微生物 常用培养基介绍
培养基制备
培养基制备一、概述培养基是生物实验中必不可缺的基础设施，它为微生物、细胞等生物种群的繁殖和生长提供了必要的营养物质。
本文将介绍常用的培养基配方和制备方法，以及如何根据中国国情进行优化。
二、常用培养基1.大肠杆菌培养基（LB）配方：10克蛋白胨、5克酵母提取物、10克氯化钠、加水至1L。
特点：优点是制备方便、易于培养，多数菌株生长良好。
缺点是含有大量营养物质，若用于长期贮存菌株，容易导致突变风险增加。
2.液体麦康凯发酵培养基（BHI）配方：将500克肉汤蛋白胨培养基、10克氯化钠、2克二氢磷酸氢二钠、2克葡萄糖溶解在1L蒸馏水中。
特点：适合多种微生物的生长，包括厌氧微生物。
BHI较LB富含营养物质，可提供较好的生长环境，适合繁殖菌株。
3.青霉素酸糖盐地衣芽孢杆菌培养基（PDA）配方：20克琼脂、4克葡萄糖、0.75克潮霉素、0.125克青霉素钾盐、0.05克维生素B1、加水至1L。
特点：适用于分离和培养种类繁多的真菌、放线菌等微生物，能有效地防止杂菌的污染。
三、优化培养基由于中国的气候、温度等环境条件与西方国家有所不同，因此需要进行针对性的优化，以满足不同微生物的生长需求。
1.调整pH值许多微生物生存和生长所需的pH值范围在7.0-7.5之间。
但是，我们在制备培养基时应从当地水质的酸碱性入手，适当调整pH值，以便营养物质的有效吸收。
2.添加一些特殊成分在中国有些地区，水质有问题，例如含有高浓度的重金属和有机物污染，这些都会影响微生物的生长和繁殖。
因此，在制备培养基时，要添加些许抗菌剂和抗氧化剂，保证培养环境的纯净度和稳定性。
3.注意制备温度对于不同的菌株，其适宜的生长温度也有所不同。
在制备培养基时，应根据菌株的特点，以及所处的生态环境，调整制备温度，将传统的37度下的浸渍式消毒改为高温滤器灭菌法，避免纳米材料产生自拍。
四、结论在国内微生物学、生物医学和生物工程研究领域中，培养基是至关重要的实验基础设施。
微生物-常用培养基介绍
• 供分离葡萄球菌或其他营养要求较高的细菌及进行培养、鉴定
9
α溶血、β溶血、γ溶血
10
肺炎链球菌在血平板上的生长
11
化脓性链球菌在血平板上的生长
12
金黄色葡萄球菌的β 溶血
13
化脓性链球菌的β 溶血
14
溶血
1 PB0123A/F 2 PO0480B
哥伦比亚血平板 胰蛋白胨大豆琼脂平板（三层无菌包装、辐照）
3
4
PO0155A
PO8060A
营养琼脂平板
玫红酸中国蓝乳糖琼脂平板 万古霉素巧克力琼脂平板
5 PB8001A/F 6 PO0152A 7 8 PO0262D PO0479D
MH平板
胰蛋白胨大豆琼脂接触平板（三层无菌包装、辐照） 卵磷脂吐温胰蛋白胨大豆琼脂接触平板(三层无菌包装、辐照）
乳糖（－）：无色或浅褐色菌落
24
SS琼脂平板
• PO5022A 90mmX10 PO5022F 70mmX10 • 分离沙门氏、志贺氏菌属细菌
• 强选择性培养基 • 沙门氏、志贺氏半透明菌落 • 大肠杆菌呈红色菌落
• 产硫化氢的菌属可形成黑色中心 • 避光保存
25
中国蓝琼脂平板
• PO8060A 90mmX10 PO8060F 70mmX10 • 弱选择性培养基 ，抑制阳性球菌的生长
7
血琼脂平板
• 均匀红色，无斑点，无裂纹，无血和纤维凝块 • 供分离葡萄球菌或其他营养要求较高的细菌及进行培养、鉴定 • 传代培养
• 观察溶血 α溶血、β溶血、γ溶血
• 卫星试验 • CAMP试验
微生物培养基及其成分介绍
微生物培养基及其成分介绍培养基通常指人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养物质。
广义上说，凡是支持微生物生长和繁殖的介质或材料均可以作为微生物的培养基。
培养基的种类繁多，因考虑的角度不同，可将培养基分成以下一些类型：天然培养基：利用生物组织、器官及其抽取物或制品配成；根据对培养基成分了解的程度合成培养基：使用成分完全了解的化学药品配制而成；半合成培养基：由部分天然材料和部分已知的纯化学药品组成液体培养基：各营养成分按一定比例配制而成的水溶液或液体状态的培养基；根据培养基物理状态固体培养基：液体培养基中加入一定量的凝固剂配制而成的固体状态的培养基；半固体培养基：琼脂加入量为0.2%-0.5%而配制的固体状态的培养基；种子培养基：适合微生物菌体生长的培养基；培养基根据培养的目的发酵培养基：用于生产预定发酵产物的培养基；繁殖培养基：主要用于菌种保藏，大部分情况下就是斜面培养基；保藏培养基：主要用于菌种保藏，大部分情况下就是斜面培养基；基本培养基：能满足某菌种的野生型菌株最低营养要求的合成培养基；加富培养基：在普通培养基中加入血、血清、动（植）物组织液或其他营养物质（或生长因子）；选择培养基：根据某种或某类微生物的特殊营养要求，或对某些物理、化学条件的抗性而设计的培养基；根据培养基的特殊用途鉴别培养基：在培养基中添加某种或某些化学试剂后，某种微生物生长过程中产生的特殊代谢产物会与加入的这些化学物反应，并出现明显的特征性变化，从而使其与其他微生物区别开来；测定生理生化特性的培养基：鉴定微生物时，为了观察微生物的培养特征或测定生理生化反应而采用的培养基；税则品目3821项下制成的微生物培养基包括能为细菌、真菌、病原菌、病毒及其他微生物提供营养及繁殖条件的各类制剂，通常是用肉汁、鲜血或血清、蛋、土豆、藻酸盐、琼脂、胨、明胶等配制而得的，但不包括未制成培养基的产品。
现介绍几种常见的配制培养基用的物质及其归类。
微生物学实验常用培养基的
牛肉膏蛋白胨培养基（培养细菌用）121℃灭菌20min。
2、高氏（Gause）1号培养基（培养放线菌用）配制时，先用少量冷水将淀粉调成糊状，倒入煮沸的水中，在火上加热，边搅拌边加入其他成分，溶化后，补足水分至1000mL。
121℃灭菌20min。
3、查氏（Czapek）培养基（培养霉菌用）121℃灭菌20min。
4、马丁氏（Martin）琼脂培养基（分离真菌用）112℃灭菌30min。
临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL，使每毫升培养基中含链霉素30μg。
5、马铃薯培养基（简称PDA）（培养真菌用）培养基的配制：马铃薯去皮，切成块煮沸30min，然后用纱布过滤，再加糖及琼脂，熔化后补足水至1000mL。
121℃灭菌30min。
6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制：(1)、取大麦或小麦若干，用水洗净，浸水6—12小时，至15℃阴暗处发芽，上面盖纱布一块，每日早、中、晚淋水一次，麦根伸长至麦粒的两倍时，即停止发芽，摊开晒干或烘干，贮存备用。
(2)、将干麦芽磨碎，一份麦芽加四份水，在65℃水浴中糖化3—4小时，糖化程度可用碘滴定之。
加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤，滤液如混浊不清，可用鸡蛋白澄清，方法是将一个鸡蛋白加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(4)、将滤液稀释到5—6波美度，pH约6.4，加入2%琼脂即成。
121℃灭菌30min。
7、无氮培养基（自生固氮菌、钾细菌）113℃灭菌30min。
8、半固体肉膏蛋白胨培养基121℃灭菌20min。
9、合成培养基加12 mL0.04%的溴钾酚紫（pH5.2—6.8，颜色由黄变紫，作指示剂）。
121℃灭菌20min。
10、豆芽汁蔗糖（或葡萄糖）培养基培养基的配制：称新鲜豆芽100g，放入烧杯中，加入水1000mL，煮沸约30min，用纱布过滤。
用水补足原量，再加入蔗糖（或葡萄糖）50g，煮沸熔化。
几种常见培养基作用
几种常见培养基作用培养基是细菌学和微生物学实验的基础，用于培养、繁殖和研究细菌和其他微生物。
不同的培养基具有不同的特性和作用。
下面将介绍几种常见的培养基及其作用：1.营养琼脂基本培养基：这是最常用的培养基之一，它提供了细菌生长所需的各种营养物质，包括碳源、氮源、矿物质和维生素。
该培养基能够满足细菌的基本营养需求，促进其繁殖和生长。
2.差异性培养基：差异性培养基的作用是区分不同细菌的生长和代谢特点。
例如，大肠杆菌选择性培养基能够抑制其他菌群的生长，只允许大肠杆菌生长，从而帮助鉴定和分离大肠杆菌。
3.选择性培养基：选择性培养基的作用是选择性地培养其中一类细菌。
根据细菌对不同抑制剂和抗生素的敏感性，可以选择性地促进或抑制一些细菌的生长。
例如，巴氏杆菌选择性培养基会抑制大多数菌群的生长，只允许巴氏杆菌生长。
4.富集培养基：富集培养基的作用是加强其中一类细菌的生长。
富集培养基通常会包含一些特定成分，如特定营养物质或抗生素，以促使目标菌株的繁殖。
例如，革兰氏阳性杆菌富集培养基中含有高浓度的碳源和氮源，有助于改善革兰氏阳性杆菌的生长。
5.不含营养物质的培养基：不含营养物质的培养基还被称为无机培养基或基本盐蔗糖培养基(BSC)。
