蛋白质组中心-质谱数据分析
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蛋白信息查询
一般根据蛋白名称可以了解该蛋白的大致功
能 使用该蛋白的GI号码可以到NCBI数据库进一 步查的该蛋白的信息 对于未知蛋白,可以采用BLAST或者其它功 能预测软件预测该蛋白的功能。
优点与缺点
优点: 鉴定准确度更高,可以得到蛋白的序列 可以实现多个蛋白的鉴定
缺点: 增加了一步操作 算法更复杂,而且需要更多的操作经验
串联质谱结果报告
二级质谱图
一级质谱图
从一级质谱图里 选出部分峰做二 级质谱
串联质谱结果报告
蛋白点编号 理论分子量 理论等电点
蛋白名称
蛋白GI号
串联质谱匹 配的序列 串联质谱离 子得分
优点与缺点
优点: 是用一级质谱鉴定蛋白质的经典方法,算法 简单,速度快
缺点: 质量相近的多肽增加匹配难度 无法实现混合蛋白的鉴定
二级质谱鉴定
质谱仪选择一级质谱中的一个峰,让这些峰
所代表的离子高速撞击质谱仪中的惰性气体, 使其肽键断裂,并对库搜索鉴定蛋白质。 常用MALDI-TOF/TOF仪器进行。
可信度
蛋白的选择
一般protein
score大于60分的结果或者单个 肽段得分超过30的结果就比较可信。 对于一次鉴定得到多个蛋白得分均超过60分 的以得分最高的最为可信。 也可用根据protein score 的C.I.%来判断,该 参数是一个可信度的评价,一般以超过95% 作为鉴定结果可靠的标准。
质谱测试分析
博苑蛋白质组技术服务中心 http://www.boyuanbio.com
蛋白质质谱鉴定流程
样品 酶解 酶解片断
PMF 肽指纹图谱 序列数据库
一级质谱
成功鉴定
PSMs及后筛选
对库 检索
Leabharlann Baidu
串联质谱
未知蛋白
De-novo 序列分析
肽指纹图谱(PMF)鉴定
PMF(Peptide
Mass Fingerprinting)是根据 一级质谱(MS)所测酶解片段的精确分子质 量鉴定蛋白质的一种方法。 一般采用MALDI-TOF仪器进行。因为MALDI 质谱图中的离子一般只带一个电荷,比较容 易计算。 其原理就是利用了蛋白序列数据库中的多肽 质量的信息与实际测得的质量信息进行对比 而实现鉴定。