实验一显微镜的构造及使用方法
实验一显微镜的构造和使用、植物细胞基本结构
实验一显微镜的构造和使用、植物细胞基本结构一、实验目的1、了解普通光学显微镜的构造和各部分性能,学习和掌握显微镜的使用方法。
2、学习生活细胞观察方法,掌握植物细胞基本结构。
3、掌握细胞主要后含物的种类及鉴别4、学习临时制片方法(斯取法、刮取法)、粉末装片法和生物绘图方法。
二、实验器具与试剂光学显微镜、载玻片、盖玻片、尖头镊子、解剖针、刀片、剪刀、吸水纸、擦镜纸、纱布块、吸水纸蒸馏水、稀碘液、苏丹Ⅲ、水合氯醛、稀甘油、20%蔗糖液。
三、实验材料洋葱鳞叶表皮细胞制片、马铃薯块茎、半夏粉末、大黄粉末、黄柏粉末、麻黄粉末。
四、实验内容(一)普通光学显微镜的构造显微镜是研究植物细胞结构、组织特征和器官构造的重要的和不可替代的仪器。
显微镜的种类繁多,可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。
电子显微镜结构相对复杂,光学显微镜结构较为简单,基本结构均可分为机械部分和光学系统部分。
1.机械部分:显微镜机械部分是由精密而牢固的零件组成,主要包括镜座、镜臂、载物台、镜筒、物镜转换器和调焦装置等。
(1)镜座:是显微镜的基座,用以支持镜体平衡,其上装有反光镜或照明光源。
(2)镜柱:是镜座上面直立的短柱,连接、支持镜臂及以上的部分。
(3)镜臂:弯曲如臂,上接镜筒、下接镜柱,支持载物台、聚光器和调焦装置。
是取放显微镜时手握的部位。
直筒显微镜镜臂和镜柱连接处有活动关节,可使显微镜在一定范围内后倾,一般不超过30°。
(4)镜筒:一般长160 mm~170 mm。
其上端放置目镜,下端与物镜转换器相连。
双筒斜式的镜筒,两镜筒距离可以根据两眼距离及视力来调节。
(5)物镜转换器:是固着在镜筒下端的圆盘,其上装有不同倍数的物镜。
可以左右自由转动,便于更换物镜。
(6)载物台:放置切片的平台,中央有一个通光孔,旁边装有固定玻片的压夹或标本移动器。
有的显微镜载物台下装有聚光镜。
(7)调焦装置:镜臂两侧有粗、细调焦轮各一对,旋转时可使镜筒上升或下降,以便得到清晰物像,即调焦。
显微镜的结构及使用
• 8.使用完毕后,必须复原才能放回镜箱内, 其步骤是:取下标本片,转动旋转器使镜头离 开通光孔,下降镜台,平放反光镜,下降集光 器(但不要接触反光镜)、关闭光圈,推片器回 位,盖上绸布和外罩,放回实验台柜内。 • 最后填写使用登记表。(注:反光镜通常应垂直放,但有
时因集光器没提至应有高度,镜台下降时会碰坏光圈,所以这里 改为平放)
显微镜使用的注意事项(1)
• 1.持镜时必须是右手握臂、左手托座的姿势, 不可单手提取,以免零件脱落或碰撞到其它地 方。 2.轻拿轻放,不可把显微镜放置在实验台的 边缘,以免碰翻落地。 3.保持显微镜的清洁,光学和照明部分只能 用擦镜纸擦拭,切忌口吹手抹或切勿接触镜头和镜 台,如果沾污应立即擦净。 5.放置玻片标本时要对准通光孔中央,且不 能反放玻片,防止压坏玻片或碰坏物镜。 6.要养成两眼同时睁开的习惯,以左眼观察 视野,右眼用以绘图。 7.不要随意取下目镜,以防止尘土落入物镜, 也不要任意拆卸各种零件,以防损坏。
实验一 显微镜的结构和使用
(用眼观察的镜头)
(使物像清晰)
(连接目镜和物镜) (安装物镜)
(放置玻片标本)
(使物像更清晰)
(接近物体的镜头)
(握镜的部位) (支持镜柱以 上的部件)
(调节光线强弱) (固定标本)
(使光线经过通 光孔反射上来)
(稳定镜身)
电子显微镜与光学显微镜的基本区别
分辨本领
光学 显微镜 电子 显微镜
• 鉴定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品,不需 用的化学试剂是 • A .斐林试剂 B .苏丹Ⅳ染液 • C .双缩脲试剂 D .红墨水
高倍镜的使用方法
• (1)选好目标:一定要先在低倍镜下把需进 一步观察的部位调到中心,同时把物象调节到 最清晰的程度,才能进行高倍镜的观察。 (2)转动转换器,调换上高倍镜头,转换高 倍镜时转动速度要慢,并从侧面进行观察(防 止高倍镜头碰撞玻片),如高倍镜头碰到玻片, 说明低倍镜的焦距没有调好,应重新操作。
普通生物学实验内容实验一显微镜的构造和使用方法实验二
③聚光器和光圈:装置在载物台下面。聚光器是由一组聚 光透镜组成,其作用是聚焦反光镜所反 射的光线于观察物上,光圈位于聚光器 下方,由多个金属页片组合而成,有一小 柄控制。推移小柄,可使光圈孔径缩小 或放大,藉以调节入射光量,使照明调 到最适程度。
④反光镜:在聚光器下面,由一平面镜和一凹面镜组成, 它是把光源射来的光线反射向上,使穿过聚光 器,照明标本。
