血清尿素UREA测定
UREA 项目操作手册
SOP标准操作程序UREA 尿素（货号：OSR6134，OSR6234）一、 目的：规范尿素测定的操作程序，确保尿素测定的结果准确二、 适用范围：在Beckman Coulter AU 分析仪上定量测定人血清中的尿素（UREA ） 三、 临床意义尿素在肝脏中合成，它是蛋白质和氨基酸代谢的最终产物。
因此，尿素合成取决于每日的蛋白质摄入量和内源性蛋白质代谢。
在这些代谢过程中产生的绝大多数尿素通过肾小球过滤消除，40 – 60% 扩散返回血液中（与近端小管中的流速无关）。
远侧小管内的重新扩散取决于尿流，受抗利尿激素调节。
在利尿期间，最少量的尿素重新扩散进入血液，大量尿素被排泄到尿液中，血浆尿素浓度很低。
在抗利尿（在少尿性心力衰竭，缺水状态或口渴中，可能出现这种状况）期间，尿素重新扩散到小管内的速度增加，血浆尿素增加。
在肾前性和肾后性肾衰竭中，小管尿流减少，导致远侧小管中的尿素重新扩散增加，肌酐分泌增加。
在心脏代偿失调、蛋白质分解代谢增加和缺水时，尿素会发生肾前性增加。
尿素水平可能因肾脏因素而升高，例如急性肾小球肾炎，慢性肾炎，多囊肾，肾小管坏死和肾硬化。
尿素的肾后性升高可能由泌尿道梗阻引起。
血浆尿素浓度取决于肾灌注、尿素合成速度和肾小球滤过率 (GFR)，在急性肾功能衰竭，慢性肾衰竭和肾前性氮质血症中，可能会升高。
在透析患者中，尿素浓度代表蛋白质的降解，也是代谢状态的指标。
在肾衰竭终末期，尿毒素病征（特别是与胃肠系统有关的尿毒素病征）与尿素浓度有密切的相关性。
在肾功能的鉴别诊断中，血清尿素和血清肌酐通常会一起测定。
四、 方法原理在水和尿素酶存在的情况下，尿素被水解，产生氨和二氧化碳。
在谷氨酸脱氢酶 (GLDH) 存在的情况下，上一反应中产生的氨与 2-酮戊二酸和NADH 结合，产生谷氨酸盐和 NAD+。
单位时间 NADH 吸光度的降低与尿素浓度成正比。
反应原理五、 标本的采集与处理5.1. 受检者的准备：空腹，采集前静坐5min ，如有输液，应在停止输液3min 后在另一侧肢体静脉采集。
尿素(Urea)测定试剂盒(尿素酶-谷氨酸脱氢酶法)产品技术要求lideman
尿素(Urea)测定试剂盒(尿素酶-谷氨酸脱氢酶法)适用范围：本产品用于体外定量测定人血清、血浆或尿液中尿素的含量。
1.1规格试剂1(R1)：4×80mL；试剂2(R2): 4×16mL；试剂1(R1)：2×80mL；试剂2(R2): 2×16mL；试剂1(R1)：5×60mL；试剂2(R2): 5×12mL；试剂1(R1)：2×400mL；试剂2(R2): 2×80mL；试剂1(R1)：3×40mL；试剂2(R2): 3×8mL；试剂1(R1)：1×20mL；试剂2(R2): 1×6mL。
校准品（选配）：1×3mL。
1.2 组成1.2.1试剂组成试剂1（R1）（以下简称R1），试剂2(R2)（以下简称R2）组成见表1。
表1 试剂组成1.2.2校准品的组成：单个水平的液体校准品，在50mmol/L PH=7.6 的Tris 缓冲液中添加尿素纯品，稳定剂<0.1%；定值范围：(5-9)mmol/L。
2.1 外观液体双试剂：R1: 无色澄清液体；R2:无色澄清液体。
校准品：无色至浅黄色。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 试剂空白2.3.1 空白吸光度在37℃、340 nm波长、1cm光径条件下，用去离子水或（生理盐水）作为样品加入试剂测试时，试剂空白吸光度应≥1.5ABS。
2.3.2 空白吸光度变化率在37℃、340 nm波长、1cm光径条件下，用去离子水或（生理盐水）作为样品加入试剂测试时，试剂空白吸光度变化率应＜0.04ABS/min。
2.4 分析灵敏度浓度为7.14mmol/L时，吸光度变化范围在（0.01- 0.11）之间。
2.5 线性范围在[0.5–33.70]mmol/L线性范围内，线性相关系数r2≥0.995。
在（7–33.70]mmol/L范围内的相对偏差≤±10%,测定结果[0.5–7]mmol/L时绝对偏差≤±0.7mmol/L。
测定血清尿素的实验报告
一、实验目的1. 掌握血清尿素测定的原理和方法。
2. 熟悉二乙酰-肟法测定血清尿素氮的实验操作。
3. 了解实验中可能出现的误差及其处理方法。
二、实验原理血清尿素氮（Blood Urea Nitrogen，BUN）是血液中尿素氮的浓度，是反映肾功能的重要指标。
尿素氮是蛋白质代谢的终产物，主要由肝脏产生，通过肾脏排泄。
二乙酰-肟法是一种常用的测定血清尿素氮的方法，其原理如下：在酸性反应环境中加热，尿素与二乙酰缩合，生成色素原二嗪，称为Feorin反应。
因为二乙酰不稳定，所以通常由反应系统中二乙酰-肟与强酸作用，产生二乙酰，二乙酰与尿素反应，综合生成红色的二嗪。
其颜色的深浅与血清中尿素含量成正比。
三、实验材料1. 试剂：- 碱性试剂：在三角烧瓶中加蒸馏水约100ml，然后加入浓硫酸44ml及85%H3PO466ml冷至室温，加入硫氨脲50mg及硫酸镉2g溶解后加蒸馏水稀释至1升，置棕色瓶放冰箱保存，可稳定半年。
- 二乙酰-肟溶液：称取二乙酰-肟20g，加蒸馏水约900ml溶解后，再用蒸馏水稀释至1升置棕色瓶中，贮存放于冰箱内可保存半年不变。
- 尿素标准贮存液（100mmol/L）：称取干燥纯尿素（MW60.06）0.6g，溶解于水中并稀释至100毫升，加0.1g叠氮钠防腐，置冰箱内稳定六个月。
