细胞工程知识点
细胞工程知识点
细胞工程一、概念1、水平：细胞水平或细胞器水平2、目的：按人的意愿改变细胞内遗传物质或获得细胞产品二、植物细胞工程1、植物组织培养技术（无性生殖）（1）原理：植物细胞的全能性（2）过程：脱分化再分化胚状体离体的组织形成愈伤组织幼根和芽完整植株（愈伤组织：排列疏松，不规则，高度液泡化，具有分生能力的薄壁细胞；属于未分化的细胞）（3）条件①离体②无菌无毒③营养+植物激素（生长素和细胞分裂素）④一定的温度、PH、光照等条件（4）优点：①保持亲本的优良遗传性状；②快速繁殖大量后代；③培育无病毒植株。
（5）应用：微型繁殖；作物脱毒；人工种子；细胞产物等。
2、植物体细胞杂交（无性生殖）原理：膜的流动性（植物细胞的全能性）（1）过程：植物A细胞除去细胞壁植物A原生质体人工诱导融合植物B细胞果胶酶纤维素酶植物B原生质体AA筛选再生细胞壁原生质体融合AB AB原生质体BB 选择培养基（与高尔基体有关）杂种细胞愈伤组织杂种植株融合成功的标志：再生细胞壁（2）意义：克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍（3）促融方法：物理方法（离心、振动、电刺激）；化学方法（聚乙二醇）三、动物细胞工程1、动物细胞培养（原理：细胞增殖）（1）过程：剪碎胚胎或幼龄动物的器官组织单个细胞细胞悬浮液（有很强的分裂增生能力）胰（胶原）蛋白酶原代培养传代培养（1-10代）细胞株细胞系（获得不死性，遗传物质改变）注：①贴壁生长，有接触抑制②目前使用的或冷冻保存的细胞通常用在10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型③正常情况下瓶壁上只有一层细胞（2）条件：环境：无菌、无毒（培养基加抗生素）营养：合成培养基，以及动物血清（补充合成培养基中缺乏的物质）温度和PH：温度为36.5±0.5℃，PH7.2-7.4气体环境：95%空气和5%CO2（以维持培养液的PH）（3）应用：生产单克隆抗体；检测有毒物质等。
2、动物体细胞核移植（克隆——无性生殖）供体：体细胞核胚胎细胞核：全能性更高受体：去核次级卵母细胞（减二中；特点：细胞大，易操作，营养物质丰富，含有使细胞核全能性表达的物质）重组细胞用物理或化学方法激活，以完成细胞分裂和发育进程。
专题2__细胞工程知识点总结
生物选修3专题2 细胞工程知识点总结（一）植物细胞工程1.理论基础（原理）：细胞全能性全能性表达的难易程度：受精卵＞生殖细胞＞干细胞＞体细胞；植物细胞＞动物细胞2.植物组织培养技术（1）过程：离体的植物器官、组织或细胞―→愈伤组织―→试管苗―→植物体（2）用途：微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产。
（3）地位：是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。
3.植物体细胞杂交技术（1）过程：（2）诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等。
化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。
（3）意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。
（二）动物细胞工程1. 动物细胞培养（1）概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。
（2）动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
（3）细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。
细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。
（4）动物细胞培养需要满足以下条件①无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。
通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。
此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。
②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。
通常需加入血清、血浆等天然成分。
③温度：适宜温度：哺乳动物多是36.5℃＋0.5℃；pH：7.2～7.4。
④气体环境：95%空气＋5%CO2。
O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。
（5）动物细胞培养技术的应用：制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质、培养医学研究的各种细胞。
(完整word版)高中生物选修3细胞工程知识点
细胞工程考点一植物细胞工程1.细胞工程(1)操作水平：细胞水平或细胞器水平。
(2)目的：按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品。
2.植物细胞的全能性(1)概念：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能。
(2)原理：细胞内含有本物种的全部遗传信息。
(3)全能性表达条件：具有完整的细胞结构，处于离体状态，提供一定的营养、激素和其他适宜外界条件。
3.植物组织培养技术(1)原理：植物细胞具有全能性。
(2)过程：4.植物体细胞杂交技术(1)概念：将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。
(2)原理：体细胞杂交利用了细胞膜的流动性，杂种细胞培育成杂种植株利用了植物细胞的全能性。
(3)过程(4)意义：克服不同种生物远缘杂交的不亲和性。
5.植物细胞工程的实际应用(1)植物繁殖的新途径①微型繁殖：用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。
②作物脱毒技术：选取作物无毒组织(如茎尖)进行组织培养，获得脱毒苗的技术。
