细胞生物学实验指导书09年

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《细胞生物学实验》教学大纲

《细胞生物学实验》教学大纲课程名称：细胞生物学实验课程编号：12030037课程类别：专业基础课/必修课学时/学分： 24/0.75开设学期：第四学期说明一、课程性质细胞生物学实验是生物科学和生物工程专业一门重要的必修基础课程，在生命学科的本科教学中有着十分重要的地位。

通过实验，不仅使学生加深对细胞生物学理论知识的理解和认证，同时通过对细胞生命现象的观察和亲手操作，使学生获得有关细胞生命活动的感性知识，有效地提高理论课的教学效果，并使学生掌握细胞生物学实验的基本原理、方法和技能，培养和提高学生实验设计和应用各种实验技术的能力，培养和训练学生的创新意识和创新能力，培养严谨的科学态度和实事求是的作风，提高发现问题、分析问题和解决问题的能力，为今后独立从事教学或科学研究打下坚实的基础。

二、教学目标通过细胞生物学实验，使学生们更加牢固地掌握细胞生物学基本知识和基本理论，对细胞的结构和功能有全面、真实的认识，使学生们掌握细胞生物学的基本实验方法和技能。

三、学时分配表序号实验项目实验时数实验类型内容与要求小计实验1细胞膜的渗透性及细胞凝集反应4设计性了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度，掌握细胞凝集反应的实验方法及细胞凝集的原理实验2叶绿体的分离与荧光观察3验证性掌握荧光显微镜的原理和使用方法；观察叶绿体的自发荧光与次生荧光；通过对植物叶绿体的分离，了解细胞器分离的一般原理和方法实验3植物细胞骨架的观察4验证性掌握光学显微镜观察植物细胞骨架的原理和方法实验4鸡血细胞的体外融合6综合性了解PEG诱导细胞融合的基本原理，通过PEG诱导鸡红细胞之间的融合实验，初步掌握细胞融合技术实验5巨噬细胞吞噬现象的观察7综合性通过对小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡血红细胞的活动观察，加深理解细胞吞噬作用的过程和意义；掌握小白鼠腹腔注射给药方法和颈椎脱臼处死法合计24四、实验方法与要求建议本课程采用传统的实验教学方法，2人一组操作，结合多媒体、小组讨论与集体讨论、实验设计、教学录像、细胞生物学小知识和小技巧介绍等多种教学手段，帮助学生通过本课程的学习全面地掌握细胞生物学的基本实验方法与技能以及实验设计的思路，以提高学生从事教学和科学研究的综合素质。

细胞膜的渗透性及巨噬细胞的吞噬作用

华南师范大学实验报告学生姓名何茂辉学号20062501302专业生物科学年级、班级06科三课程名称细胞生物学实验实验项目实验类型□验证□设计□综合实验时间09 年 5 月19 日实验指导老师尤蓉、周仁超实验评分细胞膜的渗透性及巨噬细胞的吞噬作用实验目的：1.通过红细胞的溶血过程的观察,了解细胞膜的渗透性及各种物质进入细胞膜的速度。

2.通过小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程，了解巨噬细胞对大分子或颗粒物质的内吞作用。

实验原理：1.红细胞在低渗液中，细胞很快吸水而胀裂，称为溶血。

在等渗液中，由于有些溶质会进入红细胞内、引起细胞渗透压升高，细胞也会吸水胀裂，由于各种物质透入细胞的速度不同，溶血的时间不同。

2.高等动物具有大小两类吞噬细胞(即巨噬细胞和嗜中性粒细胞)，专司吞噬作用，为非持异免疫功能的重要组成部分。

3.小鼠腹腔注射淀粉肉汤液，可诱导巨噬细胞大量产生,增强巨噬细胞吞噬活性。

实验步骤：细胞膜的渗透性(兔红细胞)1.取1mL兔的抗凝全血于50mL小烧杯中，再加入10mL0.17 mol/L氯化钠，稀释兔血制成兔的红细胞悬液，观察它的特点为一种不透明的红色浑浊液体。

2.取1支试管加入10ml蒸馏水，再加入1ml红细胞悬液，摇动2次混匀，可见溶液由不透明的红色迅速变成红色澄清液3.取6支试管贴上标签，依次加入下列等渗溶液10ml：①0.32M甲醇、②0.32M乙醇、③0.32M丙醇、④0.32M乙二醇、⑤0.32M甘油、⑥0.32M葡萄糖4.向每支试管加入1ml红细胞悬液，摇动2次混匀，观察是否有溶血现象发生，记下溶血时间并给予分析小鼠巨噬细胞的吞噬作用观察1.实验前一天向小白鼠腹腔注射6％淀粉肉汤液(含台盼蓝)1ml2.鸡红细胞悬液制备：取抗凝全血1mL，移入10mL离心管,加入4mL生理盐水混匀, 1500rpm离心5 min。

洗涤2次,最后按压积红细胞体积加生理盐水配成1%鸡红细胞悬液3.小鼠腹腔注射1％的鸡红细胞悬液1ml，轻揉腹部使鸡红细胞分散4.20～30min后,颈椎脱臼法处死小鼠5.将小鼠置于解剖盘中，剪开腹腔，把内脏推向一侧，加适量生理盐水与腹腔液混匀,用吸管吸取腹腔液于试管或小烧杯中备用6.吸取腹腔液1～2滴，制作临时装片7.镜检结果与分析：1、2、思考题1、溶液的渗透压主要与哪些因素有关?对简单盐溶液如何粗略计算出其渗透压? 溶液的渗透压主要与溶液中溶质颗粒总数有关。

细胞生物学实验指导书

实验一普通光学显微镜的结构及其使用一、实验目的1、了解普通光学显微镜的工作原理，掌握光学显微镜的使用方法。

2、熟悉光学显微镜细胞的形态与结构。

二、实验用品普通光学显微镜、生物制片标本、擦镜纸。

三、实验原理和方法1、普通光学显微镜的构造从构造上，主要分三部分：①光学放大系统，为两组玻璃透镜：目镜和物镜；②照明系统：光源、折光镜和聚光镜，有时另加各种滤光片以控制光的波长范围；③机械和支架系统：主要保证光学系统的准确配制和灵活调控。

