血清丙氨酸氨基转移酶测定-标准操作程序
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3.3试剂稳定性与贮存
血清丙氨酸氨基转移酶试剂盒在2-8℃下避光保存可稳定一年；试剂R-1、R-2开启后在2-8℃避光保存可稳定一个月。
3.4样本稳定性与贮存
3.4.1分析用人基质质控血清：该血清自生产之日起，在2-8℃下保持可稳定4年；该血清一旦复融，在25℃下可稳定24小时，在2-8℃下可稳定7天，在-20℃
三级文件
血清丙氨酸氨基转移酶测定标准操作程序
文件编号：
版本/状态：A/1
第3页共3页
生效日期：
可稳定1个月。
3.4.2待测血清：2-8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定3个月。样本不可反复冻融。不可使用已被污染的样本。
4操作步骤
4.1打开全自动生化仪，按照GS200全自动生化分析仪操作维护保养程序，完成普通测试流程。
4.2检验方法
分析方法：速率A；主波长：340 nm；副波长：405nm；样品量：15.0ul；R-1：400ul，R-2：100ul；校准方式：K因子；反应方向：下降；测定温度：37℃。
样品与R-1混匀后反应5分钟，加入R-2混合后延迟60秒，测定240秒。
样品15ul主波长340nm
R-1 400ulR-2 100ul副波长405nm
三级文件
血清丙氨酸氨基转移酶测定标准操作程序
文件编号：
版本/状态：A/1
第2页共3页
生效日期：
目的：建立血清丙氨酸氨基转移酶测定标准操作规程。
范围：适用于血清丙氨酸氨基转移酶测定的标准操作。
职责：生化部检验人员对本规程的实施负责。
规程：
1测定方法：采用连续监测法测定人血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT/GPT）的活力。
2仪器设备
GS200全自动生化分析仪
3试剂
3.1血清丙氨酸氨基转移酶试剂盒，包括试剂1（R-1）、试剂2(R-2)。
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
试剂成份含量
─────────────────────────────────
R-1乳酸脱氢酶（LDH）≥4000U/L
L-丙氨酸≥025g/L
Tris≥7g/L
─────────────────────────────────
R-2α-酮戊二酸二钠≥12.5g/L
辅酶I二钠盐（NADH·Na2）≥0.6g/L
Tris≥4g/L
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
3.2分析用人基质质控血清（RANDOX）、血清
测光测光
K =4448
0 5610min
4.3计算
△A/min×Vt×1000
ALT（U/L）=─────────────
6.22×Vs×d
△A/min =每分钟吸光度变化率Vt =反应液总体积（ml）
1000 =U/ml到U/L的转换系数6.22 = NADH的毫摩尔吸光系数
Vs =样品体积（ml）d =比色杯光径（cm）
5检பைடு நூலகம்结果的解释
抗坏血酸≤40mg/dl、游离胆红素≤684umol/L（40mg/dl）、结合胆红素≤684umol/L（40mg/dl）、血红蛋白≤500mg/dl、乳糜微粒≤3000浊度单位对测定无影响。
6注意事项
6.1高度溶血可导致正的误差。
丙氨酸氨基转移酶催化L-丙氨酸的氨基转移到α-酮戊二酸生成丙酮酸和L-谷氨酸。乳酸脱氢酶（LDH）在催化丙酮酸还原的同时将NADH氧化成NAD+。通过测定NADH在340nm处吸光度下降的速度可求得丙氨酸氨基转移酶的活力。
ALT
L-丙氨酸+α-酮戊二酸────→丙酮酸+ L-谷氨酸
LDH
丙酮酸+ NADH + H+─────→乳酸+ NAD+
血清丙氨酸氨基转移酶试剂盒在2-8℃下避光保存可稳定一年；试剂R-1、R-2开启后在2-8℃避光保存可稳定一个月。
3.4样本稳定性与贮存
3.4.1分析用人基质质控血清：该血清自生产之日起，在2-8℃下保持可稳定4年；该血清一旦复融，在25℃下可稳定24小时，在2-8℃下可稳定7天，在-20℃
三级文件
血清丙氨酸氨基转移酶测定标准操作程序
文件编号：
版本/状态：A/1
第3页共3页
生效日期：
可稳定1个月。
3.4.2待测血清：2-8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定3个月。样本不可反复冻融。不可使用已被污染的样本。
4操作步骤
4.1打开全自动生化仪，按照GS200全自动生化分析仪操作维护保养程序，完成普通测试流程。
4.2检验方法
分析方法：速率A；主波长：340 nm；副波长：405nm；样品量：15.0ul；R-1：400ul，R-2：100ul；校准方式：K因子；反应方向：下降；测定温度：37℃。
样品与R-1混匀后反应5分钟，加入R-2混合后延迟60秒，测定240秒。
样品15ul主波长340nm
R-1 400ulR-2 100ul副波长405nm
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文件编号：
版本/状态：A/1
第2页共3页
生效日期：
目的：建立血清丙氨酸氨基转移酶测定标准操作规程。
范围：适用于血清丙氨酸氨基转移酶测定的标准操作。
职责：生化部检验人员对本规程的实施负责。
规程：
1测定方法：采用连续监测法测定人血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT/GPT）的活力。
2仪器设备
GS200全自动生化分析仪
3试剂
3.1血清丙氨酸氨基转移酶试剂盒，包括试剂1（R-1）、试剂2(R-2)。
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
试剂成份含量
─────────────────────────────────
R-1乳酸脱氢酶（LDH）≥4000U/L
L-丙氨酸≥025g/L
Tris≥7g/L
─────────────────────────────────
R-2α-酮戊二酸二钠≥12.5g/L
辅酶I二钠盐（NADH·Na2）≥0.6g/L
Tris≥4g/L
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3.2分析用人基质质控血清（RANDOX）、血清
测光测光
K =4448
0 5610min
4.3计算
△A/min×Vt×1000
ALT（U/L）=─────────────
6.22×Vs×d
△A/min =每分钟吸光度变化率Vt =反应液总体积（ml）
1000 =U/ml到U/L的转换系数6.22 = NADH的毫摩尔吸光系数
Vs =样品体积（ml）d =比色杯光径（cm）
5检பைடு நூலகம்结果的解释
抗坏血酸≤40mg/dl、游离胆红素≤684umol/L（40mg/dl）、结合胆红素≤684umol/L（40mg/dl）、血红蛋白≤500mg/dl、乳糜微粒≤3000浊度单位对测定无影响。
6注意事项
6.1高度溶血可导致正的误差。
丙氨酸氨基转移酶催化L-丙氨酸的氨基转移到α-酮戊二酸生成丙酮酸和L-谷氨酸。乳酸脱氢酶（LDH）在催化丙酮酸还原的同时将NADH氧化成NAD+。通过测定NADH在340nm处吸光度下降的速度可求得丙氨酸氨基转移酶的活力。
ALT
L-丙氨酸+α-酮戊二酸────→丙酮酸+ L-谷氨酸
LDH
丙酮酸+ NADH + H+─────→乳酸+ NAD+