人羊膜上皮细胞和胚胎干细胞
羊膜细胞类型-①羊膜上皮细胞：源于胎盘羊膜组织,表达干细胞标志分子及相关基因
羊膜细胞类型-①羊膜上皮细胞：源于胎盘羊膜组织，表达干细胞标志分子及相关基因羊膜细胞类型-①羊膜上皮细胞：源于胎盘羊膜组织，表达干细胞标志分子及相关基因，但不表达端粒酶基因，具有非致瘤性，同种异体移植后不发生免疫排斥反应，同时还可分泌免疫抑制因子，防止移植后炎性反应的发生，因此可以看作是免疫赦免细胞。
②羊膜间充质细胞：源自胎盘羊膜组织，具有明显的可塑性及多向分化潜能，是一种成体干细胞。
学术术语来源——羊膜细胞可保护和修复缺血再灌注损伤小鼠脑组织细胞文章亮点：作者前期研究证实羊膜细胞在体内能明显促进脑内神经元的再生，本次实验进一步通过流式细胞仪检测发现，其在体外也能保护缺血再灌注损伤Balb/C小鼠脑细胞，并抑制脑细胞的坏死和凋亡同时促进脑细胞再生。
关键词：干细胞；移植；羊膜细胞；Balb/C小鼠；脑细胞；缺血再灌注；细胞周期；凋亡；坏死；广东省自然科学基金主题词：羊膜；再灌注损伤；细胞周期；流式细胞术摘要背景：羊膜细胞主要由羊膜上皮细胞和羊膜间充质细胞组成，均具有多分化潜能，可转化为神经元，且还有合成、释放生物活性物质和神经营养因子的功能。
作者前期研究证实羊膜细胞移植入脑内后，能明显促进脑内神经元的再生。
目的：探索羊膜细胞对小鼠缺血再灌注损伤脑细胞的作用。
方法：将Balb/C小鼠通过夹闭双侧颈总动脉方法建立脑缺血再灌注损伤模型后，分离小鼠脑细胞。
取孕鼠新鲜胎盘，分离羊膜细胞。
将与羊膜细胞共培养的小鼠脑细胞作为实验组，以PBS培养的小鼠脑细胞作为对照组。
结果与结论：实验组小鼠脑细胞活性较对照组明显增加(P < 0.05)。
培养24，72 h后实验组小鼠脑细胞坏死率较对照组差异无显著性意义(P > 0.05)，而培养48 h后实验组小鼠脑细胞坏死率较对照组明显降低(P < 0.05)。
实验组小鼠脑细胞中S期细胞数量增加，而对照组小鼠脑细胞中G1期细胞数量增加，S期细胞数量减少，但2组小鼠脑细胞中G2期细胞数量不变。
(完整)胎盘间充质干细胞的分离和培养 2016.07.21
胎盘间充质干细胞的分离，原代与继代培养及鉴定刘亭2016.7。
21目录前言 (2)1分离制备PMSC组织的选取 (4)2脐带，胎盘MSC的分离与纯化 (6)2.1胎盘组织的获取，存储与清洗 (6)2-2 脐带，胎盘MSC的分离及纯化方法 (7)3 原代培养和继代培养 (11)3—1培养基 (11)3-2培养密度 (12)3-3培养条件 (13)3—4换液 (13)3—5 传代培养 (13)3—6细胞形态与生长速度 (14)3—7 MSC的冻存与复苏： (14)4细胞表面抗原检测 (14)5生长曲线 (15)6细胞周期 (15)7分化潜能 (15)参考文献 (15)附件1不同实验室从脐带血,脐带和胎盘等各组织中分离MSC的方法.. 16脐带血 (16)脐带 (17)羊膜 (19)绒毛膜 (19)蜕膜层 (20)胎盘 (21)整体灌注法 (22)附件2 背景知识 (22)附件3 PMSC实验所需试剂 (23)前言干细胞（Stem cell，SC）是一种能够自我更新且未分化并可分化成两个或两个以上其它品系的细胞。
在一定的条件下，干细胞能够分化成为多种成熟细胞类型。
按照来源和分化潜能不同，干细胞可分为胚胎干细胞（Embryonic stem cell，ESC）和成体干细胞(Adult stem cell，ASC）两类。
胚胎干细胞来源于早期的胚泡和胚胎内层的细胞群，并且具有向3个胚层细胞分化的能力.但是胚胎干细胞应用时产生的免疫排斥、体内实验中引发肿瘤生成以及所涉及的伦理问题等影响并制约了临床应用。
成体干细胞形成于原肠胚形成后的胎儿和成体组织,早期研究认为，成体干细胞主要分化为其来源组织的细胞类型。
然而，近几年来的很多研究表明，成体干细胞具有能够分化成为除来源以外的其他胚层组织的能力。
间充质干细胞(Mesenchymal stem cell， MSC）又称为基质干细胞，是属于成体干细胞的一种，最早从骨髓中分离而来。
常用细胞简介
McCoy'5A, 15% FBS
SMMC7721
无
人
肝癌
贴壁、上皮样
RPMI-1640,15%FBS
SP2/0
ACC146
小鼠
杂交瘤
悬浮
IMDM,7.5%FBS
SW480
CCL-228
人
结肠癌
贴壁、上皮样
10%FBS,L15
SW620
CCL-227
人
结肠癌
贴壁、上皮样
10%FBS+2mML-GLU+90%L15
WSS-1 [WS-1]
CRL-2029
人
肾
上皮细胞、贴壁
DMEM, 10% FBS
XC
CCL-165
大鼠
肉瘤
上皮细胞、贴壁
MEM, 10% FBS 和NEAA
Y-1
CCL-79
小鼠
肾上腺瘤
上皮细胞、贴壁
F-10, 15% HS和2.5% FBS
说明：以上数据来源于ATCC，建议使用以上推荐的培养基。如果不使用相应的培养基会产生几方面的后果：1.细胞营养不良影响细胞生长；2.细胞分化导致的基因表达变化；3.细胞休克、死亡；
MEM/EBSS, 8% FBS
DSN
CRL-9939
狗
骨肉瘤
上皮细胞、贴壁
MEM/NEAA, 10% FBS
Du145
HTB-81
人
前列腺瘤
贴壁、上皮样
MEM/NEAA,10%FBS
EB-3
CCL-85
人
Burkitt淋巴瘤
淋巴样、悬浮
RPMI-1640, 10% FBS
ES-D3
关于干细胞的一些知识
关于干细胞的一些知识关于干细胞的一些知识干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞。
