冬虫夏草活性成分的含量研究概况
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参考文献
1 中华人民共和国国家药典委员会 1 中国药典 [ S] . 北京 :化学工 业出版社 ,2000. 一部 86 ,二部 89
2 阴健. 中药现代研究与临床应用 [ M] . 北京 : 学苑出版社 ,1993.
227 3 阮桂平 ,彭拓华. 冬虫夏草及其类似品中甘露醇的含量研究概况
提要 : 对中药冬虫夏草的活性成分甘露醇 、核苷类 、麦角甾醇 、虫草多糖等的含量研究进行综述 。
关键词 : 冬虫夏草 ;甘露醇 ;核苷类物质 ;麦角甾醇 ;虫草多糖
中图分类号 :R28411
文献标识码 :B
文章编号 :1006 - 0103 (2003) 05 - 0359 - 02
冬虫夏草为麦角菌科真菌冬虫夏草 Cordyceps sinensis (Berk. ) Sacc. [1] 寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上 的子座及幼虫尸体的复合体 ,具有补肺益肾 、止血化 痰 、抗肿瘤 、提高机体免疫力等功效 。现代药物研究 表明虫草中含有甘露醇 、腺苷 、腺嘌呤 、尿苷 、鸟苷 、 尿嘧啶 、麦角甾醇 、氨基酸 、虫草素及微量元素 、矿质 元素等成分[2] 。现将近十年来国内对冬虫夏草部分 活性成分的含量研究情况进行综述 。
定[J ] . 中国中药杂志 ,2001 ,26 (8) :540 16 李云华 ,李修禄. 用高效液相色谱法测定冬虫夏草及虫草乌鸡
胶丸中麦角甾醇的含量[J ] . 药学学报 ,1991 ,26 (10) :768 17 李绍平 ,李萍 ,季晖 ,等. RP - HPLC 测定天然与人工冬虫夏草游
4 虫草多糖
虫草多糖的研究[18] 由来已久 ,早在 50 年代即 已有虫草多糖的分子结构和药理作用的研究报道 。 日本和台湾对此有较系统的研究 , 并已申请专利 (WO 9943698 ;US 5 ,582 ,828) 。国内的一些大专院 校 ,如中国药科大学 、上海中医药大学 、北京大学及 中国中医研究院等 ,也做了大量的虫草多糖研究 。 其药理作用主要是抗肿瘤 、降糖 、抗免疫损伤性大鼠 肝纤维化 、提高免疫等 。虫草多糖的提取常用乙醇 沉析法 。余晓斌等[19] 对虫草多糖的提取工艺进行 了优化实验 ,经 SAS - RSREG程序计算出回归方程 , 以虫草多糖沉析量回归模型进行数学分析 ,得出乙 醇沉析法的优化条件为 :乙醇Π发酵液 (3. 8∶1) ;醇析
作者简介 :魏玲 ,女 ,实验师 ,从事生物化学的科研 、教学工作 。
36 0
华西药学杂志
第 18 卷
集日久者核苷类成分含量却较高 ,提示天然冬虫夏 草中核苷类物质可能来源于贮存过程中大分子核苷 (酸) 的降解 ,为此 ,该文考察了湿热对冬虫夏草中核 苷类物质含量的影响 。发现湿热可明显增加冬虫夏 草中核 苷 类 物 质 的 含 量 , 在 相 对 湿 度 75 %、温 度 40 ℃的条件下放置 10 天 ,冬虫夏草中核苷类物质的 含量可增加 1～4 倍 。而人工冬虫夏草中腺苷 、鸟苷 和尿苷的含量却无明显变化 ,提示天然和人工冬虫 夏草中核苷类成分有一定的差异 。腺苷作为冬虫夏 草的质量控制指标 ,不能客观反映天然冬虫夏草的 质量 。因此 ,腺苷在其质量控制中的应用尚值得进 一步研究 。