普通生物学实验内容实验一显微镜的构造和使用方法实验二
⑥转换器:一般都装在镜筒下方,由两个金属圆盘叠合组成, 上有2-4个孔,可依接物镜放大倍数高低,顺序安 装3-4个接物镜。转动转换器,可更换不同放大倍 数的接物镜。
⑦载物台:为放置标本的平台。位于镜筒的下方,中央有一 孔,为光线通路,台上装有一对压片夹,用来固定 标本。有的载物台上装有标本移动器,既可固定标 本,又可前后左右移动标本。标本移动器上有标 尺,用以寻找物象。
③ 调好光照:先把低倍接物镜转至镜筒下方,使距载物台的1cm 处,然后将聚光器升到最高,光圈放到最大。至此,一面由接 目镜观察,一面转动反光镜,使得到充分的照明。注意:接着 观察标本时,显微镜和反光镜都不要动,而光圈大小和聚光器 高低可依所用接目镜不同和所观察物体的大小厚薄的差异而随 时调节。
④ 低倍接物镜观察:将玻片标本放在载物台上,使待检查部分位 于低倍镜正下方,然后将接物镜降至距标本约0.5cm处,用左 眼看接目镜进行观察,并用粗调节器慢慢向上旋转镜筒,直至 影像出现,并找出最适于观察的部分,再用标本移动器推移到 视野中央,改用细调节器调节,让物像十分清楚,调节光圈的 大小和聚光器的高低,使视野中的光亮适度,以便仔细观察。
关系,它与显微镜的分辨率成正比,与焦深成反比,与镜像亮度的
平方根成正比。
数值孔径可用下式表示:
实验一光学显微镜的结构、使用及保养
实验一光学显微镜的结构、使用及保养一、目的了解光学显微镜的基本结构和各部分的作用,能正确、熟练地使用显微镜观察植物材料,掌握显微镜的保养措施。
二、用具和材料显微镜、擦镜纸或小绸布、二甲苯、任意一种植物切片或临时装片。
三、方法步骤(一)显微镜的结构:通常使用的生物显微镜,其结构分为机械部分和光学部分,现说明如下:1. 机械部分(1)镜座:即显微镜最下面的马蹄形部分,用以固定和支持镜体。
(2)镜柱:直立于镜座上的短柱,与镜臂相连。
(3)镜臂:取放或移动显微镜时手握的部位,一般呈弓形,也称执手。
(4)倾斜关节:镜柱与镜臂相连的关节,用于调节显微镜的倾斜度,以便于观察。
观察临时装片时,不要倾斜,以防玻片上的水流出,一般观察时,倾斜度不宜超过30°,以免显微镜因倾斜跌倒。
(5)载物台:位于显微镜中部,载标本制片的方形或圆形平台。
中央有一圆孔,既通光孔,光线即由此孔通过,台上两侧有用以固定制片的推进器。
(6)镜筒:为一金属圆筒,连接在镜臂上,下接转换盘。
(7)物镜转换盘:可以任意转动,上面安装有3—4个物镜,使用时根据需要可更换放大倍数不同的接物镜。
(8)焦螺旋:装在镜臂上部两旁,通过转动,调节焦距,有大小两对,大的叫粗准焦螺旋,转动一周可使镜筒升降10mm,小的是细准焦螺旋,每转动一周可使镜筒升降1mm。
2. 光学部分(1)目镜:装于镜筒上端,上面刻有号码,表示放大的倍数。
“5×、16×”可根据需要选择使用。
(2)物镜:安装在转换盘的螺旋孔上,一般有三个物镜:即低倍镜(10×)、高倍镜(40×)、油镜(100×,)物镜下端的镜孔越小,放大的倍数越大。
(3)聚光器:在载物台下,由透镜组成,可以聚集反光镜反射来的光线,照明玻片标本,聚光器下装有光圈,推动其上的小柄可使光圈任意开大或任意缩小,以调节光线强弱。
(4)反光镜:在聚光器下,安在镜臂下端可前后左右随意移动的一个镜片,通过它把光线反射到聚光器上面,凹面反射的光较强。
实验一普通光学显微镜的构造和使用[详细讲解]
实验一普通光学显微镜的构造和使用一、目的要求1.掌握普通光学显微镜的基本构造、使用方法、保护要点。
2.掌握普通光学显微镜油浸系的原理。
3.使用油镜观察几种细菌的基本形态。
二、显微镜的基本构造显微镜由机械装置和光学系统两大部分组成(图1-1)。
光学显微镜的构造(图1-1)1. 物镜转换器2. 接物镜3.游标卡尺4.载物台5.聚光器6. 彩虹光阑7.光源8. 镜座9. 电源开关 10. 光源滑动变阻器 11. 粗调螺旋 12. 微调螺旋 13.镜臂 14.镜筒 15.目镜 16.标本移动螺旋1.机械装置镜座(base)和镜臂(arm)镜座位于显微镜底部,呈马蹄形,它支持全镜。
镜臂有固定式和活动式两种,活动式的镜臂可改变角度。
镜臂支持镜筒。
镜筒(body tube)是由金属制成的圆筒,上接目镜,下接转换器。
镜筒有单筒和双筒两种,单筒又可分为直立式和后倾式两种。
而双筒则都是倾斜式的,倾斜式镜筒倾斜45°。
双筒中的一个目镜有屈光度调节装置,以备在两眼视力不同的情况下调节使用。
转换器(no sepiece)为两个金属碟所合成的一个转盘,其上装3—4个物镜,可使每个物镜通过镜筒与目镜构成一个放大系统。