这种培养基只提供细菌生长所需的无机物质和一定浓度的蔗糖，不含有机营养物质。
这种培养基的作用是用于检测细菌对不同抗生素和化合物的敏感性，从而为抗生素临床应用提供参考。
6.非选择性培养基：非选择性培养基是一种通用的培养基，适用于不同种类的细菌。
它提供了细菌生长所需的各种营养物质，并不含有可能抑制菌群向生长的物质。
这种培养基通常用于分离和纯化未知细菌，以便进一步研究其特性和功能。
7.复合培养基：复合培养基是由多种不同成分组成的培养基，包括富集培养基、选择性培养基和差异性培养基等。
复合培养基的作用是兼顾多种细菌的营养需求和特性，为细菌的培养和研究提供全面的支持和条件。
总结起来，不同的培养基具有不同的作用，能够满足细菌的基本营养需求、区分不同细菌的生长和代谢特点、选择性地培养或抑制一些细菌、加强其中一类细菌的生长，或用于检测细菌对抗生素和化合物的敏感性。
常用培养基配方范文
常用培养基配方范文培养基是为了满足微生物的生长和繁殖需要而制备的特定组分的物质。
不同的微生物对培养基的组分有不同的要求，因此有一系列常用的培养基配方。
下面介绍几种常用的培养基配方。
1.营养琼脂培养基营养琼脂培养基是最常用的培养基之一，可以满足大多数微生物的生长需求。
其基本配方如下：-蛋白胨：5g-酵母粉：2.5g-琼脂：15g-蒸馏水：1000mL将蛋白胨、酵母粉和琼脂加入蒸馏水中，加热溶解，然后加热熔化琼脂，混合均匀后倒入培养皿中，待凝固后即可使用。
2.大肠杆菌富集培养基大肠杆菌是一种常见的肠道细菌，在微生物学实验中经常使用。
它具有良好的生长能力，但在培养基中易受到其他菌群的竞争。
因此，需要使用富集培养基来选择性地培养大肠杆菌。
其基本配方如下：-脱水牛肉粉：10g-酵母提取物：5g-氯化钠：5g-蒸馏水：1000mL将脱水牛肉粉、酵母提取物、氯化钠加入蒸馏水中，加热溶解后加入琼脂，混合均匀后倒入培养皿中，待凝固后即可使用。
3.血平板培养基血平板培养基用于检测细菌对血液的溶血能力以及细菌的形态特征。
其基本配方如下：-马肉膏：6g-鸡蛋膏：5g-硫酸镁：0.5g-酚红指示剂：0.025g-蒸馏水：1000mL将马肉膏、鸡蛋膏、硫酸镁加入蒸馏水中，加热溶解后加入酚红指示剂，混合均匀后倒入培养皿中，待凝固后用刀或针在培养基上划线，然后点菌于线上即可使用。
4. Sabouraud葡萄糖琼脂培养基Sabouraud葡萄糖琼脂培养基是一种选择性培养基，常用于真菌的培养。
其基本配方如下：-葡萄糖：40g-氯化钠：10g-氯仿：0.1mL-青霉素：0.1g-琼脂：15g-蒸馏水：1000mL将葡萄糖、氯化钠、硫酸镁加入蒸馏水中，加热溶解后加入氯仿和青霉素，混合均匀后加热熔化琼脂，在冷却至40-45℃时倒入培养皿中，待凝固后即可使用。
以上是一些常用的培养基配方，不同微生物可能有不同的培养基要求，所以在实际应用中还需要根据具体情况进行调整和优化。
微生物培养基的分类和用途
微生物培养基的分类和用途1.按照培养基的成分来分培养基按其成分可分为三种:合成培养基、天然培养基和半合成培养基。
（1）合成培养基。
合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。
这种培养基的化学成分清楚，组成成分精确，重复性强，但价格较贵，而且微生物在这类培养基中生长较慢。
如高氏一号合成培养基、察氏（czapek）培养基等。
(2)天然培养基。
由天然物质制成，如蒸土豆和普通牛肉汤，前者用来培养霉菌，后者用来培养细菌。
这种培养基的化学成分不稳定，难以确定，但配制简单，营养丰富，所以经常使用。
(3)半合成培养基。
在天然有机物的基础上，适当添加成分已知的无机盐，或者在合成培养基的基础上添加一些天然成分，如用于霉菌培养的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。
这种培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需求。
2.按照培养基的物理状态分根据其物理状态，介质可分为三种:固体介质、液体介质和半固体介质。
(1)固体培养基。
培养基中加入凝结剂，如琼脂、明胶和硅胶。
固体培养基常用于微生物的分离、鉴定、计数和菌种保藏。
(2)液体培养基。
液体培养基中不添加凝固剂。
这种培养基成分均匀，微生物能充分接触和利用培养基中的营养物质，适合于生理研究。
因其发酵率高，操作方便，也常用于发酵工业。
(3)半固体培养基。
它是在液体培养基中加入少量凝固剂而成的半固态。
它可以用来观察细菌的运动，鉴定菌株和确定噬菌体的滴度。
3.根据微生物的种类，培养基可分为四种:细菌培养基、放线菌培养基、酵母培养基和霉菌培养基。
常用的细菌培养基包括营养肉汤和营养琼脂培养基；放线菌常用的培养基是高氏1号培养基；常用的酵母培养基包括马铃薯蔗糖培养基和麦芽汁培养基；常用的霉菌培养基有马铃薯蔗糖培养基、豆芽汁葡萄糖(或蔗糖)琼脂培养基和Chaz氏培养基等。
4.按照培养基用途分根据其特殊用途，培养基可分为富集培养基、选择性培养基和分化培养基。
(1)丰富培养基。
就是在培养基中加入血液、血清、动植物组织提取物，培养一些要求严格的微生物。
培养基的分类与用途
培养基的分类与用途培养基是微生物学研究中常用的一种实验工具，它是一种含有特定成分的液体或固体介质，提供给微生物生长和繁殖所需的营养物质。
根据其组分和用途的不同，培养基可以分为多种类型。
下面将介绍培养基的分类和常用的用途。
1. 培养基的分类培养基的分类可以按照多种不同的标准进行，比如成分、形态、用途等。
以下是按照成分和形态进行分类的几种常见的培养基：（1）按照成分分类根据培养基中是否包含肉汤、胨、蛋白胨等动物组织或其提取物，可以将培养基分为以下几类：a. 肉汤培养基：含有肉汤的培养基，通常用于检测细菌的生长和鉴定不同菌株。
b. 蛋白胨培养基：含有胨的培养基，适用于一般微生物的培养。
c. 血培养基：含有鲜血的培养基，适用于血液相关病原微生物的培养。
d. 偶氮染料培养基：含有偶氮染料的培养基，利用微生物对染料的反应进行鉴定。
（2）按照形态分类根据培养基的形态，可以将其分为以下几类：a. 液体培养基：呈液体状的培养基，适用于微生物的产生大量菌体和代谢产物。
b. 固体培养基：呈固体状的培养基，通常添加琼脂或琼脂糖等，用于微生物的分离和鉴定。
c. 半固体培养基：介于液体培养基和固体培养基之间的培养基，适用于微生物的细胞运动和分泌物的分析。
2. 培养基的用途培养基的用途非常广泛，不同类型的培养基可以满足不同的实验需求。
以下是一些常见的用途：（1）微生物生长和繁殖培养基最基本的用途就是提供微生物生长和繁殖所需的营养物质。
通过调节培养基成分的添加量和种类，可以促进特定微生物的生长，培养大量的菌体，以便进行后续实验。
（2）微生物鉴定和鉴定菌种不同微生物对培养基的成分和条件有不同的生长要求，利用这一特点，可以通过不同培养基来鉴定和鉴定微生物。
例如，利用含有某种特定营养物质的培养基，可以鉴定某些微生物对该物质的利用能力，从而判断其菌株特性。
（3）微生物菌落的形成和分离固体培养基可以使微生物生长为可见的菌落。
通过培养基的配方和形态，可以促进微生物在培养皿上形成单独的菌落，使其易于观察和分离。
常用微生物培养基配方大全
常用培养基配方01 糖发酵管成分:牛肉膏5g蛋白胨10g氯化钠3g磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O) 2g0.2%滇麝香草酚蓝溶液12mL蒸馏水1000mLpH7.4制法:1葡萄糖发酵管按上述成分配好后,按0.5%加入葡萄糖,分装于有一个倒置小管的小试管内,121℃高压灭菌1 5min.2其他各种糖发酵管可按上述成分配好后,分装每瓶100mL,121℃高压灭菌15min.另将各种糖类分别配好1 0%溶液,同时高压灭菌.将5mL糖溶液加入于100mL培养基内,以无菌操作分装小试管.注:蔗糖不纯,加热后会自行水解者,应采用过滤法除菌.试验方法:从琼脂斜面上挑取小量培养物接种,于36℃±1℃培养,一般观察2～3d.迟缓反应需观察14～30d.02 ONPG培养基成分:邻硝基酚β-D-半乳糖昔(ONPG) 60mg(O-Nitrophenyl-β-D-galactopyranoside)0.01mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5) 10mL1%蛋白胨水(PH7.5) 30mL制法:将ONPG溶于缓冲液内,加入蛋白胨水,以过滤法除菌,分装于10mm×75mm试管,每管0.5mL,用橡皮塞塞紧.试验方法:自琼脂斜面上挑取培养物1满环接种,于36±1℃培养1～3h和24h观察结果.如果β-半乳糖苷酶产生,则于1～3h变黄色,如无此酶则24h不变色.03 西蒙氏柠檬酸盐培养基成分:氯化钠5g硫酸镁(MgSO4·7H2O) 0.2g磷酸二氢铵1g磷酸氢二钾1g柠檬酸钠5g琼脂20g蒸馏水1000mL0.2%溴麝香草酚蓝溶液40mLpH6.8制法:先将盐类溶解于水内,校正pH,再加琼脂,加热溶化.