有文献采用比色法测定冬虫夏草及其类似品中 甘露醇的含量[7～9] ,研究者认为比色法与薄层法定 性测定具有较好的相关性 ,准确度高 ,比氧化还原 法[1] 测定甘露醇含量更可靠 ,更具特异性且快速简 便 ,可克服容量法因待测的冬虫夏草及其类似品中 含有其他还原性物质 (单糖等) ,使测得结果偏高的 缺点 。
2 核苷类物质
核苷类物质 (腺苷 、尿苷 、鸟苷) 为冬虫夏草有效 成分之一 ,尤以腺苷具有明显的药理作用 ,如改善心 脑血液循环 、防止心律失常 、抑制神经递质释放和调 节腺苷酸环化酶活性等[12] 。冬虫夏草中腺苷等核 苷类 物 质 的 含 量 以 往 多 采 用 薄 层 紫 外 分 光 光 度 法[13 ,14] 或高效液相色谱法[15] 测定 。这两种方法前 者准确性差 ,后者样品前处理繁杂 。李绍平等采用 毛细管电泳法[12] 来测定天然和人工冬虫夏草中腺 苷 、尿苷 、鸟苷等 3 种核苷类成分的含量 ,并对其变 化进行了考察 。结果表明 :天然和人工冬虫夏草中 腺苷 、鸟苷和尿苷 3 种核苷均以尿苷的含量最高 ,人 工冬虫夏草的核苷含量明显高于天然冬虫夏草 ,这 可能与人工培养品的代谢迅速有关 。人工冬虫夏草 中腺苷的含量差异显著 ,高低相差达 6 倍 。而新鲜 采集的天然冬虫夏草 (如在青海玉树 、湟中和云南采 集的样品) 中腺苷等的含量极低甚至无法定量 ,而采
华西药学杂志 W C J ·P S 2003 ,18 (5) :359～360
冬虫夏草活性成分的含量研究概况
魏 玲1 ,赵应华2 ,郭 遂3
1. 四川大学华西基础医学与法医学院 ,四川 成都 610041 ;2. 四川大学华西附二院 ,四川 成都 610041 ;31 成都升和三精医药有限 责任公司 ,四川 成都 610041
[J ] . 江西中医学院学报 ,2001 ,36 (6) :96 4 陈顺志 ,吴佩杰 ,管代义 ,等. 组培蛹草与虫草成分的比较[J ] . 食
用菌 ,1993 ,5 (6) :15 5 邢振荣 ,王溶溶 ,沈雁书 ,等. 冬虫夏草菌体成分分析[J ] . 中成药
研究 ,1986 ,12 :27 6 汪宝琪 ,庞志功. 西藏冬虫夏草中 D - 甘露醇的薄层扫描分析
离麦角甾醇的含量[J ] . 中国现代应用药学杂志 ,2001 ,18 (4) :297 18 任月英. 虫草多糖药理学研究及开发前景 [J ] . 山东医药工业 ,
2001 ,20 (4) :31 19 余晓斌 ,罗长才 ,缪静. 冬虫夏草多糖提取工艺的优化[J ] . 中草
药 ,2002 ,33 (12) :1086 收稿日期 :2003 - 06
量[J ] . 中草药 ,2001 ,32 (8) :697 10 杨跃熊 ,杨人荣 ,董大志 ,等. 几种虫草成分的比较研究[J ] . 云南
中医杂志 ,1988 ,9 (1) :33 11 王化远 ,唐心曜. 川产野生冬虫夏草不同生产期子座虫体中甘
露醇含量比较[J ] . 华西药学杂志 ,1996 ,11 (1) :58 12 李绍平 ,李萍 ,季晖 ,等. 天然与发酵培养冬虫夏草中核苷类成
1 甘露醇
冬虫夏草中含有较大量的甘露醇 。据药理研究 及临床报道 ,甘露醇具有利尿 、提高血浆渗透压 、镇 喘祛痰 、抗自由基等作用 ,且对多种疾病有一定的疗 效 ,故被认为是冬虫夏草的活性成分之一[3] 。甘露 醇含量的测定方法文献报道较多的是氧化还原法 、 高效液相色谱法 、气相色谱法 、薄层扫描法 。高效液 相色谱法系应用差示折光检测进行测定[4] ; 气相色 谱法是先将冬虫夏草提取后 ,进行乙酰化反应转换 成醋酸酯衍生物 ,再进行色谱分析[5] ;薄层扫描法是 先用薄层色谱法对冬虫夏草中甘露醇进行分离 ,用 高碘酸钾 - 联苯胺溶液显色 ,再进行双波长反射锯 齿扫描[6] 。
