标成分的浓度测定结果是准确可靠的。
如果浓度超出线性范围，可能会导致测定结果偏离真实值。
因此，在实际操作中，需要根据样品中目标成分的浓度范围，选择合适的标准曲线线性范围，以保证测定结果的准确性。
除了上述介绍的方法外，确定标准曲线线性范围还可以采用其他方法，比如采用稀释方法扩大线性范围，或者采用非线性回归分析方法拟合曲线等。
在实际操作中，可以根据具体情况选择合适的方法。
总之，确定标准曲线线性范围是实验室分析工作中的重要环节，对于保证测定结果的准确性具有重要意义。
通过合理选择标准曲线线性范围的方法，并进行严格的实验操作和数据处理，可以保证分析结果的可靠性，为科学研究和生产实践提供准确的数据支持。
CLSI发布标准介绍
附件：《体外诊断试剂分析性能评估系列指导原则（征求意见稿）》目录1.体外诊断试剂分析性能评估指导原则――编制说明2.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——检测限3.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——线性范围4.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——可报告范围5.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——准确度（回收实验）6.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——准确度（方法学比对）7.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——精密度8.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——干扰实验9.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——稳定性10.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——参考值（参考区间）附件1：体外诊断试剂分析性能评估指导原则编制说明《体外诊断试剂注册管理办法（试行）》颁布后，体外诊断试剂产品的注册过程中要求提供申报产品的分析性能评估资料，产品性能评估是产品研发、制定产品标准等过程的重要技术支持研究过程，并可能对产品的质量造成一定的影响。
目前国际上对体外诊断试剂的性能评估通常是以美国临床实验室标准化组织（Clinical and Laboratory Standards Institude以下称为CLSI）的相关标准为依据，也是美国FDA 推荐采用的评价标准，但我国还没有相关的标准及指导原则的要求。
为进一步明确体外诊断试剂分析性能评估的技术要求，我中心组织有关专家起草产品分析性能评估指导原则，以明确体外诊断试剂产品性能评估的技术要求。
体外诊断试剂产品性能评估包括检测限、线性范围、可报告范围、准确度（回收实验）、准确度（方法学比较）、精密度、干扰实验、稳定性、参考区间共九个项目。
起草的主要依据CLSI发布的以下标准:1. C28-A2: How to define and determine reference intervals in the clinical laboratory; Approved Guideline-Second Edition.2. EP5-A: Evaluation of precision performance of clinical chemistry devices; Approved Guideline.3. EP6-A: Evaluation of the linearity of quantitative measurement procedures; A Statistical Approach; Approved Guideline.4. EP7-A: Interference testing in clinical chemistry; Approved Guideline.5. EP9-A2: Method comparison and bias estimation using patient samples; Approved Guideline-Second Edition.每项性能的主要研究方法均采用以上标准和国内实际采用的评价方法相结合的方法。
临床检验方法学性能评估指南
方法学比对
比对方法
参考方法：评价结果溯源性 PT：评价结果准确性 分析系统：评价分析系统有效性
干扰物质
临床实验室测量过程中，干扰物质可以是测量误差 的重要来源； 精密度：室内质控监测， 准确度：回收实验、与参考物质或参考方法比对； 干扰物：任可一个测量程序都可能存在干扰物质， 引起的误差难以判定。