③人工种子：以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子。
(2)作物新品种的培育①单倍体育种a.实质：花药离体培养过程就是植物组织培养过程。
b.流程：花药单倍体幼苗――――――――→秋水仙素诱导染色体数目加倍纯合子。
c.优点：后代不发生性状分离，都是纯合子，能够稳定遗传，明显缩短了育种年限。
②突变体的利用：筛选出对人们有用的突变体，进而培育成新品种。
(3)细胞产物的工厂化生产1.植物组织培养的关键(1)条件：离体，一定营养物质，激素(生长素、细胞分裂素)等。
(2)培养基状态：固体培养基(需再分化生根培养基及生芽培养基) (3)体内细胞未表现全能性的原因：基因的表达具有选择性。
(4)光照的应用脱分化阶段不需要给予光照，再分化阶段需要给予光照，以利于叶绿素的形成。
2.杂种植物遗传物质的变化(1)遗传特性：杂种植株中含有两种植物的遗传物质，故杂种植株具备两种植物的遗传特性。
细胞工程知识点
第一章绪论1、细胞工程的概念，广义的细胞工程，狭义的细胞工程，⏹细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的方法，通过类似于工程学的步骤，在细胞整体水平或细胞器水平上，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质以获得新型生物或一定细胞产品的一门综合性科学技术。
⏹广义的细胞工程包括所有的生物组织、器官及细胞离体操作和培养技术，狭义的细胞工程则是指细胞融合和细胞培养技术。
2、细胞工程的研究内容（研究生物类型，实验操作对象）⏹根据研究生物类型不同，细胞工程可分为动物细胞工程、植物细胞工程、微生物细胞工程。
⏹动物细胞工程包括：细胞培养技术（包括组织培养、器官培养）；细胞融合技术；胚胎工程技术（核移植、胚胎分割等）；克隆技术（单细胞系克隆、器官克隆、个体克隆）。
⏹植物细胞工程包括：植物组织、器官培养技术；细胞培养技术；原生质体融合与培养技术；亚细胞水平的操作技术等。
3、细胞工程的重要应用（植物、动物）⏹植物细胞工程的应用：脱毒和快速繁殖细胞工程育种：利用培养变异，筛选优良突变体利用远缘杂交幼胚培养，获得杂种植株，克服其杂交不亲和性利用细胞融合技术，克服远缘杂交不亲和性倍性育种离体种质保存细胞培养生产有用物质⏹动物细胞工程的应用动物细胞培养生产医药产品（单克隆抗体）新品种培育试管动物与婴儿组织工程珍稀动物资源的保存与保护第二章细胞工程基础1、细胞分化：个体细胞发育过程中，后代细胞在形态、结构和生理功能上发生差异的过程。
2、发育潜能：指细胞分化能力的强弱。
3、细胞全能性：指细胞具有发育成完整个体的潜能。
4、细胞多能性：指随着胚胎发育，有的体细胞失去全能性，具有分化出多种组织的潜能。
5、去分化：又称脱分化，指某些条件下分化细胞不稳定，又回到未分化状态的这一过程6、愈伤组织：脱分化后的细胞，经过细胞分裂，产生无组织结构、无明显极性的、松散的细胞团称为愈伤组织。
愈伤组织的种类胚性愈伤组织（Embryonenic callus）：表面光滑、组织结构紧凑、细胞小、再生力强。
《细胞工程》 知识清单
《细胞工程》知识清单细胞工程是现代生物技术的重要组成部分，它是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过细胞水平或细胞器水平上的操作，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。
一、细胞工程的主要技术1、植物细胞工程（1）植物组织培养植物组织培养是指在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。
其过程包括脱分化和再分化两个阶段。
脱分化是指已经分化的细胞经过诱导后失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程；再分化则是指愈伤组织重新分化形成根、芽等器官的过程。
（2）植物体细胞杂交植物体细胞杂交是将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。
该技术可以克服远缘杂交不亲和的障碍，扩大了可用于杂交的亲本组合范围。
2、动物细胞工程（1）动物细胞培养动物细胞培养是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
动物细胞培养需要满足无菌、无毒的环境，营养，适宜的温度、pH 和气体环境等条件。
（2）动物细胞核移植动物细胞核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。
（3）动物细胞融合动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。
常用的诱导融合的方法有物理法（如电激）、化学法（如聚乙二醇）和生物法（如灭活的病毒）。
二、细胞工程的应用1、植物细胞工程的应用（1）快速繁殖优良品种通过植物组织培养技术，可以快速大量地繁殖优良品种，保持亲本的优良性状。
（2）培育脱毒作物利用茎尖等分生组织进行培养，可以获得无病毒植株。
（3）细胞产物的工厂化生产通过植物细胞培养，可以生产一些细胞产物，如药物、香料、色素等。
细胞工程知识点
细胞工程知识点植物细胞工程1.理论基础（原理）：全能性表达的难易程度：受精卵＞生殖细胞＞干细胞＞体细胞；植物细胞＞动物细胞 2.植物组织培养技术（1）过程：离体的植物器官、组织或细胞 ―→愈伤组织 ―→胚状体 ―→植物体（2）用途：微型繁殖、作物脱毒（材料： ）、制造人工种子（培养至 ）、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产（培养至 ）。
（3）地位：是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。
3.植物体细胞杂交技术 （1）过程：注：杂种细胞的染色体数等于两个杂交细胞的 。
（2）原理： （3）诱导融合的方法：物理法包括 等。
化学法一般是用 作为诱导剂。
（4）意义： 。
动物细胞工程1. 动物细胞培养（1）概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的，将它分散成，然后放在适宜的中，让这些细胞。
