微生物实验报告:微生物形态观察
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实验一微生物形态观察
一、实验目的
1.巩固显微镜的使用方法,重点练习油镜的使用;
2.认识细菌、放线菌和霉菌的基本形态特征和特殊结构;
3.练习手绘微生物图片。
二、实验原理
1.细菌基本形态
细菌是单细胞生物,一个细胞就是一个个体。细菌的基本形态有 3 种:球状,杆
状和螺旋状,分别称为球菌、杆菌、螺旋菌。球菌根据细胞分裂后排列方式的不同分为
单球菌、双球菌、四联球菌、八叠球菌、链球菌、葡萄球菌等。杆菌分为单杆菌、双杆
菌、链杆菌等,是细菌中种类最多的。螺旋菌分为弧菌和螺菌。
除此之外,还有一些特殊形态的细菌。
2.细菌特殊结构
细菌的特殊结构包括荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢等。荚膜是某些细菌向细胞壁表面分泌的一层厚度不定的胶状物质,具有抗干燥、抗吞噬和附着作用。鞭毛是某些细菌表面着生的 1 至数根由细胞内伸出的细长、波曲的丝状体,具有运动功能,在菌体上的着生
位置、数目因菌种而异。菌毛(又称纤毛)是在细菌体表的比鞭毛更细、更短、直硬,
且数量较多的丝状体,与细菌吸附或性结合有关。芽孢又称内生孢子,是某些细菌生长到一定阶段,在菌体内部产生的圆形、椭圆形或圆柱形休眠体,具有极强的抗热、抗辐射、抗化学药物和抗静水压等特性。
3.真菌的结构特征
菌丝是构成真菌营养体的基本单位,是一种管状细丝。可伸长并产生许多分枝,许多分枝的菌丝相互交织在一起,就叫菌丝体。根据菌丝中是否存在隔膜可分为无隔膜菌
丝和有隔膜菌丝。为适应不同的环境条件和更有效地摄取营养满足生长发育地需要,许
多真菌的菌丝可以分化成一些特殊的形态,这些特化的形态称为菌丝变态。比如吸器、
假根、子实体。
4.放线菌的结构特征
放线菌的形态比细菌复杂些,但仍属于单细胞生物。链霉菌是典型的放线菌,其细胞呈丝状分枝,菌丝直径很小,在营养生长阶段,菌丝内无隔,故一般呈多核的细胞状
态。当其孢子落在固体基质表面并发芽后,就不断伸长、分支并以放射状向基质表面和
内层扩展,形成大量色浅、较细的具有吸收营养和排泄代谢废物功能的基内菌丝,同时在其上又不断向空间方向分化出颜色较深、直径较粗的分枝菌丝,这就是气生菌丝。不久,大部分气生菌丝成熟,分化成孢子丝,并通过横隔分裂方式,产生成串的分生孢子。
5.微生物菌落
菌落是在固体培养基上(内)以母细胞为中心的一堆肉眼可见的、有一定形态和构造等特征的子细胞集团。细菌的菌落有其自己的特征,一般呈现湿润、较光滑、较透明、较粘稠、易调取、质地均匀以及菌落正反面或边缘与中央部位的颜色一致等。不同形态、生理类型的细菌,在其菌落形态、构造等特征上也有许多明显的反映。
三、实验器材
普通光学显微镜(Nikon YS-100 ),镜油,镜头纸,擦镜液;
微生物装片15 张,分为细菌、霉菌、放线菌、酵母菌等几类;
微生物单菌落划线平板 6 块,分别为大肠杆菌、酵母、泾阳链霉菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、产黄青霉。
四、实验步骤
1.调节显微镜,观察微生物装片,选择其中 6 张手绘微生物形态;
2.选择另外 6 张通过数字摄影系统拍照;
3.观察 6 块菌落平板特征;
4.整理仪器,清洁桌面。
注:本人所在35 号台的显微镜不能进行数字摄影,故照片是在 3 号台显微镜下观察得
到的。手绘图在两台显微镜观察下各有 3 张。
五、实验结果
1.数字摄影照片(图1)
分生孢子
小梗
梗基
接合孢子
分生孢子梗
孢子囊梗
( a)(b)
孢子囊
分生孢子
顶囊
(c)(d)
接合孢子
芽孢子
(e)(f)
图 1.微生物显微观察电子照片,摄于 3 号显微镜。(a)青霉,10×40倍观察;(b)黑根霉,10
× 40 倍观察;( c)曲霉, 10× 40 倍观察;(d)毛霉, 10×40 倍观察;( e)接合孢子, 10×
40 倍观察;( f )酵母菌, 10×100 倍观察。各菌种的主要特征标注在图上。
2.手绘图照片(图2)
( a)(b)
( c)(d)
( e)( f)
图 2. 微生物装片手绘图。(a)螺菌,放大10×100倍;(b)巨大芽孢杆菌,放大10×100 倍;( c)褐色固氮菌,放大 10×100 倍;(d)枯草杆菌,放大 10×100 倍;(e)放线菌,放大 10 ×
100 倍;(f )苏云金杆菌,放大 10× 100 倍。
3.菌落特征(表1)
表 1 . 单菌落划线平板特征描述
菌落名称含水状态外观状态透明度颜色边缘情况大肠杆菌略湿圆形、光滑、凸起半透明双面乳白整齐
酵母菌湿润圆形、光滑、凸起不透明正面:乳白
整齐反面:黄褐
枯草杆菌湿润不规则、粗糙、扁平半透明双面黄褐波状
泾阳链霉菌干燥小圆、光滑、凸起不透明正面:乳白
整齐反面:黄褐
产黄青霉湿润不规则、粗糙、凸起不透明双面黄色波状
金黄色葡萄球菌湿润小圆、光滑、凸起不透明正面:黄
整齐反面:黄
六、讨论
本次实验最大的收获在于熟悉了油镜的使用和清洁。过去虽让做过不少使用显微镜的
生物实验,但是因为观察的都是比较大的动植物细胞,没有机会练习油镜的使用。这次观察的都是个体非常小的微生物,真菌还可以在低倍镜下观察,但是细菌、放线菌必须使用油镜
观察。即使这样,八叠菌、金黄色葡萄球菌等形体极小的菌种仍然不能清楚地看到单个菌体,
这也是这次没有对它们进行绘图或是摄影的原因。注意,转换到100×物镜后,禁止使用粗准焦螺旋,细准焦螺旋也要慢慢调节,否则极易打碎装片。
螺菌装片是为了观察鞭毛的,但是因为没有对装片进行过特殊染色,鞭毛非常不容易
看到,必须将孔径光阑调到很小,同时降低聚光灯亮度,才能提高视野的对比度。能够隐约地衬出鞭毛,绘图时一定仔细观察。如经媒介剂加粗再染色,将更容易观察。
本周的 3 个实验(遗传、细胞、微生物)内容非常相似,都是通过显微镜观察生物样
本,之后进行手绘图片,而且所用的显微镜型号相同。希望以后可以整合类似资源,对同一
项技能没必要 3 门同时上的课都训练。可否考虑对此部分上联合绪论课,讲解光学显微镜使用、手绘生物图方法,单独授课时则侧重讲需要重点观察的样本特征。这样同学们对 3 门实验尤其是一周中上的最后一门会有更大的兴趣。
最后,感谢原先坐在 3 号台的同学,摄影结束后与我交换坐位,使我也能够对标本进
行正常的数字摄影。
七、参考资料
陈金春、陈国强,微生物学实验指导,清华大学出版社,2005 年