然后加入指示剂,混合均匀后分装试管,121℃高压灭菌15min.放成斜面.试验方法:挑取少量琼脂培养物接种,于36±1℃培养4d,每天观察结果.阳性者斜面上有菌落生长,培养基从绿色转为蓝色.04 缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR和VP试验用)成分:磷酸氢二钾5g多胨7g葡萄糖5g蒸馏水1000mLpH7.0制法:溶化后校正pH,分装试管,每管1mL,121℃高压灭菌15min.甲基红(MR)试验:自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中,于36±1℃培养2～5d,哈夫尼亚菌则应在22～25℃培养.滴加甲基红试剂一滴,立即观察结果.鲜红色为阳性,黄色为阴性.甲基红试剂配法:10mg甲基红溶于30mL95%乙醇中,然后加入20mL蒸馏水.V-P试验:用琼脂培养物接种本培养基中,于36±1℃培养2～4d.哈夫尼亚菌则应在22～25℃培养.加入6%α-萘酚-乙醇溶液0.5mL和40%氢氧化钾溶液0.2mL,充分振摇试管,观察结果.阳性反应立刻或于数分钟内出现红色,如为阴性,应放在36±1℃下培养4h再进行观察.05克氏柠檬酸盐培养基成分:柠檬酸钠3g葡萄糖0.2g酵母浸膏0.5g单盐酸半胱氨酸0.1g磷酸二氢钾1g氯化钠5g0.2%酚红溶液6mL琼脂15g蒸馏水1000mL制法:加热溶解,分装试管,121℃高压灭菌15min.放成斜面.试验方法:用琼脂培养物接种整个斜面,在36±1℃培养7d,每天观察结果.阳性者培养基变为红色.06 丙二酸钠培养基成分:酵母浸膏1g硫酸铵2g磷酸氢二钾0.6g磷酸二氢钾0.4g氯化钠2g丙二酸钠3g0.2%溴麝香草酚蓝溶液12mL蒸馏水1000mLpH6.8制法:先将酵母浸膏和盐类溶解于水,校正pH后再加入指示剂,分装试管,121℃高压灭菌15min.试验方法:用新鲜的琼脂培养物接种,于36±1℃培养48h,观察结果.阳性者由绿色变为蓝色.07 葡葡糖铵培养基成分:氯化钠5g硫酸镁(MgSO4·7H2O) 0.2g磷酸二氢铵1g磷酸氢二钾1g葡萄糖2g琼脂20g蒸馏水1000mL0.2%溴麝香草酚蓝溶液40mLpH6.8制法:先将盐类和糖溶解于水内,校正pH,再加琼脂,加热溶化,然后加入指示剂,混合均匀后分装试管,121℃高压灭菌15min,放成斜面.试验方法:用接种针轻轻触及培养物的表面,在盐水管内做成极稀的悬液,肉眼观察不见混浊,以每一接种环内含菌数在20～100之间为宜.将接种环灭菌后挑取菌液接种,同时再以同法接种普通斜面一支作为对照.于36±1℃培养24h.阳性者葡萄糖铵斜面上有正常大小的菌落生长;阴性者不生长,但在对照培养基上生长良好.如在葡萄糖铵斜面生长极微小的菌落可视为阴性结果.注:容器使用前应用清洁液浸泡.再用清水,蒸馏水冲洗干净,并用新棉花做成棉塞,干热灭菌后使用.如果操作时不注意,有杂质污染时,易造成假阳性的结果.08 Hugh-Leifson培养基(O/F试验用)成分:蛋白胨2g氯化钠5g磷酸氢二钾0.3g琼脂4g葡萄糖10g0.2%溴麝香草酚蓝溶液12mL蒸馏水1000mLpH7.2制法:将蛋白胨和盐类加水溶解后,校正pH至7.2.加入葡萄糖,琼脂煮沸,溶化琼脂,然后加入指示剂.混匀后,分装试管,121℃高压灭菌15min,直立凝固备用.试验方法:从斜面上挑取小量培养物作穿刺接种,同时接种两支培养基,其中一支于接种后滴加溶化的1%琼脂液于表面,高度约1cm,于36±1℃培养.09 马尿酸钠培养基成分:马尿酸钠1g肉浸液100mL制法:将马尿酸钠溶解于肉浸液内,分装于小试管内,并于管壁画一横线.以标志管内液面高度,高压灭菌121℃20min.试剂:三氯化铁(FeCl3·6H2O)12g,溶于2%盐酸溶液100mL中即成.试验方法:用纯培养物接种,于42℃培养48h,观察培养液是否到达试管壁上记号处,如不足时,用蒸馏水补足至原量.经离心沉淀,吸取上清液0.8mL,加入三氯化铁试剂0.2mL,立即混合均匀,经10～15min,观察结果.结果:出现恒久之沉淀物为阳性.10营养明胶成分:蛋白胨5g牛肉膏3g明胶120g蒸馏水1000mLpH6.8～7.0制法:加热溶解,校正至pH7.4～7.6,分装小管,121℃高压灭菌10min,取出后迅速冷却,使其凝固.复查最终pH 应为6.8～7.0.试验方法:用琼脂培养物穿刺接种,放在22～25℃培养,每天观察结果,记录液化时间.或放在36士1℃培养,每天取出,放冰箱内30min后再观察结果.11苯丙氨酸培养基成分:酵母浸膏3gDI-苯丙氨酸(或L-苯丙氨酸1g) 2g磷酸氢二钠1g氯化钠5g琼脂12g蒸馏水1000mL制法:加热溶解后分装试管,121℃高压灭菌15min,使成斜面.试验方法:自琼脂斜面上挑取大量培养物,移种于苯丙氨酸琼脂,在36±1℃培养4h或18～24h.滴加10%三氯化铁溶液2～3滴,自斜面培养物上流下,苯丙氨酸脱氨酶阳性者呈深绿色.12 氨基酸脱羧酶试验培养基成分:蛋白胨5g酵母浸膏3g葡萄糖1g蒸馏水1000mL1.6%滇甲酚紫-乙醇溶液1mLL-氨基酸或DL-氨基酸0.5或1g/100mLpH6.8制法:除氨基酸以外的成分加热溶解后,分装每瓶100mL,分别加入各种氨基酸:赖氨酸,精氨酸和鸟氨酸.L-氨基酸按0.5%加入,DL-氨基酸按1%加入.再行校正pH至6.8.对照培养基不加氨基酸.分装于灭菌的小试管内,每管0.5mL,上面滴加一层液体石蜡,115℃高压灭菌10min.试验方法:从琼脂斜面上挑取培养物接种,于36±1℃培养18～24h,观察结果.氨基酸脱羧酶阳性者由于产碱,培养基应呈紫色.阴性者无碱性产物,但因葡萄糖产酸而使培养基变为黄色.对照管应为黄色.13蛋白胨水(靛基质试验用)成分:蛋白胨(或胰蛋白胨) 20g氯化钠5g蒸馏水1000mLpH7.4制法:按上述成分配制,分装小试管,121℃高压灭菌15min.靛基质试剂柯凡克试剂:将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中.然后缓慢加入浓盐酸25mL.欧-波试剂:将1g对二甲氨基苯甲醛溶解于95mL95%乙醇内.然后缓慢加入浓盐酸20mL.试验方法:挑取小量培养物接种,在36±1℃培养1～2d,必要时可培养4～5d.加入柯凡克试剂约0.5mL,轻摇试管,阳性者于试剂层呈深红色;或加入欧-波试剂约0.5mL,沿管壁流下,覆盖于培养液表面,阳性者于液面接触处呈玫瑰红色.注:蛋白胨中应含有丰富的色氨酸.每批蛋白胨买来后,应先用已知菌种鉴定后方可使用.14 硫酸亚铁琼脂(硫化氢试验用)成分:牛肉膏3g酵母浸膏3g蛋白胨10g硫酸亚铁0.2g硫代硫酸钠0.3g氯化钠5g琼脂12g蒸馏水1000mLpH7.4制法:加热溶解,校正pH,分装试管,115℃高压灭菌15min,取出直立候其凝固.试验方法:挑取琼脂培养物,沿管壁穿刺,于36±1℃培养1～2d,观察结果.产硫化氢者使培养基变为黑色.注:肠杆菌科细菌测定硫化氢的产生,应采用三糖铁琼脂或本培养基.15 尿素琼脂成分:蛋白胨1g氯化钠5g葡萄糖1g磷酸二氢钾2g0.4%酚红溶液3mL琼脂20g蒸馏水1000mL20%尿素溶液100mLpH7.2±0.1制法:将除尿素和琼脂以外的成分配好,并校正pH,加入琼脂,加热溶化并分装烧瓶.121℃高压灭菌15min.冷至50～55℃,加入经除菌过滤的尿素溶液.尿素的最终浓度为2%,最终pH应为7.2±0.1.分装于灭菌试管内,放成斜面备用.试验方法:挑取琼脂培养物接种,在36±1℃培养24h,观察结果.尿素酶阳性者由于产碱而使培养基变为红色.16 氰化钾(KCN)培养基成分:蛋白胨10g氯化钠5g磷酸二氢钾0.225g磷酸氢二钠 5.64g蒸馏水1000mL0.5%氰化钾溶液20mLpH7.6制法:将除氰化钾以外的成分配好后分装烧瓶,121℃高压灭菌15min.放在冰箱内使其充分冷却.每100mL培养基加入0.5%氰化钾溶液2.0mL(最后浓度为1:10000),分装于12mm×100mm灭菌试管,每管约4mL,立刻用灭菌橡皮塞塞紧,放在4℃冰箱内,至少可保存两个月.同时,将不加氰化钾的培养基作为对照培养基,分装试管备用.17 氧化酶试验试剂:1%盐酸二甲基对苯二胺溶液:少量新鲜配制,干冰箱内避光保存.1%α-萘酚-乙醇溶液.试验方法:取白色洁净滤纸沾取菌落.加盐酸二甲基对苯二胺溶液一滴,阳性者呈现粉红色,并逐渐加深;再加α-萘酚溶液一滴,阳性者于半分钟内呈现鲜蓝色.阴性于两分钟内不变色.以毛细吸管吸取试剂,直接滴加于菌落上,其显色反应与以上相同.18 硝酸盐培养基成分:硝酸钾0.2g蛋白5g蒸馏水1000mLpH7.4制法:溶解,校正pH,分装试管,每管约5mL,121℃高压灭菌15min.硝酸盐还原试剂:甲液:将对氨基苯磺酸0.8g溶解于2.5mol/L乙酸溶液100mL中.