（2）动物细胞培养的流程：取动物组织块（的器官或组织）→剪碎→用处理分散成单个细胞→制成→转入培养瓶中进行→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续。
原代培养（10代以内）：遗传物质传代培养（10代以后）：遗传物质（3）细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就，称为（只有一层细胞）。
细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面时，细胞就会，这种现象称为。
（4）动物细胞培养需要满足以下条件①无菌、无毒的环境：培养液应进行处理。
通常还要在培养液中添加一定量的，以防培养过程中的污染。
此外，应，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。
②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、、无机盐、等。
通常需加入等天然成分。
③温度：适宜温度：哺乳动物多是；pH：。
④气体环境：95% ＋5% 。
O2是所必需的，CO2的主要作用是。
（5）动物细胞培养技术的应用：制备病毒疫苗、、、培养医学研究的各种细胞。
（①两种技术手段培养过程中都进行了有丝分裂，都是无性繁殖，都可称克隆，都不涉及减数分裂。
②植物组织培养最终产生新个体，体现了细胞的全能性；动物细胞培养产生大量细胞，不形成新个体，故不能体现细胞的全能性。
细胞工程的生物知识点总结
细胞工程的生物知识点总结1. 细胞结构与功能细胞是生命的基本单位，由细胞膜、质壁、细胞核、细胞质和细胞器等部分组成。
不同类型的细胞具有不同的结构和功能，请研究人员通过细胞工程技术对细胞的结构和功能进行深入研究，包括细胞的形态特征、生物化学特性、信号传导机制等。
2. 细胞培养技术细胞培养技术是细胞工程中的重要内容，主要包括细胞的分离、培养、传代、冻存和复苏等技术。
通过细胞培养技术，研究人员可以获取大量的同种或异种细胞用于实验研究和临床应用。
3. 细胞信号传导细胞信号传导是细胞与环境之间相互作用的过程，包括细胞对外界刺激的感知、传导和反应等。
研究人员通过细胞工程技术可以揭示细胞信号传导的机制，以及调控信号传导过程的方法和技术。
4. 细胞分化和再生细胞分化是指未分化的细胞在外部刺激下发生形态和功能上的改变，进而组成不同类型的成熟细胞。
细胞再生是指受损细胞的修复和更新过程，是细胞工程领域的研究热点之一。
5. 干细胞研究干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的细胞，对于细胞工程和再生医学有着重要的意义。
研究人员可以通过细胞工程技术对干细胞的生物学特性和应用潜力进行深入研究。
6. 细胞治疗和再生医学细胞治疗是指利用细胞工程技术治疗疾病的方法，包括干细胞移植、细胞基因治疗、组织工程等。
再生医学是利用细胞工程技术再生、修复和替代受损或疾病组织器官的医学领域。
7. 细胞生物传感器细胞生物传感器是一类利用细胞作为传感元件来检测生物学和化学变化的传感器，具有灵敏度高、选择性好、动态范围广等特点，对于环境监测和疾病诊断有着重要的意义。
8. 细胞克隆技术细胞克隆是人工复制和培育大量相同细胞的技术，包括植物细胞克隆、动物细胞克隆和人类细胞克隆等。
研究人员可以通过细胞工程技术研究细胞克隆的机制和方法，以及开发新的克隆技术。
总之，细胞工程是一门富有挑战和前景的学科，涉及多个学科和领域，将为人类健康、环境保护和生物制造等领域带来新的科技突破和应用。
细胞工程知识点
细胞工程知识点1、细胞工程：以细胞为对象，应用生命科学理论，借助工程学原理与技术，有目的地利用或改造生物遗传性状，以获得特定的细胞、组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。
2、细胞工程的应用：1)动植物快速繁殖技术：植物组织培养、人工种子、试管动物、克隆动物2)新品种的培育：细胞融合、细胞水平的重组3)细胞工程生物制品：单克隆抗体制备、疫苗生产4)细胞疗法与组织修复：2细胞工程理论基础1、细胞全能性：每个活的体细胞都具有像胚性细胞那样，经过诱导能分化发育成为一个新个体的潜在能力，并且具有母体的全部的遗传信息。
2、细胞分化：指细胞在形态、结构和功能上发生差异的过程。
3、细胞的脱分化：在一定营养和刺激因素作用下,具有特定结构与功能的植物组织的细胞被诱导而改变原来的发育途径,逐步失去原来的分化状态,细胞特性消失,转变为具有分生机能的细胞,并进行活跃的细胞分裂,这一过程称为去分化。
3细胞工程技术1、实验室条件：组成：准备室、无菌间、操作间、培养室、分析室。
2、无菌技术、显微技术、细胞观察与分析、细胞分离、细胞保存与复苏（1）细胞保存方法传代培养保存法低温冷冻保存法(低温、超低温保存) 液体固化的方式（形成冰晶、形成无定型的玻璃化状态）玻璃化指液体转变为非晶态（玻璃态）的固定化过程，在此状态时，水分子没有发生重排，不产生结构和体积的变化，因此不会由于机械或溶液效应造成组织和细胞伤害，化冻后的细胞仍有活力。
冷冻方法（缓慢冷冻法、快速冷冻法预冷冻法包括逐级冷冻和两部冷冻）细胞复苏按一定复温速度将细胞悬液由冻存状态恢复到常温的过程。
复苏细胞一般采用快速融化法。
以保证细胞外结晶快速融化，以避免慢速融化水分渗入细胞内，再次形成胞内结晶损伤细胞。
细胞培养和代谢调控：1、细胞培养：模拟机体内生理条件，将细胞从机体中取出，在人工条件下使其生存、生长、繁殖和传代，进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。
2、细胞培养的操作方式：分批式培养、流加式培养、半连续式培养、连续式培养、灌流式培养。
高中生物：细胞工程知识点
