OLYMPUSIX51倒置显微镜操作规程-厦门大学医学院中心试验室
CXO_OLYMPUS IX71倒置荧光显微镜使用与维护SOP
起 草：李敏惠 日期：2007.10.24 审 核：邹强 日 期：2007.11.07 批 准：王伦安 日期：2007.11.15生效日期：2007.12.01签 字：修订号生效日期制定（变更）原因及目的：01 2007.12.01 开始按SOP 管理 02 03 分子生物学 [ ]份 组织病理学 [ ]份 细胞培养室 [ 1 ]份 天然产物 [ ]份 抄送SPF 级动物 [ ]份精密仪器室 [ ]份准 备 室 [ ]份技术档案室 [ 1 ]份OLYMPUS IX71倒置荧光显微镜使用与维护SOP1 适用范围¾ 本SOP 适用于OLYMPUS IX71倒置荧光显微镜的使用及维护保养。
2职责¾ 操作人员：认真执行本SOP 的内容，并作好相关记录。
¾ 设备管理员：培训、指导操作人员正确执行本SOP ，同时需按本SOP 对设备进行定期维护保养并作好相应记录。
3主要性能参数 物镜转换器 六孔，带有简易防水装置聚焦行程9mm （从载物台表面起，向上7mm ，向下2mm ），同轴粗/微调节钮（微调精度1μm ，微调每圈行程100μm ），上限位锁定机构，粗调扭力矩调节器初始图像光口 上光口，更换内置1×/1.6×变倍器显微镜镜体前置操作光路选择钮，透射光强调节钮和灯开关，TTL 脉冲控制钮。
100W 透射光照明柱IX2-ILL100 照明支柱倾斜装置（30度倾角，带有减震装置）；聚光镜架（行程50mm ，带有摆动装置）；可调视场光阑，4个滤色片架（直径45毫米，厚度=6mm 或更小）透射光照明器外接电源装置 TH4-200 200V ，TH4-HS 手动控制器，重量2.2kg观察筒双目观察筒 U-BI90 瞳间距调焦范围：50～76mm ，带有屈光度调节功能，视场数22 载物台右手控制旋钮载物台IX2-SFR行程：50mm （X ）×50mm （Y ），载物台插入板可更换（直径110mm ）聚光镜 长工作距离聚光镜IX2-LWUCD5孔转盘（其中3孔直径30mm ，2孔直径38mm ），孔径光阑可调，N.A.0.55，W.D.27mm目镜 WHN10×-H 高眼点，带屈光度调节功能，视场数22 荧光照明器 IX2-RFA 直型设计，带有视场光阑模块，有滤色片滑板（2个位置，直径32mm ，厚度或更小） 反射光荧光装置荧光滤色镜转盘 IX2-RFAC 转盘上有6个位置，内置光闸光源 100W汞灯室和变压器4 主要应用范围¾透射光明场、透射光相差、反射光荧光显微观察5 启动5.1 5.2 5.36.16.2 6.36.46.5 6.6 6.76.8将光强调节钮调节到最小；打开显微镜电源，将主开关拨到“I”（开）；荧光观察时，开荧光汞灯光源，将主开关拨到“I”（开）；¾汞灯是高压激发，其内是高压，切忌频繁开关，可能的话，需观察的样本请集中在一个时间段观察，在开灯10~15分钟后开始观察效果较好。
微生物学检验--操作流程及评分标准
微生物学检验--操作流程及评分标
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显微镜的使用操作流程及评分标准
细菌的形态学检验操作流程及评分标准
基础培养基的制备与灭菌操作流程及评分标准
细菌的接种培养法操作流程及评分标准
细菌的分布操作流程及评分标准
细菌对抗药物敏感试验操作流程及评分标准
糖发酵试验操作流程及评分标准
甲基红试验操作流程及评分标准
病毒的分离培养操作流程及评分标准
1111。
倒置荧光显微镜2
8. 聚光器中心调节 1）确信10X物镜在光路中。 2）将“视场光阑调节杆”降低直到能从目镜看到视场光 阑像。 3）转动“聚光器调焦钮”升降聚光器，使视场光阑像清 晰地成象在标本面上。 4）转动两个“聚光器中心调节螺钉”，使视场光阑像在 视场中心。 5）更换40X物镜。 6）调节“视场光阑调节杆”，使视场光阑的象与视场大 致相同。 7）转动两个“聚光器中心调节螺钉”，使视场光阑像在 视场正中。
简易操作程序： 倒置显微镜中最常用的观察方法就是相差。由于这种方法不要求染色，是观察活细胞 和微生物的理想方法。在此提供各种聚光器来满足需要，这种方法提供带有自然背景 色的、高对比度的、高清晰度的图像。 1.开机。接连电源。打开镜体下端的电控开关。 2.使用 (1)准备：将待观察对象置于载物台上。旋转三孔转换器，选择较小的物镜。观察，并 调节铰链式双目目镜，舒适为宜。 (2)调节光源：推拉调节镜体下端的亮度调节器至适宜。通过调节聚光镜下面的光栅来 调节光源的大小。 (3)调节像距：转三孔转换器，选择合适倍数的物镜；更换并选择合适的目镜；同时调 节升降， 以消除或减小图像周围的光晕，提高了图像的衬度。 (4)观察：通过目镜进行观察结果；调整载物台，选择观察视野。 3.关机 取下观察对象，推拉光源亮度调节器至最暗。关闭镜体下端的开关，并断开电源。旋 转三孔转换器，使物镜镜片置于载物台下侧，防止灰尘的沉降。