显微镜的质量主要取决于物镜，物镜是显微镜最主要的光学部件。

物镜的种类很多。

2、显微镜的能力显微镜的能力是质量和性能的标志。

能力包括分辨率、放大率、焦点深度和视场宽度等，其中最重要的是分辨率。

物镜分辨力是指分辨被检样品微细结构的能力。

通常以能清晰地分辨两个物体点的最短距离来表示。

其公式如下：R=0.61λ/N.A.R：分辨率（两点的最短距离）λ：照明光线波长N.A.：物镜数值孔径分辨率以分辨两个点的最短距离表示，R值愈小，分辨能力愈大。

物镜的分辨率与照明光线的波长成反比，与物镜的数值孔径成正比。

3、显微镜的使用①聚光器的调节②光阑的调节③工作距离④油镜的使用4、观察标本注意观察下列结构：①细胞核及核仁：不同细胞的核及核仁――蚕豆根尖切片、兔肝切片（Unna试剂染色）多核及多核仁现象――蛙卵切片、肌肉切片染色体――蚕豆根尖切片、玉米花粉母细胞切片（Giemsa,地衣红或洋红染色）。

②中心体：蝗虫精巢切片（巴西木素染色）。

③线粒体：蚕豆根尖切片、兔肝切片。

④高尔基体：兔肝切片、蚕豆根尖切片（硝酸银或四氧化锇染色）。

四、实验结果简述显微镜的主要结构和操作要领；绘制细胞显微结构图。

实验二线粒体和液泡系的超活染色与观察一、实验目的1、观察植物活细胞内线粒体、液泡系的形态、数量与分布。

2、学习一些细胞器的超活染色技术。

二、实验原理活体染色是指对生活有机体的细胞或组织能着色但又无毒害的一种染色方法。

细胞学实验指导

前言一、医学细胞生物学实验课的目的和要求医学细胞生物学实验课是医学细胞生物学教学的重要组成部分，它既与医学细胞生物学课堂讲授的理论部分密切联系，同时又有它独特的目的和要求：1. 实验是科学理论的实践与论证，通过实验，使学生从感性认识加深对课堂所获得的理性知识的认识和理解。

2. 通过光学显微镜的使用，临时标本的制作、细胞培养等技术操作，使学生掌握医学细胞生物学的基本实验方法和技能。

3. 通过实验，培养同学观察、比较、分析、综合等科学思维方法、独立工作能力和实事求是的科学态度。

4. 通过实验，使学生获得书写细胞生物实验报告、绘图、制表等方面的基本知识和技能训练。

二、医学细胞生物学实验报告的写作实验报告是科学研究的记录，同学们必须学会客观地、真实地记载实验过程和结果。

实验报告的形式一般可分以下三种：1. 文字报告：要求学员将观察所得和实验结果客观地用文字给以准确、详细的描述和记录。

文字力求简洁明了，条理清楚。

2. 绘图: 绘图是医学细胞生物学实验中常用的报告形式之一, 它既是根据所观察标本的真实记录和研究资料, 又可通过描绘学习更精细观察描述。

医学生物学实验绘图不同于一般艺术性绘图。

医学细胞生物学绘图的基本要求: ①绘图前应对标本加以仔细观察研究，并在正确的理解后方可动手绘制。

图中各种结构的大小应与实物成比例，力求准确，明暗之处以点疏密表示，切勿以铅笔涂施阴影；②绘图要求洁净明了，整齐有序，图的位置大小，要求分配适宜，线条力求匀整；③图绘好后，各部结构要用铅笔详细标注名称，标注的方法是：由所标注的部位引出直线，并将其名称注于线的末端，所引的线条应与报告纸上下沿平行，书写字应当横排，字迹要求端正。

3. 制表：将观察所得或实验结果，设计一表格，将有关结果逐项填入，表示其相应关系。

三、实验室规则1. 做好课前预习：实验课前，要认真阅读实验指导及与教材的有关内容，明确实验目的、要求和注意事项，了解实验内容、方法和步骤。

细胞生物学实验课程教学大纲

细胞生物学实验课程教学大纲课程名称：细胞生物学Cell Biology课程编号：1313016215课程类别：专业课总学时数：68 实验时数：24学分：3.5开课单位：生命科学学院生物综合教研室适用专业：生物科学适用对象：本科（四年）一、课程的性质、类型、目的和任务细胞生物学是生物科学专业的一门专业课，它从细胞水平、亚细胞水平和分子水平三个不同层次上研究细胞的结构功能和生命活动的基本规律，位于分子生物学与个体生物学之间，同他们互相衔接，互相渗透。

因此，细胞生物学又是一门承上启下的学科。

细胞生物学实验课程教学以理论课教学为基础，理论与实践相结合，加深对所学知识的理解，对实验仪器要求较高，因此开设本课程的目的是使学生掌握细胞生物学实验设备的操作方法，使学生更加牢固地掌握基础知识，更重要的是培养学生的动手能力和科学研究能力，为学生学习生命科学中的其他相关课程作好基础准备。

同时也使学生具备观察和研究细胞结构与功能的基本方法，学会发现问题和解决问题的基本技能，为毕业后从事生物学相关的科研和教学工作奠定基础。

本课程的任务是通过实验教学，使学生初步掌握暗视野、相差、荧光显微镜使用；掌握细细胞膜渗透现象的原理、观察及影响因素；掌握荧光显微镜的使用方法；叶绿体分离、制片和观察；初步掌握利用细胞化学方法显示细胞内特定化学物质分布与定位的方法；掌握动、植细胞中高尔基体和线粒体的形态结构特征及分布规律；掌握光镜下观察细胞骨架的基本形态结构操作方法；掌握活体染色法的实验原理；液泡和线粒体的活体染色方法；掌握过碘酸雪夫反应显示细胞内糖原；细胞内过氧化物酶的显示方法和原理。