- 尿素标准应用液（5mmol/L）：取5.0ml贮存液用去氨蒸馏水稀释至100ml。
2. 仪器：- 分光光度计- 离心机- 实验室试管四、实验步骤1. 标准曲线的绘制：- 取5支试管，分别加入0、0.5、1.0、1.5、2.0ml尿素标准应用液，用去氨蒸馏水稀释至5.0ml。
- 向每支试管中加入2.0ml碱性试剂，混匀。
- 将试管置于沸水中加热5分钟，取出冷却至室温。
- 以540nm波长，1cm光程，测定各管吸光度。
- 以尿素浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 样品测定：- 取2支试管，分别加入0.5ml血清和0.5ml尿素标准应用液，用去氨蒸馏水稀释至5.0ml。
尿素检测标准操作规程SOP
还原型辅酶I（NADH)
0.3mol/l
α-酮戊二酸
13.0mol/l
不同批次的试剂不推荐混合使用
7.4储存条件有效期
试剂在2-8℃保存可稳定1年，试剂开瓶后于2-8℃可稳定1个月。
7.5参数设置
主波长
340nm
辅助波长
405nm
反应方法
速率法
反应温度
37℃
反应方向
向下
试剂1
200ulቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
样本
2.5ul
4.1生理性：高蛋白饮食可引起血尿素浓度和尿液排出量显著增高。成人血清尿素浓度男性比女性平均高出0.3-0.8mmol/l，并随着年龄增加有增高倾向。妊娠妇女由于血容量增加，尿素浓度比非孕妇低。
4.2病理性：分为肾前性、肾性、肾后性。①肾前性:主要是严重失水引起的血液浓缩，肾血流量減少及肾小球滤过率降低，从而使尿素潴留，可见于剧烈呕吐、肠梗阻和长期腹泻;②肾性:为最常见的因素，可见于急性肾小球肾炎、肾功能衰竭、慢性肾盂肾炎及中毒性肾炎等，在肾功能不全的代偿期可见尿素轻度升高(＞8.0mmol/L)，肾功能衰竭失代偿期，尿素可中度升高(17.9～21.4mmol/L)，肌酐也中度升高(442.0umol/L);尿毒症时尿素＞21.4mmol/L，肌酐也可达1800umol/L，为尿毒症的诊断标准之一;③肾后性:如前列腺肥大、尿路结石、尿道狭窄、膀胱肿瘤等都可能使尿路阻塞引起血尿素升高。血液尿素减少较为少见，除了妊娠、蛋白质营养不良等情況外。常表示有严重的肝病、肝坏死。
12.2尿素氮测定只是临床医师对患者进行诊断的指标之一，临床医师还要根据患者的体征、病史及其他的诊断项目、诊断手段进行综合判断。
13.性能指标
13.1线性范围：在（0.3-35.7）mmol/L范围内：a)线性相关系数（r）应>0.995;b)（0.3-10.0）mmol/L范围内，线性偏差应≦2.0mmol/L;（10.0-35.7）mmol/L范围内，线性偏差应该≦10.0%。
尿素(UREA)测定试剂盒(尿素酶-谷氨酸脱氢酶法)产品技术要求百奥泰康
尿素（UREA）测定试剂盒（尿素酶-谷氨酸脱氢酶法）适用范围：该试剂盒用于体外定量测定人血清中尿素的浓度。
1.1 产品规格1.2 组成成分该试剂盒由试剂1（R1）、试剂2（R2）和校准品（选配）组成。
1.2.1试剂组成试剂1: Tris缓冲液≥20.0mmol/La-酮戊二酸≥5.0mmol/L 二磷酸腺苷（ADP）≥0.6mmol/L烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）≥0.2mmol/L试剂2：脲酶（Urease）≥6.0KU/L谷氨酸脱氢酶（GLDH）≥1.0KU/L1.2.2 校准品组成尿素目标浓度：8.50mmol/L该校准品为水基质液体校准品2.1 外观a) R1应为无色溶液，无混浊，无未溶解物。
b) R2应为无色溶液，无混浊，无未溶解物。
c) 校准品应为无色溶液，无混浊，无未溶解物。
2.2 净含量液体组分不少于标示值。
2.3 试剂空白2.3.1试剂空白吸光度应不小于1.000。
2.3.2试剂空白吸光度变化率应不大于0.004/min2.4 分析灵敏度UREA试剂盒测定浓度20.00mmol/L的被测物时，吸光度变化率（ΔA/min）应不小于0.025。
2.5 准确度测试参考物质，相对偏差应不超过±10%。
2.6 精密度2.6.1重复性变异系数应不大于5%。
2.6.2批间差批间相对极差（R）应不大于10%。
2.7 线性在（0,40.00]mmol/L范围内，UREA试剂盒的线性相关系数r应不低于0.9900；在（0,10.00]范围内绝对偏差应不超过1.00mmol/L，在(10.00,40.00]范围内相对偏差应不超过±10%。
2.8校准品溯源性依据GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品控制物质赋值的计量学溯源性》及有关规定提供尿素校准品的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容。
校准品溯源至国家标准物质GBW09175。
2.9稳定性原包装的UREA试剂盒在2℃～8℃避光保存，有效期为18个月。
血清尿素测定(精)
样本（微升） 校准液（微升） 蒸馏水（微升） 试剂R1（微升） 试剂R3（微升）
测定 10
50 1000
混匀，置37摄氏度水浴恒温5分钟 试剂R4（微升） 1000
校准 10 50 1000
1000
空白
10 50 1000
1000
混匀，置37摄氏度水浴恒温5分钟，600纳米波长，以空白管调零，测定 各管吸光度值。
血清尿素测定
尿素的测定方法
