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细胞染色操作
细胞染色操作细胞染色是一种广泛应用于生物学研究的技术方法，通过染色剂将细胞的结构、组成以及功能等信息可视化。
细胞染色操作是进行细胞染色的关键步骤，下面将介绍细胞染色操作的基本流程和常用染色方法。
一、细胞染色操作的基本流程1. 固定：细胞染色前，需要将细胞固定在载玻片上，以保持其形态和结构。
常用的固定剂有甲醛和乙醛等，将细胞浸泡在固定剂中，使细胞膜和细胞内部结构固定。
2. 渗透：细胞固定后，需要将染色剂渗透到细胞内部，以便染色剂能够与细胞内的目标物质结合。
常用的渗透剂有甲醇、乙醇和醋酸等，将细胞浸泡在渗透剂中，使染色剂能够进入细胞内。
3. 染色：在细胞渗透后，可以选择合适的染色方法进行染色。
常见的染色方法包括荧光染色、核染色和蛋白质染色等。
荧光染色是利用荧光染料对细胞进行标记，常用的荧光染料有荧光素和荧光蛋白等。
核染色可以用来观察细胞核的形态和数量，常用的核染色剂有伊红和苏木精等。
蛋白质染色则是用来检测细胞内特定蛋白质的分布和表达水平，常用的蛋白质染色方法有免疫组织化学染色和免疫荧光染色等。
4. 洗涤：染色后，需要将细胞表面的多余染色剂洗去，以减少背景噪音的干扰。
洗涤的次数和时间可以根据具体染色方法和试剂的要求来确定。
5. 固定封片：细胞染色完成后，需要将载玻片固定在显微镜片上，以便观察和保存。
常用的固定封片剂有海藻糖溶液和透明胶等，将载玻片浸入固定封片剂中，使其固定在显微镜片上。
二、常用的细胞染色方法1. 荧光染色：荧光染色是利用荧光染料对细胞进行标记，以实现对细胞内目标物质的可视化。
常用的荧光染料有荧光素、荧光蛋白和荧光标记的抗体等。
荧光染色可以用于观察细胞内特定分子的分布和定位，例如观察细胞内的细胞器如线粒体、内质网和高尔基体等。
2. 核染色：核染色是用来观察细胞核的形态和数量。
常用的核染色剂有伊红、苏木精和荧光染料DAPI等。
核染色可以用于观察细胞核的大小、形状和染色性质，从而研究细胞的生长和增殖过程。
细胞染色方法总结(干货分享)
细胞染色方法总结Hoeｃｈst染色：ｈoｅｃhst可以穿过活细胞膜与细胞核结合(主要为凋亡活细胞)在紫外光下将核染为蓝色. Hoecｈst染细胞核会影响共聚焦显微镜对该样本其他荧光的观察效果。
ｈｏｅｃhst 有hｏｅchest33３42和hoechst3３2５8两种hｏｅchｓts33258，hoeｃｈst333４２二者区别不大,但是hｏeｃｈst33３42对细胞的毒性作用更小一些,所以一般来说hｏｅcｈsts3３2５8用于细胞固定后再染色，而hoechsｔ3３3４2则可以对活细胞直接进行染色！染色步骤PI （Ｐroｐiｄium Ｉodide碘化丙啶）染色：是一种可对DＮＡ染色的细胞核染色试剂，常用于细胞凋亡检测。
碘化丙啶（Ｐｒoｐidium Iｏdide, PI)是一种核酸染料（红色）,它不能透过完整的细胞膜,但凋亡中晚期的细胞和坏死细胞由于细胞膜通透性的增加，PI 能够透过细胞膜而使细胞核染红。
用PI单一染色观测培养细胞，只能表示细胞的坏死情况,而不是凋亡（当然晚期凋亡PI亦可着色)。
但是如果您只是想知道细胞的死亡情况，而不是仔细区分坏死或凋亡，那么PI单一染色也可以。
但是如果您一定要认定细胞的凋亡，那么PＩ单一染色显然不够! annexin—v染色细胞凋亡早期，细胞膜标志发生改变.其中，磷脂酰丝氨酸(Annexin-V，PS）外翻,Annexin-Ｖ在Ca+存在的条件下与其高亲和力特异性结合．这样,Ａnnexin-v 染色阳性，表示细胞处于早期凋亡状态.Anneｘｉn－V结合不同的荧光抗体,就可以利用流式细胞仪、荧光显微镜以及共聚焦激光扫描显微镜检测细胞凋亡的发生。
Annexin V用FITC标记发绿色荧光；如果用ＰE标记就发红色荧光....文档交流仅供参考...JC-1染色ＪＣ－１是一种阳离子染料,可以在线粒体内聚集，低浓度时主要以单体（monomer)存在,发射光以绿光(～52５nm）为主;而在高浓度时则可以形成多聚体（agｇregａｔioｎ）,发射光以红光(-590nm)为主.线粒体本身存在一定的极性（polarizaｔion),其外膜为负极，内膜为正极。
常见细胞染色试剂简介
常见细胞染色试剂简介1、酸性品红（Acid fuchsin）酸性品红是酸性染料，呈红色粉末状，能容于水，略溶于酒精（0.3%）。
是良好的细胞制染色剂，在动物制片上应用很广，在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。
它跟甲基绿同染，能显示线粒体。
组织切片在染色前先浸在带酸性的水中，可增强它的染色力。
酸性品红容易跟碱起作用，所以染色过度，易在自来水中褪色。
2、刚果红（Congo red）刚果红是酸性染料，呈枣红色粉末状，能溶于水喝酒精，遇酸呈蓝色。
它能作染料，也用作指示剂。
它在植物制片中常作为苏木精或其他细胞染料的衬垫剂。
用来染细胞质时，能把胶制或纤维素染成红色。
在动物组织制片中用来染神经轴、弹性纤维、胚胎材料等。
刚果红可以跟苏木静作二重染色，也可用作类淀粉染色，由于它能溶于水和酒精，所以洗涤和脱水处理要迅速3、甲基蓝（Methyl blue）甲基蓝是弱酸性染料，能溶于水和酒精。
甲基蓝在动植物的制片技术方面应用极广。
它跟伊红合用能染神经细胞，也是细菌制片中不可缺少的染料。
它的水溶液是原生动物的活体染色剂。
甲基蓝极易氧化，因此用它染色后不能长久保存。
4、固绿（Fast green）固绿是酸性染料，能溶于水（溶解度为4%）和酒精（溶解度为9%）。
固绿是一种染含有浆质的纤维素细胞组织的染色剂，在染细胞和植物组织上应用极广。
它和苏木精、番红并列为植物组织学上三中最常用的染料。
它和苏木精、番红并列为植物组织学上三中最常用的染料。
5．苯胺蓝（Aniline blue）是一种混合酸性染料，平常所用很难有一定的标准。
此染料一般很难溶于水，也不易溶于酒精（1.5％）。
植物制片中可与番红合用，作为组织染色；也可作藻类植物染色。
因为这种染料的成分很不一致，染色效果不易掌握。
6、苏丹Ⅲ（Sudan Ⅲ）苏丹Ⅲ是弱酸性染料，不溶解于水，呈红色粉末状，易溶于脂肪和酒精（溶解度为0.15%）。
常用70％酒精中的饱和溶液。
细胞各种染色方法1
细胞各种染色方法1细胞各种染色方法1细胞是生物体的基本结构单位，研究细胞结构和功能对于理解生命活动的基本原理具有重要意义。
而在细胞研究中，染色方法是最常用的一种技术手段之一、通过染色，可以使细胞内的各种器官、蛋白质、核酸等结构或分子可视化，从而更好地研究细胞的结构与功能。
