玉米雄穗碳氮代谢研究

玉米雄穗碳氮代谢研究

摘要:大田条件下,以农大364和郑单958为材料,对两种基因型玉米各生育时期雄穗可溶性糖､蔗糖以及可溶性蛋白质积累状况进行了研究｡结果表明,随着玉米生育进程的推进,可溶性糖､蔗糖含量呈现先升后降的变化趋势,在散粉期达最高值,说明抽雄期至散粉期是一个碳水化合物积累的过程｡可溶性蛋白质呈现不断下降的变化规律,成熟期降至最低值｡

关键词:玉米;雄穗;可溶性糖;蔗糖;可溶性蛋白质

Study on Carbon and Nitrogen Metabolism of Tassel in Maize

Abstract: Nongda 364 and Zhengdan 958 were adopted for testing the contents of soluble sugar, sucrose, and soluble protein in tassel of maize(Zea mays L.) under field condition. The results indicated that the contents of soluble sugar and sucrose in tassel of two genotypes increased first and then decreased, and reached the peak values at dispersal period, which suggested that it was a process of accumulation of carbohydrate from tasselling to dispersal period. The contents of soluble protein in tassel were in the trend of reduction along with the growing of maize, and attained lowest at mature period.

Key words: maize(Zea mays L.); tassel; soluble sugar; sucrose; soluble protein

植物碳氮代谢是农业研究的重要问题[1],碳水化合物和含氮有机物分别是构成作物产量､品质的物质基础,其变化动态直接影响着植物光合产物的形成､转化以及矿质营养的吸收､蛋白质的合成等[2]｡碳氮代谢强度和协调程度对作物生长发育､各类化学成分的形成与转化具有重要影响,直接或间接关系到作物产量和品质的形成与提高[3]｡关于玉米(Zea mays L.)碳氮代谢的研究主要集中在营养器官上[4,5],而在生殖器官方面尚缺乏系统性研究[6,7]｡雄穗是玉米生殖器官之一,发挥着重要的生理功能｡从植物生理的“源､流､库”学说来看,雄穗既是光合产物供应的重要“库”之一,又由于穗颈富含叶绿体且处在良好的光合环境下,可视为光合产物的“源”及输送养分的“流”,发达的雄穗可为个体繁衍后代提供稳定的条件及竞争能力｡因此了解其代谢生理特点对玉米高产育种以及生殖生长发育调控研究具有现实意义｡

1 材料与方法

1.1 试验材料及试验设计

供试材料为目前在东北主推品种中叶片形态差异较大的两个品种郑单958和农大364｡郑单958属于紧凑型中早熟玉米杂交种,农大364属于平展型中晚熟品种｡

试验于中国科学院东北地理与农业生态研究所德惠农业示范试验基地(东经125°33′,北纬44°12′)进行｡试验地共分为两个小区,每一品种为一个小区,每小

区面积为1 500 m2,南北行向种植｡磷肥､钾肥和部分氮肥作基肥(每小区施入含N ､P2O5､K2O分别为15%､15%､15%的玉米专用复合肥90 kg),其余氮肥于拔节前作追肥(每小区施入NH4NO3 60 kg),管理措施同大田｡

1.2 测定项目及方法

1.2.1 上清液的提取精确称取样品0.05 g于离心管中,加入5 mL水,研磨匀浆,100 ℃水浴加热30 min,4 000 r/min离心10 min,收集上清液于50 mL容量瓶中,沉淀中再加水混匀后离心,3次重复,将上清液定容至50 mL｡

1.2.2 可溶性糖的测定蒽酮试剂:0.15 g蒽酮溶于76 mL浓硫酸加入30 mL 水中｡测定步骤:抽取1 mL样品液于试管中,于冷水浴中加入5 mL蒽酮试剂后混匀,于90 ℃水浴中加热15 min,取出后水浴中冷却,于620 nm处测定吸光度｡

1.2.3 蔗糖的测定蒽酮试剂:0.40 g蒽酮溶于100 mL 88%的硫酸中溶解后冷却备用｡测定步骤:精确吸取样品液10 mL,加入2 mol/L的氢氧化钾溶液2 mL,沸水浴中煮沸10 min｡取出迅速冷却至室温,加水稀释至50 mL,摇匀｡精确吸取稀释液2 mL于干净试管中,加蒽酮试剂6 mL｡摇匀并立即置于沸水浴中加热5 min,取出立即在冷水中冷却(不断摇动),在640 nm处测定吸光度｡1.2.4 可溶性蛋白质含量的测定称取0.50 g玉米子粒放入研钵中,加5 mL pH 7.8的磷酸缓冲液,冰浴研磨,匀浆倒入离心管中,冷冻离心20 min,转速为4 000 r/min,上清液倒入试管中在0~4 ℃下保存待用｡称取100 mg G-250,溶于50 mL 95%的乙醇中,加入85%的正磷酸100 mL(血红色),最后加去离子水定容至1 000 mL(褐色)｡取上清液0.5 mL,加入5 mL G-250蛋白质试剂混匀,5 min后在595 nm处测定吸光度｡

2 结果与分析

2.1 玉米雄穗可溶性糖含量的变化

作物体内碳水化合物的含量大约占干物质总量的90%~95%,碳水化合物能够互相转化和再利用的主要是可溶性糖[8]｡可溶性糖是碳水化合物代谢和暂时贮藏的主要形式,所以在植物代谢中占有重要位置｡花粉的发育和形态建成需要正常的物质代谢和能量供应,光合产物运输到花药后,尤其在花药的药室内壁和中层细胞中有大量的淀粉积累｡淀粉在淀粉酶的催化下转化为可溶性糖,供花粉发育所需[9]｡由测试结果(图1)可知,两个玉米品种的雄穗中可溶性糖含量变化趋势相仿｡在散粉期含量最高,农大364和郑单958可溶性糖含量分别达到47.94和53.50 μg/g,之后随着雄穗的发育逐渐降低,到成熟期均最低｡

2.2 玉米雄穗蔗糖含量的变化

蔗糖是光合作用形成的第一个碳水化合物,它是叶片光合产物的暂存形式｡蔗糖的合成趋向于随光合产物输出情况的改变而改变[10]｡由图2可知,随着玉米生育进程的推进,雄穗中蔗糖含量与可溶性糖含量呈现的变化规律基本一致,抽雄期至散粉期,蔗糖含量逐渐增高,且在散粉期达到最高值,农大364和郑单958雄穗蔗糖含量分别达到12.65和12.p 可溶性蛋白质是植物所有蛋白质组分中最活跃的部分,包括各种酶原､酶分子和代谢调节物,在花粉发育中起着十分重要的作用,对雄蕊和雌蕊正常的生长发育及整个有性生殖过程均具有十分重要的意义[12,13]｡雄穗发育过程中可溶性蛋白质的亏损必然会影响花粉的正常发育｡从图3可以看出,两个玉米品种不同生育时期雄穗中可溶性蛋白质含量变化趋势基本一致,即随着玉米的发育均呈明显下降的趋势｡从抽雄期到成熟期,农大364和郑单958雄穗中可溶性蛋白质含量分别降低了41.21%和42.69%,可见两个玉米品种间可溶性蛋白质含量的降幅比较接近,且不同生育时期的数值相差亦不显著｡一方面可能是由于花粉形成过程中组织需要大量的能量和物质供应使得可溶性蛋白质含量