聚光器座的转动 拧松聚光器座旋转指紧螺钉，聚光器座就可 以转动。 此功能主要用于微分干涉显微术时调节偏振 方向。 当用系统聚光器及无起偏器光器转盘位置，为显微操作器或其它 系统留下空间。
故障及对策
维护 1. 镜头的清洁 不要将灰尘、指纹等留在镜头上。镜头、滤色片上的灰尘将影响视场中的图像。 如果镜头变脏，按以下方法进行清洁。 • 将灰尘用软刷刷去，或用纱布轻轻擦掉。 • 如果镜头上有指纹或油脂，可用一块沾有纯酒精（乙醇或甲醇）的柔软清洁的 棉布、镜头纸或纱布擦去。 • 当擦物镜上的浸油时，使用石油醚。如果没有石油醚，请用乙醇。但是，因为 乙醇的清洁效果没有石油醚效果好，需要重复擦表面。（通常清洁镜头要三到四 次。） • 勿用石油醚清洁目镜筒底部的镜头或目镜筒表面。 • 纯酒精和石油醚均为高度易燃品。因此在使用、保管、搬运过程中应格外小心。 操作电源开关或台灯尚热时，勿将它们放在灯泡附近。 • 使用纯酒精时，请遵守厂家提供的使用说明书。
OLYMPUS_IX71倒置显微镜操作规程
OLYMPUS IX71倒置显微镜操作规程编写人：於锋时间一、目的正确使用倒置显微镜对细胞标本的形态特征进行观察，为生命科学的研究提供更多可靠的实验数据。
二、原理倒置显微镜系统（IX71系列）是在透镜成像原理基础上发展起来的显微观察系统，利用卤素灯为光源，光线经过聚光镜汇聚后透过标本，通过物镜对标本进行聚焦放大成像，最后通过目镜把物镜所成的像再次放大，从而使实验者能够清晰的分辨体外培养的细胞的形态以及内部结构，主要用于体外活细胞培养形态观察，根据实验需求配置了明场、暗场、相差、荧光等技术模块。
三、主要操作规程相差观察：1.打开主开关2.转动光路选择盘到“眼睛”位置。
3.装上观察样本。
使用10X物镜，将聚光镜转盘转到“BF”位置。
4.瞳距调节5.屈光度调节：通过螺旋目镜屈光度调节环。
6. 通过粗微调对样本准确调焦。
选择所用物镜，10X，20X，40X。
相差观察时转动聚光镜转盘到“PH”位置。
相差只能用10X，20X物镜观察和摄影。
7. 调节光线强度：明场观察时，调节孔径光栏。
相差观察时，打开孔径光栏8. 观察。
荧光观察步骤：打开荧光供电装置开关，关掉显微镜主开关。
等大约10分钟后电弧稳定。
连接UV防护板把光路选择转盘和选择杆转到“眼睛”位置。
使相应的荧光激发滤色镜进入光路根据标本不同，选择U，B，G激发。
打开激发光光闸使光通过把所用物镜推入光路10X，20X，40X。
把标本放在载物台上，对标本进行调焦，如果荧光衰退快，请将激发光光闸推入光路使用1小时后关掉电源开关。
普通明场观察：打开明场电源开关（“︱”为开，“○”为关）将样品置于载物台上将光路选择旋钮调至观察位置4.从低倍镜开始观察，相差环拨到明场（BF）位置，荧光滤色块转盘拨到“1”的位置5.调节透射光光强，调焦，找到预观察视野6.依次换到高倍镜，观察样品7.拍照时将光路选择旋钮调至相机位置关机：1. 关闭汞灯电源（注意：汞灯需使用半小时以上方可关闭，关闭半小时以后方可再次开启）2. 将透射光强调到最小，透射光选择按钮按出3. 关闭明场电源开关4. 将镜头转到低倍镜，取出样品，若使用过油镜用干净的擦镜纸擦拭镜头5. 确认数据已经保存，关闭软件6. 使用光盘拷贝数据（禁止使用移动储存设备拷贝数据）7. 关闭电脑，登记使用时间、荧光数字等使用情况倒置IX71显微镜透射光明场观察步骤观察相差时，要使用与相差物镜放大倍数相匹配的相差环板。
倒置相差显微镜及荧光显微镜原理、使用与注意事项
倒置相差显微镜及荧光显微镜的使用XXX,YYY,ZZZ(版权所有，仅限个人)1倒置相差显微镜倒置相差显微镜，是将相差显微镜和倒置显微镜相结合的产物，倒置相差显微镜既具有倒置显微镜的倒置观察方式，同时又具有与相差显微镜相一致的成像原理。
因此，研究倒置相差显微镜的工作原理就需分别研究倒置显微镜和相差显微镜的工作原理。
1.1倒置显微镜的工作原理：倒置显微镜组成和普通显微镜一样，主要包括三部分：机械部分、照明部分、光学部分。
其中与普通显微镜有明显区别的是：物镜与照明聚光系统的相对位置。
相比于普通显微镜，倒置显微镜的物镜与照明聚光系统以载物台为轴颠倒位置，物镜在载物台之下，照明系统在在载物台之上。
这样的构造使得照明聚光系统与载物台的有效距离可以显著扩大，便于放置培养皿、细胞培养瓶等较厚的待观察器具，而同时物镜与材料之间的工作距离不必很大。