在一定条件下它可以分化成多种功能细胞。
根据干细胞所处发育阶段可分为胚胎干细胞（ES细胞）和成体干细胞。
根据干细胞的发育潜能又分为全能干细胞（TSC）、多能干细胞和单能干细胞（或称专能干细胞）。
干细胞是一种未充分分化，尚不成熟的细胞，具有再生各种组织器官和人体的潜在功能，在医学界称为“万用细胞”。
2013年12月1日，美国哥伦比亚大学医学研究中心的科学家首次成功地将人体干细胞转化成了功能性的肺细胞和呼吸道细胞。
干细胞即为起源细胞，具有增殖和分化潜能，它能够自我更新复制，产生高度分化的功能细胞。
具体来讲，它是一类具有多向分化潜能和自我复制能力的原始的未分化细胞，是形成哺乳类动物的各组织器官的原始细胞。
干细胞（胚胎干细胞和成体干细胞）在形态上具有共性，通常呈圆形或椭圆形，细胞体积小，核相对较大，细胞核多为常染色质，并具有较高的端粒酶活性。
干细胞是自我复制还是分化功能细胞，主要由细胞本身的状态和微环境因素所决定。
决定干细胞状态的因素，包括调节细胞周期的各种周期素和周期素依赖激酶、基因转录因子、影响细胞不对称分裂的细胞质因子。
微环境因素，包括干细胞与周围细胞、干细胞与外基质以及干细胞与各种可溶性因子的相互作用。
人体的全功能干细胞可直接克隆人体，多功能干细胞可直接复制各种脏器和修复组织。
人类寄希望于利用干细胞的分离和体外培养，在体外繁育出组织或器官，以期通过组织或器官移植实现临床应用。
现在，原位培植皮肤干细胞再生技术利用干细胞复制皮肤器官，实现了人体原位皮肤器官的复制。
干细胞具有经培养不定期地分化并产生特化细胞的能力。
在人体发育过程中，干细胞的功能行为得到了最好的诠释。
人体发育起始于卵子的受精，产生一个能发育为完整有机体的潜能单细胞。
受精后的最初几个小时内，受精卵分裂为一些完全相同的全能细胞。
这意味着如果把这些细胞的任何一个放入女性子宫内，均有可能发育成胎儿。
人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)的分离、体外培养及诱导分化
万方数据
万方数据
人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)的分离、体外培养及诱导分化
作者：丛姗， 宋瑾， 张惠娟， 李岩， 白立恒， 曹贵方， CONG Shan， SONG Jin， ZHANG Hui-Juan， LI Yan， BAI Li-Heng， CAO Gui-Fang
作者单位：丛姗,宋瑾,张惠娟,李岩,曹贵方,CONG Shan,SONG Jin,ZHANG Hui-Juan,LI Yan,CAO Gui-Fang(内蒙古农业大学兽医学院/动物组织胚胎学与发育生物学实验室,呼和浩特,010018)， 白立恒,BAI Li-Heng(内蒙古
妇幼保健医院妇产科,呼和浩特,010020)
刊名：
农业生物技术学报
英文刊名：Journal of Agricultural Biotechnology
年，卷(期)：2015,23(1)
引用本文格式：丛姗.宋瑾.张惠娟.李岩.白立恒.曹贵方.CONG Shan.SONG Jin.ZHANG Hui-Juan.LI Yan.BAI Li-Heng.CAO Gui-Fang 人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)的分离、体外培养及诱导分化[期刊论文]-农业生物技术学报 2015(1)。
人羊膜上皮细胞移植治疗肝纤维化现状与展望
人羊膜上皮细胞移植治疗肝纤维化现状与展望摘要：肝纤维化是慢性肝病发展到终末期肝病的必经阶段。
肝星状细胞的激活和增生是肝纤维化发生、发展的中心环节，而转化生长因子β是导致肝星状细胞激活最强的细胞因子。
因此，下调转化生长因子β的表达和抑制肝星状细胞的活化是防治肝纤维化形成的关键。
目前尚无有效方法抑制肝纤维化。
近期发现骨髓间充质细胞等肝干细胞能明显抑制转化生长因子β的表达，抑制肝星状细胞的活化。
因此，肝干细胞为肝纤维治疗提供了新方法。
由于致瘤性、伦理学及细胞来源限制，此类肝干细胞临床应用前景有限。
人羊膜上皮细胞源于胎盘，表达干细胞特性，并体外诱导向肝细胞分化，因易获得、数量大、非致瘤性和移植后免疫排斥反应轻，未来更有利于临床应用。
关键词：人羊膜上皮细胞肝纤维化肝细胞移植【中图分类号】r-0【文献标识码】b【文章编号】1671-8801（2013）02-0039-02我国是肝炎、肝硬化、肝癌高发国家，目前，我国慢性乙肝患者约为2000万人左右，其中近25%～30%可发展为肝硬化，而15%肝硬化患者可发展为失代偿期肝硬化。
有数据显示，代偿期肝硬化病人5年存活率为55%，失代偿期肝硬化病人5年存活率为14%。
研究证实，肝纤维化是发展到肝硬化必然经过的中间阶段，有效的抑制肝纤维化过程，人类攻克肝硬化这一世界性的难题奠定治疗基础。
目前尚无明确有效的方法抑制肝纤维化进程。
肝纤维化是慢性肝脏损伤的终末期表现，导致肝硬化、门脉高压、肝癌等严重的并发症，且没有特效药物治疗。
医学研究已经证明了肝星状细胞（hepatic stellate cells，hscs）的活化增殖在肝纤维化的发生发展中起着关键性的作用。
而hscs的增殖/凋亡与胶原合成/降解失衡则是肝纤维化形成的重要机制[1]。
肝脏受损时，激活hscs，活化后的hscs表达a-平滑肌肌动蛋白（a-smooth muscle actin，a-sma），其细胞增殖速度和胶原合成能力大大增强，同时产生过多的细胞外基质（extra cellular matrix，ecm），主要是胶原蛋白i和纤粘连蛋白，从而启动肝纤维化过程[2]。
