不同因素对家兔离体肠肌收缩的影响

不同因素对家兔离体肠肌收缩的影响

浙江中医药大学

【摘要】目的观察乙酰胆碱（Ach）、肾上腺素（E）、氢氧化钠溶液（NaOH）、盐酸溶液（HCl）、温度以及缺空气条件对家兔离体肠肌运动的因素。方法使用RM6240生物信号采集处理系统，通过不同因素（Ach、E、NaOH、HCl、温度（25℃）以及缺空气条件）对家兔离体肠肌进行作用，记录肠肌收缩幅度变化曲线及数据结果并分析机理。结果Ach、NaOH可使肠肌收缩明显，E、HCl、25℃条件、缺空气使肠肌收缩变弱。结论Ach、NaOH兴奋肠肌，促进肠肌收缩活动，E、HCl、25℃条件、缺空气抑制肠肌收缩活动。

【关键词】离体肠肌；家兔；收缩运动

【Abstract】

Objective Observation acetylcholine (Ach) and epinephrine (E), sodium hydroxide solution (NaOH), hydrochloric acid solution (HCl), temperature and lack of air condition of rabbit in vitro intestinal muscle movement factors.

Methods Use RM6240 biological signal collection and disposal system, through the different factors (Ach, E, NaOH, HCl, temperature (25℃) and lack of air condition) of rabbit in vitro intestinal muscle for effect, record intestinal muscle contraction amplitude variation curve and data results and analysis mechanism.

Results Ach, NaOH can make the intestinal muscle contraction obvious, E, HCl, 25℃condition, lack of air make intestinal muscle contraction become weak.

Conclusions Ach, NaOH excited intestinal muscle, promote intestinal muscle contraction activities, E, HCl, 25℃condition, lack of air inhibit intestinal muscle contraction activities. 【Key Words】In vitro intestinal muscle; Rabbit; Contraction movement

1.材料与方法

1.1实验对象：家兔1只，浙江中医药大学动物实验中心提供。

1.2实验药品：台式液、乙酰胆碱、肾上腺素、氢氧化钠溶液、盐酸溶液。

1.3实验仪器：恒温浴槽、木槌、麦氏浴槽、棉线若干、手术剪、氧气泵、微机生物信号采集处理系统、张力传感器、缝针、培养皿。

1.4实验方法与步骤

1.4.1安装好实验装置，将恒温浴槽调至38℃。

1.4.2用木棰猛击家兔后脑延髓部，致其昏迷后立即打开腹腔，找到胃幽门与十二指肠交界处，取出十二指肠回肠，放入冷台式液内。先用20ml注射器冲洗内容物，冲洗干净后剪成若干长约2cm的小肠段（每一实验小组一段）在其两端结扎，一端做一短环固定在通气麦氏浴槽内，另一端扎线与张力传感器相连。将肠段完全浸浴在38℃的加有台式液的麦氏浴槽内，并调整好台式液充气量（小气泡连接不断）。

1.4.3实验准备：调节扎线与张力换能器，开启张力换能器，启动计算机RM6240生物信号采集系统，启用一通道，调节参数，使基线归零，使图形位于屏幕中央，便于观察。1.4.4 实验观察项目：

（1）在屏幕曲线显示正常时，向麦氏浴槽中滴入两滴乙酰胆碱，观察并记录其收缩幅度，记录足够波形后换液冲洗。

（2）向麦氏浴槽中滴入两滴肾上腺素，观察并记录其收缩幅度，记录足够波形后换液冲洗。

（3）向麦氏浴槽中滴入两滴氢氧化钠溶液，观察并记录其收缩幅度，记录足够波形后换液冲洗。

（4）向麦氏浴槽中滴入两滴盐酸溶液，观察并记录其收缩幅度，记录足够波形后换液冲洗。（5）用25℃台式液换掉麦氏浴槽内38℃的台式液，观察并记录其收缩幅度，记录足够波形。麦氏浴槽温度设置回到38℃。