时间 12 h ; pH 7. 65 , 虫草多糖析出量为 11. 36 g· L - 1 。在虫草多糖沉析过程中 ,乙醇添加量对多糖沉 析的影响最大 ,其次是 pH 值 ,当 pH 7. 65 时沉淀量 最大 ,可能是因为虫草多糖分子带电荷有关 。多糖 的测定采用干重法 ,将乙醇沉淀下来的虫草多糖过 滤 ,并烘干至恒重称量 。
3 麦角甾醇
麦角甾醇是真菌类的特征甾醇 ,为一种重要的 维生素 D2 原 。李云华等[16] 采用将样品直接皂化 , 分配柱和吸附柱进行样品的净化和浓缩 ,建立了冬 虫夏草及其制剂中麦角甾醇的高效液相色谱测定 法 。李绍平等[17] 在该方法的基础上采用石油醚索 氏提取 ,RP2HPLC 法测定 。该方法样品前处理简便 , 回收率高 ,测定结果快速 、准确 、重复性好 。用此方 法对不同来源的天然与人工冬虫夏草中游离麦角甾 醇含量进行比较 ,表明不同来源的天然冬虫夏草中 游离麦角甾醇含量差异显著 ,但均明显高于人工虫 草菌丝 。人工北虫草子实体的麦角甾醇含量却很 高 ,仅次于西藏产天然冬虫夏草 ,高于青海 、四川产 冬虫夏草 。因此 ,作为冬虫夏草质量控制指标之一 , 其意义有待进一步探讨 。
许多文献对四川 、青海 、西藏 、云南等省的冬虫 夏草及其类似品中甘露醇的含量百度文库行了测定 。此 外 ,杨跃熊等[10] 还测定了几个冬虫夏草主产地中分
属不同种寄主昆虫的冬虫夏草中甘露醇的含量 ;王 化远等[11] 按冬虫夏草发育状况分成 1 、2 、3 类 ,分别 测定了 3 类冬虫夏草中子座及虫体中甘露醇的含 量 。研究结果表明 :冬虫夏草中甘露醇的含量主要 与其产地 、寄主及生长期等因素有关[3] 。国内学者 对冬虫夏草中甘露醇的含量研究主要集中在对某一 产地冬虫夏草的研究 ,今后应更加系统地研究不同 产地冬虫夏草中甘露醇的含量及影响冬虫夏草中甘 露醇含量的主要因素 。值得注意的是研究时选用的 测定方法不同也会因为方法本身的原因造成同一样 品中甘露醇含量测定结果的差异 。现对冬虫夏草类 似品中甘露醇含量的研究开展得较少 ,主要体现在 种类及样品数等方面 ,类似品是否能真正成为冬虫 夏草的代用品还需作进一步的深入研究 。
分的含量及其变化[J ] . 药学学报 ,2001 ,36 (6) :436 13 毛丽珍 ,阙沛红. 虫草 —中华束丝孢中腺苷的含量测定[J ] . 中草
药 ,1993 ,24 (9) :467 14 王新华 ,傅智宏 ,白霜. 百令胶囊中腺苷的含量测定[J ] . 中国现
代应用药学 ,1997 ,14 (6) :33 15 夏文娟 ,曾晓英 ,袁海龙 ,等. 不同产地冬虫夏草腺苷含量的测
[J ] . 中草药 ,1995 ,26 (4) :189 7 金道山 ,江朝光 ,梅世昌 ,等. 比色法测定冬虫夏草中甘露醇的含
量[J ] . 药物分析杂志 ,1998 ,18 (5) :120 8 李雪芹 ,熊功友. 不同方法测定 29 种中药甘露醇含量的比较研
究[J ] . 九江医学 ,1999 ,14 (1) :25 9 董钰明 ,刘晖 ,张军 ,等. 比色法测定复方虫草颗粒中甘露醇的含
1 中华人民共和国国家药典委员会 1 中国药典 [ S] . 北京 :化学工 业出版社 ,2000. 一部 86 ,二部 89
2 阴健. 中药现代研究与临床应用 [ M] . 北京 : 学苑出版社 ,1993.