下面介绍一些常用的细胞染色方法。
1.原位杂交染色原位杂交是一种通过特异性核酸探针与目标细胞中的特定DNA或RNA 序列结合，从而实现靶分子检测和定位的方法。
通过这种方法，可以查看细胞中特定基因或RNA的表达情况，从而揭示该基因或RNA在细胞中的作用。
在原位杂交染色中，探针可以用荧光标记或放射性同位素标记，并使用显微镜观察或放射性成像等方法进行检测。
2.免疫染色免疫染色是一种利用抗体与特定抗原结合的原理，对细胞或组织进行染色分析的方法。
由于抗体可以识别并结合到蛋白质、多肽、糖、核酸等生物分子上，所以免疫染色可以用于检测特定蛋白质或分子的存在和表达水平。
免疫染色可以通过荧光染色或酶标染色来实现，进一步结合显微镜观察和图像分析等方法，可以定量或定位地研究细胞内的各种分子。
3.组织化学染色组织化学染色是一种通过化学反应将细胞或组织中特定分子染色的方法。
常用的组织化学染色方法有哈维氏酸碱性染色、格里姆萨染色、伊红-Wright染色等。
这些染色方法可以用来观察细胞内的DNA、蛋白质、核酸以及细胞器等结构，并通过显微镜观察，从而对细胞和组织的结构和组成进行研究。
4.核酸染色核酸染色是一种利用荧光染料或放射性染料对DNA或RNA进行直接染色的方法。
通过核酸染色，可以观察到细胞和细胞核的形态、数量和分布情况，进而研究细胞的分裂、DNA合成和RNA转录等过程。
核酸染色方法包括荧光染色和核酸复合物染色等，其中荧光染色可用于显微观察，核酸复合物染色则可通过放射性成像等方法进行检测。
细胞染色是细胞生物学研究中非常重要的一种手段，通过染色可以使细胞内的各种结构与分子可视化，从而更好地研究细胞的结构与功能。
常用细胞染色方法
常用细胞染色方法
常用的细胞染色方法包括：
1.吉姆萨染色法：使用吉姆萨染料染色，可用于观察细胞核和细胞质的形态结构。
2.荧光染色法：使用荧光染料，通过荧光显微镜观察细胞内的特定结构、蛋白质或核酸等。
3.伊诺金染色法：使用伊诺金染料，主要用于显微镜下观察和鉴别细菌和真菌等微生物。
4.嗜酸染色法：使用嗜酸染料，能够染色细胞内的酸性结构和胞质。
5.嗜碱染色法：使用嗜碱染料，能够染色细胞内的碱性结构和胞质。
6.免疫组化染色法：利用特异性抗体与细胞中的特定蛋白质结合，再使用染料标记抗体来观察和定位细胞内的特定蛋白质。
7.核酸染色法：使用DNA或RNA特异性的染料，能够染色细胞内的核酸，常用于细胞周期和细胞分裂等研究。
8.血液细胞染色法：包括委氏染色法、中日染色法等，用于观察和鉴定血液细胞
类型和形态变化。
以上是一些常用的细胞染色方法，根据需要和研究目的的不同，可以选择合适的方法来观察和研究细胞。
实验室常用染色液配方
实验室常用染色液配方1. Giemsa染色液配方：- Giemsa染色液用于染色细胞核和染色体，常用于血液细胞计数、病原体观察等实验。
- 配方：Giemsa染色液的配方一般会根据不同的实验需求进行调整，但基本原料一般包括甲基蓝、伊苏琉斯蓝G、亚甲基蓝、酒精、非紫外吸收的甘油、磷酸盐缓冲液等。
2.范式染色液配方：-范式染色液常用于细胞和组织的常规染色，如荧光染色、光学显微镜下的染色观察等。
-配方：范式染色液的主要成分包括染料、溶剂、pH缓冲溶液、增稠剂等。
常用的染料有荧光素、伊红、伊博蓝等；常用的溶剂有酒精、乙醚、显微镜油等；常用的增稠剂有明胶粉、琼脂等。
3.原位杂交染色液配方：-原位杂交染色液主要用于检测细胞和组织中的特定核酸序列，常用于分子生物学研究、基因定位等实验。
- 配方：原位杂交染色液的配方会根据实验的具体目的进行调整，但一般包括核酸探针、碱性缓冲液、蛋白酶K、DNase I等。
4.细胞活力染色液配方：-细胞活力染色液用于评估细胞的活力和生理状态，常用于细胞培养实验、细胞毒性测试等。
- 配方：细胞活力染色液的配方一般包括活细胞染料、死细胞染料、背景抑制剂等。
常用的活细胞染料有乙酰红、卤化丙啶（Propidium Iodide，PI）等；常用的死细胞染料有丙酮溴化物（7-AAD）、EthD-1等；常用的背景抑制剂有苯甲缩醛（Sodium Azide，NaN3）等。
以上是实验室常用染色液的一些基本配方和介绍，实验者在进行实验前需要根据具体实验目的和需求进行配方选择和调整。
同时，注意染色液的稳定性、pH值的控制、操作的规范等因素也是成功进行染色实验的关键。
细胞化学染色
【注意事项】
1．过氧化氢必须新鲜配制。过氧化氢的最适 浓度是0．05mol／L左右，浓度过高，反 而抑制酶作用。一般采用5ml蒸馏水，加3 ％过氧化氢一滴。若用30％的过氧化氢时 ，只能在100ml蒸馏水中加1～2滴。涂片 中粒细胞看不见阳性颗粒，红细胞呈棕色 或绿色，即示过氧化氢过浓。若过氧化氢 加于血片上不产生气泡，则示无效。
2．2g／L核固红-硫酸铝溶液 取硫酸铝2g溶于 100ml蒸馏水中，再加入核固红 (Emerk出品 )0.2g。置37℃水浴中1h并随时振荡，使溶解， 过滤后使用。
【步骤和方法】
1.选骨髓小粒丰富的骨髓片，用甲醇固定 10min，待干。
2．玻片上滴满酸性亚铁氰化钾，染色 30min(可置37℃环境)
3．水洗时勿在水流下猛冲，以免髓粒脱 落。
3．用于诊断铁粒幼红细胞性贫血 这时能 找到数量不等的环型铁粒幼红细胞，并多 见粗颗粒的Ⅲ型与Ⅳ型铁粒幼红细胞。
【注意事项】
1．玻璃片需经无铁处理 将新片经清洁液 浸泡24h，取出反复水洗后浸入95%酒精 中24h，晾干，再浸泡在5％盐酸中24h， 用双重蒸馏水反复浸洗玻片，取出烤干后 备用。
2．酸性亚铁氰化钾液须新鲜配制。
1．急性粒细胞白血病：细胞分化较好时，原 始粒细胞呈阳性反应，阳性率可>30%， 在分化较差的白血病，如AML-M0和未分 化型（AML-M1）的部分病例，原粒细胞 的POX染色也可呈阴性。
2．急性早幼粒细胞白血病时白血病细胞呈强 阳性反应。
3．急性淋巴细胞呈阴性反应，FAB分型规定 POX阳性率<3％。
(++)：有较多的铁颗粒和小珠。
(+++)：有很多的铁颗粒、小珠和少数小 块状。
完整word版常用颜色的RGB和HSBHSL值word文档良心出品
