脂质体

SUV（小单层）
静脉给药后可分 配进入实质细胞 ，静脉给药后血 中的半衰期长 静脉给药后易被 网状内皮细胞捕 获；体内稳定性 比MLV差
LUV（大单层）
可包封蛋白质、 核酸等大分子， 包封容积大，包 封率高
第五节 脂质体的分离、质量评价及稳定性研究 一、脂质体的分离
1
2
3
凝胶柱 层析法
透析法
离心法
第三节 脂质体的作用机理和影响因素
• 一、作用机理 • １、吸附
• • • • • • ２、脂质交换 ３、内吞／吞噬 ４、融合 ５、渗漏 ６、扩散 ７、磷酸酯酶消化
• 二、影响脂质体作用的因素 • １、脂质体的大小
• • • • ２、脂质体的表面电荷 ３、脂质体的组成 ４、药物的包封方式 ５、给药途径
第一节 概述
第一节 概述
第一节 概述
一、脂质体的组成
脂质体系由磷脂为膜材及附加剂（如胆固醇）组成。
磷脂为两性物质，其结构上有亲水及亲油基团。 胆固醇也为两性物质，其亲油性大于亲水性。
第一节 概述
第一节 概述
二、脂质体的分类 （一）根据脂质体的结构类型分类 1.单层脂质体：小单层脂质体(SUV)、大单层脂质体(LUV) 2.多层脂质体(MLV) ３.多囊脂质体(MVV) （二）根据脂质体的荷电性质分类 1.中性脂质体：不含离子的脂质体。 2.负电性脂质体 ：含酸性脂质如磷脂酸和磷脂酰丝氨酸等 3.正电性脂质体：含碱基（胺基）脂质如十八胺等
• 四、去污剂分散法：
• 方法：去污剂达到临界胶束浓度，与脂质 形成混合胶束，然后从混合胶囊中去除去 污剂，得到脂质体。
• 五、钙融合法
• 方法：向磷脂酰丝氨酸等带负电荷的磷脂 中，加入Ca2+,使这相互融合形成蜗牛壳圆 桶状，加入络合剂EDTA，除去Ca2+,即产生 单层脂质体。
• 特点：形成脂质体的条件非常温和，可用 于包封DNA、RNA和酶等生物大分子。
脂质体的种类与特点
类型 优点 缺点 体内动态 静脉给药后易被网 状内皮细胞捕获
MLV（多层）
包封容积较大， 包封率较高，稳 定性较好，膜的 性质与细胞膜相 似 粒径大小、形态 均匀
粒径较大，不均 匀，不易包封蛋 白质、核酸等大 分子；向细胞内 输送困难 包封率和包封容 积小；易发生脂 质体的融合；弯 曲率大的脂质体 内外膜有差异 粒径大小不均匀
• 二、逆相蒸发法
• 方法：将磷脂等膜材溶于有机溶剂如氯仿 、乙醚等，加入待包封药物的水溶液进行 短时超声，直至形成稳定的W/O型乳剂， 减压蒸发有机溶剂，形成脂质体。 • 此方法制备的脂质体一般为大单层脂质体 • 此方法可用于包裹基因和耐受有机溶剂的 物质。
• 三、溶剂注入法
• 方法：将脂质体膜的组成成分溶解于有机 溶剂中，然后加入到含有包裹材料的水溶 液中，混合后出现两相，采用震荡、超声 等方法使磷脂在水相中形成脂质体。 • 1、乙醇注入法 • 2、乙醚注入法
•
• • • • •
（２）将能识别特定组织、细胞的特异性配体如抗体、激素和糖蛋白等 直接联于脂质体，使其分布到相应的组织器官 （３）用磁场控制载体复合物的组织分布 ６、靶向性分级
Ⅰ级为器官组织靶向性 Ⅱ级为细胞靶向性 Ⅲ级细胞内靶向性
第二节 脂质体的靶向性
• 二、脂质体作为靶向药物载体的特点
• • • • • •
第二节 脂质体的靶向性
• 三、脂质体靶向治疗的限制 脂质体在体内稳定性 脂质体的应用 前景取决于 与靶细胞的选择性作用 药物或基因释放入靶细胞内的效率与浓度
• 被细胞和巨噬细胞从循环中清除，不利于治疗RES外疾病 • 静脉注射脂质体后大部分限制在血管
第二节 脂质体的靶向性
• 四、靶向类型 • １、被动靶向 • 脂质体由网状内皮系统的细胞摄取 • ２、主动靶向 • 脂质双层上装上归巢装置：抗体、激素、糖残基、受体配体 • ３、物理化学靶向 脂质体中掺入某些特殊脂质，使脂质对pH或温度等变化敏感
脂质体
复乳法 离心法 前体脂质体法
………..
