临床检验基础考试重点2

临检（二）知识点整理

第一节细胞病理学基本检验技术

1、标本采集方法：①直接采集法②自然分泌液采集法③灌洗法④摩擦法⑤细针穿刺抽吸法

2、涂片制备方法：①推片法②吸管推片法③涂抹法④压拉涂片法⑤喷射法⑥印片法⑦微孔滤膜过滤法

3、标本固定

（1）目的：①固定：保持细胞的自然形态，以防细胞的自溶及细菌导致的腐败②保持细胞内的化学物质

（2）常用固定液：①Carnoy固定液：处理明显血性的标本，特点是渗透性强，固定效果好②乙醇乙醚固定液③95%乙醇固定液（3）方法：①▲带湿固定（wet fixation）：涂片后标本尚未干燥即行固定的方法称为带湿固定。将标本涂片迅速浸入固定液中，在固定过程中细胞不与空气接触，使细胞质脱水、蛋白质凝固。此固定法适用于巴氏染色或HE染色，该法固定后染色的细胞结构清晰，染色鲜艳。②干燥固定：此固定方法适用于瑞—姬染色。湿固定法细胞变小，干燥固定细胞变大。

4、标本浓缩技术：①离心法②细胞离心法③滤膜过滤法④细胞块法⑤液基细胞学技术

5、染色方法：

（1）巴氏染色法：鳞状上皮过度角化细胞胞质呈橘黄色；角化细胞显粉红色；而角化前细胞显浅绿色或浅蓝色，适用于上皮细胞染色或观察阴道涂片中激素水平对上皮细胞的影响。

（2）苏木精—伊红（hemotoxylin eosin,HE）染色法：适用于痰液涂片、穿刺细胞标本。胞核呈紫蓝色，胞质淡玫瑰红色，红细胞呈淡朱红色。

（3）瑞特—吉姆萨染色法（wrightgiemsa atain）；本方法多用于血液，骨髓细胞学检查。

六、细胞病理学诊断

●1、（多选）涂片通常由各种复杂细胞成分组成，因病变组织或采样部位不同，涂片上可同时见到正常和异常细胞。通常，涂片上正常同类同层细胞形态是均一的，细胞核反映的是细胞增殖状态和能力，细胞质反映的是细胞起源、功能状态和分化程度。

细胞活性增加可以是生理性的，如激素调节引起的细胞增生（子宫内膜的周期性增生、生长激素促使骨骼的生长），也可以是损伤性的，如修复（repair）和再生（regeneration），或肿瘤性异常。细胞活性减低多为激素（如低甲）、衰老（如卵巢功能降低）或凋亡等生理性情况，细胞可发生萎缩和退化变性。

（一）细胞数量

1、细胞过多（hypercellularity）表示增殖过程指数增加，代表增生或肿瘤。

2、细胞过少（paucicellularity）也并非表示无恶性细胞的存在，与标本的采集、肿瘤进展、肿瘤类型有关。分化差的恶性肿瘤时，细胞常散在脱落，形态类似于正常。因此，足够量的标本是提高结果解释可靠性的重要因素。

★（二）细胞结构特征

在细胞学涂片中常常缺乏细胞结构特征，而采集大量细胞时能显示组织学特征。

1、涂片上，正常上皮细胞常保持细胞极性（cell polarity）和细胞间黏附性（intercellular adhesion）。

所谓极性，就是一种不对称性，一种非均衡性，这种不对称性是细胞生长的基础，正是因为细胞的不对称性生长，产生了极性，这才完成细胞的各项功能活动。

极性：细胞不同表面在结构和功能上具有明显差别，它们朝向身体表面或有腔器官的腔面称为“游离面”，与游离面相对的朝向深部组织的一面称为“基底面”，而上皮细胞之间的连接面称“侧面”。

细胞间黏附性，是细胞间信息交流的一种形式，可溶性递质称细胞黏附分子，是一种跨膜糖蛋白。相邻细胞以钙黏蛋白相互结合，钙黏蛋白也是一种细胞粘附分子，镶嵌于细胞膜。

2、腺上皮细胞多呈规则排列，单层成片，正面观呈“蜂窝状”，侧面观呈“尖板条栅栏状”。

3、增生和良性肿瘤的上皮细胞常保持良好的黏附性，呈特殊的外观，如乳头状、玫瑰花样结构。

4、合胞体样细胞边界改变和极性紊乱时应考虑肿瘤的可能。

5、典型的恶性上皮细胞的极性差，细胞间相互重叠，有时三维状聚集呈球形。

6、、癌细胞具有异常黏附性和异常聚集性2个主要特征。但是，正常淋巴细胞、分化差癌细胞的细胞间黏附性差，常呈散在分布，而淋巴瘤细胞（肿瘤性淋巴细胞）则相反，两者很难鉴别。