乙液:将甲萘胺0.5g溶解于2.5mol/L乙酸溶液100mL中.试验方法:接种后在36±1℃培养1～4d,加入甲液和乙液各一滴,观察结果.硝酸盐还原为亚硝酸盐时于立刻或数分钟内显红色.注:本试验阴性的原因有三:细菌不能还原硝酸盐;亚硝酸盐继续分解,生成氨和氮;培养基不适于细菌的生长.如欲检查培养基中硝酸盐是否未被分解,可再加入锌粉少许,可使硝酸盐还原为亚硝酸盐而呈现红色.19 细胞色素氧化酶试验试剂:1%盐酸二甲基对苯二胺溶液.1%α-萘酚-乙醇溶液.试验方法:取37℃(或低于37℃)培养20h的斜面培养物一支,将两种试剂各2～3滴,从斜面上端滴下,并将斜面略加倾斜,使试剂混合液流经斜面上的培养物.如系平板培养物,则可用试剂混合液滴在菌落上.结果:于2min内呈现蓝色者为阳性.阳性培养物大多数于半分钟内出现强阳性反应,2min以后出现微弱或可疑反应均作为阴性结果.20 过氧化氢酶试验试剂:3%过氧化氢溶液:临用时配制.试验方法:挑取固体培养基上菌落一接种环,置于洁净试管内,滴加3%过氧化氢溶液2mL,观察结果.结果:于半分钟内发生气泡者为阳性,不发生气泡者为阴性.21 过氧化物酶试验试剂:2%儿茶酚溶液.3%过氧化氢溶液.试验方法:挑取固体培养基上菌落一接种环,置于洁净试管内,滴加2%儿茶酚溶液1mL及3%过氧化氢溶液1 mL.静置于室温(20℃)中30～60min,观察结果.结果:阳性反应,细菌变为黑褐色;阴性反应,细菌不变色.注:过氧化物酶的作用可受氰化钾的抑制.22 磷酸盐缓冲液储存液磷酸二氢钾34g1mol/L氢氧化钠溶液175mL蒸馏水825mLpH7.2制法:先将磷酸盐溶解于500mL蒸馏水中,用1mol/L氢氧化钠溶液校正pH后,再用蒸馏水稀释至1000mL. 稀释液:取储存液1.25mL,用蒸馏水稀释至1000mL.分装每瓶100mL或每管10mL,121℃高压灭菌15min.23明胶磷酸盐缓冲液成分:明胶2g磷酸氢二钠4g蒸馏水1000mLpH6.2制法:加热溶解,校正pH,121℃高压灭菌15min.24 乳酸-苯酚溶液成分:苯酚10g乳酸(比重1.21) 10g甘油20g蒸馏水10mL制法:将苯酚在水中加热溶解,然后加入乳酸及甘油.用途:检验真菌形态时用.25 肉浸液肉汤成分:绞碎牛肉500g氯化钠5g蛋白胨10g磷酸氢二钾2g蒸馏水1000mL制法:将绞碎之去筋膜无油脂牛肉500g加蒸馏水1000mL,混合后放冰箱过夜,除去液面之浮油,隔水煮沸半小时,使肉渣完全凝结成块,用绒布过滤,并挤压收集全部滤液,加水补足原量.加入蛋白胨,氯化钠和磷酸盐,溶解后校正pH7.4～7.6煮沸并过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌30min.26肉浸液琼脂成分:肉浸液肉汤(PH7.4) 1000mL琼脂17～20g制法:加热溶化琼脂,分装烧瓶或试管,121℃高压灭菌30min.根据需要,倾注平板或放成斜面.27牛肉(或牛心)消化汤成分:绞碎牛肉(或牛心) 1000g15%氢氧化钠溶液27mL胰蛋白酶40mL三氯甲烷1mL氯化钠10g蒸馏水2000mL制法:1 称取碎牛肉,加蒸馏水,隔水加热到80℃,维持15min.2 加氢氧化钠溶液,对pH试纸呈弱碱性,冷至40℃.3 加胰蛋白酶,氯仿,在36±1℃放置4～5h,每小时摇动一二次.4 4h后,吸取上层液5mL于试管中,加5%硫酸铜溶液0.1mL,4%氢氧化钠溶液5mL,混合之.若呈红色,则不须再消化,可由温箱取出.5 加入15%乙酸溶液45mL,对pH试纸呈酸性.6 煮沸15min,使胰蛋白酶破坏,冷后,放冰箱内一夜.7 次日吸取上层清液,加氯化钠10g,并加水补足原量,煮沸.8 校正pH7.4～7.6(加15%氢氧化钠溶液约10mL),加热,用滤纸过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌20min.注:①此培养基可作为琼脂培养基的基础,不需加蛋白胨.②胰蛋白酶之配制:称取去脂绞碎的猪胰500g,加入乙醇500mL,蒸馏水1500mL,混合之,装人玻塞瓶内.每日摇匀三次.3d后,用绒布过滤挤出其汁,加盐酸至0.05%,放冰箱内保存备用.28血消化汤成分:绞碎猪胃100g绞碎猪血块100g蒸馏水1000mL浓盐酸10mL制法:1 洗涤猪胃,除去油脂,保留胃粘膜,用绞肉机绞碎.2 用绞肉机将猪血块绞碎.3 将蒸馏水加热至55℃,加入猪胃,猪血块和盐酸,置55℃水浴中24h,时常加以摇动.4 从水浴内取出,加入1moL/L碳酸钠溶液5mL,煮沸10min,置于冰箱内一夜.5 吸取上层清液,加磷酸氢二钾1g,加热至75℃,加入1mol/L碳酸钠溶液45mL,煮沸,校正pH7.2～7.4.6 用滤纸过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌20min.29豆粉琼脂成分:牛心消化汤(PH7.4～7.6) 1000mL琼脂20g黄豆粉浸液50mL制法:将琼脂加在牛心消化汤内,加热溶解,过滤.加入豌豆粉浸液,分装每瓶100mL,121℃高压灭菌15min.豌豆粉浸液制法:取豌豆粉5g,氯化钠10g,加入蒸馏水100mL.置100℃水浴内加热1h,放于冰箱中过夜.吸取上清液即为豌豆浸液.30血琼脂成分:pH7.4～7.6豆粉琼脂100mL脱纤维羊血(或兔血) 5～10mL制法:加热溶化琼脂,冷至50℃,以灭菌手续加入脱纤维羊血,摇匀,倾注平板.亦可分装灭菌试管,置成斜面.亦可用其他营养丰富的基础培养基配制血琼脂.31营养琼脂成分:蛋白胨10g牛肉膏3g氯化钠5g琼脂15～20g蒸馏水1000mL制法:将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内,加入15%氢氧化钠溶液约2mL,校正pH至7.2～7.4.加入琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化.分装烧瓶,121℃高压灭菌15min.注:此培养基可供一般细菌培养之用,可倾注平板或制成斜面.如用于菌落计数,琼脂量为1.5%;如作成平板或斜面,则应为2%.32营养肉汤成分:蛋白陈10g牛肉膏3g氯化钠5g蒸馏水1000mLpH7.4制法:按上述成分混合,溶解后校正pH,分装烧瓶,每瓶225mL,121℃高压灭菌15min.33 乳糖胆盐发酵管成分:蛋白胨20g猪胆盐(或牛,羊胆盐) 5g乳糖10g0.04%滇甲酚紫水溶液25mL蒸馏水1000mLpH7.4制法:将蛋白胨,胆盐及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,分装每管10mL,并放入一个小倒管,115℃高压灭菌15min.注:双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍.34乳糖发酵管成分:蛋白胨20g乳糖10g0.04%溴甲酚紫水溶液25mL蒸馏水1000mLpH7.4制法:将蛋白胨及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,按检验要求分装30mL,10mL或3mL,并放入一个小倒管,115℃高压灭菌15min.注:①双料乳糖发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍.②30mL和10mL乳糖发酵管专供酱油及酱类检验用,3mL乳糖发酵管供大肠菌群证实试验用.35 EC肉汤成分:胰蛋白胨20g3号胆盐(或混合胆盐) 1.5g乳糖5g磷酸氢二钾4g磷酸二氢钾 1.5g氯化钠5g蒸馏水1000mL制法:将上述成分混合,溶解后,分装有发酵倒管的试管中,121℃高压灭菌15min,最终pH为6.9±0.2.36 缓冲蛋白胨水(BP)成分:蛋白胨10g氯化钠5g磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O) 9g磷酸二氢钾 1.5g蒸馏水1000mLpH7.2制法:按上述成分配好后以大烧瓶装,121℃高压灭菌15min.临用时无菌分装每瓶225mL.注:本培养基供沙门氏菌前增菌用.37 氯化镁孔雀绿增菌液(MM)甲液胰蛋白胨5g氯化钠8g磷酸二氢钾 1.6g蒸馏水1000mL乙液氯化镁(化学纯) 40g蒸馏水100mL4.13.3 丙液0.4%孔雀绿水溶液.制法:分别按上述成分配好后,121℃高压灭菌15min备用.临用时取甲液90mL,乙液9mL,丙液0.9mL,以无菌操作混合即可.注:本培养基亦称Rappaport 10(R10)增菌液.38 四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)基础培养基多胨或眎胨5g胆盐1g碳酸钙10g硫代硫酸钠30g蒸馏水1000mL碘溶液碘6g碘化钾5g蒸馏水20mL制法:将基础培养基的各成分加入蒸馏水中,加热溶解,分装每瓶100mL.