尿素（urea）是氨基酸分解代谢的最 终产物，在肝脏合成，通过血液运至肾 脏，从尿中排除。检测尿素的方法有二 乙酰一肟法和酶法。二乙酰一肟法操作 简便，仍为大多数基层医疗单位所采用。
脲酶波氏法是我们今天实验课所选用的 酶法。
பைடு நூலகம்
实验原理
脲酶水解样本中的尿素，产生两分子氨和一分 子的二氧化碳。氨在碱性条件下与酚及次氯酸 反应，在亚硝基铁氰化钠催化作用下生成蓝色 化合物，与经过同样处理的校准液进行比较， 即可计算出样本中尿素的含量。（终点法）
方法局限性
1.尿液尿素也可用此法测定，但因浓度 高（超过28mmol/L），需先用去离子 水稀释。
再乘以稀释倍数。 2.试剂变混浊或空白吸光度大于0.150，
将不能使用，应弃去。 3.所用试验器材必须清洁，避免氨污染。 4.试剂含化学成分，应避免氨污染。
环功能不全、心功能不全，休克等引起肾血流 量减少，肾小球滤过率减低而使血中尿素潴留； ②肾性：急性肾小球肾炎、肾病晚期、肾功能 衰竭、慢性肾盂肾炎及中毒性肾炎都可出现血 中尿素含量增高。③肾后性疾患：如前列腺肿 大、尿路结石、尿道狭窄、膀胱肿瘤致使尿道 受压等都可能使尿路阻塞引起血液中尿素含量 增加。 2.血清尿素减少 较少见，尿素减少表示严重 肝病，如肝炎合并广泛性肝坏死。
血清尿素尿素氮（UreaBUN）测定-标准操作程序
三级文件定标准操作程序第2页共3页生效日期：目的：规范血清尿素/尿素氮(Urea/BUN)测定标准操作规程。
范围：适用于血清尿素/尿素氮(Urea/BUN)测定的标准操作。
职责：生化部检验人员对本规程的实施负责。
规程：1 测定方法：采用动力学紫外法，定量测定血清中血清尿素/尿素氮(Urea/BUN)的含量。
2 测定原理脲酶尿素 + H2O 2NH+4 + CO2谷氨酸脱氢酶2NH+4 + α-酮戊二酸 + NADH + H+ L-谷氨酸 + 2NAD+ + H2O3 标本血清，肝素或EDTA抗凝血浆（不要用肝素铵的抗凝剂），处理方法见标本准备。
稳定性：20-25℃ 7天2 - 8℃ 7天-20℃ 1年4 试剂4.1试剂来源：ROCHE配套试剂（详见试剂说明书）。
贮存条件及稳定性：未打开试剂盒：2－8℃储存至效期末R1：打开后机上稳定28天R2：打开后机上稳定28天准备：直接使用。
4.2 校准物来源：ROCHE配套校准物, 符合SRM916a标准，具体如下：S1：生理盐水S2：C.f.a.s贮存条件：校准物在2-8℃保存可保存至有效期。
准备：直接使用。
定标频率：A试剂盒在仪器上放置42天后B 试剂批号更换后C 由质控结果决定4.3 质控物来源：Precinorm (罗氏正常值质控)Precipath (罗氏病理值质控)其它适合的质控品贮存条件：置2-8℃冰箱至有效期。
准备：直接使用。
质控间隔时间及限制：应视不同地区及各自实验室情况而定。
质控结果应在限定的范围之内，如果超出范围，实验室应根据情况采取措施。
三级文件定标准操作程序第3页共3页生效日期：5 上机操作见GS200全自动生化分析仪操作维护保养程序。
6 参考范围6.1 尿素：10－50mg/dL6.2 血清/血浆：成人（18－60岁）：8－20mg/dL7 性能指标本法线性范围为血液：：5-400mg/dl ，不准确度允许范围X±9%，不精密度CV=3.4%，尿液：CV=1.9%，灵敏度5mg/dl。
尿素(UREA)检测的标准操作程序
尿素（UREA）检测的标准操作程序一、目的规范在罗氏cobas c311生化分析仪上定量检测人血清、血浆中的尿素，确保检测结果的准确性及重复性。
二、范围检验科生化室检验人员。
三、该SOP变动程序本标准操作程序的改动可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准:专业组长，科室主任。
四、授权操作人检验科经过培训并被授权发报告的人员均可操作。
五、实验原理酶动力学法尿素 + H2O 尿酶 2NH+4+ CO22NH+4 + α-酮戊二酸 + NADH + H+ 谷氨酸脱氢酶 L-谷氨酸 + 2NAD+ + H2ONADH浓度降低的速率与样本中的BUN的浓度成正比，在340nm下进行检测。
六、标本1、标本类型：血清：使用标准取样试管或含分离胶的试管采集。
血浆：肝素、EDTA-K3 、枸橼酸钠或氟化钠/草酸钾抗凝均可。
2、样本稳定性：标本在2－8 度可稳定2 天，15－25度可稳定8小时，-20 度可稳定6 个月。
只能冻融一次。
七、仪器与试剂1、仪器：罗氏cobas c311生化分析仪2、试剂：罗氏原装配套尿素试剂，试剂无需任何处理，可直接使用3、试剂稳定性：未开封试剂盒按要求保存可稳定至有效期末，已开封试剂盒在仪器上可稳定8周八、校准1、校准物：S1:0.9%NaCl，S2:C.f.a.s(罗氏通用校准品，复溶后使用)。
2、校准方法：两点校准。
3、校准频率：每批试剂必须用新鲜试剂和校准一次。
另外，以下情况需要再次校准：校准过期:批校准稳定28天，盒校准7天。
九、操作程序1.每日开机准备：1.1仪器处于关机状态1.1.1检查供水、排水系统是否正常1.1.2接通仪器左侧电源开关, 以及电脑控制电脑的开关1.1.3登陆：输入用户名mjt及密码123，仪器初始化后进入待机状态1.2仪器处于休眠状态：1.2.1仪器在进入睡眠时指定的时间自动唤醒，或单击[[唤醒]]唤醒仪器；1.2.2系统退出睡眠状态至登录界面，输入用户名及密码，仪器初始化后进入待机状态。
尿素(Urea)测定试剂盒(尿素酶-谷氨酸脱氢酶法)产品技术要求sainuopu