常用RGB颜色表（一）2009-06-19 21:41BG值BR值RBRGG23#0000000176黑色00#FFFF00255黄色0浅灰蓝色255224223610541#E3CF57品蓝#29242133香蕉色22765207象牙黑8720镉黄19225590#FF9912153石板蓝18192106灰色#C0C0C019223138天蓝13520685#EB8E55冷灰#808A87128dougello235135142#FFE384105227#708069112forum gold128132255石板灰2521500255#808069青色暖灰色金黄色128#FFD700128255105 156105黄花色绿土21894165#DAA5698168225靛青225105225468瓜色#FFFFFF#E3A869白色22721127橙色古董白#FAEBD7250255235215255碧绿色97#FF61000203青绿色97天蓝色224240镉橙255255#FF610325564#F0FFFF02370145白烟25524533245245#F5F5F5#ED9121胡萝卜色绿色0黄绿色桔黄#FFFFCD#FF8000白杏仁2552552352051282550127661#F5DEB3淡黄色cornsilk179255245248220钴绿色#FFF8DC22214580翠绿色蛋壳色252201230201#FCE6C9常用RGB颜色表（二）2009-06-19 21:423442#802A2A250240森林绿#FFFAF0139棕色3412842255花白0124草地绿#A39480米色252163#DCDCDC148gainsboro2201282202205050酸橙绿#F8F8FF138ghostWhite2485424825515205#8A360F锻浓黄土色2012552405136189#873324薄荷色#F0FFF0蜜露橙240锻棕土色25213535142107巧克力色草绿色象牙白25025524021010530#FAFFF0#D2691E2025512564#FAF0E6#FF7D40肉色暗绿色128亚麻色2502402304887#F0E68CnavajoWhite255222173240230140海绿色#FFDEAD13946黄褐色1270嫩绿色玫瑰红253245230188143143#BC8F8F255#FDF5E6oldlace#C761149720肖贡土色#FFF5EE199海贝壳色25524523824018雪白25525025074#FFFAFA160紫色#734A1232标土棕115226乌贼墨棕#5E261213843189438紫罗蓝色21145160赫色0红色255082102160#FF0000#A0522Djasoa250153#9C661F5119139马棕色69湖紫色#8B451331102砖红156214镉红227淡紫色218#F4A460#E3170D96244沙棕色231316411222122116014018080127珊瑚色255210#FF7F50棕褐色#D2B48C梅红色#B222223434178耐火砖红#0000FF25500蓝色#B0171F3123176印度红．#3D59AB8钴栗色#B03060176171486196#1E90FF30203144#FFC0C粉红25525dodger blue192#0B174623#8726571草莓jackie blue135703887#03A89锰橙红色#FA80721682503128114158#FF634725525991127深蓝色#19197蕃茄红25 016桔红#33A1C9255516920孔雀蓝#FF45000255140#FF00F深红色#00C78C2551990土耳其玉色常用颜色的RGB值及中英文名称RGB值英文名中文名颜色#FFB6C1 LightPink 浅粉红Pink #FFC0CB 粉红#DC143C Crimson 深红/猩红LavenderBlush #FFF0F5 淡紫红PaleVioletRed #DB7093 弱紫罗兰红HotPink #FF69B4 热情的粉红DeepPink #FF1493 深粉红MediumVioletRed#C71585中紫罗兰红#DA70D6 Orchid 暗紫色/兰花紫#D8BFD8 Thistle 蓟色#DDA0DD Plum/李子紫洋李色#EE82EE Violet 紫罗兰#FF00FF Magenta /玫瑰红洋红Fuchsia #FF00FF灯笼海棠紫红/DarkMagenta #8B008B 深洋红Purple#800080紫色#BA55D3 MediumOrchid 中兰花紫#9400D3 DarkViolet 暗紫罗兰DarkOrchid#9932CC 暗兰花紫Indigo#4B0082/紫兰色靛青#8A2BE2 BlueViolet 蓝紫罗兰#9370DB MediumPurple 中紫色MediumSlateBlue#7B68EE中板岩蓝/中暗蓝色SlateBlue#6A5ACD 板岩蓝/石蓝色．DarkSlateBlue #483D8B 暗灰蓝色暗板岩蓝/Lavender #E6E6FA 熏衣草淡紫淡紫色/GhostWhite #F8F8FF 幽灵白Blue #0000FF 纯蓝MediumBlue #0000CD 中蓝色MidnightBlue #191970 午夜蓝DarkBlue #00008B 暗蓝色Navy #000080 海军蓝RoyalBlue #4169E1 /皇家蓝宝蓝CornflowerBlue#6495ED矢车菊蓝LightSteelBlue #B0C4DE 亮钢蓝LightSlateGray #778899 亮蓝灰/亮石板灰SlateGray #708090 灰石色/石板灰DodgerBlue #1E90FF 道奇蓝闪兰色/AliceBlue#F0F8FF 爱丽丝蓝SteelBlue#4682B4铁青钢蓝/LightSkyBlue #87CEFA 亮天蓝色SkyBlue #87CEEB 天蓝色DeepSkyBlue #00BFFF深天蓝LightBlue #ADD8E6 亮蓝PowderBlue #B0E0E6 火药青粉蓝色/CadetBlue#5F9EA0 军兰色/军服蓝Azure #F0FFFF 蔚蓝色LightCyan#E0FFFF淡青色PaleTurquoise #AFEEEE 弱绿宝石Cyan #00FFFF 青色Aqua#00FFFF水色/浅绿色DarkTurquoise #00CED1 暗绿宝石DarkSlateGray #2F4F4F /暗瓦灰色暗石板灰DarkCyan #008B8B 暗青色Teal#008080水鸭色MediumTurquoise #48D1CC 中绿宝石LightSeaGreen #20B2AA 浅海洋绿Turquoise #40E0D0 绿宝石Aquamarine#7FFFD4宝石碧绿MediumAquamarine #66CDAA 中宝石碧绿MediumSpringGreen #00FA9A 中春绿色MintCream #F5FFFA 薄荷奶油SpringGreen #00FF7F 春绿色MediumSeaGreen#3CB371 中海洋绿SeaGreen #2E8B57 海洋绿Honeydew #F0FFF0 蜜瓜色蜜色/LightGreen #90EE90 淡绿色PaleGreen#98FB98弱绿色DarkSeaGreen #8FBC8F 暗海洋绿LimeGreen #32CD32 闪光深绿Lime#00FF00 闪光绿ForestGreen #228B22 森林绿Green #008000 纯绿DarkGreen #006400 暗绿色Chartreuse #7FFF00 黄绿色/查特酒绿LawnGreen#7CFC00草坪绿/草绿色GreenYellow #ADFF2F 绿黄色DarkOliveGreen#556B2F暗橄榄绿YellowGreen #9ACD32 黄绿色OliveDrab#6B8E23橄榄褐色Beige#F5F5DC 米色/灰棕色LightGoldenrodYellow #FAFAD2 亮菊黄Ivory #FFFFF0 象牙色LightYellow #FFFFE0 浅黄色Yellow #FFFF00 纯黄Olive#808000橄榄#BDB76B DarkKhaki 深卡叽布暗黄褐色/#FFFACD LemonChiffon 柠檬绸#EEE8AA PaleGoldenrod 苍麒麟色灰菊黄/#F0E68C Khaki /黄褐色卡叽布Gold#FFD700金色#FFF8DC Cornsilk 玉米丝色#DAA520 Goldenrod 金菊黄DarkGoldenrod#B8860B暗金菊黄．FloralWhite #FFFAF0 花的白色OldLace #FDF5E6 旧蕾丝老花色/Wheat #F5DEB3 小麦色浅黄色/Moccasin #FFE4B5 /鹿皮靴鹿皮色Orange#FFA500橙色PapayaWhip #FFEFD5 /番木瓜番木色BlanchedAlmond #FFEBCD 白杏色NavajoWhite #FFDEAD 土著白纳瓦白/AntiqueWhite #FAEBD7 古董白Tan #D2B48C 茶色BurlyWood #DEB887 硬木色Bisque #FFE4C4 陶坯黄DarkOrange #FF8C00 深橙色Linen#FAF0E6亚麻布Peru #CD853F 秘鲁色PeachPuff #FFDAB9 桃肉色SandyBrown #F4A460 沙棕色Chocolate #D2691E 巧克力色SaddleBrown #8B4513 马鞍棕色重褐色/Seashell#FFF5EE海贝壳Sienna #A0522D 黄土赭色LightSalmon #FFA07A 浅鲑鱼肉色Coral#FF7F50 珊瑚OrangeRed #FF4500 橙红色DarkSalmon #E9967A 鲑鱼色深鲜肉/Tomato #FF6347 番茄红MistyRose #FFE4E1 /浅玫瑰色薄雾玫瑰Salmon#FA8072/鲑鱼色鲜肉Snow #FFFAFA 雪白色LightCoral#F08080淡珊瑚色RosyBrown #BC8F8F 玫瑰棕色IndianRed #CD5C5C 印度红Red#FF0000纯红Brown #A52A2A 棕色FireBrick#B22222耐火砖/火砖色．DarkRed #8B0000 深红色Maroon #800000 栗色White #FFFFFF 纯白WhiteSmoke #F5F5F5白烟#DCDCDC Gainsboro 淡灰色#D3D3D3 LightGrey 浅灰色#C0C0C0 Silver 银灰色#A9A9A9 DarkGray 深灰色#808080 Gray 灰色DimGray #696969 暗淡灰Black #000000纯黑常用颜色HSB值，视觉色彩颜色的RGB数字表示方法2009年03月15日星期日下午02:45RGB色光的混合是加色混合，参看《色彩混合》。
十五种细胞染色技术
1、酸性品红：酸性品红是酸性染料，呈红色粉末状，能容於水，略溶於酒精（0。
3％)。
是良好的细胞制染色剂，在动物制片上应用很广，在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁.它跟甲基绿同染，能显示线粒体。
组织切片在染色前先浸在带酸性的水中，可增强它的染色力。
酸性品红容易跟碱起作用,所以染色过度,易在自来水中褪色。
2、刚果红：刚果红是酸性染料，呈枣红色粉末状，能溶於水和酒精,遇酸呈蓝色。
它能作染料，也用作指示剂。
它在植物制片中常作为苏木精或其他细胞染料的衬垫剂。
用来染细胞质时，能把胶制或纤维素染成红色。
在动物组织制片中用来染神经轴、弹性纤维、胚胎材料等。
刚果红可以跟苏木静作二重染色，也可用作类淀粉染色，由於它能溶於水和酒精，所以洗涤和脱水处理要迅速3、甲基蓝：甲基蓝是弱酸性染料，能溶於水和酒精。
甲基蓝在动植物的制片技术方面应用极广。
它跟伊红合用能染神经细胞，也是细菌制片中不可缺少的染料.它的水溶液是原生动物的活体染色剂。
甲基蓝极易氧化，因此用它染色后不能长久保存。
4、固绿：固绿是酸性染料，能溶於水（溶解度为4％)和酒精（溶解度为9%)。
固绿是一种染含有浆质的纤维素细胞组织的染色剂，在染细胞和植物组织上应用极广.它和苏木精、番红并列为植物组织学上三中最常用的染料。
它和苏木精、番红并列为植物组织学上三中最常用的染料。
5。
苯胺蓝：是一种混合酸性染料，平常所用很难有一定的标准。
此染料一般很难溶於水，也不易溶於酒精（1.5%）。
植物制片中可与番红合用，作为组织染色;也可作藻类植物染色。
因为这种染料的成分很不一致，染色效果不易掌握。
6、苏丹Ⅲ:苏丹Ⅲ是弱酸性染料，不溶解於水，呈红色粉末状，易溶於脂肪和酒精（溶解度为0。
15%)。
常用70%酒精中的饱和溶液。
苏丹Ⅲ是脂肪染色剂。
7、苏丹Ⅳ：苏丹Ⅳ是弱酸性染料，也是很好的染脂肪染料，现在多用以代替苏丹Ⅲ，可染树脂、乳汁管、蜡质以及角质等结构，也可使叶绿体染成暗红色。
细胞各种染色方法
细胞各种染色方法细胞染色方法是一种用于研究细胞结构和功能的重要技术。
通过对细胞进行染色，可以使细胞成分和结构可见，便于观察和研究。
下面将介绍几种常用的细胞染色方法。
1.基本染色方法-干燥染色法干燥染色法是最常见的染色方法之一，用于观察细胞的形态和结构。
在细胞表面涂上染色剂（如吉姆萨、范斯丁染料等），然后用胶片或显微镜进行观察。
这种方法方便快捷，适用于常规的细胞观察。
-神经元染色法神经元染色法主要用于研究神经系统的结构和功能。