分装时应随时振摇,使其中的碳酸钙混匀.121℃高压灭菌15min备用.临用时每100mL基础培养基中加入碘溶液2mL,0.1%煌绿溶液1mL.39 四硫磺酸钠煌绿增菌液(换用方法)基础液:蛋白胨10g牛肉膏5g氯化钠3g碳酸钙45g蒸馏水1000mL将各成分加入于蒸馏水中,加热至约70℃溶解,校正pH至7.0±0.1,121℃高压灭菌20min.硫代硫酸钠溶液硫代硫酸钠(Na2S2O3·5H2O) 50g蒸馏水加至100mL碘溶液碘片20g碘化钾25g蒸馏水加至100mL将碘化钾充分溶解于是少量的蒸馏水中,加入碘片,振摇玻瓶至碘片全部溶解,再加入蒸馏水至规定量.贮于棕色玻瓶内,紧塞瓶盖备用.煌绿水溶液煌绿0.5g蒸馏水100mL存放暗处,不少于1d,使其自然灭菌.牛胆盐溶液干燥的牛胆盐10g蒸馏水100mL煮沸溶解,121℃高压灭菌20min.制备:基础液900mL硫代硫酸钠溶液100mL碘液20mL煌绿溶液2mL牛胆盐溶液50mL临用前,按上列顺序,以无菌操作依次加入于基础液中,每加入一种成分,均应摇匀后再加入另一种成分.分装于灭菌瓶中,每瓶100mL.40 亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)成分:蛋白胨5g乳糖4g亚硒酸氢钠4g磷酸氢二钠 5.5g磷酸二氢钾 4.58L-胱氨酸0.01g蒸馏水1000mL1%L-胱氨酸-氢氧化钠溶液的配法:称取L-胱氨酸0.1g(或DL-胱氨酸0.2g),加1mol/L氢氧化钠1.5mL,使溶解,再加入蒸馏水8.5mL即成.制法:将除亚硒酸氢钠和L-胱氨酸以外的各成分溶解于900mL蒸馏水中,加热煮沸,俟冷备用.另将亚硒酸氢钠溶解于100mL蒸馏水中,加热煮沸,候冷,以无菌操作与上液混合.再加入1%L-胱氨酸-氢氧化钠溶液1mL.分装于灭菌瓶中,每瓶100mL,pH应为7.0±0.1.41 GN增菌液成分:胰蛋白胨20g葡萄糖1g甘露醇2g柠檬酸钠5g去氧胆酸钠0.5g磷酸氢二钾4g磷酸二氢钾 1.5g氯化钠5g蒸馏水1000mLpH7.0制法:按上述成分配好,加热使溶解,校正pH.分装每瓶225mL,115℃高压灭菌15min.42 肠道菌增菌肉汤成分:蛋白胨1 10g葡萄糖5g牛胆盐20g磷酸氢二钠8g磷酸二氢钾2g煌绿0.015g蒸馏水1000mLpH7.2制法:按上述成分配好,加热使溶解,校正pH.分装每瓶30mL,115℃高压灭菌15min.43 亚硫酸铋琼脂(BS)成分:蛋白胨10g牛肉膏5g葡萄糖5g硫酸亚铁0.3g磷酸氢二钠4g煌绿0.025g柠檬酸铋铵2g亚硫酸钠6g琼脂18～20g蒸馏水1000mLpH7.5制法:1 将前面5种成分溶解于300mL蒸馏水中.2 将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠另用50mL蒸馏水溶解.3 将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解,冷至80℃4 将以上三液合并,补充蒸馏水至1000mL,校正pH,加0.5%煌绿水溶液5mL,摇匀.冷至50～55℃,倾注平皿. 注:此培养基不需高压灭菌.制备过程不宜过分加热.以免降低其选择性.应在临用前一天制备,贮存于室温暗处.超过48h不宜使用.44 DHL琼脂成分:蛋白胨20g牛肉膏3g乳糖10g去氧胆酸钠1g硫代硫酸钠 2.3g柠檬酸钠1g柠檬酸铁铵1g中性红0.03g琼脂18～20g蒸馏水1000mLpH7.3制法:将除中性红和琼脂以外的成分溶解于400mL蒸馏水中,校正pH. 再将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解,两液合并,并加入0.5%中性红水溶液6mL,待冷至50～55℃,倾注平板.45 HE琼脂成分:脙胨12g牛肉膏3g乳糖12g蔗糖12g水杨素2g胆盐20g氯化钠5g琼脂18～20g蒸馏水1000mL0.4%溴麝香草酚蓝溶液16mLAndrade指示剂20mL甲液20mL乙液20mLpH7.5制法:将前面七种成分溶解于400mL蒸馏水内作为基础液;将琼脂加入于600mL蒸馏水内,加热溶解.加入甲液和乙液于基础液内,校正pH.再加入指示剂,并与琼脂液合并,待冷至50～55℃,倾注平板.注:①此培养基不可高压灭菌.②甲液的配制硫代硫酸钠34g柠檬酸铁铵4g蒸馏水100mL②乙液的配制去氧胆酸钠10g蒸馏水100mL②Andrade指示剂酸性复红0.5g1mol/L氢氧化钠溶液16mL蒸馏水100mL将复红溶解于蒸馏水中,加入氢氧化钠溶液.数小时后如复红褪色不全,再加氢氧化钠溶液1～2mL.46 SS琼脂牛肉膏5g眎胨5g三号胆盐 3.5g琼脂17g蒸馏水1000mL再将两液混合,121℃高压灭菌15min,保存备用.完全培养基:基础培养基100mL乳糖10g柠檬酸钠8.5g硫代硫酸钠8.5g10%柠檬酸铁溶液10mL1%中性红溶液2.5mL0.1%煌绿溶液0.33mL加热溶化基础培养基,按比例加入上述染料以外之各成分,充分混合均匀,校正至pH7.0,加入中性红和煌绿溶液,倾注平板.注:①制好的培养基宜当日使用,或保存于冰箱内于48h内使用.②煌绿溶液配好后应在10d以内使用.③可以购用SS琼脂的干燥培养基.47 WS琼脂成分:②胨12g牛肉膏3g氯化钠5g乳糖12g蔗糖12g十二烷基硫酸钠2g琼脂15gAndrade指示剂20mL0.4%溴麝香草酚蓝溶液16mL甲液20mL蒸馏水1000mLpH7.0制法:除指示剂和甲液外,将其他成分加热溶解,不需消毒,校正pH后加入指示剂和甲液,倾注平板应呈草绿色.注:①供沙门氏菌分离用.②Andrade指示剂和甲液的配制均见HE琼脂.48 麦康凯琼脂成分:蛋白胨17g眎胨3g猪胆盐(或牛,羊胆盐) 5g琼脂17g蒸馏水1000mL乳糖10g0.01%结晶紫水溶液10mL0.5%中性红水溶液5mL制法:1 将蛋白胨,眎,胆盐和氯化钠溶解于400mL蒸馏水中,校正pH7.2.将琼脂加入600mL加热溶解.将两液合并,分装于烧瓶内,121℃高压灭菌15min备用.2 临用时加热溶化琼脂,趁热加入乳糖,冷至50～55℃时,加入结晶紫和中性红水溶液,摇匀后倾注平板.注:结晶紫及中性红水溶液配好后须经高压灭菌.49 伊红美蓝琼脂(EMB)成分:蛋白胨10g乳糖10g磷酸氢二钾2g琼脂17g2%伊红Y溶液20mL0.65%美蓝溶液10mL蒸馏水1000mLpH7.1制法:将蛋白胨,磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中,校正pH,分装于烧瓶内,121℃高压灭菌15min备用.临用时加入乳糖并加热溶化琼脂,冷至50～55℃,加入伊红和美蓝溶液,摇匀,倾注平板.50三糖铁琼脂(TSI)成分:蛋白胨20g牛肉膏5g乳糖10g蔗糖10g葡萄糖1g氯化钠5g硫酸亚铁铵〔Fe(NH4)2(SO4)2·6H2O〕0.2g硫代硫酸钠0.2g琼脂12g酚红0.025g蒸馏水1000mLpH7.4制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH.加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂.加入0.2%酚红水溶液12.5mL,摇匀.分装试管,装量宜多些,以便得到较高的底层.121℃高压灭菌15min.放置高层斜面备用.51 三糖铁琼脂(换用方法)成分:蛋白胨15g牛肉膏3g酵母膏3g乳糖10g蔗糖10g葡萄糖1g氯化钠5g硫酸亚铁0.2g硫代硫酸钠0.3g琼脂12g酚红0.025g蒸馏水1000mLpH7.4制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH.加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂.加入0.2%酚红水溶液12.5mL,摇匀.分装试管,装量宜多些,以便得到较高的底层.121℃高压灭菌15min,放置高层斜面备用.52 克氏双糖铁琼脂(KI)上层培养基成分血消化汤(pH7.6) 500mL琼脂 6.5g硫代硫酸钠0.1g硫酸亚铁铵0.1g乳糖5g0.2%酚红溶液5mL下层培养基成分血消化汤(pH7.6) 500mL琼脂2g葡萄糖1g0.2%酚红溶液5mL制法:1 取血消化汤按上层和下层的琼脂用量,分别加入琼脂,加热溶解.2 分别加入其他各种成分.将上层培养基分装于烧瓶内;将下层培养基分装于灭菌12mm×100mm试管内,每管约2mL.115℃高压灭菌10min.3 将上层培养基放在56℃水浴箱内保温;将下层培养基直立放在室温内,使其凝固.4 当下层培养基凝固后,以无菌手续将上层培养基分装于下层培养基的上面,每管约1.5mL,放成斜面.53 克氏双糖铁琼脂(换用方法)成分:蛋白胨20g牛肉膏3g酵母膏3g乳糖10g葡萄糖1g氯化钠5g柠檬酸铁铵0.5g硫代硫酸钠0.5g琼脂12g酚红0.025g蒸馏水1000mLpH7.4制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH.加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂.加入0.2%酚红水溶液12.5mL,摇匀.分装试管,装量宜多些,以便得到比较高的底层.121℃高压灭菌15min.放置高层斜面备用.54 葡萄糖半固体发酵管成分:蛋白胨1g牛肉膏0.3g氯化钠0.5g1.6%溴甲酚紫酒精溶液0.1mL葡萄糖1g琼脂0.3g蒸馏水100mLpH7.4制法:将蛋白胨,牛肉膏和氯化钠加入于水中,校正pH后加入琼脂加热溶解,再加入指示剂和葡萄糖,分装小试管,灭菌121℃15 min.55 5%乳糖发酵管成分:蛋白胨0.2g氯化钠0.5g乳糖5g2%溴麝香草酚蓝水溶液1.2mL蒸馏水100mLpH7.4制法:除乳糖以外的各成分:溶解于50mL蒸馏水内,校正pH.将乳糖溶解于另外50mL蒸馏水内,分别灭菌12 1℃15min,将两液混合,以无菌操作分装于灭菌小试管内.注:在此培养基内,大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于1d内发酵.56 CAYE培养基此培养基附在肠毒素诊断试剂盒内,如无此培养基,亦可用Honda氏产毒肉汤.57 Honda氏产毒肉汤成分:水解酪蛋白20g酵母浸膏粉10g氯化钠 2.5g磷酸氢二钠15g。
各种培养基的配方
各种培养基的配方在微生物学中，培养基是为微生物提供营养和生长所必需的营养物质的混合物，可以根据微生物的特性和需求来设计不同成分的培养基。
不同种类的微生物需要不同的培养基来生长和繁殖，为了获得最佳的生长效果，需根据微生物的特性制备相应的培养基。
下面介绍几种常用的培养基及其配方。
1. 加尔沙基培养基（Luria-Bertani，LB培养基）LB培养基是一种常用的细菌培养基，适用于大多数细菌的培养。
其成分包括牛肉浸出物、酵母提取物和氯化钠，PH为7.0。
配方：- 水：1000ml-氯化钠：10g-酵母提取物：5g-牛肉浸出物：10gLB培养基的主要特点是富含氨基酸和碳源，适合于细菌的快速生长。
2. PDA培养基（Potato Dextrose Agar）PDA培养基是一种适合真菌和霉菌生长的培养基，成分简单易得。
它主要包括马铃薯提取物、葡萄糖和琼脂。
PDA培养基是一种半固体培养基，适合于真菌的产孢。
配方：-马铃薯提取物：200g-葡萄糖：20g-琼脂：20g-静置180s后，灭菌PDA培养基适合于真菌和霉菌的生长，常用于菌落计数和生长的研究中。
3.营养琼脂培养基营养琼脂培养基是一种通用的培养基，适用于多种微生物的培养。
它主要包括蛋白水解物、酵母提取物、氯化钠和琼脂。
配方：-蛋白水解物：5g-酵母提取物：1g-氯化钠：5g-琼脂：15g- 水：1000ml-蒸馏后灭菌营养琼脂培养基适合于大多数微生物的生长，是最常用的培养基之一4. 马尼特尔-梅尔特培养基（Mannitol-Salt Agar，MSA）MSA培养基是一种选择性培养基，主要用于金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）的分离和鉴定。
它的成分包括马尼托尔、氯化钠、酵母提取物和琼脂。
配方：-马尼托尔：5g-氯化钠：75g-酵母提取物：1g-琼脂：15g- 水：1000ml-蒸馏后灭菌MSA培养基在金黄色葡萄球菌的生长过程中，可以通过红色菌落的形成来进行识别。
微生物常用培养基介绍
微生物常用培养基介绍常用的培养基可根据最基本的组成成分分为以下两种类型：化学合成培养基和复合物培养基。
化学合成培养基是通过将纯化学物质溶解在水中制备而成，能精确控制培养基的成分。
复合物培养基则是以天然有机物质如糖、蛋白等为主要碳源和氮源制备的培养基，营养成分相对复杂。
以下将对常用的培养基进行介绍：1. 营养琼脂培养基（Nutrient Agar）：是最常用的通用培养基之一、它由水、肉提取物、酵母提取物和琼脂组成。
适用于大多数常见细菌和真菌的培养。
3. MacConkey琼脂培养基：是一种选择性培养基，用于分离和鉴定肠道革兰氏阴性菌，如大肠杆菌和克雷白杆菌。
它添加了碱性红和液体胆盐，以抑制革兰氏阳性菌的生长。
4. Sabouraud葡萄糖琼脂培养基：是一种常用的真菌培养基，含有葡萄糖和琼脂作为碳源，以及抗生素如氯霉素和青霉素，以抑制细菌的生长。
5. Mannitol盐琼脂培养基：是一种选择性培养基，可鉴定耐盐菌和致病菌如金黄色葡萄球菌。
它含有高浓度的盐和麦芽糖，以及琼脂作为凝胶化剂。
6. TCBS琼脂培养基（Thiosulfate Citrate Bile Salt Sucrose Agar）：是一种用于分离和鉴定卡介菌属细菌的培养基，含有碱性盐、胱硫酸盐、柠檬酸盐和蔗糖。
7. TSB液体培养基（Tryptic Soy Broth）：是一种通用的液体培养基，适用于多种微生物的培养。
它由胰胨和大豆胨制备而成。
8. BHI液体培养基（Brain Heart Infusion Broth）：是用于培养多种微生物的液体培养基，以动物脑和心脏组织为基础材料，提供丰富的营养。
9. 铁琼脂培养基（TSI Agar）：是一种含有红霉素、蛋白质胨、蔗糖和乳糖等成分的复合物琼脂培养基，用于鉴定肠道革兰氏阴性杆菌。
10. 阿曼氏琼脂培养基（Mannitol Salt Agar，MSA）：是一种选择性培养基，用于鉴定耐盐菌，如金黄色葡萄球菌。
微生物学实验常用培养基的
微⽣物学实验常⽤培养基的⽜⾁膏蛋⽩胨培养基（培养细菌⽤）121℃灭菌20min。
2、⾼⽒（Gause）1号培养基（培养放线菌⽤）配制时，先⽤少量冷⽔将淀粉调成糊状，倒⼊煮沸的⽔中，在⽕上加热，边搅拌边加⼊其他成分，溶化后，补⾜⽔分⾄1000mL。
121℃灭菌20min。
3、查⽒（Czapek）培养基（培养霉菌⽤）121℃灭菌20min。
4、马丁⽒（Martin）琼脂培养基（分离真菌⽤）112℃灭菌30min。
临⽤前加⼊0.03%链霉素稀释液100mL，使每毫升培养基中含链霉素30µg。
5、马铃薯培养基（简称PDA）（培养真菌⽤）培养基的配制：马铃薯去⽪，切成块煮沸30min，然后⽤纱布过滤，再加糖及琼脂，熔化后补⾜⽔⾄1000mL。
121℃灭菌30min。
6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制：(1)、取⼤麦或⼩麦若⼲，⽤⽔洗净，浸⽔6—12⼩时，⾄15℃阴暗处发芽，上⾯盖纱布⼀块，每⽇早、中、晚淋⽔⼀次，麦根伸长⾄麦粒的两倍时，即停⽌发芽，摊开晒⼲或烘⼲，贮存备⽤。
(2)、将⼲麦芽磨碎，⼀份麦芽加四份⽔，在65℃⽔浴中糖化3—4⼩时，糖化程度可⽤碘滴定之。
加⽔约20mL，调匀⾄⽣泡沫时为⽌，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(3)、将糖化液⽤4—6层纱布过滤，滤液如混浊不清，可⽤鸡蛋⽩澄清，⽅法是将⼀个鸡蛋⽩加⽔约20mL，调匀⾄⽣泡沫时为⽌，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(4)、将滤液稀释到5—6波美度，pH约6.4，加⼊2%琼脂即成。
121℃灭菌30min。
7、⽆氮培养基（⾃⽣固氮菌、钾细菌）113℃灭菌30min。
8、半固体⾁膏蛋⽩胨培养基121℃灭菌20min。
9、合成培养基加12 mL0.04%的溴钾酚紫（pH5.2—6.8，颜⾊由黄变紫，作指⽰剂）。
121℃灭菌20min。
10、⾖芽汁蔗糖（或葡萄糖）培养基培养基的配制：称新鲜⾖芽100g，放⼊烧杯中，加⼊⽔1000mL，煮沸约30min，⽤纱布过滤。
微生物培养常用培养基配方
溶液名称用途吕氏碱性美蓝染色液美蓝染色法吕氏碱性美蓝染色液美蓝染色法吕氏碱性美蓝染色液美蓝染色法结晶紫染色液革兰氏染色法革兰氏碘液革兰氏染色法沙黄复染液革兰氏染色法石炭酸品红染色液耐酸性染色法（萋-倪染色法）3%盐酸-乙醇耐酸性染色法（萋-倪染色法）复染液吕氏碱性美蓝染色液柯氏染色液柯氏染色法奥尔特氏染色液奥尔特氏荚膜染色法瑞氏染色液瑞士染色法鞭毛染色法染色液（甲液）鞭毛染色法鞭毛染色法鞭毛染色法染色液（乙液）鞭毛染色法鞭毛染色法碱性复红染色液碱性复红染色法甲基红实验甲基红（MR）实验氧化酶试验细胞色素氧化酶试验过氧化氢酶试验过氧化物酶试验磷酸盐缓冲液（储存液）磷酸盐溶液（稀释液）明胶磷酸盐缓冲液乳酸-苯酚溶液检查真菌形态硝酸盐还原试剂（甲液）硝酸盐还原试剂（乙液）靛基质试剂（柯凡客试剂）靛基质试剂（欧-波试剂）美蓝95%乙醇0.01%氢氧化钠溶液结晶紫95%乙醇1%草酸水溶液碘碘化钾蒸馏水沙黄95%乙醇蒸馏水碱性品红95%乙醇5%酚水溶液浓盐酸95%乙醇0.5%沙黄液0.5%孔雀绿液沙黄蒸馏水瑞氏色素甲醇单宁酸氯化高铁蒸馏水1%氢氧化钠溶液15%甲醛溶液硝酸银蒸馏水浓氢氧化铵溶液碱性复红溶液甲基红试剂1%盐酸二甲基对苯二胺1%α-萘酚-乙醇溶液1%盐酸二甲基对苯二胺1%α-萘酚-乙醇溶液3%过氧化氢溶液2%茶酚溶液3%过氧化氢溶液磷酸二氢钾1mol/L氢氧化钠溶液蒸馏水储存液稀释至1000ML 明胶蒸馏水苯酚乳酸甘油蒸馏水对氨基苯磺酸乙酸甲萘胺乙酸对二甲氨基甲醛戊醇浓盐酸对二甲氨基苯甲醛乙醇浓盐酸。
