药物化学第九章二氢吡啶类钙通道阻滞药物的分析优秀课件
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第9章-二氢吡啶类-钙通道阻滞药物的分析
L/O/G/O
第九章 二氢吡啶类 钙通道阻滞药物的分析
学习要求：
• 1. 掌握：二氢吡啶类药物的基本结构及主 要理化性质；结构、性质与分析方法间的 关系；铈量法的原理、方法及注意事项。
• 2. 熟悉：二氢吡啶类药物的化学鉴别反应 及有关物质检查的方法；
• 3. 了解：二氢吡啶类药物其他的鉴别试验 及含量测定方法、及体内分析中样品的处 理方法。
色谱与质谱条件 色谱柱为Chiral-AGP柱 (150mm×4.0mm，5µm)，流动相为10 mmol/L醋酸铵缓 冲液(pH4.5)-正丙醇(99:1)，流速0.9 ml/min，柱温30℃。 APCI离子源，温度350℃，辅助气(N2)流速2 L/min，气 帘气(N2)压力410kPa流速1.2 L/min，电晕放电电流2A， 正离子选择反应监测(SRM)[M+H]+离子，N2碰撞能量 15eV，用于定量分析的离子反应分别为m/z409→238(氨 氯地平)和m/z260→116(S-(-)-普萘洛尔)。
二、分光光度法
（一）紫外分光光度法
ChP2010尼群地平软胶囊的鉴别： 避光操作。取本品的内容物约1g，置100ml量瓶 中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，取10ml，置 100ml量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，在 353nm与303nm的波长处分别测定吸光度，在 353nm与303nm的吸光度比值应为2.1～2.3。
第五节 体内二氢吡啶类药物的分析
氨氯地平分子结构中含有一个手性碳原子， 故具有一对光学异构体R-(+)-氨氯地平与S-(-)氨氯地平，仅S-(-)-氨氯地平具有血管扩张作用， 其中左旋氨氯地平药效是消旋氨氯地平的2倍， 因此需进行血浆中氨氯地平对映体的手性分离 与立体选择性药动学研究。
第九章 二氢吡啶类 钙通道阻滞药物的分析
学习要求：
• 1. 掌握：二氢吡啶类药物的基本结构及主 要理化性质；结构、性质与分析方法间的 关系；铈量法的原理、方法及注意事项。
• 2. 熟悉：二氢吡啶类药物的化学鉴别反应 及有关物质检查的方法；
• 3. 了解：二氢吡啶类药物其他的鉴别试验 及含量测定方法、及体内分析中样品的处 理方法。
色谱与质谱条件 色谱柱为Chiral-AGP柱 (150mm×4.0mm，5µm)，流动相为10 mmol/L醋酸铵缓 冲液(pH4.5)-正丙醇(99:1)，流速0.9 ml/min，柱温30℃。 APCI离子源，温度350℃，辅助气(N2)流速2 L/min，气 帘气(N2)压力410kPa流速1.2 L/min，电晕放电电流2A， 正离子选择反应监测(SRM)[M+H]+离子，N2碰撞能量 15eV，用于定量分析的离子反应分别为m/z409→238(氨 氯地平)和m/z260→116(S-(-)-普萘洛尔)。
二、分光光度法
（一）紫外分光光度法
ChP2010尼群地平软胶囊的鉴别： 避光操作。取本品的内容物约1g，置100ml量瓶 中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，取10ml，置 100ml量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，在 353nm与303nm的波长处分别测定吸光度，在 353nm与303nm的吸光度比值应为2.1～2.3。
第五节 体内二氢吡啶类药物的分析
氨氯地平分子结构中含有一个手性碳原子， 故具有一对光学异构体R-(+)-氨氯地平与S-(-)氨氯地平，仅S-(-)-氨氯地平具有血管扩张作用， 其中左旋氨氯地平药效是消旋氨氯地平的2倍， 因此需进行血浆中氨氯地平对映体的手性分离 与立体选择性药动学研究。
09二氢吡啶类钙通道阻滞药物的分析
药物分析
Pharmaceutical Analysis
第九章: 二氢吡啶类钙 通道阻滞药物的分析
主讲: 罗容珍
2019年11月13日
化学与制药工程学院
前言
二氢吡啶 类钙通道 阻滞药物
钙通道?