（6）去除氧气泵，进行无氧条件实验，观察并记录其收缩幅度，记录足够波形。

2.结果

图1滴加乙酰胆碱后的肠肌运动

图2滴加肾上腺素后的肠肌运动

图3滴加氢氧化钠后的肠肌运动

图4滴加盐酸后的肠肌运动

图 5 在25℃的条件下肠肌的运动

图 6 无空气环境中的肠肌运动

肠肌收缩紧张度对比

ACH对照

ACH

E对照

E NaOH对照

NaOH

HCl对照

HCl

对照

25℃

对照

缺空气

对照

紧张度

注：比较肠肌收缩紧张度时以肾上腺素（E）为参考标准（即取值为0）；肠肌收缩强度即为最大值(g)与最小值(g)的差值。

3. 讨论

3.1 加入乙酰胆碱：离体肠管活动加强，描记曲线出现收缩频率变快，幅度增加，张力也增加。肠的平滑肌有神经调节的作用。其中一类神经元含乙酰胆碱、速激肽、P物质等，它们可以使中间神经元或兴奋性运动神经元。这些神经元通过他们末梢释放的递质，调节小肠平滑肌的活动。原因是乙酰胆碱可与肌膜上的M受体联合，使得两类通道开放：一类为电位敏感性钙专用通道，另外一类为特异性受体活化钙专用通道。前一类通道对Ach敏感，小剂量Ach即引起开放；后一类通道对Ach相对不敏感，只有大剂量Ach才会引起开放。这两类通道开放都使得肌浆中钙增高，进而拿获肌纤卵白—肌凝卵白—ATP系统，使光滑肌收缩，肌拉力增加。

3.2 加入肾上腺素：可见离体肠管活动减弱，记录曲线收缩频率变慢，幅度减小，基线下移。目前认为与肠肌细胞膜上存在α和β两中受体，α受体又分为α抑制型受体和α兴奋型受体有关。肾上腺素作用于α抑制型受体，引起肠肌膜上一种特异性受体活化，使钾外流增多，细胞膜发生超极化，肠肌兴奋性降低，肌拉力下降。同时，肾上腺素还作用于β受体，①它的拿获引起肠肌细胞膜中的cAMP合成增多，cAMP拿获肠肌膜及肌浆网上钙泵活动，使肌浆中钙液体浓度降低，亦使肌拉力降低；②β受体拿获后还促使钾及钙外流增加，加速膜的超极化，促进了肠肌肌拉力的减低。

3.3 加入氢氧化钠：可见肠管活动加快，基线上移。NaOH为碱性成分，正常机体胃肠内有胰腺小导管细胞分泌的HCO3—可起到中和胃酸的作用，使小肠液pH值升高，甚至偏碱性，有利于小肠内各种酶发挥作用，所以肠管活动增强。但要注意适当的PH值收缩效果最好，PH值过高或过低，收缩幅度及张力都会降低。

3.4 加入盐酸：离体肠管活动减弱，描记曲线出现收缩幅度降低，频率变慢。出现这一现象，目前认为其原因在于：①细胞外H+升高时，Ca2+通道的活性受到抑制，使得Ca2+内流减少。②H+升高能干扰肌肉的代谢和肌丝滑行的生化过程：H+能与Ca2+竞争钙调蛋白的结合位点而使肌球蛋白ATP酶活性降低（近期有理论认为是直接抑制作用而非竞争作用）；使肌原纤维对Ca2+的敏感性和Ca2+从肌质网的释放量减少。本实验由于操作失误，先加了NaOH,后加了HCL,实验结果图可以看出，HCl很好地抑制了胃肠道的运动。

3.5 加入25℃台式液：见到基线先上移后下降的现象，这是因为降温本身对肠管是一种刺激，也可短暂地加强代谢活动，所以肌张力升高。但总体离体肠肌活动减弱，记录曲线收缩频率减慢、幅度减小。温度降低，代谢程度降低，兴奋性减弱。