高中生物：细胞工程知识点（一）克隆1.克隆clone：无性繁殖系（只由一个模板分子、母细胞或母体直接形成新一代…）2.克隆技术cloning：从众多基因或细胞群体中通过无性繁殖和选择获得目的基因或特定类型细胞的操作技术3.内容：（1）分子水平：基因克隆即目的基因的复制（受体细胞的无性繁殖）、分离（特定基因探针选择、钓取目的基因）过程（2）细胞水平：杂交瘤制备单克隆抗体（3）个体水平：不通过两性细胞的结合，从一个单一（体）细胞繁殖出生物个体——胚胎细胞克隆以胚胎/卵细胞作为供体、利用核移植，不是严格意义上的动物个体克隆4.条件：（1）理论条件：细胞全能性/有发育成完整新个体的全套遗传物质（根本原因）（2）基本条件：①具有包含物种完整基因组的细胞核的活细胞②具有能有效调控细胞核发育的细胞质物质 e.g去核卵细胞③完成胚胎发育的必要的环境条件 e.g胚胎早期培养环境/子宫5.非正面影响：丰富生物多样性，促进生物进化，维护生态平衡（二）植物克隆1.全能性表达的难易程度：(1)受精卵＞生殖细胞＞胚胎/全能干细胞＞多能（干）细胞＞专能（干）细胞＞体细胞；PS生殖细胞在一定刺激下染色体可加倍；一些动物存在孤雌生殖(2)植物细胞＞动物细胞；低等动物＞高等动物PS不同种类植物或同种植物的不同基因型个体间全能性的表达程度大不相同2.植物组织培养（植物克隆的技术基础）（1）理论基础：植物细胞全能性，即植物体的每个生活细胞都具有遗传上的全能性，因而都具有发育成完整植株的潜能（2）过程：①离体植物细胞、组织或器官（外植体）→获得愈伤组织→诱导形成试管苗→新植株PS外植体选取形成层(分生组织)部分易于诱导形成愈伤组织A.培养条件：首先是离体培养(生物体内细胞中基因在特定时间和空间条件下选择性表达，细胞分化为不同组织、器官，故无法表现出全能性)半/固体培养基（固体为例）a.营养物质：水、无机盐、蔗糖、维生素、有机添加剂(氨基酸、琼脂凝固剂等)b.植物激素/生长调节剂（适当浓度配比诱导分化出芽/根的顶端分生组织/花）——CTK中等量IAA少量诱导脱分化，CTK、IAA比例合适诱导根芽分化c.无菌条件（外植体70%酒精消毒、器械高温蒸汽灭菌）——杂菌争夺产毒d.适宜的pH、温度和渗透压B.光照：若外植体是（带叶）茎段，不经历脱分化再分化，组培全过程均需要光照；若外植体是非光合作用部位（如胡萝卜块根），再分化成芽后光照C.试管苗移栽前需炼苗（草炭土/蛭石，逐渐降湿）D.愈伤组织：排列疏松的高度液泡化的活的薄壁细胞团②外植体→愈伤组织→摇床液体悬浮培养分散成单细胞→胚状体→人工种子PS 单细胞植物克隆，类似受精卵的卵裂、分化、器官发生、形态建成单细胞：细胞质丰富、液泡小、细胞核大（胚性细胞特征）③酶解细胞壁→原生质体培养→新植株（2）用途：微型繁殖、制造人工种子(胚状体阶段)、单倍体育种、作物脱毒（植物分生组织细胞，分裂旺盛病毒极少Cf抗病毒）、在培养基中加入不同浓度的氯化钠溶液，可诱发和筛选抗盐植株细胞产物工厂化生产（愈伤组织阶段已可，试管培养苗、细胞培养反应器也可）(3)长期培养后的全能性下降原因：染色体畸变、核变异、非整倍体产生；细胞或组织中激素平衡被打破；细胞对外源生长物质的敏感性改变；形成缺乏成胚性的细胞系——植株在多次继代培养后，会逐渐丧失细胞全能性的表达能力3.原生质体融合/植物体细胞杂交（不同植物）获得原生质体：在甘露醇溶液环境（较高渗透压）中用纤维素酶和果胶酶混合液处理用网筛过滤原生质体到离心管内，离心后收集沉淀物，用等渗溶液洗涤；检验原生质体是否符合要求：依据渗透作用原理，采用低渗胀破法（见比较表格）4.植物细胞工程：培养植物细胞（包括原生质体），借用基因工程技术将外源DNA导入受体细胞或通过细胞融合将不同源的遗传物质重新组合，再通过细胞培养，获得具有特定性状的植株C细胞工程：细胞培养和细胞融合（若基因型不同为细胞杂交）——基因定位：利用细胞杂交中染色体丢失与特定基因产物的对应关系（三）动物细胞工程1. 动物细胞培养指明“动物”细胞培养（1）概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。
细胞工程考点
悬浮培养：是指将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增殖的技术。
继代培养：将细胞从一个培养瓶转移到另外一个培养瓶内进行的连续培养的技术。
细胞同步化：是指同一悬浮培养体系的所有细胞都同时通过细胞周期的某一特定时期。
方法：分选法饥饿法抑制剂法低温处理法平板培养：指将一定密度的悬浮细胞接种到一薄层固体培养基中进行培养的技术。
看护培养：将亲本愈伤组织或高密度的悬浮细胞同低密度细胞一起培养，以促进低密度细胞生长、分裂的培养方法。
微室培养：为了进行单细胞活体观察而建立的单细胞培养技术。
大规模体系的建立:1.成批培养：是指一个培养体积中接种细胞和添加培养基后，中途不再添加培养基也不更换培养基的方式。
2.连续培养：在培养过程中，不断向生物反应器中以一定流量添加新鲜培养液，同时以相同的流量从系统中取出培养液，从而维持培养系统内的细胞密度，产物浓度及物理状态上的相对平衡。
特点：延长细胞培养周期延长产物的积累时间增加目的产物产量3.半连续培养：介于成批培养和连续培养之间的培养方式。
特点：节省种子细胞培养的成本有利于细胞分裂的启动人工种子：又称合成种子或体细胞种子，是将植物离体培养产生的体细胚包埋在含有营养成份和保护功能的物质中，在适宜的条件下发芽出苗。
植物体细胞杂交：植物体细胞杂交又称原生质体融合是指将植物不同种、属，甚至科间的原生质体通过人工诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。
植物脱毒: 用植物组织培养技术,除植物细胞中侵染的病毒,健康的繁殖。
培养基：培养基（Medium）是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐以及维生素和水等。
生物技术；利用生物学过程解决人类生存和发展所面临的问题的技术。
细胞工程；是以细胞学遗传学，发育学和技术及生物学等理论为基础，借助工程学的实验方法或技术，在细胞水平上研究改造生物遗传特性和生物学特性已获得特定的细胞，细胞产品或新生物体的有关理论和技术的方法。
细胞工程知识点总结
细胞工程知识点总结细胞工程的知识点主要涵盖细胞生物学、生物医学工程、材料科学、化学等多个领域的内容，下面将对一些重要的知识点进行总结和介绍。
一、细胞生物学1. 细胞结构和功能：细胞是生物体的基本单位，包括细胞质、细胞核、细胞膜等结构组成，具有营养吸收、代谢、生长繁殖、分化等功能。
2. 细胞信号传导：细胞通过受体、信号分子等进行信号传导，调控生物功能和代谢活动。
3. 细胞分化：在不同环境条件下，细胞可以分化成不同类型的细胞，如干细胞可以分化成心肌细胞、神经细胞等。
4. 细胞凋亡和增殖：细胞在受到损伤或者环境刺激时，会发生凋亡或者增殖，维持细胞组织的稳态。
二、生物医学工程1. 细胞培养技术：包括细胞分离、培养基配制、细胞传代、细胞冻存等技术，用于大规模的生物制品的生产。
