离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察
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离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察
实验目的:学习一种离体组织器官实验方法;观察离子成分,酸碱度,温度,乙酰胆碱,肾上腺素等药物对离体家兔小肠
平滑肌的作用;分析平滑肌活动的某些生理特性及理化
环境改变对它的影响。
实验原理:消化道平滑肌具有自动节律性,较大的伸展性,对化学物质,温度及牵张刺激较为敏感等生理特性。将离体的
组织,器官置于模拟的内环境中,可在一定时间内保持
其功能,从而为我们检测它们的生理学和药理学特性提
供了便利的条件。功能和维持的时间长短与模拟内环境
的精确性和稳定性有关。
实验动物:家兔,体重2.0~~2.5kg,雌雄不拘。
实验器材:台氏液,0.01%肾上腺素溶液,0.01%乙酰胆碱溶液,0.01%阿托品溶液,1mol/L盐酸溶液,1mol/L氢氧化钠溶液。
恒温平滑肌槽,小烧杯,丝线,温度计,张力换能器,污
物杯,双凹夹。
实验步骤:1..处死动物
2.制备肠段标本
注意事项:1.肠管勿牵拉过紧或过松,且连线必须垂直,且不得与浴槽的管壁,通气塑料管接触,以免摩擦。
2.浴槽中液体的量以高过肠段为准,并保持液面高度一
致。
3.药物应滴在肠管附近,药物要事先预热至38度。各药
用量系参考剂量,若效果不明显,可以增补加药,但不
可一次过多,以免引起不可逆反应。
4.每次加药出现反应后,必须立即更换浴槽内的台氏液
至少三次,待肠管恢复稳定活动后,再观察下一项目。
实验结果:1.
正常情况下,离体小肠平滑肌在台氏液中可以自由缓
慢收缩,但其节律性不规则。在浴槽中加入乙酰胆碱
后可见离体肠管活动增强,描计曲线出现收缩频率变
快,幅度增加。出现上述现象是因为消化道平滑肌
产生动作电位的离子基础与钙离子的内流有关,乙
酰胆碱可与肌膜上的M受体结合,使得两类通道开
放:一类为电位敏感性钙离子专用通道,另一类为
特异性受体活化钙离子专用通道。前一类对Ach敏
感,小剂量Ach即引起开放;后一类对Ach相对不
敏感,只有大剂量才会引起开放。这两类通道开放
都使得肌浆中钙离子增高,进而激活肌纤蛋白—肌
凝蛋白—ATP系统,使平滑肌收缩,肌张力增加。
当加入抗胆碱药阿托品后,现象消失。
2.
在浴槽中加入肾上腺素后,可见离体肠管活动减弱,描计曲线出现收缩频率变慢,幅度减小以及基线下移。因为肠肌细胞膜上存在α于β受体, 前者又分为抑制性受体和兴奋性受体,肾上腺素作用于抑制性受体,引起肠肌膜上一种特异性受体活化,使钾离子外流增多,细胞膜发生超极化,肠肌兴奋性降低,肌张力下降,同时肾上腺素还作用于β受体,它的激活引起肠肌细胞膜上的cAMP合成增多,激活了肠肌膜及肌浆网上钙离子泵活动,使肌浆中钙离子浓度降低使肌张力下降。Β受体激活后促使钾离子及钙离子外流增加,加速膜的超极化,促进了肌张力的减低。
3.
在浴槽中加入盐酸溶液后,离体肠管活动减弱,描计
曲线出现收缩幅度降低,频率变慢。这是由于细胞外
氢离子升高,钙离子通道的活性受到抑制,使得钙离
子内流减少。氢离子升高能干扰肌肉的代谢和肌丝滑
行的生化过程,氢离子能与钙离子竞争钙调蛋白的结
合位点而使肌球蛋白ATP酶活性降低,使肌原纤维
对钙离子的敏感性和钙离子从肌质网的释放量减少。
再加入NaOH后肠管活动出现相反的情况,及肠管
活动增强,这是因为NaOH可以中和氢离子,改变
细胞外液的PH值,PH过高过低,收缩幅度及张力
都会降低,最适PH时收缩效果最好。
实验讨论:1.消化道平滑肌具有自律性,但其收缩缓慢,节律性不规则。
2.消化道平滑肌具有一定的紧张性。
3.消化道平滑肌的活动易受温度,PH值及其他化学因
素,药物因素的影响。
小组成员:赵政王养才王仑陈龙陈伟