测量过程中的干扰因素
不准确度（inaccuracy）又称分析总误差 （total analytical error）主要受三个因素 影响：不精密度、偏倚和样本误差。
实验室可以通过对测量程序的评估，对不精密 度和偏倚进行分析，但通常把样本误差（干 扰）看成是个别样本的问题，而不是测量程序 的问题。
（EP17－A）
检测方法的极限参数
极限参数的关系
LoB LoQ 0 LoD
LoB
＜
LoD
≤
LoQ
被测量
实验室分析目标的确立
允许总误差：
精密度：RCV 准确度：偏倚 样本误差：只考虑分析误差时，被忽略。
管理要求
不精密度
分析标准差：
σ A = 1 2 ⋅ σ WithinB
总标准差：
σT = σ
可
不确定度
临床检验
为区分健康状 况提供信息
生物体
部分
参考区间
方法学性能要点
校准 Calibration
校准物和校准方式 校准间隔 校准验证
分析特异性和干扰 Analytical Specificity and Interference
精密度 Precision
重复性 Repeatability：批内CV（OCV） 中间精密度：总CV（RCV）
北京市部分临床检验项目不精密度建议
线性评价
21
Using Proficiency Testing to Improve Lab Performance
校准验证的概念及方法：
方法：所提供的校准验证材料，其浓度或活 性涵盖大多数分析物的可报告范围，分发给 各参加实验室后，按病人样本方式进行分析， 然后将各实验室测定结果与靶值进行比较， 从而判断当前校准是否在可报告范围内保持 稳定及测定结果的准确性
(7)EP12-P ： 用于定性实验评价的用户协议，提议指南（ User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance; Proposed Guideline ）；
(8)EP13-R ： 实验室统计—标准差，报告 （ Laboratory Statistics — Standard Deviation; A Report ）；
目的:
评价分析方法能报告的可 信的最低、最高的浓度范 围值。
确认厂家所提供该分析 系统的可报告范围是否一 致。
实验指导
9
临床生物化学与检验实验指导
常用的方法:
• 目测线性法 • 最小二剩法线性评价 • NCCLS制订并推出的评价方案（EP-6） • 多项式线性评价方案 （2002）
实验指导
10
临床生物化学与检验实验指导
(11) EP18-P： 检验单位使用的质量管理，提议指南（ Quality Management for Unit-Use Testing; Proposed Guideline ）；
(12) EP21-P： 临床实验方法 总分析 误差的评估，提议指南（ Estimation of Total Analytical Error for Clinical Laboratory Methods; Proposed Guideline ）。
光谱仪检测标准
光谱仪检测标准光谱仪检测标准是一种用于评估和规范光谱仪性能和操作流程的技术规范。
这些标准通常由国际权威机构或行业协会制定，以确保不同厂商和用户之间的光谱仪检测结果具有可比性和可靠性。
以下是光谱仪检测标准的几个关键方面。
一、性能指标性能指标是光谱仪检测标准的核心部分，用于评估光谱仪的关键性能参数，以确保其满足用户的需求。
这些指标通常包括波长范围、分辨率、灵敏度、线性范围、杂散光等。
1.波长范围：波长范围是光谱仪能够检测的电磁波的波长范围。
一般来说，光谱仪的波长范围越宽，其应用领域就越广泛。
2.分辨率：分辨率是光谱仪能够分辨的最小波长间隔，通常以纳米（nm）为单位表示。
高分辨率的光谱仪能够提供更多细节的信息，但同时也需要更高的技术要求和更复杂的算法来解析结果。
3.灵敏度：灵敏度是指光谱仪检测弱光的能力。
高灵敏度的光谱仪能够检测更微弱的光信号，因此在低光强度条件下具有更高的应用价值。
4.线性范围：线性范围是指光谱仪能够线性响应的光强度范围。
在这个范围内，光谱仪的输出信号与输入光强度成正比，可以提供准确的测量结果。
5.杂散光：杂散光是指光谱仪对非目标波长的光的响应。
低杂散光的光谱仪能够更好地检测目标波长的光信号，并提供更准确的结果。
二、操作流程光谱仪检测标准还包括操作流程的规范和指南，以确保不同用户在进行检测时能够遵循一致的方法和技术要求。
这些流程通常包括样品准备、仪器设置、数据采集、数据处理和结果分析等步骤。
1.样品准备：样品准备是光谱仪检测的重要环节之一。
标准中应规定样品的选取、制备和处理方法，以确保样品具有代表性，并且与实际应用场景相符。
2.仪器设置：在开始检测之前，需要正确设置光谱仪的参数，如扫描范围、分辨率、曝光时间等。