二、本课程与其它课程的联系与分工本课程宜从三年级第一学期开始，以确保学生学习本课程具有所需要的生物化学、微生物生物学、有机化学等基础。

三、课程内容及教学基本要求[1]表示“了解”；[2]表示“理解”或“熟悉”；[3]表示“掌握”；实验一、暗视野、相差、荧光显微镜使用三种特殊光学显微镜的原理和结构特点[2]；三种特殊光镜的使用方法[3]；实验二、细胞膜的渗透性实验细胞膜渗透性原理[1]；渗透现象的观察[2]；各种设置因素对细胞膜通透性的影响[2]；实验三、叶绿体的分离和荧光观察叶绿体分离的一般原理和方法[1]；自发荧光和次生荧光产生的原理[2]；荧光显微镜的使用方法[2]；叶绿体分离、制片和观察[3]；实验四、细胞内特定化学物质的显示细胞内特定化学物质的显示的基本原理[1]；利用细胞化学方法显示细胞内特定化学物质分布与定位的方法[2]；实验五、高尔基体和线粒体的观察动、植细胞中高尔基体和线粒体的形态结构特征[2]；高尔基体和线粒体不同类型细胞中的分布规律[2]；实验六、植物细胞骨架的光学显微镜观察光镜下细胞骨架的基本形态结构[1]；光镜下观察细胞骨架的基本形态结构操作方法[2] ；光镜的使用[2]；实验七、活体染色法显示细胞器活体染色法的实验原理[2]；液泡和线粒体（植物细胞还包括质体）的活体染色方法 [3]；实验八、细胞中多糖和过氧化物酶的定位过碘酸雪夫反应(PAS)—显示细胞内糖原(参照照片和示教片) [2]；细胞内过氧化物酶的显示[2]；实验九、细胞的原代和继代培养原代细胞培养与继代细胞培养基本原理[1]；原代培养与继代培养的基本操作过程[2]；器材及液体的准备和无菌操作[3]；实验十、培养细胞的形态观察和计数培养细胞的形态观察[1]；培养细胞的计数及活细胞的鉴定[2]；实验十一、细胞同步化阻断细胞于G1/S期交界处的TdR双阻断法[2]：机械振荡法收集M期同步化细胞[2]：四、实验方式与要求1．实验前，要求学生预习实验内容，掌握实验目的及设计思路，了解实验步骤。

精编细胞生物学实验指南说明书

生命科学实验指南系列精编细胞生物学实验指南ＳｈｏｒｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＣｅｌｌＢｉｏｌｏｇｙ〔美〕Ｊ．Ｓ．博尼费斯农　等　著章静波　方　瑾　王海杰　谭玉珍　主译陈实平　陈誉华　张钦宪　陈克铨　主校北　京图字：０１唱２００５唱３９５４号内　容　简　介本书内容翔实全面，主要包括：细胞培养、细胞的制备与分离、亚细胞组分分离和细胞器分离、抗体、显微镜技术、细胞蛋白质的特性、电泳与免疫印迹、蛋白标记和免疫沉淀、蛋白质的磷酸化作用、蛋白质转运，以及细胞增殖、衰老和死亡、体外重建、细胞黏附和细胞外基质、细胞的能动性、细胞器运动。

全书还附有各种实用信息和数据，包括试剂与溶液的配制、细胞生物学研究中常用的药物概要和各种常用技术的介绍等。

原书名：ＳｈｏｒｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＣｅｌｌＢｉｏｌｏｇｙ．Ｃｏｐｙｒｉｇｈｔ憋２００３ｂｙＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ．Ｉｎｃ．Ａｌｌｒｉｇｈｔｓｒｅｓｅｒｖｅｄ．ＡｕｔｈｏｒｉｚｅｄｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎｆｒｏｍｔｈｅＥｎｇｌｉｓｈｌａｎｇｕａｇｅｅｄｉ唱ｔｉｏｎｂｙＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．　图书在版编目（ＣＩＰ）数据　精编细胞生物学实验指南／（美）Ｊ．Ｓ．博尼费斯农等著；章静波等译．—北京：科学出版社，２００７　（生命科学实验指南系列）　ＩＳＢＮ９７８７唱０３唱０１７５７９唱４　Ⅰ畅精…　Ⅱ畅①博…②章…　Ⅲ畅细胞生物学实验指南　Ⅳ畅Ｑ２唱３３　中国版本图书馆ＣＩＰ数据核字（２００６）第０７３９８４号责任编辑：李　悦　彭克里　刘　晶／责任校对：朱光光责任印制：钱玉芬／封面设计：王　浩科学出版社出版北京东黄城根北街１６号邮政编码：１００７１７ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｓｃｉｅｎｃｅｐ．ｃｏｍ双青印刷厂印刷科学出版社发行　各地新华书店经销倡２００７年１月第　一　版２００７年１月第一次印刷印数：１—３０００开本：７８７×１０９２　１／１６印张：５４１／４字数：１２４２０００定价：１２０畅００元（如有印装质量问题，我社负责调换枙科印枛）译校者名单译　者　章静波（中国协和医科大学基础医学院）董　敏（中国医学科学院基础医学研究所）王艳辉（中国医学科学院基础医学研究所）熊伟鹏（中国医学科学院基础医学研究所）陈实平（中国医学科学院基础医学研究所）冯　若（郑州大学医学院）刘书漫（郑州大学医学院）崔景彬（郑州大学医学院）陈鲤翔（郑州大学医学院）朱自强（中国医学科学院基础医学研究所）刘　伟（中国医学科学院基础医学研究所）王艾琳（北华大学医学院）安倍莹（北华大学医学院）曲　莉（北华大学医学院）宋　艳（北华大学医学院）赵永娟（中国医学科学院基础医学研究所）方　瑾（中国医科大学基础医学院）张惠丹（中国医科大学基础医学院）赵伟东（中国医科大学基础医学院）陈　澄（中国医科大学基础医学院）王海杰（复旦大学上海医学院）谭玉珍（复旦大学上海医学院）王莎丽（中国医学科学院基础医学研究所）审校者　陈克铨（中国协和医科大学基础医学院）陈实平（中国医学科学院基础医学研究所）章静波（中国协和医科大学基础医学院）张钦宪（郑州大学医学院）刘　伟（中国医学科学院基础医学研究所）朱自强（中国医学科学院基础医学研究所）方　瑾（中国医科大学基础医学院）陈誉华（中国医科大学基础医学院）译　者　序细胞生物学的重要性及其在生命科学中的重要地位已被科学家们所公认。

细胞生物学实验指导

细胞生物学实验指导实验一、显微镜的结构与使用方法一、实验目的1.认识显微镜的构造2.学会独立操作显微镜二、仪器和材料显微镜、擦镜纸、装片三、实验内容1.学生按编号把自己的显微镜取出，放在试验台上，在教师的指导下熟悉显微镜各部分的构造及用途，然后进行操作练习。