常见的神经元染色方法包括尼氏染色法、戈登染色法和格尔染色法等。
这些方法可以染色神经元的胞体、突触和轴突等结构，以及神经元之间的连接方式。
2.核酸染色方法-核酸荧光染色法核酸荧光染色法是一种用于检测细胞核酸的方法。
常见的核酸染色剂包括达尔林紫、伊曼纽尔蓝和乳胶蓝等。
这些荧光染料可以与DNA或RNA 结合，生成荧光信号，便于观察和分析。
-原位杂交法原位杂交法是一种利用互补的单链DNA或RNA探针与目标细胞中的互补序列发生杂交反应的方法。
这种方法可以检测特定的基因表达情况或检测一些病毒的感染情况。
常见的原位杂交方法包括原位PCR、荧光原位杂交和非放射性原位杂交等。
3.蛋白质染色方法-共聚焦显微镜染色法共聚焦显微镜染色法是一种利用荧光染料标记特定蛋白质的方法。
常见的荧光染料包括荧光素、乳酸钙蓝和荧光蛋白等。
这种方法可以使用不同的荧光染料标记不同的蛋白质，通过共聚焦显微镜观察细胞中的蛋白质分布和相互作用。
-银染法银染法是一种用于检测蛋白质的方法，特别适用于低表达量的蛋白质。
该方法通过将目标蛋白质与银离子结合，形成黑色或棕色的颗粒，便于观察和分析。
银染法常用于检测蛋白质在凝胶电泳中的分子量和含量。
4.细胞器染色方法-非特异性染色法非特异性染色法是一种用于检测细胞器的方法，常用的非特异性染色剂包括宙斯金、吉姆萨和荧光素等。
这些染料可以与细胞器特有的成分结合，使其在显微镜下可见。
-特异性染色法特异性染色法是一种用于检测特定细胞器的方法，常见的特异性染色剂包括桡胞蛋白、核蛋白和线粒体染料等。
细胞染色方法
细胞染色方法细胞染色是生物学研究中常用的一种技术手段，通过染色可以使细胞的形态、结构和功能更加清晰地展现出来，为细胞学研究提供了重要的帮助。
在细胞染色的过程中，我们可以利用不同的染色剂来染色，以观察细胞的形态和结构，从而更好地了解细胞的功能和特性。
本文将介绍几种常用的细胞染色方法，希望能够为您的细胞学研究提供一些帮助。
首先，常用的细胞染色方法之一是荧光染色法。
荧光染色法利用荧光染料对细胞进行标记，然后利用荧光显微镜观察染色的细胞。
荧光染色法具有高灵敏度和高分辨率的特点，可以用来观察细胞内的微小结构和分子。
常用的荧光染料有荧光素、DAPI、FITC等，它们可以针对不同的细胞结构和分子进行选择性染色，从而实现对细胞内不同成分的观察和分析。
其次，还有常规染色法。
常规染色法是指利用常规染色剂对细胞进行染色，然后在普通光学显微镜下观察染色的细胞。
常用的常规染色剂有伊红、甲苯胺蓝、格里姆萨染料等，它们可以染色细胞的细胞核、细胞质等不同部位，从而帮助我们观察细胞的形态和结构。
另外，还有免疫组织化学染色法。
免疫组织化学染色法是利用抗体对细胞内特定蛋白进行特异性染色的方法，通过这种方法可以对细胞内的特定蛋白进行定位和分析。
免疫组织化学染色法在细胞生物学和病理学研究中有着广泛的应用，可以帮助我们了解细胞内蛋白的表达和分布情况，从而对细胞的功能和特性进行深入研究。
最后，还有原位杂交染色法。
原位杂交染色法是利用标记的核酸探针对细胞内的特定核酸序列进行染色的方法，可以用来观察细胞内特定基因的表达和分布情况。
原位杂交染色法在遗传学和发育生物学研究中有着重要的应用，可以帮助我们了解细胞内基因的表达模式和调控机制。
细胞染色方法的选择应根据具体的研究目的和样本特点来确定，不同的染色方法有着各自的优缺点和适用范围，我们需要根据实际情况进行选择。
希望本文介绍的几种常用的细胞染色方法能够为您的细胞学研究提供一些参考，同时也希望能够为您在实验中的细胞染色工作提供一些帮助。
实验十二常用血细胞化学染色
实验十二常用血细胞化学染色Cytochemistry stain for blood cells一、过氧化物酶染色染色原理粒细胞和部分单核细胞的溶酶体颗粒中含有髓过氧化物酶(myeloperoxidase, POX或MPO),能将底物H202分解，产生新生态氧，新生态氧可氧化四甲基联苯胶成联苯胺蓝。
联苯胺蓝自我脱氢氧化形成棕色的四甲基苯酿二胺，后者与亚硝基铁氧化纳结合，再进一步氧化形成稳定的蓝色颗粒，沉淀于细胞质内酶所在的部位。
试剂器材1．1%TMB(3,5,31,5f一四甲基联苯胶)乙醇溶液:0.1g TMB溶于100mL88%乙醇溶液中，置棕色瓶内，冰箱保存。
2．亚硝基铁氧化锅饱和溶液在少量蒸馏水中加入亚硝基铁氰晶体，至不再溶解为止，置棕色瓶内，冰箱保存。
3．1%过氧化氢溶液取30%H2021mL加入蒸馆水29mL。
4．稀过氧化氢溶液1%H2021滴，加10 mL蒸馏水稀释(新鲜配制)。
5．瑞氏(Wright)染色液。
6．新鲜涂片(骨髓或血片)、染色架、洗耳球、光学显微镜等。
操作步骤1．取0.1%TMB乙醇溶液1mL，加亚硝基铁氰化钠饱和溶液10μL，溶液呈淡棕黄色，染色液应临用前配制。
2．在新鲜干燥的血片或骨髓涂片上，加0.1%TMB一亚硝基铁氰化钠饱和溶液0.5mL，放置lmin，再加稀H202溶液0.7mL，吹匀，染色6min。
3．自来水冲洗，待干，用瑞氏染液复染15~20 min。
4．自来水冲洗，待干，用油镜镜检。
注意事顶1．血涂片或骨髓涂片应新鲜制作，涂片应厚薄适宜。
2．TMB配制在85%~88%的乙醇溶液中染色效果较好，勿用90%~95%乙醇，否则细胞表面蛋白质很快凝固，妨碍试剂向胞内渗入而导致染色效果差。
3．H202需新鲜配制，其浓度与加入量不能随意更改。
涂片中粒细胞看不见阳性颗粒，红细胞呈棕色或绿色，即表示H202过浓。
若H202加于血片上不产生气泡，则示无效。
4．染色液pH应为5.5。
细胞染色方法
细胞染色方法细胞染色是生物学和医学领域中常用的一种实验技术，通过染色剂将细胞或细胞器的结构染色，以便观察和研究。
细胞染色方法的选择对于细胞学研究至关重要，不同的染色方法可以突出不同的细胞结构或分子，为科研工作提供重要的信息。
本文将介绍几种常用的细胞染色方法，希望能对您的实验工作有所帮助。
首先，常见的细胞染色方法之一是荧光染色。
荧光染色是利用荧光染料对细胞或组织进行染色，然后利用荧光显微镜观察。
荧光染色可以用于观察细胞器的分布和形态，也可以用于检测蛋白质的定位和表达水平。
常用的荧光染料包括荧光素、DAPI、FITC等，它们可以选择性地与DNA、蛋白质等结合，从而在显微镜下呈现出荧光信号。
荧光染色方法对于细胞内结构的研究具有重要意义，有助于揭示细胞的生理和病理过程。
其次，还有免疫组织化学染色法。
免疫组织化学染色是利用抗体对细胞或组织中的特定分子进行染色，从而实现对这些分子的检测和定位。
免疫组织化学染色可以用于检测蛋白质、细胞因子等分子的表达，也可以用于研究细胞凋亡、增殖等生理过程。
