肿瘤血管生成

• 3 抑制促血管生成因子的药物 Bevacizumab (商
品名:avastin) 是一种单克隆抗体,于2004 年2 月 26 日获得FDA批准上市用于一线治疗晚期结直肠 癌,这是首个VEGF 抑制剂。Hurwitz 等对900 多名 已转移且未经治疗的结直肠癌患者进行临床试验 发现,同时接受Bevacizumab 联合IFL 方案(5－FU + Leucovorin + CPT211) 化疗的患者,与只接受化 疗的患者相比,其中位生存期平均延长5 个月。 Bevacizumab 是用于抗VEGF 抗体治疗癌症的一 个成功的例子,2004 年2 月被FDA 批准为转移性 直结肠癌的一线用药。
• 20 世纪70 年代末,研究人员逐渐认识到肿
瘤的血管网是新生的血管,对血管生成进行 定性定量是可能的。但大多数人仍然认为 这些新生的血管是由于肿瘤坏死产物引起 的炎性反应,甚至是机体对肿瘤的防御反应。 并且,一部分研究人员认为肿瘤的血管会和 伤口的血管一样逐渐成熟,不可能成为治疗 的靶点。
• 有意思的是,在肿瘤血管生成领域的很多重要发现
• 1971 年,福克曼在总结自己和前人观察基础
上大胆地提出了肿瘤血管生成的理论,即:肿 瘤生长和转移都依赖于血管生成,抗血管生 成可起到治疗肿瘤的作用 • Folkman J . Tumor angiogenesis : Therapeutic implication. N Engl J • Med ,1971 ,285 :1182 – 1186.
• 古希腊伟大的思想家、科学家亚里士多德
(Aristole ,公元前384～前322)在他的著作 《Parts Of Animals》中详细地记录了从鸡 蛋到小鸡孵出期间鸡胚的血管发展情况。 1868 年,希斯(His) (1831～1904) 作了可能 是人类早期对鸡胚血管发育最为详尽的研 究。
• 4 抑制整合蛋白分子的药物 整合蛋白
(intFra Baidu bibliotekgrin) 是细胞粘附分子,具有粘附、移动 及信号转导功能
• 二、传统细胞毒化疗药物 • 传统化疗以直接杀伤肿瘤细胞为目标。最
近几年来发现某些化疗药物在低剂量、长 时间接触中可选择性的抑制血管内皮细胞 的功能。这称之为小剂量化疗和抗血管生 成化疗。 • 根据Miller 等在2001 年提出的筛选有实际 意义抗血管生成化疗药物的筛选标准,已被 证实的抗血管生成化疗药物主要有环磷酰 胺、紫杉醇、长春新碱、优氟定和羟基喜 树碱等。
• 目前研究发现血管生成所涉及的疾病领域
已远不止肿瘤一种,还包括风湿性关节炎、 Crohns 病、银屑病、糖尿病视网膜病变、 动脉粥样硬化、先兆子痫、子宫内膜异位、 Alzheimer 氏病、肥胖症等。促进血管生成 对于心血管疾病、器官移植、伤口愈合也 有重要意义。血管生成理论在应用上已分 成了抑制血管生成,治疗性血管生成 ( therapeutic angiogenesis) 两大领域。
肿瘤抗血管生成治疗临床应用
• 一、血管生成抑制剂 • 1 基质金属蛋白酶抑制剂( TIMPs)
TIMPs 可以与金属蛋白酶的锌指结构结合而抑制 其活性,从而防止细胞外基质的降解和基底 膜的破坏,抑制肿瘤血管生成。 • 2 直接抑制内皮细胞的药物 沙利度胺,曾 用名为反应停。在临床试验中疗效最显著 的就是应用于多发性骨髓瘤的治疗。
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VEGF 受体反义寡核苷酸 VEGF 受体的反义 核苷酸可抑制VEGF 受体表达,从而阻断VEGF 的信 号转导通路。Kamiyama 等用VEGFR22 的反义核 苷酸治疗胃癌。首先将人类胃癌细胞注入裸鼠的 结肠系膜内,待成瘤后,一组腹腔内注射VEGFR22 反义寡核苷酸,另一组注射生理盐水,每天1 次,共7 次; 治疗结束14 d 后开腹检查。与对照组相 比,VEGFR22 反义寡核苷酸治疗组肿瘤结节内血 管密度少,腹膜转移结节少,表明VEGFR22 反义核 苷酸治疗可抑制血管新生而显著抑制肿瘤转移。