图1.1倒置显微镜由于倒置显微镜观察的材料一般都是培养的细胞，透明性大，结构对比不明显，故倒置显微镜常配备相差物镜，实际上也就构成了倒置相差显微镜（图1.1）。
1.2相差显微镜的工作原理：1.2.1光学知识镜检时，视场中的样品只有在其透射光的波长（颜色）和振幅（亮度）与周围介质有明显变化时，才能被眼睛所分辨。
照明光线通过无色透明的物体时，透射光的波长和振幅都不发生明显改变，尤其是振幅，几乎无变化。
所以用普通光学显微镜观察时，难以辨清这样物体的结构，必须借助于固定和染色等理化方法，使样品和背景的透射光在波长或振幅上发生变化，即在颜色和亮度上有所差异，以供识别。
一束光线在透过折射率n不同的透明介质后，产生的衍射光和透过的直射光的波长没有明显变化，只是衍射光的振幅稍小于直射光，这也是透明不均质物质产生些许明暗变化的原因，但这一点变化很小，并不能有效分辨。
变化明显的是衍射光相对透射光在相位上有1/4λ的滞后，虽然人眼不能分辨相位的差别，但可以分辨振幅和波长的变化。
相差显微镜就是利用这一点，将相位的差别转变成振幅的变化，也就是将本来均为透明但折射率不同的各个结构显现出明暗差距，从而可以被清楚地分辨。
倒置荧光显微镜 尼康Ti s操作规程
尼康TI-S操作规程眼视光研究室2012-02-29警告和注意1高温警告此标记在透射照明器的顶部及12V100W 灯室上，提醒您注意以下几点：A 灯亮时，灯泡可产生高温高热，灯室在使用过程中及照明刚关闭时非常热，为避免烫伤，请勿在灯亮时触摸灯室，而要在关闭电源30 分钟后方可接触；B为避免火灾，切勿在亮灯或熄灯三十分钟内，在灯室周围放置纤维织品、纸张或易燃物质如汽油、乙醚、稀料或酒精；C在使用时电源底座发热，请不要堵塞电源侧面的通风孔；D更换灯泡前确信灯室已充分冷却。
3 不要弄湿显微镜如果显微镜被弄湿，可能会导致电路短路从而损坏显微镜或发生危险。
如果不小心将液体溅到显微镜上，请立即关闭电源开关(拨至O 侧)并拨掉电源线，然后用一块干布擦干。
如果有液体进到显微镜内，请停止使用并与就近的尼康代理商联系。
4 微弱电磁波本显微镜有微弱的电磁波，如果靠近精密电子仪器使用，其精度有可能受到不良影响。
5 搬运显微镜当移动显微镜时，请不要紧握调焦旋钮、目镜筒、平台、透射照明器等部位，因为这有可能导致部件损坏或脱落。
而要握紧显微镜前、后的底部。
6 小心T-SR 矩型载物台的伸出齿条平台移动时T-SR 矩型载物台的齿条会向外伸出，在调焦或转动物镜转换器时，小心不要被齿面弄伤您的手。
明场显微术操作规程A明场显微术用于观察染色标本和定位样本观察视野；B透明照射器（卤素灯）使用时灯泡可产生高温高热，使用完请勿立即盖上防尘罩，而要在关闭电源30 分钟后再盖上防尘罩，防止烧坏显微镜部件和发生火灾8；C聚光器调焦旋钮、聚光器和环形光阑调中螺钉由工程师调整固定好，请不要随意调整，以免造成显微镜使用不正常8，12；D 使用完毕后，请及时登记显微镜使用状态。
注意：流程：-物镜及物镜转换器-荧光滤光块转盘-目镜2 打开电源：A 打开外置电源开关8；B 打开显微镜左侧的透射照明器开关10；C 将显微镜上的亮度调节盘调整到12V100W位置10；3 将滤光片D\NCB推进到光路中，ND根据亮度需要移入和移出光路9；4 将聚光器模块旋转至A位置12；5 将荧光滤光块转盘旋转至无字母标示位置（明场无需使用荧光滤光片）10；6 先用低倍物镜确定观察视野，调节亮度和焦距，找到并观察样本7，10；7 调整目镜筒的屈光度使成像清晰度，调整目镜筒瞳距宽度11；8 通过物镜转换器切换高倍物镜观察细胞，调节亮度、焦距和物镜校正环，找到并观察样本，使显微图像最清晰（切换高倍物镜后光线会减弱）10；9 20倍物镜和40倍物镜带有物镜校正环，当校正环刻度设定值与实际容器底板厚度（细胞培养皿或载玻片的底部）一致时，显微图像为最清晰状态10；10肉眼观察找到需拍照视野后，通过光路转换盘切换光路，打开电脑和软件拍照11；11观察结束时，把显微镜左侧亮度调节旋钮调至最小，依次关闭显微镜左侧的透射照明器开关和外置电源开关，登记显微镜使用情况；12 请勿立即盖上防尘罩，而要在关闭电源30 分钟后再盖上。
上海理工大学医疗器械与食品学院OLYMPUSIX倒置相差荧光显微镜使用说明
Ⅲ、执行完黑(白）平衡以后，若要恢复图像原来的色调,可通过点击“acquisiｔion settinｇ”找到”Caｍera”然后将其下拉菜单里的“cｏｌor”的RGB值恢复初始状态即可。
I、拍照前在软件中选择正确的物镜倍率。
Ⅱ、在Vｉｅw菜单下选择Ｓcaｌｅ Bar 选项,标尺即会在图片上显示出来。
Ⅲ、拍照以后如果想将标尺保存在图片中,则在Ｉmaｇe 菜单下选择Bｕｒｎ In Info 选项，然后保存图片。
