放线菌的选择培养基

合集下载

什么是选择培养基？常用的选择培养基有哪些。

什么是选择培养基？常⽤的选择培养基有哪些。

选择培养基是根据某⼀种或某⼀类微⽣物的特殊营养要求或对⼀些物理、化学抗性⽽设计的培养基。

利⽤这种培养基可以将所需要的微⽣物从混杂的微⽣物中分离出来⼀、⽜⾁膏蛋⽩胨培养基(培养细菌⽤)⽜⾁膏 3g；蛋⽩胨 10g；NaCl 5g；琼脂 15—20g；⽔ 1000ml；pH 7．0—7．2；1．05kg/cm2 ，121．3℃灭菌20分钟。

⼆、淀粉琼脂培养基(⾼⽒1号培养基，培养放线菌⽤)可溶性淀粉 20g；KNO3 1g；NaCl 0．5g；K2HPO4 0．5g；MgSO4 0.5g；FeSO4 0．01g琼脂 20g;⽔ 1000ml;pH 7．2—7．4配制时，先⽤少量冷⽔，将淀粉调成糊状，在⽕上加热，边搅拌边加⽔及其他成分，溶化后，补⾜⽔分⾄1000ml。

1．05kg/cm2 ，121．3℃灭菌20分钟。

三、查⽒培养基(培养霉菌⽤)NaNO3 2g；K2 HPO4 1g；KCl 0．5g；MgSO4 0．5g；FeSO4 0．01g；蔗糖 30g琼脂 15—20g；⽔ 1000ml；pH ⾃然；1．05kg/cm2 ，121．3℃灭菌20分钟。

四、马丁⽒(Martin)琼脂培养基(分离真菌⽤)葡萄糖 10g；蛋⽩胨 5g；KH2PO4 1g； MgSO4·7H2O 0．5g；1/3000孟加拉红溶液 100ml；琼脂 15—20g；pH ⾃然;蒸馏⽔ 800ml;0．56kg/cm2 (8磅/英⼨2 )，112．6℃灭菌30分钟。

临⽤前加⼊0．03%链霉素稀释液100ml，使每毫升培养基中含链霉素30µg。

五、马铃薯培养基 (实验16)马铃薯 200g；蔗糖(或葡萄糖) 20g；琼脂 15—20g；⽔ 1000ml；pH ⾃然马铃薯去⽪，切成块煮沸半⼩时，然后⽤纱布过滤，再加糖及琼脂，溶化后补⾜⽔⾄1000ml。

1．05kg/cm2 ，121．3℃灭菌20分钟。

放线菌的选择培养基

高氏一号合成培养基的制备、土壤中放线菌的分离实验材料：培养基成分：可溶性淀粉、KNO3、NaCl、K2HPO4•3H2O、MgSO4•7H2O、FeSO4•7H2O、琼脂。

实验内容：高氏一号合成培养基是培养放线菌的培养基。

这种培养基是采用化学成分完全了解的纯试剂配制而成的培养基，高氏一号培养基：碳源为可溶性淀粉、氮源为KNO3 、NaCl 、K2HPO4•3H2O 、MgSO4•7H2O作为无机盐，FeSO4•7H2O作为微生物的微量元素，提供铁离子等组成。

放线菌是重要的抗生素产生菌，主要分布在土壤中，其数量仅次于细菌，一般在中性偏碱性、有机质丰富、通气性好的土壤中含量较多。

由于土壤中的微生物是各种不同种类微生物的混合体，为了研究某种微生物，就必须把它们从这些混杂的微生物群体中分离出来，从而获得某一菌株的纯培养。

分离放线菌常用稀释倒平板法。

根据放线菌的营养、酸碱度等条件要求，常选用合成培养基或有机氮培养基。

如果培养基成分改变，或土壤预先处理（120℃热处理1h），或加入某种抑制剂（如加数滴10%酚等），都可以使细菌，霉菌出现的数量大大减少，从而淘汰了其它杂菌。

再通过稀释法，使放线菌在固体培养基上形成单独菌落，并可得到纯菌株。

实验步骤：1.高氏一号合成培养基的制备先将可溶性淀粉称好，在小烧杯内用50~100ml水调成糊状，再在另一容器内加入900~950ml热水，将小烧杯内淀粉倒入混匀。

再分别称取其它药品，并加热搅拌使之溶解后，调pH至7.2~7.4，分装，0.1Mpa（15lb/in2）15~30min高压蒸汽灭菌。

2.土壤中放线菌的分离（1）取9套无菌平皿，在皿底贴上标签，注明土壤稀释液的稀释度（10-3、10-4、10-5）、组别、姓名、操作日期等。

每个稀释度做三个培养皿。

然后在每皿中倒入已溶化并冷至50℃左右的高氏一号培养基15~20ml左右，待冷凝成平板。

（2）将土样放入用酒精擦拭过的乳钵中，除去石块、草根、研磨压碎后，称取5g，放入盛有45ml无菌水的三角瓶中。

土壤中放线菌的分离

土壤中放线菌的分离
分离土壤中的放线菌的步骤如下：
1. 准备培养基：选择适合放线菌生长的培养基，常用的包括土壤提取物富集培养基、葡萄糖琼脂糖培养基、镜菌素琼脂糖培养基等。

2. 取样：在选择好的采样地点，使用消毒的工具（如消毒棉签或无菌铲子）采集土壤样品。

注意避免土壤样品的污染。

3. 预处理：将采集到的土壤样品放入无菌研钵中，加入合适的无菌生理盐水或者缓冲液，悬浮土壤样品，使放线菌被更好地释放出来。

可以对土壤样品进行稀释处理，以降低微生物密度。

4. 稀释平板法：将预处理好的土壤样品用无菌移液管分别
在培养基平板上均匀涂布。

然后放入恒温培养箱进行培养。

孵育时间一般为3-4周。

在培养箱内，放线菌会产生菌落
形成。

5. 单菌分离：在培养箱内观察到单个的放线菌菌落后，使
用消毒的工具将其分离到新的培养基上，形成纯种菌落。

这一步可以采用传统的传代分离法或微量分离法。

6. 纯种菌株保存：将得到的纯种菌株存储在适当的冻存管中，通过冻存进行长期保存。

需要注意的是，在进行上述步骤时，需要严格遵守无菌操
作的原则，避免样品或培养基的污染，以保证得到纯种的
放线菌菌株。

培养放线菌实施方案

培养放线菌实施方案放线菌是一类重要的微生物资源，具有广泛的应用价值。

在生物制药、农业生产、环境保护等领域都有着重要的作用。

因此，培养放线菌的实施方案显得尤为重要。

本文将介绍一种较为全面的培养放线菌的实施方案，希望能够对相关领域的研究人员和生产工作者提供一定的参考价值。

首先，培养放线菌需要准备适当的培养基。

放线菌培养基的配方一般包括碳源、氮源、矿质盐和生长因子等。

在选择碳源和氮源时，应该根据不同放线菌的需求进行合理搭配，以提高培养效果。

同时，还可以添加一定的生长因子，如维生素、氨基酸等，以促进放线菌的生长和代谢。

其次，培养放线菌需要注意合适的培养条件。

放线菌一般喜欢在较为潮湿的环境中生长，因此在培养过程中需要保持适当的湿度。

同时，温度和氧气供应也是影响放线菌生长的重要因素，应该根据不同放线菌的生长特性进行合理控制。

另外，培养放线菌还需要进行合适的分离和筛选。

在培养过程中，可能会存在多种微生物混合生长的情况，因此需要进行分离和筛选，以获得纯种的放线菌。

这需要借助于一定的分离技术和筛选方法，如稀释平板法、筛选培养基等，以确保获得纯种的放线菌。

最后，对于某些特殊放线菌的培养，可能还需要进行一定的改良和优化。

有些放线菌在自然环境中生长缓慢，或者在传统培养条件下难以获得理想的培养效果，这就需要进行一定的改良和优化。

可以通过改变培养基的配方、调整培养条件、引入基因工程等手段，以提高放线菌的培养效率和产量。

总之，培养放线菌是一个复杂而又重要的工作，需要综合运用生物学、微生物学、生物工程学等多个学科的知识。

通过合理的培养实施方案，可以更好地利用放线菌资源，促进相关领域的发展和进步。

希望本文介绍的培养放线菌实施方案能够为相关研究和生产工作提供一定的帮助和指导。

微生物学实验常用培养基的配制

牛肉膏蛋白胨培养基（培养细菌用）牛肉膏3g蛋白胨5g氯化10g钠琼脂15~20gpH 7.0~7.2水1000mL 121℃灭菌20min。

2、高氏（Gause）1号培养基（培养放线菌用）可溶性淀20g粉硝酸钾1g氯化0.5g钠磷酸氢二钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g琼20g脂水1000mLpH7.2～7.4配制时，先用少量冷水将淀粉调成糊状，倒入煮沸的水中，在火上加热，边搅拌边加入其他成分，溶化后，补足水分至1000mL。

121℃灭菌20min。

3、查氏（Czapek）培养基（培养霉菌用）硝酸钠2g磷酸氢二钾1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂15~20g水1000mLpH 自然121℃灭菌20min。

4、马丁氏（Martin）琼脂培养基（分离真菌用）葡萄糖10g蛋白胨5g磷酸二氢钾1g七水合硫酸镁0.5g1/3000孟加拉红100mL（rose bengal，玫瑰红水溶液）琼脂15—20gpH 自然蒸馏水800mL112℃灭菌30min。

临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL，使每毫升培养基中含链霉素30μg。

5、马铃薯培养基（简称PDA）（培养真菌用）马铃薯200g蔗糖（或葡萄糖）20g琼脂15—20gpH 自然培养基的配制：马铃薯去皮，切成块煮沸30min，然后用纱布过滤，再加糖及琼脂，熔化后补足水至1000mL。

121℃灭菌30min。

6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制：(1)、取大麦或小麦若干，用水洗净，浸水6—12小时，至15℃阴暗处发芽，上面盖纱布一块，每日早、中、晚淋水一次，麦根伸长至麦粒的两倍时，即停止发芽，摊开晒干或烘干，贮存备用。

(2)、将干麦芽磨碎，一份麦芽加四份水，在65℃水浴中糖化3—4小时，糖化程度可用碘滴定之。

加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤，滤液如混浊不清，可用鸡蛋白澄清，方法是将一个鸡蛋白加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

放线菌培养基 (2)

放线菌培养基简介放线菌属于厌氧细菌，产生许多有用的生物活性物质，如抗生素、抗肿瘤剂等。

要培养放线菌，需要一种适合其生长和繁殖的培养基。

本文将介绍一种常用的放线菌培养基配方。

培养基配方放线菌培养基的配方主要包括基础培养基、辅助因子和添加剂等。

基础培养基常用的放线菌基础培养基是固体培养基，其配方包括：•荚膜水解物：10克•葡萄糖：5克•柠檬酸：1克•氯化钙：0.05克•Agar：15克•蒸馏水：1000毫升将荚膜水解物、葡萄糖和柠檬酸溶解在蒸馏水中，加热煮沸，再加入氯化钙和Agar，将混合溶液调节至pH 7.2-7.4，然后装入培养瓶中，高压灭菌20分钟即可。

辅助因子放线菌的生长需要一些特殊的辅助因子，常用的包括：•青霉素：50单位/毫升•氯霉素：50毫克/毫升•铁盐：0.1毫克/毫升将这些辅助因子加入到基础培养基中，使得放线菌在培养基中能够获得充足的营养和生长环境。

添加剂为了提高放线菌的生长和产生生物活性物质的能力，可以在基础培养基中添加一些添加剂，常用的包括：•酵母浸出物：3克/升•大豆粉：20克/升•鱼粉：10克/升这些添加剂可以提供额外的氮源和碳源，促进放线菌的生长和代谢。

使用方法使用这种放线菌培养基进行放线菌的培养，可以按照以下步骤进行：1.准备培养基：按照上述配方制备基础培养基并添加辅助因子和添加剂。

2.高压灭菌：装满培养基的烧瓶密封好，放入高压锅中进行高压灭菌，温度为121°C，压力为15PSI，时间为20分钟。

3.倒入培养皿：将高压灭菌后的培养基迅速倒入培养皿中，摇晃培养皿使培养基均匀分布。

4.接种菌株：将欲培养的放线菌菌株接种到培养皿中，可以使用菌液或菌落接种。

5.培养条件：将接种后的培养皿放入恒温培养箱中，温度一般为28°C，培养时间根据放线菌的生长速度而定。

6.观察和记录：在培养过程中观察放线菌的生长情况，记录形态和色素的变化。

结论通过合适的放线菌培养基的配方和正确的培养条件，可以有效地培养出放线菌，并获取其产生的有用生物活性物质。

放线菌的培养与观察

放线菌的培养与观察摘要：对青色链霉菌（Streptomyces glaucus)和弗氏链霉菌(Streptomycesfradiae)进行有效的观察.实验利用高氏（Gause）一号培养基对放线菌在28℃下进行培养，并通过插片法，在普通光学显微镜下完成了对两种放线菌自然状态下的观察，观察到了基内菌丝以及孢子丝等结构。

关键词：放线菌插片法孢子丝链霉菌前言放线菌与人类的生产和生活关系极为密切，目前广泛应用的抗生素约70%是各种放线菌所产生。

一些种类的放线菌还能产生各种酶制剂，此外，放线菌还可用于甾体转化、烃类发酵、石油脱蜡和污水处理等方面。

而链霉菌属（Streptomyces）是最高等的放线菌，有发育良好的分枝菌丝。

已知放线菌所产抗生素的90％都由本属产生。

放线菌是属于一类具有分支状菌丝体的细菌，革兰染色为阳性。

大多数有发达的分枝菌丝。

菌丝纤细，宽度近于杆状细菌，约0.5～1微米。

可分为营养菌丝，气生菌丝，孢子丝三种，孢子丝的形状和排列方式因种而异。

孢子丝的形态、孢子的排列以及形状都是放线菌重要的分类学指标。

培养放线菌则使用的是高氏（Gause）一号培养基。

这种培养基属于合成培养基，对于其中的成分，我们能够精确地掌握。

实验中采用插片法来观察放线菌自然状态下的基内菌丝和孢子丝等结构。

本次试验就是将以这些为基础，培养和观察青色链霉菌（S. glaucus)与弗氏链霉菌(S. fradiae)，加深对放线菌的认识和理解。

1.材料与方法1.1 材料1.1.1 菌种青色链霉菌（S. glaucus)；弗氏链霉菌(S. fradiae)1.1.2 溶液与试剂可溶性淀粉；KNO3粉末；NaCl粉末；K2HPO4粉末；MgSO4粉末；FeSO4粉末；琼脂；水；1.1.3 仪器电子天平；烧杯；玻璃棒；药匙；加热器；10ml量筒；1ml移液管；高压蒸汽灭菌锅；培养皿；盖玻片；载玻片；酒精灯；接种环；镊子；试管；恒温箱；普通光学显微镜；300ml锥形瓶1.2 方法1.2.1 高氏一号培养基制备1.2.1.1 按照高氏一号培养基的配方称取各个成分，备下一步使用。

微生物学实验常用培养基的

牛肉膏蛋白胨培养基（培养细菌用）121℃灭菌20min。

2、高氏（Gause）1号培养基（培养放线菌用）配制时，先用少量冷水将淀粉调成糊状，倒入煮沸的水中，在火上加热，边搅拌边加入其他成分，溶化后，补足水分至1000mL。

121℃灭菌20min。

3、查氏（Czapek）培养基（培养霉菌用）121℃灭菌20min。

4、马丁氏（Martin）琼脂培养基（分离真菌用）112℃灭菌30min。

临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL，使每毫升培养基中含链霉素30μg。

5、马铃薯培养基（简称PDA）（培养真菌用）培养基的配制：马铃薯去皮，切成块煮沸30min，然后用纱布过滤，再加糖及琼脂，熔化后补足水至1000mL。

121℃灭菌30min。

(2)、将干麦芽磨碎，一份麦芽加四份水，在65℃水浴中糖化3—4小时，糖化程度可用碘滴定之。

加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

(4)、将滤液稀释到5—6波美度，pH约6.4，加入2%琼脂即成。

121℃灭菌30min。

7、无氮培养基（自生固氮菌、钾细菌）113℃灭菌30min。

8、半固体肉膏蛋白胨培养基121℃灭菌20min。

9、合成培养基加12 mL0.04%的溴钾酚紫（pH5.2—6.8，颜色由黄变紫，作指示剂）。

121℃灭菌20min。

10、豆芽汁蔗糖（或葡萄糖）培养基培养基的配制：称新鲜豆芽100g，放入烧杯中，加入水1000mL，煮沸约30min，用纱布过滤。

用水补足原量，再加入蔗糖（或葡萄糖）50g，煮沸熔化。

常用微生物培养基配方大全

（1）分离细菌时，在培养基中加入浓度为50U/ml制霉菌素，可以抑制霉菌和酵母菌的生长。

（2）分离放线菌时，在样品中加入0.05%十二烷基磺酸钠（SDS）不仅可以抑制细菌的生长，还能激活放线菌孢子的萌发。

加入氟哌酸（5mg/L）+制霉菌素（50mg/L）+青霉素（0.8mg/L）也可以有效地抑制细菌和真菌，而不影响放线菌的生长。

（3）分离霉菌和酵母菌时，在培养基中加入青霉素、链霉素和四环素各30U/ml，可以抑制细菌和放线菌生长。

（4）分离根霉和毛霉时，由于这些微生物的菌丝易蔓延成片，难以得到纯化的菌落，通常在培养基中添加0.1%去氧胆酸钠或山梨醇防止菌丝蔓延，使菌落长得小而紧密。

一般用于分离单一目的微生物的培养基中均含有抑制其他微生物的抑制剂，这些专用的抑制剂在小型实验室配制较麻烦，现已有成品供应，只要直接加入基础培养基即可。

如氨苄西林，主要用于分离亲水气单孢菌。

1、细菌培养基配方一牛肉膏琼脂培养基牛肉膏0.3克，蛋白胨1.0克，氯化钠0.5克，琼脂 1.5克，水1000毫升在烧杯内加水100毫升，放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠，用蜡笔在烧杯外作上记号后，放在火上加热。

待烧杯内各组分溶解后，加入琼脂，不断搅拌以免粘底。

等琼脂完全溶解后补足失水，用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.2～7.6,分装在各个试管里，加棉花塞，用高压蒸汽灭菌30分钟。

配方二马铃薯培养基取新鲜牛心（除去脂肪和血管）250克，用刀细细剁成肉末后，加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。

在烧杯上做好记号，煮沸，转用文火炖2小时。

过滤，滤出的肉末干燥处理，滤液pH值调到7.5左右。

每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心，灭菌，备用。

配方四根瘤菌培养基葡萄糖10克磷酸氢二钾0.5克碳酸钙3克硫酸镁0.2克酵母粉0.4克琼脂20克水1000毫升1%结晶紫溶液1毫升先把琼脂加水煮沸溶解，然后分别加入其他组分，搅拌使溶解后，分装，灭菌，备用。

常用培养基制备灭菌与消毒

分生孢子丝
气生菌丝琼脂表面基内菌丝
The cross section of an actinomycete colony showing the substrate mycelium（基内菌丝） and aerial mycelium （气生菌丝）with chains of conidiospores（分生孢子）
放线菌生长到一定阶段，大部分气生菌丝分化成孢子丝，通过横割分列的方式产生成串的分生孢子。孢子丝形态多样，有直、弯曲、钩状、螺旋状、轮生等多种形态。孢子也有球形、椭圆形、杆状和瓜子状等等。它们的形态构造都是放线菌分类鉴定的重要依据。放线菌的菌落早期绒状同细菌菌落月牙状相似，后期形成孢子菌落呈粉状、干燥，有各种颜色呈同心圆放射状。
平板划线法： 1、倒平板，标记培养基名称，编号和实验日期。
2、划线方法
稀释混合平板法： 1、先加菌 2、倒平板时注意培养基温度 3、混合均匀
微生物培养技术
1、斜面接种 2、液体培养基接种 3、穿刺接种将已接种的斜面、半固体和液体培养基放置培
养箱中培养将生长好的菌种用牛皮纸包好，置4℃
冰箱中
查氏合成培养基
查氏合成培养基是用来分类和培养霉菌的培养基,其配方如下：
NaNO3 3g,K2HPO4 1g, KCl 0.5g, MgSO4.7H2O 0.5g,FeSO4 0.01g,蔗糖 30g, H2O 1000ml,pH自然
麦芽汁培养基
用来培养酵母菌,干麦芽粉加4倍水,在5060℃保温糖化3-4小时，用碘液试验检查至糖化完全为止,调整糖液浓度,煮沸后，过滤，调pH为6.0。
有二层小梗
青霉
青霉的形态结构 A单轮型 B非对称型 C对称二轮型

放线菌培养基配方

放线菌培养基配方放线菌是一类重要的微生物资源，具有广泛的应用价值。

为了研究和利用放线菌，科学家们开发了各种放线菌培养基。

本文将介绍几种常见的放线菌培养基配方及其组成。

一、固体培养基配方1. 鸡蛋葡萄糖琼脂培养基鸡蛋葡萄糖琼脂培养基是一种简单常用的放线菌培养基。

其配方包括鸡蛋黄、葡萄糖、琼脂等成分。

鸡蛋黄提供了丰富的营养物质，葡萄糖是放线菌生长所必需的能源，琼脂起到了凝固培养基的作用。

2. 土壤提取物琼脂培养基土壤提取物琼脂培养基是一种复杂的放线菌培养基，其配方包括土壤提取物、葡萄糖、琼脂等成分。

土壤提取物中含有丰富的有机物和微量元素，可提供放线菌生长所需的多种营养物质。

3. 大豆粉葡萄糖琼脂培养基大豆粉葡萄糖琼脂培养基是一种富含植物蛋白的放线菌培养基。

其配方包括大豆粉、葡萄糖、琼脂等成分。

大豆粉中含有丰富的植物蛋白，可提供放线菌生长所需的氮源。

二、液体培养基配方1. 蛋白胨培养基蛋白胨培养基是一种简单常用的放线菌培养基。

其主要成分是蛋白胨，还可以添加葡萄糖、盐等成分。

蛋白胨是一种消化蛋白质的产物，含有丰富的氨基酸和肽类物质，可提供放线菌生长所需的营养物质。

2. 磷酸盐缓冲液培养基磷酸盐缓冲液培养基是一种适用于放线菌发酵的培养基。

其主要成分是磷酸盐缓冲液，还可以添加葡萄糖、酵母提取物等成分。

磷酸盐缓冲液可以维持培养基的pH值稳定，促进放线菌的生长和代谢。

3. 蛋白胨酵母浸泡液培养基蛋白胨酵母浸泡液培养基是一种富含氮源的放线菌培养基。

其主要成分是蛋白胨、酵母浸泡液，还可以添加葡萄糖、琼脂等成分。

蛋白胨和酵母浸泡液中含有丰富的氨基酸和氮源，可促进放线菌的生长和代谢。

三、特殊培养基配方1. 抗生素抑制培养基抗生素抑制培养基是一种用于筛选放线菌的培养基。

其主要成分是抗生素，可以抑制其他细菌的生长，使得放线菌能够优势生长。

在配方中可以使用多种抗生素，以增加对不同细菌的选择性。

2. 低氧培养基低氧培养基是一种模拟放线菌自然生长环境的培养基。

36种常用微生物培养基配制汇总

36种微生物常用培养基配制1.牛肉膏蛋白胨培养基（用于细菌培养）牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，水1000mL，pH7.4～76。

2.高氏1号培养基(用于放线菌培养)可溶性淀粉20g，KNO3 1g，NaCl 0.5g，K2HPO4•3H2O 0.5g，MgSO4•7H2O0.5g，FeSO4•7H2O0.01g，水1000mL，pH7.4～76。

配制时注意：可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。

3.马丁氏（Martin）培养基（用于从土壤中分离真菌）K2HPO41g，MgSO4•7H2O0.5g，蛋白胨5g，葡萄糖10g，1/3000孟加拉红水溶液100mL，水900mL，自然pH，121℃湿热灭菌30min。

待培养基融化后冷却55～60℃时加入链霉素(链霉素含量为30μg/mL)。

4.马铃薯培养基(PDA)(用于霉菌或酵母菌培养)马铃薯(去皮)200g，蔗糖(或葡萄糖)20g，水1000mL，配制方法如下：将马铃署去皮，切成约2cm2的小块，放入1500mL的烧杯中煮沸30min，注意用玻棒搅拌以防糊底，然后用双层纱布过滤，取其滤液加糖，再补足至1000mL，自然pH，霉菌用蔗糖，酵母菌用葡萄糖。

5.察氏培养基(蔗糖硝酸钠培养基)(用于霉菌培养)蔗糖30g，NaNO3 2g，K2HPO4 1g，MgSO4•7H2O0.5g，KCl 0.5g，FeSO4•7H2O0.1g，水1000mL，pH7.0～72。

6.Hayflik培养基(用于支原体培养)牛心消化液(或浸出液)1000mL，蛋白胨10g，NaCl 5g，琼脂15g，pH7.8～8.0，分装每瓶70mL，121℃湿热灭菌15min，待冷却至80℃左右，每70mL中加入马血清20mL，25%鲜酵母浸出液10mL，15醋酸铊水溶液2.5mL，青霉素G钾盐水溶液(20万单位以上)0.5mL，以上混合后倾注平板。

*注意：醋酸铊是极毒的药品，需特别注意安全操作。

lab-1放线菌的选择分离与计数

实验一放线菌的选择分离与计数一教学要求
放线菌有多种代谢产物，如抗生素，维生素、氨基酸、蛋白质、淀粉酶、脂肪酶、纤维素酶等，很多产物在农业、医疗、食品及国防等领域产生了巨大的效益。本实验的目的在于学习从土壤等环境中分离放线菌
二实验原理
土壤中含有丰富的放线菌，但主要是链霉菌，链霉菌以外的其他放线菌，如小单孢菌、游动放线菌、诺卡氏菌等，它们是生物活性物质重要的产生菌。但往往由于样品中稀有放线菌的数量太少，常规的分离方法很难得到。对样品进行风干、干热处理、培养基添加重铬酸钾的方法减少细菌和真菌的数量；用干热和苯酚处理减少链霉菌数量的方法，可以分离得到更多种类的放线菌。
三材料与器材
菜园土或林地土，自然风干，备用。 0.1％重铬酸钾溶液，1％苯酚，高氏1号培养基。水浴锅等。
四操作步骤
取样及预处理
1、来源：土壤中放线菌最丰富，品种齐全。可以筛选新的放线菌。从堆肥或过热的材料中如干草或蔗渣中可分离到大量的嗜热放线菌，从淡水和海洋环境中分离到嗜碱性的和嗜酸性的菌种。 2、取样及预处理（1）土样：取5cm以下的土样，放于灭菌过的牛皮纸袋中，一般不放于不透气的瓶子或塑料袋中。气生孢子能耐干燥，耐湿热能力高于营养体，室温保存20天，放线菌的数量和组成变化不大，细菌大部分死亡（2）水样与水低泥样用采泥器和采水器采集，放与灭菌瓶，不密封
分离操作步骤（1）取体积为300ml的高氏一号培养基，加入0.1%的重铬酸钾15mL，使之终浓度为50ppm，摇匀，倒平板，待用。（2）取土样5g，摊平于大号培养皿上，在恒温干燥箱中 120℃干热处理1h。（3）土样热处理后，加入装有45mL无菌水和少量玻璃珠的三角瓶中，加入0.5mL的笨酚，室温下振荡30分钟，静止5分钟，取上清液用无菌水稀释10倍。同时另取土样5g，不加热和笨酚处理，余步骤同上，作为对照。（4）用移液管分别吸取原液和10倍稀释液各0.1ml标志稀释倍数的平板上，涂抹均匀，倒置，28℃培养。（5）培养10~14d，观察比较不同处理方法的生长情况、菌落特征。挑取红色，无气生菌丝的小菌落以及其它菌落形态菌株接种斜面，进一步用于形态观察和鉴定。

放线菌筛选的一般方法

放线菌筛选的一般方法放线菌筛选是一种从大自然中寻找新的抗生素和其他有用化合物的方法。

放线菌是一类革兰氏阳性细菌，与其他细菌存在显著区别，它们具有许多生物活性代谢产物的天然合成能力。

因此，放线菌筛选被广泛应用于寻找新的抗生素和其他有活性的化合物。

1.采集样本：首先，需要在大自然环境中采集到放线菌的样本。

放线菌广泛分布于土壤、水体、植物等各种环境中，因此可以从这些环境中采集到样本用于筛选。

样本的采集可以通过在目标环境中收集土壤或其他样品，并将其置于合适的容器中保存。

2.预处理：采集到的样本通常含有大量不同种类的微生物，因此需要进行预处理步骤。

预处理的目的是去除其他微生物，只留下放线菌。

常用的预处理方法包括加热处理、酸碱处理、稀释等。

3. 筛选培养基的选择：放线菌的生长需要适宜的培养基，因此在筛选之前需要选择合适的培养基。

常用的培养基包括Mannitol-Soya agar （MSA）、Glycerol Yale agar（GYA）、Starch Casitone-Nitrate agar （SCN）等。

4.筛选培养条件的优化：放线菌的生长条件可以通过培养条件的优化来改善。

常用的优化参数包括温度、pH、培养时间和培养基成分等。

优化培养条件可以提高放线菌生长的速度和产生生物活性物质的能力。

5.放线菌分离：在筛选培养基上，可以观察到放线菌的集落。

这些集落可以单独分离，得到纯种的放线菌菌株。

分离放线菌的常用方法包括传代分离和扩散板法等。

6.放线菌菌株的筛选：得到纯种的放线菌菌株后，可以进行生物活性物质的筛选。

常用的筛选方法包括抗菌活性测定、抗肿瘤活性测定和酶活性测定等。

这些方法可以通过测量抑菌圈直径、细胞生存率和酶催化能力来评估放线菌菌株的活性。

7.活性物质的提取和纯化：经过筛选得到有活性的放线菌菌株后，还需要将其产生的活性物质进行提取和纯化。

常用的提取方法包括溶剂提取法、胶体微滤法和萃取法等。

而纯化方法则包括柱层析、薄层层析和高效液相层析等。

放线菌发酵实验报告

放线菌发酵实验报告一、引言放线菌发酵是一种常见的微生物实验方法，通过培养放线菌并利用其代谢产物进行发酵，可以得到各种有用的化合物，如抗生素、酶和有机酸等。

本实验旨在通过放线菌发酵实验，了解放线菌的发酵过程及其应用。

二、实验材料与方法1. 实验材料：- 放线菌培养基：包括碳源、氮源、矿物质盐等；- 放线菌菌种：选择常见的放线菌菌种，如链霉菌、链霉菌属、真菌等；- 培养基培养基：用于接种放线菌菌种的培养基；- 发酵罐：用于进行放线菌发酵的装置；- 发酵液收集瓶：用于收集发酵产物。

2. 实验方法：- 准备放线菌培养基：按照配方将碳源、氮源、矿物质盐等按一定比例混合均匀；- 接种放线菌菌种：将放线菌菌种接种到培养基中，放入恒温培养箱中进行孵育；- 准备发酵罐：将培养基倒入发酵罐中，控制好温度、湿度和通气等条件；- 进行发酵：将已经孵育好的放线菌菌种接种到发酵罐中，进行发酵；- 收集发酵产物：在适当的时间点，将发酵液收集瓶放入发酵罐中收集发酵产物。

三、实验结果通过放线菌发酵实验，我们观察到以下结果：1. 发酵过程中，发酵液的颜色逐渐变化，由初始的无色逐渐变为黄色或其他颜色；2. 发酵液的酸碱度随着发酵时间的延长而发生变化，有些发酵产物会使发酵液呈酸性，而有些则呈碱性；3. 发酵液中可能会有一些气泡产生，这是由于发酵过程中产生的气体的释放；4. 在一定的发酵时间后，可以收集到发酵产物，可以通过化学分析等方法对其进行进一步研究和应用。

四、实验讨论通过放线菌发酵实验，我们可以得到各种有用的化合物，如抗生素、酶和有机酸等。

放线菌产生的抗生素广泛应用于临床医学，能够有效抑制或杀死一些病原微生物，对治疗感染性疾病具有重要意义。

放线菌产生的酶可以用于工业生产中，如纺织、食品、制药等领域，具有广阔的应用前景。

有机酸是一类重要的有机化合物，可用于食品添加剂、化妆品等领域。

然而，放线菌发酵也存在一些问题和挑战。

首先，放线菌发酵过程需要严格的温度、湿度和通气等条件控制，否则会对发酵产物的产量和质量产生影响。

放线菌培养条件

放线菌培养条件嘿，你知道放线菌不？这小家伙可神奇啦！咱今天就来聊聊放线菌的培养条件。

放线菌，那可是微生物世界里的小明星呢！它们就像是一群勤劳的小工匠，在自己的小天地里忙碌着。

要想让这些小工匠茁壮成长，可得给它们创造合适的条件。

首先说说培养基吧。

这培养基就像是放线菌的家，得舒舒服服的才行。

一般来说，高氏一号培养基就很不错。

这里面有各种营养物质，就像给放线菌准备了一桌丰盛的大餐。

有淀粉啦、硝酸钾啦、氯化钠啦等等。

这些东西能让放线菌吃得饱饱的，有力气干活。

你想想，要是你饿着肚子，能有精神做事不？温度也是很重要的哦。

放线菌可不像我们人类，能适应各种温度。

它们有自己喜欢的温度范围。

一般来说，28 度左右是比较合适的。

这个温度就像是春天的暖阳，不冷不热，刚刚好。

要是温度太高了，放线菌可能就会热得受不了，罢工啦！要是温度太低了，它们又会冻得缩手缩脚，没力气生长。

所以说，控制好温度，那可太重要啦！还有酸碱度呢。

放线菌喜欢偏碱性的环境。

就像我们有些人喜欢吃甜食，有些人喜欢吃辣的一样，放线菌也有自己的口味偏好。

把培养基的pH 值调到7.2 到7.6 之间，放线菌就会过得很开心。

要是酸碱度不合适，它们可能就会闹脾气，不好好生长。

氧气也是必不可少的。

放线菌需要氧气来呼吸。

就像我们人类需要空气一样，没有氧气，放线菌可活不下去。

可以通过振荡培养或者在培养基表面轻轻搅拌，让空气充分接触放线菌。

这样它们就能呼吸顺畅，茁壮成长啦！培养时间也不能马虎哦。

放线菌可不是一下子就能长大的。

得给它们足够的时间。

一般来说，几天到一周左右的时间，放线菌就能长得比较好了。

要是你太心急，没等它们长大就去看，可能会失望哦。

就像种庄稼一样，得有耐心，等它们慢慢成熟。

在培养放线菌的过程中，还得注意保持清洁。

不能让其他杂菌跑进来捣乱。

就像我们不希望有不速之客闯进自己的家一样，放线菌也不喜欢有别的细菌来抢它们的地盘。

所以要做好消毒工作，让放线菌有一个干净的生长环境。

放线菌培养基 (3)