• DNA 双螺旋结构的发现人之一,诺贝尔奖获
得者沃森(Wat son)则将“血管生成之父” 福克曼( Folkman) 教授与达尔文相提并论。 血管生成研究的历史是一个典型的科学家 契而不舍地探索,最后获得广泛认同的历史。
• 1961 年福克曼因服兵役到美国海军医院作
研究工作,被要求的工作是找出红细胞的代 用品来解决航空母舰上备血的问题。在实 验中,福克曼意外地观察到移植到小鼠的肿 瘤在生长过程中,周围必会有新生小血管来 滋养肿瘤;没有足够的血供,肿瘤的体积只能 维持在较小的尺寸。
• 1973 年研究人员首次从脐静脉分离培养内
皮细胞成功。1979 年,福克曼等建立了毛细 血管内皮细胞长期培养,内皮细胞培养的成 功极大地促进了血管生成的研究。此后,一 系列的血管生成模型相继出现,如经典的鸡 胚绒毛尿囊膜(chickchorioallantoic membrane ,CAM) 模型、角膜移植模型、 皮下基质胶(Matrigel)模型等。
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中和血循环中的VEGF 近年来,研究者 将中和循环中已存在的VEGF 方法应用于临 床,并取得了成功。 • 3. 1 抗VEGF 抗体 靶向VEGF 的单克隆 抗体可以特异性地与VEGF 相结合。 Bevacizumab 是一个靶向VEGF 的重组人源 性单克隆抗体。
针对VEGF 治疗肿瘤的策略
• 1 VEGF 反义寡核苷酸 使用VEGF 反义寡核苷酸
•
抑制VEGF 的表达,目前还处于试验阶段。 Hotz 等给裸鼠胰腺移植人类胰腺肿瘤, 试验组用V EGF 基因的反义寡核苷酸AS23 (V EGF 基因的 cDNA) 行腹膜内注射(10 mg · kg · d ) ,对照组给予 安慰剂注射。共观察14 周后行尸体解剖, 并以抗 CD231 染色法检查肿瘤血管密度。试验结果发现, 与对照组相比,试验组原发肿瘤体积小( P < 0. 01) ,血管新生明显减少( P < 0. 01) ,远处转移少 ( P <0. 01) ;对照组有50 %的裸鼠有腹水,腹水中 的VEGF 浓度均很高,而试验组中无一例出现腹水。
都出乎人们的意料。TNP - 470 是人类发现的第 一种特异性地抑制血管内皮细胞生长的物质,也是 第一个进入临床实验的抗血管生成药物。TNP 470 的发现是科学史上又一个“偶然”的例子。 福克曼实验室的英格勃( Ingber) 在一次培养内皮 细胞时,偶然发现细胞被真菌污染,引起内皮细胞的 退化。细胞培养被污染是研究人员经常会遇见的 事情。但英格勃没有简单地扔掉细胞,而是推测真 菌中可能含有抑制血管生长的物质,最终从真菌中 纯化得到了TNP - 470 。
• 血管发生(vasculogenesis)
胚胎血管生成 学说表明,造血干细胞沿血管排列发展为血 岛,血岛中心的细胞发育为血细胞,而血岛周 围的细胞发展为内皮细胞。近期的肿瘤实 验动物模型证明了类似的过程,即骨髓中的 造血干细胞通过循环、积聚、融合形成新 血管。血管发生对人类肿瘤的作用还不清 楚,多数学者对此机制是否可以作为肿瘤治 疗的靶目标尚持保留态度。
• 1991 年,魏德纳(Weidner) 、福克曼等发现
乳腺癌中微血管密度越大,预后越差,第一次 报道了血管生成与肿瘤预后的关系。此后 陆续在膀胱癌、前列腺癌、肺癌、黑色素 瘤等肿瘤中发现了这种相关性。
• 早在1977 年,许格贝克(Sugarbaker) 等就观
察到除去原发肿瘤将导致转移部位肿瘤的 迅速生长。1994 年,福克曼实验室的欧瑞里 (O’Reilly) 从荷有Lewis 肺癌的小鼠尿中分 离到一种纤维蛋白溶酶原的剪切片断,命名 为angiostatin ,该物质可完全抑制小鼠皮下 移植Lewis 肺癌的肺转移。以类似的方法, 欧瑞里等在1997 年又发现了endostatin。
• In 1971 Folkman published a seminal paper in the New