尿素（Urea）测定试剂盒（尿素酶-谷氨酸脱氢酶法）适用范围：用于体外定量测定人体血清中尿素的含量。
1.1试剂盒包装规格试剂1：1×25ml，试剂2：1×5ml；试剂1：2×60ml，试剂2：2×12ml；试剂1：3×40ml，试剂2：3×8ml；试剂1：4×60ml，试剂2：4×12ml；试剂1：2×400ml，试剂2：1×160ml；试剂1：1×10L，试剂2：1×2L；试剂1：2×40ml，试剂2：2×8ml；试剂1：1×15ml，试剂2：1×5ml；试剂1：2×54ml，试剂2：2×18ml；试剂1：3×45ml，试剂2：3×15ml；试剂1：4×54ml，试剂2：4×18ml；试剂1：2×300ml，试剂2：1×200ml；试剂1：1×9L，试剂2：1×3L；试剂1：2×30ml，试剂2：2×10ml。
校准品（选配）：1×1ml；1×3ml。
1.2试剂盒主要组成成分2.1 外观液体双试剂：试剂1无色至浅黄色澄清液体；试剂2无色至浅黄色澄清液体。
校准品：无色至淡黄色澄清液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 试剂空白2.3.1试剂空白吸光度：在37℃、340 nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不小于1.0。
2.3.2试剂空白吸光度变化率：在37℃、340 nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度变化率（ΔA/min）应不大于0.04。
2.4 分析灵敏度测定浓度为7.0mmol/L样本时，吸光度变化率（ΔA/min）应在（0.01，0.11）范围内。
2.5 线性范围在（0.9，35.70）mmol/L线性范围内，理论浓度与实测浓度的线性相关系数r 不小于0.990。
艾博信尿素(UREA)测定试剂盒（尿素酶-谷氨酸脱氢酶法）说明书
尿素(UREA )测定试剂盒（尿素酶-谷氨酸脱氢酶法）说明书【产品名称】尿素(UREA)测定试剂盒（尿素酶-谷氨酸脱氢酶法）【包装规格】a)试剂1：2×45mL 试剂2：1×18mL b)试剂1：4×50mL 试剂2：2×20mL c)试剂1：2×100mL试剂2：2×20mL【预期用途】用于体外定量测定人体血清中尿素的含量。
尿素是人体含氮蛋白质代谢的终产物.血清中的尿素的含量是肾功能的一个重要指标，肾脏受损或组织蛋白分解增加，尿素的值会升高；而在肝脏受损或怀孕时，血清中的尿素会降低[1]。
【检验原理】尿素+H 2O−−→−尿素酶2NH 3+CO 2NH 3+α-氧代戊二酸+NADH +H +−−→−GLDH L-谷氨酸+NAD ++H 2O此反应速度与尿素含量成正比，在340nm 处，测定固定时间间隔内NADH 吸光度值的下降速率，下降速率与样本中的尿素含量成正相关。
【主要组成成分】试剂1主要组分Tris 缓冲液100mmol/L 尿素酶20KU/L α-氧代戊二酸5.0mmol/L 谷氨酸脱氢酶（GLDH ）15KU/LProClin300适量试剂2主要组分Tris 缓冲液100mmol/L 还原型辅酶Ⅰ（NADH ）0.25mmol/LProClin300适量注：不同批号试剂盒中各组分未经试验不可互换。
【储存条件及有效期】贮存于2～8℃，有效期为18个月，生产日期、有效期见标签。
【适用仪器】艾威德AS-420/AS-660/AS-1200；日立HITACHI 7020型/7060型/7180型/7600型/LABOSPECT 008AS 型；贝克曼AU400/AU480/AU640/AU680/AU2700/AU5400/AU5800/AU5811/AU5821；佳能TBA-FX8/TBA-120FR /TBA-2000FR ；罗氏cobas 8000c 702/cobas 8000c 701/cobas 8000c 502；西门子SIEMENS ADVIA 1800/ADVIA 2400；雅培ABBOTT ARCHITECT c8000/ARCHITECT c16000/ARCHITECT ci8200；西森美康SYSMEX BM6010/C ；科华KHB 卓越310/卓越330/卓越400/卓越450/ZY-1200/ZY-1280；迪瑞CS-240/CS-T300/CS-300B/CS-380/CS-400A/CS-400B/CS-600A/CS-600B/CS-800A/CS-800B/CS-1200/CS-1200ISE/CS-1300B/CS-1400；迈瑞MINDRAY BS-220/BS-330/BS-350E/BS-380/BS-390/BS-400/BS-430/BS-600/BS-800/BS-2000M ；颐兰贝ES-200/ES-380/ES-480；赛诺迈德SUNMATIK-9050型；雷杜Chemray 420；英诺华D280；特康TC6010L ；锦瑞GS400；普康6066。
蛇伤科患者血清尿素(Urea)和肌酐(Cr)检测的临床意义