载物台(stage)又称镜台,为方形或圆形的盘,用以载放被检物体,中心有一个通光孔。
在载物台上有的装有两个金属压夹称标本夹,用以固定标本;有的装有标本推动器,将标本固定后,能向前后左右推动。
有的推动器上还有刻度,能确定标本的位置,便于找到变换的视野。
调焦装置是调节物镜和标本间距离的机件,有粗动螺旋(coarse adjustment)即粗调节器和微动螺旋(fine adjustment)即细调节器,利用它们使镜筒或镜台上下移动,当物体在物镜和目镜焦点上时,则得到清晰的图像。
2.光学系统物镜(objective)物镜安装在镜筒下端的转换器上,因接近被观察的物体,故又称接物镜。
其作用是将物体作第一次放大,是决定成像质量和分辨能力的重要部件。
实验一光学显微镜的构造使用和临时装片制作
(三)茎的次生结构
1 双子叶植物茎的次生结构 观察椴树茎一年生、多年生横切片,杨树茎一
年生横切片,棉花茎次生生长切片,接骨木皮孔 (树皮)切片,注意区分出初生、次生结构、重点 观察次生木质部、次生韧皮部、维管形成层的结构 及各组成成分的细胞特征,观察周皮、皮孔、维管 形成层的结构特征。
有生活力的种子其胚细胞的原生质具有半透 性,有选择吸收外界物质能力,某些染料如红墨 水中的酸性大红G不能进入细胞内,胚部不着色。 而丧失生活力的种子其胚部细胞原生质膜丧失了 选择吸收的能力,染料进入细胞内是胚部染色, 所以可根据种子胚部是否染色来判断种子的生活 力。
三 实验仪器、试剂和材料
恒温箱、培养皿Leabharlann 刀片、烧杯、镊子、恒温箱、 电炉。
实验五 植物种子活力的检定
一 实验目的 掌握植物种子活力检定的基本原理及
TTC法和红墨水法快速测定种子活力的方 法,奠定种子活力检定方法在农业生产实 际中的应用基础。
二 实验原理
凡有生命活力的种子胚部,在呼吸作用过程中
都有氧化还原反应,而无生命活力的种胚则无此反 应。当氯化三苯基四氮唑(TTC)渗入种胚的活细 胞内,并作为氢受体被脱氢辅酶(NADH2或 NADPH2)上的氢还原时,便由无色的TTC变为红 色的三苯基甲腙(TTF)。
(五)输导组织
观察南瓜茎纵切片(双韧维管束、中空)、 苋茎纵切片(外韧维管束)看导管、筛管;观察 松木离析装片看管胞。
(六)分泌组织
观察柑桔果皮切片(溶生型)、松木质茎横 切片(裂生型)
实验一显微镜的结构和使用
三、基础知识和应用
1、目镜和物镜 (1)镜头长度与放大倍数关系 目镜:越长,放大倍数越小。 物镜:越长,放大倍数越大。 (2)放大倍数的含义: 显微镜放大的是长度或宽度,而不是面积和体积。 放大倍数=目镜×物镜 (3)高倍物镜与低倍物镜的比较 《学评》P2
遵循“污物在什么结构上,
随什么变化”的原则
四、巩固练习
• 1.《学评》 • 2.课本P12
目镜
物镜
镜头长度与放大倍数关系 目镜:越长,放大倍数越小。 物镜:越长,放大倍数越大。
一、显微镜的结构
粗准焦螺旋
目镜
镜筒
细准焦螺旋
镜臂
转换器
物镜 载物台 遮光器
镜柱
反光镜
二、显微镜的使用
(一)取镜和安放
(二)对光、调焦距
(三)低倍镜观察
(四)高倍镜观察
(五)收镜
(一)取镜和安放
• 一手握镜臂ห้องสมุดไป่ตู้一手托镜座。
• 让镜筒向前,镜臂向自己。
(二)对光
1.转动粗准焦螺旋,使镜筒上升。 2.转动转换器,使低倍镜对准通光孔。 3.转动载物台下的遮光器,选一较大 的光圈对准通光孔。 4.转动反光镜,使光线通过通光孔反 射到镜筒内, 使视野明亮。
• 当光线强时,让平面镜对着光源; • 当光线弱时,用凹面镜对着光源。 视野
《学评》P7-11、8-28
光圈
反光镜
(三)低倍镜观察
1.把玻片放在载物台上压住,正对通光孔的中心。 2.眼侧看物镜和标本之间,转动粗准焦螺旋,使 镜筒缓缓下降,直到物镜接近玻片为止。 3.注视目镜内,同时反向缓缓转动粗准焦螺旋, 使镜筒上升,直到看到物象为止。
实验一 显微镜的构造及使用酵母菌的形态观察
实验一显微镜的构造及使用酵母菌的形态观察一、实验目的1.了解显微镜的构造及使用方法。
2.观察酵母菌的形态。
二、实验原理显微镜是观察微生物的常用工具之一。
它是用来放大细菌、真菌、病毒、单细胞等微生物肉眼无法观察的微小结构的光学仪器。
显微镜的基本构造包括镜头系统、光源、机械系统和目镜系统。
镜头系统包括目镜和物镜,光源是用来照射样本的光源。
机械系统包括支撑和移动的部分,目的是将样本放到光学系统中进行观察。
目镜系统用来放大样本图像并观看。
酵母菌是一种单细胞真菌,营养模式为化学合成型与发酵型。
常见的酵母菌有酿酒酵母、面包酵母等。
它们的大小一般在1-5微米左右,形状呈球形、椭圆形或短棒形。