先用低倍镜进行对光联系，使视野明亮而均匀。

如果使用双筒目镜，还应学习目镜间距的调节。

在转换高倍物镜观察，此时应注意它的视野亮度与低倍物镜有无区别？并思考通过哪几种方法调节使得高倍物镜的视野达到要求的亮度。

2.取已制备好的装片进行观察：按低倍镜使用步骤和方法进行操作练习。

注意要使观察到的像向前移动时，玻片标本应向那个方向移动？欲使观察到的像向右移动时，拨片标本应向那个方向移动？3.观察制备好切片：细胞核、中心体、胞间连丝、有丝分裂、减数分裂、高尔基体等。

4.观察完毕后，按正规要求取下玻片，把显微镜收好。

四、作业绘制2-3中细胞结构实验二、Feulgen反应显示DNA（一）实验目的1．掌握临时制片法。

2．熟悉Feulgen反应的原理及操作步骤。

3．观察细胞中DNA的分布。

（二）实验原理Feulgen在1924年发明一种对DNA特异的组织化学染色反应，故称Feulgen反应。

DNA经酸（1mol/L HCl）水解后，DNA分子中的嘌呤和脱氧核糖连接的配糖键被打开，脱氧核糖的一端释放出醛基，并在原位与Schiff试剂反应形成特异性的紫红色产物。

该产物能特异地吸收峰值为550~570nm的光波。

并且在一定的浓度范围内，对550~570nm光波的吸收值与DNA 含量成正比关系，既符合化学计量学关系。

此法既可定位用于细胞或组织化学染色反应，观察DNA的分布，又可用显微分光光度计和图像分析仪对细胞或组织中DNA的含量进行定量分析。

紫红色的产生，是由于反应产物的分子内含有醌基，醌基是一个发色团，所以具有颜色。

对照组或采取不经盐酸处理，或预先用热三氯醋酸或DNA酶处理，抽提去细胞中的DNA而得到阴性反应。

细胞生物学实验教学指导书

细胞生物学实验教学指导书有丝分裂实验一、实验目的学习植物根尖压片方法的基本技术。

熟悉细胞有丝分裂各个时期的形态特征及染色体的变化，并学会染色体简易永久片的制片技术。

二、实验原理有丝分裂是体细胞分裂的主要方式，一般发生在植物根尖或茎尖的分生组织中。

在有丝分裂时，细胞核与细胞质有很大的变化，但以细胞核内染色体的变化最为明显，而且是有规律地进行。

各种生物染色体在数目上和形态上是相对恒定的，并随科属种的不同而具有一定的特征。

洋葱体细胞中有8对共16条染色体，在有丝分裂过程中，每个染色体能复制一份，然后分配到两个子细胞中，所以两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目、形态和性质上都是相同的。

在细胞遗传学研究中，人们常常需要了解某一物种的染色体数目，而最有效的方法就是观察细胞有丝分裂的中期，这样能得到较为准确的结果。

三、实验材料洋葱(Aillum cepa)根尖蚕豆(Vicia faba)根尖四、实验器具和药品试剂显微镜、培养箱、恒温水浴锅、温度计、镊子、解剖针、刀片、载玻片、盖玻片、烧杯、量筒、滴瓶、切片架、切片盒、凹面玻片、青霉素瓶、大培养皿、纱布、吸水纸、铅笔、吸管。

卡诺氏固定液(甲醇或95%乙醇3份，冰醋酸1份)、改良苯酚品红染色液(见附录:实验试剂的配制)、0.002M8-羟基喹啉水溶液、0.05—0.2%秋水仙素溶液、对二氯苯饱和水溶液、1N HCl、95%乙醇、正丁醇、加拿大树胶。

五、实验方法和步骤(一)材料准备选取蚕豆(或小麦、玉米等)种子放在烧杯中，放清水浸泡过夜，使种子吸水胀大后倒出，再用清水洗几次，用多层纱布包好种子，放进20,25?培养箱内培养。

当根尖长1,3cm 时，即可以进行预处理。

(二)预处理为了有利于对有丝分裂中染色体的观察和计数，在固定之前应用理化因素进行预处理，这样可以改变细胞质的粘度，抑制或破坏纺锤丝的形成，促使染色体缩短和分散等。

一般是在分裂高峰前处理1.5小时以上。

处理的方法如下: 1(秋水仙素水溶液常用浓度为0.05,0.2%，室温下处理2,4小时。

《细胞生物学》实验指导书(不太全供参考).doc

《细胞生物学》实验指导书（不太全供参考）适用专业:生物科学、生物技术实验目录实验一植物原生质体的分离与融合•••]实验二动物细胞原代培养•••3实验三细胞传代培养…彳实验四植物细胞骨架的光学显微镜观察••Y实验五细胞凋亡的诱导、观察与检测“I实验六环境因素诱变染色体改组的观察实验七红细胞膜蛋白的分离及其电泳检测 (11)实验一植物原生质体的分离与融合实验项目类型:综合性所属课程名称：《细胞生物学》实验计划学时：7学时一、实验目的1.掌握原生质体分离的原理与技术；2.了解细胞融合的基本原理及应用；3.初步掌握PEG融合法和电融合法.二、实验原理植物原生质体是去除了细胞壁的裸露的细胞.原生质体可以从培养的单细胞、愈伤组织和植物器官（叶等）获得.但一般认为从叶肉组织分离原生质体是理想的材料，其优点是材料来源方便，供应及时，而且遗传性较为一致.原生质体的分离通常采用酶解法，对细胞壁成分进行降解后获得.原生质体培养的条件和对营养的要求与组织、细胞相似.但原生质体由于除去了细胞壁,所以需要一定浓度的渗透压稳定剂来保持原生质体的稳定.常用的渗透压稳定剂包括甘露醇、山梨醇、蔗糖等. 其次，还应当考虑取材、酶的种类和纯度、酶液的渗透压、酶解时间及温度等因素对分离原生质体的影响.2个或2个以上的细胞合并成为1个细胞的现象称为细胞融合.细胞融合的主要方法有病毒法、聚乙二醇(PEG)法和电融合3种方法，其原理基本相同，都是两细胞接触点的膜分子发生重组,然后由于表面张力作用,形成一个球形细胞. 原生质体分离融合和培养的意义：1.除去了细胞壁为植物细胞之间的融合扫平了障碍，为制造新杂种开辟了道路.植物原生质体融合和培养在植物遗传工程和育种研究上具有广阔的应用前景.它是植物同源、异源多倍体获得的途径之一，它不仅能克服远缘杂交有性不亲和障碍，也可克服传统的通过有性杂交诱导多倍体植株的麻烦，最终将野生种的远缘基因导入栽培种中，原生质体融合技术可望成为作物改良的有力工具之一.2.原生质体可摄入外源DNA,细胞器、细菌或病毒颗粒,这些特性与植物全能性相结合为高等植物的遗传饰变打下基础.3.获得细胞无性系和选育突变体的优良起始材料.三、实验仪器与材料1.材料:油菜叶子、白菜花2.溶液或试剂:(1)洗涤液:甘露醇0.7mol/L,CaC12 • 2H2O3.5mmol/L,KH2PO4 0.7mmol/L(pH 5.6),高压灭菌；(2)混合酶液:1.5%纤维素酶,1%果胶酶溶于洗涤液中(pH 5.6).(3)50%PEG(4)高pH高钙稀释液：(5)20%蔗糖溶液(6)DPD培养基：3.仪器或其他用具:超净工作台、灭菌锅、显微镜、恒温培养箱、镶子、解剖刀、剪子、接种针、铝饭盒、锡箔纸、记号笔、橡皮筋、试剂瓶、三角瓶移液管、培养皿、酒精灯等.四、实验步骤(一)原生质体的制备：1.取材:取新鲜油菜叶和白菜花瓣自来水洗净，再用70%乙醇浸泡30S,0.5%次氯酸钠消毒lOmin,无菌水冲洗5次.2.酶解：材料切成1mm宽细丝，加入适量酶液，置摇床上(60〜70rpm),在25〜28°C黑暗条件下，酶解5〜7h.3.分离：用200目网过滤除去未完全消化的残渣，在lOOOrpm条件下离心5分钟,弃上清.加入3〜4ml洗涤液，相同条件下离心2-5分钟，弃上清，留1ml洗液.用滴管将混有原生质体的1ml洗液吸出，轻轻铺于20% 蔗糖溶液上(5ml离心管装3ml 20%蔗糖溶液)，在lOOOrpm条件下离心5-10分钟，由于密度梯度离心的作用，生活力强状态好的原生质体漂浮在20%的蔗糖与洗涤液之间，破碎的细胞残渣沉入管底.用200 u 1移液器轻轻将状态好的原生质体吸出（注意尽可能不要吸入下层的蔗糖溶液），放入另一干净的离心管中，加4ml洗涤液,1000rpm离心2-5分钟, 弃上清.（二）原生质体融合：1.将原生质体用DPD调节浓度为1*105个/mL.2.将原生质体混合物滴入小培养皿，静置8〜10分钟.3.然后滴入50%的PEG溶液，静置2分钟.4.依次间隔5分钟加入0.5ml、1 ml和2 ml高钙高pH洗涤液.注意在第二、三次洗液加入前,用移液器轻轻吸走部分溶液，但不能吸干，否则原生质体破碎死亡;最后用液体培养基洗1〜2次.制片，镜检.五、实验报告画出观察到的融合细胞，并计算融合率.六、思考题1.你认为要获得数量多、生活力强的原生质体，在实验中应注意那些问题？增多数量的方法:多取材且尽量切碎，增加酶浓度，提高酶解温度，延长酶解时间，操作轻柔，勿使原生质体破碎等.提高生活力的方法:取新鲜材料,采用合适的酶浓度、作用温度和时间2.举例说明原生质体融合的应用价值.实验二动物细胞原代培养实验项目类型:基础性所属课程名称：《细胞生物学》实验计划学时：4学时一、实验目的1.掌握动物细胞原代培养的基本方法和操作过程；2.熟悉原代培养细胞观察方法.二、实验原理用直接从机体获取的细胞进行的培养称为原代培养.原代培养是建立各种细胞系的第一步，该技术可以在体外进行各种类型细胞的增殖、遗传、变异、分化和脱分化、恶变与去恶变等研究.分为组织块培养法和消化法两种.三、实验仪器与材料1.材料:小鼠心、肝、脾、肾等2.溶液或试剂：(1)RPMI-1640培养基、小牛血清.(2)0.25%胰蛋白酶、(pH 5.6).(3)Hanks液3.仪器或其他用具:CO2培养箱、倒置显微镜、超净工作台、高压锅、水浴锅、解剖器械、培养瓶、微量加样器、吸管、移液管、酒精灯、酒精棉球等.四、实验步骤1.处死小鼠:将小鼠用颈椎脱臼法处死，放入75%酒精种浸泡消毒.2.取材:在超净工作台中用灭菌的解剖器械剖开小鼠腹腔，辨认并取下肝脏、脾脏和肾脏，放入灭菌的培养皿中，加入Hanks液清洗，然后加入2mL胰蛋白酶液,研磨并过滤.3.将液体转移到离心管,1200rpm离心5min收集细胞,加入适量培养液,C02培养箱培养.4.观察:逐日在倒置镜下观察细胞生长情况.五、实验报告画出细胞贴壁前和贴壁后的形态.六、思考题试述细胞原代培养成功的条件？实验三细胞传代培养实验项目类型:基础性所属课程名称：《细胞生物学》实验计划学时：3学时一、实验目的1.熟练掌握贴壁细胞传代的培养方法；2.观察传代细胞贴壁、生长、繁殖过程中细胞形态的变化.二、实验原理离体培养的细胞群体增殖达到一定密度时，细胞的生长和分裂速度就会减慢甚至停止，如不及时分离传代培养,细胞将逐渐衰老死亡.传代培养是指细胞从一个培养瓶以1:2或其它比率转移，接种到另一培养瓶的培养.贴壁培养细胞的传代通常采用胰蛋白酶消化,把细胞分散成单细胞再传代.