常见细胞系
细胞株名称ATCC 编号细胞来源细胞种类生长状态使用培养基293 CRL-1573 人胎肾贴壁、上皮样MEM/NEAA,10%FBS2215 无人肝癌贴壁、上皮样DMEM,15%FBS127TAg CRL-2817 小鼠多能胚胎干细胞胚胎型DMEM, 10% FBS293/CHE-Fc CRL-2368 人肾上皮细胞、贴壁DMEM,10%FBS3T3-L1 CL-173 小鼠胚胎成纤维成纤维DMEM,10%FBS3T6 CCL-96 小鼠胚胎成纤维细胞、贴壁DMEM,10%FBSA431 CRL-1555 人表皮细胞癌上皮细胞、贴壁DMEM,10%FBSA549 CCL-185 人肺癌贴壁、上皮样F12,10%FBSA9 CRL-6319 小鼠结缔组织成纤维细胞、贴壁DMEM,10% FBS+AR42J CRL-1492 大鼠胰腺肿瘤贴壁、上皮样Ham'sF-12K, 20%FBSAtT-20 CCL-89 小鼠垂体肿瘤上皮细胞、贴壁F-10, 15% HS和2.5% FBSB95-8 CRL-2311 绒猴EB病毒感染的白血病细胞成淋样RPMI-1640, 10% FBS BALB/3T3 CCL-163 小鼠胚胎成纤维细胞、贴壁DMEM, 10% FBSbel7402 无人肝癌贴壁、上皮样RPMI-1640,15%FBSBeWo CCL-98 人绒毛癌上皮细胞、贴壁F-12K, 15%F12BHK-21 CCL-10 仓鼠肾成纤维细胞、贴壁MEM/NEAA, 10% FBSBHL-100 无人乳房上皮细胞、贴壁McCoy'5A, 10% FBSBRL 3A CRL-1442 大鼠肝上皮细胞、贴壁MEM/NEAA, 10% FBSBT CRL-1390 牛鼻甲骨细胞成纤维细胞、贴壁DMEM, 10% FBSCaco-2 HTB-37 人结肠腺癌上皮细胞、贴壁MEM/NEAA, 10% FBSChang 无人肝脏上皮细胞、贴壁BME, 10% FCSCHO-K1 CRL-9618 仓鼠卵巢上皮细胞、贴壁F-12, 10%FBSCL2 CRL-2514 小鼠B细胞淋巴细胞、悬浮RPMI-1640, 10% FBSCL3 CRL-2515 小鼠B细胞淋巴细胞、悬浮RPMI-1640, 10% FBSClone 9 CRL-1439 大鼠肝脏上皮细胞、贴壁F-12K, 10%FBSClone M-3 CCL-53.1 小鼠黑素瘤上皮细胞、贴壁F-12, 15% HS和2.5% FBS COS-1 CRL-1650 猴肾成纤维细胞、贴壁DMEM, 10% FBSCOS-3 无猴肾成纤维细胞、贴壁MEM, 10% FBSCOS-7 CRL-1651 猴非洲绿猴肾成纤维细胞、贴壁DMEM, 10% FBS CRFK CCL-94 猫肾上皮细胞、贴壁MEM/NEAA, 10% FBSCV-1 CCL-70 猴非洲绿猴肾成纤维细胞、贴壁MEM/NEAA, 10% FBSD-17 CCL-183 狗骨肉瘤上皮细胞、贴壁MEM/NEAA, 10% FBSDAN CRL-2130 狗骨肉瘤上皮细胞、贴壁MEM/EBSS, 8% FBSDaudi CCL-213 人淋巴瘤病人血液成淋巴细胞、悬浮RPMI-1640, 10% FBS DLD-1 CCL-221 人结肠直肠腺癌上皮细胞、贴壁RPMI-1640, 10% FBS DSDh CRL-2131 狗骨肉瘤上皮细胞、贴壁MEM/EBSS, 8% FBSDSN CRL-9939 狗骨肉瘤上皮细胞、贴壁MEM/NEAA, 10% FBSDu145 HTB-81 人前列腺瘤贴壁、上皮样MEM/NEAA,10%FBSEB-3 CCL-85 人Burkitt淋巴瘤淋巴样、悬浮RPMI-1640, 10% FBSES-D3 CRL-1934 小鼠多能胚胎干细胞胚胎型DMEM+ 15% FBSF9 CRL-1720 小鼠睾丸畸胎癌胚胎型至内胚层DMEM, 15% FBSGH1 CCL-82 大鼠垂体肿瘤上皮细胞、贴壁F-12, 15% HS和2.5% FBSGH3 CCL-82.1 大鼠垂体肿瘤上皮细胞、贴壁F-12, 15% HS和2.5% FBSH9 HTB-176 人T细胞淋巴瘤成淋巴细胞、悬浮RPMI-1640, 10% FBSH9/HTLV-IIIB CRL-8543 人T细胞淋巴瘤成淋巴细胞、悬浮RPMI-1640, 10% FBSHaK CCL-15 仓鼠肾上皮细胞、贴壁BME, 10%FCSHCT-15 CCL-225 人结肠直肠腺癌上皮细胞、贴壁RPMI-1640, 10% FBSHela CCL-2 人宫颈癌贴壁、上皮样MEM/NEAA,10%FBSHela S3 CCL-2.2 人子宫颈癌贴壁、上皮样F12,10%FBSHep-2 无人喉癌上皮细胞、贴壁MEM, 10% FBS;或RPMI-1640, 10% FBSHep3B HB8064 人肝癌贴壁、上皮样MEM/NEAA,10%FBSHepG2 HB-8065 人肝癌贴壁、上皮样MEM/NEAA,10%FBSHK-2 CRL-2190 人肾皮质贴壁、上皮样Keratinocyte-Serum Free Medium + 5 ng/ml rhEGF HL-60 CCL-240 人急性早幼粒细胞白血病悬浮、粒细胞样RPMI-1640,20%FBSHP [HT1080 poly] CRL-12012 人纤维肉瘤上皮细胞、贴壁DMEM, 10% FBSHT-1080 CCL-121 人纤维肉瘤上皮细胞、贴壁MEM/NEAA, 