聚肌胞对禽流感油乳剂疫苗的体液免疫增强作用研究

聚肌胞对禽流感油乳剂疫苗的体液免疫增强作用研究

黄艳艳;李悦;张琳;马鑫鑫;许传田;张秀美;刘思当;吴家强

【摘要】为了研究聚肌胞是否能够增强油乳剂灭活疫苗免疫后鸡群的体液免疫应答,将3个不同来源的聚肌胞产品与H5亚型禽流感病毒灭活抗原相混合,使用轻质

矿物油乳化制备疫苗,分别免疫21日龄SPF鸡,同时设置添加抗菌肽的疫苗免疫组、常规油乳剂疫苗免疫组以及不免疫对照组.在免疫后第14、21、28、35 d分别翅

下静脉采集SPF鸡抗凝血,通过血凝抑制试验检测鸡血清中禽流感抗体的水平,使用统计学方法评价疫苗中添加聚肌胞对鸡群体液免疫反应的影响.结果发现,添加了聚

肌胞或抗菌肽的疫苗免疫后,鸡血清中禽流感抗体水平显著高于普通油苗组.另外,不同来源的聚肌胞产品(PIC-l、PIC-2和PIC-3)免疫增强作用存在差异,以PIC-1免疫增强效果最好.在PIC-1疫苗免疫后,鸡血清抗体增长快,且可维持较高水平.总之,本

研究表明聚肌胞是良好的禽病毒性疫苗免疫增强剂;不同厂家的聚肌胞产品质量有

差异,应择优使用.%To ev aluate the efficacy of poly I∶ C (PIC) as adjuvant for avian influenza vaccines,three different sources of PIC were mixed with

viral antigens of H5 avian influenza virus,and oil emulsion vaccines were developed.Twenty-one-day-old specific-pathogen-free (SPF) chickens were vaccinated with either vaccine.Meanwhile,an unvaccinated chicken group,a cecropin-added oil emulsion vaccine group and a common oil emulsion vaccine (vaccine control) group were set.Chicken blood was collected on the 14th,21st,28th and 35th day after vaccination to test serum antibody levels against avian influenza by hemagglutination inhibition assay.Statistic analysis showed that chickens vaccinated with PICs or cecropin adjuvant developed significantly higher antibody level compared to the vaccine

control group.Further,PIC of different sources (PIC-1,PIC-2 and PIC-3) showed varied immune-enhancing effects and that of PIC-1 was the best.After vaccinated with PIC-1,the serum antibody of chickens increased fast and could maintain at higher level.In conclusion,PIC is a better promising adjuvant for chicken viral vaccine,and its efficacy may vary due to the sources.

【期刊名称】《山东农业科学》

【年(卷),期】2017(049)012

【总页数】4页(P100-102,143)

【关键词】聚肌胞;免疫增强剂;鸡;禽流感;疫苗

【作者】黄艳艳;李悦;张琳;马鑫鑫;许传田;张秀美;刘思当;吴家强

【作者单位】山东省农业科学院畜牧兽医研究所/山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室,山东济南250100;山东省农业科学院畜牧兽医研究所/山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室,山东济南250100;山东农业大学动物科技学院,山东泰安271018;山东省农业科学院畜牧兽医研究所/山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室,山东济南250100;山东省农业科学院畜牧兽医研究所/山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室,山东济南250100;山东农业大学动物科技学院,山东泰安271018;山东省农业科学院畜牧兽医研究所/山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室,山东济南250100;山东省农业科学院畜牧兽医研究所/山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室,山东济南250100;山东农业大学动物科技学院,山东泰安271018;山东省农业科学院畜牧兽医研究所/山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室,山东济南250100

【正文语种】中文

【中图分类】S852.4

禽流感是危害我国养禽业的一类重要传染病，我国采取灭活疫苗免疫和扑杀相结合的措施应对高致病性禽流感在家禽中的传染[1]。疫苗的普遍采用极大程度上降低

了禽流感易感家禽的比例，对禽流感的防控起到了积极作用。油乳剂灭活疫苗与活疫苗相比，免疫保护产生得慢，因此生产上迫切需要改进型的禽流感灭活疫苗，以缩短疫苗免疫后的保护空白期，提高疫苗对鸡群的保护效率。新型免疫增强剂如干扰素、白介素、细胞模式识别受体激动剂等可有效增强机体的细胞/体液免疫应答，缩短疫苗使用后的免疫保护空白期，因此成为近年来的研究热点[2,3]。

聚肌胞(poly I∶C, PIC)是人工合成的病毒双链RNA(double-stranded RNA, dsRNA)类似物，可替代病毒dsRNA用作Toll样受体3(TLR3)和维甲酸诱导基因I 受体(RLR)的激动剂[4]，目前已有多个含PIC的抗病毒和抗肿瘤药物的报道[5]。

本课题组以鸡源细胞和SPF鸡为模型所做的试验表明，PIC转染后可迅速激活细

胞和鸡体的固有免疫应答，引起细胞模式识别受体(TLR3和MDA5)和细胞因子(IFN-β、IFN-γ和IL-6)基因转录水平的迅速上调(另文报道)。此外，有研究表明PIC对获得性免疫也有显著增强作用[6]。国内也有将PIC用作家禽抗病毒药物和

疫苗佐剂的报道，但应用效果不一[7-11]。本研究中，笔者在禽流感油乳剂灭活疫苗中添加不同来源的聚肌胞，检测其对鸡体液免疫应答的影响，为禽流感灭活疫苗的改进提供依据。

1 材料与方法

1.1 免疫增强剂溶液的配制

丁胺卡那霉素耦合聚肌胞PIC-1、PIC-2和PIC-3分别购自国内3个生产厂家，使