三、实验仪器与材料1.材料:原代培养的小鼠细胞或Hela细胞2.溶液或试剂：(1)RPMI-1640培养基、小牛血清.(2)0.25%胰蛋白酶、(pH 5.6).(3)Hanks液3.仪器或其他用具:CO2培养箱、倒置显微镜、超净工作台、高压锅、水浴锅、培养瓶、微量加样器、吸管、移液管、酒精灯、酒精棉球等.四、实验步骤1.将长成单层的细胞从二氧化碳培养箱中取出,在超净工作台中倒掉瓶内的培养液，加入少许消化液.(以液面盖住细胞为宜)，静置5~10分钟.2.在倒置镜下观察被消化的细胞，如果细胞变圆,相互之间不再连接成片，这时应立即在超净台中将消化液倒掉，加入3〜5ml新鲜培养液,吹打, 制成细胞悬液.3.将细胞悬液吸出2ml左右，加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3ml 左右培养液，盖好瓶塞，送回二氧化碳培养箱中，继续进行培养.五、实验报告分别画出贴壁生长的小鼠细胞和Hela细胞,并说明二者的不同.六、思考题写出细胞传代培养成功的条件？实验四植物细胞骨架的光学显微镜观察实验项目类型:基础性所属课程名称：《细胞生物学》实验计划学时：3学时一、实验目的了解细胞骨架的结构特征及其制备技术二、实验原理细胞骨架是由蛋白质丝组成的复杂网状结构，根据其组成成分和形态结构可分为微管、微丝和中间纤维.它们对细胞形态的维持，细胞的生长、运动、分裂、分化，物质运输，能量转换，信息传递，基因表达等起到重要作用.用适当浓度的Triton X-100处理细胞时，可将细胞质膜和细胞质中的蛋白质和全部脂质溶解抽提，但细胞骨架系统的蛋白质不受破坏而被保存，经戊二醛固定，考马斯亮蓝R250染色或间接免疫荧光标记以后，可在显微镜下观察到细胞骨架结构.三、实验仪器与材料1.材料:洋葱鳞茎和口腔上皮细胞2.溶液或试剂：(1)M-缓冲液(2)6mmol/L(pH 6.8)磷酸缓冲液(3)l%Triton X-100(用M-缓冲液配制)(4)0.2%考马斯亮蓝R250(5)3%戊二醛3.仪器或其他用具:光学显微镜、50ml烧杯、玻璃滴管、容量瓶、试剂瓶、载玻片、盖玻片、镶子、小剪刀、吸水纸、擦镜纸等.四、实验步骤1.撕取洋葱鳞叶内表皮若干片,大小约lcm2,置于青霉素小瓶或小烧杯中.2.用磷酸缓冲液(PBS)浸泡片刻.3.吸去磷酸缓冲液，用1% TritonX-100处理20分钟抽提细胞骨架以外的蛋白质,从而使骨架图像更加清晰.4.吸去TritonX-100,用M-缓冲液洗3次，每次3分钟.M-缓冲液有稳定细胞骨架的作用.5.用3%戊二醛固定15-20分钟6.用PBS洗3次，每次3分钟7.考马斯亮蓝染色15分钟8.蒸馅水洗2次9.置于载玻片上，盖上盖玻片，在光学显微镜下观察.五、实验报告绘出植物细胞骨架微丝结构图.六、思考题说出各步骤的目的和一些重要试剂的在此处的作用.实验五细胞凋亡的诱导、观察与检测实验项目类型:创新设计性实验所属课程名称：《细胞生物学》实验计划学时：9学时一、实验目的1.了解细胞凋亡的概念和原理;2.掌握细胞凋亡诱导的方法;3.认识细胞凋亡的特征.二、实验原理人体内的细胞注定是要死亡的，目前人们已经知道细胞的死亡起码有两种方式，即细胞坏死与细胞凋亡.坏死是细胞受到强烈理化或生物因素作用引起细胞无序变化的死亡过程.表现为细胞胀大，胞膜破裂，细胞内容物外溢，核变化较慢,DNA降解不充分，引起局部严重的炎症反应.凋亡是细胞受到内、外因子刺激后发生的由基因调控的生理性死亡行为.其细胞及组织的变化与坏死明显不同.细胞凋亡的形态学变化: 首先细胞体积缩小，连接消失，与周围的细胞脱离，然后胞质密度增加, 核质浓缩，核膜核仁破碎,DNA降解,胞膜形成小泡，最终为为几个凋亡小体，无内容物外溢,因此不引起周围的炎症反应，凋亡小体可迅速被周围专职或非专职吞噬细胞吞噬.凋亡细胞DNA的有控降解是一种内源性核酸内切酶作用的结果,该酶在核小体连接部位切断染色体DNA,这种降解表现在琼脂糖凝胶电泳中就呈现特异的梯状Ladder图谱,而坏死呈弥漫的连续图谱.三、实验仪器与材料1.鸡血细胞2.溶液或试剂：生理盐水,20mmol/LCaC12顺伯，姬姆萨染色剂，Tris.HCl,SDS, EDTA,乙醇，甲醇，蛋白酶K.3.仪器或其他用具:超净工作台、灭菌锅、显微镜、恒温培养箱、镶子、解剖刀、剪子、接种针、铝饭盒、锡箔纸、记号笔、橡皮筋、试剂瓶、三角瓶移液管、培养皿、酒精灯等.四、实验步骤（一）细胞凋亡的诱导：1.采鸡血10ml,加0.85%的生理盐水混匀,1200r/min离心5min,弃上清液（重复三次），制备红细胞悬液，然后加入50ml血细胞保存液混匀放于4°C冰箱中备用.2.取4个试管，各加入鸡血细胞保存液2ml,在1号管中加入2ml生理盐水作为阴性对照,2号试管加入2ml 10ug/ml的顺伯溶液作为阳性对照;3号试管中加入2ml 20mmol/L的CaC12溶液进行胁迫处理;4号试管不加任何物质，实验时煮沸5 min使细胞坏死.（二）细胞凋亡的形态学观察：1.处理4h取样，用生理盐水稀释5倍，各取50ul细胞悬液均匀涂布于5 片载玻片上,晾干.2.用甲醇固定2min,然后在载玻片上滴加适量姬姆萨染液染色lOmin.3.用蒸馅水轻轻洗去染液，室温晾干，在光学显微镜下观察细胞形态变化.4.照相，并对试验组细胞进行凋亡计数统计.（三）DNA梯状条带的检测：1.离心收集鸡血细胞，弃上清.2.加入1ml的细胞裂解缓冲液重悬，转入1.5ml离心管中，加入蛋白酶K （500ug/ml）20 n 1,混匀.3.在65°C恒温水浴锅中水浴30min（也可转入37°C水浴12〜24h）,间歇振荡离心管数次.4.于台式离心机以12000 rpm离心5min,取上清液入另一离心管中.5.加2倍体积异丙醇，倒转混匀后，可以看见丝状物，用100ul吸头挑出, 或12,000转/分离心5分钟，弃上清,晾干.6.用50ulTE 缓冲液(pH8.0)溶解沉淀,并加入RNase A(10ug/ul)5ul,于37 °C 保温10〜15分钟.7.1.2 %琼脂糖凝胶,75 V电压，电泳45 min左右，8.紫外灯下观察并照相.(琼脂糖凝胶电泳:称取 1.2克琼脂糖加入100ml1*TBE),加热使之溶解，取一个凝胶模子，两端用胶布封好，水平放置.将制孔器(即梳子)放在模子一侧约0.5cm处，其底部距模子约1mm.待琼脂冷至约70°C时，加入10ul 0.5mg/ml EB,混匀，倒入模子，待冷却凝固后，取下梳子，撕去两端胶布,放入电泳槽中，使有加样孔的一端放在负极一端.在电泳槽中加入1*TBE至超过凝胶表面约1mm.加入DNA 电泳样:1.5ul DNA 。