微生物常用培养基介绍
微生物常用培养基介绍微生物培养基是为了满足微生物生长和繁殖的营养和生理需求而制备的一种复杂的化学和物理组合。
培养基的选择是微生物实验室工作中非常重要的一步，因为不同微生物对于营养物质的需求是不同的。
下面将介绍几种常用的微生物培养基。
1.营养琼脂培养基营养琼脂培养基是一种基础的培养基，用于培养常见的微生物。
它主要由肉汤、胰蛋白胨、琼脂、盐类等组成。
营养琼脂培养基可以满足绝大多数微生物的生长需求，是最常见的培养基之一2.马尿培养基马尿培养基主要用于分离和鉴定大肠杆菌等大肠埃希菌科细菌。
它由酵素消化的马肉精制的冻干物和一些特殊的肥料和盐类组成。
马尿培养基中含有氧和无氧生长所需的营养物质，因此非常适合于肠道细菌的生长。
3.血琼脂培养基血琼脂培养基是一种含有血液的琼脂培养基。
它可以促进细菌和真菌的生长，并可以区分不同微生物的产生溶解酶的能力。
血琼脂培养基常用于耐药性的细菌和分离和鉴定病原微生物。
4.马尿西杰林培养基马尿西杰林培养基是一种用于分离和鉴定大肠杆菌的选择性培养基。
它主要由马尿、氯化钠、柠檬酸钠、琼脂、培养基和蔗糖组成。
马尿西杰林培养基通过选择性抑制其他细菌的生长，提供了大肠杆菌生长的有利条件。
5.大肠埃希菌选择性琼脂培养基大肠埃希菌选择性琼脂培养基是一种含有红松籽酸、氯化碱、鹽、柠檬酸钠、亚硝酸钠等抑制非大肠杆菌的选择性琼脂培养基。
它主要用于大肠埃希菌的分离和鉴定。
6.牛肉浸提液琼脂培养基牛肉浸提液琼脂培养基是一种富含氨基酸和其他有机营养物质的培养基。
它主要用于快速生长和温和微生物的培养。
以上是几种常用的微生物培养基介绍，每种培养基都有其特殊的适应细菌生长和分离鉴定的功能。
在微生物实验室中，选择适当的培养基对于微生物的研究和应用具有重要的意义。
同时，在培养过程中还应注意操作规范，采取严格的无菌措施，以保证实验结果的准确性。
常见微生物培养基
常见微生物培养基Medium含有碳水化合物、含氮应用化学药品配成并标液体培养基不易长期保有不同。
一般培养基在对一些需严格灭菌的培2~6。
C的冰箱内。
1、细菌培养基配方一牛肉膏琼脂培养基牛肉膏0.3克 1.00.5 1.5水100毫升在烧杯内加水100火上加热。
待烧杯内各10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.27.6,30分钟。
配方二马铃薯培养基250500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。
在烧杯上做好2pH值调到7.5左右。
每支试管内加入10毫升用。
配方三根瘤菌培养基葡萄糖10克磷酸氢二钾0.5克碳酸钙3克硫酸镁0.2克酵母粉0.4克琼脂20克水1000毫升1%结晶紫溶液1毫升2、放线菌培养基配方一可溶性淀粉2克硝酸钾0.1克磷酸氢二钾0.05克氯化钠0.05克硫酸镁0.05克硫酸亚铁0.001克琼脂2克水100毫升595它溶解。
在烧杯外做好pH值到7.27.4备用。
配方二面粉琼脂培养基面粉60克琼脂20克水1000毫升50030分钟。
另取500pH值到7.43、真菌培养基配方一Sabouraud’s蛋白胨10克琼脂20克麦芽糖40克水1000毫升40本培养菌是培养许多种类真菌所常用的。
配方二马铃薯糖琼脂培养基2001000液中加入10煮沸溶解后加糖20用。
把这培养基的pH值调到7.27.4杆菌。
配方三黄豆芽汁培养基黄豆芽100克琼脂15克葡萄糖20克水1000毫升301000把这培养基的pH值调到7.27.4。
配方四豌豆琼脂培养基豌豆80粒琼脂5克水200毫升取8014、食用菌菌种培养基配方一马铃薯—蔗糖--琼脂培养基20%马铃薯煮汁1000毫升蔗糖20克琼脂18克200100020分钟足水分到100020%pH配方二综合马铃薯培养基20%马铃薯煮汁1000 毫升磷酸二氢钾3克硫酸镁1.5克葡萄糖20克维生素10毫克琼脂18克先配制20%整pH值到6该培养基用于培养和保存灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种。
常用培养基的种类及用途
常用培养基的种类及用途
有许多种类的培养基可以帮助科学家、农业或医疗方面的科研工作或活动等。
这些培养基的种类繁多，种类也越来越多。
研究者们为了更好地研究细胞、微生物、细菌等，可以选择合适的培养基。
下面我们就来谈谈常见培养基的种类及用途：
首先，了解培养基的种类及用途，必须从通用培养基开始。
通用培养基非常适
合大多数细胞、微生物、细菌的培养，其中最常用的通用培养基之一是Tris-HCL。
Tris-HCL 可以有效支持真菌、细菌、病毒等的生长，是研究实验必不可少的物质。
其次，也是使用比较广泛的培养基是各类微生物培养基，这些微生物培养基也
被称作特异培养基，它们可以满足培养特定种类细菌或真菌之类特定微生物的需要，比如不同的抗生素培养基、放线菌培养基、细菌培养基等。
紧接着，我们要提到的培养基是适合培养细胞的类型，比如细胞培养基就是用
来支持不同细胞类型生长的培养基，它们之中可以包括重组培养基，以支持任何细胞的生长；或者免疫细胞培养基，可以支持免疫功能的细胞的发育和活跃。
再有，将培养基分类，一定不能忘记病原体培养基，这是一种特殊的培养基，
用于培养易于感染的有害病毒、细菌等危害人类健康与生命安全的微生物病原体，如流感，结核，猩红热和伤寒等。
最后，需要提到的是各种细胞膜膜培养基。
它们被广泛用于研究细胞膜结构和
物质流动，这些培养基可以模拟生物体细胞膜的环境，以便检验药物的毒性，进一步研究细胞的生理功能，或研究埃及螺旋菌和结核病毒。
从上面这些内容可以看出，许多种类的培养基有着各自特定的用途，不同培养
基可以用于不同的研究，可以很好地服务于科学研究，从而为社会健康发。
146种常见培养基的配方
146种常见培养基的配方培养基是微生物学实验中常用的一种重要实验工具，通过调配合适的培养基，可以提供微生物生长所需的营养物质，从而促进微生物菌落的繁殖和生长。
下面将介绍一些常见的培养基配方，涵盖了常用的总结培养基、选择性培养基和不同微生物类群的专用培养基。
1.琼脂肉汤培养基（NB）-牛肉脱脂粉5g-酵母提取物2.5g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml2.大肠杆菌复合培养基（LB）-液体培养基-蛋白胨10g-酵母提取物5g-NaCl5g- 蒸馏水 1000ml-琼脂板-蛋白胨10g-酵母提取物5g-NaCl5g-琼脂15g- 蒸馏水 1000ml3. 肠杆菌选择性琼脂培养基（MacConkey琼脂培养基）-蛋白胨17g-紫胆汁盐1.5g-普鲁士蓝盐1.5g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml4. 脱氧胆盐琼脂培养基（Deoxycholate Agar）-脱氧胆酸钠20g-普鲁士蓝盐0.8g-蛋白胨7.5g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml5.阿米巴选择性琼脂培养基（KV培养基）- 鸡蛋清 20ml- 中性红溶液 12ml-NaCl0.5g-纤维素0.25g- 盐酸 1ml-琼脂15g- 蒸馏水 1000ml6. 革兰氏阳性菌选择性琼脂培养基（Mannitol Salt Agar）-蔗糖10g-氯化钠75g-酵母提取物5g-麦芽提取物1g-琼脂15g- 蒸馏水 1000ml7. 维生素富集琼脂培养基（Burkholder's Basal Salt Medium）-NaNO31g-KCl0.5g-MgSO4·7H2O0.2g-CaCl2·2H2O0.02g-FeSO4·7H2O0.01g-琼脂14g- 蒸馏水 1000ml8. 三氯化铁琼脂培养基（Cetrimide Agar）-硫酸镁0.8g-氯化钴0.05g-氯化锌0.01g-氯化亚铁0.03g-三氯化铁0.03g-比色琼脂糖15g- 过滤蒸馏水 1000ml9. 库氏四甲基铵琼脂培养基（Chapman Agar）-高氯酸钠5g-脲7.5g-酵母提取物2g-海藻酸钠20g-紫胆汁盐0.25g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml10. 还原格兰氏琼脂培养基（Reduced Gram-negative Broth）-蛋氨酸0.5g-异亮氨酸0.5g-半胱氨酸0.5g-菜碱0.5g-胀氨酸0.5g-琼脂7g- 蒸馏水 1000ml这些是其中的一部分常见的培养基配方，涵盖了常用的总结培养基、选择性培养基和不同微生物类群的专用培养基。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