酵母菌能形成菌丝,但这种情况比较少见。
三、实验方法1.将显微镜移动到桌子上并固定。
2.将目镜放置在顶部的镜头上。
3.调整物镜的位置,使其与样本平齐,同时调整焦距以获得清晰的图像。
在调整过程中需要注意不要接触到样本。
4.将透射光源调整到合适的位置,以达到适当的照射强度。
5.将酵母菌样本涂在载玻片上。
6.将载玻片放到显微镜的机械系统上。
7.观察样本并记录所见的情况。
4.处理数据观察并记录显微镜下看到的酵母菌样本形态及数量。
五、实验结果经过观察,酵母菌呈球形和椭圆形,大小约在1-5微米之间。
本实验观察了显微镜的构造以及使用方法,并在此基础上观察了酵母菌的形态。
酵母菌是一种典型的单细胞真菌,大小约在1-5微米之间,通常呈球形和椭圆形,并且能形成菌丝。
本实验结果表明显微镜是一种重要的工具用于观察微细结构的形态,为后续实验提供了基础。
显微镜的构造和使用实验报告
显微镜的构造和使用实验报告显微镜的构造和使用实验报告引言:显微镜是一种重要的科学工具,它能够让我们看到微小的物体和微观世界。
本实验旨在探索显微镜的构造和使用方法,以便更好地理解显微镜的原理和应用。
一、显微镜的构造显微镜主要由以下几个部分构成:物镜、目镜、光源、调焦机构和台座。
1. 物镜:物镜是显微镜的主要部件,它负责放大被观察物体的图像。
物镜通常有多个镜片组成,每个镜片的放大倍数不同,可以根据需要选择不同的物镜。
2. 目镜:目镜是显微镜的另一个重要部分,它位于物镜的下方,用于放大物镜所形成的物体图像。
目镜通常有一个或多个镜片组成,其放大倍数一般较小。
3. 光源:光源是显微镜的照明部分,它提供光线以照亮被观察的样本。
常见的光源有白炽灯、荧光灯和LED灯等。
在实验中,我们使用了LED灯作为光源。
4. 调焦机构:调焦机构用于调节物镜和目镜的位置,以获得清晰的图像。
常见的调焦机构有粗调焦和细调焦两种,粗调焦用于快速调节焦距,而细调焦则用于微调焦距。
5. 台座:台座是显微镜的支撑部分,它提供稳定的基础,使显微镜能够保持平衡和稳定。
二、显微镜的使用方法1. 准备样本:首先,我们需要准备一份待观察的样本。
样本可以是生物组织、细胞、昆虫等微小的物体。
将样本放置在玻璃片上,并加上一滴显微镜溶液,以便更好地观察。
2. 调整光源:将显微镜放在平稳的台面上,打开光源。
通过调节光源的亮度,使样本能够被适当照亮,但不至于过亮。
3. 调节物镜和目镜:将样本放置在显微镜的物镜下方,并通过调节物镜和目镜的位置,使样本能够被清晰放大。
首先,使用粗调焦将样本大致调焦,然后使用细调焦进行微调,直到获得最清晰的图像。
4. 观察和记录:一旦样本被清晰放大,可以开始观察并记录所见的现象。
可以使用显微镜的目镜上的刻度尺来测量样本的大小,并使用显微镜的调焦机构来调整焦距,以观察样本的不同层面。
5. 清洁和存放:实验结束后,将显微镜上的样本和玻璃片清洁干净,并将显微镜存放在干燥、清洁的地方,以防止灰尘和污垢的积累。
试验一显微镜的构造和使用
7.在实验报告纸上,上写实验题目,下写图的 名称及放大倍数。
实验 报告
实验二 植物细胞
实例
细胞壁
细胞质
细胞核
液泡
洋葱表皮细胞图(40x)
实验报告
1.绘图表示洋葱表皮细胞的 构造,并注明各部位的名 称。
2.绘图表示马铃薯块茎三种 淀粉粒的构造,注明各部 名称。
实验三 植物组织
实验目的
光源
镜筒 物镜转换器 镜臂 镜柱 载物台
粗调焦螺旋 微调焦螺旋
镜座
二. 显微镜的使用 关键步骤: (1)调光; (2)调焦。
1.低倍镜的观察
观察
拿取显微镜 放置显微镜
对光 放置玻片标本
调节焦距 调节视野明亮度
2.高倍镜的观察
选好目标置于视野的正中央
使用微调螺旋调整焦点 调节光亮度和反差
认真观察
显微镜使用后的整理
3.使用显微镜的注意事项
1. 使用显微镜时,要首先使用低倍镜,然后 再使用高倍镜;
2. 玻片标本要加盖玻片; 3. 调换载玻片时需用镜头转换器将高倍镜换
成低倍镜,然后取出玻片,换上新玻片, 再从低倍镜开始观察。
实验二 植物细胞
实验目的
1. 了解植物细胞的基本构造。 2. 了解植物细胞的原生质流动现象和胞间连丝。 3. 了解细胞贮藏物质和细胞壁的形态及一般的鉴
别方法。 4. 掌握植物细胞有丝分裂过程中各个时期的特点。 5. 掌握徒手切片技术及临时装片的制作。 6. 掌握生物绘图的基本技能。
实验内容
1.洋葱表皮细胞
2.番茄果肉离散细胞
3.胡萝卜根有色体
4. 马铃薯块茎淀粉粒
5.蓖麻种子糊粉粒
6.芝麻种子脂肪
显微镜的结构及使用方法
显微镜的结构及使用方法(1)普通光学显微镜的构造(2)各部分的作用镜座:稳定镜身。