在免疫组织化学染色中，首先需要用特定的抗体与待检测分子结合，然后再加入染色剂进行染色，最后在显微镜下观察并分析结果。
免疫组织化学染色方法对于研究细胞信号转导、肿瘤生物标志物等具有重要意义。
此外，还有原位杂交染色法。
原位杂交染色是利用标记的核酸探针对细胞或组织中的特定核酸序列进行染色，从而实现对这些核酸序列的检测和定位。
原位杂交染色可以用于研究基因的表达模式、染色体结构和功能等。
在原位杂交染色中，首先需要合成标记的核酸探针，然后与待检测的核酸序列杂交，最后用染色剂进行染色。
原位杂交染色方法对于研究基因组学、细胞遗传学等领域具有重要意义。
细胞染色方法的选择应根据研究的目的和需要进行合理的选择，不同的染色方法可以提供不同的信息。
在进行细胞染色实验时，需要严格控制实验条件，选择合适的染色剂和探针，合理设计实验方案，从而获得可靠的实验结果。
常用的五种细胞化学染色方法
常用的五种细胞化学染色方法一、细胞化学染色方法概述细胞化学染色是生物学和医学研究中常用的技术手段，通过对细胞内各种化学成分的染色，可以揭示细胞的结构、功能以及病变过程。
根据染色原理和目的的不同，细胞化学染色方法有多种分类。
本文将介绍五种常用的细胞化学染色方法，分别是：吉姆萨染色、瑞氏染色、巴氏染色、苏木素-伊红染色和福尔根染色。
二、常用的五种细胞化学染色方法1.吉姆萨染色吉姆萨染色是用于显示细胞内蛋白质和核糖体的方法。
该方法使用含有天青、伊红、酸性品红等染料的吉姆萨染液对细胞进行处理，使蛋白质和核糖体呈现紫红色或蓝紫色。
吉姆萨染色在免疫学和寄生虫学等领域有广泛应用。
2.瑞氏染色瑞氏染色是一种用于显示细胞内颗粒物质的染色方法，如细胞内酶、核酸等。
该方法使用含有伊红和天青染料的瑞氏染液对细胞进行处理，使颗粒物质呈现蓝紫色或红色。
瑞氏染色常用于病理学和血液学中的骨髓涂片检查。
3.巴氏染色巴氏染色是一种用于显示细胞内糖原的染色方法。
该方法使用含有苏丹III 或苏丹IV染料的巴氏染液对细胞进行处理，使糖原呈现红色或橙色。
巴氏染色在妇科和肿瘤学等领域有重要应用，常用于检查宫颈脱落细胞中的糖原含量。
4.苏木素-伊红染色苏木素-伊红染色是一种显示细胞核和细胞质的染色方法。
该方法使用含有苏木素和伊红染料的染液对细胞进行处理，使细胞核呈现蓝色，细胞质呈现红色或橘黄色。
苏木素-伊红染色在病理学中广泛用于组织切片的诊断。
5.福尔根染色福尔根染色是一种用于显示DNA的染色方法。
该方法使用含有品红和苦味酸的福尔根染液对细胞进行处理，使DNA呈现蓝色。
福尔根染色在遗传学和肿瘤学研究中常用作显示肿瘤细胞的DNA含量。
三、结论细胞化学染色在生物学和医学研究中具有重要价值，有助于揭示细胞的结构、功能和病变过程。
常用的五种细胞化学染色方法各有其特点和适用范围，可以根据研究目的和需求选择适合的方法。
这些常用的细胞化学染色方法在实验操作和试剂选择等方面有一定的标准和要求，熟练掌握这些方法有助于提高实验结果的可靠性和准确性。
细胞染色方法大全
Hoechst染色:hoechst可以穿过活细胞膜与细胞核结合(主要为凋亡活细胞)在紫外光下将核染为蓝色、Hoechst染细胞核会影响共聚焦显微镜对该样本其她荧光的观察效果、hoechst有hoechest33342与hoechst33258两种hoechsts33258,hoechst33342二者区别不大,但就是hoechst33342对细胞的毒性作用更小一些,所以一般来说hoechsts33258用于细胞固定后再染色,而hoechst33342则可以对活细胞直接进行染色！染色步骤PI (Propidium Iodide碘化丙啶)染色:就是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂,常用于细胞凋亡检测、碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)就是一种核酸染料(红色),它不能透过完整的细胞膜,但凋亡中晚期的细胞与坏死细胞由于细胞膜通透性的增加,PI 能够透过细胞膜而使细胞核染红、用PI单一染色观测培养细胞,只能表示细胞的坏死情况,而不就是凋亡(当然晚期凋亡PI亦可着色)。
但就是如果您只就是想知道细胞的死亡情况,而不就是仔细区分坏死或凋亡,那么PI单一染色也可以。
但就是如果您一定要认定细胞的凋亡,那么PI单一染色显然不够！annexin-v染色细胞凋亡早期,细胞膜标志发生改变、其中,磷脂酰丝氨酸(Annexin-V,PS)外翻,Annexin-V 在Ca+存在的条件下与其高亲与力特异性结合、这样,Annexin-v 染色阳性,表示细胞处于早期凋亡状态、Annexin-V结合不同的荧光抗体,就可以利用流式细胞仪、荧光显微镜以及共聚焦激光扫描显微镜检测细胞凋亡的发生。
Annexin V用FITC标记发绿色荧光;如果用PE标记就发红色荧光。
JC-1染色JC-1就是一种阳离子染料,可以在线粒体内聚集,低浓度时主要以单体(monomer)存在,发射光以绿光(～525nm)为主;而在高浓度时则可以形成多聚体(aggregation),发射光以红光(-590nm)为主。
实验十一 细胞简单染色
实验十一细胞简单染色
一、实验原理
细菌细胞通常带负电荷，简单染色是采用已知的、带正电荷的碱性染料与菌体细胞黏附使菌体着色，经染色后的细胞与背景形成鲜明对比
二、实验器材与试剂
器材：接种环、酒精灯、载玻片、显微镜、胶头滴管
试剂：结晶紫
三、操作步骤
1、用胶头滴管滴一滴蒸馏水于玻片中央
2、用接种环在酒精灯旁接取少量DH5α到载玻片中央，并用接种环涂抹成薄膜状
3、将载玻片放在酒精灯旁均匀受热，直到载玻片完全干燥
4、取适量结晶紫试剂将菌种覆盖1-2min后，将载玻片呈45度角至细水处冲洗
5、将玻片放到显微镜下面观察其形态
四、实验结果
密集的紫色小点
五、注意事项
1、在接种过程中一定不能离开酒精灯，保证无菌操作
2、玻片在干燥时要受热均匀
六、小结
水洗时，不要直接冲洗涂面，而应使水从载玻片一端流下，且水流不宜过急，以免涂片薄膜脱落。
实验室做细胞常用染色
实验室做细胞常用的细胞固定与染色方法一、爬片前盖玻片处理方法对于悬浮培养的细胞，在进行各种染色前常需先制备成涂片。
为了保证细胞在长时间的染色过程中不从载玻片脱落，必须使其牢固贴附于载玻片上.在载玻片上涂布一层有助于细胞黏附的物质是经常采用的方法之一。
能促进细胞黏附的物质主要有多聚赖氨酸、铬矾明胶等,这里介绍多聚赖氨酸的涂布方法.1、将载玻片用玻璃专用洗涤剂(如Decon)浸泡5min，间或振荡。
2、用自来水冲洗5min。