8
哥伦比亚血琼脂平板
• 均匀红色，无斑点，无裂纹，无血和纤维凝块 • 传代培养 • 观察溶血
α溶血、β溶血、γ溶血 • 卫星试验、协同溶血（CAMP）试验 • 肺炎链球菌等苛养菌生长极好 • 在国外一般加抑菌剂作为培养阳性球菌的选择性培养基用 • 供分离葡萄球菌或其他营养要求较高的细菌及进行培养、鉴定
常用培养基介绍
临床检验常用的成品培养基
• 分离用培养基 • 鉴定用培养基 • 药敏用培养基 • 院内感染控制用培养基 • 血培养 • 显色培养基
2
Oxoid干粉培养基
• CM：基础干粉，含有丰富的碳源、氮源、生长因子、选择性抑制因子， 显色剂
• SR：添加剂，通常包装10小瓶/盒，每瓶通常可配制500ml或225ml添加 的培养基，成分通常是抗生素和热敏感的营养成分
17
协同溶血（CAMP）试验
18
巧克力琼脂平板
• 巧克力琼脂平板（普通） 不加抗生素，用于无菌标本的培养、分离、鉴定(脑脊液、关节液、穿刺液等) PB8124A 90mmX10 PB8124A 70mmX10
• 万古霉素巧克力琼脂平板（培养嗜血杆菌） 添加万古霉素，用于痰标本中流感嗜血杆菌的检出 PB8001A 90mmX10 PB8001F 70mmX10
35
OXOID一次性平板培养基
36
4
Oxoid制成培养基
医院常用品项： • 滋养性：营养琼脂、血平板、巧克力平板 • 肠道菌：麦康凯、中国蓝玫红酸、
伊红美蓝、 SS平板 • 分隔平板：血琼脂/麦康凯琼脂、
血琼脂/中国蓝玫红酸琼脂等 • 真菌：沙保氏葡萄糖 • 显色：念珠菌显色培养基、
尿路感染显色培养基
5
PPM TOP10
1 PB0123A/F 哥伦比亚血平板 2 PO0480B 胰蛋白胨大豆琼脂平板（三层无菌包装、辐照） 3 PO0155A 营养琼脂平板 4 PO8060A 玫红酸中国蓝乳糖琼脂平板 5 PB8001A/F 万古霉素巧克力琼脂平板 6 PO0152A MH平板 7 PO0262D 胰蛋白胨大豆琼脂接触平板（三层无菌包装、辐照） 8 PO0479D 卵磷脂吐温胰蛋白胨大豆琼脂接触平板(三层无菌包装、辐照） 9 PO0161F 沙保氏氯霉素琼脂平板 10 PO0495F 3号麦康凯琼脂平板
25
中国蓝琼脂平板
• PO8060A 90mmX10 PO8060F 70mmX10 • 弱选择性培养基 ，抑制阳性球菌的生长 • 用于分离沙门氏、志贺氏菌属细菌 • 沙门氏、志贺氏菌属细菌半透明状 • 大肠菌群细菌呈蓝色，深蓝色核心 • 中国蓝碱性无色，酸性蓝色 • 玫红酸碱性时呈红色，酸性时黄色 • 成品PH7.4淡紫红色，过高呈鲜红色，过低暗紫色
6
血琼脂平板
• 血琼脂平板 PB0115A PB0115F
90mmX10 70mmX10
• 哥伦比亚血琼脂平板
PB0123A
90mmX10
PB0123F
70mmX10
• 厌氧血琼脂平板
PB8111A
90mmX10
PB8111F
70mmX10
7
血琼脂平板
• 均匀红色，无斑点，无裂纹，无血和纤维凝块 • 供分离葡萄球菌或其他营养要求较高的细菌及进行培养、鉴定 • 传代培养 • 观察溶血
23
3号麦康凯琼脂平板
• PO0495A 90mmX10 PO0495F 70mmX10 • 均匀淡红色，无斑点，无裂纹 • 选择性分离肠杆菌和大肠埃希菌，用来检测不同标本中的肠杆菌 • 通过颜色变红来检测乳糖发酵
乳糖（＋）：粉红到红色菌落 乳糖（－）：无色或浅褐色菌落
24
SS琼脂平板
• PO5022A 90mmX10 PO5022F 70mmX10 • 分离沙门氏、志贺氏菌属细菌 • 强选择性培养基 • 沙门氏、志贺氏半透明菌落 • 大肠杆菌呈红色菌落 • 产硫化氢的菌属可形成黑色中心 • 避光保存
19
巧克力琼脂平板原理
• 特殊的变色工艺破碎血细胞，释放出Ⅹ因子、Ⅴ因子，破坏血中不稳定的 抑制细菌生长的成分，保留热稳定的营养物质
• 补加完整的氨基酸及生长因子 • 模拟细菌最有利的生长缓冲系统 • 均匀的巧克力色外观 • 合理的抗生素设计，能够抑制标本中的大部分杂菌，提高淋球菌的检出率
20
流感嗜血杆菌在巧克力色血平板上的生长
方法：先以产B-溶血素的金黄色葡萄球菌划一横线接种于血琼脂平板上，再 将被检菌与前一划线作垂直划线接种，两线不能相交，相距0.5～lcm，于 37℃培养18～24h，观察结果。每次试验都应设阴性和阳性对照。
应用：在链球菌中，B群链球菌、C群、F群都可出现CAMP试验阳性，故可 作为鉴定依据之一。其它细菌也可出现CAMP试验阳性，比如李斯特菌，摩 根菌等。
3
DCM Top 10
1
CM0337B
MH琼脂
2
CM0309B
WL营养琼脂
3
CM0657B
橙血清琼脂
4
CM0331B
哥伦比亚血琼脂基础
5
CM0325B
平板计数琼脂
6
CM0651B
普通啤酒琼脂
7
CM1055B
阪崎肠杆菌显色琼脂
8
CM0003B
营养琼脂
9
CM0115B
3号麦康凯琼脂
10
CM0041B
沙保氏葡萄糖琼脂
9
α溶血、β溶血、γ溶血
10
肺炎链球菌在血平板上的生长
11
化脓性链球菌在血平板上的生长
12
金黄色葡萄球菌的β 溶血
13
化脓性链球菌的β 溶血
14
溶血
金黄色葡萄球菌 （β溶血）
β溶血性链球菌
Байду номын сангаас
肺炎链球菌 （α溶血）
15
卫星试验
16
协同溶血（CAMP）试验
• 原理： B群链球菌能产生CAMP因子，可 促进葡萄球菌的B-溶血素溶解红细 胞的活性，因此在两菌（B群链球 菌和葡萄球菌）的交界处溶血力增 加，出现矢形（半月形）的溶血区 。
平板培养基出血水 平板培养基溶血，发黑 平板培养基琼脂靠近冰柜壁的一侧或两侧变白 平板培养基琼脂表面不平，有裂纹
30
平板培养基运输保存注意事项
• 平板培养基保存于2～10℃冷库或冰箱内，避光存放。避免靠近冷库或冰 箱的壁、门、风机口等温度不稳定的部位。
• 平板培养基运输和存放时——倒置（标签正置）。 • 平板培养基运输时置于泡沫箱内并加冰块，冰块用吸水纸或废报纸包三
• 巧克力双抗琼脂平板（培养脑膜炎奈瑟氏菌） 添加万古霉素和多粘菌素（双抗），用于鼻咽部标本脑膜炎奈瑟氏菌的检出 PB8013A 90mmX10 PB8013F 70mmX10
• 巧克力GC选择性琼脂平板（培养淋球菌） 添加复合抗生素，用于生殖道、尿道标本中分离淋球菌 PB8136A 90mmX10 PB8136F 70mmX10
28
血平板颜色深 ，发黯，发黑
• 色深问题也就是效期问题 • 羊血红细胞也会存在个体差异 • 同一批产品由于前期与后期受热时间不同也会出现颜色差异 • 另外运输保存不当也会造成未达到效期时颜色会变深 • 存货期长，保存条件不当 • 生产操作失误
29
运输保存不当危害
• 平板培养基琼脂脱落 • 平板培养基出水 • 平板培养基污染 • 平板培养基冷冻
21
淋球菌在巧克力色血平板上的生长
22
MH琼脂平板
• PO0152A 90mmX10 PO1043SA 140mmX5 • 无色或微黄色 • 用于一般细菌琼脂扩散法药物敏感性试验 • 琼脂厚度4mm
厚度的异常会影响抑菌环的直径大小 • HTM(嗜血杆菌) • MH+羊血(肺炎链球菌和其它链球菌) • 真菌药敏
层以上，避免阳光曝晒，避免剧烈振动。 • 尽量减少公司和代理商的存货期。 • 不要用冰柜保存。
31
血平板α、β溶血，苛养菌检出
• 金黄色葡萄球菌的某些株溶血不明显 • 溶血观察与个人经验有关 • 协同溶血试验 • 苛养菌与标本的采集、运输、接种、培养辨认等因素密切相关
32
苛氧菌分离现状
• 不具备苛氧菌分离的培养基 • 未建立标本送检指南，送检标本与接种标本相隔时间太长 • 无CO2培养环境 • 不能辨别菌落 • 无鉴别试剂
33
平板培养基出水
• 出水问题是困扰成品培养基的严重问题，不仅严重影响品质，且是造成 培养基污染的罪魁祸首
• 最主要的原因为存放过程中的温度变化造成平板培养基冷热波动而凝结 出水
• 只能尽量减轻，尚无法完全避免 • 尽量减少平板培养基的存货期
34
平板培养基污染
• 运输保存不当，造成出水是平板培养基污染的主要原因 • 动物血污染造成平板培养基污染 • 杀菌失败造成平板培养基污染 • 除菌失败造成平板培养基污染 • 生产环境不合格引起平板培养基污染 • 生产操作引入平板培养基污染
26
分格平皿培养基
• 分格平皿培养基专为一个标本同时接种两种不同的培养基来分离各种致 病菌而设计
• 只需一次接种即可完成，方便、省时省力、且便于编号及对照。
哥伦比亚血琼脂/伊红美蓝琼脂 哥伦比亚血琼脂/中国蓝玫瑰红琼脂 哥伦比亚血琼脂/3号麦康凯琼脂
27
平板培养基主要问题
• 血平板颜色深 ，发黯，发黑 • 运输保存不当危害 • 平板培养基运输保存注意事项 • 血平板α、β溶血，苛养菌生长 • 平板培养基出水 • 平板培养基污染