227 3 阮桂平 ,彭拓华. 冬虫夏草及其类似品中甘露醇的含量研究概况
提要 : 对中药冬虫夏草的活性成分甘露醇 、核苷类 、麦角甾醇 、虫草多糖等的含量研究进行综述 。
关键词 : 冬虫夏草 ;甘露醇 ;核苷类物质 ;麦角甾醇 ;虫草多糖
中图分类号 :R28411
文献标识码 :B
文章编号 :1006 - 0103 (2003) 05 - 0359 - 02
冬虫夏草为麦角菌科真菌冬虫夏草 Cordyceps sinensis (Berk. ) Sacc. [1] 寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上 的子座及幼虫尸体的复合体 ,具有补肺益肾 、止血化 痰 、抗肿瘤 、提高机体免疫力等功效 。现代药物研究 表明虫草中含有甘露醇 、腺苷 、腺嘌呤 、尿苷 、鸟苷 、 尿嘧啶 、麦角甾醇 、氨基酸 、虫草素及微量元素 、矿质 元素等成分[2] 。现将近十年来国内对冬虫夏草部分 活性成分的含量研究情况进行综述 。
定[J ] . 中国中药杂志 ,2001 ,26 (8) :540 16 李云华 ,李修禄. 用高效液相色谱法测定冬虫夏草及虫草乌鸡
胶丸中麦角甾醇的含量[J ] . 药学学报 ,1991 ,26 (10) :768 17 李绍平 ,李萍 ,季晖 ,等. RP - HPLC 测定天然与人工冬虫夏草游
4 虫草多糖
虫草多糖的研究[18] 由来已久 ,早在 50 年代即 已有虫草多糖的分子结构和药理作用的研究报道 。 日本和台湾对此有较系统的研究 , 并已申请专利 (WO 9943698 ;US 5 ,582 ,828) 。国内的一些大专院 校 ,如中国药科大学 、上海中医药大学 、北京大学及 中国中医研究院等 ,也做了大量的虫草多糖研究 。 其药理作用主要是抗肿瘤 、降糖 、抗免疫损伤性大鼠 肝纤维化 、提高免疫等 。虫草多糖的提取常用乙醇 沉析法 。余晓斌等[19] 对虫草多糖的提取工艺进行 了优化实验 ,经 SAS - RSREG程序计算出回归方程 , 以虫草多糖沉析量回归模型进行数学分析 ,得出乙 醇沉析法的优化条件为 :乙醇Π发酵液 (3. 8∶1) ;醇析
作者简介 :魏玲 ,女 ,实验师 ,从事生物化学的科研 、教学工作 。
36 0
华西药学杂志
第 18 卷
集日久者核苷类成分含量却较高 ,提示天然冬虫夏 草中核苷类物质可能来源于贮存过程中大分子核苷 (酸) 的降解 ,为此 ,该文考察了湿热对冬虫夏草中核 苷类物质含量的影响 。发现湿热可明显增加冬虫夏 草中核 苷 类 物 质 的 含 量 , 在 相 对 湿 度 75 %、温 度 40 ℃的条件下放置 10 天 ,冬虫夏草中核苷类物质的 含量可增加 1～4 倍 。而人工冬虫夏草中腺苷 、鸟苷 和尿苷的含量却无明显变化 ,提示天然和人工冬虫 夏草中核苷类成分有一定的差异 。腺苷作为冬虫夏 草的质量控制指标 ,不能客观反映天然冬虫夏草的 质量 。因此 ,腺苷在其质量控制中的应用尚值得进 一步研究 。
有文献采用比色法测定冬虫夏草及其类似品中 甘露醇的含量[7～9] ,研究者认为比色法与薄层法定 性测定具有较好的相关性 ,准确度高 ,比氧化还原 法[1] 测定甘露醇含量更可靠 ,更具特异性且快速简 便 ,可克服容量法因待测的冬虫夏草及其类似品中 含有其他还原性物质 (单糖等) ,使测得结果偏高的 缺点 。