是一种跨越细胞膜的结 构，它严格控制着钙离 子进入细胞的过程。
2019年11月13日
钙离子信号与很多重要生理功能 相关，例如心脏收缩、基因转录 等，因此调节钙离子进入细胞的 精确反馈机制就至关重要。
2019年11月13日
化学与制药工程学院
2019年11月13日
具体机理就不 深入讲解了
化学与制药工程学院
总离子流色谱图：
在GC-MS或LC-MS等方法中使用的一种色谱图。质 量分析器在可能出现的质荷比范围内以固定时间间隔重 复地扫描，检测系统就可连续不断的得到变化着的质谱 信号。计算机一边收集存储，一边将每次扫描的离子流 求和，获得总离子流。 总离子流随时间变化的图谱称 为总离子流色谱图(TIC)。在TIC中，纵坐标表示收集 存储离子的电流总强度，横坐标表示离子的生成时间或 连续扫描的扫描次数。
2019年11月13日
化学与制药工程学院
提取离子色谱图：
EIC（Extracted Ion Chromatogram）即提 取离子色谱图，就是从TIC中提取的某个离子的 色谱图；SIM是一种扫描模式，single ion monitor or select ion monitor。
2019年11月13日
化学与制药工程学院
质谱定量时,是以后面产生的碎片峰（子离子）定量, 但是这一子离子是由母离子在碰撞室产生的特征性碎片， 所以用MRM定量灵敏度会比用SIM定量好很多。
Pharmaceutical Analysis
第九章: 二氢吡啶类钙 通道阻滞药物的分析
主讲: 罗容珍
2019年11月13日
化学与制药工程学院
前言
二氢吡啶 类钙通道 阻滞药物
钙通道?
是一种跨越细胞膜的结 构，它严格控制着钙离 子进入细胞的过程。
2019年11月13日
钙离子信号与很多重要生理功能 相关，例如心脏收缩、基因转录 等，因此调节钙离子进入细胞的 精确反馈机制就至关重要。
2019年11月13日
化学与制药工程学院
2019年11月13日
具体机理就不 深入讲解了
化学与制药工程学院
总离子流色谱图：
在GC-MS或LC-MS等方法中使用的一种色谱图。质 量分析器在可能出现的质荷比范围内以固定时间间隔重 复地扫描，检测系统就可连续不断的得到变化着的质谱 信号。计算机一边收集存储，一边将每次扫描的离子流 求和，获得总离子流。 总离子流随时间变化的图谱称 为总离子流色谱图(TIC)。在TIC中，纵坐标表示收集 存储离子的电流总强度，横坐标表示离子的生成时间或 连续扫描的扫描次数。
2019年11月13日
化学与制药工程学院
提取离子色谱图：
EIC（Extracted Ion Chromatogram）即提 取离子色谱图，就是从TIC中提取的某个离子的 色谱图；SIM是一种扫描模式，single ion monitor or select ion monitor。
2019年11月13日
化学与制药工程学院
质谱定量时,是以后面产生的碎片峰（子离子）定量, 但是这一子离子是由母离子在碰撞室产生的特征性碎片， 所以用MRM定量灵敏度会比用SIM定量好很多。
药物分析09二氢吡啶类钙通道阻滞药物的分析
二氢吡啶 类钙通道 阻滞药物
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前言
二氢吡啶 类钙通道 阻滞药物
能抑制ATP酶的活性，降低心肌 收缩力；使平滑肌细胞松弛，血 管扩张，降低外周血管阻力
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前言
二氢吡啶 类钙通道 阻滞药物
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R1
H N 6 1 2 5 4 3
CH3
R 2O OΒιβλιοθήκη CCOOR3 R43,5位酯基为必 要基团，酯基 中烷氧基不同 时活性增大；
R5
第一节:二氢吡啶类药物的结构与性质
本类药物均含有苯基-1,4-二氢吡啶的母核 X射线衍射表明， 1,4二氢吡啶环 为船式结构，