3）白平衡和黑平衡
Ⅰ、在预览界面下可使用黑白平衡功能，根据标本类型不同,黑白平衡功能之一分别可用（明场观察时白平衡可用，荧光观察时黑平衡功能可用)。
1０X、20X物镜用ＰH1
40Ｘ物镜用PH2
2)调节调焦旋钮,获得清楚的相差图像。
3)20X、40X的物镜上有矫正环,根据不同的培养容器需要调节矫正环，在聚焦到相对最清楚后调节矫正环至图像最清晰。
*观察相差时,要使用与相差物镜放大倍数相匹配的相差环板。
三、荧光方式的使用说明
1）打开汞灯光源控制器U-RＦL-T的电源(开关在控制器前面板右下方）“Ｉ”为打开，“o”为关闭;2s后“BＵＲＮER OＮ”指示灯点亮为绿色,荧光光源完全打开。
注意：汞灯光源不要频繁开关,打开后至少使用半小时以上,关闭后至少等待半小时再打开。
2）调节荧光滤色块转盘到合适的位置进行荧光观察。观察之前确保荧光滤色块转盘上的光闸shuｔter处于打开位置(“o”为打开,反之为关闭）。
4、DP2-BSＷ软件使用
1)单张实时图像预览及图像采集
2）图像添加标尺及标尺保存
TH4电源开关
奥林巴斯生物显微镜操作规程
奥林巴斯生物显微镜操作规程奥林巴斯生物显微镜操作规程2篇篇一：OLYMPUS显微镜操作规程OLYMPUS显微镜操作规程（1）打开光源开关，调节光强到合适大小（不要调到最亮）。
（2）选择所需光路。
（3）转动物镜转盘，使低倍镜头正对载物台上的通光孔。
（4）将所要观察的玻片放在载物台上（玻片标本上下不得有水或其他液体），使玻片中被观察的部分位于通光孔的正中央。
（5）先用低倍镜观察（10X）。
观察之前，先转动粗动调焦手轮，使载物台上升，物镜逐渐接近玻片。
需要注意，不能使物镜触及玻片，然后，通过目镜观察，并转动粗调焦手轮，使载物台慢慢下降，直到看清物像。
如果像偏离视野，可调节载物台移动杆。
（6）瞳距调节：使两目镜距离与自己两眼距离相等。
（7）屈光度调节：以右眼看右目镜，用微调旋钮调好焦距；以左眼看左目镜，旋转屈光度调节环调好焦距。
（8）高倍物镜观察：把物像中需要放大观察的部分移至视野中央。
将高倍物镜转入光路（一般具有正常功能的显微镜，低倍物镜和高倍物镜基本齐焦，在用低倍物镜观察清晰时，换高倍物镜应可以见到物像，但物像不一定很清晰），微动调焦手轮进行调节。
（9）聚光镜调整：调节聚光镜升降旋钮使聚光镜到最高位置：调聚光镜孔径光阑②使与物镜倍数相对应。
（10）需更换标本观察时，先将物镜转到10×再更换标本，严禁在高倍物镜下取放标本。
篇二：奥林巴斯生物显微镜使用、维护保养操作规程1、仪器及电源组成：本系统由目镜、镜筒、中间镜筒、镜臂、物镜转盘、载物台、聚光镜、灯室等单元组成；电源由TL4外接30W电源装置组成。
2、打开光源，调节亮度2.1开启设备总电源开关，接通TL4外接电源：检查一下，光强调节旋钮‘I’的标志要指向低电压（最左边方向），然后，把主开关位于‘O’（关）的位置调至‘I’（开）。
2.2顺时针转动光强调节旋钮‘I’（提高照明电压，使照明更亮），从左边旋转到右边并根据玻片性质调整内置照明灯光亮度及光圈大小，使视野亮度处于合适范围；将事先准备好的玻片放到已降低的载物台上，拉开夹片器，放上样品载玻片用标本夹片器夹好，转动物镜转盘，先用移动手轮转动载物台旋钮，调整观察位置使观察样品大致位于物镜正下方。
OLYMPUSIX51倒置显微镜操作规程-厦门大学医学院中心试验室
倒置荧光显微镜操作规程Olympus IX5厦门大学医学院中心实验室黄静茹2017年3月说明：①透射光主开关；②汞灯高压电源开关；③透射光光强控制钮；④滤色片架；⑤光路选择杆；⑥X轴和Y轴调节钮；⑦物镜转盘；⑧粗/微调焦旋钮；⑨双目观察筒；⑩屈光度调节环；⑪聚光镜高度调节钮；⑫聚光镜对中旋钮；⑬视场光阑调节杆；⑭孔径光阑调节杆；⑮聚光镜转盘；⑯荧光光闸（SHUTTER）；⑰荧光激发块转盘；⑱荧光减光阀正式操作仪器之前请注意如下事项：首先要在仪器预约保护时间内及时使用本人注册的校园卡刷卡开始实验。
1.查看仪器使用记录本，如之前使用者有记录仪器异常情况，请不要开机使用。
2.查看仪器整体有无异常，周围环境是否正常，需要时要开启室内空调，检查并清空除湿机水箱。
3.查看仪器使用记录本及刷卡机“日历”，如之前使用者刚刚关机，请等候30分钟以上再开机使用。
一、开机1、打开透射光源（白光）主开关①；2、打开荧光光源（汞灯高压电源）②；3、打开电脑，进入cellSens Standard工作站；备注：标本为HE染色、免疫组化时，不需要打开荧光光源；标本为荧光染料染色时，一般也不需要打开白光光源。