镜柱:支持镜柱以上的部件。
镜臂:握镜的部位。
载物台:放置玻片标本的地方。
中央有通光孔,两旁各有一个压片夹。
镜筒:上端安装目镜,下端有转换器。
转换器:可以转动的圆盘,上面安装物镜。
粗准焦螺旋:转动时可以大幅度升降镜筒。
细准焦螺旋:转动时,镜筒升降幅度较小,可以使物像更清晰。
目镜:接近眼睛的镜头。
物镜:接近物体的镜头。
遮光器:上面有大小不等的圆孔叫做光圈。
不同的光圈可以调节光线的强弱。
(大光圈光线弱时使用)反光镜:一面是平面镜(光线强时使用),一面是凹面镜(光线弱时使用)。
转动反光镜可以使光线经过通光孔反射上来。
(小光圈光线强时使用)(3)注意:在移动标本时,像总是朝相反的方向移动;从目镜内看到的物象是倒像;目镜与物镜放大倍数的乘积就是所成像的放大倍数。
(高倍显微镜下,所见的细胞数目少)(低倍显微镜下,所见的细胞数目多)实验一用显微镜观察永久装片(一)实验操作技能1.安放显微镜取镜:右手握镜臂,左手托镜座(1分)安放:放在靠左手边,离桌边7cm左右(1分)2.显微镜对光遮光器:选用合适的光圈(光线好用小光圈,光线不好用大光圈)(1)物镜、目镜的使用:选用低倍镜观察,转动转换器,不能用手扳动物镜(1)反光镜对光:光线好用平面镜,光线不好用凹面镜。
镜面对着光源(1)3.观察永久装片装片放置:将要观察的目标放在载物台上,并用压片夹压好(1)使用低倍镜,下降镜筒:镜筒用粗准焦螺旋下降至物镜与装片相离2cm左右(1)调焦:用左眼观察,同时慢转粗准焦螺旋,直至看到目标后转用低准焦螺旋(1)4.说出装片的显著特征(1)血细胞涂片:红细胞较多,没有细胞核。
(若看到白细胞,要说明白细胞比红细胞大,有细胞核)叶片结构:叶片属于植物的营养器官。
叶肉属基本组织,看到一层表皮细胞排列整齐紧密,表皮属于保护组织,看到大的叶脉,叶脉属于疏导组织。
(二)实验常规和实验习惯(1)显微镜收放:将压片夹转至后方,取走装片,将物镜转离通光孔,下降镜筒至最低,将反光镜转到与镜座垂直的位置,用右手握镜臂,左手托镜座,将显微镜放入镜箱。
微生物实验实验一显微镜的使用及微生物形态观察
• 实验一 显微镜的使用及微生物形态观察 • 实验二 活性污泥生物相及藻类形态观察 • 实验三 微生物的染色 • 实验四 微生物细胞数的计数 • 实验五活性污泥不同微生物种群的分离培养与鉴别
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实验一 显微镜的使用及微生物形态观察
一. 目的 1. 了解普通光学显微镜的构造,学习显微镜 的使用方法和保养。(高、低倍镜的使用) 2. 观察蓝细菌、霉菌、酵母菌、放线菌的 个体形态,学会生物图的绘制。
血球计数板正面结构图
计数室放大图
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计数:
数出5个中方格中的总菌数A,若菌液的稀释 倍数为B,则计算公式如下:
(1) 25个中方格的计数板计算公式 总菌数 A 25 104 B 50000 A B(个 / ml)
5 (2) 16个中方格的计数板计算公式
总菌数 A 16 104 B 32000 A B(个 / ml) 5
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三. 实验内容
(一)培养基的制备及灭菌 1. 玻璃器皿的包扎与灭菌
(1) 六套培养皿一组, 用报纸包装。 (2) 取四支吸量管,在其吸端塞少许棉花后用 长报纸条包扎。
(3) 干热灭菌:上述玻璃器皿在160°C烘箱内2小 时。
2.无菌水的制备 在3支试管中各装入9ml自来水,塞上硅胶塞, 同下
述培养基一起用高压蒸汽灭菌。
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2. 区分酵母菌死活细胞基本原理 美蓝是一种无毒性的染料,它的氧化型呈
蓝色,还原型是无色。用美蓝对酵母菌的活细 胞进行染色时,由于细胞的新陈代谢作用,细 胞内具有较强的还原能力,能使美蓝由蓝色的 氧化型变成无色的还原型。因此,具有还原能 力的酵母活细胞是无色的或淡蓝色,而死细胞 或代谢作用的衰老细胞则呈蓝色,借此即可对 酵母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。
显微镜的构造和使用
细胞质:为无色透明的胶状物,紧贴在细 胞壁以内,被中央大液泡挤成一薄层,仅 细胞的两端较明显,当缩小光圈使视野变 暗时,在细胞质中可以看见一些无色发亮 的小颗粒,是白色体。
(2)取一永久制片,按照“低倍镜使用” 的步骤与方法进行操作练习。
注意:要使标本向前移动时,载玻片应向 哪个方向移动?要使标本向左移动时,载 玻片应向哪个方向移动?经多次练习掌握 移动玻片使物象保持视野中央的规律。应 该注意,拧动移动器时、动作要轻,只能 慢慢移动,切忌动作过猛,防止损坏移动 器。
多存在于植物的幼嫩细胞或不见光的细胞中,取大白菜的幼叶或叶柄做徒手切片; 细胞核:为扁圆形的小球体,总是沉没在细胞质中,由于有中央大液泡的形成,所以使它和细胞质一样紧贴着胞壁。 核质,充满整个细胞核; 多存在于植物的幼嫩细胞或不见光的细胞中,取大白菜的幼叶或叶柄做徒手切片; (2)白色体: 白色体是不含色素的质体,所以无色。 (2)取洋葱头新鲜的肉质鳞片,用镊子从其内表面撕下一条透明的、薄膜状的内表皮,再用剪刀剪取3-5平方毫米的一小块,迅速置 于载玻片上的水滴中,注意,必须外切向壁朝上,如果发生卷曲,应细心地用镊子和解剖针将其展开,再盖上盖玻片(盖盖玻片时, 用镊子轻轻地夹住盖玻片一侧,先放下相对的一边,然后再慢慢地将整个盖玻片放下,以防产生气泡)。 检查一下,如果载玻片上水液过多,盖玻片在水上浮动,应用吸水纸吸去一些水分; (3)结合观察洋葱表皮细胞,进行显微镜操作练习。 有时在撕取表皮时,细胞已破裂,核与质均流出,就看不见了,一般的细胞核都包括下列三部分:核模,包围在细胞核的外面; 核仁,为核质中1-3个发亮的小颗粒。 观察时,不要闭眼,应练习自己用左眼观察单筒显微镜的习惯(右眼便于绘图)。 核质,充满整个细胞核; 2、初步掌握显微镜的使用方法; 三、实验内容 1、显微镜的构造及使用方法 (1)按号把自己的显微镜取出,放在实验桌上,参照本实验指导第二节“显微镜”,在教师指导下熟悉显微镜各部分构造的名称及用 途,然后进行操作练习,先用低倍物镜进行对光练习,使视野调节得明亮而均匀,再转换成高倍物镜,此时注意它的视野亮度与低倍 物镜有无区别?思考:通过哪几方面的调节操作可使高倍物镜的视野达到要求的亮度? 二、实验用品和材料 用品(以后各次实验基本相同):显微镜、扩大镜、镊子、载玻片、盖玻片、解剖针、纱布、吸水纸、蒸馏水、番红、醋酸洋红、碘
实验一显微镜构造、使用和细胞结构
药用植物学实验指导适用专业:中药学药用植物教研室实验一显微镜构造、使用和细胞结构实验目的:1.了解显微镜的根本构造并掌握显微镜的正确使用方法和保养2.了解植物学根本实验技术并学习临时装片法和绘图根本技术3.掌握植物细胞的根本构造实验内容:一.显微镜的构造与使用方法〔一〕显微镜的根本构造1.机械局部次局部是显微镜的骨架,是安装光学局部的基座。
包括:镜座、镜柱、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、调焦装置等。
〔1〕基座是显微镜的底座,支持整个镜体,使显微镜放置平稳。
〔2〕基柱镜座上面直立的短柱,支持镜体上部的各局部。
〔3〕镜臂弯曲如臂,下连镜柱,上连镜筒,为取放镜体时手握的局部。
直筒显微镜的镜臂下端与镜柱连接处有一活动关节,可使镜体在一定X围内后倾,便于观察。
〔4〕镜筒上端置目镜,下端与物镜转化器相连。
〔5〕物镜转换器连接于镜筒下端的圆盘,可自由转动,盘子有3-4个安装物镜的螺旋孔。
当旋转转换器时,物镜即可固定在使用的位置上,保证物镜与目镜的光线合轴。
〔6〕载物台放置玻片标本的平台,中央有一通光孔,两侧有压片夹或机械移动器,既可固定玻片标本,也可以前后左右各方向移动。
〔7〕调焦装置调节物镜和标本之间的距离,得到清晰的物像。
在镜臂两侧有粗细调焦螺旋各1对,旋转时可使镜筒上升或下降,大的一对为粗调焦螺旋,旋转一圈可使镜筒移动2mm左右。
小的一对为细调焦螺旋,旋转一圈可使镜筒移动0.1mm。
〔8〕聚光器调节螺旋镜柱一侧,旋转它时可使聚光器上下移动,借以调节光线德鄂强弱。
2.光学局部包括:物镜、目镜、反光镜、聚光器〔1〕物镜安装在镜筒前端物镜转化器上的透镜。
利用光线使被检标本第一次成像,因而直接关系和影响成像的质量,对分辨力有着决定性的影响。
物镜分为低倍、高倍、油浸物镜。
物镜放大倍数愈高,物镜下面透镜的外表与盖玻片的距离愈小,所以使用时应该特别注意。
〔2〕目镜安装在镜筒上端,可使物镜的成像进一步放大。
目镜上刻有放大倍数,如5×、10×、16×等。
实验一生物显微镜的构造、使用技术和单层扁平上皮的观察
角 化 的 复 层 扁 平 上 皮 ( 表 皮 )
未角化的复层扁平上皮(食管)
复层扁平上皮(角膜)
复层柱状上皮(眼睑结膜)
变移上皮光镜图(膀胱空虚状态)
变移上皮光镜图(膀胱扩张状态)
五.作 业 1、使用显微镜应注意哪些事项? 2、绘制单层扁平上皮结构图。 3、单层上皮分为哪几种?