细胞生物学实验指导

实验一动物细胞的传代培养一、实验目的1．熟悉细胞培养过程中的无菌操作技术。

2．了解细胞传代培养的基本方法和主要操作步骤二、实验原理细胞培养(cell culture)是指从机体内取出某种组织或细胞，模拟机体内的生理条件使其在体外生存、生长和繁殖的过程。

细胞的体外培养在细胞生物学和医学研究领域有着极为广泛的用途，这一技术已成为研究细胞生理、细胞增殖、细胞遗传、细胞癌变和细胞工程等课题的一项不可缺少的手段。

细胞培养技术的突出优点在于能为研究者提供大量的生物性状相同的细胞作为研究对象，便于人们在体外利用各种不同的方法从不同的角度研究细胞生命活动的规律。

另外，利用细胞培养技术还可使人们较为方便地研究各种物理、化学和生物因素对细胞结构和功能的影响。

细胞培养可分为原代培养和传代培养2种情况。

所谓原代培养(primary culture)是指直接从机体取出组织或细胞后所进行的首次培养。

而传代培养(subculture)是指当原代培养的细胞增殖到一定密度后，将其从原培养容器中取出，以1：2或其他比例转移到另一个或几个容器中所进行的再培养。

传代培养可简称传代。

在体外培养过程中，要使细胞能正常地生长、繁殖，需经常对其进行传代。

传代的累积次数就是细胞的代数。

在从事细胞培养工作时常常会接触到细胞系(cell line)和细胞株(cell strain)这两个容易混淆的概念。

一般认为，细胞系指通过原代培养并经传代后所形成的细胞群体，由于细胞系来源于原代培养，而原代培养物中所含的细胞种类较多，故一个细胞系往往由多个生物学性状不同的细胞群体所组成，而细胞株是利用单细胞分离培养法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中选择出的细胞群体，一个细胞株往往具有特殊的生物学性状或标记并可持续存在。

细胞培养是一种程序复杂、条件较多且要求严格的实验性工作。

由于细胞在体外的生长、繁殖会受到温度、营养物质、酸碱度、渗透压及微生物等多种因素的显着影响，故细胞培养工作的各个环节如培养器皿清洗消毒、营养液配制和除菌、pH值调整、温度调节等操作都有严格的要求和规定，特别要注意无菌操作，这是细胞体外培养成败的关键。

细胞质流动及其影响因素液泡系的活体染色

华南师范大学实验报告学生姓名何茂辉学号20062501302专业生物科学年级、班级06科三课程名称细胞生物学实验实验项目实验类型□验证□设计□综合实验时间09 年 6 月 2 日实验指导老师尤蓉、周仁超实验评分细胞质流动及其影响因素液泡系的活体染色实验目的：1.观察植物细胞质流动现象,了解影响细胞质流动的因素。

2.掌握细胞活体染色的原理和技术。

实验原理：1.细胞质流动现象的产生，是细胞骨架中微丝肌动蛋白与肌球蛋白相互滑动的结果。

2．细胞质流动要消耗能量，受各种因素诸如温度、渗透压及各种离子的影响。

3.液泡是细胞内浓缩产物的主要场所，具有重要的功能。

中性红是液泡的特殊染色剂，只将液泡染成红色。

对于活细胞，细胞质和细胞核不会被染色。

实验步骤：细胞质流动及其影响因素1.载玻片，滴1～2滴蒸馏水2.紫鸭趾草雄蕊花丝(黑藻嫩叶)装片3.观察细胞质流动4.吸水纸吸干水，加试剂，记录细胞质停止流动的时间5.吸水纸吸干，加清水，观察流动是否能恢复植物液泡系的活体染色1.取一干净载玻片，滴一滴1/3000中性红染液2.用刀片将初生的黄豆根尖切一纵薄片，置染液中，染8min3.用吸管吸Ringer液或蒸馏水滴在染液周围，使染液冲淡，吸去再换水使染液近无色4.用盖玻片盖在样品上，吸去多余水份,观察结果与分析：细胞质流动及其影响因素结果思考题：1. 如何理解细胞质流动原理？细胞质流动原理是细胞骨架中微丝肌动蛋白与肌球蛋白相互滑动的结果。

2. 胞质环流有何特点? 为什么?特点：细胞质成薄层沿着细胞膜以一定的速度和方向循环流动原因：大液泡在细胞的中央，而细胞质只是贴壁的一层，因此细胞质只能沿着细胞膜循环流动3.黄豆根尖经中性红超活染色，为什么看到生长点的细胞中液泡多，而且染色深，延长区细胞中液泡数量变少，染色浅因为生长点的细胞分裂旺盛，没有分化，含有较多且少的液泡。

而延长区得细胞已经分化，细胞内一般只含有一个大液泡。

《细胞生物学实验》课程教学大纲

《细胞生物学实验》课程教学大纲课程名称(中文) 细胞生物学实验课程名称(英文) Experiment of Cell Biology课程编号022410353课程性质独立设课课程属性基础课必修教材及实验指导书名称王金发编著细胞生物学科学出版社 2003王金发何炎明主编细胞生物学实验教程科学出版社 2004学时学分:学时 54实验学分 2开出时间：三年级五学期适用专业生物科学、生物技术、生物技术应用、生态学先修课程生物学基础、生物化学、细胞生物学一、课程简介及基本要求细胞生物学实验课程是生命科学学院本科各专业一门重要的必修基础课程，在生命学科的本科教学中有着十分重要的地位。

课程内容包括基础验证和基本技能性实验；综合性实验和开放式、研究型、创新性实验三大类。

基础验证和基本技能性实验主要是配合理论课的教学，使学生加深理解和掌握有关的知识，同时能够规范地掌握细胞生物学研究的基本操作与基本的实验技能。

综合性实验和开放式、研究型、创新性实验，目的旨在培养和提高学生实验设计和应用各种实验技术的能力，培养和训练学生的创新意识和创新能力，培养严谨的科学态度和实事求是的作风，提高发现问题、分析问题和解决问题的能力，为今后独立从事科学研究打下坚实的基础。