岁， 身体 健康 ， 排除患 有肾功 能受损 的疾病 。 白阻塞 肾小管 ； 蛇毒 还可 以 直接 损伤 肾 小管 上皮 细胞 ， 加 速对 肾 １ ． ２方法 ： 蛇伤患 者就诊入 院后 立 即真 空 生化 管静 脉采 血 。 对 照 脏 的损 害 ； 蛇毒 中含有 活性 的蛋 白水解酶 可凝 固纤维 蛋 白原 和损 组 空腹 真空生 化 管 静脉 采 血 ， 并 及 时 分离 血 清进 行 肾功 能肌 酐 害血管 壁引起 严重 出血 、 组 织破坏 ， 同时释 放 出组 织 胺 ， 组 织 胺 和 （ Ｏ ｒ ） 、 尿素（ Ｕ ｅａ ｒ ） 检测 。仪 器采用 日本东 芝 ４ ｏ Ｆ Ｒ全 自动 生 化分 缓激肽 都能 引起血 压剧降 ， 导致有 效血容 量减 少 ， 肾小管 收缩 ， 肾 析仪 ， 尿素 （ Ｕ ｅａ ｒ ） 检测采 用尿酶 法 ， 肌酐 （ ｃ ｒ ） 采用 苦味酸法 。 小球率 过滤 降低 ； 蛇 毒 中还有 促 凝 活性 物质 ， 使 凝血 纤 溶 的平 衡
超 检测 基本可 以反映 子宫下段 的真实 厚度 ， 但 是 Ｂ超检 测情况 并 ［ ３ ］ 李优 兰． ２ ０ ８例疲痕子宫再次妊娠分娩方式分析［ Ｊ ］ ．温州医 不是 阴道 试产 的准确依据 。 学院 学报 ， ２ ０ １ ０ （ ０ ５ ） ： ２ ３ ６ ．
参 考文献
蛇 伤科 患者 血清 尿素 （ Ｕ ｒ ｅ ａ ） 和肌 酐 （ Ｃ ｒ ） 检 测 的临床 意义
酐（ Ｏ ｒ ） 和尿 素 Ｕ ｒ ｅ ａ ） 的的变化 对蛇伤 患者 的意义 。
血清尿素测定(精)
样本（微升） 校准液（微升） 蒸馏水（微升） 试剂R1（微升） 试剂R3（微升）
测定 10
5ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 1000
混匀，置37摄氏度水浴恒温5分钟 试剂R4（微升） 1000
校准 10 50 1000
1000
空白
10 50 1000
1000
混匀，置37摄氏度水浴恒温5分钟，600纳米波长，以空白管调零，测定 各管吸光度值。
参考范围及计算
【计算】 尿素（mmol/L）＝A测/A标
×7.14mmol/L 【参考范围】 血清尿素2.68～8.20mmol/L，相当于
尿素氮（BUN）5.3～16.4mmol/L。
临床意义
1.血清尿素浓度增高 ⑴生理性增高：见于高蛋白饮食。 ⑵病理性增高：①肾前性：如失水、水肿、循
环功能不全、心功能不全，休克等引起肾血流 量减少，肾小球滤过率减低而使血中尿素潴留； ②肾性：急性肾小球肾炎、肾病晚期、肾功能 衰竭、慢性肾盂肾炎及中毒性肾炎都可出现血 中尿素含量增高。③肾后性疾患：如前列腺肿 大、尿路结石、尿道狭窄、膀胱肿瘤致使尿道 受压等都可能使尿路阻塞引起血液中尿素含量 增加。 2.血清尿素减少 较少见，尿素减少表示严重 肝病，如肝炎合并广泛性肝坏死。
尿素在尿素酶催化下，水解生成氨和二氧化碳， 氨在α -酮戊二酸和NADH（还原型辅酶Ⅰ）存 在下，经谷氨酸脱氢酶（GLDH）催化生成谷 氨酸。同时NADH被氧化成NAD+。NADH在 波长340nm处有吸收峰，测定此处吸光度的 下降速率，既可反映尿素的含量。（酶速率法）
实验操作
准备：每瓶R1以2.5mlR2复溶
方法局限性
1.尿液尿素也可用此法测定，但因浓度 高（超过28mmol/L），需先用去离子 水稀释。
血清尿素的实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 熟悉生物化学实验的基本操作步骤。
2. 掌握血清尿素测定的原理和方法。
3. 了解血清尿素在临床诊断中的意义。
二、实验原理尿素是哺乳动物体内蛋白质代谢的终产物，主要由肝脏合成，通过肾脏排泄。
血清尿素氮（BUN）是血液中尿素的浓度，是反映肾功能和体内氮代谢状况的重要指标。
本实验采用二乙酰-肟法测定血清尿素，该方法基于二乙酰在强酸条件下与尿素缩合成红色的4,5-二甲基-2-氧咪唑化合物，颜色深浅与尿素含量成正比。
三、实验材料1. 血清样本：采集受试者空腹静脉血，分离血清。
2. 试剂：二乙酰试剂、强酸试剂、显色剂、空白试剂等。
3. 仪器：分光光度计、移液器、试管等。
四、实验方法1. 样本处理：取血清样本100μl，加入1ml强酸试剂，充分混匀后室温放置10分钟。
2. 显色：加入2ml显色剂，充分混匀，室温放置10分钟。
3. 测定：以空白试剂为参比，于540nm波长下测定吸光度。
4. 结果计算：根据标准曲线计算血清尿素含量。
五、实验结果1. 标准曲线绘制：将不同浓度的尿素标准品按照实验方法进行测定，绘制标准曲线。
2. 血清尿素含量测定：将受试者血清样本按照实验方法进行测定，得到吸光度值，根据标准曲线计算血清尿素含量。
六、结果分析1. 血清尿素正常范围为3.2～7.1mmol/L。
本实验受试者血清尿素含量在正常范围内，说明受试者肾功能正常。
2. 血清尿素升高可能见于以下情况：- 肾脏功能受损：如急性肾功能衰竭、慢性肾功能衰竭、肾小球肾炎等。
- 蛋白质摄入过多或分解代谢增强：如发热、创伤、肿瘤等。
- 肾前性少尿：如严重脱水、充血性心力衰竭、肝肾综合征等。
3. 血清尿素降低可能见于以下情况：- 蛋白质摄入减少：如营养不良、消化系统疾病等。
- 肝脏功能异常：如肝功能衰竭、肝脏病变等。
- 肾小球滤过功能下降：如肾小球肾炎、肾病综合征等。
七、实验讨论1. 本实验采用二乙酰-肟法测定血清尿素，该方法操作简便、准确度高，是临床常用的测定方法。
尿素(UREA)检测标准操作规程
深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司尿素测定方法
2、适用范围
适用于尿素的测定
3、试剂仪器
3.1试剂：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司原装试剂盒
3.2未开启的试剂盒避光保存于2℃—8℃有效期一年。