(4)调焦 光线对好后,将玻片标本放在镜台上, 有盖玻片的一面朝上,被检物体对准镜台孔正中, 用标本移动器上的压片夹卡紧,然后调焦。转动粗 调焦螺旋调节镜台与物镜间的距离,从侧面注视, 以二者间距离5mm为度。然后自目镜观察,慢慢转 动粗调焦螺旋,同时移动标本移动器,直到基本看 清标本物像。 (5)低倍镜观察 用粗调焦螺旋调焦后,再轻轻转 动细调焦螺旋,以便得到清晰的物像。如果观察的 目标不在视野中央,可调节标本移动器,使之恰好 位于视野中央。★玻片移动方向与物像移动方向的 关系如何?若光线不适,可拨动可变光阑的操纵杆, 调节光线至适宜。
(7)油镜观察 转动粗调焦螺旋,使物镜与 镜台保持一定距离。滴1滴香柏油于玻片标本 待观察的区域上,将油镜头转至工作位置, 眼睛从侧面注视,转动粗调焦螺旋,直至油 镜头浸没于香柏油内,几乎与载玻片相接触, 但不能相碰。然后从目镜中观察,用粗调焦 螺旋极其缓慢地向上调节至出现物像为止, ★注意勿将粗调焦螺旋转动方向搞反了,以 免油镜头与载玻片相碰而损坏了镜头及玻片。 再用细调焦螺旋调至物像清晰,此时还应适 当增加光的亮度。
四. 上皮组织的观察
单层扁平上皮光镜图 (表面观;肠系膜铺片,镀银染色)
单层扁平上皮(肾小囊壁层)
单层扁平上皮(血管内皮)
单层立方上皮(甲状腺)
单层立方上皮(↑肾小管)
单层柱状上皮模式图
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实验一显微镜的构造及使用方法
一、目的要求
1.了解显微镜的构造、性能及成像原理。
2.掌握显微镜的正确适用及维护方法。
二、实验器材
1.显微镜、纱布、绸布
2.酵母菌示教标本
三、普通光学显微镜简介
微生物的最显著的特点就是个体微小,必须借助显微镜才能观察到它们的个体形态和细胞结构。
熟悉显微镜并掌握其操作技术是研究微生物不可缺少的手段。
显微镜可分为电子显微镜和光学显微镜两大类。
光学显微镜包括:明视野显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、偏光显微镜、荧光显微镜、立体显微镜等。
其中明视野显微镜为最常用普通光学显微镜,其它显微镜都是在此基础上发展而来的,基本结构相同,只是在某些部分作了一些改变。
明视野显微镜简称显微镜。
(一)显微镜的构造
普通光学显微镜的构造可以分为机械和光学系统两大部分。
图1-1 显微镜构造
1.目镜
2.镜筒
3. 转换器
4. 物镜
5. 载物台
6. 聚光器
7. 虹彩光圈
8. 聚光镜调节钮9.反光镜10. 底座11. 镜臂12. 标本片移动钮
13. 细调焦旋钮14. 粗调焦旋钮15.电源开关16.光亮调节钮17.光源
1.机械系统:
(1)镜座Base:在显微镜的底部,呈马蹄形、长方形、三角形等。
(2)镜臂Arm:连接镜座和镜筒之间的部分,呈圆弧形,作为移动显微镜时的握持部分。
(3)镜筒Tube:位于镜臂上端的空心圆筒,是光线的通道。
镜筒的上端可插入接目镜,下面可与转换器相连接。
镜筒的长度一般为160mm。
显微镜分为直筒式和斜筒式;
有单筒式的,也有双筒式的。
(4)旋转器Nosepiece:位于镜筒下端,是一个可以旋转的圆盘。
有3~4个孔,用于安
装不同放大倍数的接物镜。
(5) 载物台Stage :是支持被检标本的平台,呈方形或圆形。
中央有孔可透过光线,台
上有用来固定标本的夹子和标本移动器。
(6) 调焦旋钮:包括粗调焦钮Coarse adjustment knob 和细调焦钮Fine adjustment knob ,
是调节载物台或镜筒上下移动的装置。
2. 光学系统
(1) 接物镜Objective lens ,常称为镜头,简称物镜,是显微镜中最重要的部分,由许多
块透镜组成。
其作用是将标本上的待检物进行放大,形成一个倒立的实像,一般显微镜有3~4和物镜,根据使用方法的差异可分为干燥系和油浸系两组。
干燥系物镜包括低倍物镜(4~10x )和高倍物镜(40~45x ),使用时物镜与标本之间的介质是空气;油浸系物镜(90~100x )在使用时,物镜与标本之间加有一种折射率与玻璃折射率几乎相等的油类物质(香柏油)作为介质。
(2) 接目镜Eyepiece lens :通常称为目镜,一般由2~3块透镜组成。
其作用将由物镜所
形成的实像进一步放大,并形成虚像而印入眼帘。
一般显微镜的标准目镜是10x 。
(3) 聚光镜Condenser :位于载物台的下方,由两个或几个透镜组成,其作用是将由光源
来的光线聚成一个锥形光拄。
聚光镜可以通过位于载物台下方的聚光镜调节旋钮进行上下调节,以求得最适光度。
聚光器还俯有虹彩光圈(Iris diapHragm ),此调节锥形光拄的角度和大小,以控制进入物镜的光的量。
(4) 反光镜:反光镜是一个双面镜,一面是平面,另一面是凹面,起着把外来光线变成
平行光线进入聚光镜的作用。
使用内光源的显微镜就无需反光镜。