2 核苷类物质
核苷类物质 (腺苷 、尿苷 、鸟苷) 为冬虫夏草有效 成分之一 ,尤以腺苷具有明显的药理作用 ,如改善心 脑血液循环 、防止心律失常 、抑制神经递质释放和调 节腺苷酸环化酶活性等[12] 。冬虫夏草中腺苷等核 苷类 物 质 的 含 量 以 往 多 采 用 薄 层 紫 外 分 光 光 度 法[13 ,14] 或高效液相色谱法[15] 测定 。这两种方法前 者准确性差 ,后者样品前处理繁杂 。李绍平等采用 毛细管电泳法[12] 来测定天然和人工冬虫夏草中腺 苷 、尿苷 、鸟苷等 3 种核苷类成分的含量 ,并对其变 化进行了考察 。结果表明 :天然和人工冬虫夏草中 腺苷 、鸟苷和尿苷 3 种核苷均以尿苷的含量最高 ,人 工冬虫夏草的核苷含量明显高于天然冬虫夏草 ,这 可能与人工培养品的代谢迅速有关 。人工冬虫夏草 中腺苷的含量差异显著 ,高低相差达 6 倍 。而新鲜 采集的天然冬虫夏草 (如在青海玉树 、湟中和云南采 集的样品) 中腺苷等的含量极低甚至无法定量 ,而采
华西药学杂志 W C J ·P S 2003 ,18 (5) :359～360
冬虫夏草活性成分的含量研究概况
魏 玲1 ,赵应华2 ,郭 遂3
1. 四川大学华西基础医学与法医学院 ,四川 成都 610041 ;2. 四川大学华西附二院 ,四川 成都 610041 ;31 成都升和三精医药有限 责任公司 ,四川 成都 610041
[J ] . 江西中医学院学报 ,2001 ,36 (6) :96 4 陈顺志 ,吴佩杰 ,管代义 ,等. 组培蛹草与虫草成分的比较[J ] . 食
用菌 ,1993 ,5 (6) :15 5 邢振荣 ,王溶溶 ,沈雁书 ,等. 冬虫夏草菌体成分分析[J ] . 中成药
研究 ,1986 ,12 :27 6 汪宝琪 ,庞志功. 西藏冬虫夏草中 D - 甘露醇的薄层扫描分析
离麦角甾醇的含量[J ] . 中国现代应用药学杂志 ,2001 ,18 (4) :297 18 任月英. 虫草多糖药理学研究及开发前景 [J ] . 山东医药工业 ,
2001 ,20 (4) :31 19 余晓斌 ,罗长才 ,缪静. 冬虫夏草多糖提取工艺的优化[J ] . 中草
药 ,2002 ,33 (12) :1086 收稿日期 :2003 - 06
量[J ] . 中草药 ,2001 ,32 (8) :697 10 杨跃熊 ,杨人荣 ,董大志 ,等. 几种虫草成分的比较研究[J ] . 云南
中医杂志 ,1988 ,9 (1) :33 11 王化远 ,唐心曜. 川产野生冬虫夏草不同生产期子座虫体中甘
露醇含量比较[J ] . 华西药学杂志 ,1996 ,11 (1) :58 12 李绍平 ,李萍 ,季晖 ,等. 天然与发酵培养冬虫夏草中核苷类成
1 甘露醇
冬虫夏草中含有较大量的甘露醇 。据药理研究 及临床报道 ,甘露醇具有利尿 、提高血浆渗透压 、镇 喘祛痰 、抗自由基等作用 ,且对多种疾病有一定的疗 效 ,故被认为是冬虫夏草的活性成分之一[3] 。甘露 醇含量的测定方法文献报道较多的是氧化还原法 、 高效液相色谱法 、气相色谱法 、薄层扫描法 。高效液 相色谱法系应用差示折光检测进行测定[4] ; 气相色 谱法是先将冬虫夏草提取后 ,进行乙酰化反应转换 成醋酸酯衍生物 ,再进行色谱分析[5] ;薄层扫描法是 先用薄层色谱法对冬虫夏草中甘露醇进行分离 ,用 高碘酸钾 - 联苯胺溶液显色 ,再进行双波长反射锯 齿扫描[6] 。