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质谱定量时,是以后面产生的碎片峰（子离子）定量, 但是这一子离子是由母离子在碰撞室产生的特征性碎 片，所以用MRM定量灵敏度会比用SIM定量好很多。 建立方法的步骤是：用一定溶度的标准品溶液（110 ug/mL）Tune化合物的一级质谱条件，找到母离子 的最佳质谱条件，然后对母离子进行打碎，优化碰撞 能量，得到其特征性的子离子。最后利用该质谱条件 和该母离子->子离子对进行定量。
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6.2.2 质谱仪工作过程及基本原理
（1）将样品由贮存器送入电离室。
（2）样品被高能量（70～100ev）的电子流冲击。通常，首 先被打掉一个电子形成分子离子（母离子），若干分子离子在 电子流的冲击下，可进一步裂解成较小的子离子及中性碎片， 其中正离子被安装在电离室的正电压装置排斥进入加速室。 （只要正离子的寿命在10−5～10−6s）。
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第九章 二氢吡啶类钙通道阻滞药物
Pharmaceutical analysis
2
第一节 结构和性质
Pharmaceutical analysis
3
一、常见药物的结构与理化性质
本类药物均含有苯基-1,4二氢吡啶的母核，如下：
R1 R2OOC H N
6 1 2 5 4 3
CH3 COOR3 R4
H
R5
H
H
H
N
H
吡啶
Pharmaceutical analysis 4
Pharmaceutical analysis
22
一、铈量法
【例】硝苯地平的测定（ChP2010）
NO2 CO 2CH3 CH 3 H3 CO O NH CH 3
NO2 CO2CH3 CH3
2Ce(SO4) 2
6HClO4
H 3CO O N CH 3
2Ce(ClO4)3
4H2SO4
终点时（邻二氮菲-Fe指示剂）:微过量的Ce4+将指 示剂中的Fe2+氧化成Fe3+，使橙红色配合物离子呈 无色，以指示终点的到达。 其他可用该法定量的药物（ChP2010）：尼莫地平， 尼群地平，非洛地平，硝苯地平
Pharmaceutical analysis 23
一、铈量法
【例】硝苯地平的测定 取本品约0.4g，精密称定，加无水乙醇50ml，微 热使溶解，加高氯酸溶液（取70%高氯酸8.5ml，加 水至100ml）50ml、邻二氮菲指示液3滴，立即用硫 酸铈滴定液（0.1mol/L）滴定，至近终点时，在水浴 中加热至50℃左右，继续缓缓滴定至橙红色消失，并 将滴定的结果用空白试验校正。每1ml硫酸铈滴定液 （0.1mol/L）相当于17.32mg的C17H18N2O6。
第九章 二氢吡啶类钙通道阻滞药物的分析
橙红色消失
Fe(C12H8N2)32+
(还原型) 橙红色
Fe(C12H8N2)33+
(氧化型) 浅蓝色
4+ 为何加高氯酸？ Ce 在酸度较低时易水解，故滴定在高氯 酸强酸性条件下进行
二、紫外-可见分光光度法
ChP（2010）收载的尼群地平软胶囊：对照品对照法
【含量测定】避光操作，取本品1 0粒置小烧杯中，用剪刀剪破囊壳，加 无水乙醇少量，振摇使溶解后，将内容物与襄壳全部转移至具塞锥形瓶 中，用无水乙醇反复冲洗剪刀及小烧杯， 洗液并入锥形瓶中， 将锥形
瓶密塞， 置水浴中加热15分钟，并时时振摇，将内容物移入100ml量瓶
中，用无水乙醇反复冲洗囊壳和锥形瓶，洗液并入量瓶中，用无水乙醇 稀释至刻度，摇匀，精密量取2ml ，置100ml量瓶中，用无水乙醇稀释 至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法（附录I V A ) 在353nm的波长处 测定吸光度；另取尼群地平对照品适量，精密称定，用无水乙醇溶解并 定量稀释制成每l m l中约含20μg 的溶液，同法测定，计算，即得。
第