二、明场观察（Bright Field BF）1、正确放置标本，BF主要用于HE染色、免疫组化标本；2、转动荧光激发块转盘⑰到“6”的位置；3、转动聚光镜转盘⑮到“BF”位置，直到听到咔嗒声；4、将光路选择杆⑤推进去（选择目镜观察光路）；5、转动物镜转盘⑦，选用合适的物镜，调节白光光强控制钮③至合适的强度，调节粗/细调焦旋钮⑧聚焦观察,根据需要调节瞳间距⑨和屈光度⑩；三、相衬观察（Phase contrast PH)1、正确放置标本，PH主要用于没有任何染色的、较透明的标本；2、转动荧光激发块转盘⑰到“6”的位置；3、转动物镜转盘⑦，选用合适的物镜；4、转动聚光镜转盘⑮，使相衬光学元件与所用物镜相匹配（见表1）；5、将光路选择杆⑤推进去（选择目镜观察光路）；6、调节光强控制钮③直至合适的强度，调节粗/细调焦旋钮⑧进行聚焦观察,根据需要调节瞳间距⑨和屈光度⑩。
OLYMPUSIX51倒置显微镜操作规程-厦门大学生物医学仪器共享平台
倒置荧光显微镜操作规程Olympus IX5厦门大学医学院中心实验室黄静茹2016年10月说明：①透射光主开关；②汞灯高压电源开关；③透射光光强控制钮；④滤色片架；⑤光路选择杆；⑥X轴和Y轴调节钮；⑦物镜转盘；⑧粗/微调焦旋钮；⑨双目观察筒；⑩屈光度调节环；⑪聚光镜高度调节钮；⑫聚光镜对中旋钮；⑬视场光阑调节杆；⑭孔径光阑调节杆；⑮聚光镜转盘；⑯荧光光闸（SHUTTER）；⑰荧光激发块转盘；⑱荧光减光阀一、开机1、打开透射光源（白光）主开关①；2、打开荧光光源（汞灯高压电源）②；3、打开电脑，进入cellSens Standard工作站；备注：标本为HE染色、免疫组化时，不需要打开荧光光源；标本为荧光染料染色时，一般也不需要打开白光光源。
二、明场观察（Bright Field BF）1、正确放置标本，BF主要用于HE染色、免疫组化标本；2、转动荧光激发块转盘⑰到“6”的位置；3、转动聚光镜转盘⑮到“BF”位置，直到听到咔嗒声；4、将光路选择杆⑤推进去（选择目镜观察光路）；5、转动物镜转盘⑦，选用合适的物镜，调节白光光强控制钮③至合适的强度，调节粗/细调焦旋钮⑧聚焦观察,根据需要调节瞳间距⑨和屈光度⑩；三、相衬观察（Phase contrast PH)1、正确放置标本，PH主要用于没有任何染色的、较透明的标本；2、转动荧光激发块转盘⑰到“6”的位置；3、转动物镜转盘⑦，选用合适的物镜；4、转动聚光镜转盘⑮，使相衬光学元件与所用物镜相匹配（见表1）；5、将光路选择杆⑤推进去（选择目镜观察光路）；6、调节光强控制钮③直至合适的强度，调节粗/细调焦旋钮⑧进行聚焦观察,根据需要调节瞳间距⑨和屈光度⑩。
表1：物镜、相差元件匹配表物镜4X 10X、20X 40X 相差元件PHL PH 1（PH C）PH 2四、荧光观察1、如果需要，可先用明场观察对标本定位，再转入荧光观察；2、如果不再需要BF观察，可关闭白光电源②；或将白光光强调节钮③逆时针旋至最低，将孔径光阑向右拨至最小；3、转动荧光激发块转盘⑰，根据所用的荧光染料选择匹配的荧光激发块；表2：荧光激发块序号激发块名称激发光λ（nm）发射光λ（nm）滤掉光λ（nm）1 WU 330-385 420 ＜4002 WB 450-480 515 ＜5003 WG 510-550 590 ＜5704 WBV 400-440 475 ＜4555 WIY 545-580 610 ＜6006 BF 明场、相差4、打开荧光光闸⑯（SHUTTER），使其置于“O”位置；5、将光路选择杆⑤推进去（选择目镜观察光路）；6、转动物镜转盘⑦，选用合适的物镜，调节粗/细调焦旋钮⑧聚焦观察，根据荧光强度选择合适的ND滤镜（荧光减光阀）⑱进入光路。
倒置显微镜培训
否则会刮伤镜头表面，严重损坏镜头，也不要用水擦试镜头，这样会 在镜头表面残留一些 水迹，因而可能滋生霉菌，严重损坏显微镜。 仪器工作的间歇期间，为了防止灰尘进入镜筒或透镜表面，可将目镜 防尘塞盖上，或用防尘罩将仪器罩住。 不允许随意拆卸仪器，特别是中间光学系统或重要的机械部件，以免 降低仪器的使用性能。
倒置显微镜使用基础培训
提纲：
1、显微镜基础知识 2、 IX71结构介绍 3 、IX71操作流程 4 、操作注意事项 5、常见问题及处理
普通显微镜【CX31】
BX41
体 视 荧 光 显 微 镜
IX71
激光共聚焦
IX71倒置相差荧光显微镜
正置显微镜
倒置显微镜
原理
倒置显微镜系统（IX7系列）是在透镜成像原理基 础上发展起来的显微观察系统，利用卤素灯为光 源，光线经过聚光镜汇聚后透过标本，通过物镜 对标本进行聚焦放大成像，最后通过目镜把物镜 所成的像再次放大，从而使实验者能够清晰的分 辨体外培养的细胞的形态以及内部结构，主要用 于体外活细胞培养形态观察，根据实验需求配置 了明场、相差、荧光等技术模块。