10% FBSHT-29 HTS-38 人腺癌贴壁、上皮样DMEM/F12(1:1),5%FBSHTC ICLC 收录ATL95006 大鼠肝脏贴壁、上皮样MEM/EBSS,10%FBSHuT 78 TIB-161 人T细胞淋巴瘤成淋巴细胞、悬浮IMDM, 20% FBSHUVEC 无人脐带内皮细胞、贴壁F-12K, 10% FBS 和肝素盐100 ug/mlHX [HT1080 xeno] CRL-12011 人纤维肉瘤上皮细胞、贴壁DMEM, 10% FBSI-10 CCL-83 小鼠睾丸癌上皮细胞、贴壁F-10, 15% HS和2.5% FBSIEC-6 CRL-1592 大鼠正常小肠上皮样、贴壁DMEM, 5% FBS,胰岛素0.1μg/mlIM-9 CCL-159 人骨髓瘤病人骨髓成淋巴细胞、悬浮RPMI-1640, 10% FBSIMR-90 CCL-186 人肺成纤维细胞、贴壁MEM/NEAA, 10% FBSJAA-F11 CRL-2381 小鼠B细胞淋巴样、悬浮DMEM,10% FBS和NEAAJEG-3 HTB-36 人绒毛膜癌上皮细胞、贴壁MEM/NEAA, 10% FBSJensen CCL-45 大鼠肉瘤成纤维细胞、贴壁McCoy's 5A, 5% FBSJurkat TIB-152 人急性T淋巴细胞白血病悬浮、淋巴细胞样RPMI-1640,10%FBSK-562 CCL-243 人骨髓性的白血病成淋巴细胞、悬浮RPMI-1640, 10% FBSKB CCL-17 人口腔癌上皮细胞、贴壁MEM/NEAA, 10% FBSKG-1 CCL-246 人红白血病病人骨髓骨髓白细胞、悬浮IMDM, 20% FBSKG-1a CCL-246.1 人红白血病病人骨髓骨髓白细胞、悬浮IMDM, 20% FBSL2 CCL-149 大鼠肺上皮细胞、贴壁F-12K, 10%FBSL6 CRL-1458 大鼠骨骼肌成肌细胞贴壁DMEM, 10% FBSLLC-WRC 256 CCL-38 大鼠癌上皮细胞、贴壁199培养基, 5% HSLnCap CRL-1740 人前列腺癌贴壁、上皮样RPMI-1640,10%FBSLO2 无人正常肝细胞贴壁、上皮样DMEM,15%FBSM. dunni (Clone III8C) CRL-2017 小鼠皮肤成纤维细胞、贴壁McCoy's 5a , 10% FBSMARC S5 CRL-2507 小鼠B细胞悬浮、淋巴细胞样MEM/NEAA或DMEM, 20%FBS(灭活)MCF7 HTB-22 人乳腺癌上皮细胞、贴壁MEM/NEAA, 10% FBS10ug/ml 胰岛素MHCC97 无人肝癌贴壁、上皮样DMEM,15%FBSMOLT-4 CRL-1582 人T淋巴细胞、急性淋巴细胞白血病悬浮、淋巴细胞样RPMI-1640,10%FBSNIH3T3 CRL-1658 小鼠胚胎贴壁、成纤维细胞DMEM,15%FBSNK-92 CRL-2407 人淋巴瘤成淋巴细胞、悬浮α-MEM,12.5% HS和12.5% FBSNK-92MI CRL-2408 人淋巴瘤成淋巴细胞、悬浮α-MEM,12.5% HS和12.5% FBSPANC-1 CRL-1469 人胰腺癌贴壁、上皮样DMEM,10%FBSPC12 CRL-1721 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤多角型、松散贴壁、易结团生长F12 ,15% HS和2.5%FBSPC3 CRL-1435 人前列腺腺癌早期、骨转移贴壁、上皮样F12,10%FBSRaji CCL-86 人Burkitt淋巴瘤淋巴样、悬浮RPMI-1640, 10% FBSRat2 CRL-1764 大鼠Rat2(TK-)克隆衍生成纤维细胞样、贴壁DMEM, 5% FBS,30μg/ml BrdURS4;11 CRL-1873 人急性淋巴细胞白血病成淋巴细胞、悬浮RPMI-1640, 10% FBSSaos-2 HTB-85 人骨肉瘤上皮细胞、贴壁McCoy'5A, 15% FBSSMMC7721 无人肝癌贴壁、上皮样RPMI-1640,15%FBSSP2/0 ACC146 小鼠杂交瘤悬浮IMDM,7.5%FBSSW480 CCL-228 人结肠癌贴壁、上皮样10%FBS,L15SW620 CCL-227 人结肠癌贴壁、上皮样10%FBS+2mM L-GLU+90%L15THP-1 TIB-202 人急性单核系白血病、血液悬浮、单核细胞样RPMI-1640,10%FBSU937 CRL-1593.2 人淋巴浆母细胞瘤悬浮、单核细胞样RPMI-1640,10%FBSVero CCL-81 非洲绿猴肾贴壁、上皮样DMEM,10%FBSVero-E6 CRL-1586 非洲绿猴肾贴壁、上皮样MEM/EBSS,10%FBSWEHI-3 TIB-68 小鼠骨髓单核细胞白血病类巨噬细胞、悬浮IMDM, 10% FBSWI-38 CCL-75 人胚胎肺上皮细胞、贴壁BME, 10% FBSWISH CCL-25 人羊膜上皮细胞、贴壁BME, 10% FBSWS1 CRL-1502 人胚胎皮肤上皮细胞、贴壁MEM/NEAA 10% FBSWSS-1 [WS-1] CRL-2029 人肾上皮细胞、贴壁DMEM, 10% FBSXC CCL-165 大鼠肉瘤上皮细胞、贴壁MEM, 10% FBS 和NEAAY-1 CCL-79 小鼠肾上腺瘤上皮细胞、贴壁F-10, 15% HS和2.5% FBS说明：以上数据来源于ATCC,建议使用以上推荐的培养基。
胚胎干细胞的研究进展和应用前景