7、良性基质细胞常呈卵圆形、梭形，细胞间疏松黏附或呈裸核，恶性基质细胞（肉瘤）与良性基质细胞类似，但细胞核和细胞质多异常。

（三）细胞核特征：是判断良性细胞与恶性细胞的关键。（判断：多核细胞并不一定是恶性）

细胞核形态的异常称为核异质（dyskaryosis），分为轻度、中度和重度，或者低度和高度。

1、良性细胞核的一般特点：细胞核体积相对较小，核呈圆形、卵圆形或肾形，核边界光滑，染色质呈细颗粒状，分布均匀；涂片上同一类型细胞之间差别很小，称为单形性。

2、恶性细胞核的一般特点：

①核DNA含量增加会产生核染色致密，即染色过深（hyperchromasia），核染色质分布不规则，呈粗颗粒状、核膜增厚。

②细胞核大小不均（anisokaryosis）时，常伴核膜异常增加，边界不规则，呈沟状、切迹状、皱缩状。

③核大小、形态和染色异常又称为核多形性（nuclear pleomorphism）。常用核质比（nuclear/cytoplasmic ratio，N/C）来表达细胞核和细胞质的相对比例，分化差的细胞常具大核，而细胞质的量无变化，故核质比增大。

3、良、恶性细胞的细胞核变化与特征

（四）细胞质特征

细胞质内贮存物质（如黏液、脂肪、碳水化合物、激素或结晶）只有通过特殊染色才能鉴别。正常细胞或分化好的恶性细胞，常见黏液球、泡沫状微空泡、微绒毛刷状缘和纤毛（cilia）。邻近细胞会出现细胞质铸模（moulding）现象，少数有细胞吞噬现象，见于良性或恶性疾病，后者更常见。细胞质退化性改变包括肿胀性、水肿性、空泡样（vacuolation）变化，质膜完整性丧失使细胞内容物溢出，即细胞溶解（cytolysis）。▲

（五）背景和人为因素

浸润性肿瘤常伴有血性、坏死性、变性细胞碎片，称为肿瘤素质（tumor diathesis）。▲

人乳头状瘤病毒感染会产生细胞凹陷症（koilocytosis），单纯疱疹病毒感染会导致细胞多核，核染色质呈“毛玻璃样”（ground glass），巨细胞病毒感染会出现“鹰眼样”（owl eye）核包涵体。

第二节正常细胞形态学

根据细胞学标本特点，将细胞分为上皮源性细胞和非上皮源性细胞。

同一来源细胞的组织学和细胞学之间是有差别的。在组织学上，细胞呈侧面观；在细胞学涂片上，细胞多呈正面观。

一、上皮细胞

上皮组织覆盖于器官表面或形成腺体和腺体样结构。各种器官和系统组成的上皮类似，根据功能分为5种：鳞状上皮细胞、分泌性腺上皮、纤毛上皮、间皮、尿路上皮。

（一）鳞状上皮

1．组织学鳞状上皮是一种多层上皮，覆盖于器官表面，直接与外部环境接触，分为2种亚型：①角化型：分布皮肤和外阴表层。

②非角化型：分布于口腔前庭、角膜、咽、食道、阴道、外阴内层和子宫颈阴道口。

2．细胞学在细胞学涂片上，鳞状上皮细胞能很好保持完整形态。多数鳞状上皮细胞呈扁平、多角形、边界清晰，大小与来源有关。

3、鳞状上皮由多层上皮组成，通常分为4层。

①基底层细胞：正常情况下罕见，是唯一具有有丝分裂能力的细胞。

（1）内底层细胞：正常为一层低柱状或立方形细胞，位于最底层，具有很强的增殖能力，又称为生发层。细胞最小，直径约10μm，核相对较大；

（2）外底层细胞：在内底层细胞之上，直径约10～15μm，由2～3层大细胞组成。

②中间层细胞：直径约15～40μm，由数层大细胞组成。核相对较小；

③表层细胞：最大，直径约40～60μm，由各种大细胞组成。细胞扁平，呈不规则的多边形。根据细胞成熟程度，又分为角化前细胞、不完全角化细胞和完全角化细胞。

（1）角化前细胞：细胞核略小于中间层细胞，染色较深，但染色质仍然均匀、细致呈颗粒状，胞质量显著增多；

（2）不完全角化细胞：细胞核明显缩小，核致密、深染、固缩，核质交界处有狭窄空晕，有时近核处可见几个棕色小点，胞质透明，细胞可卷角；

（3）完全角化细胞：细胞核小时，胞质极薄。可见皱褶、卷角，此种为衰老死亡的细胞。