物镜
4倍 10倍、20倍
40倍
明场ห้องสมุดไป่ตู้察，选择BF
操作步骤
相差观察过程 5万元以上仪器填写使用登记表 ↓ 解开防尘罩，拿下目镜上的防尘盖
↓ 打开电源
↓ 将光路选择杆拨到“眼睛“ 观察
↓ 选择滤光片
↓ 将样品放置在载物体中心板上
↓ 转动荧光激发块转盘，使未装入激发块的位置进入光路
↓ 适当调节光强，让视野变亮
↓ 转入低倍镜（聚焦）
Olympus IX5倒置显微镜操作规程
倒置荧光显微镜操作规程Olympus IX5厦门大学医学院中心实验室说明：①透射光主开关；②汞灯高压电源开关；③透射光光强控制钮；④滤色片架；⑤光路选择杆；⑥X轴和Y轴调节钮；⑦物镜转盘；⑧粗/微调焦旋钮；⑨双目观察筒；⑩屈光度调节环；⑪聚光镜高度调节钮；⑫聚光镜对中旋钮；⑬视场光阑调节杆；⑭孔径光阑调节杆；⑮聚光镜转盘；⑯荧光光闸（SHUTTER）；⑰荧光激发块转盘；⑱荧光减光阀正式操作仪器之前请注意如下事项：首先要在仪器预约保护时间内及时使用本人注册的校园卡刷卡开始实验。
1.查看仪器使用记录本，如之前使用者有记录仪器异常情况，请不要开机使用。
2.查看仪器整体有无异常，周围环境是否正常，需要时要开启室内空调，检查并清空除湿机水箱。
3.查看仪器使用记录本及刷卡机“日历”，如之前使用者刚刚关机，请等候30分钟以上再开机使用。
一、开机1、打开透射光源（白光）主开关①；2、打开荧光光源（汞灯高压电源）②；3、打开电脑，进入cellSens Standard工作站；备注：标本为HE染色、免疫组化时，不需要打开荧光光源；标本为荧光染料染色时，一般也不需要打开白光光源。
二、明场观察（Bright Field BF）1、正确放置标本，BF主要用于HE染色、免疫组化标本；2、转动荧光激发块转盘⑰到“6”的位置；3、转动聚光镜转盘⑮到“BF”位置，直到听到咔嗒声；4、将光路选择杆⑤推进去（选择目镜观察光路）；5、转动物镜转盘⑦，选用合适的物镜，调节白光光强控制钮③至合适的强度，调节粗/细调焦旋钮⑧聚焦观察,根据需要调节瞳间距⑨和屈光度⑩；三、相衬观察（Phase contrast PH)1、正确放置标本，PH主要用于没有任何染色的、较透明的标本；2、转动荧光激发块转盘⑰到“6”的位置；3、转动物镜转盘⑦，选用合适的物镜；4、转动聚光镜转盘⑮，使相衬光学元件与所用物镜相匹配（见表1）；5、将光路选择杆⑤推进去（选择目镜观察光路）；6、调节光强控制钮③直至合适的强度，调节粗/细调焦旋钮⑧进行聚焦观察,根据需要调节瞳间距⑨和屈光度⑩。
生物显微镜操作规程
标准操作规程一、目的建立和规范XSP-BM生物显微镜的标准操作与清洁维护程序，用于保证实验设备操作的一致性。
二、适用范围适用于质量检验中XSP-BM生物显微镜的操作与清洁维护管理。
三、责任者质量部QC、质量部负责人四、工作程序1.操作前准备1.1.操作前，操作人员应熟读使用说明书，并严格按照说明书要求操作。
1.2.严格按照使用说明书安装XSP-BM生物显微镜。
2.使用方法2.1.取下显微镜的防尘罩，接通电源，开启电源开关，根据玻片性质调整内置照明灯光亮度及光圈大小，使视野亮度处于合适范围。
2.2.将事先准备好的玻片放到载物台上，用标本片夹持器夹好，转动移动手轮使等观察样品大致位于物镜正下方。
2.3.拉开显微镜的电子眼，并打开电脑上的工作站，将屏幕调整到合适大小移到中间。
2.4.先用低倍物镜（4倍）观察样品，转动粗准焦螺旋和移动手轮，把样品移到视野中间并调至清晰。
2.5.转动转换器，使高倍物镜（10倍）对准样品，调节细准焦螺旋，使视野清晰；如果样品稍有偏离视野中央则调节移动手轮把样品调到中央。
2.6.再次转动转换器，使高倍物镜（40倍）对准样品进行观察，方法同10倍物镜操作方法；此时视野亮度可能会变暗，应当调节内置照明灯光亮度及光圈大小使视野亮度处于合适范围。
2.7.观察完样品后，取下载玻片，先将聚光器降下，再将物镜转成“八”字形，转动粗调节器使镜筒下降，以免接物镜与聚光器相碰，并将镜筒缓缓下降到最低处，关掉电子眼及工作站，关闭电源，罩上防尘罩，将显微镜归位。
3.维护与保养3.1.显微镜要放在干燥的地方，不能在阳光下暴晒和使用。
3.2.不要随意取下目镜，以防止尘土落入物镜，也不要任意拆卸各种零件，以防损坏。
3.3.显微镜要轻拿轻放，放到试验台上时，先放镜座的一端，再将镜座全部放稳，切不可使镜座全面同时与台面接触，这样震动过大，透镜和微调节器的装置易损坏。
4.填写《仪器、设备使用记录表》和《仪器、设备日常维护保养记录表》。
倒置荧光显微镜-大型仪器设备购置论证报告-试验室管理处