(5) 光源:日光和灯光均可,以日光较好,其光色和光强都比较容易控制,有的显微镜
采用装在底座内的内光源。
(二)显微镜的成像原理
显微镜的放大作用是由物镜和目镜共同完成的。
标本经物镜放大后,在目镜的焦平面上形成一个倒立实像,再经目镜进一步放大形成一个虚像,被人眼所观察到(图1-3)。
在油镜系中,载玻片与镜头之间多用香柏油作介质。
因香柏油的折射率(n=1.51)与玻璃的折射率(n=1.52)几乎相等,故透过载玻片的光线通过香柏油后,直接进入物镜,而不发生折射。
两组物镜光线通路的区别如图1-4所示
图1-2 物镜的各种标记 1——放大倍数
2——数值口径
3——镜筒长度要求
4——指定盖玻片厚度
图1-3 显微镜成像原理 图1-4物镜光线通路 (三)显微镜的性能
1. 分辨率和数值口径
衡量显微镜性能好坏的指标主要是显微镜的分辨率,显微镜的分辨率(Resolving power )是指显微镜将样品上相互接近的两点清晰分辨出来的能力。
它主要取决于物镜的分辨能力,物镜的分辨力是所用光的波长和物镜数值口径的函数。
分辨率用镜头所能分辨出的两点间的最小距离表示,距离越小,分辨能力越好。
可用公式表示:
A
N D .21λ= 物镜的数值口径(Numberical aperture ),简写为(N.A ):表示从聚光镜发出的锥形光柱照射在观察标本上,能被物镜所聚集的量。
可用公式表示:
θsin .n A N =
n ——标本和物镜之间介质的折射率
θ——由光源投射到透镜上的光线和光轴之间的最大夹角
光线投射到物镜的角度越大,数值口径就越大。
如果采用一些高折射率的物质作介质,如使用油镜时采用香柏油作介质,则数值口径增大,从而提高分辩能力。
物镜镜筒上标有数值口径,低倍镜为0.25,高倍镜为0.65,油浸镜为1.25。
这些数值是在其它条件都适宜的情况下的最高值,实际使用时,往往低于所标的值。
2. 放大倍数、焦距和工作距离
显微镜的放大倍数是物镜和目镜放大倍数的乘积。
放大倍数一样时,由于目镜和物镜搭配不同,其分辨率也不同。
一般来说,增加放大倍数应该是尽量用放大倍数高的物镜。
物镜的放大倍数越大,焦距越短,物镜和样品之间的距离(工作距离)便越短。
(四)显微镜的使用指南
1. 观察前的准备:
显微镜的安置:取放显微镜时应一手握住镜臂、一手托住底座,使显微镜保持直立、平稳。
置显微镜于平整的实验台上,镜座距实验台边缘3~4cm 。
镜检时姿势要端正。
接通电源,根据所用物镜的放大倍数,调节光亮度调节钮、调节虹彩光圈的大小,使视野内的光线均匀、亮度适宜。
2. 显微观察:
(1)接通电源,采用白炽灯为光源时,应在聚光镜下加一蓝色的滤色片,除去黄光。
一般情况下,对于初学者,进行显微观察时应遵从低倍镜到高倍镜再到油浸镜的观察程序,因为低倍镜视野较大,易发现目标及确定检查的位置。
(2)低倍镜观察,将做好的酵母标本片固定在载物台上,用标本夹夹住,移动推进器
使观察对象处在物镜的正下放。
旋转旋转器,将10x物镜调至光路中央。
旋转粗调焦钮将载物台升起,从侧面注视小心调节物镜接近标本片,然后用目镜观察,慢慢降载物台,使标本在视野中初步聚焦,再使用细调节钮调节图像清晰。
通过玻片夹推进器慢慢移动玻片,认真观察标本个部位,找到合适的目的物,仔细观察并记录所观察的结果。
调焦时只应降载物台,以免一时的误操作而损坏镜头。
注意无论使用单筒显微镜或双筒显微镜均应双眼同时睁开观察,以减少眼睛的疲劳,也便于边观察边绘图记录。
(3)高倍镜观察,在低倍镜下找到合适的观察目标并将其移至视野中心,轻轻转动物镜转换器将高倍镜移至工作位置。
对聚光镜光圈及视野亮度进行适当调节后微调细调节钮使物像清晰,仔细观察并记录。
如果,高倍镜和低倍镜不同焦,则按照低倍镜的调焦方法从新调节焦距。
(4)油浸镜观察,在高倍镜或低倍镜下找到要观察的样品区域,用粗调焦钮先降载物台,然后将油镜转到工作位置。
在待观察的样品区域加一滴香柏油,从侧面注视,用粗调节钮将载物台小心地上升,使油浸镜浸在香柏油并几乎与标本片相接。
将聚光镜升至最高位置并开足光圈。
慢慢地降载物台至视野中出现清晰图像为止,仔细观察并作记录。
3. 显微镜的维护:
(1)观察结束后,先降载物台,取下载玻片。
(2)用擦镜纸分别擦拭物镜和目镜。
(3)用擦镜纸拭去镜头上的油,然后用擦镜纸蘸少许二甲苯擦去镜头上残留的油迹,最后再用干净的擦镜纸擦去残留的二甲苯。
(4)清洁显微镜的金属部件。
(5)将各部分还原,将物镜转成“八”字形,同时把聚光镜降下,以免物镜和聚光镜发生碰撞危险。
(6)把显微镜放回原处。
四、实验报告
1.根据讲义报告,对照实物,熟悉显微镜的构造。
2.按显微镜的使用方法,分别用低倍镜和高倍镜对酵母细胞示教标本进行观察。
3.哪个物镜的工作距离最短?
4.有哪些部件可以调节视野中光的强弱?
5.有哪些方法可以提高显微镜的分辨率?
6.为什么在用高倍镜和油镜观察标本之前要先用低倍镜进行观察。