胚胎干细胞研究现状及应用前景摘要：作为一类既有自我更新能力，并具有多向分化潜能的细胞，胚胎干细胞具有非常重要的理论研究意义和临床应用前景[1]。
胚胎干细胞已被广泛用于生命科学的许多领域, 它潜在的医学应用也成为世界范围内的研究热点。
本文主要概述了目前胚胎干细胞在基础研究及临床上应用的研究进展并展望了今后研究的方向。
关键词：胚胎干细胞生物特性克隆应用干细胞是一类具有自我更新和无限分化潜能的细胞，它包括胚胎干细胞和成体干细胞，特别是胚胎干细胞是当前国内外医学和生物学领域研究的重点。
胚胎干细胞(Embryonic Stem Cells，ES Cells)是由早期胚胎内细胞团(Inner cell mass，ICM)(桑葚胚，囊胚)或原始生殖细胞(Primordial germ cells，PGCs)经体外分化抑制培养筛选出的一种多潜能细胞。
胚胎干细胞可以在体外稳定的自我更新，可以在长时间继代培养后仍维持正常的二倍体染色体结构；具有与早期胚胎细胞相似的形态特征和很强的分化能力，在一定的条件培养下，它可以无限增殖并分化成为全身200 多种细胞类型，例如：人类ES 细胞可以分化为肌细胞、神经细胞[2]、内皮细胞、造血干细胞、骨髓细胞等，并可进一步形成机体所有组织、器官参与个体的发育过程，可称为是打开人类胚胎发育大门的一把“万能钥匙”。
1.胚胎干细胞的生物学特性1.1 胚胎干细胞的形态生化特性胚胎干细胞都具有相似的形态特点，与早期胚胎细胞相似，细胞较小，核质比高，细胞核明显，有一个或多个核仁，染色质较分散，细胞质内除游离核糖体外，其他细胞器很少；体外培养细胞呈多层集落状生长，紧密堆积在一起，无明显细胞界限。
细胞的染色体均为稳定的二倍体核型。
胚胎干细胞表达早期胚胎细胞的表面抗原，转录因子Oct- 4 为目前广泛用于鉴定胚胎干细胞是否处于未分化状态的一个重要的标记分子。
研究发现，它最早表达于胚胎8细胞时期，一直到细胞发育至桑椹胚时期，在每个卵裂球中都可检测到大量的Oct- 4 的表达产物，这之后Oct- 4 的表达局限于内细胞团细胞。
体外诱导人羊膜上皮细胞分化为神经样细胞
成瘤 的 困扰 ， 而骨 髓 基质 细 胞 要 跨胚 层 分 化 且 取 材
Байду номын сангаас
时对机体损伤大 ， 对神经系统疾病的临床治疗也不 尽人 意 。近 年 来 研 究 证 明人 羊膜 上 皮 细 胞 （ｕ ａ ｈｍ ｎ
ａｎｏｃｅｉｅａ ｃｌ ，Ａ Ｃ ） 有 部 分 胚 胎 干 细 胞 ｍ ｉｉ ｐｔ ｌｌ ｅｓｈ Ｅ ｓ具 ｔ ｈ ｉ ｌ 特 性ｌ １可分 化 为 ３个胚 层不 同类 型 的细 胞 Ｌ ｊ 卜２， ０ ，
刘红敏 ， 陈旭 东 ， 华新 宇
（ 漯河医学高等专科学校 组织胚胎学教研室 ， 河南 漯河 ４ ２０ ） ５（ ２ ３ 摘要 ： 目的 探讨人羊膜 上皮 细胞体外 向神经样细胞诱导分化 的条件 。方法 碱性成纤 维细胞生长 因子预诱导
剂（Ｆ Ｆ ， ｂ Ｇ ）化学诱导剂全反式维甲酸 （ Ｔ Ａ）丁 酸羟基 茴香 醚 （ Ｈ 作 为诱导 剂 ， 以不含诱 导剂 的无 血清 的 ＭＥ ＡＲ 、 Ｂ ａ） 并 Ｍ 培养基作为对照 ， 密切观察分 化过程 中细胞形态 的变 化 ， 诱导至 ６ｈ １ 、４ｈ ， 用免疫细胞 化学方法检 测神经元 、２ｈ ２ 时 利 特异性标志物的表达情况 。结果 诱导分化 １ 后 的 Ａ Ｒ ２ｈ Ｔ Ａ组大部分细胞 呈现双极 、 多极 和锥形 的典 型神经元细胞 ｈＥ ｓ Ａ Ｃ 可以在体外诱导 分化为神经元 样细胞 ， 全反式 维甲 （ Ｔ Ａ Ａ Ｒ ）诱 导效 的形态 ， 免疫细胞 化学显示这些细胞表现为 Ｎ Ｅ染色 阳性 ， Ｓ 而丁酸羟基茴香 醚（ Ｈ ） 细胞形态没 明显变化 ， Ｂ Ａ组 两组都 不表达神经胶质细胞标记 物 Ｇ Ａ 。结论 ＦＰ
家畜繁殖名词解释
家畜繁殖学定义：家畜繁殖学是对家畜生殖活动有关的各种规律（如发情周期规律、激素调节规律、精子和卵子的发生规律等）以及家畜改良和增殖技术的研究为目的的生物学的一个分科。
生殖激素：即那些直接作用于生殖活动，如动物的性器官、性细胞、性行为等的发生和发育以及发情、排卵、妊娠和分娩等生殖活动有直接关系的激素统称为生殖激素。
由于生殖激素是由动物内分泌腺体（无管腺）产生，故又称为生殖内分泌激素。
初情期：公畜初次释放有受精能力的精子，并表现出完整性行为序列的年龄，即为公畜的初情期。
性成熟：指公畜生殖机能已发育完全并具备正常繁殖力的年龄。
适配年龄：把种公畜正常投入配种的适宜时期称为适配年龄，一般在达到性成熟后推迟数月（猪、羊），甚至推迟一年多（牛、马）。
精子发生：从精原细胞的分裂到形成精子的全过程称为精子发生。
精子发生周期：在精细管上皮细胞出现的精子发生序列，即由A型精原细胞分裂开始，直至精子细胞变成精子，这一过程所需的时间叫做精子发生周期。
精细管上皮周期：在精细管同一部位出现两次同细胞组合（期）所经历的时间。
精细管上皮波：是指在精细管的纵长方向细胞组合排列状态所显示的周期性的变化规律。
冷休克：如果精液未经处理，温度由体温骤降到10℃以下时，会造成部分或全部精子不可逆地丧失活力的现象。
精子的糖酵解：在不需氧，也不论在有氧或无氧的条件下，精子可以把精清（或稀释液）中的果糖（葡萄糖）分解成乳酸而释放出能量的过程。
精子的呼吸：在有氧条件下，精子可将果糖酵解产生的乳酸，通过呼吸消耗氧进一步分解为二氧化碳和水，产生比糖酵解大得多的能量，称为有氧氧化，也叫做精子的呼吸。
初情期：指母畜初次表现发情并发生排卵的时期。
性成熟：雌性动物生长到一定年龄，生殖器官发育完全，具备了繁殖后代的能力，称为性成熟。