2. 细胞毒性和安全性评价：评估材料或者药物对细胞的毒性和安全性，保证产品的安全性和有效性。
3. 细胞治疗和干细胞技术：通过干细胞移植、基因修复等技术，用于治疗各种疾病和损伤。
4. 人工器官和组织工程：将细胞和生物材料结合，构建人工器官和组织，用于替代受损的组织和器官。
三、材料科学1. 生物材料的设计和制备：设计和制备适合细胞生长的生物材料，如生物降解材料、生物亲和材料等。
2. 生物材料的表征和评价：通过表面形貌、力学性能、生物相容性等评价生物材料的性能。
3. 细胞-材料相互作用：研究细胞和材料之间的相互作用机制，改善生物材料的生物相容性和使用性能。
四、化学1. 细胞药物递送系统：设计纳米级的载体或者纳米颗粒，用于细胞内的靶向递送和释放药物。
2. 细胞标记和成像技术：利用高灵敏度的成像设备和生物标记物，在活细胞和组织中进行细胞成像和追踪。
3. 细胞信号调控：通过合成化学的方法来调控和干预细胞信号传导系统，研究细胞功能和代谢途径。
细胞工程的发展趋势主要包括以下几个方向：1. “定制化医疗”：根据个体的基因组信息和生理状态，设计和生产个性化的治疗产品和医疗器械，提高治疗效果。
细胞工程重点归纳
细胞工程重点归纳植物部分归纳一、细胞全能性1.定义：指分化细胞保留着全部的核基因组，具有生物个体生长，发育成所需要的全部信息，细胞经分裂和分化后仍具有形成完整有机体的潜能或特性。
2.分类：根据动物细胞全能性大小，可分为全能性细胞（如动物早期胚胎细胞），多能性（如原肠胚细胞），专能性（如造血干细胞）；根据植物细胞表达全能性大小排列是：受精卵、生殖细胞、体细胞；全能性的物质基础是细胞内含有本物种全套遗传物质。
一个生活的植物细胞，只要有完整的膜系统和细胞核，它就会有一整套发育成一个完整植株的遗传基础，在一个适当的条件下可以通过分裂、分化再生成一个完整植株，这就是所谓的植物细胞全能性。
这是植物组织培养的理论基础。
二、.培养基：成分、大量、微量、铁、Vc等的作用1.植物组织培养是指在含有营养物质及植物生长物质的培养液中，培养离体植物组织（器官、组织、原生质体或细胞）并诱导使其长成完整植株的技术。
2.成分：无机盐：大量元素（蛋白质、氨基酸、核酸及酶重要组成）：N、S、P、K（酶活化）、Ca（细胞壁组成）、Mg（叶绿素组成）；微量元素：Fe、Mn、Cu、Zn、cl、B、Mo.（参与生物调节）有机物：糖(碳源；维持渗透压)、氨基酸、维生素（参与酶合成及蛋白质和脂肪代谢）、肌醇（刺激细胞生长；促进糖转换、维生素利用）、腺嘌呤（促进合成分裂素）等调节物质：生长激素：刺激细胞分裂和诱导根的分化；细胞分裂素：引起细胞分裂，诱导芽的形成和促进芽的生长；赤霉素：能促进细胞生长，与生长素一起诱导细胞分化其他添加物：活性炭（吸附有害物质）、琼脂（固定）、抗生素（抑制污染）、酵母抽提液或麦芽抽提液（生长调节剂）、柠檬酸等3.Fe是植物制造叶绿素不可缺少的催化剂。
4.Vc是维生素类化合物在植物细胞里主要是以各种辅酶的形式参与多项代谢活动，对生长、分化等有很好的促进作用。
5.培养基的配置程序母液的配制和保存为了减少工作量，一般将常用的药品配成所需浓度的10～100倍，在配制大量元素母液时一定要注意在混合各种盐时产生沉淀。
细胞工程知识点陈永勤
细胞⼯程知识点陈永勤第⼀章植物组织培养简介1.细胞⼯程（Cell Engineering）：在体外对⽣物的细胞进⾏⽣长与分化的调控、遗传重组与改良，使其⽣产出⼈类所需要的产品。
2.细胞全能性假说是开展植物组织培养研究的理论基础；验证细胞全能性假说是开展植物组织培养研究的动⼒。
3.细胞分裂素与⽣长素的浓度⽐值决定着愈伤组织根或芽的形成。
细胞分裂素/⽣长素的⽐值：⾼：形成芽；低：形成根；相当：愈伤组织增殖，但不分化。
4.植物组织培养在植物性状改良上的应⽤:①.胚培养可克服远源杂交不孕的困难；②.花药（花粉）培养可⼤⼤缩短育种年限；③.原⽣质体融合技术可克服有性杂交不亲和，创造远源杂种、甚⾄新的物种；④.单细胞培养技术可⽤于突变体的筛选。
第⼆章植物组织培养的设施1.培养室所需要的设备：①.培养架:培养架的设计既要考虑充分利⽤培养室的空间，也要考虑取放材料⽅便。
②.加温/降温设备：空调③.光照和控光设备。
分为光培养室和暗培养室。
光培养室常⽤⽇光灯照明，并安置控制光照时间的⾃动开关。
2.瓶盖、瓶塞、或者封⼝膜的透⽓性能对材料的培养有显著影响，透⽓性能不好的，容器中湿度⾼（饱和），容易导致植物材料出现玻璃化（⽣理病态，植物材料呈⽔渍状，深绿⾊，刚脆，⽆继续培养的价值）第三章植物组织培养基1.培养基的重要性:1)植物材料⽣长的营养来源；2)调节植物材料⽣长与分化的主要途径。
2.培养基的组成：①.⽔：要求纯净。
应⽤蒸馏⽔、去离⼦⽔，⽽不⽤⾃来⽔。
②.⽆机营养成分：植物⽣长发育需要有16种必需元素：⼤量元素：C, H, O, N, P, K, Ca, Mg, S；微量元素：Fe, Cl, Cu, Mo, B, Zn, Mn。
不同培养基的⽆机盐（特别是⼤量元素）的浓度差异很⼤。
③.有机营养：有机营养（有机成分）：维⽣素和氨基酸的总称。
常⽤：肌醇、烟酸、维⽣素B6、维⽣素B1和⽢氨酸等。
其它维⽣素：维⽣素M（叶酸）、维⽣素B2（核黄素）、泛酸钙等。
细胞工程知识点总结
细胞工程知识点总结
1、细胞的全能性:
(1)概念:已经分化的细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能.
(2)原因: 已分化的细胞具有本物种全套的遗传物质
(3)千细胞: 动物和人体内保留着少量具有和分化能力的细胞
2、细胞全能性的证明实例
(1)植物组织培养证明了植物细胞具有全能性
(2)克隆动物证明了高度分化的动物细胞核也具有发育的潜能.3、可作为证明细胞全能性的实例必须同时满足以下三个条件:
O起点: 具有细胞核的细胞;@终点: 形成完整的个体;@外部条件: 离体、营养物质等
注:种子发育成植株不叫全能性
4、细胞分化程度与全能性的关系:分化程度越低的细胞全能性越高
5、细胞全能性比较
(1)动物与植物:植物细胞>动物细胞
(2)同一个体:受精卵>生殖细胞>体细胞
(3)同一细胞: 刚产生的细胞>成熟细胞>衰老细胞。
细胞工程知识点
细胞活力：活细胞在总细胞中所占的百分比。
细胞分裂指数：指的是分裂期的细胞在全部细胞中所占的百分率，用来表示细胞增殖旺盛的程度，常计算1000个细胞中处于分裂期的细胞数目。
活体染色：即在体外条件下用某种染色剂对活的组织或细胞进行染色，而不影响活细胞的生命活动的一种方法。