二、课程实验目的要求1. 配合理论课教学，加深和巩固所学的知识。

2. 掌握细胞生物学研究有关的基本技术，学习先进的研究方法和技能。

3. 通过开放式、研究型、创新性实验训练，培养和提高学生的实验设计能力，实验动手能力以及文献查阅、论文写作的能力。

4. 通过开放式、研究型、创新性实验训练，培养学生的科学思维方法，提高发现问题、分析问题和解决问题的能力。

在实验教学过程中，要求学生除了掌握基本的操作技能外，实验室还做到全开放，为学生提供进行开放式、研究型、创新性研究的场所，学生可以个人或小组的形式根据自己所学知识、兴趣设计研究课题进行实验，期末要提交研究论文，并做成ppt进行课堂交流。

细胞膜的渗透性及巨噬细胞的吞噬作用

2.通过小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程，了解巨噬细胞对大分子或颗粒物质的内吞作用。

实验原理：1.红细胞在低渗液中，细胞很快吸水而胀裂，称为溶血。

在等渗液中，由于有些溶质会进入红细胞内、引起细胞渗透压升高，细胞也会吸水胀裂，由于各种物质透入细胞的速度不同，溶血的时间不同。

2.高等动物具有大小两类吞噬细胞(即巨噬细胞和嗜中性粒细胞)，专司吞噬作用，为非持异免疫功能的重要组成部分。

3.小鼠腹腔注射淀粉肉汤液，可诱导巨噬细胞大量产生,增强巨噬细胞吞噬活性。

细胞生物学实验指导书09年

细胞生物学实验指导书09年实验一普通光学显微镜的构造和使用一、目的要求1了解显微镜的基本构造和使用方法2 掌握油镜的原理和使用方法二、显微镜的基本结构及油镜的工作原理1．显微镜的基本构造光学部分：接目镜、接物镜、照明装置（聚光镜、虹彩光圈、反光镜等）。

机械部分：镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、载物台转移器、粗调节器、细调节器等部件。

2．显微镜的放大倍数和分辨率放大倍数=接物镜放大倍数×接目镜放大倍数显微镜的分辨率：表示显微镜辨析物体（两端）两点之间距离的能力3．油镜的使用原理当光线由反光镜通过玻片与镜头之间的空气时，由于空气与玻片的密度不同，使光线受到曲折，发生散射，降低了视野的照明度。

若中间的介质是一层油（其折射率与玻片的相近），则几乎不发生折射，增加了视野的进光量，从而使物象更加清晰。

三、器材1．永久切片2. 溶液或试剂：香柏油、二甲苯。

3. 仪器或其他用具：显微镜、擦镜纸等。

四、操作步骤1．观察前的准备（1）显微镜的安置，检查零件是否齐全，镜头是否清洁。

（2）调节光源2．显微镜观察（1）低倍镜观察（2）高倍镜观察（3）油镜观察：高倍镜下找到清晰的物象后，提升聚光镜，在标本中央滴一滴香柏油，使油镜镜头浸入香柏油中，细调至看清物象为止。

3．显微镜用毕后的处理观察完毕，上升镜筒，用擦镜纸和二甲苯清洗镜头，后将镜体全部复原。

五、思考题1．用油镜观察时应注意哪些问题？在载玻片和镜头之间滴加什么油？起什么作用？2．为什么在使用高倍镜及油镜时应特别注意避免粗调节器的误操作？实验二胞间连丝的观察一、实验目的观察植物细胞的胞间连丝，加深对胞间连丝功能的认识．二、实验原理植物细胞的细胞壁上有许多原生质的细丝，称胞间连丝。

相邻细胞的胞间连丝相互联接，在细胞间的物质运输与信息传递中起桥粱作用，并使细胞的各种生理活动协调一致，使植物体成为统一的有机体。

用合适的植物细胞为材料，经简单处理，即能方便地看到胞间连丝。

细胞生物学实验指导书(自编) (2)

《细胞生物学》（II）实验指导学号学院专业班级姓名二〇一三年八月目录实验一普通光学显微镜及其使用 (3)实验二细胞减数分裂 (8)实验三细胞骨架的显微镜观察 (11)实验四RNA的细胞化学——Brachet反应 (13)实验五果蝇唾液腺细胞巨大染色体的观察 (15)实验六小鼠巨噬细胞吞噬的观察 (20)实验七动物骨髓细胞染色体标本的制备 (22)实验八动物细胞融合 (25)实验九人体外周血淋巴细胞培养与核型分析 (29)实验十常规组织切片制作法 (31)实验一普通光学显微镜及其使用实验目的1.理解普通光学显微镜的机械系统和光学系统的结构组成及其工作原理。

2. 熟练掌握普通光学显微镜的使用方法并进行实际操作。

一、显微镜的主要构造普通光学显微镜的构造主要分为三部分：机械部分、照明部分和光学部分。

1. 机械部分（1）镜座：是显微镜的底座，用以支持整个镜体。

（2）镜柱：是镜座上面直立的部分，用以连接镜座和镜臂。

（3）镜臂：一端连于镜柱，一端连于镜筒，是取放显微镜时手握部位。

（4）镜筒：连在镜臂的前上方，镜筒上端装有目镜，下端装有物镜转换器。

（5）物镜转换器(旋转器)：接于镜筒的下方，可自由转动，盘上有4～6个圆孔，是安装物镜部位。

转动转换器，可以调换不同倍数的物镜，当听到碰叩声时，此时物镜光轴恰好对准通光孔中心。

光路接通，即可进行观察；（6）镜台(载物台)：在镜筒下方，形状有方、圆两种，用以放置玻片标本，中央有一通光孔，我们所用的显微镜其镜台上装有玻片标本推进器(推片器)，推进器左侧有弹簧夹，用以夹持玻片标本，镜台下有推进器调节轮，可使玻片标本作左右、前后方向的移动。

（7）调节器：是装在镜柱上的大小两种螺旋，调节时使镜台作上下方向的移动。

①粗调节器(粗螺旋)：移动时可使镜台作快速和较大辐度的升降，通常在使用低倍镜时，先用粗调节器迅速找到物象。

②细调节器(细螺旋)：多在运用高倍镜时使用。

图1普通正置显微镜结构图图2倒置光学显微镜结构图2．照明部分装在镜台下方，包括光源，集光器。