繁殖适龄期：可以进行正常配种的繁殖时期。
一般选择在性成熟之后体成熟之前。
绝情期：\繁殖机能逐渐衰退，继而发情停止，这一时期称为绝情期。
名词解释
一、名词解释1、发育生物学：是应用现代生物学技术研究多细胞生物体从生殖细胞的发生、受精、胚胎形成、生长、衰老和死亡整个生命过程的复杂变化和变化机制的科学。
2、发育：包括个体发育和系统发育。
个体发育是自受精卵开始到形成成熟个体所经历的一系列变化过程；系统发育是同一起源的生物群的形成历史。
3、生殖细胞：是行有性生殖的多细胞生物体内承担繁殖后代任务的细胞的总称。
包括原始生殖细胞到最终分化的精子和卵子。
（不是性腺产生的，其前体为原始生殖细胞。
）4、生殖质：是具有一定形态结构的特殊细胞质，主要由蛋白质和RNA构成，决定原生殖细胞的形成和发育。
（线虫的生殖质通常称为P颗粒，果蝇——极质）5、精子发生：指由原始生殖细胞发育为精原细胞，再发育到精子成熟并排出体外这一过程。
6、卵子发生：指由原始生殖细胞发育成卵原细胞，再由卵原细胞发育到排出成熟卵子这一完整过程。
7、生发泡：生长期的卵母细胞核内核仁增大增多、合成活跃，细胞核膨大，称为生发泡。
8、受精：是指两性生殖细胞融合并形成具备双亲遗传潜能的新个体的过程。
9、皮层颗粒反应：指精卵质膜融合时受精卵被激活，皮层颗粒膜与其外的卵质膜发生融合，导致皮层颗粒的胞吐作用。
10、灰色新月区：在动物极皮层含有大量黑色素的物种中，皮层旋转使精子进入位点对面的卵表面形成“新月形”的灰色区域，该区域称为灰色新月区。
11、卵裂：受精卵经过多次重复的有丝分裂形成很多细胞的过程。
12、卵裂球：卵裂所产生的子细胞。
13、桑椹胚：卵裂晚期，哺乳动物等形成的实心多细胞球体。
已经发生致密化，尚未形成中空的哺乳动物囊胚。
14、囊胚：多数动物晚期的卵裂球产生卵裂腔，即囊胚。
15、卵裂期：受精卵开始有丝分裂并产生由较小的细胞构成的囊胚的过程。
16、孵化：海胆囊胚的细胞外表面具有纤毛，纤毛的摆动使胚胎在受精膜内转动。
动物极细胞分泌孵化酶消化外面的受精膜，使胚胎能进入外界环境的过程就叫孵化。
17、细胞宗系：研究无脊椎动物胚胎发育的一种方法。
人羊膜上皮细胞的分离、纯化及其生物学特性研究
酶 ， ３ ℃ 下 消 化 ４ ｈ 离 心 ， 加 入 含 体 积 分 数 为 在 ７ ， 再
１％ 胎 牛 血 清 的 Ｄ Ｍ Ｆ２培 养 液 ， 打 均 匀 ， １ ０ ＭＥ ／ １ 吹 以 ×
ｌ Ｌ接种 于直径 为 １ ｍ 的培养 皿 中 ， 体积 分 Ｏ 个／ ０ｅ 置 数 为 ５ Ｏ 、７ ％Ｃ ：３ ℃细胞培养 箱 内培养 ２ｈ后 轻轻将 未 贴 壁的细胞吸出 ， １ ０ 个／ 以 ×１ Ｌ密度再接种于新培养 瓶 中 ， 日换液 ， 隔 每天观 察细胞 的生长情况 。因羊膜 上 皮 细胞贴 壁较慢 ， 混杂 的问充质 细胞或成纤 维细胞 贴 壁较快 ， 这时吸出重新 培养的细胞（ 即差异黏附法获得 的细胞 ） ０ ９ ％以上是羊膜 上皮细胞 。
广东医学
２ １ ８月 第 ３ ０ ０年 ｌ卷第 ｌ ６期 Ｇｕ ｎ ｄ ｎ ｄｃｌ ｏ ｒＭ Ａ ｇ ０ ０， ｏ．３ ，Ｎ ．１ ａ ｇ ｏ ｇＭｅ ｉａ Ｊ ｕ ｎ ｕ．２ １ Ｖ １ ｌ ｏ ６
・
２０５ ・ ５
人 羊膜 上皮 细胞 的分 离 、 化 及 其 生 物 学 纯 特性 研 究 术
公 司 ）、 原 酶 Ⅱ（ 国 Ｓｇ ａ公 司 ） Ｄ ａｅ酶 （ 国 胶 美 ｉ ｍ 、 ｎｓ 美
Ｓｇ ａ ｉ 公司 ） 大 鼠抗人细胞 角蛋 白 Ｃ ７ Ｃ ８ Ｃ １ ｍ 、 Ｋ 、 Ｋ 、 Ｋ ８单 克隆抗体 （ 国 ｂｏ ｏｌ 公 司） 美 ｉ ｒ ｗ ｄ 。
１ ２ 方 法 ．
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金玲 ，陈剑 ，吴静 徐 锦 堂 ， ，周 清 ，刘 小勇 ，赵松 滨
， 东 省 深 圳 市 宝安 区人 民 医 院 眼科 （ １ １ １ ； 南大 学 附 属 第 一 医 院 眼 科 （ 州 ５０ ３ ） 暨 南大 学 医 学院 眼 广 ５ ８ ０ ） ２暨 广 １６０ ； 科研 究室（ 州 ５０３ ） 广 １６ ０
三胚层的概念
三胚层的概念三胚层是指在胚胎发育过程中形成的三个主要层次，它们分别是外胚层、中胚层和内胚层。
三胚层的形成是胚胎发育的基础，也决定了胚胎内各种器官和组织的发育。
首先，外胚层位于胚胎的外层，起源于受精卵的外细胞团。
它在胚胎发育中发挥着重要的作用，主要发育为胚胎的外层结构，如皮肤、毛发、爪、角等。
同时，外胚层还分泌胚胎囊，保护和滋养胚胎发育。
外胚层的细胞也可以分化为胚盘和羊膜，提供胚胎的营养和呼吸。
在人及许多哺乳动物中，外胚层也是胎盘的主要组成部分，起到供氧和滋养胎儿的功能。
其次，中胚层位于外胚层和内胚层之间，起源于受精卵的间细胞团。
中胚层发育成为胚胎的中间层结构，主要形成胚胎的骨骼、肌肉、循环系统、泌尿系统等器官和组织。
中胚层的细胞分化为不同的细胞类型，形成胚胎内后期的各种器官系统。
中胚层还可以分化为心脏、血管、肾脏等重要的内脏器官。
最后，内胚层位于胚胎的内层，由受精卵的内细胞团形成。
内胚层发育为胚胎的内层结构，主要形成消化系统、呼吸系统、神经系统和内分泌系统等器官和组织。
内胚层的细胞可以进一步分化为干细胞，形成胚胎干细胞。
胚胎干细胞可以分化为各种不同类型的细胞，有着极大的潜力用于组织工程和再生医学。
三胚层的形成是在胚胎早期发育过程中的一系列复杂的细胞分化和迁移事件。
受精卵在受精后迅速分裂，形成多细胞胚胎囊。