制备方法
• 一、薄膜分散法: • 方法：将类脂溶于有机溶剂中,通入氮气或减压除去有机 溶剂,在容器壁上形成类脂薄膜，然后加入含有水溶性药 物的缓冲液，通过振摇使类脂膜吸水膨胀，弯曲封闭形成 脂质体（大多层脂质体）。 • 举例：三七总皂苷脂质体的制备 • 准确称取处方量的注射用大豆磷脂、胆固醇，加适量乙醚 使其溶解并转移至250ml茄形瓶中，置25℃恒温水浴减压 除去乙醚，使脂质体在瓶壁上成均匀薄膜，茄形瓶置真空 干燥箱内真空干燥过夜，瓶内加入含处方量三七总皂苷的 磷酸盐缓冲液适量以及2粒直径为0.8mm的搅拌子，25 ℃ 恒温水浴旋转洗膜1小时，得乳白色混悬液。 • 通过干膜超声法、薄膜-振荡分散法、薄膜-匀化法、薄膜 -挤压法等使薄膜法制得的大多层脂质体分散成单层或大 单层脂质体。
•
（１）毒性最低、无免疫原性、无致热原性、能正常代谢和消除。 （２）脂质体的大小、成分、表面电荷等有很大的选择空间。 （３）脂质体对亲水性和亲脂性的药物都能包裹。 （４）制备简单 （５）靶向分子能以最优结构与靶部位受体结合 （６）为所包裹药物的靶向性提供新的可能性。
（７）在载药脂质体表面结合不同的配基将药物递送到特定靶组织和靶细胞 。
• 多室脂质体特点：粒径在100nm以上，含数层磷脂双分子层，包封容 积大，脂溶性药物包封率高；相对稳定性好；但难以将包封的药物有 效的送入细胞中，形状大小不均匀，体循环时间短。 • 多相脂质体的特点：避免了单室或多室脂质体对脂溶性药物包封不全 而呈较大油珠，符合静脉注射给药。
第一节 概述 • （三）根据脂质体的结构性能分类 • 1.普通脂质体 • 主要由中性的或带负电荷磷脂和胆固醇组成；与细胞的作用方式 为内吞；易被网状内皮系统（RES）吞噬；体循环时间短；药物体内 过程（PK）有剂量依赖性。 • 2.特殊性能脂质体： • （1）pH敏感脂质体：主要由磷脂酰乙醇胺或二油酰磷脂酰乙醇胺与 半琥珀酸胆固醇或油酸混合制成；易被细胞内吞；在低pH条件下， 可与细胞膜或核内体膜融合，在胞浆释放药物；适于弱碱性和大分子 药物，体内分布和（PK）类似普通脂质体。 • （2）阳离子脂质体：多由一种中性磷脂和一种或多种阳性成分组成 ；可与细胞膜或核内体膜融合；适合于载带负电荷的大分子片段；易 制备，稳定性差，给予高剂量时有一定毒性。 • （3）长循环脂质体：由中性相转变温度高的脂质组成；表面高度亲 水，可避免被RES吞噬；体循环时间长。
第一节 概述
（二） 脂质体的渗透性 脂质体膜具有半透膜性质，不同分子和粒子透过膜的扩散速 率不同。 （三）脂质体的表面电性 脂质体表面电性对其包封率、稳定性、体内分布影响较大。 电性的测定方法有荧光法和显微电泳法。 （四）脂质体粒径及其分布 脂质体的粒径大小及其分布均匀程度直接影响脂质体的稳定 性及体内的吸收和分布。脂质体粒径的测定方法有：显微镜法、电
• 六、冻结融解法