标准中应规定这些参数的设置方法和依据，以确保不同用户之间的检测结果具有可比性。
3.数据采集：数据采集是光谱仪检测的核心环节之一。
标准中应规定采集数据的步骤和方法，包括如何进行背景校正、如何避免干扰等。
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线性范围的评估及数据处理方法
临床标准的线
性与非线性检 验
线性范围的评估及数据处理方法
临床标准的线
性与非线性检 验
线性范围的评估及数据处理方法
对数据组进行精密度检验
测量数据的精密度可直接影响多项式回归分析的结果， 为提高统计功效，需对数据组进行精密度检验 计算最优拟合方程的回归标准误（σ）
线性范围评估指南
郑金来 zhengjinlai@
前言
线性范围评估资料是评价拟上市产品有效
性的重要依据，也是产品注册所需的重要 申报资料之一 依据国家食品药品监督管理局《体外诊断 试剂注册管理办法（试行）》、《中华人 民共和国卫生行业标准---定量测定方法的 线性评价》的有关要求，参考CLSI有关标 准
0.20 0.80
0.10 0.90
0.00 1.00
线性范围的评估及数据处理方法
实验样本的制备方法
样本号 1 2 3 4 5
低浓度血清(ml)
1.00
0.75
0.50
0.25
0.00
高浓度血清(ml)
0.00
0.25
0.50
0.75
1.00
线性范围的评估及数据处理方法
实验样本的制备方法
样本的特殊处理：在无法得到适用的人血清时，需对 样本进行一些特殊处理以满足实验要求。这些处理过 程包括稀释、加入添加物或透析、热处理等，无论进 行何种处理均应以保持基质恒定为基本原则。在评价 报告中应对所使用的稀释液、添加物、溶剂等的材料 来源加以注明。 样本稀释液应选用由厂家推荐或经实验室证明可使用 的产品，如可采用5%牛血清白蛋白或人白蛋白溶液。 欲提高样本浓度时可在样本中添加分析物纯品。在添 加物为溶液状态时，应注意添加液体对样本的稀释作 用（小于10%）并注明所用溶剂
线性范围的评估及数据处理方法
实验样本的基本要求
对标称线性参数进行验证时，需在已知线性范 围内选择5-7个浓度水平。 无论是建立或验证线性范围，所选用的浓度水 平应可覆盖整个预期测定范围并包括与临床有 关的重要评价浓度，如最小测定浓度或线性范 围的最低限、不同的医学决定水平、最大测定 浓度或线性范围的高限等。
对于大多数分析物PctBnd取5%。如ADL小于所要求的 临界判断值，则可认为数据组具有临床可接受的线性， 所拟合出的最适非线性多项式无临床意义 ADL表示最优拟合曲线与直线的平均差异
线性范围的评估及数据处理方法
临床标准的线性与非线性检验
一般设定ADL小于5%为临床允许误差，即取PctBnd为 5%，通过查表（附录A和B）得到ADL临界值。 如ADL小于临界值，可认为多项式具有临床可接受的 非线性，为二阶线性。如ADL大于临界值，则为临床 不可接受的非线性
线性范围的评估及数据处理方法
临床标准的线性与非线性检验
对于大多数分析物PctBnd取5%。如ADL小于所要求的 临界判断值，则可认为数据组具有临床可接受的线性， 所拟合出的最适非线性多项式无临床意义 ADL表示最优拟合曲线与直线的平均差异
线性范围的评估及数据处理方法
临床标准的线性与非线性检验
线性范围的评估及数据处理方法
实验样本的制备方法
不同浓度水平的样本可通过将高浓度样本与低浓度样 本进行倍比稀释得到，注意在进行液体吸取时应选择 精密度与准确性好的移液装置。制备时应将样本完全 混合并避免蒸发或其他使样本变质的情况。每份样本 的浓度与体积单位应统一。 如果高/低浓度血清的值未知，可将每种血清编码，用 编码代表每个血清的相对浓度。对于等浓度间隔样本， 可用连续整数（如1、2、3、4、5）代表连续样本。进 行数据处理时可用样本号代替X值。
线性范围的评估及数据处理方法
实验过程
建立线性范围：需测定9-11个浓度水平，每个 浓度水平重复测定3-4次。 验证标称线性参数：需测定4-6个浓度水平，每 个浓度水平重复测定3-4次。 所有样本应在一次运行中或几次间隔很短的运 行中随机测定，最好在一天之内完成
线性范围的评估及数据处理方法
线性范围评估的基本原则
实验操作人员应熟悉方法原理与操作，能
对样本进行正确处理，确保仪器工作状态 正常，采用适当的校准品对仪器进行校准。 仪器的各项性能指标（如精密度）应与标 称值相符，不存在明显的携带污染等。 应使用同批号试剂及校准品。
线性范围的评估及数据处理方法
实验样本的基本要求
样本基质应与临床实验样本相似，但不可采用含有对 测定方法具有明确干扰作用物质的样本，如溶血、脂 血、黄疸或含有某些特定药物的样本。进行血清学标 志物检测时，理想的样本为分析物浓度接近预期测定 上限的混合人血清。 建立一种定量测定方法的线性范围时，需在预期测定 范围内选择7-11个浓度水平。如将预期测定范围加宽至 130%，在此范围内选择更多的浓度水平，然后依据实 验结果逐渐减少数据点直至表现出线性关系，可发现 最宽的线性范围。