细胞活力测定（台盼蓝法）：活细胞不被染色，死细胞染成蓝色；用活细胞占细胞中的百分比表示细胞活力； 死细胞能被台盼兰染上色，死细胞能被台盼兰染上色，镜下可见深兰色的细胞，镜下可见深兰色的细胞，镜下可见深兰色的细胞，活细胞不被染活细胞不被染色，镜下呈无色透明状。
活力测定可以和细胞计数合起来进行，但要考虑到染液对原细胞悬液的加倍稀释作用。
组织细胞的分离：①机械法：离心分离法、切割分离法、机械分散法 ②消化法：胰蛋白酶消②消化法：胰蛋白酶消 化法、胶原酶消化法、螯合剂消化法化法、胶原酶消化法、螯合剂消化法愈伤组织：在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞，在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞，多在外植体切面上产生。
多在外植体切面上产生。
植物细胞全能性：指植物体的每一个活细胞都具有该植物的全套遗传信息，具备发育完整植株的潜在能力。
传代：将细胞从一个培养瓶转移到另外一个培养瓶即称为传代或传代培养。
原代培养：也称初代培养期。
从体内取出组织接种在培养瓶中培养到第一次传代前阶段，从体内取出组织接种在培养瓶中培养到第一次传代前阶段，一一般持续1-4周。
细胞株：细胞系经过进一步的克隆化得到的单一细胞组成的细胞群体。
细胞系：细胞系是由原代培养物经初步纯化，细胞系是由原代培养物经初步纯化，获得的以一种细胞为主的、获得的以一种细胞为主的、获得的以一种细胞为主的、能在体外长期生存能在体外长期生存的不均一的细胞群体。
的不均一的细胞群体。
接触抑制：正常的细胞不停的活动或移动，正常的细胞不停的活动或移动，但是当两个或几个细胞由于运动相互接触时，但是当两个或几个细胞由于运动相互接触时，但是当两个或几个细胞由于运动相互接触时，细细胞不再移动。
细胞工程重点整理
细胞工程第一章绪论1.细胞工程学（cell engineering）是以生物细胞、组织或器官为研究对象，运用工程学原理，按照预定目标，改变生物性状，生产生物产品，为人类生产或生活服务的科学。
根据研究对象可分为：植物细胞工程（plant~）、动物细胞工程（animal~）和微生物细胞工程（microorganism~）.生物技术（biotechnology）是指应用自然科学或工程原理，依靠微生物、动物或植物体作为反应器，将物料加工以提供产品为社会服务的技术。
主要包括发酵技术和现代生物技术。
2.细胞工程研究的内容：转基因动植物；染色体工程；组织、器官或细胞培养；原生质体培养；植物胚胎培养；动物胚胎移植、胚胎培养和试管动物；克隆动物。
3.细胞工程学理论基础：4.细胞工程学的发展：5.成熟期、迅速发展期的培养技术：6.细胞工程与基因工程：7.植物体细胞融合与动物体细胞融合：第二章细胞工程的细胞学基础1.细胞周期（cell cycle）:细胞分裂后产生新细胞，通过一定生长，随后又进行分裂形成两个新的子细胞，细胞这种周而复始的生长与分裂，即从一次细胞分裂结束开始，到下一次细胞分裂结束所经历的过程，称为一个细胞周期，可分为细胞分裂间期（interphase）[G1,S,G2]、细胞分裂期（division）.2.(细胞进入G1期后，三种情况)继续增殖：周期细胞（cycling cell/periodic cell）：不断离开G1期，并通过其他各期完成细胞分裂。
具有连续分裂能力，如分生细胞（根尖、茎尖的原分生组织细胞）。
不再增殖：终端分化细胞（terminal differentiation cells）：终生处于G1期而退出细胞周期，失去分裂能力，如多数成熟细胞（韧皮部的筛管分子）。
暂不增殖：G0期细胞（G0 phase cells）：细胞暂不分裂，执行其他功能，但保持分裂能力，在某些条件的刺激下恢复分裂能力，离开G1期进入细胞周期，如植物薄壁细胞。
细胞工程知识点
细胞工程：以细胞为主要研究对象，在组织、细胞、细胞器和分子水平上，运用工程学原理，按照预定目标，改造生物学性状、生产生物产品的应用型科学技术。
研究内容1、组织、器官和细胞培养——利用生物体各部分组织、器官或者细胞进行离体培养（in vitro culture）的技术。
它是细胞工程的基本技术。
2、动物胚胎工程胚胎移植——将动物体内发育的早期胚胎分离出来，将其移植到其它未受精母体子宫内，代孕产生个体的技术。
试管动物——利用精子和卵子的体外受精（in vitro fertilization, IVF），显微受精、胚胎体外培养和移植技术所获得的各种动物。
3、染色体工程借助于物理、化学等方法，使某种生物染色体数目、结构和功能发生改变的技术。
4、细胞遗传工程转基因动植物——用细胞工程结合基因工程方法将目的基因导入受体生物基因组中，在体内稳定表达，并稳定地遗传给后代。
克隆动物——动物的无性繁殖，不经受精过程，复制出基因型、外形和性能一致的个体。
5、细胞融合采用自然或者人工方法使两个和几个不同细胞或原生质体融合为一个细胞，用于产生新物种或品系及产生单克隆抗体。
研究任务举例①细胞或者组织所需营养和环境条件；⑤动物胚胎移植；⑦改良生物品种；发展简史探索时期（1859－1929）；培养技术建立时期（1930－1959）；迅速发展时期（1960～）植物培养技术原生质体培养和细胞融合1971年Nagata 等将烟草原生质体培养出再生植株；1972年Carlson用NaNO3进行了烟草原生质体融合；植物快繁技术花药培养技术次生物质生产传代:细胞在培养器皿中生长一定时间后，被分开接种到新的培养器皿中。
原代培养:取自体内新鲜组织并置于体外条件下生长的细胞在传代之前称为原代培养。
细胞培养：使用单个细胞悬液组织培养：使用组织块（0.5～1立方毫米）或薄片（厚0.2 毫米）器官培养：使用器官原基或器官的一部分或整个器宫原代培养细胞的生命归宿：原代培养期——传代期——衰退期细胞株：细胞连续培养40－50代，仍然保持原来染色体的二倍体数量及接触抑制的行为，这种传代细胞称作细胞株；细胞系“永生性”：细胞连续培养40－50代后，大部分死亡，少量发生了遗传突变，带有癌细胞的特点，染色体呈亚二倍体或非整倍体，失去接触抑制，容易传代培养；培养细胞的生长方式贴附生长（动物细胞）：必须贴附于支持物表面才能生长。
高三细胞工程知识点
高三细胞工程知识点一、细胞工程概述细胞工程是一门研究如何使用生物学、化学和工程学的方法来控制、改造和利用细胞的学科。