九
章
二氢吡啶类钙通道阻滞药物的分析
主讲人 肖国君
二氢吡啶类钙通道阻滞药物: 二氢吡啶类钙拮抗剂,主要用于治疗高血压、缺血性心血 管疾病、脑血管疾病等。 ChP(2010年版)收载二氢吡啶类钙通道阻滞药物: 硝苯地平、尼群地平、尼莫地平、尼索地平、非洛地平等
及制剂
其他国家药典收载二氢吡啶类钙通道阻滞药物还有: 苯磺酸氨氯地平、拉西地平、伊拉地平、尼伐地平、盐酸 尼卡地平及制剂等
尼群地平 （Nitrendipine）
H N
H2NCH2 CH2OCH2 CH3 CH2OOC
CH3 COOCH3 . Cl
第九章 二氢吡啶类钙通道阻滞药物的分析
醇2ml，搅拌使溶解，移至试管中，加1%氯化
汞溶液3ml，即发生白色沉淀。
（四）重氮化-偶合反应
BP2010硝苯地平的鉴别： 取本品25mg，加10ml盐酸-水-乙醇混合溶液 （1.5∶3.5 ∶ 5），温热，加入锌粒0.5g，放 臵5分钟，滤过，滤液加亚硝酸钠溶液（10g/L） 5ml，放臵2分钟，再加入氨基磺酸铵溶液
第一节
二氢吡啶类药物 的基本骨架：
结构与性质
一、常见药物的结构
H N
6 1 2 5 4 3
R1 R2OOC
CH3 COOR3 R4 R5
CH3 CH3OOC
H N
CH3 COOCH3 NO 2
CH3 CH3CH2OOC
H N
CH3 COOCH3
NO2
硝苯地平
CH3 (CH3)2CHOOC
H N
CH3 COO(CH2)2OCH3
10.下列性质属于尼莫地平的是：
A B 氧化性 还原性
C
D E
弱碱性
弱酸性 旋光性
11.下列药物中，可与碘化铋钾反应 生成橙药沉淀的是：
A B 硝苯地平 尼群地平
C
D E
地西泮
阿司匹林 巴比妥钠
3. 二氢吡啶环氨基质子解离性 4. 稳定性
5. 旋光性
6. 吸收光谱特性
第二节 鉴别试验
一、化学鉴别法
（一）与亚铁盐反应 二氢吡啶类药物苯环上硝基பைடு நூலகம்有氧化性， 可将氢氧化亚铁氧化为红棕色氢氧化铁沉淀。
ChP2010尼莫地平的鉴别： 取本品约20mg，加乙醇2ml溶解后，加新制
的5%硫酸亚铁铵溶液2ml，1.5mol/L硫酸溶液1
滴与0.5mol/L氢氧化钾溶液1ml，强烈振摇，1
第九章二氢吡啶类钙通道阻滞药物的分析.ppt
CH3OOC
COOCH3 NO2
硝苯地平
CH3
CH3CH2OOC
COOCH3
H N CH3
NO2
尼群地平
(CH3)2CHOOC
COO(CH2)2OCH3
NO2
尼莫地平H2NCH2CH源自OCH2H N CH3CH3CH2OOC
COOCH3 Cl
SO3H
苯磺酸氨氯地平
H
CH3
N
CH3
CH3CH2OOC
COOCH3 Cl
Cl
非洛地平
（二）主要理化性质 1. 二氢吡啶环的还原性
二氢吡啶环，具有还原性，可用氧化还原反应鉴 别和氧化还原滴定法进行含量测定。
2. 硝基的氧化性 苯环上大多有硝基，具有氧化性，可被还原剂还
原为芳伯氨基，可用重氮化-偶合反应鉴别。
3. 二氢吡啶环氨基质子解离 二氢吡啶类药物与碱作用后，1,4-位氢
取本品适量（约相当于尼莫地平20mg），置 分液漏斗中，加乙醚30ml振摇提取，静置，分取 乙醚层，置水浴上蒸干，放冷，残渣加乙醇2ml， 搅拌使溶解，移至试管中，加1%氯化汞溶液3ml， 即发生白色沉淀
（四）重氮化-偶合反应
利用苯环硝基的氧化性，可被还原成芳伯胺基， 可用重氮化-偶合反应进行鉴别。
（二）红外分光光度法（具有特征的官能团） • ChP2010尼群地平片的鉴别：
避光操作。取本品（约相当于尼群地平 100mg），研细，加丙酮10ml，振摇使溶解，滤过， 滤液暗处挥干，残渣经减压干燥，依法测定。本 品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集600） 一致。
三、色谱法 （一）HPLC法 • ChP2010尼莫地平片的鉴别：
[O] 或光 CH3OOC
第九章 二氢吡啶类钙通道阻滞药物的分析优秀课件
NO2
尼群地平
(CH3)2CHOOC
COO(CH2)2OCH3
NO2
尼莫地平
H H2NCH2CH2OCH2 N CH3
CH3CH2OOC
COOCH3 Cl
苯磺酸氨氯地平
SO3H
CH3
H
N
CH3
CH3CH2OOC
COOCH3 Cl
Cl
非洛地平
二、主要理化性质
1. 二氢吡啶环的还原性 氧化还原反应鉴别或氧化还原滴定法含量测定
光 COOCH3 NO2
CH3OOC
COOCH3 NO
杂质I：2,6-二甲基-4-(2-硝基苯基)-3,5-吡啶二甲酸二甲酯 杂质II：2,6-二甲基-4-(2-亚硝基苯基)-3,5-吡啶二甲酸二甲酯
ChP2010硝苯地平有关物质的检查： 避光操作。取本品，精密称定，加甲醇溶解并定量
稀释制成每1ml中约含1mg的溶液，作为供试品溶液； 另取2,6-二甲基-4-(2-硝基苯基)-3,5-吡啶二甲酸二甲酯 (杂质Ⅰ)对照品与2,6-二甲基-4-(2-亚硝基苯基)-3,5-吡 啶二甲酸二甲酯(杂质Ⅱ)对照品，精密称定，加甲醇 溶解并定量稀释制成每1ml中各约含10μg的混合溶液， 作为对照品贮备液；分别精密量取供试品溶液与对照 品贮备液各适量，用流动相定量稀释制成每1ml中分 别含硝苯地平2μg、杂质Ⅰ1μg与杂质Ⅱ1μg的混合溶 液，作为对照溶液。
第四节 含Leabharlann 测定一、铈量法H3CO
NO2 CO2CH3
CH3
2Ce(SO4)2
NH
O
CH3
硝苯地平与硫酸铈反 应的摩尔比为1∶2。
6HClO4
H3CO
NO2 CO2CH3 CH3
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氧化还原反应鉴别或氧化还原滴定法含量测定
612
2. 硝基的氧化性
R2OOC
543
COOR3 R4
3. 二氢吡啶环氨基质子解离性
4. 稳定性 遇光极不稳定，易发生光化学反应
R5
5. 旋光性
6. 吸收光谱特性
第九章 二氢吡啶类钙通道阻滞药物的分析
❖ 6. 吸收光谱特性 ❖ 本类药物具有芳环，有明显的紫外吸收特征和红外特征。
（二）红外分光光度法
五、色谱法
（一）高效液相色谱法
ChP2010尼莫地平片的鉴别： 在含量测定项下记录的色谱图中，供试品
溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的 保留平的鉴别： 取本品加甲醇制成每1ml 中约含1mg的溶液，作为
供试品溶液；另取硝苯地平对照品适量，加甲醇制成 每1ml 约含1mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述 两种溶液各5ul，分别点于同一硅胶F254薄层板上，以 乙酸乙酯-环己烷（40∶60）为展开剂，展开，晾干， 置紫外光灯（254nm）下检视，供试品溶液所显主斑 点的位置和颜色应与对照品溶液的主斑点一致。
一、化学鉴别法
（一）与亚铁盐反应
二氢吡啶类药物苯环上硝基具有氧化性， 可将氢氧化亚铁氧化为红棕色氢氧化铁沉淀。
ChP2010尼莫地平的鉴别： 取本品约20mg，加乙醇2ml溶解后，加新制的5%硫
酸亚铁铵溶液2ml，1.5mol/L硫酸溶液1滴与0.5mol/L氢 氧化钾溶液1ml，强烈振摇，1分钟内沉淀由灰绿色变 为红棕色。
第三节 有关物质的检查
二氢吡啶类药物遇光极不稳定，易发生光 化学歧化作用，引入杂质，因此各国药典标准 中均规定在避光条件下进行有关物质检查，大 多采用HPLC法。
硝苯地平在光照和氧化剂存在条件下分别生
成两种降解氧化产物：
CH3
N
CH3
H
CH3
N
CH3
CH3
N
CH3
CH3OOC
COOCH3 NO2
NO2
NO2
硝苯地平 （nifedipine)
尼群地平 （nitrendipine)
尼莫地平 （nimodipine)
一、代表性药物的结构
H
H 3C
N
CH3
(H 3C)2H CH 2CO O C
COOCH3 NO2
尼索地平（nisoldipine)
H
H 3C
N
CH3
H 3C H 2C O O C