大型仪器设备购置论证报告仪器设备名称倒置荧光显微镜项目名称重点高校新型功能材料项目负责人朱伟东填表日期2017.3.7实验室管理处制填表说明1．单价10万元及以上仪器设备的申购均需填写此表，并与申购计划一起上报有关部门。
2．所在学院（部门）组织3—7人单数技术专家进行论证，并通知项目经费管理、设备管理等部门参加论证。
申请单一来源采购的需3人以上单数非本校专家参加论证；未列入全省统一论证进口产品范围的进口产品需5人以上单数非本校专家参加论证。
3．论证会由专家组组长主持，主要程序为：申购人报告、现场考察、专家质询与讨论、专家组形成论证意见并签名。
4．专家论证同意，经学院（部门）、项目经费管理部门签字并盖章后，报本科教学部（实验室管理处）网上公示一周无异议后实施。
5．此表一式1份（如设备为进口设备，请提交2份）。
1．工作条件1.1适于在气温为摄氏-40℃～＋50℃的环境条件下运输和贮存，在电源220V（10%）/50H z、气温摄氏-5℃～40℃和相对湿度85%的环境条件下运行。
1.2配置符合中国有关标准要求的插头，或提供适当的转换插座。
2．主要技术指标2.1研究级倒置显微镜2.1.1显微镜镜体，U型光路2.1.2物镜转换器：带编码6孔物镜转盘2.1.3聚焦机构：备有聚焦机构同轴粗、微调旋钮（最小微调刻度单位：1μm），行程≥10m m，粗调旋钮扭矩可调，备有上限调节2.1.4光学系统：无限远校正光学系统，齐焦距离必须为国际标准45m m2.2透射光照明装置：100W卤素灯透射光照明装置，视场可变光阑可调2.3观察镜筒：双目镜筒：瞳距可在50-76m m范围内进行调节，视场直径为22*2.4精确定位功能手动载物台，具备X Y锁定和复位功能；控制手柄扭力可调；尺寸：240m m(D)x444.5m m(W)；移动范围Y≥75m m，X≥114m m；*2.5聚光镜：5孔聚光镜；N A≥0.55；W D≥27m m。
NIB-100倒置生物显微镜标准操作规程
NIB-100倒置生物显微镜标准操作规程NIB-100型倒置生物显微镜使用与维护规程1 目的1.1 建立NIB-100型倒置生物显微镜的使用与维护规程 2 范围2.1 本规程适用于NIB-100型倒置生物显微镜3 职责3.1 实验室操作人员必须遵循该规程4 设备组成和性能4.1 仪器型号:NIB-1004.2 仪器的主要技术规格光学系统无限远光学系统0 观察筒铰链式三目筒30倾斜;分光比:双目观察20%/视频观察和显微照相80% 目镜 10X大视场目镜，线视场22mm物镜转换器内定位五孔转换器物镜无限远长工作距平场消色差:4X、40X无限远长工作距平场相衬:10X、20X 调焦机构粗微动同轴调焦微调格值:0.002mm行程(从载物台表面焦点起):向上8mm，向下3mm 载物台台面大小:160(宽)x250(长)mm机械式移动尺移动范围:120(宽)x78(长)mm照明 6V 30W卤钨灯，预置中心，光强连续可调聚光镜超长工作距离聚光镜，数值孔径0.3，工作距离72mm 操作环境5 操作环境5.1 室内使用5.2 海拔:最高2000米005.3 环境温度:5?~40?(41F~109F)05.4 最大相对湿度:温度为升31?(88F)时相对湿度80%，然后线性降低。
温度为升34?000(93F)时相对湿度为70%，温度为升37?(99F)时相对湿度为60%，温度为升40?(104F)时相对湿度为50%5.5 污染度:2(参照IEC60664)6 规程6.1 运行前准备6.1.1 检查仪器使用记录，了解仪器的状态，正常和有效期的仪器方可使用6.1.2 查看仪器是否完好，仪器的开关位置是否处于关断的位置 6.2 仪器运行6.2.1 倒置显微镜中最常用的观察方法就是相差。
由于这种方法不要求染色，是观察活细胞和微生物的理想方法。
在此提供各种聚光器来满足需要，这种方法提供带有自然背景色的、高对比度的、高清晰度的图像。
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倒置荧光显微镜
操作规程
Olympus IX5
厦门大学医学院中心实验室
黄静茹
2017年3月
说明：
①透射光主开关；②汞灯高压电源开关；③透射光光强控制钮；④滤色片架；
⑤光路选择杆；⑥X轴和Y轴调节钮；⑦物镜转盘；⑧粗/微调焦旋钮；
⑨双目观察筒；⑩屈光度调节环；⑪聚光镜高度调节钮；⑫聚光镜对中旋钮；⑬视场光阑调节杆；⑭孔径光阑调节杆；⑮聚光镜转盘；⑯荧光光闸（SHUTTER）；⑰荧光激发块转盘；⑱荧光减光阀
正式操作仪器之前请注意如下事项：
首先要在仪器预约保护时间内及时使用本人注册的校园卡刷卡开始实验。
1.查看仪器使用记录本，如之前使用者有记录仪器异常情况，请不要开机使用。
2.查看仪器整体有无异常，周围环境是否正常，需要时要开启室内空调，检查