它涉及到细胞培养、细胞分离和纯化、基因转移和表达等技术，广泛应用于医学、农业、食品工业等领域。
二、细胞培养技术1. 细胞培养基的制备细胞培养基是支持细胞生长和繁殖所必需的营养物质的混合物。
常用的培养基包括DMEM、RPMI1640等，其中主要包括氨基酸、维生素、无机盐等成分。
2. 细胞的传代细胞的传代是指将细胞从一个培养皿中移入新的培养皿，以维持细胞的生长和增殖。
传代过程中需要注意细胞数量的控制、细胞的状态以及培养基的适应性等问题。
3. 细胞凋亡与增殖调控细胞凋亡是指细胞主动死亡的过程，而细胞增殖调控与细胞周期相关，包括细胞周期的调控因子以及细胞周期检查点等。
三、细胞分离和纯化技术1. 细胞分离方法常用的细胞分离方法包括机械分离、酶解法、渗透法等。
机械分离是通过机械力的作用将细胞从组织中分离出来，酶解法是应用特定的酶将细胞与周围组织分离，渗透法是利用渗透压差将细胞分离出来。
2. 细胞纯化方法细胞纯化是指将目标细胞从混合细胞群中提取出来的过程。
常用的细胞纯化技术包括流式细胞术、免疫磁珠法、密度梯度离心法等。
四、基因转移与表达技术1. 基因转染技术基因转染指的是将外源基因导入到目标细胞中。
常用的基因转染技术包括化学法、转染剂法、电穿孔法、病毒载体法等。
2. 基因表达技术基因表达是指使外源基因在目标细胞中转录和翻译为蛋白质的过程。
常用的基因表达技术包括原核表达系统、真核表达系统等。
五、细胞工程在医学中的应用1. 细胞治疗细胞治疗是指将人体的细胞或转基因细胞注入到患者体内以治疗疾病。
常见的细胞治疗包括干细胞治疗、免疫细胞治疗等。
2. 细胞培养技术在药物筛选中的应用细胞培养技术广泛应用于药物筛选的过程中，可以通过观察细胞的生长情况、细胞代谢产物来评估药物的疗效和毒副作用。
六、细胞工程在农业中的应用1. 转基因植物细胞工程技术可以用于制造转基因植物，通过引入外源基因来增加植物的抗病性、抗虫性以及耐胁迫能力。
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细胞工程知识点1、细胞工程：以细胞为对象，应用生命科学理论，借助工程学原理与技术，有目的地利用或改造生物遗传性状，以获得特定的细胞、组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。
2、细胞工程的应用：1)动植物快速繁殖技术：植物组织培养、人工种子、试管动物、克隆动物2)新品种的培育：细胞融合、细胞水平的重组3)细胞工程生物制品：单克隆抗体制备、疫苗生产4)细胞疗法与组织修复：2细胞工程理论基础1、细胞全能性：每个活的体细胞都具有像胚性细胞那样，经过诱导能分化发育成为一个新个体的潜在能力，并且具有母体的全部的遗传信息。
2、细胞分化：指细胞在形态、结构和功能上发生差异的过程。
3、细胞的脱分化：在一定营养和刺激因素作用下,具有特定结构与功能的植物组织的细胞被诱导而改变原来的发育途径,逐步失去原来的分化状态,细胞特性消失,转变为具有分生机能的细胞,并进行活跃的细胞分裂,这一过程称为去分化。
3细胞工程技术1、实验室条件：组成：准备室、无菌间、操作间、培养室、分析室。
2、无菌技术、显微技术、细胞观察与分析、细胞分离、细胞保存与复苏（1）细胞保存方法传代培养保存法低温冷冻保存法(低温、超低温保存)液体固化的方式（形成冰晶、形成无定型的玻璃化状态）玻璃化指液体转变为非晶态（玻璃态）的固定化过程，在此状态时，水分子没有发生重排，不产生结构和体积的变化，因此不会由于机械或溶液效应造成组织和细胞伤害，化冻后的细胞仍有活力。
冷冻方法（缓慢冷冻法、快速冷冻法预冷冻法包括逐级冷冻和两部冷冻）细胞复苏按一定复温速度将细胞悬液由冻存状态恢复到常温的过程。
复苏细胞一般采用快速融化法。
以保证细胞外结晶快速融化，以避免慢速融化水分渗入细胞内，再次形成胞内结晶损伤细胞。
细胞培养和代谢调控：1、细胞培养：模拟机体内生理条件，将细胞从机体中取出，在人工条件下使其生存、生长、繁殖和传代，进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。
2、细胞培养的操作方式：分批式培养、流加式培养、半连续式培养、连续式培养、灌流式培养。
3、分批式培养（植物细胞培养）：分批式培养过程的环境随时间变化很大，可分为延滞期、对数生长期、减速期、平稳期和衰退期等五个阶段。
4、流加式培养(适合植物）：随着营养物质的不断消耗，不断地向系统中补充新的营养成分，使细胞进一步生长代谢，直到整个培养结束后取出产物。
5、半连续式培养（动物细胞）：定期取出部分培养物，或是条件培养基，或是连同细胞、载体一起取出。
6、连续式培养：该模式是将细胞接种于一定体积的培养基后，为了防止衰退期的出现，在细胞达最大密度之前，以一定速度向生物反应器连续添加新鲜培养基；同时，含有细胞的培养物以相同的速度连续从反应器流出，以保持培养体积的恒定。
理论上讲，该过程可无限延续下去。
7、灌流式培养：灌流式培养是把细胞和培养基一起加入反应器后，在细胞增长和产8、物形成过程中，不断地将部分条件培养基取出，同时又连续不断地灌注新的培养基。
（动物细胞）9、代谢工程：通过某些特定生化反应的修饰来定向的改善细胞的特性，或是利用重组DNA技术创造新的化合物。
它是利用基因工程或是分子生物学技术、将生物技术内的代谢路径改变，通常改变生体内化学反应的酶。
代谢工程技术目前以微生物利用为主，改变工业微生物的代谢路径，生产所需要的化学物质，如抗生素。
10、逆代谢工程：是一种采用逆向思维方式进行代谢设计的新型代谢工程。
就是先在异源生物或相关模型系统中，通过计算或推理确定所希望的表型，然后确定该表型的决定基因或特定的环境因子，然后通过基因改造或环境改造是该表型在特定的生物中表达。
植物人工繁殖11、植物组织培养：是指在无菌条件下，将离体的植物器官（如根尖、茎尖、叶、花、未成熟的果实、种子等）、组织（如花药组织、胚乳、皮层等）、细胞（体细胞、生殖细胞等）、胚胎(如成熟和未成熟的胚)、原生质体等培养在人工配置的培养基上，给予适当的条件，诱发产生愈伤组织、潜伏芽，或者长成新的完整植株的一种实验技术。
也称植物离体培养或试管培养。
12、植物组织培养再生植株的途径：1）.器官发生途径：离体培养的组织或细胞团（愈伤组织）分化形成不定根、不定芽等器官的过程2）体细胞胚发生途径：从体细胞产生胚状体的过程13、植物组织培养的问题：玻璃化、褐化问题、微生物污染问题。
