第三章 中药鉴定的基本操作
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显微化学分析是将药材的切片、粉末或浸出物 等置于载玻片上,加特定化学试剂后产生沉淀或结 晶,在显微镜下观察其形状和颜色进行鉴别的一种 方法。
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操作方法:
将切片、粉末或浸出物置于载玻片上,直接滴加
特定化学试剂,加盖玻片,置于显微镜下观察。
例如:黄连粉末滴加稀盐酸,可见针状、针簇状 盐酸小檗碱结晶析出;丁香切片滴加碱液,油室内有 针状丁香酚钠结晶析出。
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2.将物镜测微尺置于显微镜的载物台上,使有刻度的一
面朝上,同观察标本一样,使具有刻度的小圆圈位于
视野中央;
3.先用低倍镜观察,对准焦距,待看清物镜测微尺ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ刻
度后,转动目镜,使目镜测微尺的刻度与物镜测微尺
的刻度相平行,并使两尺的左边第一条线相重合,再
向右寻找两尺的另外一条重合线。
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4.记录二条重合线间的目镜测微尺的格数和 物镜测微尺的格数,根据二条重合线间小 格数的比值,计算目镜测微尺在物镜下每 小格的数值(μm)。计算方式:
4.待冷却后,滴加稀甘油1~2滴(防止析出水合
氯醛结晶),盖上盖玻片,用吸水纸吸去多余液体及
粉末。
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注意事项: 加热透化时,应在火上来回移动载玻片, 以防加热不匀而使玻片爆裂,但勿使其沸腾, 否则产生气泡,妨碍观察。 http://jkjy.czmc.cn/play_8d0j8368uua3y1 85.html
笔将切片轻轻移入培养皿的清水中备用。
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5.挑选薄而平的切片,置于载玻片中央,滴加蒸馏水2~3滴, 取盖玻片,使盖玻片一边接触液体边缘,待液体沿边缘扩 散后缓缓放下盖玻片,以防止产生气泡。装片后,用吸水 纸吸去流溢到盖玻片以外的多余液体。
注意事项:
1.切片时要注意拇指,以防刀伤。 2.切片时保持刀片与药材垂直。 3.切片中途不要停顿,更不能用拉锯方式进行切片。
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三、横切片制作
操作方法:
1.取干净的载玻片和盖玻片,置于实验台上。 2.选取经软化处理后的药材,切成3~5cm的小段。 3.以左手的拇指、食指及中指夹住材料,使之固定不动。为
防止刀伤,拇指应略低一些,并使材料上端高出手指2~3
毫米。 4.右手大拇指和食指捏住刀片一角,刀口向内,并与药材垂 直。左手保持不动,用右手使刀口向内侧右后方拉切,同 时观察切片的进展情况。材料要一次切下,切好后,用毛
注意事项:
某些中药本身不产生荧光,但以酸或碱处理或
经其他化学方法处理后,可使某些成分在紫外光灯
下产生荧光。
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第五节
常用的定量分析技术
水分测定技术 灰分测定技术 挥发油测定技术 浸出物测定技术 杂质测定技术
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石棉板上的圆孔,圈内加入中药粉末一薄层,圈上放 一载玻片,在石棉板下圆孔处用酒精灯徐徐加热数分 钟,至粉末开始变焦,去火待冷后可见有升华物凝聚 在载玻片上。将载玻片取下反转,在显微镜下观察结 晶形状,并可加化学试剂观察其反应。 注意事项:酒精灯火焰距板4cm左右,不宜太靠近。
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二、荧光分析
荧光分析是利用中药中所含的某些化学成分,
目镜测微尺每格长度=两个重叠刻度间物 镜测微尺格数×10/两个重叠刻度间目镜测微 尺格数。
测微尺的标定
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二、测量方法: 将欲测量物体封于载玻片上,于显微镜下用已
校正的目镜测微尺,测量其长度或直径,然后乘以
每小格的μm数即得。 注意事项:测微尺为易碎品,标定时防止压碎。
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第三节
显微化学分析技术
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(一)水(稀甘油)装片的制作
操作方法: 1.取一干净的载玻片和盖玻片,置于实验台上。 2.用镊子或解剖针取少量药材粉末置于载玻片中 央。 3.滴加蒸馏水(或稀甘油)2~3滴,用解剖针搅拌 均匀。 4.左手持载玻片,右手将盖玻片边缘与材料左边 水液的边缘接触,并缓缓放下盖玻片,这样可使 盖玻片下的空气逐渐被水挤掉,以免产生气泡。 5.盖玻片边缘若有多余水液,用吸水纸吸去。
第三章 中药鉴定的基本操作
第一节 中药显微制片技术
中药显微制片技术是根据药材组织构造、细胞形 状及内含物的特征制作相应制片,是显微鉴定的重要 环节,包括粉末制片、表面制片、横切片制作等。
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一、中药粉末制片
中药的粉末制片对完整的、破碎的、粉末状的 各类药材、饮片及成药均适用,是中药显微鉴定最 常用的方法之一。
在紫外光或自然光下能产生一定颜色的荧光的性质
进行鉴别。除另有规定外,紫外光灯的波长为
365nm,如用短波(254~265 nm)时,应加以说 明,因两者荧光现象不同。
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操作方法:
将中药材(或断面)直接放到紫外光灯下观察 所产生的荧光;或将中药材化学成分提取后,将 提取液点于滤纸上在紫外灯下观察所产生的荧光。 必要时喷特殊显色剂观察荧光。
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注意事项: 装片时粉末不可挑取太多,适量即可。 供试品粉末一般需过四号筛(65目)。 若水液从盖玻片边缘溢出,用吸水纸吸去 多余水液。
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(二)透化片的制作
操作方法: 1.取一干净的载玻片和盖玻片,置于实验台上。
2.用镊子或解剖针取少量药材粉末置于载玻片中
央。 3.滴加水合氯醛液3~4滴,用解剖针搅拌均匀, 置于酒精灯上小火微微加热(透化),用解剖针搅拌 均匀,重复2~3次。
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二、表面制片
可观察表皮细胞、气孔、毛茸等表面特征,适 用于叶类、花类及全草类中药的鉴定。 操作方法: 1.取一干净的载玻片和盖玻片,置于实验台上。 2.将供试品湿润软化后,以左手持材料,然后右 手持尖嘴镊子,镊子夹住材料表皮,向下撕取表皮, 用刀片切取表皮面积约4mm2大小,一正一反置载玻片 中央,滴加稀甘油2~3滴,盖上盖玻片直接观察或透 化处理后观察。 注意事项:注意分清正、反面,最好分别封藏观察。
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第四节
常用的定性分析技术
一、微量升华
微量升华是利用中药中所含的某些化学成分, 在一定温度下能升华的性质,获得升华物,在显微 镜下观察其结晶形状、色泽,或取升华物加化学试 剂观察其反应作为鉴别特征。
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操作方法:
取金属片放置在有圆孔(直径约2cm)的石棉板
上,金属片上放一小金属圈(高度约0.8cm),对准
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第二节
显微测微技术
显微测量尺是用来测量显微镜下所能见物
体长度和大小的标尺,包括目镜测微尺和载台
测微尺。
目镜测微尺
载台测微尺
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仪器与设备:生物显微镜、测微尺。 操作方法:
一、目镜测微尺的标定:
1.取下目镜,旋下目镜上的透镜,将目镜测微尺 放入目镜的中隔板上,使有刻度的一面朝下,再 旋上透镜,并装入镜筒内。