并清空除湿机水箱。
3.查看仪器使用记录本及刷卡机“日历”，如之前使用者刚刚关机，请等候30
分钟以上再开机使用。
一、开机
1、打开透射光源（白光）主开关①；
2、打开荧光光源（汞灯高压电源）②；
3、打开电脑，进入cellSens Standard工作站；
备注：标本为HE染色、免疫组化时，不需要打开荧光光源；标本为荧光染料染色时，一般也不需要打开白光光源。
二、明场观察（Bright Field BF）
1、正确放置标本，BF主要用于HE染色、免疫组化标本；
2、转动荧光激发块转盘⑰到“6”的位置；
3、转动聚光镜转盘⑮到“BF”位置，直到听到咔嗒声；
4、将光路选择杆⑤推进去（选择目镜观察光路）；
5、转动物镜转盘⑦，选用合适的物镜，调节白光光强控制钮③至合适的强度，调节粗/细调焦旋钮⑧聚焦观察,根据需要调节瞳间距⑨和屈光度⑩；
三、相衬观察（Phase contrast PH)
1、正确放置标本，PH主要用于没有任何染色的、较透明的标本；
2、转动荧光激发块转盘⑰到“6”的位置；
3、转动物镜转盘⑦，选用合适的物镜；
4、转动聚光镜转盘⑮，使相衬光学元件与所用物镜相匹配（见表1）；
5、将光路选择杆⑤推进去（选择目镜观察光路）；
6、调节光强控制钮③直至合适的强度，调节粗/细调焦旋钮⑧进行聚焦观察,根
据需要调节瞳间距⑨和屈光度⑩。
表1：物镜、相差元件匹配表
四、荧光观察
1、如果需要，可先用明场观察对标本定位，再转入荧光观察；
2、如果不再需要BF观察，可关闭白光电源②；或将白光光强调节钮③逆时针旋
至最低，将孔径光阑向右拨至最小；
3、转动荧光激发块转盘⑰，根据所用的荧光染料选择匹配的荧光激发块；
表2：荧光激发块
4、打开荧光光闸⑯（SHUTTER），使其置于“O”位置；
5、将光路选择杆⑤推进去（选择目镜观察光路）；
6、转动物镜转盘⑦，选用合适的物镜，调节粗/细调焦旋钮⑧聚焦观察，根据荧
光强度选择合适的ND滤镜（荧光减光阀）⑱进入光路。
（第一个ND100：100% 的荧光强度进入光路；第二个ND6：6%的荧光强度进入光路，第三个ND25: 25% 的荧光强度进入光路）。
五、CCD成像
1、cellSens Standard工作站中，,点击右侧摄像控制中的实时观察；
2、将光路选择杆⑤拉出（，CCD成像光路），调节粗/细调焦旋钮进⑧行聚焦；
3、曝光：可先选择自动曝光，参照自动曝光时间，再通过手动调节曝光时间使
图像更清晰；
4、背景校准：进行明场和相差成像时执行白平衡，荧光成像时执行黑平
衡，在样品空白背景处画一个小区域，软件自动以该处为背景对整幅图像进行调整，使所选区域显示为白色或黑色；
5、各成像参数设定完毕后，点击拍照，仪器自动成像；
6、右键文档工具栏窗口或在文件处进行保存（TIF或JPG格式）。
六、图像处理
1、标尺：在工具栏上选择正确的物镜倍数，点击“视图”---标尺，软件自动将
标尺加在图像上，再点击“图像”----印入信息，保存即可。
2、测量：点击“测量”----测量工具，软件左侧显示出测量工具栏，点击选择
所需的测量工具，在图像上画目标区域，右键点击结束测量即可显示结果。
测
量结果可导出Excel：点击测量工具栏图标。
3、图像叠加：打开拟叠加的图，“图像”----组合彩色图像----“可用图像”中
选择拟叠加的图----√合并层----确认。
4、图像拼接：按一定顺序拍摄图像，相邻两张图像的边缘要部分重叠，
所有图像拍摄完毕后，选择视图---工具---画廊---全选拟拼接的图像，选择运算---图像拼接---设置水平方向图像数量---根据拍摄顺序摆好图像位置
---确定；预览后视情况选择“裁剪边缘”---确定。
七、关机
1、关机前请查看放在实验台上的刷卡机“日历”，如紧接着有其他人员将使用该仪器，无需关机，联系后面使用者。
2、实验完毕，先退出工作站；
3、将透射光光强调节钮③逆时针旋至最低，关闭透射光主开关（TH4）①；
4、确认汞灯开启超过0.5h，方能关闭汞灯高压电源②；
5、用无水乙醇擦拭镜头，并将物镜转盘转至空位，清理载物台及桌面；
6、数据上传：将待上传的实验结果文件夹添加为压缩包，再将其复制到桌面上的“云存储文件夹”中。
7、关电脑及显示器。
八、注意事项
1、汞灯开启后必须至少使用0.5h才能关闭！汞灯关闭后若还需使用，必须等
0.5h后才能再次开启！
2、软件上如果没有显示“摄像控制”，通过以下方式调出：视图---工具窗口---
摄像控制。
3、在使用20X和40X物镜时，如不能清晰聚焦，先检查玻片是否清洁，放置是
否正确，再边转动物镜上的校正环，边聚焦，找到最佳校正位置。
离开实验室之前切记要及时使用本人注册的校园卡刷卡结束实验。