14、玻璃化问题解决方案：1）利用固体培养基,增加琼脂浓度，选择适当的碳源,提高培养基中蔗糖含量，从根本上降低培养基中的渗透势,造成细胞吸水阻遏,减少培养基中植物材料可获得的水分；2）采用通气性好的封口材料如纱布、脱脂棉等代替聚乙烯塑料膜作为封口材料,可降有效低培养容器内部环境的相对湿度,减轻有害气体的积累,使植物光合作用顺畅。
3）非受伤的物理和化学协迫可以增加乙烯的合成。
乙烯促进叶绿素分解及细胞的畸形发展。
乙烯处理破坏膜的结构，解离细胞壁，细胞内积累有少量纤维素及泡状物质。
4）培养基中BA浓度和培养温度与玻璃化成正相关，BA浓度越高或培养温度越高，玻璃苗比率越大。
选择搭配合适的激素,适当降低培养基中ＢＡ的浓度均可减轻玻璃苗的出现。
通过培养条件(温度和光照)减少玻璃苗的发生。
适当低温处理可消除玻璃化，提高光照强度,适当延长光照时间,充分利用自然光照也可以减低玻璃苗的发生频率。
5）在培养基中减少或除去ＮＨ4ＮＯ3，附加活性炭、青霉素、聚乙烯醇(ＰＶＡ)、Ｃａ、赤霉素(ＧＡ)及多效唑(ＰＰ333)等,减少继代培养的次数等措施均可降低观赏植物组培过程中玻璃苗的发生。
15、褐变解决途径：、1）选取适宜的外植体2）选择适宜的培养条件3）细胞筛选和预处理4）使用抑制剂（Vc、柠檬酸、巯基乙醇、谷胱甘肽、DTT等）5）使用吸附剂（活性炭、PVP等）16、微生物污染问题防治措施：1）改进外植体消毒方法2）反复检查培养物是否污染3）使用抗生素（用两性霉素B 、青霉素、链霉素）17、人工种子三部分：人工种皮外层，保护胚状体中的水分免于丧失和防止外部力量冲击；人工胚乳，含有必需的营养成分和某些植物激素；胚状体或芽。
18、极性现象：由细胞的电场方向决定的。
因为电场方向决定着细胞内的物质分配，这些物质包括无机盐类、蛋白质、核糖核酸等一些带电荷物质。
同时，生长素的梯度、pH梯度、渗透压大小、机械压、光照等都能使细胞形成电场，特别是膜上和Ca2+结合的蛋白质带有净的电荷，它在细胞内电场的建立中起着非常重要的作用。
19、植物激素的作用：(1)由IAA 和一些CTK的组合对愈伤组织根和芽的诱导。
(2)由IAA和GA3（赤霉素）在维管组织分化中的相互作用。
(3)由IAA对茎中皮层和髓组织内以及愈伤组织内维管束的诱导。
(4)茎组织对IAA的反应有不定根的发生。
(5)由GA3、IAA和乙烯对开花的诱导和性别的控制。
20、细胞分化的调控机制：1）细胞分化基因表达的主要调节发生在转录水平，而不是翻译水平。
2）调节细胞中转录过程的因素是非组蛋白,组蛋白使基因转录过程关闭，非组蛋白使部分基因转录过程打开。
21、植物胚胎培养：对植物的胚及胚器官（如子房、胚珠）进行离体无菌培养、使其发育成幼苗的技术。
包括：成熟胚培养、幼胚培养、子房培养、胚乳培养和试管受精等。
22、植物脱毒方法：1）物理法：高温处理、低温处理2）化学法：利用嘌呤和嘧啶类似物、氨基酸、抗生素等化学药品处理患病植物来抑制植物体内病毒的复制。
3）生物学方法：茎尖培养、微体嫁接法、通过愈伤组织培养、珠心培养法、花药培养脱毒。
动物人工繁殖1、体外受精：是指将哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术。
2、试管动物培育过程：（1）精子采集与体外获能、卵子采集与成熟培养。
（2）体外受精（3）胚胎体外培养（4）胚胎移植（5）体外发育、出生3、胚胎移植：是指将受精卵或发育到一定阶段的胚胎移植到与供体同时发情排卵、但未经配种的“受体”母畜输卵管或子宫的技术。
4、人工受精：将采集的精子注入发情处理的母体内完成受精过程。
5、人工受精繁殖动物的意义：1）提高优秀种公畜的利用率2）加速品种改良3）家畜配种不受时间和地域限制4）大幅度减少种公畜的饲养数量5）克服公母畜体型悬殊和种间交配困难6）防止疾病传播7）有利于提高母畜的受胎率5、人工授精技术3个环节：采精、精液处理和输精。
6、细胞核移植克隆动物的技术路线：1）核供体细胞的准备2）受体细胞的去核3）细胞核移植、激活4）重组胚的培养与移植5）核移植后代的鉴定7、胚胎冷冻保存方法：程序冷冻法、玻璃化冷冻法。
主要的冷冻损伤机制包括: 一溶液效应造成化学损伤二是细胞内结冰造成物理损伤三是细胞渗透压异常损伤。
冷冻保护剂：渗透型冷冻保护剂属于细胞内液抗冻保护剂：甘油、二甲亚砜非渗透型冷冻保护剂葡萄糖、二糖（蔗糖）、三塘（棉子糖）、聚乙烯吡咯烷酮、清蛋白注：抗冻蛋白8、精子冷冻保存方法：常温保存、低温保存、冷冻保存9、卵母细胞保存：玻璃化冷冻法、一步冷冻法、超快速冷冻法细胞重组与细胞融合1、细胞质工程：是研究真核细胞的核-质关系以及细胞器、细胞质基因转移的技术。
2、细胞质融合：也叫细胞杂交，是使用人工方法使两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的技术。
3、细胞质融合方法：1）生物法：病毒诱导细胞融合2）化学法：聚乙二醇诱导、脂质体法3）物理法：电融合诱导法4、病毒诱导细胞融合的优缺点：优点：操作简单、成本低。
缺点：要提前大量培养病毒，并且灭活后才能作为融合剂使用，操作繁琐，而且一旦灭活不充分，病毒可能感染操作者与亲本细胞5、聚乙二醇介导的细胞融合优缺点：优点：融合成本低，无需特殊设备；融合产生的异核率较高；融合过程不受物种的限制。
缺点：融合过程繁琐，聚乙二醇可能对细胞有害。
6、点融合诱导法的优缺点：优点：融合率高、重复性和可操作性强。
缺点：可能会造成不可恢复的细胞损伤。
新品种的培育1、体细胞杂交：是指将不同来源地体细胞融合并使之分化再生，形成新品种的技术。
2、多倍体育种的方法：1）化学方法：一些化学物质可以阻止卵母细胞第二极体生物释放或细胞分裂而产生多倍体。
常用的化学物质有：细胞松弛素、秋水仙素、聚乙二醇等。
2）物理方法：主要包括温变激变、机械创伤、辐射、水静压法和高盐高碱法等、3）生物法：指体细胞杂交，利用染色体加倍个体和为加倍个体杂交繁殖多倍体后代，常与物理化学法结合使用。
3、雌核发育：精子经过处理使用其核不参与受精卵卵球的发育，胚胎的发育仅在母体遗传的控制下进行的一种发育方式。
4、雄核发育：卵细胞不受精，卵核消失，或卵细胞受精前失活，由精核在在卵细胞内单独发育成单倍体，因此只含有一套雄配子染色体。
、5、雌核发育存在的问题：人工雌核发育的后代成活率较低，有的个体还有雌雄间性的特征。
6、.植物离体受精：指体外无菌条件下培养未受精的子房、胚珠和花粉、使花粉萌发进入胚珠完成受精的技术。