对回归方程进行线性检验
多元回归方程中以bi表示的系数为回归系数。 在二级与三级方程中，b2与b3为非线性系数。 对回归方程进行线性检验就是对每个非线性系数作t检 验，判断回归系数与零是否有显著性差异。 b0与b1不反映非线性，故不需对其进行检验
线性范围的评估及数据处理方法
对回归方程进行线性检验
线性范围的评估及数据处理方法
临床标准的线性与非线性检验
上述多项式回归分析主要是利用统计学方法进行线性 判断，统计学标准的线性可称为一阶线性，对数据组 的要求很高。 对于在临床实验室中使用的测定方法，在其临床应用 实践中允许有一定的非线性误差，此时通过对统计学 标准的非线性作程度判断，可得到临床标准的线性， 即二阶线性 临床标准的线性检验中使用了两个统计量，ADL（偏 离直线平均差异average deviation from linearity）与 PctBnd（百分区界 percent bound）
线性范围的评估及数据处理方法
剔除离群值：
Grubbs检验临界值(Ta)值表
样本数
显著性水平
样本数
显著性水平
0.05 3 1.153
0.025
0.01
0.005 4
0.05
0.025
0.01
0.005
1.155
1.155
1.155
1.463
1.481
1.492
1.496
线性范围的评估及数据处理方法
数据记录
项目： 样品：
仪器：
操作者： 样本号 1 2 测定1
试剂/批号：
审核者： 测定2 测定3
校准品/批号：
测定日期： 测定4 均值
3
4 5 6 7 8 9 10 11
线性范围的评定数据的可用性进行初步检查。 以样本号或样本浓度为X轴，以测定结果为Y轴做图， 在图上标出针对每个样本的测定值及每个浓度水平的 测定均值，手工或用计算机做图将均值点相连 观察数据点与直线间的偏差，如偏差过大，表明数据 组存在明显非线性，需要对测定过程进行检查，排除 因操作错误所至误差，并对样本进行重新测定。如图 形与直线接近，表明可对数据组继续进行统计分析。
线性范围的评估及数据处理方法
结果报告
线性范围报告的具体格式不要求，但至少应包括以下 几方面： 进行线性评价的实验室或生产厂家名称。 被评价的方法或试剂名称，批号。 测定项目。 线性范围（如为二阶线性应包括临床允许误差）。 如可能应标出测定项目的医学决定水平及在此水平处 的临床允许误差。
计算统计量t，计算公式为：t =bi/SEi 其中，SEi 为每个非线性系数的斜率标准误 Y为回归方程预测值，与 为测定均值 由公式df = L*R-Rdf 计算自由度，L为样本数，R为每 个样本的测定次数，Rdf为回归自由度，即回归方程中 系数（包括b0）的个数
线性范围的评估及数据处理方法
线性范围的评估及数据处理方法
剔除离群值
离群值可由散点图初步判断，标准中建议采用格拉布 斯（GRUBBS）法进行离群值检验。检验步骤如下: 每组数据中有4个测定结果，将4个测定值按大小顺序 排列,最大值记为max,最小值记为 min; 计算均值和标准差S，根据可疑值max或min分别按下 式计算统计量t: t1=(max-均值 )/S，t2=(min-均值)/S 根据给定的显著性水平a和重复测定次数查表得临界值; 如t值大于临界值，则相应的可疑值为离群值。
对回归方程进行线性检验
在t值表中寻找t界值（双边检验，α=0.05），将计算出 的t值与界值比较 如p>0.05，表示非线性系数与零无显著性差异，数据 组被认为具线性，此时可对数据组进行精密度检验， 具体方法见后。当精密度符合线性判断要求时，数据 分析可结束。 如p<0.05，表示此非线性系数具有统计学显著性，数 据组为非线性，此时应进行临床标准的线性与非线性 检验
线性范围的评估及数据处理方法
实验样本的制备方法
样本号 1 2 3 4 5 6
低浓度血清(ml)
高浓度血清(ml)
1.00
0.00
0.90
0.10
0.80
0.20
0.70
0.30
0.60
0.40
0.50
0.50
样本号
7
8
9
10
11
低浓度血清(ml) 高浓度血清(ml)
0.40 0.60
0.30 0.70
线性范围的评估及数据处理方法
对数据组进行精密度检验
用最优拟合方程的回归标准误（σ）与总平均浓度( )的 百分比代表不精密度 跟据以下公式进行判断
线性范围的评估及数据处理方法
对数据组进行精密度检验
不精密度满足判断式时, 说明数据的精密度好可作线性 评价。 反之则表示数据的精密度差，不能作线性评价。 当PctBnd取5%时, 尚可通过查不精密度和临界值表判 断数据是否精密 (附表A和B), 如此时不精密度对应的临 界值显示P, 表明测量数据的精密度不符合作线性判断 的要求