在胚胎囊的囊壁上，一部分外细胞团持续分裂，形成外胚层；而内细胞团则不断向内移动，形成内胚层。
同时，一部分细胞从内细胞团分化出来，在内胚层与外胚层之间，形成中胚层。
这种分化和迁移过程被称为胚胎分裂和融合。
三胚层的形成是胚胎发育的起点，也是构建胚胎和形成各个器官的基础。
三胚层的细胞可以分化为不同类型的细胞，并形成各种不同的组织和器官。
这种分化和特化过程是通过细胞信号通讯和基因调控来实现的。
不同的信号分子和基因表达模式决定了细胞如何分化和迁移，最终形成成熟的组织和器官。
总之，三胚层是胚胎发育的关键阶段，它们的形成决定了胚胎的整体结构和各个器官的发育。
人羊膜上皮细胞培养工艺的优化及生物学特性
人羊膜上皮细胞培养工艺的优化及生物学特性刘超;徐志国;王绍红;程红玲;杨旭巍;贡波;刘洋;徐春艳【摘要】背景:目前人羊膜上皮细胞分离、培养及冻存的研究较为分散,难以形成全面有效的方案以满足未来对移植用干细胞的临床需求.目的:建立人羊膜上皮细胞优化的分离、培养与冻存工艺,并对其生物学特性进行研究.方法:运用正交法研究各因素对人羊膜上皮细胞分离、培养及冻存指标的影响,极差法分析数据得到优化的分离、培养与冻存工艺条件.对人羊膜上皮细胞进行原代与传代培养,通过镜下形态学观察,绘制细胞生长曲线,进行流式细胞术检测、免疫荧光染色及向肝样细胞分化等实验,观察人羊膜上皮细胞的生物学特性.结果与结论:①获得优化的人羊膜上皮细胞分离条件为:胰酶浓度0.25%,分4次消化,每次消化时间20 min;优化培养条件为:细胞接种浓度为4×108 L-1,表皮生长因子质量浓度为10μg/L,血清体积分数为5%;优化冻存条件为:细胞冻存浓度为1×1010 L-1,二甲基亚砜浓度为10%,血清体积分数为80%;②原代细胞在接种二三天内贴壁生长,贴壁后细胞呈不规则多角形,以铺路石样生长,传代后细胞贴壁与生长速度加快,冻存复苏的传代第2代细胞生长与扩增能力无明显下降;③免疫荧光染色显示,原代人羊膜上皮细胞强表达CK19、SSEA-4,不表达Vimentin、CD45和HLA-DR;原代与传代第4代免疫表型检测显示,人羊膜上皮细胞在培养传代过程中有上皮间充质转化现象发生;④向肝样细胞分化实验中,免疫荧光染色显示,诱导后的人羊膜上皮细胞肝细胞标志物白蛋白、CK18表达量明显上升,糖原染色显示诱导3周后的人羊膜上皮细胞有糖原合成;⑤结果表明,人羊膜上皮细胞易于获得且体外增殖能力强,表达胚胎干细胞保持未分化状态的表面标志物.%BACKGROUND:As current studies on isolation, culture and cryopreservation of human amniotic epithelial cells (hAECs) are relatively scattered, it is difficult to form a comprehensive and effective solution tomeet the clinical needs of stem cells for transplantation infuture.OBJECTIVE:To establish the technology of isolation, culture and cryopreservation of hAECs, and to study the biological characteristics of hAECs.METHODS:Orthogonal method was used to study the effects of different factors on the separation, culture and cryopreservation, and range method was adopted to analyze the data to optimize the separation, culture and cryopreservation. We performed cell primary and passage cultures, morphology observed by microscope, drawn cell growth curve and flow cytometry assay, immunofluorescence staining, hepatocyte like cell differentiation to study the biological characteristics of hAECs.RESULTS AND CONCLUSION:(1) The optimal hAECs separation conditions were as follows:trypsin digestions were conducted at a concentration of 0.25%, four times, once for 20 minutes digestion; optimal conditions of culture were 4×108/L cell seeding density, 10 μg/L epidermal growth factor, 5% serum; optimal conditions of cryopreservation were 1×1010/L cell cryopreservation density, 10% dimethyl sulfoxide, 80% serum. (2) The primary