3、以1％盐酸—70％乙醇溶液浸泡5min。
4、烤箱干燥(至此即可用于普通染色）。
5、多聚L-赖氨酸(1:10溶于去离子水）浸泡5min，振荡。
6、入60℃烤箱1 h，或室温过夜干燥（用于细胞化学、免疫细胞化学及原位杂交细胞化学)。
二、细胞固定常用方法固定细胞的目的在于把组织和细胞的原有结构尽可能完整地保存下来,避免组织和细胞发生降解、自溶、腐败和变形等,使细胞和组织内的各种酶失去活性，防止细胞和组织的各种分子变性、解离，使细胞的化学物质和酶能准确定位，并在以后的处理和制片过程中亦不发生改变和破坏.同时,固定还可使细胞的各部分易于着色，适于观察、长期保存和分析。
1.固定组织、细胞的基本原则：尽可能选用新鲜培养物；根据检测工具、对象、目的和要求选择固定剂和固定方法。
2。
培养物的准备和固定前处理：各种细胞培养物，如双盖片悬滴培养物、悬液培养物、单层培养物和盖片单层培养物都可作固定材料.对双盖片悬滴培养物和悬液培养物来说,常通过离心收集细胞,PBS漂洗2～3次后，备固定制片;对盖片单层培养物来说，将盖片从培养器皿中取出后，PBS液漂洗2~3次,以洗去血清和附着于细胞表面的残渣，备固定用。
3.常用固定液:常用的固定液分两类,一类是以单一化学物质配成的固定液，称简单固定液。
主要有甲醇、乙醇、甲醛、醋酸、丙酮、戊二醛、苦味酸、铬酸、重铬酸钾、氯化汞、氯化镉、四氧化锇(锇酸）。
另一类是用两种或两种以上化学物质配合成的固定液，称混合固定液。
细胞染色资料
细胞染色细胞染色是生物学中一种常用的实验技术，通过处理细胞，使其内部结构或某种特定成分呈现出颜色，从而帮助科研人员观察和研究细胞结构和功能。
细胞染色技术的发展为细胞生物学和医学研究提供了重要的工具和方法。
原理细胞染色的原理主要包括细胞固定、脱水、染色和清洗等步骤。
在进行细胞染色之前，必须首先对目标细胞进行固定处理，以保持细胞的形态和结构稳定。
常用的细胞固定方法包括甲醛固定、酒精固定等。
接着是脱水步骤，脱水是为了将细胞内的水分逐渐去除，使细胞可以更好地吸收染色剂。
脱水过程通常采用一系列浓度逐渐增高的乙醇溶液。
染色是细胞染色的核心步骤，通过染色剂的作用，可以使细胞内的结构或成分呈现出颜色。
常用的细胞染色方法有荧光染色、核心染色等，不同的染色方法可以观察到不同的细胞结构。
最后是清洗步骤，清洗可以帮助去除多余的染色剂和提供更清晰的细胞图像。
清洗通常采用缓冲液或蒸馏水进行多次漂洗。
应用细胞染色技术在生物学研究和临床诊断中有着广泛的应用。
通过细胞染色，可以观察到细胞器的形态和分布，研究细胞的功能和代谢过程。
在临床诊断中，细胞染色可以用于癌症的早期诊断和治疗监测，以及其他疾病的病理学分析。
近年来，随着科技的不断进步，一些新型的细胞染色技术也在逐渐应用到实验室和临床中，如免疫组化染色、原子力显微镜等，为细胞学研究提供更多可能性。
结语细胞染色技术作为生物学领域中极为重要的实验方法之一，为科学家们探索细胞世界提供了有力的工具和支持。
通过不断的改进和创新，相信细胞染色技术会在生物学研究和医学领域发挥更大的作用，为人类健康和生命科学研究做出更多贡献。
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实验室做细胞常用的细胞固定与染色方法、爬片前盖玻片处理方法对于悬浮培养的细胞，在进行各种染色前常需先制备成涂片。
为了保证细胞在长时间的染色过程中不从载玻片脱落，必须使其牢固贴附于载玻片上。
在载玻片上涂布一层有助于细胞黏附的物质是经常采用的方法之一。
能促进细胞黏附的物质主要有多聚赖氨酸、铬矾明胶等，这里介绍多聚赖氨酸的涂布方法。
1、将载玻片用玻璃专用洗涤剂（如Decon）浸泡5min,间或振荡。
2、用自来水冲洗5min。
3、以1 ％盐酸—70％乙醇溶液浸泡5min。
4、烤箱干燥（至此即可用于普通染色）。
5、多聚L赖氨酸（1:10溶于去离子水）浸泡5min，振荡。
6入60C烤箱1 h,或室温过夜干燥（用于细胞化学、免疫细胞化学及原位杂交细胞化学）。
、细胞固定常用方法固定细胞的目的在于把组织和细胞的原有结构尽可能完整地保存下来，避免组织和细胞发生降解、自溶、腐败和变形等，使细胞和组织内的各种酶失去活性，防止细胞和组织的各种分子变性、解离，使细胞的化学物质和酶能准确定位，并在以后的处理和制片过程中亦不发生改变和破坏。
同时，固定还可使细胞的各部分易于着色，适于观察、长期保存和分析。
1.固定组织、细胞的基本原则：尽可能选用新鲜培养物；根据检测工具、对象、目的和要求选择固定剂和固定方法。
2. 培养物的准备和固定前处理：各种细胞培养物，如双盖片悬滴培养物、悬液培养物、单层培养物和盖片单层培养物都可作固定材料。
对双盖片悬滴培 养物和悬液培养物来说，常通过离心收集细胞，PBS 漂洗2〜3次后，备固定制对盖片单层培养物来说，将盖片从培养器皿中取出后， PBS 液漂洗2〜33. 常用固定液：常用的固定液分两类，一类是以单一化学物质配成的固定称简单固定液。
主要有甲醇、乙醇、甲醛、醋酸、丙酮、戊二醛、苦味 铬酸、重铬酸钾、氯化汞、氯化镉、四氧化锇 (锇酸 )。
另一类是用两种或 两种以上化学物质配合成的固定液，称混合固定液。
如 Mueller 固定液、Flemming 固液、FAA 固定液、Carnoy 固定液、Rossman 固定液、Altmann 固定液、Bouing 固定液等。
不同的固定液对细胞的化学成分、酶类及细胞结构固定 效果不同。
因此，选择合适的固定液是达到固定目的的基础。
(1)4%甲醛-PBS:甲醛是一种气体，其饱和水溶液无色，约含40%甲醛。
在很多情况下，甲醛常常产生多聚甲醛的白色沉淀。
4%甲醛-PBS 使组织变硬速度比乙醇快，并能较好地保存组织的外部形式，固定效果不受制片影响，固定 材料可用苏木精和其他合成染料染色。
甲醛的穿透力较强，对组织固定均匀， 能增强组织的弹性，大标本的固定和保存多用甲醛。
甲醛是染色体、线粒体和高尔基体的固定液，在冷冻切片中，甲醛作固定剂具有显著的优点。
用 40%甲醛水溶液：PBS=1:9配方制备甲醛固定液。
(2) 丙酮：丙酮为无色易挥发液体，用纯冷丙酮 (4 °C )固定细胞内酶效果较佳。
(3) 乙醇：乙醇又称酒精，固定血纤维蛋白、色素、弹性纤维、细菌和白细胞等效果优良。
无水乙醇或乙醇和醋酸的混合液是固定肝糖原及肌糖原的良好 固定液。
乙醇除有固定作用外，还具有硬化和脱水的作用。
作为固定用乙醇的 适宜浓度为70%〜100%。
乙醇的缺点是渗透力差，并使组织收缩。
片； 次， 以洗去血清和附着于细胞表面的残渣，备固定用。
液，酸、(4)醋酸：常用0.3%〜5%浓度的醋酸作固定剂。
