《医学免疫学与微生物学》实验报告

［实验名称］:沉淀反应 ［实验目的］:通过单向琼脂扩散测定待测血清Ig 含量

［实验材

料］: 打孔器

(1)

将溶解后的离子琼脂冷却到4 5 °C ，加入适

当浓度的抗原混 合均匀，吸取3—4毫升加在载玻片上，使其均匀布满载玻片 而又

不流失。

(2) 琼脂凝固后制成凝胶板，然后隔适当距离打孔。

(3) 在孔内滴加待测可溶性抗体。

(4) 将凝胶平板放入带盖瓷盘中，下面垫一湿纱布以保持湿度，置 于3

7 °0恒温箱中2 4小时，观察沉淀环。

单向琼脂扩散是一种定量试验，主要用来测定标本中各种免疫球

蛋白或补体成分的含量。

在孔中加入待测抗体使其向四周扩散，经一定时间后抗体与琼脂

中抗原相遇，在比例适宜处生成白色沉淀环。

沉淀环直径与抗体浓度成正比。根据测试样品沉淀环直径的大

小，可从已知的标准曲线中查出样品中抗体的含量。

实验二

［实验名称］:间接凝集抑制试验（妊娠试验）

［实验目的］:测定待检尿液中是否含HCG （绒毛膜促性腺激素）以诊断妊娠

［实验材料］:孕妇尿液、非孕妇尿液、HCG 致敏乳胶抗原、抗HCG 血清、载

实验一

1%离子琼脂、白喉类毒素、白喉抗毒素、载玻片、毛细吸管

［试验步骤］: ［实验结果］: (沉淀环直径) 测量沉淀环直径:

毫米

［实验分析］

玻片等

［试验步骤］:

（1）取一片载玻片，标记出左右。

（2）在载玻片左侧加一滴待检尿液，右侧加一滴非孕妇尿液。

（3）在两侧尿液中分别加一滴抗HCG血清，摇动混匀2 —3分钟。

（4）在两侧液滴中分别再加一滴HCG致敏乳胶抗原，摇动混匀2 — 3分钟。

（5）观察判定结果。

［实验结果］:（凝集和非凝集的描述）

左侧（待检尿液侧）呈现均匀的乳状液状态，无凝集颗粒。间接凝集抑制阳性。

右测（非孕妇尿液侧）出现明显的凝集颗粒。间接凝集抑制阴性。

［实验分析］:（结合实验原理）

孕妇尿液中的HCG含量显著增高。尿液中的HCG与加入的抗HCG结合, 抗HCG被消耗，使得加入的HCG乳胶抗原不能再与抗HCG结合，不出现乳胶抗原间接凝集反应（凝集被抑制），所以液滴呈现均匀乳状液，为乳胶间接凝集抑制阳性反应。

非孕妇尿液中HCG含量极少，不足以抑制抗HCG与HCG乳胶抗原发生间接凝集反应，所以出现乳胶颗粒的凝集，为乳胶间接凝集抑制阴性反应。

实验三

认识细菌的基本形态和特殊结构，学会使用显微镜油镜头 显微镜、香柏

油、—甲苯、镜头纸、球困标本片、杆困标本片、弧 菌标本片、荚膜标本片、芽抱标本片、鞭毛标本片

［试验步骤］: （一）显微镜油镜头的使用

1、用油镜观察时光线宜强，可将聚光器升高，开大光圈。

2、在标本片上滴加一滴香柏油。

3、 眼睛从镜筒侧面观察，同时缓慢将镜筒调至镜头浸入香柏油中（勿接触标本片）。

4、 眼睛移至目镜。先用粗调焦螺旋缓慢将油镜调离标本玻片直至观察到模糊物象，

再用细调焦螺旋调至物象清晰。观察。

5、观察完毕后把油镜头擦拭干净，显微镜复位收好。

（二）细菌基本形态的观察 （三）细菌特殊结构的观察（示教） ［实验结果］:（绘图）根据观察结果绘制细菌基本形态、 特殊结构图（不少于两幅） ［实验分析］:（结合结构的功能）

1、细菌的基本形态有球形、球杆形、杆形、弧形、螺旋形五种形态。

2、某些细菌在生长繁殖时，可分泌一些粘液性物质包绕在细胞壁外围， 称为荚膜,

用特殊染色法可将荚膜染成与菌体不同的颜色。荚膜具有抗原性，可以鉴别细

菌或细菌分型；细菌的荚膜与其致病性有关。

3、某些细菌由细胞质伸出的细长弯曲的蛋白质丝状物，称为鞭毛。鞭毛是细菌的

运动器官，鞭毛具有较强的抗原性，有些细菌的鞭毛与其致病性有关。

4、某些G ―的菌体上有比鞭毛细、短而直、数量多的丝状物，称为菌毛，主要成

分是蛋白质。菌毛分普通菌毛（与细菌致病力有关）和性菌毛（传递遗传物质、

使受体菌获得某些相应性状）

5、某些G "在体内外营养物质缺乏的环境下，细胞浆发生脱水浓缩，在菌体内形

［实验名称］: 细菌形态、特殊结构观察及显微镜油镜头使用

［实验目的］: ［实验材料］:

成一个折光性强、通透性低的圆形或椭圆形小体，称为芽抱。用特殊染色法可将芽抱染成与菌体不同的颜色。芽抱的大小、形态和位置随菌种不同而有差异,

有助于细菌的鉴别；芽抱对热、干燥、化学消毒剂和辐射都有较强的抵抗力。

《医学免疫学与微生物学》实验报告

实验四

观察细菌菌落形态、溶血现象、色素；细菌标本的涂片和革兰氏染 色法检

查 细菌人工培养性状观察示教片、大肠杆菌菌落、葡萄球菌菌落、载

玻片、生理盐水、接种环、酒精灯、结晶紫染液、卢戈氏碘液、95% 酒精、复红染液、显微镜等

［试验步骤］: （一）细菌菌落形态、溶血现象、色素等观察（示教） （二）细菌标本的涂片

1、取两张洁净的载玻片，分别滴加一滴生理盐水。

2、以无菌操作法，用接种环分别挑取少许大肠杆菌菌落和葡萄球菌菌落，分别

涂于两张载玻片的生理盐水中研成均匀混浊的菌膜 （不可过厚）后自然干燥。

3、将干燥后的标本片在酒精灯的火焰上方快速通过三次，予以固定。

（三）染色将制好的标本片按下列步骤进行染色

1、在两片标本片上分别滴加结晶紫染液初染1分钟，水洗。

2、滴加卢戈氏碘液媒染1分钟，水洗。

3、滴加9 5%酒精，摇动载片0 .5 — 1分钟脱色至恰无紫色退下，水洗。

4、 滴加稀释复红染液，复染0 .5 — 1分钟，水洗，干燥。

5、 镜检。葡萄球菌（G +球菌）染成紫色，大肠杆菌（G —

菌）染成红色。

［实验结果］:（描述不同细菌菌落的区别，绘图表示革兰氏染色的镜下结果） 1、液体培养基中：葡萄球菌呈均匀混浊生长，链球菌呈沉淀生长，枯草杆菌形成

菌膜；在普通琼脂平板上：金黄色葡萄球菌产生脂溶性金黄色色素使菌落呈现 金黄色但培养基颜色不变，绿脓杆菌产生水溶性色素使培养基呈现绿色；在血

琼脂平板上：金黄色葡萄球菌菌落周围形成透明的溶血环，甲型溶血性链球菌

［实验名称］: 细菌人工培养性状观察及革兰氏染色法

［实验目的］: ［实验材料］: