细胞培养污染图片及甲醛熏蒸(精编课件).ppt

支原体污染
阳性
阴性
培养细胞受支原体污染后，部分敏感细胞可见细胞生长增殖变 慢，部分细胞变圆，从瓶壁脱落。但多数细胞污染后无明显变 化，或略有变化，若不及时处理，还会产生交叉污染。
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疑似黑胶虫？霉菌污染
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甲醛高锰酸钾熏蒸灭菌
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高锰酸钾、甲醛熏蒸消毒
①按照甲醛（40%）10毫升／立方米、高锰酸钾5克／立方米计算用量。不同 情况下，用量有所不同，但比例为2：1。 ②盛药容器要大、耐热、耐腐蚀：一般用陶瓷或玻璃容器，因为高锰酸钾和 甲醛都具有腐蚀性，且混合后反应剧烈，释放热量。 ③房间要密闭：这样熏蒸效果才会好。 ④容器应尽量靠近门，以便操作人员迅速撤离；先将温水倒入容器内，后加 入高锰酸钾，搅拌均匀；再加入甲醛；加入甲醛后人立即离开，密闭房间。 注意顺序：是将甲醛倒入高锰酸钾溶液内。 ⑤消毒时间一般为20-30分钟。 ⑥消毒后要打开门窗通风换气。 这里说的甲醛就是40%的甲醛溶液，也就是 福尔马林，一般包装上写的是37%。
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细菌污染
培养细胞受细菌污染后，会出现培养液变混浊，pH改变。污染后 细胞发生病理改变，胞内颗粒增多、增粗，最后变圆脱落死亡。
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支原体污染电镜照片（x30K），煎蛋形状
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培养液中可见一类黑色 小虫，生长迅速，镜下 快速运动，单个不成串
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鸡舍消毒：每立方米空间用甲醛溶液15毫升、高锰酸钾 7.5g，加7.5毫升水，密闭熏蒸消毒4-10h。
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用量计算： 细胞房空间=35m3 甲醛用量=10ml×35=350ml=0.35L 高锰酸钾用量=350/2=175g 温水用量=175ml
1.准备、计算、称取甲醛与高锰酸钾量：10ml甲醛溶液中加入高锰酸钾 3－5g；
2.取一不锈钢容器，容积大小应为甲醛量的3－4倍； 3.在容器内加入全量的高锰酸钾，用纱布或滤布将容器口蒙住； 4.将容器放入空调送风口，快速倒入全量的甲醛溶液，关上空调机组门； 5.启动空调，关闭新风口，循环运行1－2小时，（视甲醛的反应速度）； 6.关闭空调，取出容器，空调及房间密闭8小时以上； 7.生产前4小时，打开空调，关闭回风阀进行空调全排风运行，直至空 调无甲醛气味后，空调按常规操作运行。（除甲醛时，可在空调送风口加 入适量的氨水，以快速中和残留甲醛） 操作中注意事项：甲醛加入高锰酸钾中，会迅速产生高温至溶液沸腾， 因此容器应大并应做好防护工作，以免混合的棕红色溶液溅出而污染机组。
细胞培养污染图片
2010.12.6
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中间长梭形是正在分裂的念珠菌
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真菌污染
真菌污染后，细胞生长变慢，但最后由于营养耗尽及毒 性作用而使细胞脱落死亡。
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高锰酸钾具有强氧化性，但和福尔马林常温下反应较 慢，但是反应放热，反应加快促进甲醛的挥发,产生甲醛 气体，甲醛能使菌体蛋白质变性凝固和溶解菌体类脂，可 以杀灭物体表面和空气中的细菌繁殖体、芽胞下真菌和病 毒,所以经一定时间后源自文库杀死病原微生物.
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甲醛加高锰酸钾熏蒸操作法：