醋酸能和水及乙醇、甲醇溶合，醋酸不固定蛋白质，但能固定核酸。
醋酸的穿透力很大，它对细胞的膨胀作用显著，这是由于它破坏了某些蛋白质分子的结合，所以，常用醋酸来减少其他固定剂引起的细胞收缩。
细胞学技术中，它能防止细胞收缩，并能较好地保存染色体，还能把染色质沉淀成为可染色的块状体。
(5)苦味酸：苦味酸是黄色结晶体，强酸，可溶于水、乙醇、苯和二甲苯，在水中的溶解度可因水温变化而变化。
苦味酸可以沉淀白蛋白、核蛋白、球蛋白、组蛋白和核酸。
苦味酸的穿透力很慢，单独使用时，造成组织严重收缩。
它和其他药物混合配制时，可以作为蛋白质的沉淀剂，同时可避免组织收缩、硬化，而且易于染色。
所以在很多混合固定液中被广泛采用。
作固定用的最适浓度为1%。
(6)锇酸(四氧化锇)：锇酸是一种强氧化剂，不能同乙醇和甲醛混合使用。
它的挥发性很强，挥发出来的气体能固定结膜，对眼睛很有害，所以操作时应特别注意。
四氧化锇是保存细胞结构的最好固定剂之一，配制时先在棕色试剂瓶中盛入50〜100ml 0.1mol/L磷酸缓冲液(pH7.0〜7.4)，再将装有1g锇酸的安培瓶放人PBS中，以玻棒击碎安培瓶，摇荡使锇酸溶解，备用。
常用的固定液浓度为1%〜2%。
(7)戊二醛：戊二醛对组织的渗透率高，与蛋白质反应快，能较好地保存蛋白质，对微管和膜性结构保存亦比较好，并能较好地保存糖原。
常用的戊二醛固定液配制方法列于表12-1。
表12-1常用的戊二醛固定液配制方法(8)甲醇/醋酸固定液：甲醇：醋酸为3:1的固定液是应用最广的一种培养细胞固定剂。
甲醇穿透力好，醋酸固定蛋白效果好，两者结合，能使固定细胞形态不变。
不仅最适用于固定染色体，而且固定的染色体适于Giemsa染色(注意：此固定液宜现用现配)。
(9)FAA固定液：此固定液适用于固定盖片单层培养的细胞，固定效果好。
配制方法：90ml 80%酒精中加5ml冰乙酸和5m140%甲醛。
(10)Carnoy固定液：Carnoy固定液是较好的非水溶性固定液，是显示细胞化学成分(如粘多糖等)时常用的固定剂，固定、保真效果好，但穿透力差，适于固定培养的单层细胞。
配制方法：60ml纯酒精加30ml氯仿和10ml冰乙酸。
(11)Bouin固定液：用于固定双盖片法培养的标本，固定30分钟后，用70%酒精褪去苦味酸黄色，如不立即染色，可将标本保存在70%酒精中。
本试剂适于固定组织细胞的糖原。
配制方法：先将75ml饱和苦味酸(100ml水中加1.21.4g)过滤，加入25ml福尔马林(40%甲醛，有沉淀时禁用)，最后加入5ml冰醋酸，混和后存于4C冰箱中备用。
冰醋酸最好在临用前加入。
该固定液对组织细胞穿透力较强，固定效果较好，保存的细胞结构完好。
但因偏酸(pH为3〜3.5)，对抗原有一定损害。
(12)4%多聚甲醛-PBS固定液：多聚甲醛为白色固体，在50ml蒸馏水中加入4g多聚甲醛，加热至60〜70C时，边搅拌边逐滴加入2mol/LNaOH，至液体清晰透明。
用1mol/LHCl调节pH至7.4,冷却后加入0.01mol/LPBS液至100ml，4C保存。
本试剂适于固定肾纤维蛋白和细胞骨架蛋白。
三、常见的细胞染色方法1 普通染色观察苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色和Giemsa染色是观察培养细胞一般形态的最常用方法，也是把细胞作为标本保存的主要方法。
对于贴壁培养的细胞，以生长于盖玻片和塑料培养瓶壁者便于操作。
固定前先用Hanks 液、PBS、BSS或生理盐水清洗培养物2次，去除妨碍染色的血清。
固定后可将盖玻片用树胶贴于载玻片上，以利操作。
对于悬浮培养细胞，须先经离心沉淀(1000r／min，10min)，弃上清液后(留少量液体)，将细胞悬液滴于玻片上做成涂片，冷风吹干。
1.1HE染色法1.1.1染液配制⑴苏木精染液：这里介绍鄂征(1995)改良的Mayer法。
称取0.5g苏木精,5.0g铵矶或钾矶，0.1g 碘酸钠加温溶于70m1蒸馏水。
再加入30ml 甘油，2ml 冰醋酸。
混匀。
过滤后即成母液。
可长久保存。
用蒸馏水以 1 :20稀释即成工作液，可用很长时间。
每次染色前宜过滤，去除氧化膜。
(2)伊红染液：伊红有醇溶性与水溶性之分。
将0.5g 伊红溶于100m170%乙醇或蒸馏水即成工作液。
1.1.2染色程序用10%甲醛(福尔马林)固定培养物30min ,或以丙酮固定15min 。
蒸馏水洗1次后，入苏木精染液5〜10min 染细胞核。
入0.5%盐酸-70%乙醇溶液30〜1min ,脱去胞质的着色。
此时核呈紫红色。
入碱性溶液碱化，使细胞核变成蓝色。
如果时间允许，最好用自来水(呈弱碱性)长时间浸泡。
也可入1% NaHCO3溶液。
此过程须不断用显微镜监 视，以掌握碱化时间。
蒸馏水洗1 min ，去除残留的碱性溶液，否则影响伊红着色。
用梯度乙醇溶液脱水： 70%、90%、95%乙醇各 30s 〜1 min ；100%（2 次）各2min 。
如伊红为乙醇溶液，略去 70%乙醇。
8)用二甲苯透明 2次，各 5min 。
4)5)6) 入伊红染液 30s 〜1 min 。
(9)树胶封固。
1.1.3染色结果细胞核呈紫蓝色或深蓝色，大部分细胞的胞质呈粉红色。
如果胞质内含较多核糖体(例如淋巴细胞)则亦呈蓝色。
1.2吉姆萨染色法此法可将细胞核与胞质同时染色，故便捷快速；但染液配制技术不易准确掌握,效果常不如HE染色稳定。
1.2.1吉姆萨(Giemsa)染液的配制(1)取1.5g吉姆萨粉末放入50ml甘油，置于60C温箱，约3h后溶解。
(2)取出后倒入50ml中性甲醇，即为母液。
于棕色瓶可长久保存。
需要注意的是，有的甲醇内含醋酸，会使染液中的伊红沉淀出来，不利染色。
(3)将母液与0.1 mol/LPBS(Ph6.9〜7.2)按1:9混合即成工作液。
吉姆萨(丄)瑞匕液对嘟H极敏感，偏酸时染色过红，偏碱时则过蓝。
所以，工作液宜现用瑞氏礙配，配制，称取1皿£瑞氏色素放入硏林屮，研磨成粉状，油，绅续研幣呈面饶状:加稍多叩醇研磨，配制成60怙1染液，转入棕色广口瓶中保存.(封心两个刀以上使川，时n保存时间不趨过)48h以免被CO2酸化。
染色方法：⑴细胞悬液潘2染色程序賑T⑵用瑞氏染液将定谥〜10m i嗨片上细胞g少削情而定)涂.逋I⑶稍等片刻⑷稍等入吉姆萨液染色州0〜1躺。
可用染色缸；或将染液滴覆于标本。
染色液形成表面张力而终止染色液加入.染3Omin左右.⑸用超纯水缓慢冲洗至少3分钟以匕待T.3）蒸馏水清洗，空气干燥，二甲苯透明，树胶封固。
1.2.3染色结果细胞核呈蓝或蓝紫色，胞质呈色与HE 染色相仿。