• 方法：将用超声波法处理得到的小单层脂 质体悬液，加入待包封的物质，在低温上 冻结，取出融解，脂质双分子膜重新排列 形成大单层脂质体。
• 七、主动包封法
• 方法：制备具一定酸碱度的空白脂质体， 调节空白脂质体混悬液的pH值，加入药物 溶液。 • 特点：包封率高。
• 八、冷冻干燥法 • 方法：将类脂高度分散在水溶液中，冷冻 干燥，然后再分散到含药的水性介质中， 形成脂质体。 九、复乳法： 方法：将少量水相与较多量的磷脂油相进行 乳化，形成W/O的反相胶团，减压除去部 分溶剂，然后加较大量的水相进行乳化， 形成W/O/W型复乳，减压蒸发除去有机溶 剂，即得。
第一节 概述
• （4）免疫脂质体和受体介导脂质体：普通脂质体或长循环脂质体中 掺入抗体或能被细胞特异识别物质。受体介导的细胞内吞；特异的细 胞靶向性；药物也可在细胞外靶点附近释放，通过扩散进入细胞发挥 疗效。 • （5）其他：超声波敏感脂质体、光敏感脂质体、磁性脂质体。 • （四）根据用途和给药途径分类 • 1、聚合膜脂质体：将具有聚合能力的官能团组投入到类脂分子中作 为单体以制备脂质体，然后在脂质体中使类脂分子聚合，发生这种聚 合反应的脂质体称为聚合膜脂质体。 • 2、气雾化脂质体 • 3、静脉滴注脂质体 • 4、口服给药脂质体 • 5、眼部用药脂质体 • 6、黏膜给药脂质体 • 7、外用脂质体 • 8、免疫诊断用脂质体 • 9、其他
第二节 脂质体的靶向性
• • • • • • ４、载药系统分类 （１）大分子载体，如蛋白质、葡聚糖、DNA、脂质体和合成的多聚体 （２）颗粒载体，如微粒、纳米粒、脂肪乳剂、磁力控制系统 （３）细胞药物载体，如红细胞、白细胞等。 ５、靶向药物释放系统的分类： （１）利用载体的物理特性，使其在特征环境下释放药物
第二节 脂质体的靶向性
• 一、靶向性的概念
• • • • • • • • • • • • １、靶向性治疗：利用载体药物释放系统改变药物的动力学，仅使药物作用于 病变部位的靶细胞，而避免对正常细胞的作用。 ２、药物靶向传递的方法： （１）药物本身具有靶向能力 （２）将药物以药理惰性的形式给予，在靶部位经化学或酶活化后发挥治 疗作用。 （３）利用生物惰性大分子载体系统将药物靶向于特定部位。（可溶性大 分子药物传递系统、颗粒药物传递系统） ３、理想药物载体复合物具备的条件： （１）药物在体内输送过程中不被降解或过早释放 （２）具备特异靶向性，能被靶向组织或细胞识别 （３）对宿主的毒性低且无副作用 （４）可按预期的速率释放药物 （５）可在宿主体内降解而不致积蓄 （６）具有生化稳定性而无免疫原性
子显微镜法、Coulter计数法、激光散射法、离心沉降法和微孔滤
膜-吸光度法。 （五）脂质体膜的流动性
第一节 概述
四、脂质体的作用特点
靶向性
提高被包封药物 的稳定性
长效作用
作用特点
降低药物毒性
改变药物动力学性质 和组织分布
与细胞在体内外 的相互作用