放线菌培养基简介放线菌（Actinomycetes）是一类广泛存在于土壤和水体中的革兰氏阳性细菌，具有丰富的生物活性代谢产物和潜在的应用价值。

放线菌的培养需要合适的培养基来满足其营养需求和生长条件。

本文档将介绍放线菌培养基的组成和制备方法。

组成放线菌培养基的组成因具体目的和放线菌菌株的需求而异，但一般包含以下基本成分：1.碳源：一般选择可溶性的碳水化合物作为碳源，如葡萄糖、麦芽糖、淀粉等。

不同的放线菌对碳源的利用能力有所差异，因此可以根据具体情况进行选择。

2.氮源：放线菌对氮源的需求较高，常用的氮源包括氨基酸、蛋白胨、硝酸盐等。

根据放线菌菌株的特性，可以选择合适的氮源进行配制。

3.矿物质盐：放线菌需要一定的无机盐供给，可使用常见的矿物质盐如磷酸盐、硫酸盐、镁盐、钙盐等。

4.生长因子：某些放线菌对特定的生长因子依赖较大，如维生素、胆汁盐等，因此可以根据菌株的需求添加适量的生长因子。

5.pH缓冲剂：放线菌通常对酸碱度较为敏感，因此在培养基中添加适量的缓冲剂，如磷酸盐缓冲液可以维持培养基的稳定pH值。

6.凝胶剂：为了制备固体培养基，可添加凝胶剂如琼脂或者吉利丁等，用于固化培养基，方便放线菌生长和分离。

制备方法下面以常见的放线菌培养基为例，介绍其制备方法：配置液体培养基1.准备所需的成分，按照需要的比例称量或计算所需的重量。

2.将碳源、氮源、矿物质盐等溶解在蒸馏水或去离子水中，调整pH值至适当范围。

3.加热溶液到沸腾，搅拌使所有成分均匀混合。

4.停止加热后，将溶液冷却至室温。

5.对于需要添加生长因子的培养基，在溶液冷却至40℃左右时加入适量的生长因子。

6.向培养容器中倒入制备好的液体培养基。

7.如需固化培养基，可选择在此阶段添加适量的凝胶剂，并搅拌使其均匀分布。

8.等待培养基冷却并凝固以后，即可用于放线菌的接种和培养。

配置固体培养基1.准备所需的成分，按照需要的比例称量或计算所需的重量。

2.将碳源、氮源、矿物质盐等溶解在蒸馏水或去离子水中，调整pH值至适当范围。

放线菌种植

放线菌种植
放线菌是一类广泛存在于自然界中的细菌，它们具有很大的种类和数量。

种植放线菌主要是为了研究其代谢产物和生物活性物质，或者用于生物制药等应用领域。

以下是一般的放线菌种植步骤：
1. 选择培养基：放线菌通常在富含营养物质的培养基上生长，如琼脂培养基、啤酒麦芽汤等。

根据所需菌株的喜好选择相应的培养基。

2. 准备培养基：按照培养基配方，将相应的化学品溶解在适量的水中，进行灭菌处理。

3. 培养基分装：将培养基分装到培养器中，如琼脂培养基可倒入琼脂平板中，液体培养基可倒入培养瓶中。

4. 接种放线菌：通常使用接种针、接种环等工具，在无菌条件下将放线菌接种到培养基上。

5. 培养：将接种后的培养基放入恒温培养箱或培养箱中，培养温度通常根据放线菌的要求来确定。

6. 观察和筛选：定期观察培养基上的菌落生长情况，筛选出所需的放线菌。

7. 提取：从培养基中提取放线菌细胞或代谢产物，用于进一步分析和应用。

需要注意的是，放线菌的种植过程要在无菌条件下进行，防止污染。

此外，不同种类的放线菌在培养条件上可能存在差异，因此需根据具体菌株的特点进行调整。

放线菌培养基配方

放线菌培养基配方放线菌培养基配方是培养放线菌的基础，它提供了养分和环境条件，使得放线菌能够生长和繁殖。

放线菌是一类广泛存在于土壤和水体中的革兰氏阳性细菌，具有重要的应用价值，可以产生许多抗生素、酶和生物活性物质。

本文将介绍常用的放线菌培养基配方，并解释各个成分的作用。

一、液体培养基1. 碳源：放线菌需要碳源作为能量来源和生物合成原料。

常用的碳源有葡萄糖、麦芽糖、淀粉等。

其中，葡萄糖是最常用的碳源，可以提供充足的能量和碳原子，促进放线菌的生长和代谢活动。

2. 氮源：放线菌需要氮源合成蛋白质和核酸等生物大分子。

常用的氮源有氨基酸、蛋白胨、酵母浸出物等。

其中，蛋白胨是一种经过水解的蛋白质，含有丰富的氨基酸和小分子肽，是放线菌培养的理想氮源。

3. 矿物质：矿物质是放线菌生长所必需的微量元素。

常用的矿物质有硫酸铵、磷酸二氢钾、硫酸镁等。

这些矿物质可以提供放线菌所需的无机离子，维持细胞内外的离子平衡，调节酶活性和细胞代谢。

4. 生长因子：某些放线菌需要特定的生长因子才能正常生长。

常见的生长因子包括生物素、硫辛酸、硫辛酸钠等。

这些生长因子可以作为辅助因子，促进放线菌的生长和代谢活动。

二、固体培养基1. 碳源：固体培养基的碳源与液体培养基相同，常用的有葡萄糖、麦芽糖等。

在固体培养基中，碳源可以提供营养物质，并增加培养基的固体结构，有利于放线菌的生长和排除。

2. 氮源：固体培养基的氮源与液体培养基相同，常用的有氨基酸、蛋白胨等。

氮源可以提供放线菌所需的氮源，促进细胞生长和代谢活动。

3. 矿物质：固体培养基的矿物质与液体培养基相同，常用的有硫酸铵、磷酸二氢钾、硫酸镁等。

矿物质可以提供放线菌所需的无机离子，维持细胞内外的离子平衡，调节酶活性和细胞代谢。

4. 凝胶剂：固体培养基需要添加凝胶剂，使培养基凝固成固体状态。

常用的凝胶剂有琼脂和琼脂糖。

凝胶剂可以提供支撑结构，使得放线菌能够在固体培养基上生长和繁殖。

总结起来，放线菌培养基的配方包括碳源、氮源、矿物质和生长因子等组成部分。