COOCH3 Cl
Fe(OH)2 Fe(OH)3(红色沉淀）
（二）与氢氧化钠试液反应
二氢吡啶类药物与碱作用后，二氢吡啶环1,4-位氢可以 发生解离，形成共轭环发生颜色变化，可以进行鉴别。
ChP2010硝苯地平的鉴别： 取本品约25mg，加丙酮1ml溶解，加20%
氢氧化钠溶液3～5滴，振摇，溶液显橙红色。
（三）沉淀反应
（1.5∶3.5 ∶ 5），温热，加入锌粒0.5g，放置5分钟， 滤过，滤液加亚硝酸钠溶液（10g/L）5ml，放置2分 钟，再加入氨基磺酸铵溶液（50g/L）2ml，摇匀，加 入盐酸萘乙二胺溶液（5g/L）2ml，即显红色（持续5 分钟以上）。
二、分光光度法
（一）紫外分光光度法
ChP2010尼群地平软胶囊的鉴别： 避光操作。取本品的内容物约1g，置100ml量瓶中，用 无水乙醇稀释至刻度，摇匀，取10ml，置100ml量瓶中， 用无水乙醇稀释至刻度，在353nm与303nm的波长处分 别测定吸光度，在353nm与303nm的吸光度比值应为 2.1～2.3。
药物 硝苯地平
溶剂 无水乙醇
浓度
λmax/λmin(nm)
（μg/ml）
吸光度比值
15
237,320-335宽吸收
尼群地平 无水乙醇 20
尼莫地平 乙醇
10
尼索地平 无水乙醇 10
非洛地平 乙醇
20
236,353/303 237 237 238, 361
A353/A302=2.1-2.3
第二节 鉴别试验
ChP2010尼莫地平注射液的鉴别： 取本品适量（约相当于尼莫地平20mg），置分液
漏斗中，加乙醚30ml振摇提取，静置，分取乙醚层， 置水浴上蒸干，放冷，残渣加乙醇2ml，搅拌使溶解， 移至试管中，加1%氯化汞溶液3ml，即发生白色沉淀。
（四）重氮化-偶合反应
BP2010硝苯地平的鉴别： 取本品25mg，加10ml盐酸-水-乙醇混合溶液
Cl
非洛地平（Felodipine)
H
H3C
N
CH3
H3CH2COOC
COOCH2CH3 COOC(CH3)3
拉西地平（Lacidipine)
H
H 3C
N
CH3
(H 3C )2H C O O C
COOCH3
N O
N
伊拉地平（Isradipine)
二、主要理化性质
1. 二氢吡啶环的还原性
H
R1
N
CH3
第一节 结构与性质
二氢吡啶类药物的基本骨架：
R1 R2OOC
H N
612
543
CH3
COOR3 R4
R5
一、代表性药物的结构
H
H 3C
N
CH3
H
H 3C
N
CH3
H
H 3C
N
CH3
H 3C O O C
COOCH3 NO2
H 3C H 2C O O C
COOCH3
(H 3C )2H C O O C
C O O (C H 2)2O C H 3
药物化学第九章二氢吡啶类钙通道 阻滞药物的分析
学习要求：
❖1. 掌握：二氢吡啶类药物的基本结构及主要理化 性质；结构、性质与分析方法间的关系；铈量法 的原理、方法及注意事项。
❖2. 熟悉：二氢吡啶类药物的化学鉴别反应及有关 物质检查的方法；
❖3. 了解：二氢吡啶类药物其他的鉴别试验及含量 测定方法、及体内分析中样品的处理方法。
[O] 或光 CH3OOC
光 COOCH3 NO2
CH3OOC
COOCH3 NO
杂质I：2,6-二甲基-4-(2-硝基苯基)-3,5-吡啶二甲酸二甲酯 杂质II：2,6-二甲基-4-(2-亚硝基苯基)-3,5-吡啶二甲酸二甲酯
1.供试液Ⅰ和Ⅱ的制备 2.有关杂质对照品液Ⅰ和Ⅱ的制备 3.色谱条件
填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶; 流动相：甲醇-水（3 ：2）； 检测波长：235nm。 结果：按外标法以峰面积计算，均不得超过0.1%，其他单 个杂质的峰面积不得大于对照品溶液中硝苯地平峰面积 (0.2%)，杂质总量不得过0.5%。
第四节 含量测定
一、铈量法
原理
H3CO
NO2 CO 2C H3
CH3
2Ce(SO4)2
NH
6HClO4
H3CO
NO2 CO2CH3 CH3