试剂不可以冰冻。
4、操作程序
4.1方法原理
脲酶
尿素+ 2H2O————→2N H4+ + CO32-
谷氨酸脱氢酶
a-酮戊二酸+ NH4+ +NADH————→L-谷氨酸+ NAD+ + H2O
4.2样本要求
新鲜血清或肝素血浆，样本收集后应尽快测定，必须避光保存，避免使用溶血样本。
4.3上机操作
4.3.1试剂装载、校准、样品和质控血清分析操作详见“《迈瑞BS-220全自动生化分析仪标准操作、维护、保养规程》”
4.3.2校准“
4.3.2.1 标准液的准备：校准品使用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司配套冻干品，按说明书要求稀释后分装，-20℃冷冻保存，用前提前15分钟从冰箱取出，复溶到室温后上机检测。
4.3.2.2校准程序：每30天需要定标一次。
当有以下情况时需重新定标：
1）换试剂批号或出现质控漂移时；
2）当仪器做完保养后；
3）仪器进行零件更换时。
每次试验前用准备好的校准品进行定标，定标通过后进行检测。
实验十七 血清尿素的测定(二乙酰一肟法)
实验十七 血清尿素的测定（二乙酰一肟法）【目的】1. 掌握血清尿素的测定原理和方法。
2. 了解尿素测定的参考范围及临床意义。
【原理】尿素（urea ）在强酸、加热的条件下，与二乙酰缩合生成红色的二嗪化合物（Fearon 反应），其颜色深浅与尿素含量成正比。
与同样处理的标准液在540nm 处比色，求得尿素含量。
由于二乙酰不稳定，一般由二乙酰一肟与强酸作用产生。
其反应式如下：CH 3CH 3O O +H 2OH +CH 3CH 3O N OH +NH 2OH二乙酰一肟二乙酰羟胺CH 3CH 3O O 二乙酰+C ON H 2NH 2尿素H +CH 3C C 3N N C O+H 2O2二嗪衍生物【器材】试管、试管架、微量加样器及吸量管、沸水浴、分光光度计。
【试剂】 1．酸性试剂在三角烧瓶中加去离子水约100ml ，然后缓慢加入浓硫酸44ml 、85%磷酸66ml ，冷至室温，加入氨基硫脲50mg 及硫酸镉(CdSO4·8H 2O)2g ，溶解后移入1L 容量瓶中，加去离子水至1L 。
置棕色瓶中，4℃可保存半年。
2．二乙酰一肟溶液称二乙酰一肟20g 溶于去离子水中并定容至1L 。
置棕色瓶中，4℃可保存半年。
3．尿素标准贮存液(100mmol/L)精确称取于60～65℃干燥恒重的尿素(MW 为 60.06)0.6g ，溶解于无氨去离子水，并定容至100ml ，加0.1g 叠氮钠防腐，4℃可保存6个月。
4．尿素标准应用液(5mmol/L)取5ml上述贮存液用无氨去离子水稀释至100ml。
【操作】取试管3支，按下表操作：表3-19 血清尿素测定加入物 (ml) 空白管标准管测定管血清－－0.02尿素标准应用液－0.02 －去离子水0.02 －－二乙酰一肟溶液0.5 0.5 0.5酸性试剂 5.0 5.0 5.0混匀，置沸水浴加热 12分钟，取出置冷水中冷却 5分钟，以空白管调零，在 540nm 波长处读取各管吸光度。
家兔血清尿素氮实验报告
一、实验目的1. 熟悉血清尿素氮测定的原理和方法。
2. 掌握家兔血清采集和处理技术。
3. 学习使用生化分析仪进行血清尿素氮的定量测定。
4. 了解血清尿素氮在动物生理和疾病诊断中的意义。
二、实验原理血清尿素氮（Blood Urea Nitrogen，BUN）是血液中尿素氮的浓度，是反映肾脏功能的重要指标之一。
血液中的尿素氮主要由肝脏合成，通过肾脏排泄。
当肾脏功能受损时，尿素氮的排泄减少，导致血液中尿素氮浓度升高。
本实验采用酶偶联法测定家兔血清尿素氮。
该方法利用尿素酶催化尿素分解产生氨，氨与水合酶反应生成亚硝酸盐，亚硝酸盐在酸性条件下与N-（1-萘基）乙二胺反应生成红色化合物，通过测定该化合物的吸光度，计算出血清中尿素氮的浓度。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 家兔血清- 尿素氮试剂盒- 10%三氯乙酸- 水合酶- N-（1-萘基）乙二胺- 酸性溶液- 生化分析仪2. 实验仪器：- 采血器- 移液器- 离心机- 酶标仪四、实验方法1. 采集家兔血清：- 将家兔固定在实验台上，使用采血器采集家兔耳缘静脉血。
- 将采集到的血液加入含有10%三氯乙酸的试管中，混匀后离心分离血清。
2. 测定血清尿素氮：- 根据试剂盒说明书，将血清加入反应杯中。
- 加入适量的水合酶和N-（1-萘基）乙二胺，混匀。
- 将反应杯放入生化分析仪中，设定相应的参数进行测定。
3. 结果计算：- 根据生化分析仪显示的吸光度，查表得到相应的尿素氮浓度。
五、实验结果实验过程中，采集到家兔血清样本后，按照实验方法进行血清尿素氮测定。
结果显示，家兔血清尿素氮浓度为X mmol/L。
六、实验讨论1. 血清尿素氮是反映肾脏功能的重要指标，本实验通过酶偶联法测定家兔血清尿素氮，结果可靠。
2. 在实验过程中，应严格按照操作规程进行，确保实验结果的准确性。
3. 血清尿素氮浓度升高可能见于多种疾病，如肾脏疾病、肝脏疾病、心脏疾病等。
本实验为临床诊断提供了一定的参考依据。
血清尿素的测定标准操作规程
血清尿素的测定标准操作规程【目的】学习血清尿素(Urea)测定方法，了解其意义。
【原理】血清尿素（Urea）是蛋白质的正常代谢产物。
它的测定是常用的衡量肾小球功能的指标之一。
肾性血清尿素含量增加，提示肾小球损伤。
是研究药物肾毒性的重要指标之一。
【器材】兔固定架、注射器、烧杯、可见分光光度计、试管、水浴【药品】0.5%氯化高汞溶液、生理盐水【动物】家兔2只【方法】取家兔2只，1只注射氯化高汞5ml/kg（0.5%氯化高汞溶液1.0ml/kg)，另1只注射等量的生理盐水。
48小时后，从家兔耳静脉取血1ml，制取血清，按血清尿素测定方法测定血清尿素含量。
【结果】记录2只家兔血清尿素含量，比较并分析其差别。
附血清尿素(Urea)测定方法【原理】尿素与二乙酰在酸性反应环境中加热，缩合生成色素原二嗪化合物。
因二乙酰不稳定，不宜直接加入，可由化学反应生成。
通常由反应系统中二乙酰一肟与强酸作用，产生乙二酰。
二乙酰和尿素反应，缩合生成红色的二嗪。
根据颜色深浅确定尿素含量的多少。
【试剂】(1)酸性试剂：在三角烧瓶中加蒸馏水约100ml，然后加入浓硫酸44ml及85%磷酸66ml。
冷至室温，加入硫氨脲50mg及硫酸镉(CdSO4·8H2O)2g。
溶解后用蒸馏水稀释至1L，置棕色瓶中冰箱保存，可稳定6个月。
(2)二乙酰-肟溶液：称取二乙酰-肟20g，加蒸馏水约900ml，溶解后，再用蒸馏水稀释至1L，置棕色瓶中，贮放冰箱内可保存半年。
(3)尿素标准贮存液（100mmol/L）:称取干燥纯尿素(MW=60.06)0.6g，溶解于蒸馏水中，并稀释至100ml，加0.1g叠氮钠防腐，置冰箱内可稳定半年。
(4)尿素标准液应用液(5mmol/L)：取5.0ml贮存液用无氨蒸馏水稀释至100ml.【操作】按表T4-1进行混匀后，置沸水中加热12分钟，置冷水中冷却5分钟后，用分光光度计在波长540nm，以空白管调至零点。
比色读取标准管及测定管的吸光度。
尿素清除指标
尿素清除指标
（原创版）
目录
1.尿素清除指标的定义和意义
2.尿素清除指标的测量方法
3.尿素清除指标的临床应用
4.尿素清除指标的异常情况及其影响
正文
尿素清除指标（Urea Clearance，UC）是指肾脏在单位时间内将血浆中的尿素全部清除的能力，是评估肾脏滤过功能的重要指标之一。
尿素在人体内是蛋白质代谢的产物，主要通过肝脏转化为尿素，然后由肾脏排出体外。
因此，尿素清除指标可以反映肾脏的滤过功能和肾小球滤过率的变化。
尿素清除指标的测量方法通常采用菊粉作为内标物，通过菊粉的清除率来计算尿素清除率。
菊粉是一种不被人体吸收的植物多糖，可以被肾脏滤过并在尿液中排出。
在测定尿素清除率时，需要同时测定血浆和尿液中的菊粉浓度，然后根据菊粉的清除率计算尿素清除率。
尿素清除指标在临床应用中具有重要意义。
首先，它可以用于评估肾脏滤过功能，帮助医生了解患者的肾脏功能状态。
其次，尿素清除指标可以用于监测肾脏疾病的进展和疗效，如慢性肾小球肾炎、肾病综合症等。
此外，尿素清除指标还可以用于评估患者的肾功能储备，为手术前的风险评估提供参考。
尿素清除指标的异常情况主要包括尿素清除率降低和尿素清除率升高。
尿素清除率降低可能表明肾脏滤过功能受损，常见于慢性肾小球肾炎、肾病综合症等疾病。
尿素清除率升高可能与高蛋白饮食、剧烈运动等因素有关，但这种情况一般不需要特殊治疗。
总之，尿素清除指标是评估肾脏滤过功能的重要指标，通过测定尿素清除率可以了解患者的肾脏功能状态，为临床诊断和治疗提供依据。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
血清尿素UREA测定
1 检验目的
指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。
2 实验原理
在下述反应中，NAD+生成速率与样本中尿素（尿素氮）的浓度成正比。
通过在340 nm处测定固定时间间隔内吸光度的下降速率，即可测得样本中尿素（尿素氮）的浓度。
尿素酶
尿素 + 2H2O 2 NH4＋ + 2 HCO3－
谷氨酸脱氢酶
NH4＋+α-酮戊二酸+NADH+H+ L-谷氨酸+NAD＋+H2O
3 标本：
3.1 病人准备：血清无特殊要求。
要留取24小时尿样。
3.2 类型：血清、血浆（不可使用肝素铵）、新鲜尿液。
无溶血和凝块的血清，如果必须使用血浆，建议使用无铵离子
的抗凝血剂，如EDTA和肝素钠。
用新鲜尿液作样品时，用蒸馏水作1:100稀释。
3.3标本存放：血清或血浆稳定性：4～25℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1年。
尿液稳定性：20～25℃保存可稳定2天；4～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1个月。
3.4 标本运输：常温条件下保存运输。
3.5. 标本拒收标准：细菌污染的标本。
4 实验材料
4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司UREA试剂盒（沪食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）4.1.1 试剂组成
试剂1（R1）：α-酮戊二
酸
7.5mmol/
L
谷氨酸脱氢
酶
＞800U/L
NADH 0.35mmol
/L
二磷酸腺苷 1.5mmol/L Tris缓冲液
115mmol/L
试剂2（R2）：
Tris缓冲液115mmol/
L
尿素酶＞40000 U/L α-酮戊二酸7mmol/L
4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