England Journal of Medicine, proposing the hypothesis that all tumor growth is angiogenesis-dependent. This founded the field of angiogenesis research and opened a field of investigation now pursued by scientists in many fields worldwide. Folkman's laboratory purified the first angiogenic protein from a tumor, discovered the first angiogenesis inhibitors and initiated clinical trials of antiangiogenic therapy. Today, angiogenesis inhibitors have received FDA approval in the U.S. for cancer and for the treatment of macular degeneration and are also approved in 27 other countries. Largely because of Folkman's research, the possibility of antiangiogenic therapy is now on a firm scientific foundation, not only in the treatment of cancer, but of many non-neoplastic diseases as well.
• 血管生成(angiogenesis)
血管生成是肿瘤 新生血管形成的关键因素。血管生成包括 以下几个步骤:小血管内皮细胞的激活,细胞 外基质的降解,细胞在基质中迁移、增殖,内 皮细胞组建为中空管道,管道最终吻合形成 新的毛细血管。
• 缺氧(hypoxia)
肿瘤生长依靠于邻近血管, 最终获得氧供,直到超过一定体积发生缺氧 为止。继发缺氧可上调一系列促血管新生 因子的表达来诱导肿瘤血管新生的发生,如 DNA 转录及稳定mRNA。缺氧诱导产生的 转录因子HIF1α可继发调节DNA 转录,这些 因子是内皮细胞生长和存活的高度特异性 因子,其中包括VEGF、bFGF、TGF 和TNF。 而VEGF 和bFGF 被认为是血管新生过程的 最重要介质。
• 外科医生也经常注意到肿瘤周围丰富的血
管,但这一现象被简单地认为是已有血管的 扩张。20 世纪60 年代,格瑞布莱特 ( Greenblatt) 、夏比克(Shubik) 等提提出 了肿瘤可产生可溶性促血管生成物质的假 设。
• 将血管生成作为理论提出并探讨其治疗意
义是哈佛大学福克曼(Folkman) 教授的杰出 贡献。
肿瘤血管生成
暨南大学附属第一医院外科 潘运龙
• 血管生成(angiogenesis) • “angiogenesis”一词始见于1900 年一篇讨论
肾上腺生长的论文,作者鲁道夫· 斯特纳 (Rudolf Steiner) ,发表在《约翰霍普金斯医 院报告》上。“angio”指血管, “genesis”指 起源。
• 1863 年病理学家魏尔啸( Virchow ,
1821 ～ 1902 ) 在他的著作 《DieKrankhaften Greschwulste》中描述 了肿瘤具有丰富的血管的现象。20 世纪40 年代,一些研究人员已经认识到肿瘤可诱导 血管生成,但他们认为是一种炎性反应,是肿 瘤生长的副作用。
• 1998 年,在美国媒体的推波助澜下,福克曼
的影响达到了颠峰。1998 年5 月3 日星期 天的《纽约时报》在头版报道了福克曼等 人在angiostatin 和endostatin 方面的研究 成果。报道引用了两位权威人士的话,诺贝 尔奖获得者沃森(Walt son) 说:福克曼将在 两年内征服肿瘤。美国国家癌症研究所主 任克劳斯勒( Klausner) 说:angiostatin 和 endostatin 是抗癌药物中最令人振奋的发现。