cells were adhered to the wall in 2-3 days, exhibiting irregular polygon, paving stone-like growth. Cell adherence and growth rate were accelerated after subculture, and the growth and proliferation ability of passage 2 cells were not significantly decreased after cryopreservation and resuscitation. (3) Immunofluorescence staining showed that the primary cells strongly expressed SSEA-4 and CK19, but did not express Vimentin, CD45 and HLA-DR. The immunophenotype statistics of the primary and passage 4 cells showed the epithelial mesenchymal transition of hAECs inculture process. (4) Immunofluorescence staining showed that the liver cell marker expression of ALB, CK18 was significantly increased after hAECs were induced to differentiate into hepatocyte-like cells. Glycogen staining revealed glycogen synthesis in hAECs after 3 weeks of induction. To conclude, hAECs are easy to obtain and have strong proliferation ability in vitro, and express surface markers for undifferentiated embryonic stem cells.【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2017(021)013【总页数】8页(P2100-2107)【关键词】干细胞;培养;人羊膜上皮细胞;正交法;生物学特性;冻存工艺【作者】刘超;徐志国;王绍红;程红玲;杨旭巍;贡波;刘洋;徐春艳【作者单位】浙江省脐带血造血干细胞库,协和华东干细胞基因工程有限公司,浙江省湖州市 313000;浙江省脐带血造血干细胞库,协和华东干细胞基因工程有限公司,浙江省湖州市 313000;浙江省脐带血造血干细胞库,协和华东干细胞基因工程有限公司,浙江省湖州市 313000;浙江省脐带血造血干细胞库,协和华东干细胞基因工程有限公司,浙江省湖州市 313000;浙江省脐带血造血干细胞库,协和华东干细胞基因工程有限公司,浙江省湖州市 313000;浙江省脐带血造血干细胞库,协和华东干细胞基因工程有限公司,浙江省湖州市 313000;浙江省脐带血造血干细胞库,协和华东干细胞基因工程有限公司,浙江省湖州市 313000;浙江省脐带血造血干细胞库,协和华东干细胞基因工程有限公司,浙江省湖州市 313000【正文语种】中文【中图分类】R394.20 引言 Introduction干细胞移植凭借其细胞来源丰富、不易感染、免疫原性低和并发症少等优点，已逐渐成为当今生物医学研究的热点。
胚胎组织的名词解释
胚胎组织的名词解释胚胎组织是指在胚胎发育过程中形成的各种类型的细胞集合体，具有特定的结构和功能。
它们是构成整个胚胎体的基本组织单元，也是胚胎发育过程中各种器官和组织的前体。
1. 胚胎胚胎是从受精卵发展而来的早期发育阶段。
在人类和很多其他动物中，受精卵通常在输卵管内发育成为囊胚，然后通过子宫壁植入子宫内膜进行进一步发育。
在胚胎发育的早期阶段，胚胎组织尚未分化出明确的结构和器官。
2. 胚胎干细胞胚胎干细胞是胚胎早期发育阶段的细胞，具有自我更新和多能性分化的能力。
它们可以分化成人体内所有类型的细胞，包括神经细胞、心脏细胞、骨骼肌细胞等。
胚胎干细胞具有巨大的潜力，被认为是研究生物学和医学领域的关键工具。
3. 器官原基器官原基是胚胎组织发育过程中生成器官的起始结构。
在胚胎发育的中后期，胚胎组织开始分化，形成不同类型的预体，即器官原基。
例如，心脏和肺的器官原基最初来自与胚胎内脊柱下部相连的胚胎中胚层。
4. 胚胎外膜胚胎外膜是围绕胚胎的一层薄膜，起保护和支持作用。
在哺乳动物中，胚胎外膜包括羊膜、绒毛膜和脐带。
羊膜提供了养分和氧气的传递，同时防止外界细菌和病原体的侵入。
绒毛膜含有细胞群，与母体子宫内膜形成血液循环联系。
脐带连接胎儿和胎盘，通过脐动脉和脐静脉传递血液和养分。
5. 胚胎期胚胎期是胚胎发育的一个阶段，从受精卵形成开始，直到器官形成。
在人类中，胚胎期从受精后的第三个星期开始，到第八个星期结束。
在这个期间，胚胎的主要器官和系统开始形成，并且对外界因素的敏感度较高。
总结：胚胎组织是胚胎发育过程中形成的各种细胞集合体，包括胚胎干细胞、器官原基、胚胎外膜等。
它们在胚胎发育过程中扮演着关键角色，决定了后续器官和组织的形成和功能。
胚胎组织的研究对于理解胚胎发育机制、人体组织再生和临床治疗等领域具有重要意义。