溶液配制

细菌培养基

100mg/ml卡那霉素(sigma)：取100mg定容至1ml,用0.22um微孔滤膜过滤除菌。常以10-50ug/ml为工作浓度，100ug/ml用于培养细胞的杀菌。

IPTG:1g溶于5ml

引物稀释：干粉离心后根据管体所注明的量溶于灭菌去离子水中，制成浓度为100 μmol/L的贮存液，再将引物贮存液稀释10倍后使用。

PEG6000：如50%PEG6000，取50gPEG6000固体，加适量水用搅拌器搅拌，定容

至100ml。

DEPC水：剧毒，致癌，通风厨中操作,戴好口罩手套。1mlDEPC原液+999ml二蒸水，振荡过夜至溶解。可以重复使用。

75%乙醇：用于DNA、RNA：需用DEPC水配制，DEPC水高压灭菌去DEPC 25ml+

75ml 无水乙醇；普通：用天平称量，水比重为1，无水乙醇比重为0.785。杀菌：95%医用乙醇加水，用酒精计配制。

0.1M CaCl2:0.22μm微孔滤膜过滤除菌

组培用6-BA（索莱宝，园艺所用上海致化）:取0.025g,加入适量水，滴入3-4滴NaOH（不要加太多）使固体粉末溶解，定容至25ml。

组培用NAA：1mg/ml。

组培用NaOH：10g定容至100ml。

提质粒用SDS碱裂解溶液Ⅰ：50mM葡萄糖，25mM Tris-HCl(pH8.0)，10mM

EDTA(pH8.0) (如配制50ml,则需葡萄糖0.4504g、1M Tris-HCl(pH8.0)1.25ml、0.5M EDTA 1ml)。高压蒸汽灭菌15min，4℃保存。

提质粒用SDS碱裂解溶液Ⅱ：0.2N NaOH，1%（m/v）SDS。（如配制1ml，则需2N NaOH 100,10% SDS 100μl,定容至1ml）。现用现配，室温使用。

提质粒用SDS碱裂解溶液Ⅲ：100ml中有5M乙酸甲60.0ml,冰乙酸11.5ml，H2O 28.5ml。配制50ml时需5M乙酸甲30.0ml（14.721g定容至30ml）,冰乙酸5.75ml，H2O14.25ml。保存于4℃，用时置于冰浴中提前预冷。