4.1.3 试剂稳定性与贮存：在2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂盒自生产之日起有效期为12个月。
4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
4.1.5 注意事项：试剂中含有防腐剂叠氮化钠，可能存在一定的刺激作用，请勿直接接触皮肤、眼睛。
一旦接触，即用大量清水冲洗。
请勿吞服。
4.2 校准品：使用上海复星长征医学科学有限公司提供的UREA校准品对自动分析仪进行校准。
4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。
5 仪器
AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪
6 操作步骤
6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。
6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。
6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。
6.4仪器操作步骤：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪操作规程。
7 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
8 计算方法：以UREA复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以mmol/L 报告。
9 参考值范围
成人2.5-6.4 mmol/L（注：各实验室应有自己的参考范围。
）
参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。
根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。
我室参考值2.5-6.6 mmol/L
10 临床意义
尿素是蛋白质分解代谢的含氮终产物。
高尿素血症或氮血症表现为血液中尿素水平升高。
鉴别肾前和肾后氮血症时可以同时检测尿素和肌酐。
因脱水、蛋白质代谢增加、皮质醇治疗或肾脏灌注减少等引起的肾前氮血症，表现为尿素水平升高而肌酐水平正常。
由泌尿管道阻塞引起的肾后氮血症，表现为尿素和肌酐水平都升高，但肌酐升高程度较小。
发生肾病时，肾小球滤过作用明显下降或蛋白质摄入量大于200 g/天都会导致尿素浓度升高。
尿素氮的检测用于诊断和治疗某些肾脏疾病和代谢紊乱。
尿素氮大约占血液中非蛋白氮的75%。
它通过肝脏中的氨进行合成，是蛋白质脱氨作用的产物。
通过肾小球从血液中过滤尿素到尿中，是消除体内多余氮的主要方法。
血液尿素氮（BUN）水平是肾功能以及肾前状态和肾后状态的度量标准，肾前因素引起的BUN的升高包括心脏代偿失调，缺水或增加的蛋白质分解代谢。
水平增加的肾脏因素有急性肾小球肾炎，慢性肾炎，多囊肾，肾纤维化和肾小管坏死。
任何类型的泌尿道的梗塞受阻是BUN水平升高的肾后因素1。
肾小球清除尿素和肌酸酐，但是，尿素随后部分地被肾小管重吸收，然而肌酸酐却不会。
因此，血清尿素氮和血清肌酸酐测定经常同时用于肾功能的不同诊断中。
11 操作性能
11.1试剂空白：
a)试剂空白吸光度：应不小于1.65
b)试剂空白吸光度变化率（ΔA/min）：应不大于0.001。
11.2分析灵敏度：1.00mmol/L样本的吸光度变化率（ΔA/min）应不小于0.011。
11.3线性范围：试剂（盒）线性范围应覆盖[0～40]mmol/L。
a) 线性相关系数（r）应不小于0.990；b) [0～10] mmol/L 范围内的绝对偏差应不超过±2mmol/L；[11～40]mmol/L范围内的相对偏差应不超过±10％。
11.4准确度：相对偏差（B）应不大于±10%。
11.5精密度：(1)重复性：变异系数（CV）应不大于5%；(2)批间差：相对极差（R）应不大于5%。
12 超出范围结果处理
本法线性上限血清/血浆为40mmol/L、尿液为5mol/L。
如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9%的氯化钠溶液作1:4稀释，重新测定，结果乘以5。
13 病危报警值的处理
当尿素氮测定值>30mmol/L时，在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。
14 方法局限性
14.1测定结果的准确性依赖于对所使用分析仪器校准、测定温度和测定时间的控制。
14.2在样本加入后的30秒钟前或120秒钟后读取吸ΔA/min 所测定的结果均不准确。
14.3有关可能干扰本测定的药物或物质，请参阅参考文献16.3。
14.4试剂启用后，在2～10℃避光的条件下可稳定14天。
若试剂混浊，或以水为空白在波长340nm处的吸光度值低于1.0A，则不能使用。
15 补救措施
当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。
16 参考文献
16.1叶应妩，王毓山，申子瑜主编·全国临床检验操作规程·中华人民共和国卫生部医政司编·(第四版)
16.2钱士匀主编.临床生物化学及生物化学检验实验指导.人民卫生出版社，2012年第5版。
16.3府伟灵,徐克前主编.临床生物化学检验.北京.人民卫生出版社,2012年第5版
16.4试剂说明书。