时间 12 h ; pH 7. 65 , 虫草多糖析出量为 11. 36 g· L - 1 。在虫草多糖沉析过程中 ,乙醇添加量对多糖沉 析的影响最大 ,其次是 pH 值 ,当 pH 7. 65 时沉淀量 最大 ,可能是因为虫草多糖分子带电荷有关 。多糖 的测定采用干重法 ,将乙醇沉淀下来的虫草多糖过 滤 ,并烘干至恒重称量 。
3 麦角甾醇
麦角甾醇是真菌类的特征甾醇 ,为一种重要的 维生素 D2 原 。李云华等[16] 采用将样品直接皂化 , 分配柱和吸附柱进行样品的净化和浓缩 ,建立了冬 虫夏草及其制剂中麦角甾醇的高效液相色谱测定 法 。李绍平等[17] 在该方法的基础上采用石油醚索 氏提取 ,RP2HPLC 法测定 。该方法样品前处理简便 , 回收率高 ,测定结果快速 、准确 、重复性好 。用此方 法对不同来源的天然与人工冬虫夏草中游离麦角甾 醇含量进行比较 ,表明不同来源的天然冬虫夏草中 游离麦角甾醇含量差异显著 ,但均明显高于人工虫 草菌丝 。人工北虫草子实体的麦角甾醇含量却很 高 ,仅次于西藏产天然冬虫夏草 ,高于青海 、四川产 冬虫夏草 。因此 ,作为冬虫夏草质量控制指标之一 , 其意义有待进一步探讨 。
许多文献对四川 、青海 、西藏 、云南等省的冬虫 夏草及其类似品中甘露醇的含量百度文库行了测定 。此 外 ,杨跃熊等[10] 还测定了几个冬虫夏草主产地中分
属不同种寄主昆虫的冬虫夏草中甘露醇的含量 ;王 化远等[11] 按冬虫夏草发育状况分成 1 、2 、3 类 ,分别 测定了 3 类冬虫夏草中子座及虫体中甘露醇的含 量 。研究结果表明 :冬虫夏草中甘露醇的含量主要 与其产地 、寄主及生长期等因素有关[3] 。国内学者 对冬虫夏草中甘露醇的含量研究主要集中在对某一 产地冬虫夏草的研究 ,今后应更加系统地研究不同 产地冬虫夏草中甘露醇的含量及影响冬虫夏草中甘 露醇含量的主要因素 。值得注意的是研究时选用的 测定方法不同也会因为方法本身的原因造成同一样 品中甘露醇含量测定结果的差异 。现对冬虫夏草类 似品中甘露醇含量的研究开展得较少 ,主要体现在 种类及样品数等方面 ,类似品是否能真正成为冬虫 夏草的代用品还需作进一步的深入研究 。
分的含量及其变化[J ] . 药学学报 ,2001 ,36 (6) :436 13 毛丽珍 ,阙沛红. 虫草 —中华束丝孢中腺苷的含量测定[J ] . 中草
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代应用药学 ,1997 ,14 (6) :33 15 夏文娟 ,曾晓英 ,袁海龙 ,等. 不同产地冬虫夏草腺苷含量的测
[J ] . 中草药 ,1995 ,26 (4) :189 7 金道山 ,江朝光 ,梅世昌 ,等. 比色法测定冬虫夏草中甘露醇的含
量[J ] . 药物分析杂志 ,1998 ,18 (5) :120 8 李雪芹 ,熊功友. 不同方法测定 29 种中药甘露醇含量的比较研
究[J ] . 九江医学 ,1999 ,14 (1) :25 9 董钰明 ,刘晖 ,张军 ,等. 比色法测定复方虫草颗粒中甘露醇的含