不同因素对家兔离体肠肌运动的影响
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不同因素对家兔离体肠肌运动的影响
姓名:浙江中医药大学200*级********专业 * 班 * 组学号:摘要:目的研究0.01%乙酰胆碱(Ach)、0.01%肾上腺素(E)、1当量NaOH、1当量HCl、25℃台氏液、缺氧等条件对家兔离体肠肌运动的影响。方法本实验取家兔离体肠肌,并用生物信号采集处理系统记录其在不同因素作用下的张力曲线。结果实验结果显示当滴加0.01%乙酰胆碱、NaOH刺激离体肠肌时,张力曲线明显上升,且频率加快,当用0.01%肾上腺素、HCl、25℃台氏液、缺氧等条件刺激离体肠肌时,张力曲线则下降,且频率减慢。结论0.01%乙酰胆碱、NaOH能促进肠肌的运动,而0.01%肾上腺素、HCl、25℃台氏液、缺氧等因素则抑制肠肌的运动。
前言
肠道平滑肌有壁内神经丛,因此有自动节律性收缩的特性,其特性起源于肌肉自身并受中枢神经系统和体液因素的调节[1]。平滑肌对某些化学物质(如:酸、碱等)及消化道神经释放的递质的刺激具有较强的敏感性。离体肠段虽然失去外来神经的支配,但肠壁神经丛仍存在,在适宜的条件下,仍能保持平滑肌收缩的特性及肠壁神经丛的作用。小肠平滑肌的电活动有快波和慢波两种基本形式。慢波是平滑肌本身所具有的自发的缓慢电变化,是一种肌源性的电活动,不依赖植物神经系统的支配[2],慢波的存在是使平滑肌保持一种起步的机能状态。
本文在肠段表面依次给予0.01%乙酰胆碱(Ach)、0.01%肾上腺素(E)、1mol/L NaOH、1mol/L HCl、25℃台氏液、缺氧等因素刺激,观察、记录其对小肠收缩情况的影响,为探讨某些体液因素对小肠平滑肌的收缩活动的影响,提供理论依据。
关键词:不同因素、离体肠肌、运动
材料和方法[1]
1.材料
家兔;麦氏浴槽、超级恒温箱、张力换能器、生物信号采集处理系统;台式溶液、0.01%乙酰胆碱、0.01%肾上腺素、1mol/L NaOH、1mol/L HCl、25℃台氏液。
2.方法
2.1实验装置准备和仪器参数设置在麦氏浴槽中加固定量的(10-15ml)台氏液,
调节超级恒温箱的温度,是麦氏浴槽内温度稳定在38℃左右。通气管连接
95%O2+5%CO2混合气体通道。用螺旋夹调节气体管道的气体流量,调节至浴槽
中气泡一个个逸出为止。换能器输出线连接微机生物信号采集处理系统,仪
器参数:RM6240系统,点击“实验”菜单中的“肠肌记录”,通道时间常数为
直流,滤波频率10Hz,灵敏度3g,采样频率200Hz,扫描速度1s/div。
2.2家兔离体肠肌标本制备取家兔一只,用木槌击其头部至晕,立即剖开腹腔,
找到回盲部,然后在离回盲部1cm处剪断,取出回肠10cm左右一段,置于冰
冷的氧饱和的台氏液培养皿中,沿肠壁除去肠系膜,用5ml注射器吸取台氏
液将肠内容物冲洗干净,然后将回肠剪成1-2cm数小段,换以新鲜台氏液备用。
取小肠肠管置于盛有台氏液的培养皿中,在其两端对角壁处,分别用缝针穿
线,并打结。注意保持肠道通畅,勿使其封闭。
2.3标本固定肠管一端连线系于浴槽固定钩上,然后放入38℃麦氏浴槽中,再将
肠管另一端系结在张力换能器的悬梁壁上,调节肌张力至2-3g。
2.4实验观察
2.4.1 灌流溶液定容。离体回肠在麦氏浴槽中稳定10-30min后,记录一段
正常张力曲线后加入0.01%乙酰胆碱1-2滴,观察并记录其张力曲线。待张力
曲线稳定(2-3min)后换液冲洗至张力恢复用药前的水平。
2.4.2灌流溶液定容。张力恢复用药前的水平后按上述步骤分别给予0.01%肾
上腺素(E)、1当量NaOH、1当量HCl等刺激,观察并记录张力曲线的变化。
2.4.3灌流溶液定容。在麦氏浴槽中换上25℃台氏液,观察并记录其张力曲
线。待张力曲线稳定(2-3min)后换液冲洗至张力恢复用药前的水平。
2.4.4缺氧夹紧通气管道螺旋夹,断绝离体肠肌O2供给,观察张力曲线变换
并使其稳定。
结果
见附图
1.在正常情况下离体肠肌收缩的幅度、频率、张力、时间及间隔都相对稳定,波形没有明显的变化。
2.加入0.01%乙酰胆碱后,离体肠肌张力曲线明显上升,收缩幅度减小,频率加快。
3.加入0.01%肾上腺素后,离体肠肌张力曲线下降至基线水平,并且幅度和频率均减小。
4.加入1mol/LNaON后,肠段张力曲线上升,振幅减小,频率加快。
5.加入1mol/LHCl后,肠段张力曲线下降,振幅减小,频率减慢。
6.在25℃台式溶液中,离体肠肌的张力曲线下降,并且振幅减小,频率减慢。
7.当离体肠肌截断氧气供给时,其张力曲线下降,振幅减小,频率减慢。
讨论
1.在恒温通气的情况下,离体小肠平滑肌能自发地有节律地进行收缩,其收缩的幅度、频率、张力、时间及间隔都相对稳定,波形没有明显的变化
2.胃肠道平滑肌以胆碱能神经占优势,小剂量或低浓度的乙酰胆碱能激动M受体,产生与兴奋胆碱能神经节后纤维相似的作用,兴奋胃肠道平滑肌[1]。因此滴加0.01%乙酰胆碱刺激离体肠肌时,其张力曲线立即上升,且频率加快。
3.肾上腺素能和肠道平滑肌上的肾上腺素能受体(α受体和β受体)结合使平滑肌松弛,因而能抑制小肠的活动。
4.加入1mol/LNaON后,肠段张力曲线上升,振幅减小,频率加快。可见,平滑肌在一定酸碱度环境中兴奋性增强。冲洗标本2次后约2min,肠段又可恢复正常节律性收缩。说明平滑肌对pH值变化有一定适应性。NaOH为碱性成分,正常机体胃肠内有胰腺小导管细胞分泌的HCO3可起到中和胃酸的作用,使小肠液p H值升高,甚至偏碱性,有利于小肠内各种酶发挥作用。但碱性成分对小肠平滑肌自发机械收缩活动有抑制效应,这可能有利于食物在小肠内的停留,以便于营养物质的吸收。
5.处于25℃台氏液中的离体肠肌,因未与体内的环境温度相似,从而影响了各种美酶的活性特别是有氧呼吸相关的酶类,从而使肠肌的运动受到抑制。
6.缺氧后肠肌有氧呼吸运动障碍,产能不足,从而抑制肠肌运动,使其张力曲线下降,振幅减小,频率减慢。
结论
0.01%乙酰胆碱、NaOH能促进肠肌的运动,而0.01%肾上腺素、HCl、25℃台氏液、缺
氧等因素则抑制肠肌的运动。
参考文献
1.陆源,林国华,杨午鸣.机能学实验教程[M].北京:科学出版社.2005.